第五章黄酮类化合物习题
第五章黄酮类化合物
[学习要求]
掌握1、黄酮类化合物的主要结构类型
2、黄酮类化合物的理化性质和显色反应
3、黄酮类化合物常用的提取和分离方法
4、色谱法和紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用
熟悉 1、黄酮类化合物苷中常见的单糖、二糖和三糖
2、一些有代表性的黄酮类化合物的生物活性
了解1、氢核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用
2、碳核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用
[重点内容]
1、黄酮类化合物的基本结构类型：黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、
二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类、查耳酮类、二氢查耳
酮类、橙酮类、黄烷-3-醇、黄烷-3，4-二醇、花色素类、双苯吡
酮类和高异黄酮类。
2、黄酮类化合物的理化性质：①黄酮类化合物多为结晶性固体，少
数为无定形粉末，具有交叉共轭体系的黄酮类化合物多具有颜色；
②黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态不同而有很大差异，
黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，难溶于水，而二氢黄
酮及二氢黄酮醇等，因系非平面性分子，溶解度稍大；③黄酮类
化合物分子中多具有酚羟基，故显酸性；④ -吡喃环上的1-氧原
子具有未共用的电子对，故表现微弱的碱性。
3、黄酮类化合物的显色反应：①还原反应：盐酸-镁粉（或锌粉）反
应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。四氢硼钠（NaBH4）
反应是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂；②金属盐
类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中常具有3-羟基4-羰基、
5-羟基4-羰基和邻二酚羟基的结构单元，故常可与铝盐、铅盐、
锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物；③硼酸显色反应：黄
酮类化合物分子中当具有3-羟基4-羰基和5-羟基4-羰基结构时，
在无机酸或有机酸存在条件下，可与硼酸反应生成亮黄色；④碱性试剂显色反应：用碱性试剂处理，观察颜色变化，对于鉴别黄酮类化合物有一定意义。
4、黄酮类化合物的提取：①黄酮苷类以及极性稍大的苷元一般可用
丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取，一些多糖苷类则可以用沸水提取；②对得到的粗提取物可进行精制处理的常用方法有：溶剂萃取法、碱提取酸沉淀法和炭粉吸附法。
5、黄酮类化合物的分离：①柱色谱法：硅胶柱色谱主要适于分离异
黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化或乙醚化的黄酮及黄酮醇类。聚酰胺柱色谱是分离黄酮类化合物较为理想的吸附剂，其吸附强度主要取决于黄酮类化合物的分子结构类型、羟基的数目与位置。葡聚糖凝胶柱色谱对黄酮类化合物有很好的分离效果，分离游离黄酮时，主要靠吸附作用，其吸附程度取决于游离酚羟基的数目，但分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用；②梯度PH值萃取法：根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH 及4%NaOH溶液萃取，来达到分离的目的；③根据分子中某些特定官能团进行分离：黄酮类化合物分子中常具有3-羟基4-羰基、5-羟基4-羰基和邻二酚羟基的结构单元，故可以用一些沉淀试剂使之沉淀，来达到分离的目的。
6、黄酮类化合物的结构鉴定：①色谱法：纸色谱（PPC）适用于分
离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物，根据其分离原理的不同，展开剂的种类也不相同。硅胶薄层色谱：此色谱法用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物，效果较好。聚酰胺薄层色谱：此色谱法特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类，由于聚酰胺对黄酮类化合物吸附能力较强，因而展开剂需要较强的极性；
②紫外及可见光谱法：此法是鉴定黄酮类化合物结构的一种重要
手段，一般程序为：首先测定样品在甲醇溶液中的UV光谱，其次，测定样品在甲醇溶液中加入各种诊断试剂后得到的UV及可
见光谱，常用的诊断试剂有甲醇钠（NaOMe）、醋酸钠（NaOAc）、醋酸钠／硼酸（NaOAc／H3BO3）、三氯化铝（AlCl3）及三氯化铝／盐酸（AlCl3／HCl）等，此法对于确定黄酮及黄酮醇类化合物、异黄酮类化合物、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物、查耳酮和橙酮查类化合物有无羟基取代及羟基取代的位置，有重要的意义。
[习题]
一、名词解释
1、黄酮类化合物
2、碳苷
3、四氢硼钠反应
4、盐酸-镁粉反应
5、锆-枸橼酸反应
6、RDA裂解
7、Wessely-Moser重排
8、pH梯度萃取法
9、插烯酸
二、填空题
1、黄酮类化合物是指含有（）骨架的一类成分。
2、确定黄酮化合物结构具有5-OH的方法有（）、（）、（）。
3、黄酮类化合物因其结构的不同而在水中的溶解度不同。其中（）和（）等系非平面性分子，水中溶解度较大；( )和( )等系平面性分子，在水中溶解度较小；( )虽也具有平面性结构，但因以离子形式存在，亲水性最强，水溶度最大。
4、对黄酮醇类化合物和二氢黄酮醇类化合物来说，可用（）显色反应进行区分。
5、下列化合物混合在一起，现用Sephadex-LH20柱色谱进行分离，请写明它们的流出顺序为：( )＞( )＞( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )
O
HO
OH
OH
O
OH
O
HO
OH
OH
O
OH
O
gal
OH
rha
A B
O HO
OH
OH
O
OH
OH
O
HO
OH
OH
O
OH
OH
C D
O
HO
OH
OH
O
O
O
OH
OH
O
O
gal
glc
rha
E F
6、花青素类化合物的颜色随pH不同而不同，一般呈在p H＜7的条件下呈现（）色，在p H为8.5的条件下呈现（）色，在p H＞8.5的条件下呈现（）色。
7、有下面一组化合物，请写明其酸性强弱的先后顺序为( ) ＞( )＞( )＞( )。
O
HO
OH
OCH3
O
OH
O
H3CO
OH
OCH3
O
OH
OH
A B
O
HO
OH
OH
O
OH
O
H3CO
OH
OCH3
O
O
Glc
C D
8、有下列四个化合物，请比较它们酸性的强弱，( ) ＞( )＞( )＞( )。
O
HO OH
O
O
HO OH
O
A B
O
HO
OH
O
OH
O
HO OH
O
OH
C D
9、有下列四个化合物，请比较它们酸性的强弱，( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )。
OH
HO
OH
O
OH
OH
OH
O
OH OH
A B
OH
HO
OH
O
OH
OH
OH
O
OH OH
C D
10、用硅胶柱色谱分离下列一组化合物，用CHCl 3-MeOH 进行洗脱，这四个化合物保留时间的大小顺序为：( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )。
O
HO
OH
O OH
OH
O
O
OH
O
OH
Glc
A B
O
HO
OCH 3
O OH
OCH 3O
O
OH OH O OH
Glc
C D
11、用葡聚糖凝胶Sephadex-LH20分离黄酮苷化合物时，分离主要原理是( )，当用此凝胶分离黄酮苷元时，则主要是依靠( )作用，这种作用强度大小取决于( )。
12、纸色谱法是分离和鉴定黄酮苷类化合物的一种常用的方法，常采用双向展开方式，第一向展开剂常采用( )性溶剂，分离原理为( )，第二向展开剂常选用( )溶液，主要分离原理为( )。 13、有下列四种黄酮类化合物A 、B 、C 、D ，
O
O
HO
OH
OH
O
O
Rham-O
OH
OH
A B
O O
HO
OH
OH
O-Glc
O
O
Rham-O
OH
OH
O-Glc
C D
请比较其酸性和极性的大小：
酸性（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ） 极性（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）
14、有下列四种黄酮类化合物A 、B 、C 、D ，请比较这四种化合物在如下三种色谱中Rf 值大小顺序：
O
O
Rham-O
OH
OH
O-Glc-Rham
O
O
HO
OH
O-Glc-Rham
A B
O
O
HO
OH
O-Glc
O
O
HO
OH
OH
C D
① 硅胶薄层色谱，用CHCl 3-MeOH 4:1展开，Rf 值（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）；
② 聚酰胺层色谱，用60%甲醇水展开，Rf 值（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）；
③ 纸色谱，用8%醋酸水展开，Rf 值（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）； 15、用聚酰胺柱色谱分离下列化合物，以不同浓度的乙醇－水进行梯度洗脱，流出柱外的先后顺序为：（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）。
O
O
HO
OH
OH
OH
OH
O
O
Rham- Glc-O
OH
OH
A B
O
O
Glc-O
OH
OH
OH
O
O
OH
HO
C D 三、判断题
1、黄酮类化合物都是平面结构。
2、多数黄酮苷元具有旋光性，而黄酮苷则无。
3、黄酮分子中引入7，4’-位羟基，促进电子位移和重排，使其颜色加深。
4、硅胶、聚酰胺和Sephadex G 是分离黄酮类化合物常用的柱色谱填料。
5、用Sephadex-LH20分离黄酮苷时，主要靠分子筛作用。
6、聚酰胺对黄酮类化合物通常在水溶液中表现出最强的吸附能力。
7、黄酮碳苷在常规酸水条件下可以被水解。
8、硼氢化钠显色反应可以用来区分黄酮和二氢黄酮类化合物。 9、黄酮与二氢黄酮相比，黄酮在水溶液中的溶解性更大。 10、碱性氧化铝可以用来分离黄酮类化合物。 四、选择题
（一）A 型题（单项选择题）
1、pH 梯度法适合于下列______类化合物的分离。
A ．黄酮
B ．强心苷
C ．挥发油
D ．香豆素 2、下列化合物_______的醇溶液与NaBH 4反应，生成紫~紫红色。
A ．黄酮醇
B ．黄酮
C ．二氢黄酮类
D ．异黄酮类 3、在5%NaHCO 3水溶液中溶解度最大的化合物是______。
A ．3，5，7-三羟基黄酮
B ． 7，4′-二羟基黄酮
C ．3，6，-二羟基花色素
D ． 2′–OH 查耳酮
4、下列黄酮类化合物中的不同位置的取代羟基，酸性最强的是_______。
A ． 6-OH
B ．3-OH
C ． 5-OH
D ．7-OH
5、某黄酮类化合物的紫外吸收光谱中，加入诊断试剂NaOAc（未熔融）后，带
Ⅱ红移10nm，说明该化合物存在_______基团。
A．5-OH B．7-OH C．4′-OH D．7-OH和4′-OH
6、黄酮类化合物的紫外吸收光谱中，加入诊断试剂AlCl3后的谱图与AlCl3/HCl
谱图完全一致，则示B环结构为______。
A．存在间二酚羟基B．只存在4′-OH
C．不存在邻二酚羟基D．存在邻二酚羟基
7、应用Sephadex-LH20分离下列化合物，最先洗脱出来的化合物为______。
A．黄酮二糖苷B．黄酮单糖苷
C．黄酮苷元D．黄酮三糖苷
8、下列苷类化合物，不能被常规酸催化水解的是______。
A．黄酮碳苷B．香豆素酚苷
C．蒽醌酚苷D．人参皂苷
9、下列化合物，在紫外光谱中，350nm以上没有吸收峰的化合物是______。
O
HO
OH
OH
O
OH
OH
OH
OH
O
OH
HO
A B
O
O
CH OH
HO
OH
O
HO
OH
OH
O
OH
OH
C D
10、用活性炭对黄酮类化合物进行纯化，在下列______溶剂中的吸附力最强。
A．8%的酚水B．8%的醇水
C．醇D．水
11、黄酮结构中，三氯化铝与下列______基团与形成的络合物最稳定。
A．黄酮5-OH B．二氢黄酮5-OH
C．黄酮醇3-OH D．邻二酚羟基
12、聚酰胺对黄酮类化合物发生最强吸附作用时，应在______中。
A．85%乙醇B．酸水
C．水D．15%乙醇
13、黄酮类化合物的紫外光谱，在甲醇溶液中加入NaOMe诊断试剂，峰带Ⅰ红
移动40-60nm，强度不变或增强说明有______。
A．无4’-OH B．无3-OH
C．有4’-OH D．有4’-OH和3-OH
14、用聚酰胺色谱分离黄酮类化合物，它的原理是______。
A．离子交换B．分子筛
C．分配D．氢键缔合
15、与四氢硼钠反应呈阳性的为______。
A．黄酮醇B．二氢黄酮
C．橙酮D．异黄酮
16、在紫外光谱法中，用来判断7-OH 的诊断试剂是______
A．醋酸钠－硼酸B．未熔融醋酸钠
C．甲醇钠D．熔融醋酸钠
（二）X型题（多项选择题）
1、盐酸镁粉反应阳性为______。
A．黄酮醇B．查耳酮
C．橙酮D．异黄酮
E．二氢黄酮
2、黄酮类化合物的结构分类主要依据______
A．三碳链的氧化程度B．是否连接糖链
C．植物来源D．三碳链是否成环
E．B环的位置
3、下列化合物中，具有旋光性的黄酮类化合物是______。
A．黄烷醇B．异黄酮
C．查耳酮D．橙酮
E．二氢黄酮
4、下列化合物中难溶解于水的是______。
A．黄酮醇B．二氢黄酮醇
C．查耳酮D．黄酮
E．二氢黄酮
5、中药槐米中的主要成分______
A．可用水进行重结晶B．能发生Molish反应
C．可用碱溶解酸沉法提取D．槲皮素
E．芦丁
6、分离黄酮类化合物常用的方法有______
A．水蒸气蒸馏法B．生华法
C．聚酰胺色谱法D．葡聚糖凝胶色谱
E．硅胶色谱法
7、3，5，3’，4’-四羟基二氢黄酮可发生下列哪些反应______。
A．Molish反应B．NaBH4反应
C．SrCl2反应D．ZrOCl2-枸橼酸反应
E．HCl-Mg反应
8、芦丁可发生下列哪些反应______。
A．HCl-Mg反应B．ZrOCl2-枸橼酸反应
C．Molish反应D．SrCl2反应
E．NaBH4反应
9、能溶解于5%Na2CO3溶液的黄酮可能具有______。
A．5-OH B．3-OH
C．7，4’-OH D．7-OH
E．4’-OH
10、在紫外光谱法中，用来判断黄酮、黄酮醇有无邻二酚羟基的诊断试剂是
A．甲醇钠B．醋酸钠/硼酸
C．醋酸钠D．AlCl3/HCl
E．SrCl2
五、写出下列黄酮类化合物的二级结构名称
O
O OH OH O O OH OH HO O O OCH 3OH HO OH O OH OCH 3HO OCH 3O OCH 3HO OH OCH 3O O HO OH OH (1)(2)(3)(4)(5)(6) O OH
OH
O
O OH
OH
HO
O
O OCH 3OH
HO
OH O OH
OCH 3HO
OCH 3O OCH 3HO
OH
OCH 3O O HO OH OH (1)(2)(3)(4)(5)
(6)
O
OH
OH
O
O OH
OH
HO
O
O OCH 3OH
HO
OH O OH
OCH 3HO
OCH 3
O OCH 3HO
OH
OCH 3O O HO OH OH (1)
(2)(3)
(4)(5)
(6)
O OH OH O O OH OH HO O O OCH
3OH HO OH O OH OCH 3
HO OCH 3
O OCH 3HO OH OCH 3O O HO OH OH (1)(2)(3)(4)(5)(6) O OH
OH O
O OH
OH HO
O
O
OCH 3OH HO
OH
O
OH OCH 3HO
OCH 3O OCH 3HO
OH
OCH 3O O HO OH OH (1)
(2)(3)(4)(5)
(6)
O
O
OCH 3
HO OCH 3
O O H 3CO OH OCH 3
OCH 3
O O H 3CO OH OCH 3OCH 3
OH O OCH 3
OH OH O
O C H OCH 3
OH (7)
(8)
(9)(10)
O
OCH 3
HO
OCH 3O
O
H 3CO
OH OCH 3
OCH 3
O
O
H 3CO
OH OCH 3
OCH 3
OH
O OCH 3
OH
OH O
O C H
OCH 3
OH (7)
(8)
(9)(10)
①
② ③
④ ⑤
⑥ ⑦
⑧
⑨
⑩
六、用适当方法区分下列化合物
1、用化学法
O
HO
OH
O OH OH
OH
OH
O
OH
HO
OH
A B
2、用化学方法
O
H3CO
OH
O
OH
O
H3CO
OH
O
OH
A B
O OH
H3CO
OH
C
3、用化学方法
O
HO
O OH
OCH3
O
HO
OH
OH
O
OCH3
A B
O
HO
OH
O
OH
C
4、用化学方法
O
HO
OH
O
O
O
OH
O
HO
OH
O
OH
OH
A B
O
HO
OH
OH O
OH
C
5、用化学方法
O H3CO
OH
OCH3
O
OCH3
OH OCH3
O
H3CO
OH
OCH3
O
OCH3
O-Glc OCH3
A B
O
H3CO
OH
O
OH
O
H3CO
OH
OH
O
OH
OH
C D
6、用化学方法
O
O
HO OH
OCH 3
OH
O
O
HO
OH
OCH 3
OH
A B
7、用紫外光谱法
O
O
HO
OH
3
O
O
H 3CO
OH
OH
A B
七、问答题
1、黄酮类化合物根据中央三碳链的氧化程度、2-位是否有羟基、B 环连接位置和三碳链是否构成环状，可将主要的天然黄酮类化合物进行分类，请说明这些二级结构分类的名称？
2、已知一个黄酮类化合物，先确定B 环3’，4’位有取代，并可确定3’，4’位其中之一取代基为羟基，另一取代基可能为-OH 或-OMe ，请用紫外光谱法说明另一取代基是-OH 还是-OMe ？
3、用Sephadex-LH20凝胶柱色谱，分离下列黄酮类化合物，以甲醇-水溶及系统进行洗脱，请写明流出柱的先后顺序，并说明其原理？
O
O
Glc-O OH
O-Glc-Rham
O
O
HO
OH
OH
O-Glc-Rham
A B
O
O
HO OH
O-Glc
O
O
HO
OH
OH
OH
C D
O
O
HO
OH
OH
OH
O
O
HO
OH
OH
OCH 3
E F
4、梯度pH 萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离，黄酮苷元混合成份进行萃取分离时，分别用哪几种碱性溶液萃取？并且这几种萃取液又能分别得到什么样的羟基取代黄酮？
5、用聚酰胺柱色谱分离下列黄酮和黄酮苷类化合物，以乙醇-水溶及系统进行洗脱，请写明流出柱的先后顺序，并说明其原理？
O O
Rham- Glc-O OH
OH
O
O
Glc-O
OH
OH
A B
O O
HO
OGlc
O
O
HO
OH
OH
OH
C D
O
O
Rham- Glc-O
OH
OH
O
O
HO OH
OH
OH
OH
E F
[习题答案]
一、名词解释（略） 二、填空题
1、C 6-C 3-C 6；
2、硼酸络合，锆-枸橼酸反应，紫外光谱AlCl 3/HCl ；
3、二氢黄酮，二氢黄酮醇，黄酮，黄酮醇，花色素；
4、硼氢化钠；
5、FBEADC ；
6、红色，紫色，蓝色；
7、CABD ；
8、DCBA ；
9、ABCD ；10、DBAC ；11、分子筛作用，吸附作用，羟基的数目和位置；12、醇性，分配，水性，吸附；13、ACBD ，DCBA ；14、DCBA ，ABCD ，DCBA ；15、BCDA ； 三、判断题
1.×
2.×
3.√
4.√
5.√
6.√
7.×
8.√
9.× 10.×
四、选择题
（一）A 型题（单项选择题）
1.A
2.C
3.B
4.D
5.B
6.C
7.D
8.A
9.A 10.D 11.A 12.C 13.C 14.D 15.B 16.B
（二）X型题（多项选择题）
1.AE
2.ADE
3.AE
4.ACD
5.ABCE
6.CDE
7.BCDE
8.ACD 9.CDE 10.BD
五、写出下列黄酮类化合物的二级结构名称
①黄酮；②二氢黄酮；③二氢黄酮醇；④异黄酮；⑤黄烷-3，4-二醇；⑥黄烷-3 -
醇；⑦黄酮醇；⑧橙酮；⑨二氢异黄酮；⑩查耳酮；
六、用适当方法区分下列化合物
1、盐酸-镁粉反应：A（+），B（-）；
2、硼氢化钠反应：B（+），A（-），C（-）；
锆-枸橼酸反应：A（-），C（+）；3、硼氢化钠反应：B（+），A（-），C（-）；
盐酸-镁粉反应：A（-），B（+）；4、Labat反应：A（+），B（-），C（-）；硼氢
化钠反应：B（-），C（+）；5、硼氢化钠反应：D（+），A（-），B（-），C（-）；
锆-枸橼酸反应：A（+），B（-），C（-）；Molish反应：B（+），C（-）；6、锆-
枸橼酸反应：A（-），B（+）；7、UV光谱：加NaOMe，带Ⅰ红移40-60nm为A；
加NaOAc，带Ⅱ红移5-20nm为B；
七、问答题（略）
植物提取物抗氧化成分及研究进展
植物提取物抗氧化原理及成分研究 抗氧化是抗氧化自由基的简称。因为人体常与外界接触，平时的呼吸、外界污染、放射线照射等因素会导致人体内产生自由基，过量的自由基会导致人体癌症、衰老和其它疾病，而抗氧化自由基（以下简称“抗氧化”）可以有效克服这些危害。因此，抗氧化已成为保健品和化妆品市场的主要研究课题之一。 本文从多种类植物提取物抗氧化成分及其原理出发，阐述了各界近年来利用植物对抗自由基的研究进展。 一、植物提取物抗氧化原理 不同的植物提取的有效成分不尽相同，同样，抗氧化作用的植物提取物也有很多不同成分，其作用机理也有所区别，西安源森生物从以下几方面进行了总结阐述： （一）作用于与自由基有关的酶 与自由基有关的酶类分为氧化酶与抗氧化酶两类，植物提取物的抗氧化作用体现在抑制相关氧化酶的活性和增强抗氧化酶活性两方面。 1. 抑制氧化酶的活性 生物体内许多氧化酶，如P-450 酶、黄嘌呤氧化酶(XOD)、脂氧化酶、髓过氧化酶(MPO)和环氧酶等，与自由基的生成有关，能诱发大量的自由基。 另外，诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在缺血再灌注时活性增加，产生大量NO而导致氧化损伤。 研究表明，许多植物提取物对上述各种氧化酶有抑制作用，从源头抑制自由基生成。黄酮类化合物中的槲皮素、姜黄素在缺血再灌注损伤时可抑制iNOS 的活性，从而起到抗氧化作用；绞股蓝皂苷可以降低异常增高的XOD 和MPO 的活性，改善糖尿病大鼠肾脏的氧化应激，延缓肾脏损害的进展。 2. 增强抗氧化酶活性 机体存在具有防护、清除和修复过量自由基伤害的抗氧化酶类，如过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶等。SOD 是体内超氧阴离子的主要清除者，将其催化分解为H2O2，但H2O2也具有氧化损伤作用，CAT 将其转化为O2和H2O。同时H2O2也可通过GSH-Px 的催化和还原型谷胱甘肽(GSH)反应生成H2O，同时生成氧化型谷胱甘肽。 许多研究表明，植物提取抗氧化成分不仅能防护体内抗氧化酶，还能增强机体内抗氧化酶活性，如黄酮类中的槲皮素能减少胰岛β细胞的氧化损伤，同时还能恢复Fe2+致肾细胞损伤动物的SOD、GSH-Px 和CAT 的活力；皂苷类物质对氧自由基本身影响较少，但大多能提高体内SOD、CAT 等抗氧化酶的活性，从而增强机体抗氧化系统功能。 此外，一些天然物质可在基因与转录水平上诱导体内抗氧化酶如SOD 的表达，发挥其抗氧化作用。 （二）抗氧化成分之间互补和协同作用 植物提取物抗氧化成分之间存在相互补充、相互协调的关系，在体内通过电子和/ 或质子转移、作用于氧化酶和抗氧化酶、螯合钝化过渡金属离子、影响基因表达等途径联合发挥抗氧化作用。 研究发现不同浓度的茶多酚和西洋参之间均存在明显的协同增效作用，并且随着浓度上升，协同增效作用也相应增强。VE 和VC对鹰嘴豆抗氧化多肽的还原能力有显著的增效作用，且VC与鹰嘴豆抗氧化多肽的协同作用较VE更强，所有的协同作用随添加量和作用时间的增加而增强。 （三）直接清除或抑制自由基 植物提取物能够作为氢质子或电子的供给体，直接猝灭或抑制自由基，终止自由基的连
黄酮类化合物提取方法的研究
黄酮类化合物提取方法的研究 发表时间：2019-07-23T09:36:27.620Z 来源：《医师在线（学术版）》2019年第10期作者：鲍兴隆[导读] 旨在研究黄酮类化合物的提取分离工艺，为选择合适的方法提供参考依据。 浙江大学校医院浙江杭州310000 摘要：近年来，随着对黄酮研究的深入，国内外对黄酮的研究也越来越重视，本文旨在研究黄酮类化合物的提取分离工艺，为选择合适的方法提供参考依据。通过对比黄酮类化合物传统及新型方法的总黄酮提取率发现，新型提取方法相对于传统提取法而言提取率具有明显优势，但新型提取技术对原料、设备、处理要求也相应提高，目前国内外研究相对偏少。 关键词：黄酮类化合物；微波提取；超临界流体萃取法 黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物，泛指两个苯环通过三个碳原子或一个吡喃环或吡喃环连接而成的化合物，主要包括：黄酮和黄酮醇类、二氢黄酮和二氢黄酮醇、异黄酮类及二氢异黄酮类、查尔酮和二氢查耳酮类及花青素类等[1]。黄酮类化合物属植物次生代谢产物，在植物体内大部分与糖结合成苷类，小部分以苷元的形式存在，具有多种生物活性，有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老等药理活性，在医药、保健食品等行业中均有广泛的开发利用。对黄酮类化合物的提取有传统的超声波提取法等；以及新型的：微波提取法、超临界流体萃取法、双水相萃取法等。 1传统提取方法 1.1超声波提取法 超声波空化作用使植物细胞壁及整个生物体破裂，这样有利于黄酮类化合物的释放和溶出，另一方面可加速提取液的分子运动，使得提取液和苎麻叶中的黄酮类化合物快速接触，相互溶合、混合，此外超声波热效应也有利于水溶作用，有效缩短了提取时间。贺波[2]以“华苎4号”苎麻叶为原料，采用超声辅助提取法,通过单因素及正交实验,得出最佳的提取工艺条件是：液固比30:1,乙醇浓度70%,超声功率60W,超声时间30min,超声温度60℃,提取一次。在此工艺条件下苎麻叶中黄酮类化合物得率为4.94%。2新型提取方法 2.1微波提取法 微波提取法是微波转化成热能使细胞内部温度上升，当细胞内部压力超过细胞壁的承受能力，细胞破裂，其有效成分流出，在较低的温度条件下萃取介质捕获并溶解。此外，微波产生的电磁场还能加速被萃取部分成分向萃取溶剂界面扩散速率，缩短萃取组成的分子由物料内部扩散到萃取溶剂界面的时间。张海慧等[3]以黑穗醋栗为试材，进行单因素实验，在此基础上设计了四因素三水平正交试验。最后确定了微波辅助法提取黑穗醋栗黄酮的最佳条件为：以95%乙醇为溶剂，微波功率500W，微波65℃，提取8min，液料比10:1，此时提取率可达到0.738mg/g。张鹏等[4]通过实验得出银杏黄酮微波提取的最佳条件为乙醇浓度50%，料液比1:25，回流温度70℃，微波时间120s，在此条件下总黄酮提取率为11.02%。与传统方法相比，微波提取法具有省时、节约溶剂、提取率高等优点，有较大的推广价值。 2.2超临界流体萃取法 超临界流体萃取分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。余青等[5]采用单因素与正交试验对超临界CO2萃取具乌饭树叶总黄酮的工艺进行了研究，结果表明，最佳提取条件为：萃取压力18MPa，萃取时间1.5h，萃取温度50℃，夹带剂乙醇浓度75%，CO2流量20kg/h，夹带剂添加量5mL/g在此条件下乌饭树叶总黄酮平均提取率为73.10%（n=3，RSD=3.58%）。谢建华等[6]利用响应面发优化超临界CO2萃取苦瓜总黄酮的工艺参数,在实验的基础上,确定最佳工艺条件:以无水乙醇为夹带剂1.0mL/g，萃取压力33.4MPa，萃取温度46℃，萃取时间53.2min。此条件下苦瓜总黄酮提取率达到84.3%。超临界流体萃取技术萃取速度快，提取率高，流程简单，且对生物活性保留较好，具有一定的应用价值。 除以上的提取方法外，还有双水相萃取分离、双水相—超声耦合、超声—酶法耦合、酶法—高压脉冲电场耦合等技术。总的来说，传统提取方法的总黄酮提取率基本在5%左右，而新型提取方法的提取率在10%以上（有的甚至可达80%-90%），相对于传统提取法而言，新型提取方法的提取率具有明显优势，但对新型提取技术对原料、设备、处理要求也相应提高，目前国内外研究相对偏少。3展望 黄酮类化合物分布范围广、种类多，黄酮类化合物的保健品也早在二十世纪八十年代末就引起国际医药界的注意，而且大部分毒理学研究提示其一般无毒，近年来此类化合物一直是生化制药、保健品生产方面的热门之一，在最近上市的保健产品中也有很大一部分其主要功效成分就属于黄酮类化合物，其涉及的功能食品也很多。最近由于心血管疾病、癌症等疾病死亡人数呈快速增长，而黄酮对心血管系统及防癌抗癌有一定的作用，许多国家和地区正在开发相关的产品，前景较好。由于黄酮类化合物可能存在几种不同的作用机制与合成途径，有些实验结果的解释可能依然存在不足之处。因此今后黄酮类化合物的研究还需要关注的是生物利用度、代谢动力学、体内的氧化损伤及长期服用产生的慢性后果等方面[7]。开发出更加可靠、令人信服的模型或系统，以此来精确评估黄酮类化合物在人体内的代谢作用是非常必要的。 参考文献 [1] TAYLOR L P,GROTEWOLD E. Flavonoids as developmental regulatoes [J].Current Opinion in Plant Biology,2005,3(8)：317-323. [2] 贺波.苎麻叶中黄酮的提取、分离纯化、结构及抗氧化活性研究[D].武汉:华中农业大学硕士学位论文,2010. [3] 张海慧.微波辅助法提取黑穗醋栗中黄酮类物质的研究[J].东北农业大学学报,2008.39(9):32-35. [4] 张鹏.银杏叶黄酮的微波提取及抗氧化性研究[J].安徽农业科学,2009,37(12):5496-5497,5730. [5] 余青,郑小严,黄红霞,等.超临界CO2萃取乌饭树叶总黄酮的工艺[J].2009,38(01):97-102. [6] 谢建华,单斌,彭云.超临界CO2流体萃取苦瓜总黄酮工艺及其抗氧化活性[J].2010,08(1):66-71. [7] 佟永薇.黄酮类化合物提取方法的研究及展望[J].食品研究与开发,2008,29(7):188-190.
黄酮类化合物试题
中药化学试题库 第六章黄酮类化合物 一、选择题 （一）A型题（每题有5个备选答案，备选答案中只有1个最佳答案） 1．黄酮类化合物的基本碳架是（） A．C6-C6-C3 B．C6-C6-C6 C．C6-C3-C6 D．C6-C3 E．C3-C6-C３ 正确答案：C ２．与２’-羟基查耳酮互为异构体的是（）A．二氢黄酮B．花色素 C．黄酮醇D．黄酮 E．异黄酮 正确答案：A ３．水溶性最大的黄酮类化合物是（） A．黄酮 B．黄酮醇C．二氢黄酮D．查耳酮 E．异黄酮 正确答案：C 6．酸性最强的黄酮类化合物是（） A．5-羟基黄酮 B．4’-羟基黄酮 C．3-羟基黄酮 D．3’-羟基黄酮 E．4’-羟基二氢黄酮
正确答案：B 7．酸性最弱的黄酮类化合物是（） A．5一羟基黄酮 B．7-羟基黄酮 C．4’-羟基黄酮 D．3’-羟基黄酮 E．6一羟基黄酮 正确答案：A 10．黄酮类化合物色谱检识常用的显色剂是（）A．盐酸-镁粉试剂B．FeCl3试剂C．Gibb’s试剂 D．2％NaBH4甲醇溶液 E．l％AlCl3甲醇溶液 正确答案：E 11．在碱液中能很快产生红或紫红色的黄酮类化合物是（） A．二氢黄酮B．查耳酮 C．黄酮醇D．黄酮 E．异黄酮 正确答案：B 13．将总黄酮溶于乙醚，用 5％NaHCO３萃取可得到（） A．5，7-二羟基黄酮B．5-羟基黄酮C．3’，4’-二羟基黄酮 D．5，8-二羟基黄酮 E．7，4’-二羟基黄酮正确答案：E 15．当药材中含有较多粘液质、果胶时，如用碱液提取黄酮类化合物时宜选用（）
A．5％Na2CO3 B．l％NaOH C．5％NaOH D．饱和石灰水 E．氨水 正确答案：D 17．下列化合物进行聚酰胺柱色谱分离，以浓度从低 到高的乙醇洗脱，最先被洗脱的是（） A．2’，4’-二羟基黄酮B．4’-OH黄酮醇C．3’，4’-二羟基黄酮 D．4’-羟基异黄酮 E．4’-羟基二氢黄酮醇 正确答案：A 18．黄芩苷可溶于（） A．水 B．乙醇C．甲醇 D．丙酮 E．热乙酸 正确答案：E 19.下列化合物属于黄酮碳苷的是 A、芦荟苷 B、葛根素 C、大豆苷 D、芦荟大黄素苷 E、橙皮苷 正确答案：B 20.与查耳酮互为异构体的是 A、黄酮 B、二氢黄酮 C、异黄酮 D、橙酮 E、花色 素 正确答案：B
第五章 黄酮类化合物
第五章黄酮类化合物 一、选择题 （一）单项选择题（在每小题的五个备选答案中，选出一个正确答案，并将正确答案的序号填在题干的括号内） 1．构成黄酮类化合物的基本骨架是（） A. 6C-6C-6C B. 3C-6C-3C C. 6C-3C D. 6C-3C-6C E. 6C-3C-3C 2．黄酮类化合物的颜色与下列哪项因素有关（） A. 具有色原酮 B. 具有色原酮和助色团 C. 具有2-苯基色原酮 D. 具有2-苯基色原酮和助色团 E.结构中具有邻二酚羟基 3．引入哪类基团可使黄酮类化合物脂溶性增加（） A. -OCH3 B. -CH2OH C. -OH D. 邻二羟基 E. 单糖 4．黄酮类化合物的颜色加深，与助色团取代位置与数目有关，尤其在（）位置上。 A. 6，7位引入助色团 B. 7，4/-位引入助色团 C. 3/，4/位引入助色团 D. 5-位引入羟基 E. 引入甲基 5．黄酮类化合物的酸性是因为其分子结构中含有（） A. 糖 B. 羰基 C. 酚羟基 D. 氧原子 E. 双键 6．下列黄酮中酸性最强的是（） A. 3-OH黄酮 B. 5-OH黄酮 C. 5，7-二OH黄酮 D. 7，4/-二OH黄酮 E. 3/，4/-二OH黄酮 7．下列黄酮中水溶性性最大的是（） A. 异黄酮 B. 黄酮 C. 二氢黄酮 D. 查耳酮 E. 花色素 8．下列黄酮中水溶性最小的是（） A. 黄酮 B. 二氢黄酮 C. 黄酮苷 D. 异黄酮 E. 花色素 9．下列黄酮类化合物酸性强弱的顺序为（） （1）5，7-二OH黄酮（2）7，4/-二OH黄酮（3）6，4/-二OH黄酮 A.（1）＞（2）＞（3） B.（2）＞（3）＞（1） C.（3）＞（2）＞（1） D.（2）＞（1）＞（3） E.（1）＞（3）＞（2） 10．下列黄酮类化合物酸性最弱的是（）
天然酚类化合物及其保健作用
天然酚类化合物及其保健作用 酚类化合物是一族结构中含有酚的化合物，广泛存在于植物食品中，由于其羟基取代的高反应性和吞噬自由基的能力而有很好的抗氧化活性。研究发现多酚类化合物可以延缓肿瘤的发作，抑制肿瘤的形成，提高认知功能，抑制低度脂蛋白LDL氧化及抑制血小板凝集等功能。这些功能都与其抗氧化性能有关。 人体内的自由基反应对人的病理、衰老机理的研究发现反应性氧（ROS，包括超氧阴离子O2－，羟基自由基·OH、过氧化物自由基ROO·和烷氧基自由基RO·等）在体内起着很不利的作用，与机体老化及许多疾病有关。ROS在体内主要氧化脂肪、蛋白、核酸等细胞组成成分，进而引起一系列生理、病理反应。 脂质氧化反应是一个自由基介导的链反应，由高反应活性自由基如·OH从多不饱和脂肪酸双键相邻的亚甲基吸收－活泼氢而引发（反应式1）。 脂肪酸烷基自由基R·很快与O2反应形成过氧化自由基ROO·（反应式2），ROO·可从脂肪酸继续吸收活泼氢，使脂质氧化反应继续进行（反应式3）。 低密度脂蛋白LDL是人体血浆中主要的携带胆固醇的蛋白质，除富含胆固醇外，还含大量的亚油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸，这些成分极易被氧自由基氧化而形成过氧化物。被氧化的LDL不能结合到LDL受体上，而是与巨噬细胞清除受体结合，形成泡沫细胞，引起动脉粥样硬化等心血管疾病。 相对于脂质而言，蛋白质和核酸较不易受自由基的攻击。蛋白质的氨基酸组成与蛋白质对ROS的敏感性有很大关系。 ROS对蛋白质的改性作用会影响其被细胞内蛋白水解酶的降解。ROS引起的蛋白质氧化可能是许多炎症反应的原因。 由氧化反应引起的核酸的改性则明显改变细胞功能，有潜在致癌性。ROS攻击DNA会引起广泛的DNA损伤，包括碱基的修饰，产生无碱基位点、碱基删除、移码、DNA解链、DNA－蛋白质交联及染色体重排等。大量的研究认为ROS在癌症的引发和发展中起了重要的作用。 多酚类化合物的抗氧化作用机理 机体有多种抗氧化防御系统，抗氧化剂主要是通过终止自由基链反应而清除自由基保护机体的。α－育酚（TOH）是生物膜中维持稳定性不可缺少的抗氧化成分，以此为例说明抗氧化剂的作用机理:当TOH的酚基团遇到过氧自由基ROO·时，反应形成生育酚自由基TO·和氢过氧化物。 该反应速率常数k3为8×104mol／s。因为链传递反应速度常数k2约10～102mol／s，远低于k3，故TOH与ROO·自由基反应的速度比RH与ROO·反应速度快约104倍。因此仅需少量即可起到有效的终止自由基链反应作用。 酚类是极好的氢或电子供体，由于形成的酚类游离基中间体的共振非定域作用和没有适合分子氧进攻的位置，比较稳定，不会引发新的游离基或者由于链反应而被迅速氧化，所以是很好的抗氧化剂。 植物中存在的天然酚类化合物谷物种子大米是亚洲主要的谷物食品，水稻壳甲醇提取物的抗氧化性能很强，从中分离并鉴定出了一种抗氧化成分异牡荆黄基类黄酮，具有独特的C －糖基结构，抗氧化能力与生育酚相当。 黑米种子即使经过长时间储存仍维持发芽力，故推测其色素物质可能有抗氧化作用。经大规模分离纯化，分离出了抗氧化色素花青素－3－0－β－D－葡萄糖苷（C3G）及dele phinidin－3－0－β－D－葡萄糖苷及花葵素－3－0－β－D－葡萄糖苷，这三种花色素型抗氧化剂在酸性条件下均呈强抗氧化活性，而C3G在中性和碱性条件下也有抗氧化性。在其
黄酮类化合物的提取纯化方法
黄酮类化合物的提取、药用价值和产品开发应用前景 任红丽2009090141 摘要：对黄酮类化合物的药用价值、提取工艺、分离方法等方面进行综述。在 药用价值方面,讨论了其抗抑郁作用、抗氧化与自由基消除活性作用、对化学性肝损伤的保护作用、抗肿瘤作用、抗骨质疏松作用、抗心肌缺血作用;在提取工艺方面,讨论了溶剂提取法、超声提取法、酶法、微波法等;及其开发应用，为今后黄酮类化合物的深入研究提供理论基础。 关键词：黄酮类化合物提取工艺药用价值 黄酮类物质是一类低分子天然植物成分，是自然界中存在的酚类物质[14]，又称生物黄酮或植物黄酮，属植物次级代谢产物，广泛存在于各种植物的各个部位，尤其是花、叶，主要存在于芸香科、唇形科、豆科、伞形科、银杏科与菊科中。迄今，已有数百种不同类型的黄酮类化合物在植物中被发现，人工合成的黄酮类化合物也不断问世。最初这类物质仅用于染料方面，自20世纪20年代，槲皮素、芦丁等黄酮类物质用于临床后，才开始引起人们的关注，研究发现其中相当一部分具有显著的生理及药理活性，例如抗氧化、抗病毒、抗炎、调节血管渗透性，改善记忆，抗抑郁、抗焦虑、中枢抑制、神经保护等功能[2,12]诸多生理和药理特性使其广泛应用于食品、医药等领域。 1.提取纯化方法 1．1 传统提取方法 1．1．1 热水提取法 水是最廉价的提取溶剂，是地球最丰富的物质，无色无味无毒，对人体和环境无害，挥发性不大，具有真正的绿色环保意义。但用水作为提取溶剂时，从中药材中提取的黄酮类化合物中杂质含量较多，往往因泡沫或粘液很多，给进一步分离带来许多麻烦，而且浓缩也会很困难。此外，水提取物容易发霉发酵[22]。1．1．2 碱性水、碱性稀醇浸提法 中草药中黄酮类成分多为多酚类化合物，因其结构中具有酚羟基[7]，故可用碱性水或碱性稀醇液来提取中草药中的黄酮类化合物。黄酮母核的多样性主要是由黄酮本身骨架、环系的变化、氧化程度和数量而定，当碱的浓度过高，加热时便破坏黄酮类化合物的母核。 1．1．3 有机溶剂热回流及冷浸提取法 根据杂质极性不同，可选用不同的有机溶剂(如石油醚、乙酸乙酯、氯仿、乙醇、甲醇、丙酮等)，一般采取乙醇为提取溶剂[15]。
槐花中黄酮类化合物提取、分离和鉴定教学文案
槐花中黄酮类化合物分离和鉴定[适用对象] 中药国际交流、中药知识产权、中药制药工程、中药资源专业 [实验学时]9 一、实验目的要求 学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求： （1）了解沸水提取黄酮类化合物的原理和操作。 （2）了解由芸香苷水解制取槲皮素的方法。 （3）掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。 二、实验原理 由槐花中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制。纸色谱的分离原理是利用各种化合物在流动相和固定相中分配系数的不同而达到分离目的。 三、仪器设备 烘箱、水浴锅、铁架台，烧杯，三角烧瓶，滤纸，试管，层析槽，毛细管等。 四、相关知识点 槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾，主要含芸香苷（芦丁），含量高达12~20%，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖。 芸香苷（rutoside），分子式C27 H30 O16，分子量610.51，淡黄色针状结晶，mp.177~178℃。难溶于冷水（1﹕8000），略溶于热水（1﹕200），溶于热甲醇（1﹕7），冷甲醇（1﹕100），热乙醇（1﹕30），
冷乙醇（1﹕650），难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。 槲皮素（quercetin ），分子式C 15 H 10 O 7，分子量302.23，黄色针状结晶，mp.314℃（分解）。溶于热乙醇（1﹕23），冷乙醇（1﹕300），可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、氯仿、乙醚中，几不溶于水。 O O O H OH OH OH OR 五、实验步骤 （一）芸香苷、槲皮素和糖的纸色谱鉴定 1、点样：取新华一号色谱滤纸，规格20 cm ×20 cm ，在滤纸下端约2 cm 处用铅笔画一直线，间隔2 cm 分别点上下列样品或标准溶液： （1）糖样品溶液 （2）标准葡萄糖溶液 （3）标准鼠李糖溶液 （4）芸香苷样品甲醇溶液 （5）芸香苷标准品溶液 （6） 槲皮素样品甲醇溶液 （7）槲皮素标准品溶液 2、展开剂：正丁醇-醋酸-水（4﹕1﹕5）上层上行展开。 3、显色：展开完毕，将滤纸取出，记录溶剂前沿位置。待溶剂挥尽后，在（3）与（4）点之间剪开，分别显色。 （1）糖的显色：喷苯胺-邻苯二甲酸试剂，在105℃烘10分钟，
骨碎补中的两个新酚酸类化合物_梁永红
·874·药学学报Acta Pharmaceutica Sinica 2010, 45 (7): 874?878 骨碎补中的两个新酚酸类化合物 梁永红, 叶敏*, 张灵芝, 李卉芳, 韩健, 王宝荣, 果德安* (北京大学药学院天然药物与仿生药物国家重点实验室, 北京 100191) 摘要: 为了研究骨碎补的化学成分, 采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱及半制备高效液相色谱等技术, 从中药骨碎补的70%乙醇提取物中分离得到9个酚酸类化合物。其结构经1H NMR、13C NMR、2D NMR、HR-ESI-MS等谱学方法分别鉴定为4, 4'-dihydroxy-3, 3'-imino-di-benzoic acid (1)、原儿茶酸 (protocatechuic acid, 2)、没食子酸 (gallic acid, 3)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid, 4)、咖啡酸 [(E)-caffeic acid, 5]、ethyl trans- 3, 4-dihydroxycinnamate (6)、咖啡酸4-O-β-D-葡萄糖苷(caffeic acid 4-O-β-D-glucopyranoside, 7)、对-香豆酸4-O- β-D-葡萄糖苷(p-coumaric acid 4-O-β-D-glucopyranoside, 8) 和23(S)-12-O-caffeoyl-12-hydroxyllauric acid glycerol ester (9)。其中, 化合物1和9为新化合物, 化合物3、4、6为首次从槲蕨属植物中分离得到。 关键词: 骨碎补; 槲蕨; 酚酸; 23(S)-12-O-caffeoyl-12-hydroxyllauric acid glycerol ester; 4, 4'-dihydroxy-3, 3'- imino-di-benzoic acid 中图分类号: R284.1 文献标识码:A 文章编号: 0513-4870 (2010) 07-0874-05 Two new phenolic acids from Drynariae Rhizoma LIANG Yong-hong, YE Min*, ZHANG Ling-zhi, LI Hui-fang, HAN Jian, WANG Bao-rong, GUO De-an* (The State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100191, China) Abstract: To study the chemical constituents of Drynariae Rhizoma, nine phenolic acids were isolated from a 70% ethanol extract by using a combination of various chromatographic techniques including column chromatography over silica gel, ODS, Sephadex LH-20, and semi-preparative HPLC. By spectroscopic techniques including 1H NMR, 13C NMR, 2D NMR, and HR-ESI-MS, these compounds were identified as 4, 4'- dihydroxy-3, 3'-imino-di-benzoic acid (1), protocatechuic acid (2), gallic acid (3), p-hydroxybenzoic acid (4), (E)-caffeic acid (5), ethyl trans-3, 4-dihydroxycinnamate (6), caffeic acid 4-O-β-D-glucopyranoside (7), p-coumaric acid 4-O-β-D-glucopyranoside (8), and 23(S)-12-O-caffeoyl-12-hydroxyllauric acid glycerol ester (9), separately. Among them, 1 and 9 are new compounds, and 3, 4, and 6 were isolated from Drynaria species for the first time. Key words: Drynariae Rhizoma; Drynaria fortunei; phenolic acids;23(S)-12-O-caffeoyl-12-hydroxyl lauric acid glycerol ester; 4, 4'-dihydroxy-3, 3'-imino-di-benzoic acid 骨碎补为水龙骨科槲蕨属植物槲蕨Drynaria fortunei (Kunze.) J. Sm.的干燥根茎, 性温, 味苦, 入肾、肝二经, 具有补肾强骨、续伤止痛的功效[1]。用 收稿日期: 2010-01-08. 基金项目: 教育部创新团队计划 (985-2-063-112); 北京大学医学部985项目 (985-2-119-121). *通讯作者Tel / Fax: 86-10-82802700, E-mail: yemin@https://www.wendangku.net/doc/3216779308.html, or gda@https://www.wendangku.net/doc/3216779308.html, 于治疗肾虚腰痛, 耳聋、耳鸣, 牙齿松动, 跌扑闪挫, 筋骨折伤; 外用治疗斑秃、白癫风。国内外文献报道槲蕨的化学成分主要有黄酮类[2–6]、三萜类[7–9]及苯丙素类化合物[10], 也有学者利用GC-MS分析了其挥发油成分[11]。为了进一步寻找其生物活性成分, 作者对中药骨碎补的化学成分作了进一步的研究。采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及半 DOI:10.16438/j.0513-4870.2010.07.004
酚类化合物
酚类化合物是一类具有大而复杂基因的化合物。从化学上讲，酚是苯环（又称芳香环）上联有一个或多个羟基的化合物。多酚物质（polyphenols）是含有酚官能基团的物质，是构成植物固体部分的主要物质[5,6]。按分子质量可分为单宁化合物（相对分子量500～3000）和非单宁化合物（相对分子量＜500或＞3000）[3]。酚类物质是葡萄中重要的次生代谢产物，与葡萄的抗病性、采后生理、贮存、保鲜以及与葡萄汁（酒）的色泽、风味等品质指标密切相关。德、法等国在探讨酚类物质与葡萄酒的品质关系方面已经开展了大量工作，并取得了不少研究成果，国内对酚类物质的研究尚处于起步阶段[18]。葡萄与葡萄酒中常见的酚类按其化学结构可分为两大类：类黄酮和非类黄酮[1]。不同葡萄品种之间酚的含量及类型差异很大，相同品种葡萄及其酿制的葡萄酒中酚的构成及含量也会受地域、栽培条件、气候条件、成熟度，酿造工艺等多种因素的影响。 1 非类黄酮 酚酸类化合物（phenolic acids） 这类化合物具有一个苯核，多为对羟基苯甲酸和对羟基苯丙烯酸（肉桂酸）的衍生物[5,6]。主要有对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸和香豆酸4种，此外还有没食子酸、原儿茶酸、阿魏酸、绿原酸、芥子酸等。 葡萄浆果中20%～25%的酚酸都以游离态的形式存在。在葡萄酒中，酚酸可与花色素和酒石酸相结合[2,5,6]。这些物质结构较简单，主要贮存在葡萄细胞中的液泡中，破碎时容易被浸出。含量最高的是羟基肉桂酸的衍生物，一般与糖、有机酸以及各种醇以酯化形式存在[1]。葡萄品种成熟条件不同，葡萄浆果中酚酸的总量和游离态酚酸的比例也不相同。 2 类黄酮 黄酮类化合物是自然界存在的酚类化合物的最大类别之一。而且大部分单宁也是由黄酮类化合物转变来的。黄酮类化合物的母核总是由15个碳原子组成，它们排列成C6-C3-C6的构型。也就是说，两个芳香环由一个成环或不成环的C3单元联结起来。这三个环分别标为A、B、C。葡萄酒中最常见的类黄酮物质有黄酮醇，儿茶素，红葡萄酒中还有花色苷等[1,11]。类黄酮主要来自于葡萄皮，葡萄籽及果梗，在红葡萄酒中占多酚物质的85%以上，在白葡萄酒中含量一般不超过总酚的20%，因此类黄酮对红葡萄酒的影响要远远大于对白葡萄酒的作用[1]。 2.1 黄酮醇类化合物（flavonols） 槲皮酮（栎精）R:HR':H 莰非醇（山奈醇）：R:OH R':H 杨梅黄酮：R:OH R:OH 图1 黄酮醇类化合物结构 分子结构中含有“黄烷构架”。主要有写槲皮酮（栎精，Quercetin）、莰非醇（山奈醇，Kaempferal）、和杨梅黄酮（Myricetin）（见图1）。
银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展
银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展 银杏树Ginkgo biloba L.又称白果树、公孙树，是我国古老的树种之一，具有“活化石”的美称。由于其生长规律特殊，抗病能力强而受到国内外的重视。有关银杏叶的有效成分及疗效的研究日益受到重视，已开发出保健品、化妆品、药品等多达100多种，形成国际市场上销售额20多亿美元的新兴产业。银杏叶的化学成分有黄酮类、萜类、内酯类、酚酸类以及生物碱、聚异戊二烯等化合物。黄酮类为银杏叶的主要有效成分之一，含量随品种、产地、树龄、不同的采摘时间而不同。黄酮类化合物优异的抗氧化、抗病毒、防治心血管疾病、增强免疫力等作用而受世人瞩目。 药学研究表明，有38种银杏黄酮类化合物从银杏叶中分离出来，其中黄酮类化合物主要有3类：黄酮(醇)及其昔28种：如槲皮黄酮等；黄烷醇类：如儿茶素等4种；双黄酮：如白果双黄酮等6种(儿茶素)。 1 银杏叶黄酮的提取分离 1.1 溶剂提取法目前国内外掀起了研究开发银杏叶热。国内银杏叶常用溶剂例如乙醇、丙酮、醋酸乙酯、水以及某些极性较大的混合溶剂浸泡银杏叶进行提取，溶剂提取方法一般有：煎煮、冷浸、回流、渗施等经典方法。 1.1.1 水提取树脂分离法有关水浸提银杏黄酮苷的文献报道不多。肖顺昌等报道了用l 6倍量沸水分3次浸提银杏叶，得到的水溶液，经冷藏、分离杂质得溶液，然后用D101型吸附树脂吸附得到浓度达38％的黄酮苷。胡敏等研究水浸提银杏叶黄酮苷并用树脂精制的工艺，探讨了影响黄酮苷浸出的主要因素以及最适的精制方法，结果表明：水为提取剂，在9 0℃水溶回流浸提银杏叶2次，4h／次，经沉淀，过滤，浓缩后，用树脂精制、冷冻干燥后，制得总黄酮苷含量高的提取物、产品得率为银杏叶干重的 1.2％-1.5％。 水提取成本低，没有任何环境污染，产品安全性高，但是水对有效成分的选择性差，提取率低。
第六章 黄酮类化合物
第六章黄酮类化合物 本章是本教材的重点，因此考试也是重点。 学习和复习时，对黄酮化合物的分类、检识和提取分离部分重点掌握，并可以通过紫外方法对简单黄酮类化合物进行结构解析。熟悉槐米和黄芩两味中药的实例。 第一节概述 的含义：黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一大类化合物。由于这类化合物大多呈黄色或淡黄色，且分子中亦多含有酮基因此被称为黄酮。黄酮类化合物经典的概念主要是指基本母核为2-苯基色原酮的一系列化合物。现在，黄酮类化合物是泛指两个苯环（A与B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。其基本碳架为：C6-C3-C6。 了解黄酮类化合物也是中药中一类重要的有效成分，具有多方面的生物活性。 第二节黄酮类化合物的结构与分类 这一节要掌握黄酮的分类原则，根据黄酮类化合物A环和B环中间的三碳链的氧化程度、三碳链是否构成环状结构、3位是否有羟基取代以及B环（苯基）连接的位置（2或3位）等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类。 结合中药实例槐米和黄芩进行学习。 第三节黄酮类化合物的理化性质 这一节内容为黄酮类化合物物理和化学性质学习，也是黄酮化合物难点部分也是重要考点，因此必须掌握，复习时将影响黄酮颜色，酸性强弱的因素归纳总结便于记忆，并牢记颜色反应和金属盐类试剂的络合反应，能熟练应用显色反应区分相似结构的化合物。 黄酮类化合物颜色主要与分子中是否存在交叉共轭体系有关，助色团（-OH、-OCH3等）的种类、数目以及取代位置对颜色也有一定影响。
花色素的颜色可随pH不同而改变 二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因分子中的C环具有近似于半椅式的结构系非平面型分子，有利于水分子进入，故在水中溶解度稍大。花色素类虽具有平面型结构，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，水溶度较大。 黄酮类化合物的酸性强弱与酚羟基数目的多少和位置有关。以黄酮为例其酚羟基酸性由强至弱的顺序是：7，4′-二OH＞7-或4′-OH＞一般酚羟基＞5-OH，黄酮类化合物的颜色反应主要是利用分子中的酚羟基及γ-吡喃酮环的性质。 盐酸-镁粉反应此为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。 与金属盐类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中若具有3-羟基、4-羰基，或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基，则可以与许多金属盐类试剂如铝盐、锆盐、锶盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。 第四节黄酮类化合物的提取与分离 黄酮类化合物的提取可以分为溶解提取法、热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法各有利弊，可根据药材和提取条件选择。 黄酮类化合物的分离是本节的重点，尤其是聚酰胺色谱发洗脱规律和应用。 聚酰胺色谱的分离机理，一般认为是“氢键吸附”，即聚酰胺的吸附作用是通过其酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔合而产生的，其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中酚羟基的数目与位置等及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化合物形成氢键缔合的能力越强，则聚酰胺对黄酮类化合物的吸附作用将越弱。黄酮类化合物在聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律： 1、首先看黄酮不同类型，被吸附强弱的顺序为：黄酮醇＞黄酮＞二氢黄酮醇＞异黄酮。 2、相同母核条件下：酚羟基数目，越多则吸附力越强，在色谱柱上越难以被洗脱；当分子中酚羟基数目相同时，易于形成分子内氢键，则其与聚酰胺的吸附力减小，易被洗脱下来；分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强 3、游离黄酮与黄酮苷的分离若以含水移动相（如甲醇-水）作洗脱剂，黄
红薯叶黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性的测定
万方数据
万方数据
万方数据
万方数据
红薯叶黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性的测定 作者：王小华， 邓斌， 张晓军， 龙石红， WANG Xiao-hua， DENG Bin， ZHANG Xiao-jun，LONG Shi-hong 作者单位：王小华,WANG Xiao-hua(湘南学院化学与生命科学系,湖南,郴州,423000)， 邓斌,DENG Bin(湘南学院化学与生命科学系,湖南,郴州,423000;中国科技大学,合肥微尺度物质科学国 家实验室,安徽,合肥,230026)， 张晓军,ZHANG Xiao-jun(中国科技大学,合肥微尺度物质科 学国家实验室,安徽,合肥,230026)， 龙石红,LONG Shi-hong(永州职业技术学院,湖南,永州 ,425000) 刊名： 化学与生物工程 英文刊名：CHEMISTRY & BIOENGINEERING 年，卷(期)：2009,26(2) 被引用次数：2次 参考文献(9条) 1.邵红论红薯的营养价值与药用价值[期刊论文]-食品工业科技 2002(05) 2.胡立明.高荫榆.陈才水甘薯叶研究进展[期刊论文]-郑州工程学院学报 2002(01) 3.卢新建.吕美琴甘薯茎叶菜用及栽培技术 2000(04) 4.邹耀洪国产甘薯叶黄酮类成分研究[期刊论文]-分析测试学报 1996(01) 5.孙艳梅.徐雅琴.杨林天然物质类黄酮的抗氧化活性的研究[期刊论文]-中国油脂 2003(03) 6.夏维木.陈杞.张利民几种黄酮类化合物清除活性氧的实验研究[期刊论文]-第二军医大学学报 1997(04) 7.高愿军黄酮化合物结构鉴定技术 2002 8.石锦芹.黄绍华测定过氧化值 1999(05) 9.方素英.赵亚军.李琳食品抗氧化剂 1998 引证文献(2条) 1.薛长晖.端允双波长法测定山丹叶中总黄酮含量[期刊论文]-粮油加工 2009(10) 2.冯雷.吴冬青.王永生.安红钢.王军霞.任雪峰黄芩总黄酮的提取及羟基自由基清除方法比较[期刊论文]-中兽医医药杂志 2010(5) 本文链接：https://www.wendangku.net/doc/3216779308.html,/Periodical_hbhg200902009.aspx
黄酮类化合物的提取分离方法
一.黄酮类化合物的提取分离方法 按所用溶剂不同分类 (1)热水提取法(以水作溶剂)---------- 灵芝多糖热水提取 (2)有机溶剂萃取法-----------生产茶多酚工业试验、乳酸 (3)碱提取酸沉淀法.---------- 橙皮苷、黄芩苷、芦丁等都可用此法提取. 2.按提取条件不同分类 (1)回流提取法----------从苦楝树皮中提取苦楝素 (2)索式提取法----------柑橘属类黄酮 (3)微波辅助提取法----------采用微波辅助法从黎蒿中提取黄酮类化合物 (4)超声提取法----------提取山楂中黄酮类物质 (5)超滤法----------黄岑甙 (6)酶提取法----------采用纤维素酶对红景天进行酶解处理,可提高黄酮类物质的浸出率 (7)超临界流体提取法----------竹叶黄酮、从干姜片中提取挥发油 PH 梯度萃取法：石榴果皮褐变产物、葛花总异黄酮 高效液相色谱分析法：五味子、葛根 高速逆流色谱分离法：甘草、分离蜜环菌发酵液乙醇提取部位 柱色谱法 （1）硅胶柱色谱：姜黄素 （2）聚酰胺柱色谱：紫锥菊 （3）葡聚糖凝胶柱色谱：回心草、茵陈蒿 （4）大孔吸附树脂分离法：川草乌、三七总皂甙 二. 槐米中芸香苷（芦丁）的提取方法有哪些（设计） 方法：渗漉法、煎煮法、回流提取法 （1） 槐米粗粉20g 加约120ml 的%硼砂水溶液， 搅拌下加入石灰乳至pH8-9， 并保持该pH 值煮沸20分钟，四层纱布 趁热滤过，反复2次 提取液 药渣 浓盐酸调pH2~3 搅拌，静置放冷，滤过。 滤液 沉淀 热水或乙醇重结晶 芸香苷结晶 碱溶酸沉法提取分离槐米中芸香苷的流程图 （2）取30g 槐花米，置于250mL 烧杯中，加入%硼砂沸水200ml ，在搅拌下缓缓加入石灰乳调节pH=8～9，在此pH 下保持微沸20～30min ，趁热用棉花滤过，残渣再加水，同上法再煎一次，趁热抽滤。合并滤液，在60～70℃下用浓盐酸调至pH=4—5，静置。 提 碱 取 溶 分 酸 离 沉
黄酮类化合物的提取
一、溶剂提取法：国内外使用最广泛的方法，步骤多、周期长、产率低、产品中有机溶剂易残留。溶剂系统主要有乙醇，水溶液、丙酮-水溶液、NaOH-水溶液、NaOH-乙醇等。精提物常在粗提物制备基础上精制，常用液-液提取法、沉淀法和吸附．洗脱法。以60％丙酮为起始溶剂粗提取，再脱脂、去银杏酚酸等15道工艺制成提取物。NaOH-水溶液提取效果最好，NaOH-乙醇溶液次之，正丁醇萃取水溶液中银杏黄酮苷，获得最佳萃取条件为萃取5 min温度60℃4次，萃取物中黄酮苷含量为57％。V水：V正丙醇=1:25最佳。银杏叶精提物树脂吸附纯化法以石油醚回流提取，再以80％乙醇回流提取，减压浓缩，新型澄清剂沉降，树脂分级吸附，pH值为3—4酸水和酸性25％乙醇洗涤，75％乙醇洗脱，喷雾干燥将银杏叶洗净，于60℃烘干至恒重，粉碎，过50目筛。称取粉末25 g，置于索氏提取器中恒重，粉碎，过50目筛。称取粉末25 g，置于索氏提取器中加入60％乙醇至250．0 ml，80℃下回流提取3．0 h，蒸馏回收乙醇，并用活性炭脱色，得银杏叶黄酮提取物。乙醇浓度为50％一70％时,提取率随浓度增加提高，当浓度70％时提取率达最大。随水浴温度升高总黄酮提取率快速增加。当温度80℃时提取率达最大。提取时间为三小时为佳。 黄酮类化合物（英语：Flavonoid，又称类黄酮[1]）是指基本母核为2-苯基色原酮类化合物，现在则泛指两个具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连接的一系列化合物。他们来自于水果、蔬菜、茶、葡萄酒、种子或是植物根。虽然他们不被认为是维生素，但是在生物体内的反应里，被认为有营养功能，曾被称为“维生素P”： 黄酮类（英语：Flavones）是一类基于2-苯基色原酮-4-酮（2-苯基-1-苯并吡喃-4-酮）骨架的黄酮类化合物，如右图所示。 银杏叶黄酮的研究程序 溶剂提取法：国内外使用最广泛的方法，步骤多、周期长、产率低、产品中有机
毕业论文：黄酮类提取物抗氧化研究进展
本科生毕业设计 题目：黄酮类提取物抗氧化研究进展 年月日
黄酮类提取物抗氧化研究进展 摘要 黄酮类化合物（Flavonoid)是广泛存在于植物界的一大类多酚类化合物，多以甙类形式存在，也有一部分以游离形式存在。这类化合物在食物中有广泛的来源，具有极多的生物学作用。据统计,目前已分离出的黄酮类类化合物已超过4000 种,为天然酚类化合物之首[1]。 关键词：黄酮类；抗氧化；进展 Research progress of flavonoid antioxidant Abstract Flavonoids (Flavonoid) are a class of polyphenolic compounds widely existing in plants, mostly exist in glycoside form, there is also a part of present in a free form. The compounds have a wide range of sources in the food, has a biological effect. According to statistics, flavonoid compounds have been isolated has more than 4000 species, is a natural phenolic compounds of the first [1]. Keywords: flavonoids; antioxidant; progress
1黄酮类化合物的结构 黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮(2-pheny l-chromone)类化合物,目前泛指两个具有酚羟基的芳香环(A环和B环)通过中央三碳链相互作用连接而成的一系列化合物, 其基本骨架具有C6-C3-C6。其中C3部分可以是脂链，或与C6部分形成六元或五元环,泛指2个苯环（A环与B环)通过中央三碳链相互连接而成的一系列化合物［2]。 2 黄酮类化合物分类 一般黄酮类化合物主要是以六元C环的氧化状况和B 环所连接的位置不同为依据进行分类,可以分为黄酮(flavone)及黄酮醇（flavonol)类,如芦丁、槲皮素;二氢黄酮(flavonone)及二氢黄酮醇(flavanonol)类,如陈皮苷;异黄酮(isoflavone)及异黄酮醇(isoflavonol)类,如葛根素;黄烷醇(flavanol)类,如儿茶素;花色素(anthocyanidins)类,如飞燕草素;双黄酮(biflavonoids)类, 如银杏素;查耳酮(chalcones)类,如红花苷。另外,还有一些其他类型的类黄酮,如香豆素(coumarins)等。类黄酮可以是配基和糖苷型(环上携有一个或多个糖基),也可以是甲脂衍生物。黄酮醇以及黄酮化合物是最为常见的类黄酮,而黄烷酮、黄烷醇类( 儿茶酚)、二氢黄酮以及二氢查尔酮类化合物被认为是一类微量类黄酮, 因为后者在自然界分布相对有限。其中,槲皮素(quercerin)是研究最为透彻的一种类黄酮[3]。 3黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定型粉末。黄酮类化合物的颜色与分子中存在的交叉共轭体系及助色团（-OH、-CH3）等的类型、数目及取代位置有关。一般来说，黄酮、黄酮醇及其苷类多呈灰黄至黄色，查尔酮为黄色至橙黄色，而二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮类等因不存在共轭体系或共轭很少，故不显色。花色素及其苷元的颜色，因pH的不同而变，一般呈红（pH<7）、紫（7<8.5）、蓝（PH>8.5）等颜色。 黄酮苷元一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性相应加大，而在有机溶剂中的溶解度相应减少。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多有