交叉配血试验标准操作规程微柱凝集法

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交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）

一、目的

为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法

采用微柱凝集法；

三、原理

将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。微柱检测系统的上端为反应室，将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中，微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间，反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙，沉积在微柱凝集检测管的底部。

四、适用范围

适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备

普通离心机；血型血清学多用离心机；37℃免疫微柱孵育器；

六、试剂

1、试剂名称：抗人球蛋白交叉配血卡（微柱凝集法）SOPREG012.01 第1 页共6 页

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2、试剂生产厂家：长春博迅生物技术有限责任公司；

3、批准文号：国药准字S2*******；

4、包装规格：聚丙烯卡12卡×3检测人份/盒；

5、贮藏条件；18-25℃避光保存。

6、有效期：自检定合格之日起12个月；

七、检测样本要求

1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤

1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；

2、分别配制受血者与献血者0.5%-0.8%红细胞悬液

3、将受血者血清50ul与献血者红细胞悬液50ul加入主侧管中；

4、将受血者红细胞悬液50ul与献血者血清50ul加入次侧管中；

5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟；

6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟，1500rpm离心3分钟，取出肉眼观察结果。

7、结果判断：

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南昌大学第一附属医院输血科第 3 页共 6 页阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管层底部，表明受血者与献血者血型相合；

阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者血型不相合

九、质量控制

1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评，且成绩合格；

2、每日做室内质量控制，且要求在控。

3、严格执行查对制度，判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误等引起的差错。

4、交叉配血标本应在2～8℃保存留一周，以备复查。

十、生物参考区间

相合，不相合。

十一、注意事项与干扰因素

1、本方法可结合盐水介质交叉配血相合后进行临床发血。

2、交叉配血标本必须正确有标识，其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态；

3、交叉配血试验血样要求是输血前3天内的血样（预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体）。

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南昌大学第一附属医院输血科第 4 页共 6 页4、标本血液离体后要求尽快送检，至检测完毕最长不能超过3d，每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃～8℃保存7天；

5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效；

6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酐、PVP等治疗，应注意将红细胞洗涤；如果受者使用肝素治疗，则应用硫酸鱼精蛋白对抗，使样本凝结；

7、交叉配血试验不相合时应注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别，可结合盐水介质交叉配血试验镜下观察或离心去上清液后重悬观察。8、抗体筛选试验阴性，而交叉配血结果阳性，提示有未检测明的同种抗体存在。

9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在。

10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例；

11、血清或血浆中如含有溶血性抗体，则相应红细胞被溶解而不凝集，交叉配血结果阳性，如排除标本中补体干扰因素的影响，可来活后重新试验。

12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体，应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别。

十二、参考文献

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1、胡丽华主编，临床输血检验，第1版。中国医药科技出版社，2004；

2、叶应妩，等主编，全国临床检验操作规程，第3版。东南大学出版社，2006，11；

3、抗人球蛋白交叉配血卡（微柱凝集法）说明书。

[质量与技术记录]

1、输血科室内质量控制实施记录表

2、输血科室内质量控制失控处理记录表

3、输血科工作量统计记录表

4、输血科感染性垃圾登记表

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