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实验六 淀粉酶动力学分析

实验六淀粉酶动力学分析(Ⅰ)

——DNS法葡萄糖标准曲线的制作及不同pH和温度条件下的淀粉酶活力测定(4学时)

第一部分3, 5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量

一、实验目的

学习3, 5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的原理。

掌握3, 5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的方法。

二、实验原理

在NaOH和丙三醇存在下,3, 5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540 nm 波长处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。

三、实验器材与试剂

实验器材

1. 722分光光度计

2. 电子天平

3. 恒温水浴锅

4. 1.5KW电炉

5. 18×180 mm试管

6. 40孔试管架

7. 100 mL容量瓶

8. 500 mL棕色试剂瓶;棕色及无色250 mL试剂瓶;无色200 mL试剂瓶;

50 mL棕色试剂瓶

9. 100 mL量筒

10. 200 mL烧杯、500 mL烧杯

11. 1 mL吸量管、2 mL吸量管、5 mL吸量管、10 mL吸量管

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