五日生化需氧量作业指导书

五日生化需氧量

作业指导书

( 依据标准: GB/T7488-1987 )

1含义及有关质量或排放标准

1.1 五日生化需氧量含义

五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。条件为20±1°C 培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。

1.2 五日生化需氧量(BOD5)的地表水质量1或污水排放标准2-3

注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002）

2-中华人民共和国污水综合排放标准（GB8978-1996）

3-上海市污水综合排放标准(DB31/199-1997)

2分析方法稀释接种法(GB7488-87)

2.1 适用范围

本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000 mg/L的水样。BOD5大于6000 mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。

本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。

本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。水中的藻类或硝化微生物也可能告成虚假的偏高结果。

2.2 定义

生物化学需氧量（BOD）：在规定条件下，水中有机物和无机物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。

2.3 原理

将水样注满培养瓶，瓶盖塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。

由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。

一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培养瓶中投入硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在的足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。

在测定BOD5的同时，需用葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证试验。

2.4 试剂

分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L,并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。

2.4.1接种水

如试验样品本身不含有足够的合适性微生物，应采用下述方法之一，以获得接种水：

a. 城市废水，取自污水管或取自没有明显工业污染的住宅区污水管。这种水在使用前，应倾出上清液备用。

b. 在1L水中加入100g花园土壤，混合并静置10min。取10ml上清液用水稀释至1L。

c. 含有城市污水的河水或湖水。

d. 污水自理厂出水。

e. 当待分析水样为含难降解物质的工业废水时，取自待分析水排放口下游约3～8km的水或所含微生物适宜于待分析水并经实验室培养过的水。

2.4.2 盐溶液

下述溶液至少可稳定一个月，应贮存在玻璃瓶内，置于暗处。一旦发现有生物滋长迹象，则应弃去不用。

2.4.2.1磷酸盐：缓冲溶液。

将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g 七水磷酸氢二钠（Na2HPO427H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于约500ml水中，稀释至1000ml并混合均匀。

此缓冲溶液的pH应为7.2。

2.4.2.2七水硫酸镁：22.5g/L溶液。

将22.5g的七水硫酸镁（MgSO427H2O）溶于水中，稀释至1000ml并混合均匀。

2.4.2.3氯化钙：27.5g/L溶液。

将27.5g的无水氯化钙（CaCl2）（若用水合氯化钙，要取相当的量）溶于水，稀释至1000ml并混合均匀。

2.4.2.4六水氯化铁（Ⅲ）：0.25g/L溶液。

将0.25g六水氯化铁（Ⅲ）（FeCl326H2O）溶解于水中，稀释至1000ml 并混合均匀。

2.4.3 稀释水

取每种盐溶液（2.4.2.1、2.4.2.2、2.4.2.3和2.4.2.4）各1 ml，加入约500ml 水中，然后稀释至1000ml并混合均匀，将此溶液置于20℃下恒温，曝气1h以上，采取各种措施，使其不受污染，特别是不被有机物质、氧化或还原性物质或金属污染*，确保溶解氧浓度不低于8mg/L。

*建议采用压缩空气瓶或采用空气不与任何润滑油接触的压缩机（隔膜泵压缩机）。空气在用前应过滤和洗涤。

此溶液的5日生化需氧量不得超过0.2mg/L。

此溶液应在8h内使用。

2.4.4 接种的稀释水

根据需要和接种水的来源，向每升稀释水（2.4.3）中加1.0～5.0ml接种水（2.4.1），将已接种的稀释水在约20℃下保存，8 h后尽早应用。

2.4.5 盐酸（HCl）溶液：0.5mol/L。

2.4.6 氢氧化钠（NaOH）溶液：20g/L。

2.4.7 亚硫酸钠（Na2SO3）溶液：1.575g/L，此溶液不稳定，需每天配制。

2.4.8 葡萄糖-谷氨酸标准溶液

将一些无水葡萄糖（C6H12O6）和一些谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）在103℃下干燥1h，每种称量150±1mg，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml并混合均匀。此溶液于临用前配制。

2.5 仪器

使用的玻璃器皿要认真清洗，不能吸有毒的或生物可降解的化合物，并防止沾污。

常用的实验室设备如下：

2.5.1 培养瓶：细口瓶的容量在250～300ml之间，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口，最好是直肩的。

2.5.2 培养箱：能控制20±1℃。

2.5.3 测定溶解氧仪器*。

*溶解氧的测定可采用碘量法（GB 7489-87）。

2.5.4 用于样品运输和贮藏的冷藏手段（0～4℃）。

2.5.5 稀释容量：带塞玻璃瓶，刻度精确到毫升，其容积大小取决于使用稀释样品的体积。

2.6 样品的贮存

样品需充满并密封于瓶中，置于2～5℃保存到进行分析时。一般应在采样后6h之内进行检验。若需远距离转运，在任何情况下贮存皆不得超过24h。

2.7 操作步骤

2.7.1 样品预处理

2.7.1.1样品的中和

如果样品的pH不在6～8之间，先做单独试验，确定需要用的盐酸溶液（2.4.5）或氢氧化钠溶液（2.4.6）的体积，再中和样品，不管有无沉淀形成。

2.7.1.2含游离氯或结合氯的样品

加入所需体积的亚硫酸钠溶液（2.4.7），使样品中自由氯和结合氯失效，注意避免加过量。

2.7.2 试验水样的准备

将试验样品温度升至约20℃，然后在半充满的容器内摇动样品，以便消除可能存在的过饱和氧。

将已知体积样品置于稀释容器（2.5.5）中，用稀释水（2.4.3）或接种稀

释水（2.4.4）稀释，轻轻地混合，避免夹杂空气泡。稀释倍数可参考下表。

测定BOD5时建议稀释的倍数

E：生物净化过的污水；

S：澄清过的污水或轻度污染的工业废水；

C：原污水；

I：严重污染的工业废水。

若采用的稀释比大于100，将分两步或几步进行稀释。若需要抑制硝化作用，则加入ATU或TCMP试剂。

若只需要测定有机物降解的耗氧，必需抑制硝化微生物以避免氮的硝化过程，为此目的，在每升稀释样品中加入2ml浓度为500mg/L的烯丙基硫脲（ATU）（C4H8N2S）溶液或一定量的固定在氯化钠（NaCl）上的2-氯代-6-三氯甲基吡啶（TCMP）（Cl-C5H3N-Cl），使TCMP在稀释样品中浓度大约为0.5mg/L。

恰当的稀释比应培养后剩余溶解氧至少有1mg/L和消耗的溶解氧至少2mg/L。

当难于确定恰当的稀释比时，可先测定水样的总有机碳（TOC）或重铬酸盐法化学需氧量（COD），根据TOC和COD估计BOD5可能值，再围绕预期的BOD5值，做几种不同的稀释比，最后从所得测定结果中选取合乎要求条件者。

2.7.3 空白试验

用接种稀释水（2.4.4）进行平行空白实验测定。

2.7.4 测定

接采用的稀释比（见2.7.2）用虹吸管充满两个培养瓶至稍溢出。

将所有附着在瓶壁上的空气泡赶掉，盖上瓶盖，小心避免夹空气泡。

将瓶子分为二组，每组都含有一瓶选定稀释比的稀释水样和一瓶空白溶液（见2.7.3）。

放一组瓶于培养箱（2.5.2）中，并在暗中放置5天。

在计时起点时，测量另一组瓶的稀释水样和空白溶液中的溶解氧浓度。

达到需要培养的5天时间时，测定放在培养箱中那组稀释水样和空白溶液的溶解氧浓度。

2.7.5 验证试验

为了检验接种稀释水、接种水和分析人员的技术，需进行验证试验。将20ml葡萄糖-谷氨酸标准溶液（2.4.8）用接种稀释水（2.4.4）稀释至1000ml，并且按照2.7.4的步骤进行测定。

得到BOD5应在180～230mg/L之间，否则，应检查接种水。如果必要，还应检查分析人员的技术。

本试验同试验样品同时进行。

2.8 结果的表示

2.8.1 被测定溶液若满足以下条件，则能获得可靠的测定结果。

培养5天后：

剩余DO≥1mg/L；

消耗DO≥2mg/L。

若不能满足以上条件，一般应舍掉该组结果。

2.8.2 五日生化需氧量（BOD5）以每升消耗氧的毫克数表示，由下式算出：BOD5 =[( c1- c2)-( V t- V e)*( c3- c4)/ V t]* V t / V e

式中：c1-在初始计时时一种试验水样的溶解氧浓度，mg/L；

c2-培养5天时同一种水样的溶解氧浓度，mg/L；

c3-在初始计时时空白溶液的溶解氧浓度，mg/L；

c4-培养5天时空白溶液的溶解浓度，mg/L；

V e-制备该试验水样用去的样品体积，ml；

V t-该试验水样的总体积，ml。

若有几种稀释比所得数据皆符合2.8.1所要求的条件，则几种稀释比所得结果皆有效，以其平均值表示检测结果。

3方法指南

3.1 稀释操作技术

3.1.1稀释操作要求稀释水的质量对BOD5测定有重要意义。生化反应因所含有机物的浓度及微生物的种类的不同而异。因此，用稀释水进行空白试验加以校正是困难的，为此，要求其5日耗氧量小于0.2mg/L，并最好能控制在小于0.1mg/L。为保证稀释水时应注意：自来水中常可含有某些挥发性有机物，从而残留在蒸馏水中，遇此情况时，应在蒸馏前作预处理除去。离子交换树脂处理的水中常含有从树脂中分出的有机物而影响水的质量，不宜于作稀释水用。玻璃器皿的不洁，以及在清洗时残留洗涤剂均可影响稀释水质量。当发现稀释水质量不符合要求时，则应检查稀释水中有机物的来源，并设法消除。当所采取的措施无效时，则可考虑采用贮存措施以获得俣格质量的稀释水，其具体方法是：将稀释水在室温或20度贮存足够和的时间，以达到满意的BOD值。贮存之前，加适量的生化池取得的接种液于稀释水中，保证有一定量的微生物能降解水中的有机物，接种的量使5日耗氧约0.1mg/L。贮存必须在暗室中进行，以防藻类生长，贮存后的水样如有沉渣则可用倾泻法或过滤除去。为确保稀释水中含溶解氧接近饱和，必要时可由真空泵或水抽吸使通入经净化的空气，或由氧气钢瓶通入纯氮，然后于20度培养箱中，放置一定时间，使达到平衡。冬季在较低室温放置的稀释水可能含过多的溶解氧，夏季高温季节则恰好相反，均应在培养箱内放置后，使之与空气中氧分压平衡。

3.1.2稀释倍数的确定

稀释倍数失当，过大或过小，可遭致5日耗氧太少或过多而无氧，超出耗氧范围，使实验失败。而由于BOD5试验同期较长，一旦出现此类情况，就无法以原样补测，因此，必须十分重视这一问题。

3.2 直接稀释法的操作步骤：

先将稀释水以虹吸法引入已知容积的培养瓶中至半满，然后沿壁注入根据稀

释倍数计算出的每一培养瓶内应加入的水样体积，再引入稀释水（或接种稀释水）至瓶颈，使盖上瓶塞时无水溢出，瓶内不留气泡，然后水封瓶口。采用本方法应注意最后引入稀释水进行不宜过快，并摸索引入最适体积的规律，避免过量溢出而造成误差。水样稀释水引入培养瓶时，不应发生气泡，以免空气溶入或水中氧气逸出。

3.3 接种操作技术

BOD测定是一个生化耗氧过程，微生物（主要是细菌）以水中的有机物作为食物，获得所需的能量和合成新的菌体所需的营养，在这一过程中有机物被降解为简单的无机物并消耗了水中的溶解氧。因此，在测定BOD时，水样中必须含有一定量的对待测水样中的有机物有降解能力的微生物。（水和废水标准检验法）规定了接种稀释水5日耗氧量应为0.3~1.0mg/L。

3.4 测试中的其它问题

3.4.1 硝化作用及其抑制

在生化过程的第二阶段（硝化阶段）主要进行含氮物质氧化，这种氧化作用是在硝化菌和硝化菌参加下进行。当需要区别含碳物质的需氧量和含氮物质的需氧量，提供生化处理厂的设计要求和检查运转效果时，可采用加入硝化抑制办法，以消除BOD测定中的硝化作用，如在每升稀释水中加入10毫克2－氯－6－（三氯甲基）吡啶或10毫克丙烯基硫脲。

3.4.2 溶解氧的测定

加硫酸锰和碱性碘化钾溶液的氧固定操作，必须按规程进行，避免发生不完全固定，影响测定结果。同样，加酸反应时，亦应充分混合，并使所有锰酸盐的棕褐色沉淀溶解，否则使测定结果偏低。

3.4.3 BOD5／COD比值

当以重铬酸钾法测定COD时，其比值几乎均小于1，如出现大于1时，应检查测定操作全过程有无差错，并注意水样的均匀性。

3.4.4 稀释结果的反常现象当出现有规律的衡释倍数越大，BOD5值越高的现象，多半是由水样中含有抑制微生物生长繁殖的物质。当稀释溶液中水样所占比例越大岑听抑菌物质越多，无法进行有效的生化降解反应，因此稀释倍数小测得值就低。

3.4.5 BOD5／CODcr比值明显偏低当遇到比值低于0.2，甚或低至0.1或以下, 除化学毒性物质或抗菌素影响外, 最常见的原因是pH值和杀菌剂游离氯等，前者可发生于水样未调节pH值至7，或稀释水（接种稀释水）的pH值未达7.2，后者如漂白粉类消毒剂。为免于失误，在BOD5测定过程中，对水样及稀释水的pH值的测定和调节，以及氧化剂的存在与否，应作为例行检查步骤。

3.4.6BOD5测定的精度

经验表明，城市生活污水的BOD5测定结果虽然不难重复，但总还是在一定范围内波动，具有半定量的性质。而对于工业废水来说，则范围还会大些，这是由于BOD5测定既包括生物化学过程，又包括化学反应过程。同一样品在不同实验室测得BOD计算出的结果很难符合在10％误差之内。

3.5 注意事项

3.5.1水中有机物的生物氧化过程，可分为二个阶段。第一阶段为有机物中的碳和氢，氧化生成二氧化碳和水，此阶段称为碳化阶段。第二阶段为含氮物质及部分氨，氧化为亚硝酸盐及硝酸盐，称为硝化阶段。一般测定水样BOD5时，硝化作用很不显著或根本不发生硝化作用。

3.5.2玻璃器皿应彻底洗净。先用洗涤剂浸泡清洗，然后用稀盐酸浸泡，最后依次用自来水、蒸馏水冼净。

3.5.3在两个或三个稀释比的样品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于1mg/L时，计算结果时，应取其平均值。若剩余的溶解氧小于1 mg/L，甚至为零时，应加大稀释比。溶解氧消耗量小于2mg/L，有两种可能，一是稀释倍数过大；另一种能是微生物菌种不适应，活性差，或含毒物质浓度过大。这时可能出现在几个稀释比中，稀释倍数大的消耗溶解氧反而较多的现象。

3.5.4为检查稀释水和搂种液的质量，以及化验人员的操作水平，可将20毫升葡萄糖－谷氨本标准溶液用种稀释水知释至1000毫升，按测定BOD5的步骤操作。测得BOD5的值应在180－230 mg/L之间。否则应检查接种液、稀释水的质量或操作技术是否存在问题。

3.5.5水样稀释倍数超过100倍时，应预先在容量瓶中用水初步稀释后，再取适量进行最后稀释培养。

4 仪器操作规程

4.1 HW-II型生化培养箱操作规程

4.1.1将电源开关拨至“开”，总电源接通，指示灯亮，机器开始工作。

4.1.2将温度显示拨至“开”，数显表电源接通。

4.1.3将“满”、“测”共用开关拨至“测”位置，然后旋转温度刻度盘，直到数显表显示出所需要的温度值为止。

4.1.4将“满”、“测”共用开关拨至“测”位置，此时数显表显示温度仅是箱内实际温度，此温度将随机器的工作状态而改变，旋转温度刻度盘，直到数显表显示出所需要的温度值为止。当机器达到平衡状态（即不加热，也不制冷时）则数显表显示数值即所需温度值。

4.1.5位于控温旋钮下两个指示灯分别表示加热、制冷的两种工作状态，若开机后，经过一段时间，两者均不亮，则表示箱内温度达到平衡，等于所需温度。由于加热是无级调压形式进行温度补偿，故加热指示灯出现闪烁现象是正常情况。箱内不需照明时，应将面板上的照明开关置于“关”。

4.1.6 电源接通后，调节好所需的温度，控温旋钮不可来回旋转，以免损坏压缩机。取出样品，取出接水盘或调箱内托网的位置时，应将门打开180。。

4.1.7 仪器使用时应注意仪器在有效检定周期内。

4.2 YSI-58型溶解氧测定仪操作规程

4.2.1 使用前准备工作

4.2.1.1检查电极膜安装是否良好（平整无气泡为良好）。

4.2.1.2用软纸吸干电极膜上的水，将电极置于已达到平衡湿度的容器中。

4.2.1.3检查仪器内电池的电量是否足够（仪器无LDBAT时）。

4.3 基本操作步骤

4.3.1 准备和连接好溶解氧电极。

4.3.2 调节“ZERO”钮，使溶解氧O2读数为“0.00”。

4.3.3 开机稳定20 min后，调节“CALIB”校正O2读数为“100.0 %”。

4.3.4 将“SALINITY”控制钮置于被测样品的盐度值处。

4.3.5将电极置于水样瓶中。开启电极上的搅拌开关，即可测定水样中溶解氧，待显示的读数稳定后，该读数为水样中溶解氧测定值。

4.3.6所有样品测试完毕后，电极用蒸馏水冲洗，关闭仪器电源开关于“off”处。

4.4 维护及注意事项

4.4.1若发现电极膜内有气泡或电极膜较脏，必须及时调换电极膜。

4.4.2仪器显示“LOBAT”，则要调换仪器中的电池。

4.4.3关机后再开机，都须重新稳定20 min后再校正，再测量。

4.4.4 保持仪器外部的清洁干净，电极不使用时要安插在装有少量蒸馏水的瓶中，以保持电极处于湿润状态。每月做好仪器维护记录。

4.4.5仪器使用时应注意仪器在有效检定周期内。

五日生化需氧量BOD5测定综合实验

生化需氧量（BOD5）测定综合实验 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。当其污染水域后，这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其它水生生物的死亡。 水体中含有的有机物成分复杂，难以一一测定其成分。人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。 测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0—4℃下进行保存。一般应在6小时内进行分析。若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时间不应超过24小时。 概述 1．方法原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程进行的时间很长，如在20℃培养时，完成此过程需100多天。目前国内外普遍规定于20±1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升（mg/L）表示。 对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1 mg/L以上。 为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气），以便稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐等），以保证微生物生长的需要。 对于不含或少含微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。 本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000 mg/L的水样。当水样BOD5大于6000 mg/L，会因稀释带来一定的误差。 仪器 （1）恒温培养箱（20℃±1℃） （2）5—20L细口玻璃瓶 （3）1000—2000ml量筒 （4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 （5）溶解氧瓶：250ml到300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 （6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。 试剂 1．磷酸盐缓冲溶液 将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4 ·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml。此溶液的pH应为7.2。 2．硫酸镁溶液 将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4 · 7H2O）溶于水中，稀释至1000ml。

生化室作业指导书

生化室作业指导书 文件编号：ZTGRY-1-SH-01~61 第1版 审核： 批准：

生效日期：2014年1月1日 梓潼县工人医院检验科

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修订页

血清总胆红素(T-BIL)测定 1. 实验原理 血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。 英诺华总胆红素试剂是钒酸氧化法，PH接近于3时，在钒酸盐及表面活性剂的作用下，总胆红素被氧化成胆绿素。此时，胆红素特有的黄色减少，通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可求得样品中总胆红素的浓度。 胆红素钒酸胆绿素 2. 标本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。 3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。 4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。 5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：英诺华总胆红素试剂盒（试剂1: 4×32ml；试剂2：8ml） 6.1.1 试剂组成 试剂1： 柠檬酸缓冲液88mmol/L 试剂2： 磷酸盐缓冲液50mmol/L 偏钒酸钠3mmol/L SID 见瓶签 6.1.2 试剂准备：液体试剂，直接使用，无需配制。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。

水中生化需氧量(BOD5)的测定

水中生化需氧量（BOD5 ）的测定 一、实验目的 1、学会测定B OD 5 的方法； 2、掌握实验数据的处理方法。 二、实验要求 1 、了解实验的目的； 2 、学会实验方法和会处理实验数据； 3 、实验之后，懂得其中所涉及的理论知识 三、实验原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物进行的生物化学过程中所消耗溶解氧的量。此生物氧化全过程目前国内外普遍规定于 20 ±1 ℃培养 5 天，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为 B OD5 值，以氧的质量浓度（ m g /L ）表示。 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物，这些有机物在水体中分解时需要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。水体因缺氧造成鱼类及其他水声生物的死亡。 水中所含的有机物成分复杂，难以一一测定其成分，人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。化学测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。在0~4℃下进行保存，一般应在6 小时内进行分析。若需要远距离转运，贮存时间不应超过24 小时。 对于某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧为2 m g /L ，而剩余溶解氧在1 m g/L 以上。为了保证水样稀释后，有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气）使稀释水中溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐）以保证微生物生长的需要。 本方法适用于测定B OD 5大于或等于2 m g /L ，最大不超过6 00 0 m g /L 的水样。当水样 B OD5 大于60 00 m g /L 时，会因稀释带来一定的误差。 四、仪器 1. 恒温培养箱 2. 细口玻璃瓶 3. 大量筒 4. 玻璃搅拌棒，棒的长度应比所用量筒高度长2 00 m m。在棒的底端固定一个直径比底 小，并带有几个小孔的硬橡胶板； 5. 溶解氧瓶为 250~350 m L 之间，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形（每组 8 个）； 6. 虹吸管，供分取水样和添加稀释水用（乳胶管即可）； 7. 酸式滴定管（ 50. 00m L 一个）； 8. 三角烧瓶（ 500m L 一个）； 9. 移液管（ 1 .0 0m L， 2. 00 m L， 100m L 各一个）。 10. 870 型直读B OD 5 测定仪 五、试剂 1. 磷酸盐缓冲溶液取8 .5 g 磷酸二氢钾、 21. 75 g 磷酸氢二钾、 33 .4 g 七水合磷酸氢二钠 和1. 7 g 氯化铵溶于水中，稀释至1 000 m L。此溶液的 pH=7. 2。

第一人民医院生化检验作业指导书

第一人民医院生化检验作业指导书 1.0 目的 规范管理，保证生化检验质量。 2.0 适用范围 本科室人员。 3.0 职责 3.1科主任和生化组长负责仪器维护和试剂管理。 3.2生化当班人员负责生化项目的检脸。 3.3生化当班人员负责仪器使用情况记录和检验结果记 录。 4.0 工作程序 4.1 仪器和试剂管理 按照中文操作手册，科主任和生化检验组长负责调试、管理和维护仪器，使之处于备用状态。根据仪器要求选用有批准文号合格的试剂，并按试剂要求合理保存试剂。 4.2生化项目和检验时间的安排

由本科室根据临床需要和我院实际情况安排项目和时间， 原则上要求急诊项目能随时检验，其它项目能定时检验。 4.3 检验的实施 4.3.1首先医生应根据患者状况和实际病情开各种检验申请单。 4.3.2护士应按检验申请单的项目要求严格收取合格的标本并及 时送检验科。 4.3.3生化检验人员对标本再进一步确认无误后签名，然后对标 本进行分检、离心等处理，使标本处于待检状态。 4.3.4生化检验人员每天在上机前应检查仪器状态，如果仪器处 于“ stand by ”状态，且无红色报警等异常情况，并确 认正常后才能正式运转，如发现断电或死机等问题应及时 向生化组长或科主任汇报，待排除故障，确认仪器正常， 需重新定标，待通过后方可开机检测。 4.3.5生化检验人员根据标本不同、项目不同，按照《全国临床检验操作规程》和试剂说明书及仪器操作规程对标本进行及时，准确检验。 4.3.6生化检验人员正式测定标本前应做质控，质控通过后方可 上机测标本，并将质控结果记录在检验科室内质控记录本

中。生化组长负责项目的编程设定、定标、质控。 4.3.7生化检验人员对检验结果应进行认真核对，审核无误后方 签发报告，对严重异常结果应通知开单医生或科室，及时 了解患者情况，如果病情与结果相一致，基本可以排除操 作中的偶然误差，及时签发报告，如果病情与结果不一 致，应严格检查操作步骤，排除各种操作误差后方可签发 报告，并尽可能要求患者复查。对人为引起标本结果严重 异常者应及时总结经验，防止下次再出现，对仪器引起结 果异常时应及时调校仪器，保证准确检测。凡急诊申请应 在60 分钟内出报告。 4.3.8门诊报告单在发报告单窗口发放，由患者或其亲属 凭发票领取；住院部报告单由科内专人在上午11 点左 右和下午5 点左右发送各临床科室，并由当班医 务人员签收。凡门诊患者非主观原因造成报告单丢 失者，可凭发票到检验科补发报告单，住院患者由主管医 生提出申请，方可补发报告单。 4.4在使用仪器时，使用者应及时记录，发现仪器或结果

生化需氧量的测定(包括DO的测定)

生化需氧量的测定 张浩200812082 环工0803 大气组 一、实验目的及要求 1、了解BOD5测定的意义及掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能； 2、掌握保证准确测定的方法； 二、实验原理 生化需氧量（BOD5）是指在好氧条件下，微生物分解存在水中的有机物质的生物化学过程中所需的溶解氧量。 有机物在微生物的作用下，好氧分解过程两个阶段：第一阶段为含碳物质氧化阶段，主要是含碳有机物氧化为二氧化碳和水；第二阶段为硝化阶段，主要是含氮有机化合物在硝化细菌的作用下分解为亚硝酸盐和硝酸盐。一般硝化反应在5~7天后反应从会明显，故一般在20℃五天培养法测定的BOD值一般不包括硝化阶段。 五天培养法也成标准稀释法或稀释接种法。测定原理为;水样经稀释后，在20℃±1℃条件下培养五天，求出培养前后水样中溶解氧含量，二者的差值为BOD5，单位以的mg/L 表示。 五天培养法实验的必备条件：水体中存在能降解有机物的好氧微生物、有微生物生长所需的营养物质、有足够的溶解氧。 三、实验仪器 1）恒温培养箱[（20+1）℃]； 2）5~20L的细口玻璃瓶； 3）1000mL量筒； 4）玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板； 5）350mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口； 6）虹吸管，供分取水样和添加稀释水用； 四、实验药品 1）磷酸盐缓冲溶液：称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、2.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠（NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶液的pH应为7.2； 2）硫酸镁溶液：称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶于水中，稀释至1000mL； 3）氯化钙溶液：称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释至1000mL； 4）三氯化铁溶液：称取0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O），溶于水中，稀释至1000mL；5）稀释水：在20L玻璃瓶内加入18L水，控制水温在20℃左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气2~8h，使水中溶解氧饱和或接近饱和（20℃时溶解氧大于8mg/L）。使用前，每升水中加入氯化钙溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值应小于0.2mg/L； 6）接种稀释水：接种稀释水配制后应立即使用； 四、操作步骤 1）经稀释的水样的测定：COD的测定在使用重铬酸钾法确定时，通常需要三个稀释比，由COD值分别乘以0.075、0.15、0.225即由此获得三个稀释倍数；在使用接种稀释水时，应分别乘以0.075、0.15、0.225获得三个稀释倍数分别为0、40、80、120倍。本实验使用的稀释水的COD值为500mg/L； 2）根据确定的稀释倍数，用虹吸法把准备好的稀释水（接种稀释水）引入1000mL量筒

风淋室使用操作规程

制定日期 风淋室操作规程 文件编号 生效日期 版次 一、目的 本规程用于保证风淋室正确、安全的使用，确保其使用寿命。 二、适用范围 本规程适用于指导本公司风淋室的操作，防止安全事故及对设备进行保养。 三、操作流程 1、风淋步骤 1.1进入车间的人员应在外更衣室穿戴好静电服、静电鞋和无尘帽。 1.2走近风淋室外门，确认风淋室内没有其他人员，风淋室门外部亮起绿色的指示灯“GO ”， 否则不得打开风淋室外门。 1.3打开外门，进入风淋室后并随手关闭外门。 1.4走过风淋室红外感应探头，此时风淋室双门自动上锁，同时风淋室风机启动，开始吹淋。 1.5按设定的时间吹淋完毕后，打开风淋室内门进入车间。 2、风淋参数设定（非设备人员不得擅自更改参数设定） 2.1电源键：控制风淋室的电源，风淋过程中如有特殊情况可按“电源键”结束风淋，并迅速 离开风淋室。 2.2风机键：按该键可执行一次风淋循环。 2.3照明键：控制风淋室内照明灯的开启和关闭。 2.4设置键：按该键结合“+”、“-”键可分别对风淋时间、照明时间、屏保时间、间隔启动 进行时间长度短的设定。 四、注意事项 1、进出门时必须轻拉推门把手，不要将门的开度打开至极限，以免造成门、门锁的损坏。 2、在一门打开状态下决不要用力开另一门。 3、在吹淋状态，不得强制性地将门打开。 4、吹淋结束后请等待2s 以上时间再开门。 批准： 审核： 编制： 红外感 应探头 2.1 2.2 2.3 2.4 绿灯亮起才能进入风淋室。

制定日期 风淋室操作规程文件编号生效日期版次五、保养维护 1、每天由制造部负责对风淋室地板和侧壁进行清洁。对风淋室的照明灯、指示灯的功能进行确认， 发现异常要及时通知设备部检查和维修。 2、当发现风速变小时，按图示1取下初效过滤器检查表面是否发黑，若发黑则应拆下初效空气 过滤器内的无纺布进行清洗或予以调换。每月由设备部检查一次。 3、当调换或清洗无纺布后，仍不能提高风速则说明高效空气过滤器已经堵塞，可按图示2、3取 下高效过滤器进行更换。更换高效空气过滤器时，须拆下喷球板，取出高效过滤器，按照原 有高效过滤器的规格型号更换新的高效空气过滤器。安装时应确认高效过滤器上的箭头标记， 箭头应指向气流的方向，并确保密封良好，防止渗漏。一般情况下，高效过滤器的使用期为 两年。每年由设备部检查一次。 4、每年由设备科对风淋室的电路、控制面板、离心风机等进行功能确认。发生故障要及时维修。 批准：审核：编制：3 2 1

生化企业化验室设备操作规程概要

化验室设备操作规程

SH220石墨消解仪 一、设备参数 二、操作方法 1、接通电源，打开仪器开关。 2、通过控制面板设定所需温度并按确认键。 3、当实际温度显示屏达到所需温度时，放入样品即可。 4. 实验结束后，关闭仪器电源，等待冷却。 K9840凯氏自动定氮仪 一、设备参数 二、操作方法 1、化学试剂的准备 (1)将蒸馏水加入到蒸馏水桶中，并将瓶盖拧紧。 (2)配置30%~40%的氢氧化钠溶液，加入到碱液桶内，并将桶盖拧紧。 (3)配置2%的硼酸溶液，加入到硼酸桶内，并将瓶盖拧紧。 2、调试 将冷却水管接在水龙头上，并打开自来水，检查设备是否漏水。打开设备，换上一个空的消解管和三角瓶，关闭防护门后，选择自动，连续确认三次后，观察设备运行是否正常。

3、检测 设备试运行正常后，关闭防护门，选择＂自动＂，连续确认三次后，对样品进行蒸馏。 三、注意事项 1、仪器使用前首先确认蒸馏水桶、碱液桶、硼酸桶内液体是否充足，如不足需补充。 2、排废液的管路出口要比仪器安放的高度要低，以便排液通畅。 3、仪器长期不用，应将碱液管路中的碱液排除，并加入清水。 YP202N型电子天平 一、设备参数 二、操作方法 1、调水平。 2、开机，按开机键开机，预热30min。 3、样品称量。 4、关机 称量完毕，按关机键关机，拔下电源。 三、注意事项 1、将天平置于稳定的工作台上，避免振动，阳光直射和气流。 2、经常使用天平时，应使天平连续通电以减少预热时间，使天平处于相对稳定状态，如果天平长期不用应关闭电源。

3、天平以保持清洁，谨防灰尘等无钻入天平。不应该放在有腐蚀性气体的环境中。 4、根据天平的使用程度，应作周期性的检查校准。 AL204电子分析天平 一、仪器参数 二、操作方法 1、调水平。 2、开机，按开机键开机，预热30min。 3、样品称量。 4、关机 称量完毕，按关机键关机(或一段时间不用后自动关闭显示器)，拔下电源。 三、注意事项 1、将天平置于稳定的工作台上，避免振动，阳光直射和气流。 2、经常使用天平时，应使天平连续通电以减少预热时间，使天平处于相对稳定状态，如果天平长期不用应关闭电源。 3、天平应保持清洁。不应该放在有腐蚀性气体的环境中。 4、根据天平的使用程度，应作周期性的检查校准。 JA2003N电子天平 一、仪器参数

TBA-40FR全自动生化分析仪标准化操作规程

芜湖县中医院检验科第 1 页共 4 页全自动生化分析仪标准化操作规程 【目的】 描述东芝TBA-40FR全自动生化分析系仪的使用和维护，以保证检验质量。 【适用范围】 适用于TBA-40FR 全自动生化分析仪的操作和维护。 【开机前准备】 1．打开去离子水机电源开关，确认去离子水的设施运转正常； 2．确认废水管道的软管接到下水道；倒空高浓度废液桶； 3．打开系统前面的板，检查泵、水路系统是否漏水，特别注意管道顶端，弯 曲处和连接处。检查后请关好系统前面板； 4．确认在试剂仓的1号位置放入未稀释的恒温槽添加剂；2号和56号位置放入1%稀释的碱性清洗液； 5．检查样品针、试剂针、搅拌器、清洗针有无裂缝、折断和弯曲。 6．确认放置了足够数量的打印纸 【开机】 按下[POWER]电源开关，初始化后出现启动状态的画面，按下[POWER]电源开关。初始化后出现启动状态的画面，启动结束后按下确认键，仪器开始自动清洗。 ），检查各试剂瓶中的剩余体积，添加不足在主菜单下打开画面12（REAGENT MAP 试剂。 【关机】 当一天所有的测试完成的时候，按维护和保养第一条“清洗试剂和样品管路 清”先管路。清洗结束后检查并确认各部件无异常，按[POWER]电源开关，关闭仪器。 【项目参数设置】 主菜单画面下→4→2进入参数设置，根据试剂厂家提供的参数输入相应位置。设置好参数后按EXIT退出。

芜湖县中医院检验科第 2 页共 4 页 【校准】 在主菜单→[13][确认]，显示标准界面扫方向键移动光标至要校准的项目。 1．终点法：直接按ENTER键选中，然后在参数设置界面中设置校准物放置位 置及标准物浓度，将标准品放入样品盘中圈相应校准位。按START键开始校准 2. 因数法：先按PF6然后再按ENTER键选中，按START键开始校准 【质控】 将中值质控样品设置成1号样本号，高值质控样品设置成2号样本号，质控 品当成普通样品进行检测，检测结果自动在LIS系统生成质控图。质控结果处理 参照《生化室内质控标准操作程序》。 【样品检测步骤】 1．常规样品的测定 （1）将待测样品放入样品盘中。主菜单画面下→[15][ENT]，按PF3键光标在样品位置处闪烁，输入样品位置号（1-40），按[ENT]确认，输入样品编号 （1-32000），按[ENT]确认，按PF8或向下的方向键，在项目菜单中选择实验： ①单个实验选择：将光标移到欲选择的实验位置，按[ENTER]键，如同一样品需选择2个或更多实验，重复上述步骤。 ②选择项目组合中的组合编号（1-48），按[ENTER]键。 ③批量输入相同实验项目：按上述①或②选择好实验项目后，按PF5键此时在屏幕右下角光标闪烁，输入要结果的样品编号按[ENTER]键 （2）设定下一个样品时，按[PF8]将光标移到下一个样品位置，重复上述步 骤 2．急诊样品测定 按[STAT]急诊键，出现急诊画面。如果此时正进行其他测试，当按下[STAT]键后，[PAUSE]键指示灯亮。显示急诊画面时，选择实验项目方法同常规样品①～③，按[PAUSE]急诊样品开始测定 3．样品信息录入 在样品检测前打开LIS系统，输入工号和密码登记LIS系统，根据申请单录 入被检者信息，包括姓名、年龄、性别、科别、类型、医生姓名。录入完毕核对

6.生化培养箱期间核查作业指导书

生化培养箱期间核查作业指导书 1. 期间核查的目的： 为了检查生化培养箱的温度示值偏差、温度均匀度、波动性，确认仪器的可靠性，使其保持良好的运行状态，从而保证本实验室所得到的测量结果准确可靠。 2. 期间核查的条件： 2.1环境条件：温度5~30℃，相对湿度≤80%，大气压86kPa~106kPa 。 2.2 控制温度范围及精度：0~65℃，温度均匀性允差：±0.8℃，温度波动性允差：±0.3℃。 3. 期间核查的频率：生化培养箱使用频繁时，每季度一次，仪器使用不频繁时，可适当减少核查的频次。 4. 核查项目和核查方法： 4.1 外观核查：外观完好；铭牌上标有仪器的名称、型号、制造厂名（或厂标）、出厂编号、玻璃毛刺回流管无破损。 4.2核查方法： 核查温度点一般选择在设备的中层的四个角落与中心点（共5个点），测试点与内壁的距离不小于各边长的1/10。中心测试点应在恒温培养箱的几何中心。 将已检定的精确度为0.2℃温度计分别放置在测试点上，打开电源，将恒温设备的温度值设定值核查值。 待设备工作室温度稳定后，开始记录温度计的温度，每隔2min 记录一次数据，连续进行10次。 4.3 温度示值偏差计算公式：d X ?=d X —0X 。 式中：d X ?—温度偏差，℃； d X —设备显示的温度值，℃； 0X —中层测试温度的10次平均值，℃。 4.4温度均匀度：n X X X n i i i u ∑-= ?)2/)((min max 式中：u X ?—温度均匀度，℃； m a x i X —各测试点在第i 次测得的最高温度，℃； min i X —各测试点在第i 次测得的最低温度，℃； n —测定次数。 4.5温度波动性：X ?=±（X max -X min ）/2

五日生化需氧量作业指导书

五日生化需氧量 作业指导书 ( 依据标准: GB/T7488-1987 ) 1含义及有关质量或排放标准 1.1 五日生化需氧量含义 五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。条件为20±1°C 培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。 1.2 五日生化需氧量(BOD5)的地表水质量1或污水排放标准2-3 注：1-地表水环境质量标准（GB3838-2002） 2-中华人民共和国污水综合排放标准（GB8978-1996）

3-上海市污水综合排放标准(DB31/199-1997) 2分析方法稀释接种法(GB7488-87) 2.1 适用范围 本方法适用于BOD5大于或等于2mg/L并且不超过6000 mg/L的水样。BOD5大于6000 mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。 本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。 本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。水中的藻类或硝化微生物也可能告成虚假的偏高结果。 2.2 定义 生物化学需氧量（BOD）：在规定条件下，水中有机物和无机物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。 2.3 原理 将水样注满培养瓶，瓶盖塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。

检验医学SOP文件生化室作业指导书

生化室作业指导书 文件编号：ABCD-3-SF-01~61 第A版 编制： 审核： 批准： 生效日期：2015年4月8日ABCD人民医院检验科

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血清总胆红素(T-BIL)测定 1. 实验原理 血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。 申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。 胆红素+DCA 红色偶氮化合物 表面活性剂 2. 标本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。 3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。 4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。 5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂1＋试剂2） 6.1.1 试剂组成 试剂1：6×64 ml 磷酸缓冲液40mmol/L 氯化钠9g/L 表面活性剂,稳定剂适量 试剂2：6×16 ml 2,4-二氯苯胺重氮盐1mmol/L 盐酸30mmol/L 表面活性剂适量 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存

生化专业作业指导书(DOC)

检验科生化作业指导书依据《全国临床检验操作规程第三版》编制 编写人：徐永红 审核人：沈爱军 批准人：徐永红 批准日期：2011年10月19日 安阳鼎城糖尿病医院检验科

批准令 本检验科生化作业指导书第一版(文件号：SH20111019)已编写审订完成，现向全科发布执行。本文件为检验科质量手册的支持性文件，是本科质量目标和质量方针得以贯彻执行的重要保证，本科所有工作人员均必须遵照执行。 本文件依据《全国临床检验操作规程第三版》、KHB卓越450全自动生化分析仪用户手册、试剂盒说明书和《临床生化和生化临检第三版》编写。 批准人：徐永红 批准日期：2011年10月19日

目录： 第一章总论 6 第一节生化实验室工作流程 6 第二节生化实验室日常工作程序 7 第三节生化实验室记录表单 8 第四节生化实验室设备清单 9 第二章卓越450全自动生化分析仪标准化操作规程 10 第一节卓越450全自动分析仪主机操作规程 10 一. 前言 11 二．仪器的使用环境要求 11 三．仪器的安全使用要求 12 四．仪器的操作 12 五．仪器的校准 47 六．维护保养 47 七、相关文件 48 第一章水机 39 第二章生化实验室各检验项目分述 40 第一节钙Ca （偶氮胂Ⅲ法） 40 第二节二氧化碳CO2CP （酶法） 42 第三节尿素（BUN）（尿素酶法） 45 第四节尿酸（UA）（尿酸酶法） 48

第五节糖Glu 葡萄糖氧化酶法 51 第六节肌酐Cr 苦味酸法 54 第七节丙氨酸氨基转移酶ALT(GPT) IFCC速率法 57 第八节天冬氨酸氨基转移酶AST IFCC速率法 60 第九节碱性磷酸酶ALP IFCC速率法 63 第十节γ-谷氨酰转肽酶γ-GT IFCC速率法 66 第十二节总蛋白TP 双缩脲法 72 第十三节白蛋白ALB 溴甲酚绿法 75 第十四节总胆红素Tbil 重氮法 78 第十五节直接胆红素Dbil 重氮法 81 第十七节总胆固醇Tch 胆固醇氧化酶法 87 第十八节甘油三酯TG 酶法（GPO－PAP法） 90 第十九节高密度脂蛋白胆固醇HDL－C 直接一步法 93 第二十节载脂蛋白A1 APOA1 免疫透射比浊法 96 第二十一节载脂蛋白B APOB 免疫透射比浊法 99 第二十三节肌酸激酶CK DGKC速率法 105 第二十四节肌酸激酶同工酶CK-MB 免疫酶抑制法 108 第二十五节羟丁酸脱氢酶α-HBDH 速率法 111 第二十六节乳酸脱氢酶LDH IFCC速率法L→P 114 第二十七节磷P 直接紫外法 117 第四十一节淀粉酶 158

临床生化室内质量控制SOP文件

临床生化室内质量控制操作规程 【目的】检测、控制生化室测定工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高常规测定工作检测结果的一致性。 【范围】生化室开展的定量测定项目。 【使用仪器】TBA-40FR生化仪、AC9900电解质分析仪 【职责】 1、检测人员：负责每天室内质量控制的实施、记录、质控图的绘制、失控原因分析及处理。 2、组长：负责监督本组内各项目是否按照程序文件和作业指导书中有关检验过程质量控制程序的要求进行。负责制定本组室内质控规则，质控计划，以及失控时纠正措施，定期总结，归档保存记录。 【工作程序】 1、质控血清的先选择： 选用Randox定值、冻干质控血清（中值和高值两个水平的质控物分别为正常水平和病理水平）作为室内质控品。 2、质控物的使用： （1）未复溶质控物的保存：按说明书要求，将未复溶的质控血清保存在2-8度冰箱内 （2）复溶：按照说明书，室温条件下，用稀释器准确吸取5.0ml去离子水溶解，盖上瓶盖，放置30分钟，待其完全溶解。 （3）保存：复溶后的质控血清中一般项目在2-8℃可稳定三天。完全溶解好的质控血清充分混匀后，用离心管分装成500ul一只置-20℃冻存，两周内有效，临用前融化一支作为当天的质控物。 3、质控的要求： ①每天在检测标本前先检测质控品，质控结果在控后才开始检测病人标本。 ②严格按质控品说明书操作和保存。

③不使用超过保质期的质控品。 ④质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定。 ⑤每日工作前用正常和异常两个水平各一次。 3、靶值的确定 （1）临时靶值的建立： 新批号的质控品应与当前使用的质控品一起进行测定。根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果，对数据进行离群值检验(剔除超过3SD外的数据)，计算出平均数，以此均值作为临时靶值。以此暂定靶值作为下1个月室内质控物的靶值进行室内质量控制。 （2）变动靶值阶段： 以后每月结束后，统计一次结果，将该月的在控结果与以前的所有质控数据汇集在一起，计算累积平均数，作为下一月的靶值和标准差。 （3）固定靶值和标准差的建立： 以最初20个数据和最初3-5个月在控数据在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数作为质控品有效期内的固定靶值，并以此作为以后室内质量控制图的中心线。 4、控制限的设定 （1）临时标准差的建立： 以确定临时靶值时的20个数据的标准差作为临时标准差，以此临时标准差作为下一个月室内质控图的标准差，进行室内质控。两个浓度水平的标准差（SD）、变异系数（CV%）。 （2）变动标准差阶段： 一个月结束后，将该月的在控结果与以前质控数据汇集在一起，计算累积标准差。作为下一月质控的标准差。 （3）固定标准差的建立： 以最初20个数据和最初3-5个月在控数据的累积标准差作为质控品有效期内的固定标准差，以后每个月的室内质控图的标准差使用该值。 5、绘制质控图及记录质控结果

水中五日生化需氧量(BOD5)的测定(标准操作规程作业指导书)

1.适用范围 本测定规程规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。 2.测试原理 在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4 h或（2+5）d±4 h[先在0~4℃的暗处培养2 d，接着在（20±1）℃的暗处培养5 d，即培养（2+5）d]，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5的形式表示。 3.仪器设备 3.1 生化培养箱：20±1℃。 3.2 溶解氧仪：0~20 mg/L。 3.3 曝气装置。 3.4 溶解氧瓶：300 mL。 3.5 滤膜：孔径为1.6 μm。 3.6 一般实验室常用仪器和设备，玻璃容器需符合国家A级标准。 4.试剂 除非另有说明，分析时均用符合国家标准的分析纯试剂。 4.1 一级水，文中所说的水均指一级水。 4.2接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。也可按以下方法获得接种液。 4.2.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于300 mg/L，总有机碳不大于100 mg/L。 4.2.2 含有城镇污水的河水或湖水。 4.2.3 污水处理厂的出水。 4.2.4 分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种液。也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生活污水，使适当该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，可用作接种液。一般驯化过程需

OLYMPUS AU400全自动生化分析仪标准操作规程

OLYMPUS AU400全自动生化分析仪标准操作规程 【目的】 建立OL YMPUS AU400全自动生化分析仪标准操作规程，确保仪器正确使用，使实验结果真实可靠。 【范围】 用于OL YMPUS AU400全自动生化分析仪的操作。 【职责】 1.仪器负责人负责仪器的正确使用及维护，确保检测结果的准确性。 2.仪器操作人员负责具体执行本操作规程。 【程序】 一、运行条件 1.安装环境 为保证仪器的正常运行，仪器必须在满足下列各条件和维持相应环境的情况下使用： 1)没有阳光直接照射，灰尘非常少、通风好的环境。 2)地面平坦（少余1|200），地面承重485kg。 3)室内温度保持在18-32摄氏度，工作时波动小于±2摄氏度。相对湿度保 持在40-80%RH并无冷凝。 4)不能有身体可觉察的振动。 5)系统应安装在距配电盘10m以内。 6)电源电压AC200V±10% 50HE 功率：3.5KV A 。 7)连接地线，以防止电击和仪器故障。（接地电阻小于100Ω） 8)去离子水器及排水孔应安装在距仪器10m内，水压：0.49×105 到3.92 ×105 Pa 9)排水管距地不得高于0.1m。 10)在仪器安装的房间关闭手机及收发报机，勿将有不正常噪声的设备放在 仪器附近。 2.安全条款 以下是AU400自动分析仪的警告、注意事项，如不遵守，使用者会有生命危险或造成伤害的可能性，也可能损害物品。为安全有效的使用仪器，请遵守下列事项： 1)设备必须按照要求的安装环境和安装条件正确安装，防止仪器破损或燃 烧。 2)决不移动盖上的镙丝，如后档板和侧板的镙丝，避免被仪器电击伤。 3)如发生液体溢出或泄漏到仪器内，联系OLYMPUS技术部门，对液体轻 率的操作可能导致电击。 4)更换灯泡时，关闭电源5分钟后再换。在灯泡冷却前请勿接触灯泡，以 免烫伤。 5)在仪器操作过程中，不要触动仪器的动作部件，不要将手指或手插入敞 开的地方。 6)仪器在开启状态时，请不要直接用眼睛看光源及激光条码读数器，光源 和激光束可能导致眼睛损伤。 7)若手或衣服接触到了强酸、强碱性试剂或发生感染的样品，立即用肥皂 和水清洗，若溅进眼中，立即用大量水冲洗至少15分钟，必要时应向医

组培室无菌化操作规程

无菌操作 一、接种室的消毒 1、每天开始工作前用75%酒精喷雾自己周围环境。 2、一天的工作结束后，值日、值班人员要对培养基储存间、三个接种室、两个培养室及风淋室进行紫外灯及臭氧灭菌20~30min。 3、风淋室两个门随时关紧，灭菌间和储存间之间的门除了放培养基外不得随意开门。风淋室与接种间之间的门要随时关闭！接种四人间对着的门绝对不允许开！ 二、无菌操作要求 1、在一楼换各自的护士鞋。 1、进实验室首先要穿过风淋室吹风，换工作服，换拖鞋，戴好帽子、把头发全部包进去、不许有头发留在外面，之后进入实验室。 2、自己的工作服、帽子一周清洗一次。口罩要保持干净。 4、必须剪除长指甲，接种时用75%酒精擦洗。 5、接种时禁止谈话并戴上口罩。 6、接种过程尽量减少工作人员在接种室的走动。 三、接种前应做好相应的准备工作 1、超净台紫外灯灭菌20min，值日值班人员提前10min 开台子。 2、打开高温灭菌消毒器，温度达到200℃左右时可以使用。 3、此时将当天或某时间段所需要的原瓶苗、培养基、盘子、一瓶无菌水及放置瓶盖的空框子准备好，待紫外灯关闭5min后进入接种室， 4、将事先准备好的原瓶苗及其他物品放到医用小推车上（有条理的

摆放，便于在操作时使用）。 5、于8：20之前和14:50之前进入操作室超净台前进行接种工作。 四、具体的无菌操作步骤如下： 1、首先要拉下超净台挡风板，隔离人体和无菌苗，减少菌的发生。 2、操作前要用酒精喷壶喷洒超净台并用抹布擦干净。 3、将两把解剖刀和镊子放入灭菌消毒器内进行2~3min灭菌，之后放在灭菌支架上，冷却或不烫手的情况下使用。每做完一瓶无菌分化材料，都应将刀子镊子进行灭菌，否则会引起交叉污染。 3、器具及用品（盘子、培养基、原瓶苗）用酒精喷壶消毒之后，放在超净工作台面上待用（台内只放无菌器具和用品）。盘子在酒精消毒后，小心地打开报纸，反扣在台面上，手不要触碰碟子，否则碟子会积聚菌，导致瓶苗污染。 4、操作前要检查好所取苗子是否为无菌苗，在发生真菌性污染（在培养基表面有粉状、毛状菌）、细菌性污染（在培养基表面有油状、浓状菌斑）时要将瓶苗放在一边，不可以打开瓶盖，以免发生超净台环境污染。 5、用镊子夹无菌碟并小心放到酒精灯右前方（忌用手拿碟子）。 6、将消毒后的镊子（左）和刀子（右）架在无菌碟上 7、打开瓶盖对无菌分化苗瓶口进行火焰灭菌（打开的瓶盖右手扔进空框里），左手托着瓶身，瓶口斜对着酒精灯火焰，瓶身由里向外旋转2~3圈即可。 8、用镊子夹分化苗放入无菌碟中。分化苗多的情况下可以分两次放

水五日生化需氧量(BOD5)的测定

实验五水五日生化需氧量（BOD5）的测定 1 目的 1.1 理解BOD的含义及测定条件； 1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。 2 方法原理 生物化学需氧量(BOD)定义为：在规定的条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量。该过程进行的时间很长，如在20℃培养条件下，全过程需100天，根据目前国际统一规定，在20±1℃的温度下，培养五天后测出的结果，称为五日生化需氧量，记为BOD5，其单位用质量浓度mg/L表示。 对于一般生活污水和工业废水，虽然含较多有机物，如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气，就可以将样品直接进行测定，但为了保证微生物生长的需要，需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。 某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等，测定前应接入可以分解水中有机物的微生物，这种方法称为接种。对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，可以将水样适当稀释，并用驯化后含有适应性微生物的接种水进行接种。 一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗氧量和少量无机还原性物质的耗氧量。由于许多二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中，往往含有大量硝化微生物。这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。为了抑制硝化作用的耗氧量，应加入适量的硝化抑制剂。 3 适用范围 BOD5为2—1000mg/L水样，超过1000mg/L的水样，应适当稀释。 4 主要仪器及设备 使用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗，防止油污、沾尘。玻璃器皿干燥后方能使用。 常用实验室设备如下： 4.1 生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。 4.2 充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。 4.3 BOD培养瓶：容积550±1mL。

公司环境卫生及员工行为规范

公司环境卫生及员工行为规范 1.目的 １．1。教育和帮助从事食品包装生产的所有人员了解包装与食品卫生关系，遵守良好的生产、工作、卫生规范,特别是有关个人外表清洁、身体健康和环境卫生准则，使生产的产品符合公司的质量品质要求，实现公司质量方针。 1．2。提高员工的自我保护意识，爱护产品，爱护个人和他人的身体健康.２．范围 2.１本作业指导书从个人清洁管理、现场环境卫生管理二个方面，规范要求所有车间部门达到管理目标。 3．规范要求 3。１个人清洁和行为管理 个人清洁要求按照生产系统人员、行政系统人员、外来人员区分. 生产系统人员包括：车间操作员工、辅助员工和车间管理人员、QＣ检验员、设备维修人员、仓库人员。 行政系统人员包括：生产系统以外的各科室人员、销售人员、高级管理人员。外来人员包括:各供应商、客户、外协作人员、政府机关人员等公司员工以外人员。 3。1。1 生产系统人员 ３.1．1.1要求 A.按照公司规定进生产车间必须着统一工作服装,戴好工作帽，穿好工作鞋。工 作服装、帽、鞋都要保持干净，做到每8天至少洗涤一次，鞋每１6天至少洗涤一次;工作帽必须戴正,并且将头发包裹在内，对于留长发的员工（不论男女性别）必须将头发扎起后放入工作帽中；工作服装穿戴不许坦胸露腹，应该扣好扣子（或拉练拉好)至胸袋以上，工作裤不得卷裤腿；工作鞋应该穿好,不得拖鞋皮、光着脚穿鞋,出车间换自己的鞋。进入车间者必须洗手消毒，按《洗手、消毒规范》执行。 B.严禁任何人员在生产区域内吃食物、饮料、吸烟、吐痰。严禁在生产现场使 用喷发胶、指甲油、护手霜等化妆品.生产现场员工不能留长指甲不允许佩戴假指甲,不应佩戴首饰和手表，但平滑的结婚戒指、结婚手镯和连续的耳环除外。 3．１。1。２检查和处罚 日常检查由各车间主管和助理执行,生产部主任和人事行政部及厂长高级管理人员进行抽查。对于３.１.1。1中一般不符合者,由各车间主管或助理责令其更换或整改后才能进入，否则不得入车间；车间的打扫由各生产主管负责安排在生产间隙进行环境打扫有记录，并且进行卫生检查；每个工作日由部门领导牵头安排全公司的厂纪厂规检查，对于不符合者按照公司处罚制度由人事行政部执行。3。１．2行政系统人员 3.１．2。1要求 Ａ. 到生产现场必须戴工作帽或一次性帽子，穿着公司统一的工作服装才能进入车间；工作帽必须戴正，并且将头发包裹在内，对于留长发的(不论男女性别）必须将头发扎起后放入工作帽中.进入车间必须穿好鞋套（或工作鞋)、洗手消毒。 B。严禁在生产区域内吃食物、饮料、吸烟、吐痰.严禁在生产现场使用喷发胶、指甲油、护手霜等