生物化学考试重点笔记(完整版)
第一章蛋白质的结构与功能
第一节蛋白质的分子组成
一、组成蛋白质的元素
1、主要有C、H、O、N和S，有些蛋白质含有少量磷或金属元素铁、铜、锌、锰、钴、钼，个别蛋白质还含有碘。
2、蛋白质元素组成的特点：各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。
3、由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量：100 克样品中蛋白质的含量（ g % ）= 每克样品含氮克数× 6.25 ×100
二、氨基酸——组成蛋白质的基本单位
（一）氨基酸的分类
1.非极性氨基酸（9）：甘氨酸（Gly）丙氨酸（Ala ）缬氨酸（Val ）亮氨酸
（Leu）异亮氨酸（Ile ）苯丙氨酸（Phe）脯氨酸（Pro）色氨酸（Try ）蛋氨酸（Met）
2、不带电荷极性氨基酸（6）：丝氨酸（Ser）酪氨酸（Try）半胱氨酸
（Cys）天冬酰胺（Asn）谷氨酰胺（Gln ）苏氨酸（Thr ）
3、带负电荷氨基酸（酸性氨基酸）（2）: 天冬氨酸（Asp ）谷氨酸（Glu）
4、带正电荷氨基酸（碱性氨基酸）（3）: 赖氨酸（Lys）精氨酸（Arg）组氨
酸（ His）
（二）氨基酸的理化性质
1.两性解离及等电点
等电点: 在某一pH 的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。此时溶液的pH 值称为该氨基酸的等电点。
2.紫外吸收
（1）色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280 nm 附近。
（2）大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，所以测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。
3.茚三酮反应
氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm 处。由于此吸收峰
值与氨基酸的含量存在正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方法
三、肽
（一）肽
1 、肽键是由一个氨基酸的- 羧基与另一个氨基酸的- 氨基脱水缩合而形成的化学键。
2、肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。
3、由十个以内氨基酸相连而成的肽称为寡肽，由更多的氨基酸相连形成的肽称多肽
4、肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全，被称为氨基酸残基
5、多肽链是指许多氨基酸之间以肽键连接而成的一种结构。
6、多肽链有两端：N 末端：多肽链中有自由氨基的一端
C 末端：多肽链中有自由羧基的一端
（二）几种生物活性肽
1.谷胱甘肽
2. 多肽类激素及神经肽第二节蛋白质的分子结构
一、蛋白质的一级结构
1、定义：蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的连接方式、排列顺序和二硫键的位置。
2、主要的化学键：肽键，有些蛋白质还包括二硫键。
3、一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。
二、蛋白质的二级结构
1、定义：蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象
2、主要的化学键：氢键
3、蛋白质二级结构的主要形式-螺旋、- 折叠、- 转角、无规卷曲
三、蛋白质的三级结构
1、定义：整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。
2、主要的化学键：疏水作用、离子键、氢键和Van der Waals 力等
四、蛋白质的四级结构
1、蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构
2、亚基之间的结合力主要是疏水作用，其次是氢键和离子键。
第四节蛋白质的理化性质
（一）蛋白质的紫外吸收
（二）蛋白质的两性电离
1、蛋白质的等电点：当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH 称为蛋白质的等电点。
（三）蛋白质的沉降特性
（四）蛋白质的胶体性质蛋白质胶体稳定的因素：颗粒表面电荷、水化膜
（五）蛋白质的变性、复性
1、蛋白质的变性：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。
2、变性的本质：破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。
（六）蛋白质的呈色反应
⒈茚三酮反应蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。
⒉双缩脲反应蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。
第二章核酸的结构与功能
第一节核酸的化学组成
一、核苷酸的组成
1、元素组成:C、H、O、N、P（9~10%）
2、分子组成：（1）碱基：嘌呤碱，嘧啶碱（2）戊糖：核糖，脱氧核糖（3）磷酸
3、DNA与RNA在分子组成上的异同
二、核苷酸的结构
1、核苷的形成：碱基和核糖（脱氧核糖）通过糖苷键连接形成核苷（脱氧核苷）。
2、核苷：AR, GR, UR, CR 脱氧核苷：dAR, dGR, dTR, dCR
3、核苷酸的结构：核苷（脱氧核苷）和磷酸以磷酸酯键连接形成核苷酸（脱氧核苷酸）。
4、核苷酸：AMP, GMP, UMP, CMP 脱氧核苷酸：dAMP, dGMP, dTMP, dCMP 第二节核酸的分子结构
一、核酸的一级结构
1、定义：核酸中核苷酸的排列顺序。由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。
二、核酸的空间结构与功能
（一）DNA的空间结构与功能
1、DNA的二级结构——双螺旋结构
（1）DNA双螺旋结构模型要点：① DNA分子由两条相互平行但走向相反的脱氧核糖核苷酸链组成，磷酸、脱氧核糖在外围构成骨架，中间是碱基对平面，碱基严格按照碱基互补配对原则。（A=T; G C）
②右手双螺旋结构，螺旋一圈10 对碱基，螺距3.4nm，表面有间隔排列的大沟、和小沟。
③互补碱基的氢键维持双链横向稳定性，碱基堆积力维持双链纵向稳定性。
2、DNA的三级结构在二级结构的基础上，DNA双螺旋结构进一步折叠、盘绕成为更为复杂的结构（1）原核生物DNA的高级结构——DNA超螺旋闭合环状双螺旋，正超螺旋、负超螺旋
（2）DNA在真核生物细胞内真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是核小体（3）核小体的组成：① DNA：约200bp（碱基对）②组蛋白：H1、H2A、H2B、H3、H4 3、DNA的功能DNA 的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转
录的模板。它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础
（二）RNA的空间结构与功能
1、mRNA---（含量少，种类多，寿命短）
（1）mRNA的功能：携带遗传信息（DNA），作为蛋白质翻译的模板。
（2）mRNA 结构特点：① 5 ′末端形成帽子结构：m7GpppN m- ② 3 ′末端有一个多聚腺苷酸（polyA）（80-250）尾
2、tRNA
（1）tRNA的一级结构特点：① 73-93 个核苷酸（分子量最小）②含10~20% （7-15 个）稀有碱基，如DHU等③ 3′末端为—CCA-OH，5 ′末端大多是-G
（2）tRNA 的二级结构——三叶草形结构有：氨基酸臂DHU 环及臂反密码环及臂TΨC 环及臂额外环
（3）tRNA的三级结构——倒L 形
（4）RNA的功能：活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。
（三）rRNA
（1）rRNA的结构：空间结构，较为复杂
（2）rRNA 的功能参与组成核糖体，作为蛋白质生物合成的场所。
（3）rRNA的种类（根据沉降系数）：①真核生物5S rRNA、5.8S rRNA、18S rRNA、28S rRNA
②原核生物5S rRNA 、16S rRNA、23S rRNA
第三节核酸的理化性质
一、紫外吸收：核酸在260nm处有吸收高峰，在230nm处有一低谷
二、DNA的变性
1、定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。
2、方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等
3、变性后其它理化性质变化：OD260增高粘度下降比旋度下降浮力密度升高
酸碱滴定曲线改变生物活性丧失
4、DNA变性的本质是双链间氢键的断裂
5、增色效应：DNA变性时其溶液OD260 增高的现象。
6、Tm：紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度，其
大小与G+C含量成正比。
三、DNA的复性与分子杂交
1、DNA复性的定义：在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。
2、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火。
3、减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。
四、核酶和脱氧核酶
1、核酶：催化性RNA作为序列特异性的核酸内切酶降解mRN。A
2、脱氧核酶：催化性DNA 人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。
第五章维生素
一、概述
1、定义：维生素（vitamin）是机体维持正常功能所必需，但在体内不能合成或合成量不足，必须由食物供给的一组小分子有机化合物。
2、分类：（1）脂溶性维生素Vit.A* 、D*、E 、K ：
（2）水溶性维生素：Vit.C* B 族Vit. ：B1*、B2*、PP*、B 6* 、生物素泛酸、叶酸*、B12 *、硫辛酸
3、引起维生素缺乏的原因：（1）摄入不足：偏食、烹饪不当（2）吸收障碍：胃肠道疾
病、肝胆疾病（3）需要量增加：儿童，孕妇，哺乳期妇女，重体力劳动者和慢性消耗性疾病患者
（4）服用某些药物：如抗生素，可致肠道菌群紊乱，自身可合成的少量维生素缺失（维生素K、B6 、PP、生物素、泛酸等）（5）生物体的特异缺陷：如内因子缺乏
二、脂溶性维生素
1、共同特点：（1）不溶于水，溶于脂肪及有机溶剂（2）在食物中与脂类共存，并随脂
类一同吸收（3）在血浆中与特异蛋白结合而运输（4）在肝脏内储存，摄入过多会出现中毒
2、种类：Vit A, Vit D, Vit E, Vit K
一、维生素A 抗干眼病维生素
1、视黄醇（维生素A1），3- 脱氢视黄醇（维生素A2）视黄醇————视黄醛———
视黄酸
2、活性形式：11－顺视黄醛（紫外线可破坏维生素A）
3、来源：哺乳动物及鱼的肝脏、蛋黄、乳制品等维生素A原：β- 胡萝卜素可转化为维生素A （胡萝卜、红辣椒、菠菜、芥菜等绿叶蔬菜）（二）生化作用及缺乏症：1、构成视觉细胞内感光物质的成分2 、维持上皮组织结构的完整性3 、参与类固醇的合成促进生长发育4 、有一定的抗癌、防癌作用缺乏症：夜盲症、干眼病
二、维生素D--- 抗佝偻病维生素
1、种类：VitD 2（麦角钙化醇）VitD 3（胆钙化醇）
2、VitD 2原：麦角固醇V itD 3 原：7- 脱氢胆固醇
3、来源：肝、蛋黄、牛奶、鱼肝油
4、VitD 3的活性形式：1, 25- （OH）2-VitD 3
5、生化作用及缺乏症：1、生化作用：（1）肠：促进肠道对钙的吸收；（2）肾：促进肾脏对钙、磷的重吸收（3）骨骼：增加骨对钙、磷的吸收和沉积，有利于骨的钙化；
2、缺乏症：儿童——佝偻病成人——软骨病
三、维生素E--- 生育酚
1、活性形式：生育酚
2、来源：植物油、豆类、谷物等
3、生化作用：1、抗氧化作用2 、维持生殖机能3 、促进血红素代谢缺乏症：未发现，
临床：治疗习惯性流产
四、维生素K - 凝血维生素
1、来源：绿色蔬菜、种子、鱼、肝等
2、化学结构：2-甲基-1 ，4-萘醌的衍生物
3、生化作用：维持体内凝血因子Ⅱ、Ⅶ 、Ⅸ和Ⅹ的正常水平，参与凝血作用
4、缺乏维生素Ｋ会延迟血液凝固；易出血。
第二节水溶性维生素
一、概述
（一）共同特点：1、易溶于水，故易随尿液排出。2 、体内不易储存，必须经常从食物中摄取。3 、不易导致积累而引起中毒
（二）种类：B 族维生素和维生素C
一、维生素B1 抗脚气病维生素
（一）别名及活性形式：1、维生素B1 又名硫胺素2 、活性形式：焦磷酸硫胺素（TPP）（四）生化作用及缺乏症
1、生化作用：（1）TPP 是α- 酮酸氧化脱羧酶的辅酶，（2）TPP是磷酸戊糖途径中转酮酶的辅酶。
（3）在神经传导中起一定的作用，抑制胆碱酯酶的活性。
2、缺乏症：（1）脚气病：维生素B1 缺乏时，可引起依赖TPP代谢的反应受抑制，导致
如丙酮酸堆积，使组织供氧不足，功能不足。出现：手足麻木，肌肉萎缩，心力衰竭，下肢水肿，神经功能退化等。（2）末梢神经炎：神经痛，面部神经麻痹等。（3）胃肠机能障碍：胃肠蠕动减慢，消化液分泌减少，食欲不振，消化不良。
二、维生素B2 -核黄素
（一）来源：动物内脏、黄豆、小麦、绿色蔬菜，肠道合成。耐热，酸性溶液中稳定，易被碱和紫外线破坏
（二）别名及活性形式
1、维生素B2 又名核黄素（riboflavin）
2、活性形式：黄素单核苷酸（FMN）黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）
3、生化作用：FMN及FAD是体内氧化还原酶的辅基，主要起氢传递体的作用。
4、缺乏症：口角炎，唇炎，阴囊炎等。
三、维生素PP--- 抗赖皮病维生素
1、体内活性形式：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）
2、生化作用：NAD+及NADP+是体内多种脱氢酶（如苹果酸脱氢酶、乳酸脱氢酶）的辅酶，起传递氢的作用。
3、缺乏症：癞皮病（3D症状: 皮炎腹泻痴呆
四、维生素B6
1、别名及活性形式：维生素B6：包括吡哆醇，吡哆醛及吡哆胺活性形式：磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺
2、生化作用及缺乏症：1、磷酸吡哆醛是转氨酶及脱羧酶的辅酶 2 、磷酸吡哆醛是血红素合
成关键酶的辅酶。3 、磷酸吡哆醛参与糖原分解。
五、泛酸--- 遍多酸
（一）、别名及活性形式
1、别名: 遍多酸
2、活性形式：辅酶A （CoA）和酰基载体蛋白（ACP）。二）生化作用及缺乏症
1、CoA及ACP是酰基转移酶的辅酶，参与酰基的转移作用。
2、缺乏病：未发现
六、生物素--- α生物素和β生物素
（一）活性形式：生物素
（二）生化作用：生物素（biotin）是多种羧化酶（如丙酮酸羧化酶）的辅酶，参与CO2 的羧化过程。人类罕见生物素缺乏症。
七、叶酸
（一）、化学本质及性质：1、叶叶酸又称蝶酰谷氨酸2 、活性形式：四氢叶酸（FH4）（二）生化作用及缺乏症：1、生化作用：FH4 是一碳单位转移酶的辅酶，参与一碳单位的转移
2、缺乏症：巨幼红细胞贫血
八、维生素B12 抗恶性贫血维生素
（一）别名及活性形式
1、维生素B12 又称钴胺素
2、活性形式：甲基钴胺素5 - 脱氧腺苷钴胺素（二）生化作用及缺乏症1、生化作用：参与体内甲基转移作用，甲基转移酶的辅助因子。
2、缺乏症：巨幼红细胞贫血
九、维生素C—对热不稳定的酸性物质
（一）别名及活性形式
1、维生素C又称L- 抗坏血酸2 、活性形式：抗坏血酸
3、生化作用：
（1）参与体内羟化反应（维生素C 作为辅助因子）：促进胶原蛋白的合成参与胆固醇的转化参与芳香族氨基酸的代谢
（2）参与氧化-还原反应：保护巯基酶的活性（解毒）使GSSG还原成GSH，保护细胞膜。
具有解毒作用促进抗体的合成。促进造血将Fe3＋转化为（Fe 2＋）。
护VitA,VitE 免遭氧化。抗病毒，防止肿瘤。
2、缺乏症：坏血病
十、硫辛酸
1、活性形式：硫辛酸
2、生化作用及缺乏病
（1）、生化作用：是α - 酮酸脱氢酶系的辅助因子，参与传递氢和酰基作用。
（2）、缺乏病：未发现
第六章酶1、酶的概念：酶是一类由活细胞产生的，对其特异底物具有高效催化作用的蛋白质。2、目前将生物催化剂分为两类酶、核酶、脱氧核酶第一节酶的组成、活性中心与功能
一、酶的组成
（一）分子组成：单纯酶和结合酶2、全酶：由蛋白质部分（酶蛋白）和辅助因子（小分子有机化合物和金属离子）组成
3、只有全酶才有催化作用。
4、辅助因子分类：（1）辅酶）: 与酶蛋白结合疏松，可用透析或超滤的方法除去。（2）辅基: 与酶蛋白结合紧密，不能用透析或超滤的方法除去。
5、酶蛋白决定酶促反应的特异性，辅助因子决定酶促反应的类型。
（二）酶的结构组成
1、单体酶：由一条多肽链构成的酶，只含有一个活性中心。
2、寡聚酶：有多个相同或不同的亚基以非共价键结合构成，含有多个活性中心的酶。
3、多酶复合体：由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物共同完成催化功能的多酶复合体。
3、多功能酶或串联酶：多种不同催化功能存在于一条多肽链中，这类酶称为多功能酶
4 、多酶体系：物质代谢的各条途径有许多酶共同参与，依次完成反应过程，这些酶在结构上无彼此关联，称为多酶体系。
二、酶的活性中心
1、定义：某些必需基团在一级结构上可能相距得很远，但在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，它能与底物结合，并催化底物生成产物，称这个区域为酶的活性中心
2、必需基团：一些与酶活性密切相关的化学基团。
3、常见的必需基团有：组氨酸残基的咪唑基，丝氨酸残基的羟基，半胱氨酸残基的巯基，天冬
氨酸残基的羧基。
三、酶促反应的特点与机制
（一）酶促反应的特点
1、高效性2 、特异性（绝对特异性、相对特异性、立体结构特异性）
3、可调节性4 、不稳定性
（二）酶促反应的机制酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过程称为酶- 底物结合的诱导契合假说
第二节酶促反应动力学
1、概念：研究各种因素对酶促反应速度的影响
2、影响因素包括有酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂
一、底物浓度对反应速度的影响在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速度的影响呈矩形双曲线关系。
1、当底物浓度较低时，反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。
2、随着底物浓度的增高，反应速度不再成正比例加速；反应为混合级反应。
3、当底物浓度高达一定程度，反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应
4、Km值：酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L 。
5、K m的意义：a） Km是酶的特征性常数之一；只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关，不同的酶有不同的Km。（一组同工酶有不同的Km值）
b） Km 反映酶与底物的亲和力：Km越大，酶与底物的亲和力越小；
c）一种酶对不同底物有不同的Km值，Km最小的底物是天然底物（最适底物）
6、V max ——是酶完全被底物饱和时的反应速率，与酶浓度成正比。
二、酶浓度对反应速度的影响
1、当[S] ＞＞[E] ，酶可被底物饱和的情况下，反应速度与酶浓度成正比。
三、温度对反应速度的影响
1、双重影响
2、最适温度（optimum temperature）：酶促反应速度最快时的环境温度。
四、pH 对反应速度的影响
五、抑制剂对反应速度的影响
1、酶的抑制剂：凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质称为酶的抑制剂。抑制剂多与酶的活性中心内、外必需基团结合抑制酶的活性（特异的结合）。
2、根据抑制剂与酶结合的紧密程度不同分为：不可逆性抑制，可逆性抑制
（一）不可逆性抑制作用
1、概念：抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。抑制剂不能用透析、超滤等方法除去。
2 、举例1、有机磷中毒羟基酶解毒-- -- -- 解磷定（PAM）
2、重金属中毒巯基酶解毒-- -- -- 二巯基丙醇（BAL）
（二）可逆性抑制作用
*1、概念：抑制剂以非共价键与酶或酶- 底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。
2、类型：根据抑制剂与底物的竞争关系：竞争性抑制、非竞争性抑制、反竞争性抑制１、竞争性抑制作用：抑制剂（I ）与底物（S）结构相似
* 特点：1 ）抑制剂与底物的结构相似。
2）抑制剂与底物竞争酶的活性中心。
3）酶的活性中心与抑制剂结合后，酶失去活性。
4）抑制作用的大小取决于亲和力及［I ］/ ［S］。当［S］》［I ］时，抑制作用可以忽略举例：（1）抑制剂丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶（2）磺胺类药物的抑菌机制与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶机理：磺胺类药物的结构与对氨基苯甲酸结构相似，竞争性抑制二氢叶酸合成酶，从而使细菌的核酸合成受阻，从而影响其生长繁殖，达到抑菌的效果。由于是竞争性抑制，因而，服用磺胺类药物时，必须保持血液中药物达到一定浓度，才能发挥有效的竞争抑菌作用。
2、非竞争性抑制
* 特点：1 ）抑制剂与酶的活性中心以外的必需基团相结合。抑制酶的催化活性。
2）抑制剂与底物之间无竞争关系。
3）形成酶-底物-抑制剂复合物不能释放出产物。
3、反竞争性抑制作用
特点：1）抑制剂与中间产物（ES）结合。抑制酶的催化活性。
2）降低ES的有效浓度，促进底物和酶的结合。
3）抑制作用与竞争性抑制作用相反。
4、各种可逆性抑制作用的比较
六、激活剂对反应速度的影响
1、激活剂：使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质
2、大多数为金属离子：
Mg2+，K+，Mn2+等，少数为阴离子：Cl- 有机化合物：胆汁酸盐酶原激活剂：肠激酶等第三节酶的存在形式及其调节
一、酶原与酶原的激活
1、酶原：酶的无活性前体，称为酶原。
2、酶原的激活：在一定条件下，无活性的酶的前体转变成有活性的酶的过程。
3、酶原激活的生理意义：（1）避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的
部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。（2）酶原是酶的储存形式。
二、同工酶及其临床意义1、定义：同工酶是指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质，乃至免疫学性质和电泳行为均不同的一组酶。
2、举例：乳酸脱氢酶（LDH1～LDH5）
（1）、LDH的含量与分布LDH1在心肌中的比例较高，LDH5 在肝脏、骨骼肌中所占比例较大（2）诊断LDH1 作为心肌疾病诊断的辅助指标，LDH5作为肝脏和骨骼肌疾病的辅助指标
3、生理及临床意义：同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断；同工酶可以作为遗传标志，用于
遗传分析研究。
三、关键酶
1、定义：在代谢途径的各个反应中，催化单向反应、速度最慢、控制着整个代谢速度的酶促反应为该途径的限速反应。催化此反应的酶称之。又称为限速酶（
limiting velocity enzyme
）
四、酶活性测定和酶活性单位
国际单位（IU）：在25℃、最适PH值、最适底物浓度时，每分钟催化1μmol 底物生成产物所需的酶量。
催量单位（katal）：１催量（kat）是指在特定条件下，每秒钟催化1mol 底物转化为产物所需的酶量。
第七章糖代谢
第二节糖的氧化分解
一、糖酵解
1、糖酵解的定义：在缺氧情况下，葡萄糖生成乳酸（lactate）的过程称之为糖酵解。
2、糖酵解的反应部位：胞浆
3、糖酵解分为两个阶段：第一阶段：由葡萄糖分解成丙酮酸，称之为糖酵解途径第二阶段由丙酮酸转变成乳酸。
（一）葡萄糖分解成丙酮酸
⑴ 葡萄糖磷酸化为6- 磷酸葡萄糖
⑵ 6- 磷酸葡萄糖转变为6- 磷酸果糖
⑶ 6- 磷酸果糖转变为1,6- 双磷酸果糖
⑷ 磷酸己糖裂解成2 分子磷酸丙糖
⑸ 磷酸丙糖的同分异构化
⑹ 3- 磷酸甘油醛氧化为1,3- 二磷酸甘油酸
⑺ 1,3- 二磷酸甘油酸转变成3- 磷酸甘油酸
⑻ 3- 磷酸甘油酸转变为2- 磷酸甘油酸
⑼ 2- 磷酸甘油酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸
⑽ 磷酸烯醇式丙酮酸转变成丙酮酸，并通过底物水平磷酸化生成ATP
（二）丙酮酸转变成乳酸
反应中的NADH++H 来自于上述第6 步反应中的3- 磷酸甘油醛脱氢反应。
（三）糖酵解的生理意义
1.是机体在缺氧情况下获取能量的有效方式。
2.是某些细胞在氧供应正常情况下的重要供能途径。
① 无线粒体的细胞，如：红细胞② 代谢活跃的细胞，如：白细胞、骨髓细胞
3.糖酵解的中间产物是其他物质的合成原料。
（四）糖酵解小结
⑴ 反应部位：胞液
⑵ 糖酵解全过程要求掌握
⑶ 关键酶（限速酶）：己糖激酶、磷酸果糖激酶-1 、丙酮酸激酶
⑷ 能量改变－－产能
净生成ATP数量：从G开始2×2-2=2ATP 从Gn开始2×2-1=3ATP
（五）糖酵解的调节
调节方式：① 别构调节② 共价修饰调节
二、糖的有氧氧化
1、概念：糖的有氧氧化（aerobic oxidation）指在机体氧供充足时，葡萄糖彻底氧化成H2O 和CO2，并释放出能量的过程。是机体主要供能方式。
2、部位：胞液及线粒体（一）有氧氧化的反应过程
第一阶段：酵解途径
第二阶段：丙酮酸的氧化脱羧
1、丙酮酸进入线粒体，氧化脱羧为乙酰CoA
2、总反应式：NAD + , HSCoA CO 2 , NADH + H+ 丙酮酸————————————————————————乙酰CoA
丙酮酸脱氢酶复合体
2、丙酮酸脱氢酶复合体的组成：E1：丙酮酸脱氢酶E 2：二氢硫辛酰胺转乙酰酶E 3：二氢硫辛酰胺脱氢酶第三阶段：三羧酸循环
1、定义：三羧酸循环（TAC）也称为柠檬酸循环，这是因为循环反应中的第一个中间产物是一个含三个羧基的柠檬酸。由于Krebs 正式提出了三羧酸循环的学说，故此循环又称为Krebs 循环，它由一连串反应组成。
2、反应部位：所有的反应均在线粒体中进行
3、ATP的生成：NADH+H—+———3ATP NADPH ————2ATP
4、三羧酸循环的生理意义：①是三大营养物质氧化分解的共同途径；②是三大营养物质代谢联系的枢纽；③为其它物质代谢提供小分子前体
5、小结① 部位：线粒体②掌握TAC全过程。
③关键酶：柠檬酸合（成）酶、异柠檬酸脱氢酶、α- 酮戊二酸脱氢酶系④能量改变（产能:12molATP）
⑤生理意义第四阶段：氧化磷酸化
（二）有氧氧化的关键酶
己糖激酶、6－磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶、丙酮酸脱氢酶系、柠檬酸合成酶、异柠檬酸脱氢酶、α－酮戊二酸脱氢酶系
（三）有氧氧化的能量改变
产能：1mol葡萄糖经过有氧氧化，生成36或38molATP
（四）有氧氧化的生理意义
1、糖的有氧氧化是机体产能最主要的途径。
2、是三大营养物质氧化分解的共同途径。
3-
3、是三大营养物质代谢联系的枢纽。 糖有氧氧化的小结：① 部位：胞液及线粒体 ②掌握糖有氧氧化全过程。③关键酶 ④能量改变（产能 :36 或 38molATP ）⑤生理意义
三、磷酸戊糖途径
1、定义：磷酸戊糖途径是指由葡萄糖生成磷酸戊糖及 NADPH++，H 前者再进一步转变成
磷酸甘油醛和 6- 磷酸果糖的反应过程。
（一）、反应过程 1、细胞定位：胞 液
2、反应过程可分为二个阶段：第一阶段：氧化反应生成磷酸戊糖， NADPH++
及H CO 2
第二阶段则是非氧化反应 包括一系列基团转移。
（二）、磷酸戊糖途径的生理意义 1、为核苷酸的生成提供 5- 磷酸核糖 3、 提供 NADPH 作为供氢体参与多种代谢反应
四、糖醛酸途径
生理意义： 1、生成活化的葡萄糖醛酸 UDPG ，A 即 UDPGA 是葡萄糖的活性形式
2、 参与生物转化，为合成透明质酸等多糖提供葡萄糖醛酸。
第 三 节 糖原合成和分解 1、糖原储存的主要器官及其生理意义
（1） 肌肉：肌糖原， 180 ~ 300g ，主要供肌肉收缩所需
（2）肝脏：肝糖原， 70 ~ 100g ，维持血糖水平 一、糖原的合成代谢
（一）定义 糖原的合成 （ 指由葡萄糖合成糖原的过程。
（二）合成部位 组织定位：主要在肝脏、肌肉 细胞定位：胞浆 （四） 糖原合成途径 1. 葡萄糖磷酸化生成 6- 磷酸葡萄糖
2. 6- 磷酸葡萄糖转变成 1- 磷酸葡萄糖
3. 1- 磷酸葡萄糖转变成尿苷二磷酸葡萄糖
4、 α-1,4- 糖苷键式结合 二、糖原的分解代谢 （一）定义：糖原分解习惯上指肝糖原分解成为葡萄糖的过程。
部位：亚细胞定位：胞 浆 （二）肝糖原的分解
1. 糖原的磷酸解—从糖原的非还原端
2 、 1- 磷酸葡萄糖转变成 6-磷酸葡萄糖
3 、 6- 磷酸葡萄糖水解生成葡萄糖
三、 糖原合成与分解的生理意义
1、体内糖来源丰富，能量充足时，合成糖原储能。空腹时机体将储存的糖原迅速分解，提
供能量。2 、维持血糖浓度的相对恒定（肝糖原）。3、在肌肉组织为肌肉收缩提供能量（肌糖原）
四、糖原合成与分解的调节
1、关键酶：① 糖原合成：糖原合酶② 糖原分解：糖原磷酸化酶
1、别构调节
（1）6- 磷酸葡萄糖是糖原合酶的别构激活剂。（2）ATP、葡萄糖是磷酸化酶的别构抑制剂。
2、共价修饰调节①两种酶磷酸化或去磷酸化后活性变化相反②此调节为酶促反应，调节速度快③调节有级联放大作用，效率高；
④受激素调节。
第四节糖异生作用
概念糖异生是指从非糖化合物转变为葡萄糖或糖原的过程。
原料主要有乳酸（有机酸）、甘油、生糖氨基酸部位：主要在肝、肾细胞的胞浆及线粒体过程：糖异生途径不完全是糖酵解的逆过程。
一、糖异生途径
1. 丙酮酸转变成磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）
① 丙酮酸羧化酶，辅酶为生物素（反应在线粒体）
② 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（反应在线粒体、胞液）
2. 1,6- 双磷酸果糖转变为6- 磷酸果糖
3.6- 磷酸葡萄糖水解为葡萄糖
4、底物循环定义：由不同的酶催化的单向反应使两个底物通过循环相互转化。底物循环在正常生理条件下不会进行。
糖异生的调节是通过对两个底物循环的调节与糖酵解调节彼此协调。
4、乳酸循环
二、糖异生的生理意义
（一）维持血糖浓度的相对恒定（二）补充糖原储备
（三）调节酸碱平衡（四）协助氨基酸代谢
第五节血糖及其调节一、血糖来源和去路
1、来源：①食物经消化吸收的葡萄糖②肝糖原分解③糖异生
2、去路：①氧化供能②合成糖原③转变为脂肪及某些非必须氨基酸④转变为其他糖类物质
3、平恒定的生理意义：要组织器官的能量供应，特别是某些依赖葡萄糖供能的组织器官。脑组织不能利用脂酸，正常情况下主要依赖葡萄糖供能；红细胞没有线粒体，完全通过糖酵解获能；骨髓及神经组织代谢活跃，经常利用葡萄糖供能
二、血糖水平的调节
1、肝脏调节是维持血糖浓度的主要器官，在神经，激素的控制下进行。血糖↑→肝糖原合
成↑，糖异生↓
血糖↓→肝糖原分解↑ ，糖异生↑
2、肾脏调节肾糖阈：血糖8.9-10.0mmol/L 血糖低于肾糖阈，肾小管将葡萄糖全部重吸收
血糖高于肾糖阈，出现糖尿。
3、依靠激素的调节降低血糖：胰岛素升高血糖：胰高血糖素（glucagon）、糖皮质激素、肾上腺素
三、糖代谢紊乱
（一）低血糖
1. 低血糖的定义：腹血糖浓度低于3.33~3.89mmol/L 时称为低血糖。
2. 低血糖的影响：血糖水平过低，会影响脑细胞的功能，从而出现头晕、倦怠无力、心悸等症状，严重时出现昏迷，称为低血糖休克。
3.低血糖的病因:① 胰性（胰岛β -细胞功能亢进、胰岛α -细胞功能低下等）② 肝性（肝癌、糖原积累病等）③ 内分泌异常（垂体功能低下、肾上腺皮质功能低下等）④ 肿瘤（胃癌等）
⑤饥饿或不能进食
（二）高血糖及糖尿症
1. 高血糖的定义: 临床上将空腹血糖浓度高于7.22~7.78mmol/L 称为高血糖。
2. 肾糖阈的定义: 当血糖浓度高于8.89~10.00mmol/L 时，超过了肾小管的重吸收能力，则可出现糖尿。这一血糖水平称为肾糖阈。
3.高血糖及糖尿的病理和生理原因
a.持续性高血糖和糖尿，主要见于糖尿病（diabetes mellitus, DM）。
b.血糖正常而出现糖尿，见于慢性肾炎、肾病综合征等引起肾对糖的吸收障碍
c.生理性高血糖和糖尿可因情绪激动而出现。
第八章脂类代谢
第一节脂类的消化、吸收、分布及生理功能
脂类：脂肪和类脂总称为脂类
一、脂类的消化
1、部位主要在小肠上段
2、条件① 乳化剂（胆汁酸的乳化作用）；② 酶的催化作用二、脂类的吸收
1、部位十二指肠下段及空肠上段
、脂类分布及生理功能
第二节三酰甘油代谢
一、三酰甘油的分解代谢
（一）脂肪的动员
1、定义：储存在脂肪细胞中的脂肪，被肪脂酶逐步水解为FFA 及甘油，并释放入血以供其他
组织氧化利用的过程。
2、关键酶：激素敏感性脂酶（三酰甘油脂酶）
3、脂解激素：能促进脂肪动员的激素，如胰高血糖素、去甲肾上腺素、促肾上腺皮质激素（ACTH）、促甲状腺激素（TSH）等。
4、抗脂解激素：抑制脂肪动员，如胰岛素、前列腺素E2、雌二醇等。
激素敏感性脂酶二酰甘油脂酶一酰甘
5、脂肪动员过程：三酰甘油—————————二酰甘油———————酰甘油———油脂酶
————甘油
（二）脂肪酸氧化（β - 氧化）
1、部位：（1）组织：除脑组织外, 大多数组织均可进行，其中肝、肌肉最活跃。
（2）亚细胞：胞液、线粒体
2、过程：（1）脂酸的活化——脂酰CoA 的生成（胞液）关键酶：脂酰CoA合成酶：存在于内质网及线粒体外膜上活化形式：脂酰CoA
条件：ATP、HSCO、A Mg2+，消耗两个高能磷酸键
（2）脂酰CoA进入线粒体（载体分子——肉碱）关键酶：肉碱脂酰转移酶I
（3）脂肪酸的β- 氧化（线粒体）：脱氢、加水、再脱氢、硫解
（4）脂酸氧化的能量生成——以16 碳软脂酸的氧化为例
活化：消耗2 个高能磷酸键
β 氧化：
每轮循环四个重复步骤：脱氢、水化、再脱氢、硫解
产物：1分子乙酰CoA 1分子少两个碳原子的脂酰CoA 1分子NADH++H1 分子FADH2 软脂酸（16C）的彻底氧化
7 轮循环产物：8 分子乙酰CoA 7 分子NADH++H 7 分子FADH2
华中农业大学《生物化学实验》试卷
华中农业大学本科生课程考试试卷 考试课程与试卷类型：植物生理学实验原理与技术（A）姓名： 学年学期：2008－2009－1 学号： 考试时间：2009－－班级： 一、名词解释 ( 每题 4 分 , 共 12分 ) 1. 聚丙烯酰胺凝胶 2. 离心技术 3．可见光分光光度法/反相纸层析 二、填空题 ( 每空 2 分 , 共 42分 ) 1. 反相纸层析法分离油菜不饱和脂肪酸的实验中 ,分离后的不饱和脂肪酸经红氨酸溶液显色后 , 其最终产物颜色是（1）,从点样端起层析谱带所对应的脂肪酸依次是 (2) 、（3）、（4）、（5）、（6）。 2. 圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物酶同工酶的实验中 , 电泳时上槽接电源（7）极 ,下槽接电源 (8) 极 , 电泳开始电流应调节至每管（9）mA, 十分钟后电流调节至每管 (10) mA; 在上槽或样品中加入溴酚蓝是起（11）的作用。 3. 核酸提取过程中 , 将含有 DNA 的溶液置72℃处理 3 分钟，其目的是（12）；在淀粉酶活性测定过程中将淀粉酶液置于 70℃下处理 15 分钟的目的是（13）。 4．在微量凯氏定氮法测定植物组织中的总氮和蛋白氮，有三个主要的实验阶段，它们分别是（14）、（15）和（16）。在第二阶段，若收集三角瓶中的溶液颜色由_（17）变为（18），表明反应完全。第三阶段所用的标准浓度的滴定溶液名称是（19）。 5. DNA 提取研磨时加入的研磨缓冲液的NaCl浓度是（20），研磨时加入SDS的作用是（21）
三、是非判断题 (判断对错，对的标T，错的标F，每题 2 分，共 10 分 ) 1．萌发的小麦种子中含有很高活性的淀粉酶，其中α－淀粉酶不耐热，在70℃迅速钝化。（） 2．本学期测定还原性糖和可溶性蛋白含量时都用到了斐林试剂，这两个实验中所用的斐林试剂的配方是相同的。（） 3．DNA提取中，加入冷乙醇是为了使DNA分子复性变粗。（） 4．离心机使用中，要求同一台离心机所用的离心管都有相同的重量。（）5．油菜种子硫甙葡萄糖苷的快速分析法中，反应的实质是测定水解硫苷产生的葡萄糖的数量。（） 四、问答题（共36分） 1．试述维生素C测定的基本原理及其实验过程中的注意事项（12分） 2．简述凯氏定氮法测定蛋白质含量的基本原理。为什么一些不法商人要在蛋白质制品中加入三聚氰胺？（12分） 3．凝胶电泳法测定同工酶的原理是什么？为什么本学期所作的胶条染色后显示的谱带就是过氧化物同工酶带？（12分）
生物化学-考试知识点_6核苷酸代谢
核 苷 酸 一级要求 单选题 1 用 A 嘧啶环的N1 嘌呤环的N1和N7 E 肌酸 在嘌呤核苷酸的合成中,第4位及5位的碳原子和第7位氮原子主要来源于: 15 N 标记谷氨酰胺的酰胺氮喂养鸽子后, 在鸽子体内下列主要哪种化合物中含 15 N ？ B GSH C D 嘌呤环的N3和N9 D E 2 A 天冬氨酸 C 谷氨酰胺 E 甘氨酸 B 谷氨酸 D 丙氨酸 3 下列对嘌呤核苷酸合成的描述哪种是正确的? A 利用氨基酸、一碳单位和CO 2合成嘌呤环,再与5'-磷酸核糖结合而成 B 利用天冬氨酸、一碳单位、CO 2 和5'-磷酸核糖为原料直接合成 C 嘌呤核苷酸是在5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)提供磷酸核糖分子的 基础上与氨基酸、CO 2及一碳单位作用逐步形成 D 在氨基甲酰磷酸的基础上逐步合成 E 嘌呤核苷酸是先合成黄嘌呤核苷酸(XMP),再转变为AMP 、GMP 4 AMP 分子中第六位碳原子上的氨基来源于: C A 谷氨酰胺的酰胺基 B 谷氨酸 C E 天冬酰胺的酰胺基 天冬氨酸 D 甘氨酸 E 5 6 人体嘌呤核苷酸分解代谢的特征性终产物是: A C E NH3 B D CO 2 黄嘌呤 尿酸 次黄嘌呤 E 下列对嘧啶核苷酸从头合成途径的描述哪种是正确的? A 先合成嘧啶环,再与PRPP 中 的磷酸核糖相连 B 在PRPP 的基础上,与氨基酸及 CO 2作用逐步合成 C UMP 的合成需要有一碳单位的参加 D 主要是在线粒体内合成 E 需要有氨基甲酰磷酸合成酶I 参加 A D 7 嘧啶环中的第一位N 原子来源于: A 游离的氨 B 谷氨酸 C 谷氨酰胺的酰胺基 E 天冬酰胺的酰胺基 D 天冬氨酸 8 dTMP 的嘧啶环中第五位碳原子上的甲基来源于: A S-腺苷蛋氨酸 C N5-CH3FH4 B N5N10-CH2-FH4 D N10-CHOFH4 E N5N10=CH-FH4 B C 9 下列哪种氨基酸为嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成的共同原料? A 谷氨酸 D 丙氨酸 B 甘氨酸 C 天冬氨酸 E 天冬酰胺 10 下列关于嘌呤核苷酸从头合戒的叙述哪项是正确的
动物生物化学试题
动物生物化学试题 (A) 2006.1 一、解释名词（20分，每小题4分） 1. 氧化磷酸化 2. 限制性核酸内切酶 3. Km 4. 核糖体 5. 联合脱氨基作用 二、识别符号（每小题1分，共5分） 1.SAM 2.Tyr 3.cDNA 4.PRPP 5.VLDL 三、填空题（15分） 1. 蛋白质分子的高级结构指的是（1分）， 稳定其结构的主要作用力有（2分）。 2. 原核生物的操纵子是由 (1分)基因， (1分)基因及其下游的若干个功能上相关的（1分）基因所构成。 3. NADH呼吸链的组成与排列顺序为 （3分）。 4. 酮体是脂肪酸在肝脏中产生的不完全分解产物，包括（1分），
（1分）和（1分），在肝外组织中利用。 5. 脂肪酸的氧化分解首先要（1分）转变成脂酰辅酶A，从胞浆转入线粒体需要一个名为（1分）的小分子协助；而乙酰辅 酶A须经过 （1分）途径从线粒体转入胞浆合成脂肪酸。 四、写出下列酶所催化的反应，包括所需辅因子，并指出它所在的代谢途径 （10分） 1. 氨甲酰磷酸合成酶I 2. 谷丙转氨酶 五、问答题（50分） 1. 什么是蛋白质的变构作用（4分），请举例说明（4分）。（8分） 2. 以磺胺药物的抗菌作用为例（4分），说明酶的竞争抑制原理（4分）。（8分） 3. 一摩尔的乙酰辅酶A经过三羧酸循环完全氧化分解可以生成多少ATP？（3分）请说明理由（5分）。（8分） 4.比较在原核生物DNA复制过程中DNA聚合酶III和聚合酶I作用的异同。（8分） 5.真核基因有什么特点，简述真核生物mRNA转录后的加工方式。（8分） 6.简述由肾上腺素经PKA途径调控糖原分解代谢的级联放大机制。（10分）
生物化学实验理论考试题答案
生物化学实验理论考试题答案 1.醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端，为什么？ 答；电泳时点样端应靠近负极，因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么？ 答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？ 答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.何谓Rf值？影响Rf值的因素？ 答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关，对同一种物质来讲Rf是一个常量。 5.什么是盐析？盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性，因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析 6.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 7.影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系？ 答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶
生物化学与分子生物学复习归纳笔记
生物化学与分子生物学重点(1) https://www.wendangku.net/doc/307835232.html, 2006-11-13 23:44:37 来源：绿色生命网 第一章绪论 一、生物化学的的概念： 生物化学（biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学，它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。 二、生物化学的发展： 1．叙述生物化学阶段：是生物化学发展的萌芽阶段，其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。 2．动态生物化学阶段：是生物化学蓬勃发展的时期。就在这一时期，人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。 3．分子生物学阶段：这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。 三、生物化学研究的主要方面： 1．生物体的物质组成：高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成，此外还含有一些低分子物质。 2．物质代谢：物质代谢的基本过程主要包括三大步骤：消化、吸收→中间代谢→排泄。其中，中间代谢过程是在细胞内进行的，最为复杂的化学变化过程，它包括合成代谢，分解代谢，物质互变，代谢调控，能量代谢几方面的内容。 3．细胞信号转导：细胞内存在多条信号转导途径，而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起，从而构成了非常复杂的信号转导网络，调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。 4．生物分子的结构与功能：通过对生物大分子结构的理解，揭示结构与功能之间的关系。 5．遗传与繁殖：对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究，也是现代生物化学与分子生物学研究的
一个重要内容。 第二章蛋白质的结构与功能 一、氨基酸： 1．结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外，其余氨基酸均为L-α-氨基酸。 2．分类：根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类：① 非极性中性氨基酸(8种)； ② 极性中性氨基酸(7种)；③ 酸性氨基酸(Glu和Asp)；④ 碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。 二、肽键与肽链： 肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。氨基酸分子在参与形成肽键之后，由于脱水而结构不完整，称为氨基酸残基。每条多肽链都有两端：即自由氨基端(N端)与自由羧基端(C端)，肽链的方向是N端→C端。 三、肽键平面(肽单位)： 肽键具有部分双键的性质，不能自由旋转；组成肽键的四个原子及其相邻的两个α碳原子处在同一个平面上，为刚性平面结构，称为肽键平面。 四、蛋白质的分子结构： 蛋白质的分子结构可人为分为一级、二级、三级和四级结构等层次。一级结构为线状结构，二、三、四级结构为空间结构。 1．一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序，其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间结构。 2．二级结构：指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象，借氢键维系。主要有以下几种类型： ⑴α-螺旋：其结构特征为：①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋；②螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基，螺距为0.54nm；③ 相邻螺旋圈之间形成许多氢键；④ 侧链基团位于螺旋的外侧。 影响α-螺旋形成的因素主要是：① 存在侧链基团较大的氨基酸残基；② 连续存在带相同电荷的氨基酸残基；③ 存在脯氨酸残基。 ⑵β-折叠：其结构特征为：① 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片；② 所有肽键的C=O和
动物生物化学复习总结
一、名词解释： 1.等电点；当一定的PH条件下，氨基酸分子中所带的正电荷和负电荷相等，即净电荷为0，此时溶液的PH即为该种氨基酸的等电点。 2. 酶的活性中心：酶只有很小的部位与底物发生反应，此部位称为酶的活动中心。 3. 变构酶：当一种效应物与酶一个部位结合后，将影响到另一个效应物与酶的结合，这类酶称为变构酶 二、填空题： 1. 碱性氨基酸包括：组氨酸、赖氨酸、精氨酸 酸性氨基酸包括：天冬氨酸、谷氨酸 2. 蛋白质的二级结构包括：α-螺旋 、β-折叠、独立的α-螺旋和β-折叠、相间的α-螺旋和β-折叠3. 酶的专一性包括相对专一性、绝对专一性、立体结构专一性 三、三羧酸循环或糖酵解路径图(书本103,105面) 习题 1氨基酸在水溶液中也什么形式存在（两性离子） 2蛋白质亚基间的空间排布相互作用（四级结构） 3胰岛素原转变为胰岛素发生在哪个细胞器：高尔基体 4蛋白质的等电点为5.0放在PH为1.0的缓冲液中，正电荷能向正极还是负极。答案：负极5每分子血红蛋白中有多少个铁原子？（四个） 6双缩脲用来检测什么（蛋白质） 7肽键属不属于一级结构内能（属于） 8肽键中氮与氮之间单键为什么不能旋转（有酰胺平面） 判断题 9肽键能旋转形成β-折叠（错误） 10具有三级结构的肽键都具有生物活性（错误） 11蛋白质在生物体内合成之后的共价修饰是可逆（正确） 12磷酸化和去磷酸化作用用的是不是同一种酶（不是） 13盐析不会引起蛋白质的变性（正确） 14Km值代表亲合性的高低（负相关） 15磷酸化是激酶催化的（正确） 16糖元磷酸化酶是一种什么酶（可逆的共价调节酶） 17Km值与酶的性质相关而不是与酶的活性相关（正确） 18糖酵解过程中的限速酶（磷酸果糖激酶） 19以磷酸二羟丙酮为交叉点的是（糖代谢与甘油代谢之间） 20丙酮到乙酰辅酶A脱掉的H给了谁（NAD+） 21发生线粒体的循环式：三羧酸循环 22一分子子葡萄糖进行有氧氧化会经过几次底物磷酸化（6次） 思考题 第二章蛋白质 （1）天冬氨酸解离基团的pK值分别是pK1=1.88，pK2=9.06，pKR=3.64，天冬氨酸的等电点是多少？
生物化学实验题目
实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么？ 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时，与值呈良好的线性关系？ 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中，为什么要加无水乙醇？ 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂，会产生什么现象？（至少写2点） 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时，正确的加法是什么？将产生什么现象？请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇，下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中，无水乙醇为什么要分两次加入？ 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么？ 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时，能用稀硫酸吗？为什么？ 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质，稀硫酸中含有水，会降低P-S-Fe试剂的浓度，从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。
实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖，用什么方法进行糖含量的测定？ 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应，是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色，谁的A值更大？为什么？ 产物的更大，因为产物生成棕红色，颜色越深，吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中，为什么要离心两次？ 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗？为什么？ 是的，因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量？ 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是？ 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中，碘液的作用是什么？ 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。
动物生物化学(1)
动物生物化学复习题 1、天然蛋白质氨基酸的结构要点？ 答：在与羧基相连的α－碳原子上都有一个氨基，称为α－氨基酸。α—碳原子不是手性碳原子的是哪个氨基酸？ 答：甘氨酸 具有紫外吸收特性的氨基酸有哪些？ 答：酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸 吸收波长是多少？ 答：280nm 核酸的紫外吸收波长是多少？ 答：260nm 2、全酶包括哪几部分？ 答：酶蛋白与辅助因子 辅基与辅酶的异同点？ 答：与酶蛋白结合梳松，用透析、超滤等方法可将其与酶蛋白分开者称为辅酶；与酶蛋白结合紧密，不能用透析发分离的称为辅基。 正常情况下，大脑获得能量的主要途径是什么？ 答：葡萄糖的有氧氧化 糖酵解是在细胞的是在细胞的哪个部位进行的？
答：细胞的胞液中 3、糖异生的概念和意义？ 答： 概念：由非糖物质转变为葡萄糖或糖原的过程。 意义：由非糖物质合成糖以保持血糖浓度的相对恒定；有利于乳酸的利用；可协助氨基酸代谢。 生糖氨基酸、丙酮酸、乳酸、乙酰COA哪个不能异生成糖? 答：乙酰COA 4、什么是呼吸链？ 答：又称电子传递链,是指底物上的氢原子被脱氢酶激活后经过一系列的中间传递体，最后传递给被激活的氧分子而生成水的全部体系。各种细胞色素在呼吸链中传递电子的顺序? 答：B-C1-C-AA3-O2 两条呼吸链的磷氧比分别是多少？ 答：NADH呼吸链：P/O~2.5（接近于3） FADH2呼吸链：P/O~1.5（接近于2） 氰化物中毒是由于抑制了哪种细胞色素? 答：Cytaa3（细胞色素氧化酶） 5、为了使长链脂酰基从胞浆转运到线粒体内进行脂肪酸的β-氧 化，所需要的载体是什么？ 答：肉碱
6、氨基酸脱下的氨基通常以哪种化合物的形式暂存和运输？答：谷氨酰胺 参与尿素循环的非蛋白氨基酸有哪几种？ 答：瓜氨酸和鸟氨酸 7、RNA 和 DNA 彻底水解后的产物有哪些不同？ 答：DNA彻底水解产物:磷酸，脱氧脱氧核糖，鸟嘌呤，腺嘌呤， 胞嘧啶，胸腺嘧啶。 RNA彻底水解产物:磷酸，核糖核酸，鸟嘌呤，腺嘌呤，尿嘧啶，胸腺嘧啶 双链DNA 解链温度的增加，提示其中碱基含量高的是哪几种碱基？答：C和G（胞嘧啶和鸟嘌呤） 8、蛋白质一级结构的概念? 答：蛋白质的一级结构是指多肽链上氨基酸残基的排列顺序，即氨基酸序列。 维系蛋白质一级结构的化学键主要是什么键？ 答：肽键 9、蛋白质变性后可出现哪些变化？ 答：破坏次级键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。如：溶解度降低，易形成沉淀析出，结晶能力丧失，分子形状改变，酶失去活力，激素蛋白失去原来的生理功能。
生物化学重点笔记(整理版)
教学目标： 1.掌握蛋白质的概念、重要性和分子组成。 2.掌握α-氨基酸的结构通式和20种氨基酸的名称、符号、结构、分类；掌握氨基酸的重要性质；熟悉肽和活性肽的概念。 3.掌握蛋白质的一、二、三、四级结构的特点及其重要化学键。 4.了解蛋白质结构与功能间的关系。 5.熟悉蛋白质的重要性质和分类 导入：100年前，恩格斯指出“蛋白体是生命的存在形式”；今天人们如何认识蛋白质的概念和重要性？ 1839年荷兰化学家马尔德（G.J.Mulder）研究了乳和蛋中的清蛋白,并按瑞典化学家Berzelius的提议把提取的物质命名为蛋白质（Protein，源自希腊语，意指“第一重要的”）。德国化学家费希尔(E.Fischer)研究了蛋白质的组成和结构，在1907年奠立蛋白质化学。英国的鲍林(L.Pauling)在1951年推引出蛋白质的螺旋；桑格(F.Sanger)在1953年测出胰岛素的一级结构。佩鲁茨(M.F.Perutz)和肯德鲁(J.C.kendrew) 在1960年测定血红蛋白和肌红蛋白的晶体结构。1965年，我国生化学者首先合成了具有生物活性的蛋白质——胰岛素（insulin）。 蛋白质是由L-α-氨基酸通过肽键缩合而成的，具有较稳定的构象和一定生物功能的生物大分子（biomacromolecule）。蛋白质是生命活动所依赖的物质基础，是生物体中含量最丰富的大分子。 单细胞的大肠杆菌含有3000多种蛋白质，而人体有10万种以上结构和功能各异的蛋白质，人体干重的45%是蛋白质。生命是物质运动的高级形式，是通过蛋白质的多种功能来实现的。新陈代谢的所有的化学反应几乎都是在酶的催化下进行的，已发现的酶绝大多数是蛋白质。生命活动所需要的许多小分子物质和离子，它们的运输由蛋白质来完成。生物的运动、生物体的防御体系离不开蛋白质。蛋白质在遗传信息的控制、细胞膜的通透性，以及高等动物的记忆、识别机构等方面都起着重要的作用。随着蛋白质工程和蛋白质组学的兴起和发展，人们对蛋白质的结构与功能的认识越来越深刻。 第一节蛋白质的分子组成 一、蛋白质的元素组成 经元素分析，主要有C（50%～55%）、H（6%～7%）、O（19%～24%）、N（13%～19%）、S（0%～4%）。有些蛋白质还含微量的P、Fe、Cu、Zn、Mn、Co、Mo、I等。 各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16%。因此，可以用定氮法来推算样品中蛋白质的大致含量。 每克样品含氮克数×6.25×100=100g样品中蛋白质含量（g%） 二、蛋白质的基本组成单位——氨基酸 蛋白质在酸、碱或蛋白酶的作用下，最终水解为游离氨基酸（amino acid），即蛋白质组成单体或构件分子。存在于自然界中的氨基酸有300余种，但合成蛋白质的氨基酸仅20种（称编码氨基酸），最先发现的是天门冬氨酸（1806年），最后鉴定的是苏氨酸（1938年）。 （一）氨基酸的结构通式 组成蛋白质的20种氨基酸有共同的结构特点： 1．氨基连接在α- C上，属于α-氨基酸（脯氨酸为α-亚氨基酸）。 2．R是側链，除甘氨酸外都含手性C，有D-型和L-型两种立体异构体。天然蛋白质中的氨基酸都是L-型。 注意：构型是指分子中各原子的特定空间排布，其变化要求共价键的断裂和重新形成。旋光性是异构体的光学活性，是使偏振光平面向左或向右旋转的性质，（-）表示左旋，（+）表示右旋。构型与旋光性没有直接对应关系。 （二）氨基酸的分类 1．按R基的化学结构分为脂肪族、芳香族、杂环、杂环亚氨基酸四类。 2．按R基的极性和在中性溶液的解离状态分为非极性氨基酸、极性不带电荷、极性带负电荷或带正电荷的四类。 带有非极性R（烃基、甲硫基、吲哚环等，共9种）：甘（Gly）、丙（Ala）、缬（Val）、亮（Leu）、异亮（Ile）、苯丙（Phe）、甲硫（Met）、脯（Pro）、色（Trp） 带有不可解离的极性R（羟基、巯基、酰胺基等，共6种）：丝（Ser）、苏（Thr）、天胺（Asn）、谷胺（Gln）、酪（Tyr）、半（Cys）带有可解离的极性R基（共5种）：天（Asp）、谷（Glu）、赖（Lys）、精（Arg）、组（His），前两个为酸性氨基酸，后三个是碱性氨基酸。 蛋白质分子中的胱氨酸是两个半胱氨酸脱氢后以二硫键结合而成，胶原蛋白中的羟脯氨酸、羟赖氨酸，凝血酶原中的羧基谷氨酸是蛋白质加工修饰而成。 （三）氨基酸的重要理化性质 1．一般物理性质 α-氨基酸为无色晶体，熔点一般在200 oC以上。各种氨基酸在水中的溶解度差别很大（酪氨酸不溶于水）。一般溶解于稀酸或稀碱，
动物生物化学 期末复习资料 超准
生化复习资料 考试： 名：10个（三、四） 选：10个（不含1、6、11、12） 3章重点维生素的载体、作用，嘌呤、嘧啶合成区别，核糖作用，一碳基团载体，ACP，载体蛋白，乙酰辅酶A缩化酶，生物素 填：20空（1、2、8） 简答：3个（1、6、7、8） 简述：3个（9、10、11、12） 血糖来源和去路，葡萄糖6-磷酸的交叉途径 实验与计算：（1、7） 一、名词解释 1、肽键：是一分子氨基酸的羧基与另一分子氨基酸的氨基脱水缩合而成的酰胺键（-CO-NH-），称为肽键。是蛋白质结构中的主要化学键（主键） 2、盐析： 3、酶的活性中心：在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上的基团，通过肽链的盘绕、折叠而在空间构象上相互靠近，形成的具有一定的构象，直接参与酶促反应的区域。又称酶活性部位 4、米氏常数：是反应最大速度一半时所对应的底物浓度,即当v = 1/2Vm时，Km = S 意义：Ｋm越大，说明E和S之间的亲和力越小，ES复合物越不稳定。米氏常数Km对于酶是特征性的。每一种酶对于它的一种底物只有一个米氏常数。 5、氧化磷酸化：是在电子传递过程中进行偶联磷酸化，又叫做电子传递水平的磷酸化。 6、底物水平磷酸化：是直接由底物分子中的高能键转变成A TP末端高能磷酸键叫做底物水平的磷酸化。 7、呼吸链：线粒体能将代谢物脱下的成对氢原子(2H)通过多种酶和辅酶的链锁反应体系逐步传递,最后与激活的氧结合为水,由于该过程利用氧气与细胞呼吸有关,所以将这一传递体系叫做呼吸链。 8、生物氧化：糖类、脂肪和蛋白质等有机化合物在生物体内经过一系列的氧化分解，生成CO2和水释放能量的总过程叫做生物氧化。 9、葡萄糖异生作用：由非糖前体物质合成葡萄糖的过程。 10、戊糖磷酸通路：指机体某些组织以6-磷酸葡萄糖为起始物在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸进而代谢生成磷酸戊糖为中间代谢物的过程。 11、激素敏感激酶： 12、酮体：脂肪酸在肝脏中氧化分解所生成的乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮三种中间代谢产物，统称为酮体。 13、饲料蛋白质的互补作用：把原来营养价值较低的不同的蛋白质饲料混合使用，可能提高其营养价值和利用率。 14、氮平衡：是反映动物摄入氮和排除氮之间的关系以衡量机体蛋白质代谢概况的指标。 15、从头合成途径：利用氨基酸等作为原料合成 16、补救合成途径：利用体内游离的碱基或核苷合成
生物化学实验习题及参考答案完整版
生物化学实验习题及参 考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（）
动物生物化学(1)
一．绪论与酶 1.名词解释: 生物化学——简称生命的化学；是从分子水平上阐明生命有机体化学本质的一门学科。 酶——由生物活细胞产生，具有高度专一性和极高催化效率的生物催化剂。 酶原——在细胞内最初合成或分泌时并没有催化活性，必须经过适当物质的作用才具有催化活性的酶的前体。 同工酶——是指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质和免疫学性质不同的一组酶。 酶原的激活——使无活性的酶原转变成有活性的酶的过程。 维生素——维持细胞正常功能所必需，但需要量很少，动物体内不能合成，必须由食物供给的一类有机化合物。 酶活性部位——酶分子中能直接与底物相结合并催化底物转化为产物的部位。 活化能——从反应物(初态)转化成中间产物(过渡态)所需要的能量。 必需基团——直接参与对底物分子结合和催化的基团以及参与维持酶分子构象的基团。 诱导契合学说—— 酶活力——酶催化底物化学反应的能力 ２.酶催化作用的特征(P2) 答：1.酶具有很高的催化效率 2.酶具有高度的专一性 3.反应条件温和 4.体内的酶活性是受调控 5.酶易变性失活 3.单纯酶和结合酶 单纯酶：只含有蛋白质成分，如：脲酶、溶菌酶、淀粉酶、脂肪酶、核糖核酸酶等。 结合酶：除蛋白质组分外，还有非蛋白质的小分子物质，只有两者同时存在才有催化功能。 4.维生素与辅酶(P3) 名称辅酶形式主要作用缺乏病 B1 TPP 丙酮酸脱氢酶的辅酶脚气病 B2 FMN FAD 脱氢酶的辅酶，递氢口角炎等 B3 CoA 酰基转移酶的辅酶 B5 NAD+、NADP 脱氢酶的辅酶，递氢、递电子作用癞皮病 B6 磷酸吡哆醛氨基转移的载体 B7 生物素羧化酶的辅酶 B9 FH4 一碳基团的载体巨红细胞贫血 B12 变位酶的辅酶，甲基的载体恶性贫血 5.酶催化机理(P4) 答：过渡态和活化能:酶能降低化学反应所需的活化能 中间产物学说 诱导契合学说
生物化学实验重点试题
一、解词 1、总氮量水中各种形态无机和有机氮的总量 2、酶的抑制作用是指在某个酶促反应系统中，某种低相对分子质量的物质加入后，导致酶活力降低的过程。 3、酶的最适温度酶催化活性最高时的温度 4、蛋白质的等电点每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点 5、盐析增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低的现象 6、蛋白质变性蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失6、酶的专一性酶对底物及其催化反应的严格选择性通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应 7、激活剂能提高酶活性的物质大部分是离子或简单的有机化合物 8、抑制剂凡能使酶催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质 9、酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体 二、填空 1、球蛋白可在半饱和中性硫酸铵溶液中析出，清蛋白可在高盐浓度溶液中析出。 2、在PH3.0、和9.5时的电场中，卵清蛋白（PI4.6）移动方向分别为负移 动，正移动。 3、唾液淀粉酶的最适温度是37 4、还原糖与本乃狄试剂共热现象生成生成砖红色沉淀。 5、维生素C也称抗坏血酸，它具有很强还原性 6、用苔黑酚浓盐酸溶液可以鉴定核糖核酸 7、当溶液的PH低于蛋白质等电点时，蛋白质分子带正电荷；当溶液的 PH大于蛋白质等电点时，蛋白质分子带负电荷； 10．凯氏定氮法测定蛋白质含量消化终点颜色为清澈的蓝紫色色。 11．蛋白质变性的实质是空间结构被破坏。 12．常用的RNA提取方法有苯酚法、、高盐法等。 13、维持蛋白质亲水胶体稳定的因素是蛋白质颗粒表面的电荷层 和水化膜、 14、蛋白质在等电点时，主要以两性离子离子形式存在；当溶液的P H＞PI 时，蛋白质分子以负离子形式存在；当溶液的P H＜PI时，蛋白质分子带正离子形式存在。 15、蛋白质分子中氮的平均含量为 5.16% ，样品中的蛋白质含量常以测 氮量乘以 6.25 、即 6 。 三、选择 1、盐析法沉淀蛋白质的原理( ) A 与蛋白质结合成不溶性蛋白盐 B 次级键断裂蛋白质的构象改变 C 中和电荷，破坏水化膜 D 调节蛋白质溶液的等电点 2、以下哪项不是酶的特性（） A 酶是生物催化剂，催化效率极高 B 易受Ph，温度等外界因素的影响 C 能加速化学反应但不改变反应平衡点 D 有高度特异性 3、RNA和DNA的最大紫外吸收值是在（） A 280nm B 260nm C 510nm D 620nm 4、．凯氏定氮法使用的混合催化剂硫酸钾-硫酸铜配比为（） A 1:3 B 5:1 C 3:1 D 1:1
生物化学考试知识点提要
Pro含N16%，AA残基平均M=110，残基数<50称多肽。 主链构象角：肽键中N－Cα转动角为φ，Cα－C转动角为ψ；C－N转动角为ω。 肽链构象为反式构象ω=180 (脯氨酸除外)。Ramachandran图：φ和ψ角。 α-螺旋几乎都是右手，3.6残基/圈，第i残基C＝O和第i+4残基N-H形成氢键。Ala,Glu,Leu,Met 对螺旋有倾向，Pro,Gly,Ser不参加。//几乎所有β折叠片均存在链扭曲，大部分是右手。β-折叠片中，β-折叠股处于伸展状态，一股的C＝O与另一股的N-H形成氢键。所有β-折叠股有相同的N-C方向称为平行；相互靠近的两股有相反方向为反平行。 不规则二级结构：转角及环。规则的比不规则的稳定，新功能往往由不规 则的二级结构区域来体现，——蛋白质的“结合部位”或酶的“活性中心”。氨基酸残基序列——一级结构(共价键)；α-螺旋，β-折叠，环状区域——二级结构(氢键)； 超二级结构(花样)：TIM桶，β-回折片……其他各种未写明的；// TIM桶：αβ-barrel八个β被//八段α围绕，短的环连接交替的β和α。酶活中心的残基位于TIM桶β片的C端和连接α的环状区。结构域：一个Pro可包含一个或多个，是能够独立折叠成稳定的三级结构的多肽链的一部分或者全部。三级结构(二硫键等连接的多条多肽链)；四级结构(多亚基结构)；分子聚合体； 胃：胃蛋白酶。胰→小肠(肠激酶激活)：羧肽酶原，糜蛋白酶原，胰蛋白酶原，胰凝乳蛋白酶原。蛋白酶家族按照催化部位的残基分：巯基(半胱氨酸)蛋白酶家族；天冬氨酸~；丝氨酸~；金属~。 胰凝乳蛋白酶（丝氨酸蛋白酶家族）：共价修饰催化。水解位于C端，芳香基团或大侧链残基的肽键。 很多蛋白酶（枯草杆菌蛋白酶，小麦羧肽酶-II，乙酰胆碱酯酶及脂肪酶） 有催化三联体，特异性由三联体附近的亲水凹隙形成底物结合口袋决定。溶酶体和蛋白酶体：溶酶体涉及内吞作用到胞内的蛋白降解；蛋白酶体主要涉及细胞自身蛋白的降解。 (转录因子、病毒编码的蛋白、折叠错误的蛋白) 自噬泡with溶酶体：内为酸性，有半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、含锌金属蛋白酶等水解酶。 泛素with蛋白酶体：泛素——多肽，多泛素化的蛋白质被特异性识别并在蛋白酶体中迅速降解。 蛋白酶体：一个桶状结构的26S复合物。核心复合物20S，盖子结构19S。 泛素的C端连到泛素激活酶E1上(耗ATP)，然后转移到泛素结合酶E2的巯基，泛素连接酶E3转移被激活的泛素到一个被选择蛋白(E3识别)的赖氨酸侧链上。E3具有底物特异性，关系到N-end rule(蛋白半衰期与其N-端序列相关)。不断重复，Pro被绑了一批泛素分子，被运送到蛋白酶体中切成短链。 氨基酸的N代谢：脱氨基、氮原子代谢、最终形成尿素/尿酸。！谷氨酸有核心地位 ⑴氧化脱氨：(仅少数AA) 谷氨酸+NAD++H2O→NADH+NH4++α-酮戊二酸谷氨酸脱氢酶 //变构酶in MIT，ATP/GTP抑制剂，ADP/GDP激活剂。能利用NAD+/NADP+作电子受体。 ⑵联合脱氨：(主要) 转氨常与谷氨酸氧化脱氨偶联——由谷氨酸完成脱氨。 //转氨酶——催化氨基在氨基酸& α-酮酸之间可逆的转移。 ⑶其它途径：嘌呤核苷酸循环，丝氨酸脱水酶；过氧化物体中的氨基酸氧化酶。 高氨血症，NH+4浓度升高尤其对大脑有毒：将驱使谷氨酸→谷氨酰胺，耗尽神经递质谷氨酸；谷氨酸脱氢酶反方向催化α-酮戊二酸→谷氨酸，α-酮戊二酸的耗尽削弱了脑中能量代谢TCAC。氨以丙氨酸、谷氨酰胺形式运输；主要在肝脏合成尿素以解毒（或在肾合成铵盐）。 尿素循环{鸟氨酸循环by Krebs}（完整的尿素循环仅在肝脏）： 总：2NH3+CO2+4ATP+天冬AA→Urea+延胡索酸+4ADP+4Pi 线粒体内膜中有鸟氨酸/瓜氨酸转运体，瓜氨酸离开&鸟氨酸进入MIT基质。 0. 循环前的关键——氨基甲酰磷酸的合成：（HCO-3+NH3不可逆反应耗2ATP） 氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ（in MIT）是别构酶，N-乙酰谷氨酸是激活剂。 1. 鸟+氨基甲酰磷酸→瓜鸟氨酸转氨甲酰酶MIT 2. 瓜+天冬→精氨基琥珀酸精氨琥珀酸合酶胞质 3. 精氨基琥珀酸→精+延胡索酸精氨琥珀酸酶胞质 4. 精→尿素+鸟；精氨酸酶胞质 胰脂肪酶选择1,3位酯键水解为甘油单酯+脂肪酸，甘油单酯被甘油单酯脂肪酶水解得甘油+脂肪酸。甘油代谢：⑴甘油+ATP→α-磷酸甘油甘油激酶(in肝脏) ⑵α-磷酸甘油→二羟丙酮磷酸（糖酵解/糖异生）脱氢酶，脱氢 脂肪酸代谢：(脂肪动员：脂肪组织贮存的脂肪释放出游离脂肪酸并转移到肝脏) 长链脂肪酸的活化（内质网膜，线粒体外膜）：总：脂肪酸+ATP+HS-CoA→脂酰-CoA+AMP+2Pi ⑴脂肪酸+ATP→酰基腺苷酸+PPi ；PPi→2Pi //脂酰-CoA有高能硫酯键 ⑵酰基腺苷酸+HS-CoA→脂酰-CoA+AMP 脂酰-CoA合酶 脂酰-CoA能透过MIT外膜但不能透过内膜到基质，肉碱介导脂酰基转运到线粒体基质： 1.肉碱软脂酰转移酶I（在MIT外膜）：脂酰基从脂酰-CoA转移到肉碱→脂酰肉碱 2.线粒体内膜上的的运输体：介导内膜内外两个肉碱/脂酰肉碱的脂酰基交换 3.肉碱软脂酰转移酶II（在MIT基质）：脂酰基从肉碱转移到CoA→脂酰-CoA 脂肪酸的β-氧化（MIT基质）： ⑴脂酰-CoA脱氢酶：脂酰-CoA中的脂肪酸氧化出双键(C2=C3)，FAD→FADH2 ⑵烯酰-CoA水合酶：反式双键水合反应产生L-羟脂酰-CoA ⑶羟脂酰-CoA脱氢酶：氧化β位(C3)的羟基为酮基，NAD+→NADH ⑷β-酮脂酰硫解酶：硫解产物为乙酰-CoA及少了2C的脂酰-CoA（直到乙酰-CoA） 总：脂酰-CoA+FAD+NAD++HS-CoA→脂酰-CoA（少2C）+FADH2+NADH+H++乙酰-CoA 脂肪酸氧化的控制主要在脂酰基转运：丙二酸单酰-CoA（脂肪酸合成前体）抑制肉碱软脂酰转移酶I。低ATP高AMP时丙二酸单酰-CoA减少，则脂肪酸氧化增加：产生乙酰-CoA进入TCAC补充ATP。脂肪酸的合成（细胞溶胶）：合成时的H-载体是NADPH，增2C的直接前体是丙二酸单酰-CoA。 ⑴乙酰-CoA羧化酶：形成丙二酸单酰-CoA ⑵脂肪酸合酶：经历启动,装载,缩合,还原,脱水,还原,释放过程，加上2C。// 动物停在16C 血浆脂蛋白（用于运输脂类）：乳糜颗粒，LDL低密度脂蛋白，VLDL极低~，HDL高~。 LDL是胆固醇载体，在细胞表面与LDL受体结合并经内吞作用进入细胞。 高胆固醇血症（引起动脉粥样硬化，冠心病）：LDL受体合成缺陷；受体从内质网 到高尔基体的转运缺陷；LDL与受体的结合缺陷；细胞膜凹陷处受体不能聚集缺陷。
动物生物化学大纲
826《动物生物化学》大纲 动物生物化学是动物科学、动物医学及动物药学专业本科生的重要专业基础课。要求考生了解生命现象的化学本质及化学组成，掌握生物大分子的分子结构、三大营养物质的代谢及能量转化、生物遗传的分子基础（DNA复制、转录及蛋白质生物合成）、代谢调节及基因表达调控等。 1.主要了解生物化学的概念、主要的研究内容、研究热点及发展趋势。 2.了解蛋白质的生理功能及分类，掌握组成蛋白质的基本结构—氨基酸结构及 性质；掌握蛋白质结构各层次结构概念及特点。弄清蛋白质结构与功能的关系，掌握蛋白质的主要理化性质。 3.弄清DNA和RNA的化学组成、性质和生物学功能，掌握DNA双螺旋结构特点、RNA分类、结构特点及生物学功能。掌握核酸变性、复性的基本概念及其应用。 4.了解酶的基本概念，掌握酶促反应特点，掌握酶的化学组成及辅酶（维生素）， 弄清酶结构与功能的关系，了解酶催化机制，掌握酶促反应动力学及酶活性调节的方式。 5.了解糖在的物体的一般代谢概况，掌握糖原合成与分解、糖酵解与三羧酸循 环、糖异生的代谢过程及反应、关键酶、能量转变及生理意义，掌握戊糖磷酸途径的生理意义，弄清糖代谢各途径的联系及调节。 6.弄清生物氧化的特点及其酶类，了解生物氧化二氧化碳生成的方式，掌握线粒体两条呼吸链的组成、排列顺序、抑制剂抑制部位，掌握氧化磷酸化机制。 7.了解脂类的生理功能，弄清脂肪的动员，掌握脂肪酸的?—氧化过程，掌握酮 体合成与分解过程，酮体生成意义，弄清脂肪酸合成的特点、关键酶等，了解脂肪合成途径和脂肪代谢调控，掌握类脂代谢特点（合成原料、合成过程的能量来源、关键酶等），了解脂类在体内的转运概况。 8.了解蛋白质的营养作用，弄清氨基酸的各种脱氨基方式，掌握氨基酸的联合 脱氨基作用，掌握尿素合成的主要阶段和反应过程，弄清体内α-酮酸的代谢去路及体内非必需氨基酸合成途径。弄清提供一碳基团的氨基酸和酪氨酸转变的物质。弄清的物体核苷酸从头合成途径的特点和嘌呤核苷酸在不同生物体内代谢的终产物。
临床生物化学实验原理方法及检测介绍
临床生物化学实验原理、分析方法及检测技术 中国中医研究院广安门医院临床检测中心 生物化学实验——是把化学(分析技术)和生物化学(实验反应原理)的方法应用于疾病的诊断、治疗、监控的实验分支。 一个生化实验的最后测定结果应包括四大部分来完成。 一、实验反应原理及分析方法（理论依据） 二、实验检测技术（手段）生化仪的分析技术。 三、质量控制程序（质量保证）室内质控、室间质评、仪器、试剂、人员五要素。 四、临床意义（目的）咨询服务、异常结果的解释。 实验反应原理及分析方法(理论依据) 一个生物化学实验的反应原理设计，首先要找出所检测的化学特性，如测定体液（首先是血液）中酶的含量血液中除少数酶（如凝血溶血酶、铜氧化酶及假性胆碱脂酶等）含量较多外，血液正常生理状况下含量微乎其微。一般每毫升含微微克（Pg）水平，要直接测定如此微量物质是相当困难的。用免疫化学方法可测定全部酶蛋白分子含量（不论其有无活性）而用化学方法测定只能测定酶的催化活性，间接计算出酶的含量。目前利用酶具有催化活性这一特性，在临床上已普遍应用测定酶蛋白，同时还可以测定三大代谢的产物，如糖、脂类、蛋白质、这样也就建立起利用酶促反应的一级反应测定代谢物的方法。一级反应—反应速度与底物浓度成正比，因此只有当酶反应为一级反应时，才能准确测定底物含量，（如测定血糖、总甘油三脂、总胆固醇等）。从此在临床试剂盒的方法中出现了以酶为试剂测定各种代谢产物。 临床化学方法的分类 特别是自动生化仪方法的特点 以往临床化学实验都采用比色法进行各个项目的测定，这是因为比色法具有微量、迅速、准确的优点，特别适合于微量的生物体体液中各项物质测定。 在一般比色法中，手工使用比色计或分光光度计可以测定各种反应溶液的吸光度，但由于很难控制测定时间和反应温度，很难准确记录反应过程中吸光度变化，因此，毫不奇怪在很长一段时间内我们所使用的方法，都是在呈色反应达到完全或者反应达到平衡时，吸光度达到稳定时才进行测定。即所谓平衡法或终点法。 但自从自动生化仪出现后，从根本上改变了上述情况。通过各项先进技术，人们可以精确测定反应的动态过程。并可以准确计算任何一段反应时间内的反应速率，这样大大开阔了临床化学家对方法选择。除经典的终点法外还可以进行动态测定。这样不仅缩短了操作时间，大大提高了工作效率，还可进行一些用常规比色方法不能进行的测定。如测定酶反应的初速 度（V o ）等等。测酶初速度（V o ）只能用分光光度法。 因此，用好自动生化仪一个重要前提必须对自动生化仪可以提供的测试方法类型有所了解。 生化自动分析仪特点： 1 精确测定反应的动态过程； 2 准确计算任何一段反应时间内的反应速率； 3 除经典的终点法外还可以进行动态测定。 分析方法的分类