实验六 淀粉酶动力学分析
实验六淀粉酶动力学分析（Ⅰ）
——DNS法葡萄糖标准曲线的制作及不同pH和温度条件下的淀粉酶活力测定（4学时）
第一部分3, 5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量
一、实验目的
学习3, 5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的原理。
掌握3, 5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的方法。
二、实验原理
在NaOH和丙三醇存在下，3, 5-二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540 nm 波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。
三、实验器材与试剂
实验器材
1. 722分光光度计
2. 电子天平
3. 恒温水浴锅
4. 1.5KW电炉
5. 18×180 mm试管
6. 40孔试管架
7. 100 mL容量瓶
8. 500 mL棕色试剂瓶；棕色及无色250 mL试剂瓶；无色200 mL试剂瓶；
50 mL棕色试剂瓶
9. 100 mL量筒
10. 200 mL烧杯、500 mL烧杯
11. 1 mL吸量管、2 mL吸量管、5 mL吸量管、10 mL吸量管
12. 纱手套
13. 玻璃棒
14. 滤纸
15. 称量纸
16. 橡皮筋
17. 化学试剂：3, 5-二硝基水杨酸、NaOH、丙三醇、葡萄糖均为分析纯
实验试剂
1. 3, 5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5 g DNS溶于少量蒸馏水中，移入1000 mL容量瓶中，加入2 mol/L NaOH溶液325 mL，再加入45 g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000 mL（老师准备）。
2. 葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200 mg，加入少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100 mL，即含葡萄糖为2.0 mg/ mL（学生配制）。
3. 样品糖溶液：0.2-1.8 mg/ mL(老师准备)。
4. 250 mL蒸馏水装于250 mL无色试剂瓶中（学生准备）。
四、实验方法
1. 葡萄糖标准曲线的制作
取11支18×180 mm试管，按下表分别加入2.0mg/ mL葡萄糖标准溶液和蒸馏水，实验组做两组平行实验。
在上述试管中分别加入DNS试剂2.0 mL，试管用橡皮筋扎好，于沸水浴中加热2 min进行显色，取出后在盛有冷水的500 mL烧杯中冷却（注意换冷水），各加入蒸馏水9.0 mL，摇匀，以空白管为调零点，在540 nm波长测定吸光度值。以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线（采用excel 中的散点图法作图，注意坐标单位和作图格式）。
2. 样品中还原糖测定
取3支18×180 mm 试管，分别按下表加入试剂。
在加入上述试剂后，于沸水浴中加热2 min 进行显色，取出后在盛有冷水的500 mL 烧杯中冷却（注意换冷水），各加入蒸馏水9.0 mL ，摇匀，以空白管为调零点，在540 nm 波长测定吸光度值，从标准曲线查出葡萄糖的含量。
管号
项目
1
2
3
4
5
葡萄糖标准溶液（mL ） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水（mL ） 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 葡萄糖含量（mg /mL ） 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 DNS 溶液（mL ）
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
沸水浴2 min 后冷却
蒸馏水（mL ） 9 9 9 9 9 9 OD 值
管号
项目 对照 样品
0 1 2 蒸馏水（mL ） 1.0 0 0 样品溶液（mL ） 0 1.0 1.0 DNS 溶液（mL ）
2.0
2.0
2.0
沸水浴2 min 后冷却
蒸馏水（mL ） 9 9 9 OD 值
葡萄糖含量（mg /mL ）
3. 样品还原糖含量的计算
还原糖含量（mg/ mL）=CX
C——从葡萄糖标准曲线中读得的葡萄糖含量，mg/ mL；
X——样品的稀释倍数，此处为1。
第二部分PH对酶活性的影响
一、实验目的
了解pH对酶活性的影响
学习测定酶最适pH的方法
二、实验原理
酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值，成为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时，酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH值不同，例如，胃蛋白酶的最适pH为1.5-2.5，胰蛋白酶的最适pH为8等。
应当指出，酶的最适pH受底物性质和缓冲液性质的影响。例如，α-淀粉酶的最适pH约为6.8，但在磷酸缓冲液中，其最适pH为6.4-6.6，在醋酸缓冲液中则为5.6。淀粉酶活力以淀粉酶酶解淀粉形成还原糖的能力表示。
三、实验器材与试剂
实验器材
1-16. 见本实验第一部分
17. 化学试剂：可溶性淀粉、柠檬酸、磷酸氢二钠均为分析纯，α-淀粉酶
实验试剂
1. 0.2M磷酸氢二钠溶液（共6000 mL）
2. 0.1M柠檬酸溶液（共6000 mL）
3. 不同pH磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制：按下表分别配制pH 3.0、
4.0、
5.0、
6.0、
7.0、
8.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液各800 mL，用于1%淀粉溶液的配制。
组成
0.2 M磷酸氢二钠（mL）0.1 M柠檬酸（mL）
缓冲液pH
3.0
4.11 1
5.89
4.0 7.71 12.29
5.0 10.30 9.70
6.0 12.63
7.37
7.0 16.47 3.53
8.0 19.45 0.55
4. 1%淀粉溶液：称取1 g可溶性淀粉于200 mL烧杯中，用5 mL pH分别为3.0、4.0、
5.0、
6.0、
7.0、
8.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液调成糊状。另取200 mL烧杯，盛入95 mL 3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，于电炉上烧开，倒入60 mL缓冲液于盛有淀粉糊的烧杯中，搅拌均匀，继续煮开并搅拌至透明状，冷却后转至100 mL容量瓶中，用剩余缓冲液荡洗烧杯，合并于容量瓶中，最后用蒸馏水定容至刻度（老师准备）。
5. α－淀粉酶：活性为2000 u/mL(常用单位为u：1酶活力单位为50℃，pH5.0条件下，1分钟液化可溶性淀粉1 mg成为糊精所需要的酶量；而国际单位为IU：分解或生成1 umol底物或产物所需要的酶量)的中温α－淀粉酶，用蒸馏水（应用不同pH的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释，但考虑到同学们分别配制不方便，故用蒸馏水稀释，这对酶反应体系pH有一定影响，但由于淀粉溶液为缓冲液配制，且量为酶液的三倍，故对反应体系pH影响不是很大）稀释1000倍（老师准备）。
5. DNS试剂：见本实验第一部分（老师准备)
四、实验方法
取13支干燥的18×180 mm 试管，按下表编号，实验组做两组平行试验，加入不同pH 的淀粉溶液和α-淀粉酶溶液（mL ），50℃反应10分钟，反应液稀释一定倍数（约10倍，取1 mL 反应液，加9 mL 蒸馏水，混匀），取1 mL ，加DNS 试剂，于沸水浴中加热2 min 进行显色，取出后在盛有冷水的500 mL 烧杯中冷却（注意换冷水），各加入蒸馏水9.0 mL ，摇匀，以空白管为调零点，在540 nm 波长测定吸光度值，从标准曲线查出葡萄糖的含量，算出酶活力。
管号
项目 0
1
2
3
4
5
6
pH
5.0 3.0 4.0 5.0
6.0
7.0
8.0 1%淀粉溶液（mL ）
3
3 3 3 3 3 3 α-淀粉酶溶液（mL ） 1（煮沸
灭活）
1
1
1
1
1
1
50℃反应10分钟，稀释一定倍数（约10倍），取1 mL 用于DNS 反应。 DNS 溶液（mL ）
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
沸水浴2 min 后冷却
蒸馏水（mL ） 9 9 9 9 9 9 9 OD 值
葡萄糖含量（mg
/mL ）
酶活力（IU/ mL ）
α-淀粉酶酶活力计算公式为（IU/mL ）：
1241000
18010
C X X ?????
C ——从葡萄糖标准曲线中读得的葡萄糖含量，mg/ mL
4——酶解液共为4 mL ，测定的还原糖为1 mL 酶解液中的还原糖量，所以
应×4
X1——酶解液的稀释倍数
X2——酶的稀释倍数
1000——由mg单位转为μg单位时所乘的倍数
180——葡萄糖的分子量
10——反应时间为10分钟
绘制α-淀粉酶在不同的pH条件下的酶活力曲线（采用excel中的散点图法作图）。
第三部分温度对酶活性的影响
一、实验目的
了解温度对酶活性的影响
学习测定酶最适温度的方法
二、实验原理
酶的催化作用受温度的影响很大，一方面与一般化学反应一样，提高温度可以增加酶促反应的速度。通常温度每升高10℃，反应速度加快一倍左右，最后反应速度达到最大值。另一方面酶是一种蛋白质，温度过高可引起蛋白质变性，导致酶的失活。因此，反应速度达到最大值以后，随着温度的升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度。高于或低于最适温度时，反应速度逐渐降低。大多数动物酶的最适温度为37-40℃，植物酶的最适温度为50-60℃。但是，一种酶的最适温度不是完全固定的，它与作用时间长短有关，反应时间增长时，最适温度向数值较低的方向移动。通常测定酶的活性时，在酶反应的最适温度下进行。为了维持反应过程中温度的恒定，一般利用恒温水浴等恒温装置。
酶对温度的稳定性与其存在的形式有关。实践证明大多数酶在干燥的固体状
态下比较稳定，能在室温下保存数月以至一年。溶液中的酶，一般不如固体的酶稳定，而且容易为微生物污染，通常很难长期保存而不丧失其活性，在高温的情况下，更不稳定。
三、实验器材与试剂
实验器材
1-16. 见本实验第一部分
17. 化学试剂：可溶性淀粉、柠檬酸、磷酸氢二钠均为分析纯，α-淀粉酶
实验试剂
1. 1%淀粉溶液：称取1 g可溶性淀粉的200 mL烧杯中，用5 mL pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液调成糊状。另取200 mL烧杯，盛入95 mL pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，于电炉上烧开，倒入60 mL于盛有淀粉糊的烧杯中，搅拌均匀，继续煮开并搅拌至透明状，冷却后移至100 mL容量瓶中，用剩余缓冲液荡洗烧杯，倒入容量瓶中，最后用蒸馏水定容至刻度（老师准备）。
2. α-淀粉酶：活性为2000 u/mL的中温α－淀粉酶，用pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释1000倍（老师准备，现用现配）。
3. DNS试剂见本实验第一部分（老师准备)
四、实验方法
取13支干燥的18×180 mm试管，按下表编号，实验组做两组平行试验，按下表加入pH5.0的淀粉溶液和α-淀粉酶溶液（mL），不同温度下反应10分钟（全实验室需确保有6台水浴锅，按照组号顺序分别将水浴锅温度控制在20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃，并依次循环），反应液稀释一定倍数（约10倍，取1 mL反应液，加9 mL蒸馏水，混匀）取1 mL，加DNS试剂，于沸水浴中加热2 min进行显色，取出后在盛有冷水的500 mL烧杯中冷却（注意换冷水），各加入蒸馏水9.0 mL，摇匀，以空白管为调零点，在540 nm波长测定吸光度值，从标准曲线查出葡萄糖的含量，算出酶活力。
α-淀粉酶酶活力计算公式为（IU/mL ）：
1241000
18010
C X X ?????
C ——从葡萄糖标准曲线中读得的葡萄糖含量，mg/ mL
4——酶解液共为4 mL ，测定的还原糖为1 mL 酶解液中的还原糖量，所以应×4
X 1——酶解液的稀释倍数 X 2——酶的稀释倍数
1000——由mg 单位转为μg 单位时所乘的倍数 180——葡萄糖的分子量 10——反应时间为10分钟
绘制α-淀粉酶在不同的温度条件下的酶活力曲线（采用excel 中的散点图法
管号
项目 0
1
2
3
4
5
6
温度
50 20 30 40 50 60 70 1%淀粉溶液（mL ）
3
3 3 3 3 3 3 α-淀粉酶溶液（mL ）
1（煮沸
灭活）
1
1
1
1
1
1
50℃反应10分钟，稀释一定倍数（约10倍），取1 mL 用于DNS 反应。 DNS 溶液（mL ）
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
沸水浴2 min 后冷却
蒸馏水（mL ） 9 9 9 9 9 9 9 OD 值
葡萄糖含量（mg
/mL ）
酶活力（IU/ mL ）
作图）。
五、实验报告
1. 内容与要求：按《2009级生物化学实验课程内容及要求》撰写实验报告，包括实验目的、实验原理、主要实验仪器设备与试剂、实验步骤、结果分析与讨论。实验结果应同时具有实验现象、数据、表格、图形以及最后结果，包括，标准曲线、样品浓度、不同pH条件下的酶活力曲线和最适pH、不同温度下的酶活力曲线和最适温度等。
2. 思考题
1 M的纤维二糖、麦芽二糖、麦芽六糖、蔗糖各相当于多少浓度的还原糖。
淀粉酶活力测定实验报告
淀粉酶活力测定实验报告 淀粉酶活力测定实验报告实验三、淀粉酶活性的测定实验报告 实验四、淀粉酶活性的测定 一、实验目的: 1、了解α - 淀粉酶和β - 淀粉酶的不同性质及其淀粉酶活性测定的意义; 2、学会比色法测定淀粉酶活性的原理及操作要点。 二、实验原理: 淀粉酶存在于几乎所有植物中，特别是萌发后的禾谷类种子，淀粉酶活力最强，其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。根据α-淀粉酶和β-淀粉酶特性不同，α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速钝化;β-淀粉酶不耐热，70? 15min 则被钝化。测定时，使其中一种酶失活，即可测出另一种酶的活性。 淀粉在淀粉酶的催化作用下可生成麦芽糖，利用麦芽糖的还原性与3,5-二硝基水杨酸反应生成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸，测定其吸光度，从而确定酶液中淀粉酶活力(单位重量样品在一定时间内生成麦芽糖的量)。 三、实验用具: 1、实验设备 研钵,具塞刻度试管,离心管，分光光度计，酸度计，电热 恒温水浴锅，离心机，电磁炉。 2、实验材料与试剂 (1)0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液:A液:称取柠檬酸20.01g，定容至 1000ml;B液:称取柠檬酸钠29.41g，定容至1000ml;取A液55ml与B液145ml混匀。 (2)1%可溶性淀粉溶液:1g淀粉溶于100ml 0.1mol/l pH5.6
的柠檬酸缓冲液; (3)1%3,5-二硝基水杨酸试剂:称取3,5-二硝基水杨酸1g、NaOH 1.6g、酒石酸钾钠30g，定容至100ml水中，紧盖瓶塞，勿使CO2进入; (4)麦芽糖标准溶液:取麦芽糖0.1g溶于100ml水中; (5)pH 6.8的磷酸缓冲液: 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解，用 0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至 6.8，加水稀释至1000ml即得。 (6)0.4mol/L的NaOH溶液; (7)1%NaCl溶液。 (8)实验材料:萌发的谷物种子(芽长约1cm) 四、操作步骤 1、酶液提取:取6.0g浸泡好的原料，去皮后加入10.0mL 1%的NaCl 溶液，磨碎后以2000r/min 离心10min，转出上清液备用。取上清液1.0ml，用pH 为6.8的缓冲溶液稀释5倍，所得酶液。 2、a- 淀粉酶活力测定 (1) 取试管4支,标明2支为对照管,2支为测定管。 (2) 于每管中各加酶液lml ,在 70?士0.5? 恒温水浴中准确加热15min ,取出后迅速用流水冷却。 (3) 在对照管中加入4m1 0.4mol/L氢氧化钠。 (4) 在4支试管中各加入1ml pH5.6的柠檬酸缓冲液。 (5) 将4支试管置另一个40?士 0.5? 恒温水浴中保温15min ,再向各管分别加入40?下预热的1,淀粉溶液 2m1,摇匀,立即放入40?恒温水浴准确计时保温 5min。取出后向测定管迅速加入4ml 0.4mol/L氢氧化钠,终止酶 活动,准备测糖。
分析化学实验碱度的测定实验报告
实验报告 姓名：班级：同组人： 项目碱度的测定课程：分析化学学号： 一、实验目的 1、掌握酸碱滴定法测定碱度的原理和方法。 2、掌握碱度测定结果的计算。 3、熟练滴定操作及相关仪器的操作方法。 二、实验原理 水的碱度主要由碳酸盐、重碳酸盐、及氢氧化物组成,但在某些情况下,如水中存在磷酸盐、硅酸盐、硼酸盐等也会产生一定的碱度。 碱度的测定是在水样中加入适当的指示剂,用酸标准溶液进行滴定,可分别测出水样 中各种碱度,其反应如下： OH- + H+= H2O CO32- + H+= HCO3- HCO3-+ H+= H2O + CO2 根据上述到达终点时所用酸的量可计算出溶液中碳酸盐、重碳酸盐及总碱度。 三、仪器和药品 仪器：250mL锥形瓶3个;50mL酸式滴定管1支、20、50 mL移液管、50mL量筒。试剂：0.1%酚酞指示剂、0.1%甲基橙指示剂、0.1mol/L盐酸标准溶液、0.05000mol/L Na2CO3 四、内容及步骤 （一）0.1mol/L盐酸标准溶液浓度的标定 准确量取20.00mL 已配好的0.05000mol/L Na2CO3标准溶液置于3只250mL锥形瓶中,加水约30mL,温热,摇动使之溶解,以甲基橙为指示剂,以0.lmol/LHCl标准液滴定至溶液由黄色转变为橙色,记下HCl标准溶液的消耗用量（3份测定的平均偏差应小于0.2%,否则应重复测定）,并计算出HCl标准溶液的浓度。 （二）碱度的测定（双指示剂法） 准确移取水样l00mL于250mL锥形瓶中,加人酚酞指示剂三滴,如呈红色,用0.1mol/L 盐酸溶液滴定至颜色刚好消失,记下盐酸溶液的消耗体积(V1);在此溶液中,再加入2滴甲基橙指示剂,继续用标准盐酸溶液滴定至橙色为止,记下盐酸的消耗量(V)。判断水样中碱度的组成及含量。 五、实验结果记录与计算 （一）盐酸标准溶液浓度的标定
实验三、淀粉酶活性的测定实验报告
实验四、淀粉酶活性的测定 一、实验目的： 1、了解α - 淀粉酶和β - 淀粉酶的不同性质及其淀粉酶活性测定的意义； 2、学会比色法测定淀粉酶活性的原理及操作要点。 二、实验原理： 淀粉酶存在于几乎所有植物中，特别是萌发后的禾谷类种子，淀粉酶活力最强，其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。根据α-淀粉酶和β-淀粉酶特性不同，α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速钝化；β-淀粉酶不耐热，70℃ 15min 则被钝化。测定时，使其中一种酶失活，即可测出另一种酶的活性。 淀粉在淀粉酶的催化作用下可生成麦芽糖，利用麦芽糖的还原性与3,5-二硝基水杨酸反应生成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸，测定其吸光度，从而确定酶液中淀粉酶活力（单位重量样品在一定时间内生成麦芽糖的量）。 三、实验用具： 1、实验设备 研钵,具塞刻度试管,离心管，分光光度计，酸度计，电热恒温水浴锅，离心机，电磁炉。 2、实验材料与试剂 （1）0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液：A液：称取柠檬酸20.01g，定容至1000ml；B液：称取柠檬酸钠29.41g，定容至1000ml；取A液55ml与B液145ml混匀。 （2）1%可溶性淀粉溶液：1g淀粉溶于100ml 0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液； （3）1%3,5-二硝基水杨酸试剂：称取3,5-二硝基水杨酸1g、NaOH 1.6g、酒石酸钾钠30g，定容至100ml水中，紧盖瓶塞，勿使CO2进入； （4）麦芽糖标准溶液：取麦芽糖0.1g溶于100ml水中； （5）pH 6.8的磷酸缓冲液:取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，加水稀释至1000ml即得。 （6）0.4mol/L的NaOH溶液； （7）1%NaCl溶液。 （8）实验材料：萌发的谷物种子（芽长约1cm） 四、操作步骤 1、酶液提取：取6.0g浸泡好的原料，去皮后加入10.0mL 1%的NaCl 溶液，磨碎后以2000r/min 离心10min，转出上清液备用。取上清液1.0ml，用pH 为6.8的缓冲溶液稀释5倍，所得酶液。 2、a- 淀粉酶活力测定 (1) 取试管4支,标明2支为对照管,2支为测定管。 (2) 于每管中各加酶液lml ,在 70℃士0.5℃恒温水浴中准确加热15min ,取出后迅速用流水冷却。 (3) 在对照管中加入4m1 0.4mol/L氢氧化钠。 (4) 在4支试管中各加入1ml pH5.6的柠檬酸缓冲液。 (5) 将4支试管置另一个40℃士 0.5℃恒温水浴中保温15min ,再向各管分别加入40℃下预热的1％淀粉溶液2m1,摇匀,立即放入40℃恒温水浴准确计时保温5min。取出后向测定管迅速加入4ml 0.4mol/L氢氧化钠,终止酶
分析化学实验报告本(无数据模板)
实验一电子分析天平的操作及称量练习 学院/专业/班级：______________________________ 姓名： 学号：________________ 实验日期______年__月__日教师评定：______________ 【实验目的】 ①掌握电子分析天平的基本操作和粉末状样品的称量方法； ②开始培养准确、简明地记录原始数据的习惯，不得涂改数据，不得将测量数据记录在实验报告以外的任何地方。 【实验原理】 电子天平有顶部承载式（吊挂单盘）和底部承载式（上皿式）两种，根据电磁力补偿工作原理，使物体在重力场中实现力的平衡或通过电磁矩的调节，使物体在重力场中实现力矩平衡，整个过程均由微处理器进行计算和调控。秤盘加载后，即接通了补偿线圈的电流，计算器就开始计算冲击脉冲，达到平衡后，显示屏上即自动显示出天平所承载的质量值。 电子天平具有自动调零、自动校准、自动“除皮”和自动显示称量结果等功能，因此操作简便，称量快速，还能与计算机、打印机等联用，可在数秒内将所称量的质量显示并打印出来。 【仪器及试剂】 仪器：电子分析天平（型号：________________）；保干器；称量瓶；称量纸；试剂勺；小烧杯等 试剂：练习使用试剂（干燥处理后，装入称量瓶中，保存于保干器内） 【实验步骤】
【数据记录及处理】 1. 直接法：小纸铲质量m=____________g 2. 增重法：目标质量m=0.2034 g；实际称量m1=___________g；m2=___________g；m3=___________g 3．减重法：目标质量范围m=0.2 0.3g 【思考与讨论】
实验二之淀粉酶活力测定实验后思考题及淀粉酶实验报告写作提示(2012.3.19上传)
实验二、萌发麦苗淀粉酶活力及水溶性蛋白含量的测定。 （报告写作提示及思考题） 注意：实验二整体是为了完成如何在正确的总体思路的指导下合理设计实验方案及其细节。所以我们首先以对生物催化剂-酶的基本认识确定了酶活测定实验的总体设计思路，并在其指导下，明确了总体方案及最关键的设计细节。 然后以我们比较熟悉的禾谷类种子的萌发状态及其代谢途径为具体思考对象，进行了淀粉酶活力测定相关的分析，然后认可并已完成了前人设计的实验。所以淀粉酶活力测定实验报告的结果就绝不仅仅是计算得出的两个酶活力数据，或说那两个数据只是一个必然的实验数据，“实验结果”是我们设计并完成了对淀粉酶，这类在禾谷类种子萌发过程中起关键作用的酶的活力的测定，即，是实验设计本身。所以结果分析应该是围绕实验设计展开。根据实验具体实施过程中可操作性的特点、操作误差对结果的可能影响，以实际材料完成实验后得到的具体结果数据结合相关生理功能一起思考判断，是否能初步确定该实验设计不仅理论上可行而且实验后的结果也可信，从而最终确认整个实验设计的基本合理可行可信。 实验后思考题： 1．α-淀粉酶活性测定时70℃水浴为何要严格保温15分钟？保温后为什么要立即于冰浴中骤冷？而经如此处理，为什么在随后的40℃温浴和酶促反应中就能保证β-淀粉酶不会再参与催化反应。 2．酶的最适反应温度（一般都是生理温度）和最适保存温度（一般0℃以下）为什么不一样？而这两个状态都是需要维护酶的空间结构。 3．为什么3，5-二硝基水杨酸与还原糖的反应要先沸水浴然后再稀释测定？ 4. 在设计酶活测定的实验时，要求酶促反应初速度对底物浓度的小量变化不敏感，具体要求为：在底物浓度有10%的变化幅度范围内，而所测初速度的变化幅度小于1%。则【S】/K M应该大于多少才能保证这一点？（设定为米氏酶） 5.转氨酶在细胞内的作用及生理意义？细胞内有众多的转氨酶，但相关研究及医学临床应用中却几乎都是只检测谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）的活力，而极少测定其它转氨酶活力，你推测可能的原因会是什么？为什么？ 6、转氨酶催化的是双底物可逆反应，根据酶活力测定的总体思路，要保证测定反应的初速度，根据实验指导所提供的资料，你认为是否保证了这一点？是如何保证的？ 7、指导所提供的两个转氨酶活力测定实验方案，设计的酶促反应时间是多少？终止酶促反应用的什么试剂？与淀粉酶活力测定规定的酶促反应时间相比是否有差异？差异可能的原因你分析认为会是因为什么？
分析化学实验报告
分析化学实验报告 分析化学实验报告格式 1.实验题目编组同组者日期室温湿度气压天气 2.实验原理 3.实验用品试剂仪器 4.实验装置图 5.操作步骤 6. 注意事项 7.数据记录与处理 8.结果讨论 9.实验感受(利弊分析) 分析化学实验报告范文 实验题目:草酸中h2c2o4含量的测定 实验目的: 学习naoh标准溶液的配制、标定及有关仪器的使用; 学习碱式滴定管的使用，练习滴定操作。 实验原理: h2c2o4为有机弱酸，其ka1=5、9 10-2，ka2=6、4 10-5、常量组分分析时cka1>10-8，cka2>10-8，ka1/ka2<105，可在水溶液中一次性滴定其两步离解的h+: h2c2o4+2naoh===na2c2o4+2h2o
计量点ph值8、4左右，可用酚酞为指示剂。 naoh标准溶液采用间接配制法获得，以邻苯二甲酸氢钾标定: -cook -cooh +naoh=== -cook -coona +h2o 此反应计量点ph值9、1左右，同样可用酚酞为指示剂。 实验方法: 一、naoh标准溶液的配制与标定 用台式天平称取naoh1g于100ml烧杯中，加50ml蒸馏水， 搅拌使其溶解。移入500ml试剂瓶中，再加200ml蒸馏水，摇 匀。 准确称取0、4~0、5g邻苯二甲酸氢钾三份，分别置于250ml 锥形瓶中，加20~30ml蒸馏水溶解，再加1~2滴0、2%酚酞指示剂，用naoh标准溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟不褪色即为终点。 二、h2c2o4含量测定 准确称取0、5g左右草酸试样，置于小烧杯中，加20ml蒸馏水溶解，然后定量地转入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻 度，摇匀。
唾液淀粉酶活性的测定
影响唾液淀粉酶活性的研究 摘要：讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异，实验结果表明，影响唾液淀粉 酶活性的因素很多，必须在适宜的条件下，才能发挥最佳催化作用；淀粉酶具有 高度专一性，其活性受温度、ｐＨ值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多 种因素的影响；每个人产生唾液淀粉酶的量不同，活性强弱也有差异。 关键词：淀粉酶；活性；温度；抑制剂；激活剂；专一性 2影响唾液淀粉酶的活性的因素 （一）实验目的 观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。 （二）实验原理 人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶，在唾液腺细胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖和葡萄糖。变化过程如下： 淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖 淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。 淀粉与糊精无还原性，或还原性很弱，对班氏试剂呈阴性反应。麦芽糖与葡萄糖是还原性糖，与班氏试剂共热后生成红棕色氧化亚铜的沉淀。 唾液淀粉酶的最适温度为37-40°C，最适pH为6.8.偏离此最适环境时，酶的活性减弱。 低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性，是它的激活剂。Cu2+等金属离子能降低该酶的活性，是它的抑制剂。 （三）器材及试剂 1、器材：试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶 2、试剂：1％淀粉溶液、碘液、班氏试剂、0.4％HCl溶液、0.1％的乳酸溶液、1％NaCl溶液、1％CuSO4溶液、0.1％淀粉溶液 （四）操作步骤
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文 唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文 2 唾液淀粉酶活性观察实验报告 一、实验目的 1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性； 2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。 二、基本原理 1.酶是生物催化剂，具有极高的催化效率，其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2，铁粉地H2O2分解也有催 化作用，但其效率远低于酶。 2.酶的活性受温度的影响。在一定的温度范围内，温度升高，酶的活性也会增大。当到了最大值后，此时温度为酶的最适温度，由于温度过高，酶开始失活，导致酶的效率降低，最后完全失活。 3.酶的活性受PH值的影响。酶在一定范围的PH值下才有活性，高于或低于最适PH，都会使酶的活性降低。 4.酶活性常受到某些物质的影响。有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂，有些物质能使酶的活性降低，称为抵制剂。 5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化： 淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦
芽糖+少量葡萄糖 加碘后：蓝色 紫红色 暗褐色红棕色 黄色 三、试剂与器材 影响唾液淀粉酶活性的研究 摘要：讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异，实验结果表明，影响唾液淀粉 酶活性的因素很多，必须在适宜的条件下，才能发挥最佳催化作用；淀粉酶具有 高度专一性，其活性受温度、ｐＨ值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多 种因素的影响；每个人产生唾液淀粉酶的量不同，活性强弱也有差异。 关键词：淀粉酶；活性；温度；抑制剂；激活剂；专一性 2影响唾液淀粉酶的活性的因素 实验目的 观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。 实验原理 人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶，在唾液腺细胞中合成。在唾液淀
分析化学实验报告本
实验一电子分析天平得操作及称量练习 学院／专业/班级：_＿____＿_＿__＿＿__＿＿___＿___＿__＿__ 姓名: 学号:＿＿＿＿____________ 实验日期＿_＿___年_＿月_＿日教师评定:__＿ ____＿___＿＿_ 【实验目得】 ①了解电子天平得构造及主要部件; ②掌握电子天平得基本操作,掌握实物称量得技术; ③掌握准确、简明、规范地记录实验原始数据得方法。 【实验原理】 电子天平有顶部承载式(吊挂单盘）与底部承载式(上皿式)两种,根据电磁力补偿工作原理，使物体在重 力场中实现力得平衡或通过电磁矩得调节,使物体在重力场中实现力矩平衡,整个过程均由微处理器进行计 算与调控。秤盘加载后,即接通了补偿线圈得电流,计算器就开始计算冲击脉冲,达到平衡后,显示屏上即自动 显示出天平所承载得质量值。 电子天平具有自动调零、自动校准、自动“除皮”与自动显示称量结果等功能,因此操作简便，称量快 速，还能与计算机、打印机等联用，可在数秒内将所称量得质量显示并打印出来。 【仪器及试剂】 仪器:电子分析天平(型号：＿__＿___＿＿_＿_＿＿_＿);保干器;称量瓶;称量纸；试剂勺;小烧杯等 试剂：练习使用试剂（干燥处理后,装入称量瓶中,保存于保干器内) 【实验步骤】 【数据记录及处理】 【思考与讨论】 实验二食醋中总酸度得测定 学院/专业/班级:＿＿_________＿__＿＿_＿___＿___＿_＿__ 姓名:
学号:_＿_＿_______＿＿___ 实验日期______年_＿月_＿日教师评定:__＿__＿_＿__＿___ 【实验目得】 １.进一步掌握滴定管、移液管、容量瓶得规范操作方法; 2.学习食醋中总酸度得测定方法; 3.了解强碱滴定弱酸得反应原理及指示剂得选择。 【实验原理】 食醋就是以粮食、糖类或酒糟等为原料,经醋酸酵母菌发酵而成。食醋得味酸而醇厚,液香而柔与,它就是烹饪中一种必不可少得调味品。常用得食醋主要有“米醋”、“熏醋”、“糖醋”、“酒醋”、“白醋”等,根据产地、品种得不同,食醋中所含醋酸得量也不同,食醋得酸味强度得高低主要就是由其中所含醋酸量(HAc,其含量约为３%~8 %）得大小决定。除含醋酸以外,食醋中还含有对身体有益得其它一些营养成分,如乳酸、葡萄糖酸、琥珀酸、氨基酸、糖、钙、磷、铁、维生素B２等等。 用NaOH标准溶液测定时，醋酸试样中离解常数K a?≥１０－7得弱酸都可以被滴定，其滴定反应为: 因此,上述测定得为食醋中得总酸量。分析结果通常用含量最多得 HAｃ表示。本实验滴定类型属强碱滴定弱酸,滴定突跃在碱性范围，其理论终点得ｐH值在8、7左右，可选用酚酞作为指示剂。 【实验试剂】 KHC8H4O4 (基准物,10５?C烘至恒重于干燥器内保存备用)；NaOH溶液:5０0ｇ?Ｌ－１ 酚酞指示剂：2 g?Ｌ-1（乙醇溶液)；食醋试样（待测） 【实验步骤】 (１)0、1 mｏl?Ｌ-1ＮaOH标准溶液得配制与标定 ①用10 mL量筒量取5０0 g?L-1 NaOH溶液_＿_＿_ｍL，倾入＿＿＿_＿mL得聚乙烯试剂瓶中，用水洗涤量筒数次,洗涤液并入试剂瓶中，稀释至___＿_mL，摇匀后备用。 ②用减重法称取___＿＿~ __＿__ g得KＨC8H4O4置于三个编好号*得锥形瓶中,分别加入20~3０ｍL 蒸馏水,小心摇动,使其溶解(慎用玻棒!*),然后加入２滴酚酞指示剂,用所配制NａOH溶液滴定至溶液呈微红色且30 s内不褪色为终点,记下所消耗NａＯH得体积,计算所配制ＮａOＨ溶液得浓度。 (2)食醋试液总酸度得测定 ①用移液管移取待测试液_____mL至__＿__ｍＬ容量瓶中，用煮沸并冷却后得水定容。 ②用25 ｍL移液管移取上述试液至250 mL锥形瓶中,滴加2~3滴酚酞指示剂,用NaOＨ标准溶液滴定至溶液呈微红色并保持３０s内不褪色即为终点，记下所消耗NａＯH得体积。根据NａOＨ标准溶液得
淀粉酶活性测定实验报告
班级：植物092 姓名：徐炜佳学号：03 淀粉酶活性的测定 一、研究背景及目的 酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种，存在于禾谷类的种子中。β-淀粉酶存在于休眠的种子中，而α-淀粉酶是在种子萌发过程中形成的。 α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,α-淀粉酶活性低的品种抗穗发芽,反之则易穗发芽。目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种,活力单位的定义也各不相同,国内外测定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3 ,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法。这3 种方法所用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉,获得的α-淀粉酶活性应该分别是延迟(内 二、实验原理 萌发的种子中存在两种淀粉酶，分别是α-淀粉酶和β-淀粉酶，β-淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，而α-淀粉酶不耐酸，在下则发生钝化。本实验的设计利用β-淀粉酶不耐热的特性，在高温下（70℃）下处理使得β-淀粉酶钝化而测定α-淀粉酶的酶活性。 酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的，淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖，可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定，由于麦芽糖能将后者还原生成硝基氨基水杨酸的显色基团，将其颜色的深浅与糖的含量成正比，故可求出麦芽糖的含量。常用单位时间内生成麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性。实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。 在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。并且在酶的作用过程中，四支测定管及空白管不要混淆。
唾液淀粉酶的实验
例题1：生物课外小组的同学，在探究“馒头在口腔中的变化”时，进行了如下处理： 1）将馒头碎屑与唾液放入1号试管中充分搅拌； 2）将馒头碎屑与清水放入2号试管中充分搅拌； 3）将馒头快与唾液放入3号试管中不搅拌； 4）将馒头碎屑与唾液放入4号试管中不搅拌；（以上试管中馒头碎屑与馒头块、唾液、清水均等量） 其中第1种处理是模拟口腔中的牙齿，舌和唾液的作用，第2.3.4种处理都是1的对照实验。回答问题： ①当以“舌的搅拌”为变量时，应选取___________两种处理进行对照实验。 ②1与2对照进行实验是为了探究__________________________的作用。 ③在以上三种对照实验中，哪种处理不妥，请指出__________________________________。 ④在设计此探究方案时，有的同学建议：“除了以上四种处理外，还要进行第五种处理， 即将馒头块与清水放入试管中不搅拌。”你认为这种处理有必要吗为什么______________________________________________________________。 例题2：下表表示某同学在进行“馒头在口腔中的变化”实验时，设计的部分实验，请根据他的实验设计和加碘液后应出现的现象，加以分析说明： (1)在1—4号试管中分别加入实验材料后，为使实验现象更加明显，应采取的操作方法是 __________________________________________________________________________； (2)表中C现象为______________________________，原因是 _______________________________________________________。 (3)表中A和B现象都可能____________________________，原因是
实验二淀粉酶活性测定实验报告
实验二淀粉酶活性测定 实验报告 集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）
淀粉酶活性的测定 一、实验目的 酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定 时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。 淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。α-淀粉酶是一种典型 的内切型淀粉酶,主要作用于淀粉水解的液化阶段,因此又叫液化酶。作 为一种最重要的工业酶制剂，α-淀粉酶广泛存在于动物,植物和微生物中。其中，微生物α-淀粉酶以其经济易得成为工业生产主要来源。目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种。 本实验采用杨氏改良法测定α-淀粉酶；掌握测定α-淀粉酶活性大 小与温度关系的方法，通过分析得出酶的最适温度范围。 二、实验原理 酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和pH值称为某种酶作用 时的最适温度和pH值。温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度 的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低，其变化趋势呈钟形 曲线变化。 不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀 粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的
反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。 本实验通过淀粉遇碘显蓝色，淀粉含量越高，颜色越深。用分管光度计检测显色效应大小，通过分管光度值计算酶活力 注意：实验中为了消除非酶促反应引起的淀粉水解带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。 在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。并且在酶的作用过程中，三支测定管及空白管不要混淆。 三、材料、试剂与仪器 实验材料：α-淀粉酶 仪器：分光光度计、电热恒温水浴锅、小台秤、研钵、玻璃仪器若干 试剂： ① 0.4M NaOH/0.4M CH3COOH及0.1M HCl： ② 0.005%工作碘液：0.5克I2和5.0克KI水中研磨，定容至1000mL； ③1%糊化淀粉溶液：称取1.0克淀粉，加入25mL0.4M NaOH，60℃ COOH，定容至100mL； 5min，冷却后加25mL0.4M CH 3 ④稀释α-淀粉酶溶液：待测样品 四、实验步骤 ① 10mL1%淀粉溶液加入试管中，室温25/45/65℃保温10min
实验二：淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性的测定 一、实验目的 酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。 淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。α-淀粉酶是一种典型的内切型淀粉酶,主要作用于淀粉水解的液化阶段,因此又叫液化酶。作为一种最重要的工业酶制剂，α-淀粉酶广泛存在于动物,植物和微生物中。其中，微生物α-淀粉酶以其经济易得成为工业生产主要来源。目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种。 本实验采用杨氏改良法测定α-淀粉酶；掌握测定α-淀粉酶活性大小与温度关系的方法，通过分析得出酶的最适温度范围。 二、实验原理 酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和pH值称为某种酶作用时的最适温度和pH值。温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低，其变化趋势呈钟形曲线变化。 不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。 本实验通过淀粉遇碘显蓝色，淀粉含量越高，颜色越深。用分管光度计检测显色效应大小，通过分管光度值计算酶活力 注意：实验中为了消除非酶促反应引起的淀粉水解带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以
唾液淀粉酶最适pH值的测定实验设计
唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 小组成员:刘倍材何标才揭春晓李芮 实验目的： 1.掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告。 2.掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。 3.熟悉影响酶促反应速度的因素。 实验原理： 1．酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH、激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响，可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色，来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。 2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时，淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于660nm 处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同，吸光度值也不同。因此，通过测量660nm处的吸光度值，可以了解PH 对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。
实验步骤： 1.缓冲溶液的配制。取12支试管进行编号1-12，分别按下表加入试剂。 2.唾液的采集。 先给备取者一杯纯净水让其漱口，将漱口液吐掉,让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口，在备取者眼前放上一些话梅，这时，备取者的唾液会不停地流出来。 3.唾液的稀释。取10支试管，进行编号1＇-10＇,进行稀释。
4.唾液稀释倍数的选取。 另取10支试管，分别编上A-K号，各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入1ml的0.02％的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出，滴加2～3碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一支，记录稀释倍数。 5.最适PH的测定。 另取12支试管,进行编号,按下表加入试剂。进行测定。
淀粉酶活性测定实验报告
班级：植物092 姓名：徐炜佳学号：0901080223 淀粉酶活性的测定 一、研究背景及目的 酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种，存在于禾谷类的种子中。β-淀粉酶存在于休眠的种子中，而α-淀粉酶是在种子萌发过程中形成的。 α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,α-淀粉酶活性低的品种抗穗发芽,反之则易穗发芽。目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种,活力单位的定义也各不相同,国内外测定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法。这3种方法所用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉,获得的α-淀粉酶活性应该分别是延迟(内源)α-淀粉酶、萌动种子α-淀粉酶和后熟面粉的α-淀粉酶活性。
本实验的目的在于掌握α-淀粉酶和β-淀粉酶的提取和测定方法。 二、实验原理 萌发的种子中存在两种淀粉酶，分别是α-淀粉酶和β-淀粉酶，β-淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，而α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6下则发生钝化。本实验的设计利用β-淀粉酶不耐热的特性，在高温下（70℃）下处理使得β-淀粉酶钝化而测定α-淀粉酶的酶活性。 酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的，淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖，可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定，由于麦芽糖能将后者还原生成硝基氨基水杨酸的显色基团，将其颜色的深浅与糖的含量成正比，故可求出麦芽糖的含量。常用单位时间内生成麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性。实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。 在实验中要严格控制温度及时间，以减小误差。并且在酶的作用过程中，四支测定管及空白管不要混淆。 三、材料、试剂与仪器 实验材料：
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水分析化学实验报告 班级： 姓名： 学号： 指导老师： 实验1 仪器的认领和洗涤、天平的使用 专业、班级姓名指导教师____________ 日期室温同组者_______________ 实验注意事项： 养成良好的实验习惯对于水分析化学实验非常重要，请同学们在以后的实验中按老师的要求做到以下几点： 1、认领洗涤后请老师确认，再进行天平的称量练习； 2、确认自己仪器的放置位置，以后每次实验结果后均需原物归位，并请老师确认； 3、班长按排好值日生，实验后负责实验室和天平室的卫生工作。 一、目的要求 1、认领水分析实验中常用的一些玻璃器皿、仪器等； 2、根据水分析化学的要求洗涤玻璃器皿，并明白洗涤干净的标准； 3、学会电子天平称量药品的方法-减量法，能正确记录实验结果。 二、基本原理 三、电子天平的操作步骤注意事项： 1.取下天平罩，折叠后置于台面靠墙处。 2.观察水平仪中的水泡是否位于中心。 3.按“on”键开启显示器。 4.若显示屏显示不为0.0000（g），按“tar”键使显示为0.0000（g）。 5、按老师的示范进行正确操作；6.称量完毕后，按“off”键，取下被称物，关闭天平门，盖好天平罩。 四、数据记录： 实验2 酸碱标准溶液的配制与标定 专业、班级姓名指导教师 日期室温同组者 实验注意事项： 养成良好的实验习惯对于水分析化学实验非常重要，请同学们做到以下几点： 1、确认自己仪器的放置位置，实验结果后均需原物归位，并请老师确认； 2、长按排好值日生，实验后负责实验室和天平室的卫生工作。3、保留标好的盐酸溶液，供下次使用。．．．．．．．．．．．．．．． 一、目的要求 二、基本原理 三、实验内容和数据记录及处理 1．氢氧化钠标准溶液浓度的标定 采用__________指示剂，溶液的颜色由_________色滴定至________色，查得邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量__________g/mol。 3 计算公式：c（naoh，mol/dm）＝ 2．盐酸标准溶液浓度的标定 采用____________指示剂，溶液的颜色由_______色滴定至________色，查得na2co3的摩尔质量__________g/mol。 计算公式：c(hcl，mol/dm)＝ 3篇二：分析化学实验报告本模版
生化实验--淀粉酶活性测定标准实验报告
实验二：酶活力测定方法的研究 一．研究背景及目的 酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白，几乎所有的生化反应都离不开酶的催化，所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色，因此对酶的研究有着非常重要的意义。酶的活力是酶的重要参数，反映的是酶的催化能力，因此测定酶活力是研究酶的基础。酶活力由酶活力单位表征，通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。本实验选取萌发的禾谷类种子为材料，通过对其所含两种淀粉酶活力的测定来研究酶活力测定的方法。 二．实验原理 萌发的种子中存在两种淀粉酶，分别是α淀粉酶和β淀粉酶，β淀粉酶不耐热，在高温下易钝化，而α淀粉酶不耐酸，在pH3.6下则发生钝化[1]。本实验的设计利用β淀粉酶不耐热的特性，在高温下（70℃）下处理使得β淀粉酶钝化而测定α淀粉酶的酶活性[1]。酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的，麦芽糖的浓度利用比色法可以很容易测得。然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性，拟将总活性与α淀粉酶的活性的差值看作β淀粉酶的活性，再做进一步分析。实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差，每组实验都做了相应的对照实验，在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。 三．材料、试剂与仪器 材料： 萌发的小麦种子 试剂： ①1%淀粉溶液（称取1克可溶性淀粉，加入80ml蒸馏水，加热熔解，冷却后定容至100ml）； ②pH5.6的柠檬缓冲液：A液（称取柠檬酸20.01克，溶解后定容至1L）
B液（称取柠檬酸钠29.41克，溶解后定容至1L）取A液5.5ml、B液14.5ml 混匀即可； ③3，5-二硝基水杨酸溶液（称取3，5-二硝基水杨酸1.00克，溶于20ml 1M 氢氧化钠中，加入50ml蒸馏水，再加入30克酒石酸钠，待溶解后，用蒸馏水稀释至100ml，盖紧瓶盖保存）； ④麦芽糖标准液（称取0.100克麦芽糖，溶于少量蒸馏水中，小心移入100ml 容量瓶中定容）； ⑤0.4M NaOH 仪器： 722光栅分光光度计(编号990695) DK-S24型电热恒温水浴锅(编号L-304056) 离心机(TDL-40B) 配平天平药物天平电热锅 100ml容量瓶50ml容量瓶移液管试管研钵烧杯洗瓶 四．实验方法 本实验按照下列表格的中的操作步骤进行：
分析化学实验报告
分析化学实验报告 （编号：） 实验名称：EDTA标准溶液的配制与标定及 水总硬度的测定 所在班级： 学号： 姓名： 实验时间： 实验成绩：
实验六 EDTA 标准溶液的配制与标定及水硬度的测定 一、【实验目的】 1、掌握EDTA 标准溶的液配制和标定方法； 2、熟悉金属指示剂的变色原理以及滴定终点的判断方法。 3、了解配位滴定法测定水总硬度的原理和方法。 4、掌握水硬度的计算。 二、【实验原理】 EDTA （乙二胺四乙酸）是一种有机络合剂，能与大多数金属离子形成稳定的螯合物，因此常用作配位滴定的标准溶液。由于 EDTA 在水中的溶解度较小，因此配制 EDTA 标准溶液常用乙二酸四乙酸二钠(EDTA －2Na ·2H 2O)盐配制。EDTA －2Na ·2H 2O 为白色结晶粉末，因不易制得纯品，标准溶液常用间接法配制。标定EDTA 标准溶液的基准试剂较多，例如Zn ，ZnO ，CaCO 3，Bi ，Cu ，MgSO 4·7H 2O ，Ni ，Pb 等。通常 以ZnO 为基准物质标定其浓度。滴定时溶液的pH ＝10，指示剂为铬黑T ，滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色即为终点。滴定过程可以用方程式表示为： 滴定前： Zn 2+ + HIn 2- ZnIn - + H + 酒红色 终点时： ZnIn - + H 2Y 2- ZnY 2- + H 2In - 纯蓝色 1-ZnO ZnO EDTA L mol 1000 ???= EDTA V M m c 水的总硬度是指水中的的总量，它包括暂时硬度和永久硬度。水中Ca 2+,Mg 2+以碳酸氢盐形式存在的称为暂时硬度；若以硫酸盐、硝酸盐或氯化物形式存在称为永久硬度。 硬度又分为钙硬和镁硬，钙硬是由Ca 2+引起的，镁硬是由Mg 2+引起的。 水的硬度是表示水质的一个重要指标，对工业用水关系很大。水的硬度是形成锅垢和影响产品质量的主要因素。因此，水的硬度即水中钙、镁总量的测定，这为确定用水质量和进行水处理提供依据。 水的总硬度的测定一般采用配位滴定法。 在pH=10的氨-氯化铵时，以铬黑T 为指示剂[1]，用EDTA 标准溶液直接滴定水中的Ca 2+、Mg 2+总量。由于K CaY ﹥K MgY ﹥K Mg ·EBT ﹥K Ca ·EBT ，
探究唾液淀粉酶对淀粉的消化作用
《探究唾液对淀粉的消化作用》实验教学设计 时间：2017年3月 地点：生物实验室 教师：穆小军 一、教学目标 1.认知目标： （1）了解消化、物理性消化、化学性消化的含义；（2）探究唾液对淀粉有无消化作用 2. 能力目标： （1）初步训练学生独立完成实验探究的能力。如：试着发现问题、提出假设、制订计划、实施计划、得出结论、表达和交流等能力；（2）通过学生参与发现问题、提出假设、设计并实施实验方案、对实验结果的交流、表达等活动，训练学生的观察能力、描述能力、实验能力、发散性思维能力、创新能力。 3.情感目标： （1）通过小组的探究活动，培养学生的互相协作意识； （2）通过学生如实记录、分析实验结论，培养他们认真、求实的科学态度及一定的探索精神和创新意识。 二、教学重点：科学实验方法的训练。 三、教学难点：教师如何有效地组织、引导整个探究过程，并抓住时机训练学生的能力，培养学生正确的学习态度和观念。 四、教学过程 教学程序主要是围绕淀粉遇碘液变蓝色这个原理进行探究式学习展
开的。学生可根据教师提供的材料，自己设计试验方案，如果觉得自己的试验方案不如课本中的好，也可采用课本中的。 1 提出探究性问题 先创设一个实验情景：分发给每位学生一小块馒头让他们细嚼慢咽，同时思考问题：馒头在口腔里“吃的过程中”主要有哪些器官参与？在这些器官参与下，馒头发生了什么变化？在学生答出馒头块在牙齿的咀嚼、舌头的搅拌作用下由块状变为糜状时，引出物理性消化的含义；紧接着在问学生，细细嚼馒头时，还有什么感觉？在学生答出“有点甜”时，引出探究性问题：馒头里的营养成分主要是淀粉，淀粉本身是一种高分子有机化合物，没有甜味，那为什么在口腔里充分与唾液混合后就感觉到了甜味呢？难道是在唾液的作用下，淀粉这种成分发生了什么变化？这是学生在吃馒头的过程中，亲自感悟到的问题，所以积极性非常高，众说纷云。 2 提出假设 要解决上述问题，只有通过实验进行证明，那么可以先假设淀粉在唾液的作用下成分是发生了变化，然后用“淀粉遇碘液变蓝色”这一原理进行实验证明：淀粉在与唾液充分混合后，再加入碘液，如果颜色不变蓝，说明假设成立；如果颜色变成了蓝色，说明假设不成立。 3 设计并实施实验方案 如何进行实验来说明问题呢？这是整个探究式学习的一个核心，同时也是开阔学生思维、培养学生发散性思维的关键。这个时候，教师的点拨及实验材料的充分准备非常关键。我除了将课本上提及的有关材