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环境卫生学细菌培养正常指标Microsoft Word 文档

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细菌培养正常指标

空气细菌培养的采样方法

1空气的采样方法检测空气的培养法平板暴露法。此法简便,目前大部分医疗单位采用。在处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是:空气中细菌等可随尘粒一起下降,在室内各采样点处放好平板,采样高度距地面~,采样时,将平板盖打开,暴露5min或10min,盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。2细菌数的细菌总数(c f u/m3=4500N/A×T)式中A=平板面积(cm2) T——平板暴露时间(min) N——平均菌落数(cfu) 这个计算公式是根据在面积100cm3的表面,5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500c f u/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间,采用,或喷雾消毒。 据统计,目前世界上有41种主要,其中经空气传播的就有14种,占首位[1]。空气是疾病的主要传播媒介,而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方,的好坏,不仅对患儿的影响很大,也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的,也对提出严峻的考验。调查表明,空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时,就有发生感染的危险性,而如果细菌总数不足180 cfu/m3时,则这种危险性似乎很小[2]。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3,并随着时间的推移,细菌总数逐步上升,在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致疾病通过空气传播。儿科门诊患者大多是急性或,在患者咳出的、痰液及分泌物中含有多种致病菌,同时每个患儿通常都有家长陪护,导致空气细菌含量较高。因为患儿本身较低,所以儿科输液室空气质量的好坏更能影响患儿疾病的转归,这一点应该引起高度重视。本次研究发现,儿科门诊输液室空气消毒后效果监测,符合标准,而且指数较低,输液患者后细菌数逐渐上升,2 h、4 h均超标,因此,儿科门诊输液室在人员流动的情况下,无法持续进行,仅靠一天两次的紫外线消毒是不能保证空气质量。降低菌落数的效果较持久。自然通风通过换气持续30 min,可以显着减少空气中的含量,降低室内CO及废气的浓度。每天累计通风2 h~3 h,能持久降低中的菌落数。有报道通风流出和进入的空气达到本房间容积时为换气1次,可清除原细菌数的%,所以通风是最简单的消毒方法[3]。另外,也应注意及时关闭,保持已清洁消毒后的室内净化效果。通过对空气中菌落的初步鉴定发现主要以革兰阳性菌为主,其中葡萄球菌、微球菌、奈瑟

空气细菌总数的测定教案资料

空气细菌总数的测定

空气细菌总数的测定 一、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌,以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以彻底高效杀死各种细菌及其高度耐热的原理。 空气是人类赖以生存的必须环境,也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子,这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等,它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面,可较长时间停留在空气中。某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处,给身体健康带来严重危害,也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区,给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。因此,空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量,是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度,需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。 ----测定方法--平皿沉降法 二、测定原理 空气中飘浮着各种微生物,将盛有无菌培养基的平皿放于监测点上,暴露 5min,空气中的细菌便会落到培养基上,然后在37°C恒温箱中培养24h,计数每个平皿表面的菌落数,由于一个菌落由一个细菌繁殖而来,菌落总数便可认为是细菌总数。 三、试剂 营养琼脂 1、成分 A蛋白胨 1g

空气培养的采样方法精选版

空气培养的采样方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】

医院常规空气细菌培养(自然沉降法)采样方法 一、采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。 二、采样高度 与地面垂直高度80-150厘米。 三、布点方法 1.面积≤30 m2,设一条对角线取三点,即中间一点,两端各距墙1米处各取一点(图1) 2.室内面积>30m2,设两条对角线,东,西,南,北,中取五点,其中东,西,南,北距墙均1米(图2) 四、采样方法 用9厘米直径普通琼脂平皿,打开盖后面朝下斜扣到底盘,在采样点准确暴露5分钟后,送检培养。 五、结果分析 I类区域:<10 cfu/m3 II类区域:<200 cfu/m3 III类区域:<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域:层流洁净手术室、层流洁净病房(参照洁净室空气培养方法与标准)。 Ⅱ类区域:普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域:儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域:传染病科及病房。 洁净室空气细菌培养监测布点与标准 一、局部百级,周围千级: 共放13个培养皿,其中手术区域5点,周边区8点。采样布置点示意图:二、局部千级,周围万级: 共放9个培养皿,其中手术区域3点,周边区6点。采样布置点示意图:三、局部万级,周围十万级:

共放7个培养皿,其中手术区域3点,周边区域4点。采样布置点示意图: 四、三十万级:面积>30m2布放4点,面积≤30 m2布放2点。 五、要求: 1.送风口集中布置时,应对手术区和周边区分别检测;如送风口分散布置时,全室统一检测,测点可均布,不应布置在送风门正下方; 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上,手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m,培养皿放置30分钟; 3.采样后的培养皿,应立即置于37度条件下培养48小时; 4.然后计数生长的菌落数,菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后1位。 5.放置培养皿示意图: 盖面朝下斜扣到底盘A边上 六、洁净室空气细菌菌落总数标准?

空气细菌培养的采样方法

空气细菌培养的采样方 法 文档编制序号:[KKIDT-LLE0828-LLETD298-POI08]

1 空气的采样方法 检测空气的培养法平板暴露法。此法简便,目前大部分医疗单位采用。 在处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是:空气中细菌等可随尘粒一起下降,在室内各采样点处放好平板,采样高度距地面~,采样时,将平板盖打开,暴露5min或10min,盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。 2 细菌数的 细菌总数(cfu/m3=4500N/A×T) 式中A=平板面积(cm2) T——平板暴露时间(min) N——平均菌落数(cfu) 这个计算公式是根据在面积100cm3的表面,5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3 效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间,采用,或喷雾消毒。 据统计,目前世界上有41种主要,其中经空气传播的就有14种,占首位[1]。空气是疾病的主要传播媒介,而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方,的好坏,不仅对患儿的影响很大,也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的,也对提出严峻的考验。调查表明,空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时,就有发生感染的危险性,而如果细菌总数不足180 cfu/m3时,则这种危险性似乎很小[2]。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3,并随着时间的推移,细菌总数逐步上升,在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致

空气细菌培养操作规程

病房空气细菌培养操作规程 1.定义:空气细菌培养的采样方法是一种检测空气细菌总数的细菌培养法平板 暴露法。 2.基本原理:是空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降,降落在室内各采样点 处放好的营养琼脂平板上。最后,将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 3.采样时间:在消毒处理后,进行医疗操作前采样,静止10min采样。 4.布点方法:室内面积≤30m2,对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙 壁1m处;室内面积>30m2,设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m 处。 5.采样高度:距地面0.8~1.5m。 6.采样方法:采样时,将平板盖打开,暴露5min或10min,盖好平板。在平皿 上注明采自的科室或科室的房间,用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途中平皿和平皿盖子分离而造成污染。 7.标本保存:采样后必须尽快送检,并保存于2~8℃,送检时间不超过12小时。 8.注意事项: 1)培养皿盖子要反扣于培养皿边上,禁止内面向上的放于桌面。 2)培养期间禁止人员走动。 9.消毒合格标准: Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。

10.说明:Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能 空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间,采用紫外线消毒,化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。 参考文献:中华人民共和国国家标准GB 15982-2010 血液层流病房 2010.4制定 1 M-血液层流-001

空气细菌培养的采样方法

空气细菌培养的采样方法Newly compiled on November 23, 2020

1 空气的采样方法 检测空气的培养法平板暴露法。此法简便,目前大部分医疗单位采用。 在处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是:空气中细菌等可随尘粒一起下降,在室内各采样点处放好平板,采样高度距地面~,采样时,将平板盖打开,暴露5min或10min,盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。 2 细菌数的 细菌总数(cfu/m3=4500N/A×T) 式中A=平板面积(cm2) T——平板暴露时间(min) N——平均菌落数(cfu) 这个计算公式是根据在面积100cm3的表面,5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3 效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间,采用,或喷雾消毒。 据统计,目前世界上有41种主要,其中经空气传播的就有14种,占首位[1]。空气是疾病的主要传播媒介,而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方,的好坏,不仅对患儿的影响很大,也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的,也对提出严峻的考验。调查表明,空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时,就有发生感染的危险性,而如果细菌总数不足180 cfu/m3时,则这种危险性似乎很小[2]。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3,并随着时间的推移,细菌总数逐步上升,在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致

全院空气中细菌浓度监测规范

空气中细菌浓度监测规范 一、采样时间 1.采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从 事医疗活动前采样; 2.未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风 换气后与从事医疗活动前采样; 3.或怀疑与医院感染暴发有关时采样。 二、监测方法 (一)采样布点: 1.洁净手术部(室)及其他洁净用房可选择沉降法或浮游 菌法,参照GB 50333要求进行监测。房间面积>10m2者,每增加10 m2增设一个采样点。 手术区(operating zone),即需要特别保护的手术台及其周围区域。Ⅰ级手术室的手术区是指手术台 两侧边至少各外推0.9m、两端至少各外推0.4m后(包 括手术台)的区域;Ⅱ级手术室的手术区是指手术台 两侧边至少各外推0.6m、两端至少各外推0.4m后(包 括手术台)的区域;Ⅲ级手术室的手术区是指手术台 四边至少各外推0.4m后(包括手术台)的区域。Ⅳ

级手术室不分手术区和周边区。Ⅰ级眼科专用手术室手 术区每边不小于1.2m。详见以下示意图: 图1:百级,最少13个采样点。 图3:万级,最少7个采样点。 图2图3 2.未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法: (1)室内面积≤30 m2,设内、中、外对角线三点,内、外点应距墙壁1m处;见图4 (2)室内面积>30 m2,设四角及中央五点,四角的布点位置应距墙壁1m处。见图5

(二)采样方法 将普通营养琼脂平皿(Φ90mm)放置各采样点,采样高度为距地面0.8m~1.5m;采样时将平皿盖打开,扣放于平皿旁,暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。 暴露时间: 1.洁净手术部(室)和其他洁净场所:30分钟; 2.非洁净手术部(室)、非洁净骨髓移植病房、产房、导 管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护 病房、血液病病区:15分钟; 3.儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、 注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中 心(室)、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病 科门诊及其病房:5分钟。 (三)培养时间 1.洁净手术部及其他洁净用房空气培养,将送检平皿置 37℃24小时,计数菌落数。

空气培养的采样方法36934

医院常规空气细菌培养(自然沉降法)采样方法 一、采样时间?选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。 二、采样高度 与地面垂直高度80-150厘米。?三、布点方法 ? 1.面积≤30 m2,设一条对角线取三点,即中间一点,两端各距墙1米处各取一点(图1) 2.室内面积>30m2,设两条对角线,东,西,南,北,中取五点,其中东,西,南,北距墙均1米(图2) 四、采样方法?用9厘米直径普通琼脂平皿,打开盖后面朝下斜扣到底盘,在采样点准确暴露5分钟后,送检培养。 五、结果分析?I类区域:<10cfu/m3 II类区域:<200 cfu/m3?III类区域:<500 cfu/m3?六、附录?Ⅰ类区域:层流洁净手术室、层流洁净病房(参照洁净室空气培养方法与标准)。?Ⅱ类区域:普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。?Ⅲ类区域:儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。?Ⅳ类区域:传染病科及病房。 洁净室空气细菌培养监测布点与标准

一、局部百级,周围千级: 共放13个培养皿,其中手术区域5点,周边区8点。采样布置点示意图: 二、局部千级,周围万级:?共放9个培养皿,其中手术区域3点,周边区6点。采样布置点示意图: 三、局部万级,周围十万级: 共放7个培养皿,其中手术区域3点,周边区域4点。采样布置点示意图:

四、三十万级:面积>30m2布放4点,面积≤30 m2布放2点。 五、要求:? 1.送风口集中布置时,应对手术区和周边区分别检 测;如送风口分散布置时,全室统一检测,测点可均布,不应布置在送风门正下 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度方;? 上,手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m,培养皿放置30分 3.采样后的培养皿,应立即置于37度条件下培养48小时;钟;? ? 4.然后计数生长的菌落数,菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后1位。?5.放置培养皿示意图: 盖面朝下斜扣到底盘A边上 六、洁净室空气细菌菌落总数标准

空气细菌培养的采样方法

1空气细菌培养的采样方法检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便,目前大部分医疗单位采用。在消毒处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点,4角的布点部位距 空气消毒效 空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。

Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应 因为患儿本身呼吸系统抵抗力较低, 质量的好坏更能影响患儿疾病的转归,这一点应该引起高度重视。本次研究发现,儿科门诊输液室空气消毒后效果监测,符合标准,而且指数较低,接纳输液患者后细菌数逐渐上升,2 h、4 h均超标,因此,儿科门诊输液室在人员持续不断流动的情况下,无法持续进行紫外线消毒,仅靠一天两次的紫外线消毒是不能保证空气质量。自然通风降低菌落数的效果较持久。自然通风通过对流换气持续30 min,可以显著减少空气中微生物的含量,降低室内CO 及废气的浓度。每天累计通风2 h~3 h,能持久降低室内空气中的菌落数。有报道通风流出和进入的空气达到本房间容积时为换气1次,可清除原细菌数的3.2%,所以通风是最简单的消毒方法[3]。另外,也应注意及时关闭门窗,保持已清洁消毒后的室内净化效果。通过对空气中菌落的初步鉴定发现主要以革兰阳性菌为主,其中葡萄球菌、微球菌、奈瑟氏菌和棒状杆菌是本院儿科输液室中最主要的细菌,与其他文献报道葡萄球菌是医院病房空气中最

空气细菌培养流程图

空气细菌培养流程图 采样时间:采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采 样;未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动 前采样;或怀疑与医院感染暴发有关时采样。 监测方法:1、Ⅰ类环境:洁净手术部(室)及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法,参照GB50333要求进行监测,房间面积>10 m2者,每增加10 m2增设一个采样点。 2、Ⅱ类环境、Ⅲ类环境,未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法:室内面积≤30 cm2,设内、中、外对角线三点,内、外点应距墙壁1m处;室内面积>30 cm2,设四角及中央五点,四角的布点位置应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿(Φ90mm)放置各采样点,采样高度为距地面0.8m~1.5m;采样时将平皿盖打开,扣放于平皿旁,暴露规定时间后盖上平皿盖 采样时间及平皿:1、Ⅰ类环境:洁净手术部(室)及其他洁净用房,直径9cm平皿,不应超过30min;Ⅱ类环境:非洁净手术部(室)、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、ICU、血液病病区;直径9cm平皿,15min; 2、Ⅲ类环境:儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心(室)、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房,直径9cm平皿,5min 及时送检,计数菌落数: 1、Ⅰ类环境,将送检平皿置37℃恒温箱培养24h 2、Ⅱ类环境,将送检平皿置37℃恒温箱培养48h 3、Ⅲ类环境,将送检平皿置37℃恒温箱培养48h 4、若怀疑与医院感染暴发有关时,进行目标微生物的检测 结果判定: 1、洁净手术部(室)和其他洁净场所,空气中的细菌菌落总数要求应遵循GB50333 2、Ⅱ类环境≤4cfu/(15min·直径9cm平皿) 3、Ⅲ类环境≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)

空气培养

空气细菌培养操作规程 1.基本原理:空气中的细菌等微生物尘粒一起下降,在室内可采样处放好营养 琼脂平板,采样高度距离地面0.8~1.5m,采样时将平板打开,暴露5min或10min盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h,计算菌落数。 2.所需设备:9cm普通琼脂平皿,37℃恒温培养箱,记号笔,手套,口罩。 3.采样及采样原则:采样后必须对样品进行相应指标的检测;送检时间不的超过 6h,样品保存在0~4℃条件时不得超过24h。 4.采样时间:选择消毒处理后与医疗活动之前期间采样。 5.采样高度:与地面垂直高度0.8~1.5m。 6.布点方法:室内面积<30㎡,对角线内、中、外处设三点,内外点布位距墙壁 1m处。如下图: 室内面积>30㎡,设四角及中央五点,四角的布点位置应距墙壁1m处。如下图:

7.采样方法: (1)打开平皿,将盖口向下扣放,计时。 (2)暴露5min。 (3)记录采样房面积、时间、地点、位置、采样人及采样时环境条件(温度、湿度)。 (4)看表5min,收取平皿。入室内面积<30㎡,一条对角线上取三点,放平皿时先放最里边,收取时先收最外边点上的平皿。在平皿上注明采 自的科室房间,用胶布把平皿及平皿盖子固定好,以免在送检途中平 皿及平皿盖子分离造成污染。 8.注意事项: (1)平皿盖子要反扣于培养皿边上,禁止内面向上放于桌面。 (2)培养期间禁止人员走动。 9.细菌数的计算方 法细菌总数(cfu/m3=4500N/A×T)式中A=平板面积(cm2)T——平板暴露时间(min)N——平均菌落数(cfu) 这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面,5min内能落下的细菌相当于10L中含的细菌数而推算出来的。 10.空气消毒效果和污染状况的评价 空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定: Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅲ类区域细菌总数≤500cf u/m3并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅲ类环境包括

空气细菌测定

空气细菌测定 将采得的空气样品,通过培养,进行细菌菌落计数,或折算成单位体积空气中所含细菌数,对照标准,作出空气清洁或污染程度的评价。 一、沉降平皿法 将盛有培养基的平皿持平暴露在空气中一定时间,然后置温箱培养,计算所生长的菌落数。 1 ?制备培养基常用的营养琼脂培养基含以下成分:牛肉浸膏50g;蛋白陈10g;氯分钠 5g;琼脂20g;加水至1000ml。调节培养基pH7.2?7.4,经15磅30分钟高压灭菌。 2.空气采样 (1)选择有代表性的采样点,一般在室内四角及室中央,放置含营养琼脂的平皿。 (2)打开皿盖(将皿盖置于平皿底下,不可仰放,以防污染),将有培养基的平皿,暴露于空气10?20分钟(视空气清洁程度而定),采样毕合上皿盖,记录采样时间。 (3)培养皿置于37C温箱培养24小时。 (4)记录5个平皿的菌落总数。 3?结果计算:100cm"琼脂面积上,5分钟所降落的菌落数,相当于10L空气所含细菌数,计算结果如下: 细—' x t x m )乂N I uf> & 100UX50X N 50000N At At — t ――平皿暴露于空气中的时间(分钟) N――培养后,平皿上的菌落总数 A――所用平皿的面积(cm2) 二、离心式空气微生物采样法 (一)原理:采用LWC-1型离心式空气微生物采样器。当采样器通电后,借助采样器内叶轮的高速旋转,把距离40cm范围内的空气吸进采样器,由于离心力的作用,空气中的粒子冲击到含有琼脂培养基的塑料条上,而空气呈螺旋状离开采样器涡壳流出。 (二)操作步骤

1.根据所采细菌种类,往琼脂培养基条上浇灌不同种类的培养基,每条琼脂培养基的注入量约为6ml 。 2.把琼脂培养基条,从无菌塑料套中取出,插入采样器头部的涡壳内。 3.根据需要选定采样时间的采样地点。 4.将电源开关拨至“开”的位置,指示灯亮。 5.按动按钮,即起动开始采样。 6.采样完毕,关断电源开关。将基条从涡壳内抽出,放入无菌塑料套中(将条的凹面对准套的凸面)送恒温箱中进行培养,然后计算菌落数。 7.菌落计算 3 菌落形成单位CFU/m=琼脂培养基条上的菌落数/ 40X采样时间(min) 琼脂培养基的表面积为34 X 1cm2。 8.注意事项 (1)一条琼脂基条的采样时间最多不超过8 分钟。 (2)琼脂培养基条插入涡壳的开口处时,琼脂的表面要面向叶轮,基条插入后,突出部分应为1.5?2cm。 (3)打开开关“ 1”时,采样时间30秒,采样量20L;依次类推。 开关“全”关,采样时间8 分,采样量320L。

产房细菌培养采样方法

产房细菌培养采样方法 一采样及检查原则 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h,若样品保存于0 -40C条件时,送抢时间不得超过24h。 二空气采样及检查方法 采样高度时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采祥高度 与地面垂直高度80-150cm。 布点方法 室内面积≤30㎡,设一条对角线上取3点,即中心一点、两端各距墙1m处各 取一点; 室内面积>30㎡,东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 采样方法 用9m直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。 细菌菌落总数检查 产房空气细菌菌落总数≤200cfu/m3 三物体表面采样及检查方法 采样时间 选择消毒处理后4h内进行采样。 采样面积 被采表面<100㎡,取全部表而;被采表面≥100㎡,取100㎡ 采样方法 用5×5㎡的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水平样液的棉拭子1支,在规格权内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1—4个规格板面

积,剪去手接触部分,将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。 门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。 细菌菌落总数检查 规定执行。 结果计算 物体表面细菌菌落总数≤5cfu/㎡ 四医护人员手采样及检查方法 采样时间 在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 采样面积及方法 被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双 手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积30cm2〕, 并随之转动采样棉试子,剪去手接触部位。 将棉试子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘 米(cm2)计算。 细菌菌落总数检查 手细菌菌落总数≤5cfu/ cm2 五医疗用品采样及检查方法 采样时间 在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。 采样量及采样方法 浸有无菌生理盐水采样液的棉试子在被检物体表面涂抹采样,被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。 使用中消毒剂与无菌器械保存液 采样时间 采取更换前使用中的消毒剂

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