黄芩中黄芩苷的提取分离与鉴定

黄芩中黄芩苷的提取分离

与鉴定

This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

药学专业综合实验（二）

题目：黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定学院：医药学院

班级： xxxxxxxxxxx

姓名： xxxxxxxxxxxxxxx

学号： xxxxxxxxx

黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定

黄芩简介：

黄芩又名山茶根、黄芩茶、土金茶根；为唇形科植物，以根入药。有清热燥湿，凉血安胎，解毒等功效。

含多种黄酮类化合物，主要为黄芩甙，黄芩素，汉黄芩甙，汉黄芩素，７-甲氧基黄芩素，７-甲氧基去甲基汉黄芩素，黄芩黄酮Ⅰ，黄芩黄酮Ⅱ等。

主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。产于河北、辽宁、陕西、山西、山东、内蒙古、黑龙江等。

一、实验目的

1掌握从黄芩中提取、精制黄芩苷的原理、方法及操作要点。

2掌握黄芩苷的结构鉴定原理及方法。

二、实验原理

黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄

酮化合物，具有一定的脂溶性和弱酸性，

提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液，同

时其可在碱性溶液中溶解，形成钠盐，在

提取液中加酸酸化，使黄芩苷游离析出。

利用黄芩苷能溶于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质分离。

三、实验材料与仪器

材料：黄芩干燥根

仪器：旋转蒸发仪离心沉淀机 200g摇摆式高速中药粉碎机

电子天平真空泵抽滤装置圆底烧瓶水浴锅索氏提取器

量筒玻璃棒PH试纸

试剂：浓盐酸 60%乙醇 40%氢氧化钠 95%乙醇 50%乙醇

2mol/l盐酸镁粉二氧化锆枸橼酸三氧化铝

四、实验步骤

1、黄芩苷的提取、分离

黄芩粗粉100g

加10倍量水煎煮2次，每次1h过滤

4h，抽滤

(粗制黄芩苷)

2、黄芩苷的鉴定

（1）盐酸-镁粉反应：取黄芩苷少许置于试管中，以乙醇1ml水浴微温振摇溶解，加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，观察颜色变化。

（2）锆-枸橼酸反应：取黄芩苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解，加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，观察颜色变化；再加2%枸橼酸试剂，观察颜色变化。

（3）三氧化铝反应：取黄芩苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解，加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，观察颜色变化。

五、实验结果

1.黄芩苷得率

x 100％

黄芩苷得率(％)=M／M

一提取时用黄芩的重式中：M一所得黄芩苷精品重量 M

量

为100g，所以收率为%。

本实验中：M为，M

2.芩苷鉴定结果

(1).盐酸-镁粉反应：取黄芩苷少许置于试管中，以乙醇1ml水域微温振摇溶解，加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，溶液产生樱红色。

(2).锆-枸橼酸反应：取黄芩苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解，加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，显黄色并有黄绿色荧光。再加2%枸橼酸试剂，黄色和荧光褪去。

(3).三氧化铝反应：取黄芩苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解，加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，溶液产生鲜黄色，在紫外光下显黄绿色荧光。

六、结果分析、注意事项

1、结果分析：本实验中产率不高，原因可能有：粗粉未浸泡(或粉末浸泡不完全)；静置时间短，沉淀不完全；调PH时温度控制不好。

2、注意事项：

提取过程中为防止黄芩苷的酶解、氧化和减少有效成分被破坏，应控制在一定温度下进行。

在用酸、碱进行提取纯化黄酮类化合物时，应当注意温度和碱度都不宜过高，以免破坏黄酮类化合物的母核。酸化时，酸度也不宜过高，否则酸会与黄酮类化合物生成盐而溶解。

在选择乙醇溶液做提取剂时要注意提取溶液的溶度。

浓度在(50%～70%)的乙醇水溶液其极性与黄芩苷的极性相近，便于其溶出。低浓度(40%及以下) 的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大增加，高浓度(90%及以上) 的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶出。

七、思考题

1、黄芩苷提取过程中为什么要控制温度和调节PH

答：(1)温度的控制：黄芩苷在一定温度和湿度下能酶水解成黄芩素及葡萄糖醛酸。黄芩素分子中具有邻三酚羟基，在空气中易氧化成醌式结构显绿色。以防提取过程中黄芩苷的酶解、氧化和有效成分被破坏。

(2)PH的调节：在提取纯化黄酮类化合物时，碱度过高，会破坏黄酮类化合物的母核；酸度过高，会使酸与黄酮类化合物生成盐而溶解。

因此在黄芩苷的提取过程中要控制温度和调节PH。

2、为什么要选用一定浓度的乙醇溶液作为提取液

答：黄芩苷在黄芩中以羧酸盐存在，可以被溶剂溶出，传统的提取方法以水做提取剂，但黄芩苷只能微溶于热水，而且在水煎煮的过程中引入了大量的水溶性杂质。黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物，具有一定的脂溶性，所以在提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液作为提取液，大大增加它的溶出率，并且抑制象鞣质、蛋白、粘液等高分子杂质的溶出，便于过滤纯化。浓度(50%～70%)的乙醇水溶液其极性与黄芩苷的极性相近，便于其溶出。

低浓度(40%及以下) 的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大增加，高浓度(90%及以上) 的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶出。因此，本实验采用了60%的乙醇溶液作为提取溶剂。