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脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎模型筛选

脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎模型筛选
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脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺炎模型筛选服务

脂多糖(LPS)是内毒素的主要成分,来源于革兰氏阴性菌细胞壁的外膜,在污染的空气、职业性粉尘(谷物粉等)、香烟中到处都有LPS,职业性和环境性的吸人一定浓度的上述物质后可引起或加重一系列临床病症,如哮喘、支气管肺炎等。LPS引起支气管肺炎后经及时有效治疗可痊愈,否则,病程迁延,气道炎症反复发作可变成慢性支气管炎,如继续接触高浓度的脂多糖,病情将进行性加重,最终发展成为肺心病。研究发现,LPS在体内外引起多种细胞高表达趋化因子和致炎因子 ,在肺组织中引起中性粒细胞聚集增多的主要细胞因子是IL-1β和TNF-α。 服务项目:

正常组 肺组织基本正常。(×200)

模型组 血管周围水肿明显,局部肺泡壁明显充血。(×200)

受试药物 肺泡壁基本正常,无明显充血、无炎细胞浸润,肺泡腔清晰。(×200)

高脂血症资料

实验动物学综述 题目:《高脂血症动物模型的探讨》姓名:张阳慧 学号: 2010109118 院系专业班级:硕2010级12班生理学任课老师刘政江老师 付建华老师

高脂血症动物模型的探讨 张阳慧综述司军强?审校 (石河子大学医学院民族高发病与地方病教育部重点实验室电生理研究室石河子 832002) 摘要:随着生活水平日益提高,高脂血症( hyperlipidemia) 发病率在逐年升高,大量流行病学调查和研究均表明,高脂血症是导致动脉粥样硬化(AS) ,冠心病、糖尿病等多种疾病最重要的的危险因素之一。高脂血症已经成为研究热点,但至今尚未明显突破,除了其他原因外,理想的动物模型(animal model) 制备可能也是制约其发展的重要原因。在研究高脂血症的模型动物中,有野生型、自然缺损和基因修饰的,动物种类包括大鼠、小鼠、兔、金黄地鼠、豚鼠和小型猪等。本文就对先天性、化学物质诱导的和转基因动物模型作一综述,为研究高脂血症的模型选择提供依据。 关键词: 高脂血症; 动物模型; 文献标识码: A Discussion on the animal model of hyperlipidemia Yanghui Zhang, Si Jun-qiang? (Division of Electrophysiology, Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Shihezi University Medical College, Xinjiang Shihezi, 832002) Abstract:With the increasing standard of living, hyperlipidemia incidence has increased year by year, a large number of epidemiological surveys and studies show that hyperlipidemia is a cause of atherosclerosis(AS), coronary heart disease, diabetes and the risk factors of other important disease . Hyperlipidemia is the hot point in the medicine field, but has not been broken through. Besides other reason, the experimental animal models play an important role in the study of the disease. In the study of animal models of hyperlipidemia, there are wild-type,natural defects and genetic modification, the animal species are including , rats, mice, rabbits, hamsters, guinea pigs and small pigs. To provide information for the choice of the animal models for the study of hyperlipidemia, congenital,chemical - induced and transgenic models were introduced in the review. Key words:hyperlipidemia ; animal model; 高脂血症( hyperlipidemia) 又称脂质代谢紊乱或异常, 是导致脂肪肝、动脉粥样硬化等多种疾病的重要因素。随着发病率的持续增加, 高脂血症的病因学、预防和治疗依然是医学界研究的热点。然而至今药物治疗尚未取得明显突破, 究其原因, 除了其它因素而外, 高脂血症动物模型的制备也可能是影响该类药物发展的重要原因之一, 因此, 选择理想的高脂血症动物模型是推进高脂血症研究进程的关键。本文就近年来高脂血症动物模型的研究概况作一综述, 为该领域的研究者正确合理选择高脂血症动物模型提供依据。 1常见高脂血症模型动物的种类及特点 1.1 大鼠建立大鼠高脂血症模型, 方法简单, 成本适中, 采血量较大, 可以满足一次做多种指标, 且模型建立的方法最多。更重要的是大鼠的食性与人类相似, 所形成的病变与人类早期病理改变相似, 且适应性较强, 是目前国内研究脂质代谢最多的实验动物。但大鼠有对抗动脉粥样硬化形成的能力, 不宜作为抗动脉粥样硬化药物

小鼠免疫细胞

免疫细胞的观察与小鼠脾脏淋巴细胞的提取 一、实验目的 1、明确各免疫器官分布与形态结构,能熟练找到各免疫器官,弄清中枢免疫器官与外周免疫器官的区别与联系。 2、掌握密度梯度离心法分离小鼠脾脏淋巴细胞的方法,熟悉脾脏淋巴细胞的形态与功能。 二、实验原理 脾脏是外周免疫器官之一,是人体最大的淋巴器官。它生在腹腔左上方,质地比较脆,容易外伤。一般来讲,脾脏有三大功能: 首先它是人体的“血库”,当人体休息、安静时,它贮存血液,当处于运动、失血、缺氧等应激状态时,它又将血液排送到血循环中,以增加血容量; 其次,脾脏犹如一台“过滤器”,当血液中出现病菌、抗原、异物、原虫时,脾脏中的巨噬细胞、淋巴细胞就会将其吃掉; 此外,脾脏还可以制造免疫球蛋白、补体等免疫物质,发挥免疫作用。脾是血循环中重要的滤过器,能清除血液中的异物、病菌以及衰老死亡的细胞,特别是红细胞和血小板。因此,脾功能亢进时可能会引起红细胞及血小板的减少。脾脏还有产生淋巴细胞的功能。 我们利用小鼠来观察脾脏的淋巴细胞。 小鼠淋巴细胞的比重为1.088,利用比重为1.088的淋巴细胞分离液,将脾细胞悬液置于分离液上层,通过梯度离心的方法,在分离液与脾细胞悬液交界液面处分离得到脾脏淋巴细胞。 三、实验器材 KM种小鼠,PBS缓冲液,淋巴细胞分离液,200目不锈钢网,解剖器械 四、实验步骤 1、杀死老鼠,取出小鼠的脾脏,在pbs缓冲液中冲洗干净。 2、将小鼠脾脏至于200目铜网中,铜网绑定在烧杯上面,剪碎、碾磨,边碾磨边加PBS 冲洗,制得脾细胞悬液。 3、将制得的脾细胞悬液转移到10ml的离心管中,1000r/min 5min离心洗涤,倒掉上清,加入5mlPBS再离心洗涤一次。 4、加入5mlPBS将洗涤的脾脏细胞吹散、悬浮,缓慢加入淋巴细胞分离液上层,细胞悬液与分离液体体积比为1:1。 5、2000r/min离心30min。 6、小心吸取中间层细胞,1000r/min 5min离心洗涤两次。 7、将制得的淋巴细胞滴于玻片,镜检。

小鼠免疫组织及免疫细胞的观察

小鼠免疫组织及免疫细胞的观察 【实验原理】 免疫器官、组织及细胞是机体免疫系统的重要组成部分。中枢免疫器官包括胸腺和骨髓,是T淋巴细胞及其他各类免疫细胞发生、发育和分化的场所,外周免疫器官包括脾胀、淋巴结和粘膜相关淋巴组织是免疫应答的场所。各类免疫细胞直接参与免疫系统对抗原类物质的免疫应答,完善的免疫器官组织结构和正常的免疫细胞种类和数量是机体免疫功能发挥正常的基本条件。 【试剂和器材】 小鼠、棉签、解剖台、平皿、大头针、手术剪子、手术镊子、载玻片、瑞士染液、细胞筛 【操作方法】 1.取一只小鼠,采用颈部脱臼法处死,将小鼠放到解剖台上,沿腹中线剪开皮肤且不破坏腹膜和胸膜,剪开腹膜,打开腹腔和胸腔,观察胸腺所在的位置和形状。 2.分离脾细胞:取出脾胀,去除其周围的脂肪组织,用剪子剪碎脾脏,放入细胞筛中,用载玻片清研脾胀,滴加生理盐水,使脾细胞分散成细胞悬液。 3.脾细胞染色观察:取少量细胞悬液置于载玻片上,与室温晾干,加瑞士染色液甲染色1min,甩掉染液,用瑞士染色液乙染色5min,用自来水冲洗,让染液漂走,置于光学显微镜下观察染色脾细胞。 【结果观察】 小鼠脾细胞瑞士染色镜下观察 【注意事项】 1.正确抓取小鼠,防止被鼠咬伤。 2.脾脏分离完整,清研轻柔。 3.染色时间不宜过长或过短。. 【讨论】 脾脏具有多种重要的生理功能, 参与并调节血液、免疫、内分泌系统的运转, 绝非可有可无;脾脏功能在疾病的不同阶段扮演不同的角色,有时甚至完全相反, 即具有双向性、时向性的特点。 1.脾切除术后暴发性感染全脾切除术后 OPSI 的发生率约为 1 %~

2.4 %。虽然 OPSI的发生率不是很高,但脾脏切除后,在由肺炎球菌导致的感染中毒性休克中, 50 %患者的病情迅速进展, 并最终导致死亡。脾脏为全身最大的淋巴器官, 血循环相当丰富, 且脾脏具有延缓微循环的作用, 有利于清除和吞噬多种抗原, 减轻机体感染的发生。同时脾脏拥有大量重要的免疫细胞及免疫因子, 如 T 细胞、B 细胞、K 细胞、单核巨噬细胞、自然杀伤细胞、杀伤细胞、淋巴因子活化杀伤细胞(LAK 细胞)、树突状细胞。免疫因子包括 tufstin 因子、备解素即P因子、纤维结合蛋白免疫核糖核酸环磷酸鸟苷内源性细胞毒因子、调理素和补体等。而脾切除后,脾脏所产生的免疫因子及免疫细胞消失,血浆中免疫球蛋白IgM、IgG下降,巨噬细胞活性下降,补体旁路活性下降及自身抗体活性增强, 使免疫系统失衡,导致机体易感性增加,甚发生OPSI 。 2.关于tufstin是主要由脾脏产生的促吞噬激素, N ajjar 于 1970 年首先发现。是IgG分子Fc段的一种四肽(T hrLy s -P ro -A rg), 通过激活中性粒细胞发挥吞噬功能。需要在白细胞激肽酶及内羧基肽酶的共同作用下释放。脾切除、镰状红细胞贫血、特发性血小板减少性紫癜、A IDS 及一些腹部疾病可使其水平下降, 脾移植后可使 tufstin 的水平升高。虽然已发现其在免疫系统中的重要作用, 但具体机制仍不十分明了。理论上讲上述情况 tufstin 活性减低的原因包括低γ球蛋白血症、脾脏内中性粒细胞释放减少、白细胞激肽酶活性改变及 tufstin 分子异常。 3.脾脏的抗肿瘤功能机体发生肿瘤的主要原因为免疫系统监控失调, 而脾脏作为人体免疫系统的重要组成部分, 无疑与肿瘤的发生密切相关。临床观察发现, 脾脏不仅自身很少发生原发恶性肿瘤且少有转移瘤出现, 这也表明脾脏具有抗肿瘤的作用。目前大家较公认的观点为脾脏在肿瘤免疫中具有双向性、时向性的特点。表现为在肿瘤早期脾脏具有抗肿瘤作用, 而在晚期则表现为免疫抑制, 促进肿瘤生长。其抗肿瘤作用主要表现在:①可增强巨噬细胞的吞噬功能。②可增强巨噬细胞溶解瘤细胞及其过氧化酶作用。③通过增强 NK 细胞活性发挥抗肿瘤作用。④Chu 认为, tufstin 的抗肿瘤机制不仅通过增加巨噬细胞的肿瘤趋向性、吞噬能力和分泌能力, 更重要的是增加巨噬细胞产生氧自由基—超氧阴离子的能力, 对杀伤肿瘤细胞具有重要意义。关于脾脏边缘带淋巴瘤的研究表明, 肿瘤的发生也与脾脏免疫功能的下降有关。

小鼠缺氧实验实验报告

\篇二:缺氧 缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响 【摘要】目地:本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧地动物模型方法,观察缺氧过程中呼吸地反应及血液色泽和全身一般情况地变化,并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受地影响以及对照实验和控制实验条件重要性.方法:通过复制缺氧动物模型,观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽地变化.通过测定耗氧量和小鼠地存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧地影响.结果:中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧地影响与对照组相比,存活时间和总耗氧率有显著性差异;复制不同原因造成地不同缺氧类型小鼠都表现出了不同地呼吸频率和存活时间地变化.结论:给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率,延长其存活时间().中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间,降低呼吸频率.美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠地作用,已定程度延长小鼠存活时间,延缓呼吸频率地下降. 【关键词】缺氧氯丙嗪总耗氧率亚硝酸盐美兰存活时间 当供应组织地氧不足,或组织利用氧障碍时,机体地机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧.根据缺氧地原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型,不同类型地缺氧,机体地代偿适应性反应和症状表现有所不同. 1.材料和方法 1.实验动物:小白鼠(雌性). 药品:氯丙嗪() 、钠石灰( ),亚硝酸钠( ) 、亚甲基蓝(美蓝)(,)、% ( ) 、( ). 器材:、广口瓶和测耗氧装置. 方法 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响 取只性别相同体重相近地小鼠,准确称取体重,并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组.氯丙嗪组按体重腹腔注射%氯丙嗪,随即安放在冰浴地纱布上 ,使呼吸频率降至次;生理盐水组按体重腹腔注射生理盐水,室温放置-,作为对照.之后将只小鼠分别放入地广口瓶内,连接好测耗氧装置.如右图. 不同原因造成地缺氧 取只性别相同体重相近地小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组.乏氧性缺氧组小鼠放入含有钠石灰地密闭瓶中;一氧化碳中毒组小鼠放入密闭瓶,注入气体. 另取只性别相同体重相近地小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组.亚硝酸纳组小鼠腹腔注射亚硝酸纳,并随即腹腔注射生理盐水;亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射亚硝酸纳后即刻腹腔注射亚甲基蓝 . 2.观察项目 2.1.中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响 记录下小鼠地体重().从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡,分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠地存活时间()、总耗氧量().按以下公式计算出总耗氧率[(·)]: [(·)] ()÷()÷() 2.2.不同原因造成地缺氧 乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组:处理前分别测出两鼠地正常呼吸频率(次).待塞紧瓶塞开始记时后,每隔测一次呼吸频率(次),并观察两鼠地行为以及耳、尾、口唇等地颜色变化,直至小鼠死亡.记录死亡时间. 亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组:处理前分别测出两鼠地正常呼吸频率(次).待注射药品后,每隔测一次呼吸频率(次),并观察两鼠地行为以及耳、尾、口唇等地颜色变化,直至小鼠死亡.记录死亡时间. 将只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色地不同. 3.实验结果 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重 无显著性差异();氯丙嗪组小鼠地耗氧量为± ,生理盐水组小鼠地耗氧量为± ,两者无

免疫常用小鼠

常用小鼠品系 1.BALB/c品系 (1)遗传背景及亚系:1913年Bagg获得的白化株(albino stock)小鼠。1923年以后由Mac Dowell进行了近亲繁殖,在1932年繁殖到26代,最后Snell将其育成。 亚系:BALB/c、BALB/ced、BALB/cJ、BALB/cAnN等。 (2)毛色基因标记:AA、bb、cc。 (3)主要遗传学特征: a.免疫学特征:易患慢性肺炎。初生时摘除胸腺的动物58%可发生侏儒症。在6月龄时,多数个体非常明显地出现高血球蛋白血症。免疫球蛋白绝对量的多少又因饲养条件的不同而有差异。在BALB/c鼠腹腔注射矿物油,可产生多发骨髓瘤,其发生率可高达60%。其发生率可因亚系的不同或饲养条件的不同而有差异。 b.生理学特性:血压较高,可自发高血压症,大部分雄鼠在20月龄时发生脾的淀粉样边。对X线照射敏感性高,LD50为500R,与其它品系比较,缺乏毛的光泽,甚至有脱毛现象。 c.癌发生率:乳癌发生率低,为3%;肾上腺癌、肺癌时有发生。雌鼠的几种癌发生率为:肺癌2%,网状肉瘤8%,血管瘤6%,淋巴肉芽肿4.5%。 d.老化及寿命:老年鼠心脏有某些病变,两性小鼠均有动脉硬化,SPF级雌性小鼠寿命为561日,雄鼠为509日。 (4)饲养方面注意事项:雌鼠繁殖利用周期较长,约1年,是比较容易繁殖的品系。四周龄以后不同窝的雌鼠有相互咬架的现象,故不同窝的鼠不宜同笼饲养。繁殖室26℃-27℃为宜,由于易患肺炎,所以不要与其他品系动物同室饲养。在其他品系的常在菌,对于本品系则可引起发病。 (5)特性和用途:对慢性肺炎敏感,特别对放射线敏感。乳腺肿瘤发病率低,当用乳腺肿瘤病毒(MTV)诱发时发病率增高。对促性腺激素有超排卵反应。两性小鼠均有动脉硬化症。对弓形体易感。补体活性高,对矿物油诱发浆细胞瘤敏感。偶见甲状腺肿瘤。干扰素产量低,对百日咳组织胺易感因子敏感。对以下列病原体敏感:鼠伤寒沙门氏菌 C5、麻疹病毒(中等)、利氏曼原虫、斑点热、立克次氏体和曼氏血吸虫。常用于单克隆抗体研究和生产。 2.C57BL/6品系 (1)遗传背景及亚系:1921年Little用Abbg Lathrop的小鼠株雌鼠57号与雄鼠52号交配,而得C57BL/6。亚系:C57BL/6、C57BL/6J、C57BL/6N等。 (2)毛色基因标记:aa、BB、CC(黑色)。 (3)主要遗传学特征:

三种小鼠实验性高脂血症模型效果的比较分析

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/302267879.html, 三种小鼠实验性高脂血症模型效果的比较分析 作者:哈建利张明军夏涛 来源:《科教导刊》2015年第26期 摘要目的:筛选出一种理想的小鼠高脂血症动物模型造模方法。方法:参考相关文献选取三种小鼠高脂血症动物模型配方并略作调整,制成乳剂给小鼠灌胃,分别在2w、4w、6w时取尾静脉血,测定血清中TG、TC、LDL和HDL含量。结果:三种高脂配方均可不同程度地导致小鼠血清中脂代谢紊乱,形成高血脂动物模型。结论:在20%三磷酸甘油酯和10%胆固 醇的基础上加入3%胆酸钠,灌胃4w就可形成理想的小鼠高脂血症动物模型。 关键词高脂血症小鼠模型分析 中图分类号:R589 ; 文献标识码:A ; ; DOI:10.16400/https://www.wendangku.net/doc/302267879.html,ki.kjdkz.2015.09.078 Comparative Analysis of Three Experimental Rats Hyperlipidemia Models HA Jianli[1], ZHANG Mingjun[1], XIA Tao[2] ([1]Nursing School, Hubei Polytechnic Institute, Xiaogan, Hubei 432000; [2]Teaching & Research Section of Environmental Hygiene, Tongji Medical School, Huazhong University of Science & Technology, Wuhan, Hubei 430030) Abstract Objective: To choose an ideally modeling method of rats hyperlipidemia model. Methods: By referring to relevant documents, choose three experimental rats hyperlipidemia models, make into emulsions to perfuse rats' stomachs, and sample tail vein blood after 2 weeks,4 weeks and 6 weeks separately, to measure TG, TC, LDL and HDL contents in blood serum. Results: The three models result in rat lipid metabolic disorder in different degrees, to form hyperlipidemia models. Conclusions: By adding 3% sodium cholate liquor into 20% triglycerol phosphate and 10% cholesterol, perfuse rats' stomachs for 4 weeks to form an ideal rats hyperlipidemia model. Key words Hyperlipidemia; rat; model; analysis 随着我国经济的不断发展,人们生活水平不断提高,高脂血症(hyperlipidemia)的发病率在我国已呈逐年上升趋势。高脂血症是机体脂代谢紊乱的重要标志,也是动脉粥样硬化、心脏

黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响

黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响 发表时间:2013-12-10T10:07:32.950Z 来源:《医药前沿》2013年11月第31期供稿作者:朱永俸1 石高星1 吴剑平1 李珊珊1 袁婧1 黄立师1 刘 [导读] 长期以来,人类生活在一个充满危险的环境,得以存续的同时,也获得了非凡的免疫力。朱永俸1 石高星1 吴剑平1 李珊珊1 袁婧1 黄立师1 刘佳2(通讯作者) (1长沙医学院2010级生物技术专业湖南长沙 410219) (2长沙医学院生物学教研室湖南长沙 410219) 【摘要】目的探讨黄芪多糖对小鼠的免疫功能的影响。方法连续28天黄芪多糖以4.0,1.0,0.25g/kg浓度给予小鼠灌胃,检测小鼠的胸腺,脾脏指数及小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。结果低浓度组的胸腺指数高于空白组(P=0.017),中浓度组的脾脏指数高于空白组(P=0.002),其他各组差别无统计学意义。各组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、吞噬指数无显著差别(F=2.088,P=0.140)。结论黄芪多糖可能通过提高胸腺和脾脏的功能从而增强免疫力,但对参与非特异免疫的巨噬细胞影响不明显。【关键词】胸腺脾脏指数吞噬能力 【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)31-0254-02 长期以来,人类生活在一个充满危险的环境,得以存续的同时,也获得了非凡的免疫力。免疫力低下的机体易于感染、易于生病;如引发过敏反应、自身免疫病等,因此优化免疫力已经成为了医学研究的热点之一。中药黄芪的使用迄今已有2000多年的历史,有利尿、抗疲劳、抗衰老、抗应激、降压等多方面作用,关于黄芪是否能够增强机体免疫能力尚需研究。黄芪的主要活性成分是黄芪多糖,因此,本实验通过给小鼠连续灌胃黄芪多糖,研究黄芪多糖对小鼠免疫力是否具有提升作用。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 主要试剂和仪器 黄芪多糖(纯度70%,批号:20130310);电子恒温不锈钢水浴锅(上海市南阳仪器有限公司);光学显微镜(MOTIC公司);1%鸡红细胞悬液;6%淀粉肉汤(含0.3%台盼蓝));吉姆萨染液;其他试剂为分析纯。 1.1.2 动物 40只SPF级昆明小鼠,雄性,体重(22±2)g,由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,批号43004700000750,长沙医学院湖南省重点建设学科标准动物室饲养。 1.2 方法 1.2.1 动物处置 实验以4.0,1.0,0.25g/kg浓度设3个剂量组,另设1个对照组,每组10只小鼠,采用灌胃法,对照组给予等量蒸馏水,每天一次,连灌28天,第27、28天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤1ml。第29天,称重后腹腔注射20%鸡红细胞悬液0.5-1ml,轻柔小鼠腹部。30min后,再向腹部内注射0.5ml小鼠生理盐水,轻柔小鼠腹部。3min后,将小鼠以颈部脱位法处死。小鼠剪开腹腔,用不装针头的注射器吸取腹腔液涂片,吉姆萨染色后,检测巨噬细胞吞噬能力。分离脾脏和胸腺,洗净吸干水分,称重。 1.2.2 胸腺和脾脏指数的测定 摘取小鼠的胸腺和脾脏,用滤纸吸干残血后,称重(mg),按公式计算胸腺指数和脾脏指数,即:胸腺指数=胸腺重量/(小鼠体重×10) 脾脏指数=脾脏重量/(小鼠体重×10)(每10 g小鼠体重含有的胸腺或脾mg重量,mg/10 g)1.2.3 巨噬细胞吞噬能力的测定 剪开腹部皮肤,将注射器伸入小鼠腹腔中,吸取腹腔液,把腹腔液滴加在洁净的载玻片上,然后将载玻片置于电子恒温不锈钢水浴锅中,在37℃恒温孵育30分钟。将载玻片取出,用水轻轻的冲洗,去除上清和未粘附在玻片上的细胞在室温下晾干。再用甲醛固定3分钟,晾干后用吉姆萨染色,冲洗多余的染液晾干。在油镜下观察计数100个巨噬细胞,计算出吞噬百分率(吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞所占比率)和吞噬指数(每100个巨噬细胞中吞噬了红细胞个数)。 1.2.4 统计学方法 采用SPSS 19软件进行数据分析处理,数据以`x±s表示。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较方法采用LSD法,P<0.05有统计学意义。 2 结果 2.1黄芪多糖对胸腺指数,脾脏指数的影响 经过28天不同浓度的黄芪多糖灌胃,各组的胸腺指数存在区别(F=3.588,P=0.036),其中低浓度组的胸腺指数高于空白组(P=0.017),其他各组差别无统计学意义。各组的脾脏指数存在区别(F=4.914,P=0.012),其中中浓度组的胸腺指数高于空白组(P=0.002)。 表1 黄芪多糖对小鼠胸腺指数与脾脏指数的影响(x-±s,n=10)

小鼠缺氧模型及其分析

缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素 高伟飞 (浙江中医药大学滨江学院10级临床专业临滨1班4组20102090114) 一、实验目的: 1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用 2.复制几种类型缺氧的模型,观察血液颜色的特点,分析其机制 根据大纲要求: 掌握概念:缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧,紫绀、肠源性紫绀。 熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。 熟悉反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度,动静脉血氧含量差)。 掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制,掌握各型缺氧的特征(血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化)。 二、实验原理: 当组织供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧。不同类型的缺氧,其机体的代偿适应性反应和症状也不同。根据缺氧原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。 影响机体对缺氧耐受性的因素很多,如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。本实验才缺氧的不同环节入手观察呼吸变化及皮肤黏膜的颜色改变。实验通过动物的不同代谢状况、中枢神经系统功能和动物所处环境温度,观察动物的缺氧耐受性。 三、实验对象:小鼠 四、实验材料:电子秤、注射器、钠石灰、广口瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸;生理盐水、美兰亚硝酸钠、氯丙嗪、冰块、量筒等 五、实验方法: 1、取2只小鼠,注射及处理: 1号:亚硝酸钠及美兰0.2ml ,左下腹注射 2号:亚硝酸钠及生理盐水各0.2ml ,左下腹注射 注射完,观察,2号小鼠立即死亡,1号小鼠仍存活;然后处死解剖,剪下一片肝脏组

影响小鼠缺氧耐受性的因素

影响小鼠缺氧耐受性的因素 摘要【目的】复制不同类型的缺氧模型,观察不同类型缺氧时呼吸变化规律和皮肤黏膜颜色的变化特点;观察中枢神经系统功能状态不同、外界环境温度不同对缺氧耐受性的影响;了解临床应用冬眠及低温疗法的意义;掌握对照实验和控制实验条件重要性。【方法】用小白鼠设立对照组和实验组,复制不同缺氧类型的模型,观察小白鼠的呼吸节律、皮肤黏膜的变化,观察不同耐氧耐受性因素的影响。【结果】小鼠缺氧后皮肤粘膜的颜色变青紫色;注射氯丙嗪的小鼠先呼吸变缓慢,活动迟缓,之后呼吸加快;另一只小鼠呼吸急促,活动活跃;之后呼吸逐渐减弱。小鼠A总耗氧量为,小鼠B总耗氧量。小鼠亚硝酸钠中毒后,血液、肝脏颜色变为暗红色;用亚甲蓝解救后的小鼠,血液、肝脏颜色仍为鲜红色。【结论】当动物中枢神经系统功能抑制和降低动物所处的环境温度时,其代谢率会降低,组织细胞耗氧量减少,而增强机体的缺氧耐受性;氯丙嗪能够缓解缺氧,使小鼠存活时间更长;亚甲蓝为还原剂,可抑制小鼠亚硝酸钠中毒反应。 关键词:缺氧类型;缺氧耐受性;氯丙嗪;亚甲蓝 Abstract:【Objective】copy of different types of anoxia model, to observe oxygen to breathe as different types of variation and the changing characteristics of color of skin mucous membrane; Observe different condition of central nervous system function, and the external environment temperature, the influence of different to anoxia tolerance; Understand the clinical application and the significance of hypothermia therapy hibernate; Master control experiment and control experimental conditions importance.【Method】established in mice in the control group and the experimental group, copying, oxygen types of model different mice breathing rhythms observe the changes skin mucous membrane, and observe different factors which influence the oxygen resistance tolerance. 【Aesult】mice after the color of skin and mucosa oxygen variable green purple; The mice injected chlorpromazine breathing become slow, activity first after delay, breathe faster; Another mice shortness of breath activity; After breathing decreased. Mice for A total oxygen consumption , total oxygen consumption mouse B. Mice sodium nitrite, blood and liver after the poisoning color into wine; After with methylene blue rescue the mice, blood and liver are still bright red color.【Conclusion】when animals central nervous system function suppression and reduce the environmental temperature in animal and their metabolic rate can be reduced, tissue cell oxygen consumption reduced and increase the body's anoxia tolerance; Chlorpromazine can alleviate hypoxia, make mice live longer; Methylene blue as reducing agent, can restrain sodium nitrite toxic reaction in mice. Keyword:Anoxia type; Anoxia tolerance; Chlorpromazine; Methylene blue 当供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧。缺氧是多种疾病共有的病理过程。许多原因都能使机体发生缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。 影响机体对组织缺氧耐受性的因素很多,如年龄、机体的代谢、功能状况以及锻炼适应等。当动物中枢神经系统功能抑制和降低动物所处的环境温度时,其代谢率降低,组织细胞耗氧量减少,而增强机体的缺氧耐受性,可延长其死亡时间。 本实验从缺氧的不同环节入手通过密闭装置、注射亚硝酸钠等复制小鼠乏氧性缺氧、血

高血脂动物模型评价及进展

高血脂动物模型评价及进展 高脂血症是动脉粥样硬化和冠心病发病的最重要的因素之一,寻找高脂血症的发病原因,探求其治疗方法已经成了医药学界甚为关注的问题,而选择理想的高脂血症动物模型是开展相关实验、研究脂质代谢紊乱的关键,目前,已应用大鼠、豚鼠、家兔、小鼠、金黄地鼠等实验动物建立了高脂血症动物模型。目前高脂血症动物模型主要有先天性、转基因和化学物质诱导三种,前2种由于来源困难和价格昂贵,限制了其应用,化学物质诱导应用最为广泛,它主要包括两类,一类是利用高脂饮食饲喂或灌胃一段时间后形成的,另一类是利用化学试剂通过静脉或腹腔注射一次形成的,本文将按照不同种类的动物,对采用高脂饮食饲喂或灌胃诱导高脂血症的模型进行综述。 1大鼠 大鼠是目前国内研究人类脂质代谢使用最多的实验动物,其优点是易于饲养管理,抵抗力较强,采样方便,血量丰富,有着明确的遗传背景,便于一次进行较多指标的检测,并且能够明显地反映出实验处理的影响,但是,在国外高脂血症动物模型的研究中,大鼠的使用呈逐渐减少的趋势。 人大鼠 HDL 30 80 LDL 60 10 LDL/HDL 2 0.13 VLDL 10 大鼠血浆中HDL是血浆胆固醇的主要载体,而人类的血浆胆固醇的主要载体是LDL,物种差别比较大,而且,大鼠血浆中CETP(胆固醇酯转运蛋白)的活性仅为人类的14%,此外,大鼠具有对抗动脉粥样硬化形成的能力,因此,在复制高血脂动物模型时,大鼠的使用在减少。 大鼠缺少胆囊,加入胆盐的高脂饲料,会促进大鼠有效吸收胆固醇与脂肪;饲料配方中胆固醇含量与血清TC水平呈正相关,猪油含量的改变会影响TG水平,可见高脂饲料配方中胆固醇和猪油等物质是必不可少的,但猪油含量过高饲料不易成形,且油脂含量过高动物会产生消化不良现象;在部分造模方法中加入一些抗甲状腺素分泌类药物,以降低胆固醇向胆汁酸转化,但是由于该类药物普遍存在对肝脏及淋巴结损害,容易造成肝脏及淋巴结损伤,增加大鼠生存负荷,降低生活质量,并且不符合正常代谢过程,又容易造成模型动物死亡,因此,本

缺氧实验最终报告

缺氧实验最终报告

昆明医科大学机能学实验报告 实验日期:2015年9月17日 带教教师: 小组成员: 专业班级:临床医学二大班 缺氧实验 一、实验目的 1、复制不同病因导致小鼠缺氧的模型,了解乏氧性,血液性,组织中毒性缺氧的分类。 2、观察缺氧对呼吸系统,中枢神系统的影响,以及血液颜色变化。 3、了解影响缺氧耐受性的因素。 二、实验原理 批阅人 成绩

丁:放入缺氧装置,40℃水浴锅放入装小鼠缺氧瓶,记录死亡时间,活动状态以及耗氧量 ②一氧化碳中毒性缺氧(小鼠一只):检查装置气密性,连接一氧化碳发生装置,将一只小鼠放入广口瓶,然后与一氧化碳发生装置连接;先取甲酸 1.5ml 放入试管内,再加入浓硫酸1ml。连接加热试管(用酒精的间断加热,加速CO产生,不可使液体沸腾)观察记录一般状况* 观察记录如下:死亡(记录时间),计算小鼠耗氧率(R)* 3、亚硝酸中毒缺氧(小鼠一只) 观察记录一般状况 小鼠:腹腔注射*5%亚硝酸钠0.3ml 观察记录如下:死亡(记录时间),计算小鼠耗氧率(R)* 4、取出甲鼠及2,3实验小鼠尸体部分肝叶进行对比,记录颜色。 五、实验结果

表1.各型缺氧对机体的影响 组别 呼吸频率(次/10秒) 存活 时间 (分 ) 中枢 神经 系统 变化 肝 脏、 血 液 颜 色 皮肤 粘膜 颜色0 1,3,5,7, 9,… 乏氧性缺氧(NS 组)10、19、25、 29、30、逐 渐减慢 10.7 5 正 常, 兴 奋, 抑 制, 死亡 暗 红 紫 绀 一氧化碳中毒20、14、15、 20、15,逐 渐减慢 12 极兴 奋, 兴 奋, 抑 制, 嗜 樱 桃 红 粉红

小鼠缺氧实验指导(2016)

实验三实验性缺氧 【实验目的】 1.掌握各型(低张性和血液性)缺氧动物模型复制的方法,了解缺氧的分类。 2.观察不同类型缺氧时机体的变化(活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色)及存活时间; 3.观察不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响,理解条件因素在缺氧发病中的重要性。 4.掌握各型缺氧的发生机制及特点。 5.了解常见血液性缺氧的解救措施。 【实验原理】 导致低张性缺氧最常见的原因包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。本实验将小鼠放置于加入钠石灰的密闭广口瓶内,随着小鼠的呼吸消耗,广口瓶中氧气含量逐渐降低,模拟外环境氧分压过低引起的低张性缺氧。观察低张性缺氧时机体的变化(活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色)及存活时间。 影响机体对缺氧耐受性的因素很多,除缺氧时间、速度、类型和程度外,还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。本实验通过应用药物改变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠,观察不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。 血液性缺氧是由于血红蛋白的数量减少或性质改变从而降低血液携氧能力或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。本实验将复制两种常见血液性缺氧模型:一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。一氧化碳可与血红蛋白结合,形成碳氧血红蛋白而失去结合氧的能力,从而导致血液携氧能力降低而引起机体缺氧。亚硝酸钠是强氧化剂,可使血红蛋白分子内二价Fe2+氧化成为三价Fe3+而形成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白同样失去携氧能力而引起血液性缺氧。【实验对象】 成年小鼠(性别、年龄、体重近似、雌雄不拘)、新生小鼠 【实验药品和器材】 3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚甲兰、浓硫酸、草酸。 缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置(图1)、1 ml注射器、5 ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科镊、小烧杯、酒精灯、火柴、CO发生装置(图2)、气囊袋。

小鼠缺氧实验实验报告

小鼠缺氧实验实验报告 篇一:小鼠实验性缺氧实验报告 \ 篇二:小鼠缺氧模型及其分析 课程名称:机能实验学教研室:病理生理学教研室任课教师:张彩华授课章节:缺氧与普鲁卡因对神经干的作用授课专业和年级:2005级医疗授课学时:8学时 授课时间:2007年3-7月 实验题目:缺氧 实验目的:1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用 2.复制几种类型缺氧的模型,观察血液颜色的特点,分析其机制根据大纲要求: 掌握概念:缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧,紫 绀、肠源性紫绀。 熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。 熟悉氧代谢的四个环节(摄取、携带、运输和利用)及反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度,动静脉血氧含量差)。 掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制,掌握各型缺氧的特征(血氧变化的 特点和皮肤黏膜颜色变化)。 实验原理: 1. 现代病因学认为,疾病是由于原因和条件综合作用的结果。 原因是引起疾病所不可缺

少的因素,并且往往决定疾病的特异性,它与相应的疾病有着必然的因果关系;而条件则不是疾病所不可缺少的因素,它往往是通过作用于致病因子或改变机体反应性,对疾病的发生发展起促进或阻碍作用。 2. 缺氧是指任何原因引起的供氧不足或利用氧障碍引起组织细胞发生功能代 谢和形态 结构异常变化的病理过程。根据不同的病因,可以把缺氧分为四种类型:低张 性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧、组织性缺氧。不同类型的缺氧具有不同的病因以及不同的血液颜色和血氧变化特点。 实验对象:小鼠 实验器械和药品:电子秤、注射器、钠石灰、小鼠缺氧瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸、苦味酸、一氧化碳包;生理盐水、1.25%尼可刹米、2%水合氯醛、5%亚硝酸钠、0.1%氰化钾 实验方法: 一、原因和条件作用的分析 1. 取3只小鼠称重,编号1、2、3,用苦味酸做好标记 2. 注射及处理: 1号:生理盐水,0.2ml/10g ,腹腔注射 2号:1.25%尼可刹米,0.2ml/10g ,腹腔注射 3号:2%水合氯醛, 0.2ml/10g ,腹腔注射 给药后分别放入三个缺氧瓶中,密闭计时,观察动物活动情况至死亡。 3. 用测耗氧量装置测定总耗氧量(A) 4. 计算耗氧率(R):根据小鼠体重(W),存活时间(t),总耗氧量(A)计算 小鼠耗氧率R(ml/min/g) =A/(W*t.) 二、几种类型的缺氧 1. 取3只小鼠称重,编号4、5、6,用苦味酸做好标记 2. 注射及处理:

不同类型缺氧小鼠观察.

不同类型缺氧小鼠观察 2013-3-25 ].[实验原理] 1.乏氧性缺氧 2.血液性缺氧 3.组织中毒性缺氧

J[实验目的] 1.学习各型缺氧动物模型复制的方法,了解缺 氧的分类。 2.观察不同类型缺氧中机体的变化。 3.掌握各类型缺氧的概念、发生机制及特点。 2013-3-25 1 [实验动物] ■小白鼠4只 2013-3-25

2013-3-25 器材小白鼠缺氧瓶(250 ml 带塞锥形瓶或广 口瓶)、一氧化碳发生装置一套.刻度吸管(2ml. 5ml ), 1ml 注射器二具、酒精灯、6号针头二颗、 手术剪、组织银、眼科镶各一把。 2.试剂和药品 钠石灰(NaOHCaO ).甲酸.浓 硫酸、氢氧化钠、1%亚硝酸钠溶液 2013-3-25 1. 动物一般状态、活动情形等 2. 呼吸频率(次/10s ).深度 3. 皮肤(口唇)、血液颜色 4. 存活时间 实验材料] 观察指标]

[实验步骤] 、正常对照组 1-取正常小鼠一只,观察动物的的各项指标. 2.处死动物后立即从眶静脉取血2滴于装有7ml蒸馆水的试管内混匀. 观察其 颜色。打开胸腹腔,观察其内脏颜色,并与其他类型的缺氧小鼠比较。 2013-3-25 ____________________________ 乏氧性缺氧 "(1)取钠石灰少许(约5g)及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般悄况、呼吸.皮肤与口唇颜色,然后塞紧瓶塞,记录时间。以后每3min重复观察上述指标一次(如有其它变化则随时记录),直到动物快死亡时从眶静脉取血2滴于装有7ml蒸憎水的试管内混匀,观察其颜色。 (2)取出动物尸体,做好记号,待以后解剖。 2013-3-25

小鼠缺氧模型及其分析

课程名称:机能实验学教研室:病理生理学教研室任课教师:张彩华 授课章节:缺氧与普鲁卡因对神经干的作用授课专业和年级:2005级医疗 授课学时:8学时授课时间:2007年3-7月 实验题目:缺氧 实验目的:1.观察原因和条件在疾病发生发展中的作用 2.复制几种类型缺氧的模型,观察血液颜色的特点,分析其机制 根据大纲要求: 掌握概念:缺氧、低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧,紫绀、肠源性紫绀。 熟悉并理解原因和条件在疾病发生发展中的作用。 熟悉氧代谢的四个环节(摄取、携带、运输和利用)及反映血氧情况的一些指标(氧分压、氧含量、氧容量、氧饱和度,动静脉血氧含量差)。 掌握各型缺氧发生的原因及主要发病机制,掌握各型缺氧的特征(血氧变化的特点和皮肤黏膜颜色变化)。 实验原理: 1.现代病因学认为,疾病是由于原因和条件综合作用的结果。原因是引起疾病所不可缺 少的因素,并且往往决定疾病的特异性,它与相应的疾病有着必然的因果关系;而条件则不是疾病所不可缺少的因素,它往往是通过作用于致病因子或改变机体反应性,对疾病的发生发展起促进或阻碍作用。 2.缺氧是指任何原因引起的供氧不足或利用氧障碍引起组织细胞发生功能代谢和形态 结构异常变化的病理过程。根据不同的病因,可以把缺氧分为四种类型:低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧、组织性缺氧。不同类型的缺氧具有不同的病因以及不同的血液颜色和血氧变化特点。 实验对象:小鼠 实验器械和药品:电子秤、注射器、钠石灰、小鼠缺氧瓶、测耗氧量装置、剪刀、镊子、滤纸、苦味酸、一氧化碳包;生理盐水、1.25%尼可刹米、2%水合氯醛、5%亚硝酸钠、0.1%氰化钾 实验方法: 一、原因和条件作用的分析 1.取3只小鼠称重,编号1、2、3,用苦味酸做好标记 2.注射及处理: 1号:生理盐水,0.2ml/10g ,腹腔注射 2号:1.25%尼可刹米,0.2ml/10g ,腹腔注射 3号:2%水合氯醛,0.2ml/10g ,腹腔注射 给药后分别放入三个缺氧瓶中,密闭计时,观察动物活动情况至死亡。 3.用测耗氧量装置测定总耗氧量(A) 4.计算耗氧率(R):根据小鼠体重(W),存活时间(t),总耗氧量(A)计算 小鼠耗氧率R(ml/min/g) =A/(W*t.)

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