实验室常用培养基
实验用培养基配制 >
1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）7.6 ～1000mL ，pH7.4 10g ，NaCl 5g ，水牛肉膏3g ，蛋白胨) 用于放线菌培养号培养基 ( 2. 高氏 1
可溶性淀粉20g ，KNO 3 1g ，NaCl 0.5g ，K 2 HPO 4-·3H 2 O 0.5g ，MgSO 。～7.6 ，水1000mL ，pH7.4 7H 2 O 0.5g, 4 ·，FeSO4 ·7H 2 O 0.01g
配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。）培养基（用于从土壤中分离真菌）．马丁氏（ Martin 3
K 2 HPO 4 1g ，MgSO 4 ·7H 2 O 0.5g ，蛋白胨5g ，葡萄糖10g ，1/3000 孟。30min 121 ℃湿热灭菌100mL, 水900mL ，自然pH ，加拉红水溶液
30 μg/mL). 链霉素含量为时加入链霉素( 待培养基融化后冷却55 ～60 ℃) 用于霉菌或酵母菌培养马铃薯培养基(PDA)( 4.
1000mL ) 20g, 水去皮)200g, 蔗糖( 或葡萄糖马铃薯(
配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液. 酵母菌用葡萄糖霉菌用蔗糖, 1000mL, 加糖, 再补足至自然pH.
) )( 用于霉菌培养 5. 察氏培养基 ( 蔗糖硝酸钠培养基蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 ·7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 ·7H
7.2 ～2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0
) ( 用于支原体培养培养基6. Hayflik
～15g, pH7.8 琼脂10g, NaCl 5g, 蛋白胨)1000mL, 或浸出液( 牛心消化液．
8.0,
分装每瓶70mL, 121 ℃湿热灭菌15min, 待冷却至80 ℃左右, 每70mL 中加入马血清
20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素
G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊. , 需特别注意安全操作是极毒的药品
) 醋酸钠培养基培养基 (McCLary) ( 7 ．麦氏葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ，酵母膏0.25g ，醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g ，蒸馏水
15min 。℃湿热灭菌l00mL 。溶解后分装试管，1l5
) ．反应和甲基红试验用于 V.P 8 ．葡萄糖蛋白胨水培养基 (
蛋白胨0.5g ，葡萄糖0.5g ，K 2 HPO 4 0.2g ，水100mL, pH7.2, 1l5 ℃湿热20min 。灭菌
) ( 用于吲哚试验9 ．蛋白胨水培养基。湿热灭菌20min ～7.4, 121 ℃蛋白胨10g, NaCl 5g, 水1000mL ，pH7.2
) ( 用于细菌糖发酵试验10 ．糖发酵培养基蛋白胨0.2g, NaCl 0.5g, K 2 HPO 4 0.02g ，水100mL ，溴麝香草酚蓝( 质量分数1% 水溶液) 0.3mL ，糖类lg 。分别称取蛋白胨和NaCl 溶于热水中，调pH 至7.4 ，再加入溴麝香草酚蓝( 先用少量质量分数95% 乙醇溶解后，再加水配成质量分数1% 水溶液) ，加入糖类，分装试管，装量 4 ～5cm 高，并倒放入一杜氏
小管( 管口向下，管内充满培养液) 。115 ℃湿热灭菌
20min 。灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等( 后。1.5%) 两种糖的用量常加大为质量分数) 用于厌氧菌培养) ( ( 强化梭菌培养基 11. RCM 培养基酵母膏3g ，牛肉膏l0g ，蛋白胨10g ，可溶性淀粉lg ，葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g ，NaCl 3g ，NaAc 3g, 水l000mL, pH8.5 ，刃天青3mg/L,
。30min 湿热灭菌℃l2l
) 用于厌氧菌培养( 12. TYA 培养基
，醋酸(bacto-typetone)6g ，胰蛋白胨2g ，酵母膏2g ，牛肉膏40g 葡萄糖．
铵3g, KH 2 PO 4 0.5g ，MgSO 4 ·7H 2 O 0.2g ，FeSO 4 ·7H 2 O 0.01g ，水。30min 1000mL, pH6.5, 121 ℃湿热灭菌) 用于厌氧菌培养 13 ．玉米醪培养基 (
玉米粉65g ，自来水1000mL ，混匀，煮10min 成糊状，自然pH, 121 ℃湿30min 。热灭菌
) 用于厌氧菌培养 14 ．中性红培养基 (
葡萄糖40g ，胰蛋白胨6g ，酵母膏2g ，牛肉膏2g ，醋酸铵3g ，KH 2 PO
4 5g ，中性红0.2g, MgSO 4 ·7H 2 O 0.2g ，FeSO 4 ·7H 2 O 0.01g, 水1000ml,
。℃湿热灭菌30min pH6.2, 121
) ( 用于厌氧菌培养15 ． CaCO3 明胶麦芽汁培养基麦芽汁(6 波美)1000mL ，水1000mL ，CaCO 3 10g, 明胶10g ，pH6.8,
。30min 121 ℃湿热灭菌) ( 用于乳酸发酵BCG 牛乳培养基 16 ．(A) 溶液：脱脂乳粉100g ，水500mL ，加入质量分数1.6% 溴甲酚绿(B.C.G)
20min 。灭菌1mL 乙醇溶液，80 ℃(B) 溶液：酵母膏10g ，水500mL ，琼脂20g , pH6.8, 121 ℃湿热灭菌
。20min
溶液混合均匀后倒平板。(B) (A) 以无菌操作趁热将、) ( 用于乳酸发酵17 ．乳酸菌培养基
牛肉膏5g ，酵母膏5g ，蛋白胨10g ，葡萄糖10g ，乳糖5g, NaCl 5g ，水。℃湿热灭菌20min 1000mL, pH6.8, 121
) ( 用于酒精发酵．酒精发酵培养基18
蔗糖10g, MgSO 4 ·7H 2 O 0.5g, NH 4 NO 3 0.5g, 质量分数20% 豆芽汁2mL, 。pH 100mL KH 2 PO 4 0.5g ，水，自然) ( 用于钩端螺旋体培养柯索夫培养基19. CaCl 0.02g, KH 2 PO
，0.4g, NaCl 0.7g, KCl 0.02g, Na HCO 3 0.01g 优质蛋白胨．
。40mL 蒸馏水500 mL ，无菌兔血清4 0.09g, NaH 2 PO 4 0.48g,
制法：除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调pH 至7.2, 121 ℃湿热灭菌20min ，待冷却后，加入无菌兔血清，制成8% 血清溶液，然后分装试管lh 后备用。, 56 ℃水浴灭活（ 5 ～10mL/ 管） 20 ．豆芽汁培养基黄豆芽500g ，加水1000mL ，煮沸lh ，过滤后补足水分，121 ℃湿热灭菌50% 的豆芽汁，后存放备用，此即质量分数为
用于细菌培养：质量分数10% 豆芽汁200mL ，葡萄糖( 或蔗糖)50g ，水。～7.4 800mL, pH7.2
用于霉菌或酵母菌培养：质量分数10% 豆芽汁200mL ，糖50g ，水800mL ，。霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。自然pH
) ( 细菌培养，常在分子生物学中应用LB(Luria—Bertani) 培养基 21 ．双蒸馏水950mL ，胰蛋白胨l0g, NaCl l0g ，酵母提取物(bacto- yeast
extract)5g ，用lmol/L NaOH ( 约l mL) 调节pH 值至7.0 ，加双蒸馏水至总30min 。121 ℃湿热灭菌体积为1L ，含氨苄青霉素LB 培养基: 待LB 培养基灭菌后冷至50 ℃左右加入
抗生素，。100mg/L 80 ～至终浓度为
) ) ( 用于水体中大肠菌群测定22 ．复红亚硫酸钠培养基 ( 远藤氏培养基蛋白胨10g ，牛肉浸膏5g ，酵母浸膏5g ，琼脂20g ，乳糖10g, K 2 HPO 4
1000mL 。20mL ，蒸馏水0.5g ，无水亚硫酸钠5g, 5% 碱性复红乙醇溶液制作过程：先
将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL 水中，加热溶解，再加入K 2 PO 4 ，溶解后补充水至l000mL ，调pH 至7.2 ～7.4 。随后加入乳糖，混匀溶解后，于115 ℃湿热灭菌20min 。再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中，用少许无菌水使其溶解，在水浴中煮沸10min 后，立即滴加于20mL 质量分数5% 碱性复红乙醇溶液中，直至深红色转变为淡粉红色为止。将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中，混匀后立即倒平板，待
凝固后存放冰箱备用，若颜色由淡红变为深红，则不能再用。) 用于水体中大肠菌群测定
( ．乳糖蛋白胨半固体培养基23
蛋白胨10g ，牛肉浸膏5g ，酵母膏5g ，乳糖10g ，琼脂5g ，蒸馏水
。20min (l0mL/ 管), 115 ℃湿热灭菌1000mL ，pH7.2 ～7.4 ，分装试管
) ( 用于多管发酵法检测水体中大肠菌群24 ．乳糖蛋白胨培养液
蛋白胨10g ，牛肉膏3g ，乳糖5g ，NaCl 5g ，蒸馏水l000mL ，质量分数
1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液lmL 。调pH 至7.2 ，分装试管(l0mL/ 管) ，并放20min 。℃湿热灭菌入倒置杜氏小管，l15
) 用于水体中大肠菌群测定 25 ．三倍浓乳糖蛋白胨培养液 (
将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大 3 倍加入到l000mL 水中，制法同20min 。湿热
灭菌每管5mL ，1l5 ℃上，分装于放有倒置杜氏小管的试管中，) )( 培养基用于水体
中大肠菌群测定和细菌转导26 ．伊红美蓝培养基 (EMB
蛋白胨l0g, 乳糖10g, K 2 HPO 4 2g ，琼脂25g, 质量分数2%/ 伊红Y( 曙。pH7.4 ) 水溶液l3mL ，( ) 水溶液20mL, 质量分数0.5% 美蓝亚甲蓝红
制作过程：先将蛋白胨、乳糖、K 2 HPO 4 和琼脂混匀，加热溶解后，调pH 至
7.4, 1l5 ℃湿热灭菌20min ，然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液，充分混匀，防止产生气泡。待培养基冷却到50 ℃左右倒平皿。如培养基太热会产生过多的凝集水，可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖，其余成分不变。) 用于细菌转导27 ．加倍肉汤培养基 (
7.6 。1000mL, pH7.4 ～6g ，蛋白胨20g, NaCL 10g ，水牛肉膏) ( 用于细菌转导
28 ．半固体素琼脂。30min 100mL, 121 ，水℃湿热灭菌琼脂1g
) ( 用于产蛋白酶霉菌菌株筛选29 ．豆饼斜面培养基
豆饼100g 加水 5 ～ 6 倍，煮出滤汁100mL ，汁内加入KH 2 PO 4 质量分数为0.1%, MgSO 4 质量分数为0.05%, (NH 4 ) 2 SO 4 质量分数为0.05% ，可 2.5% 。，琼脂质量分数为2% ～溶性淀粉质量分数为2%, pH6
液。B 分别配制A 液和 ) 用于蛋白酶菌株筛选 30 ．酪素培养基(
，加适量蒸馏水，并加热4g 。干酪素7H 2 O 1.07g Na 2 HPO 4 ·液：称取A 溶解。，加水溶解。KH 2 PO 4 0.36g B 液：称取A 、B 液混合后，加入酪素水解液0.3 mL, 加琼脂20g ，最后用蒸馏水定容1000mL 。至
酪素水解液的配制：1g 酪蛋白溶于碱性缓冲液中，加入质量分数1% 的枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL 加水至100mL, 30 ℃水解lh 。用于配制培养基时，其100mL 以上水解液。1000mL 培养基中加入用量为
) 用于筛选营养缺陷型．细菌基本培养基 ( 31
Na 2 HPO 4 ·7H 2 O 1g ，MgSO 4 ·7H 2 O 0.2g , 葡萄糖5g , NaCl 5g , K 2 。湿热灭菌30min HPO 4 lg ，水l000mL, pH7.0, 1l 5 ℃
) ( 用于酵母原生质体融合32. YEPD 培养基酵母粉10g, 蛋白胨20g ，葡萄糖20g ，蒸馏水1000mL, pH6.0 ，115 ℃湿。20min 热灭菌) ( 用于酵母原生质体融合33. YEPD 高渗培养基
琼脂。3% 的NaCL ，质量分数在YEPD 培养基中加入0.6mol/L
) 用于酵母原生质体融合 34. YNB 基本培养基 (
质量分数0.67% 酵母氮碱基(YNB, 不含氨基酸，Difco), 质量分数2% 葡萄糖，质量分数3% 琼脂，pH6.2 。另一配方为：葡萄糖10g (NH 4 ) 2 SO 4 1g ，
K 2 HPO 4 0.125g ，KHPO 4 0.875g, KI 0.0001g ，MgSO 4 ·7H 2 O 0.5g, CaCl
2 ·2H 2 O 0.lg, NaCl0.1g ，维量元素母液lmL, 维生素母液lmL( 母液均按常规。6.0 ，水1000mL, pH5.8 ～) 配制
) 用于原生质体融合 35. YNB 高渗基本培养基 (
0.6mol/LNaCl 。YNB 基本培养基中加入在
) ( 用于检查氧与菌生长的关系36 ．酚红半固体柱状培养基蛋白胨1g ，葡萄糖10g, 玉米浆10g ，琼脂7g, 水1000mL ，pH7.2 。在调好pH 后，加入质量分数 1.6% 酚红溶液数滴，至培养基变为深红色，分装。细菌在此培养20min 灭菌℃1l5 ，1/2 于大试管中，装量约为试管高度的．
基中利用葡萄糖生长产酸，使酚红从红色变成黄色，在不同部位生长的细菌，可使培养基的相应部位颜色改变。但注意培养时间太长，酸可扩散以致不能正确判断结果。以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态，只需改变琼脂用量即可，前者质0.8% ～ 2.0% ～量分数为1.5% ，后者质量分数为0.3% 。