白腐菌液体菌种培养条件的试验研究_吴薇
Ｎｏ．１．２００８
收稿日期：２００７－０７－２０＊通讯作者
基金项目：中国农业科学院作物科学研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项。
作者简介：吴薇（１９７０—），女，浙江人，博士研究生，副教授，研究方向为农产品加工与贮藏工程和生物质材料工程。
吴
薇１，顿宝庆２，姜训鹏１，吕程序１，高振江１＊，路明２＊
（１．中国农业大学工学院，北京１０００８３；２．中国农科院生物质能源研究中心，北京１０００８１）
摘要：对３种白腐菌的液体菌种培养条件进行了优化研究。结果表明，黄孢原毛平革菌液体菌种培养的较优条件为培养时间４ｄ、初始ｐＨ６．０、装量５０ｍＬ、琼脂添加量０．２％，Ｗ３液体菌种培养的较优条件为培养时间５ｄ、初始ｐＨ６．５、装量５０ｍＬ、琼脂添加量０．３％，变色栓菌液体菌种培养的较优条件为培养时间５ｄ、初始ｐＨ６．５、装量７５ｍＬ、琼脂添加量０．１％。关键词：白腐菌；液体菌种；培养条件中图分类号：ＴＳ２０１．３
文献标志码：Ａ
文章编号：１００５－９９８９（２００８）０１－００１６－０３
白腐菌液体菌种培养条件的
试验研究
Ｓｔｕｄｙｏｎｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎｌｉｑｕｉｄｓｔｒａｉｎｏｆｔｈｅｗｈｉｔｅ－ｒｏｔｆｕｎｇｉ
ＷＵＷｅｉ１，ＤＵＮＢａｏ－ｑｉｎｇ２，ＪＩＡＮＧＸｕｎ－ｐｅｎｇ１，ＬＶＣｈｅｎｇ－ｘｕ１，ＧＡＯＺｈｅｎ－ｊｉａｎｇ１＊，ＬＵＭｉｎｇ２＊
（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３；２．ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆ
ＥｎｅｒｇｙＳｏｕｒｃｅｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：
Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，
ｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎｌｉｑｕｉｄｓｔｒａｉｎｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅｗｈｉｔｅ－ｒｏｔｆｕｎｇｉｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｆｏｒｔｈｅ
ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｓｔｕｄｙａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｗｈｉｔｅ－ｒｏｔｆｕｎｇｉｉｎｔｈｅｒｅｌｅｖａｎｔｆｉｅｌｄｓｃａｎｂｅｉｍｐｒｏｖｅｄｉｎａｌａｒｇｅｅｘｔａｎｔ．
ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｎｌｉｑｕｉｄｓｔｒａｉｎｏｆＰｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ
ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍｗａｓ４ｄａｙｓｃｕｌｔｕｒｅｐｅｒｉｏｄ，ｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｐＨ６．０，ｌｉｑｕｉｄｃａｐａｃｉｔｙ５０ｍＬ，ａｇａｒｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ０．２％．Ｔｈｅ
提高海藻糖的百分含量。
将海藻糖和三氯乙酸混合液用３倍体积的９５％乙醇在４℃冰箱中醇析１２ｈ后，在５０００ｒ／ｍｉｎ下离心２０ｍｉｎ得到沉淀物。将此沉淀物冷冻干燥１２ｈ后，可得海藻糖晶体。
参考文献：
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食品开发与机械
１６
Ｎｏ．１．２００８处理黄孢原毛平革菌
Ｗ３变色栓菌
１０．３５２０．３６６０．５３４２０．４７１０．２７１０．４１９３０．３２２１．６０６０．４６５４０．７８３２．２６８０．４３４５０．５９９０．９５３０．４４９６０．８７８２．０２４０．２９０７０．７５６２．４６９０．３２４８０．８５０３．０２２０．３７８９
０．３１７
２．７２１
０．７５３
表２
各菌种菌丝干质量结果（ｇ）
水平因素
培养时间／ｄ
Ａ
初始ｐＨ
Ｂ装量／ｍＬＣ琼脂添加量（ｗ／ｖ）／％
Ｄ１３５．５５００．１２４６．０７５０．２３
５
６．５
１００
０．３
表１
４因素３水平正交试验设计表Ｌ９（３４）
木质素是植物细胞壁的重要组成部分，在自然界中木质素含量丰富，是仅次于纤维素的天然高分子化合物。目前，影响人们对植物纤维素原料高效利用的关键问题之一是木质素的阻碍作用。要想有效利用木质纤维素原料中的纤维素和半纤维素就必须首先将它们从木质素的束缚中解脱出来，传统的物理和化学方法由于存在能耗高、污染大等缺点，使得人们越来越热衷于木质素生物降解的研究。
白腐菌是唯一能彻底地降解木质素的微生物。目前，在白腐菌中研究较多的是那些降解木质素能力强并具有较强选择性的菌种，例如黄孢原毛平革菌（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）、变色栓菌（云芝）
（Ｔｒａｍｅｔｅｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）等［１－３］。目前，国内外对白腐菌的木质素降解研究多采用固体菌种和孢子菌种，也有一些是采用液体菌种，但未见对白腐菌液体菌种培养条件优化研究方面的相关报道。
液体菌种与固体菌种相比较而言，有几个明显的优点：菌种培养周期短，产量大，菌龄一致，接种后发菌点多，萌发迅速［４］。而孢子菌种虽然也具有发菌点多的优点，但适用面狭窄，只适用于一些能产生大量无性孢子的菌种。生产孢子的周期也较长，如黄孢原毛平革菌产生分生孢子需要７～１０ｄ，而培养液体菌种只需２～３ｄ，并且当菌种接种后，孢子菌种需要经过孢子萌发阶段才能形成菌丝，而液体菌种无需此过程。ＡｌｅｘａｎｄｅｒＪａｇｅｒ等研究表明，用液体菌种接种比用孢子接种可提前４～５ｄ达到木质素降解酶的产酶高峰［５］。
本文在选出适宜培养基的基础上，针对影响白腐菌液体菌种质量的培养基初始ｐＨ值、培养基黏度、摇瓶装量、培养时间等因素［６］，设计了相应的试验方案，对３种白腐菌的液体菌种培养条件进行了优化，获得了理想的工艺参数，可较大程度提高白腐菌在相关领域的研究和应用的效率。
１材料与方法１．１
菌种
黄孢原毛平革菌，Ｗ３（一株自分离的白腐真菌），
变色栓菌。
１．２原料及试剂
马铃薯、麦麸皮、蔗糖、红糖：市售；其他试
剂：分析纯。
１．３培养基
马铃薯１００ｇ，红糖１５ｇ，葡萄糖１０ｇ，麸皮３０
ｇ，蛋白胨１．５ｇ，ＫＨ２ＰＯ４１．５ｇ，ＭｇＳＯ４０．７５ｇ，ＶＢ１０．１ｍｇ，水１０００ｍＬ。１．４
试验方法
本试验所采用的４因素为Ａ培养时间、Ｂ初始
ｐＨ、Ｃ装量、Ｄ琼脂添加量，采用４因素３水平正交试验设计，见表１。
１．５试验结果的测定方法
测定菌球干质量法：先把剪好的纱布放到６５℃
的电热鼓风干燥器中烘至恒质量，然后放到干燥器中冷却到室温称质量得ｍ１，用干燥过的４层纱布过滤出菌球后，放到６５℃的电热鼓风干燥箱中烘至恒质量，然后放到干燥器中冷却到室温称质量得ｍ２，菌球干质量ｍ＝ｍ２－ｍ１。
２结果与分析２．１
试验结果
图１￣图３是各菌种较优水平的液体菌种形态。
２．２试验结果极差分析的趋势图２．３
分析与结论
注：黄孢原毛平革菌的培养温度为３９℃，其他菌种培养温度为２８℃。用灭菌打孔器在平板边缘取直径为１．１ｃｍ的菌塞，并将其个数视为接种量的数量。
ｏｐｔｉｍｕｍｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｎｌｉｑｕｉｄｓｔｒａｉｎｏｆＷ３ｗａｓ５ｄａｙｓｃｕｌｔｕｒｅｐｅｒｉｏｄ，ｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｐＨ６．５，ｌｉｑｕｉｄｃａｐａｃｉｔｙ５０ｍＬ，ａｇａｒｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ０．３％．ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｎｌｉｑｕｉｄｓｔｒａｉｎｏｆＴｒａｍｅｔｅｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒｗａｓ５ｄａｙｓｃｕｌｔｕｒｅｐｅｒｉｏｄ，ｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｐＨ６．５，ｌｉｑｕｉｄｃａｐａｃｉｔｙ７５ｍＬ，ａｇａｒｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ０．１％．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｗｈｉｔｅ－ｒｏｔｆｕｎｇｉ；ｌｉｑｕｉｄｓｔｒａｉｎ；ｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
食品添加剂
食品开发与机械１７
Ｎｏ．１．２００８
图４
黄孢原毛平革菌菌丝干质量极差分析趋势图
０．８０．７０．６０．５０．４０．３
干质量／ｇ
３
４
５
５．５６６．５５０７５１０００．１０．２０．３
时间／ｄ
ｐＨ
装量／ｍＬ琼脂添加量／％０．７５３
０．３８２０．６４１０．６
０．６４
０．５０６
０．６９３
０．５２４
０．５５９０．４２３
０．７０２
０．６５２时间
ｐＨ装量
琼脂添加量
图５
Ｗ３菌丝干质量极差分析趋势图
３２．５２１．５１０．５
干质量／ｇ
０．７４８
２．７３７１．７４８
１．７０１
１．４１５
２．１１７
１．８０４１．７５８
１．６７６１．３４７１．５８８
２．２９９
时间
ｐＨ装量琼脂添加量
３４５５．５６
６．５５０７５１０００．１０．２０．３
ｐＨ
装量／ｍＬ
琼脂添加量／％
时间／ｄ
图１
黄孢原毛平革菌
图２
Ｗ３
图３变色栓菌
图６变色栓菌菌丝干质量极差分析趋势图
经极差分析可知，黄孢原毛平革菌４因素的主次顺序是Ａ＞Ｄ＞Ｃ＞Ｂ，Ｗ３４因素的主次顺序为Ａ＞Ｄ＞
Ｂ＞Ｃ，变色栓菌４因素的主次顺序为Ｄ＞Ｃ＞Ａ＞Ｂ。对于主要因素选最好的水平，次要因素则可根据节约、方便等具体情况确定选用水平，把它们组合起来，
就得到较优组合。
黄孢原毛平革菌培养的较优条件为Ａ２Ｄ２Ｃ１Ｂ２，也就是培养时间４ｄ、初始ｐＨ６．０、装量５０ｍＬ、琼脂添加量０．２％较好。
Ｗ３培养的较优条件为Ａ３Ｄ３Ｂ３Ｃ１，也就是培养时间
５ｄ、初始ｐＨ６．５、装量５０ｍＬ、琼脂添加量０．３％较好。
变色栓菌培养的较优条件为Ｄ１Ｃ２Ａ３Ｂ３，也就是培养时间５ｄ、初始ｐＨ６．５、装量７５ｍＬ、琼脂添加量０．１％较好。
３
小结
通过上述的试验研究，分别得到３种白腐菌液
体菌种培养的较优条件，可较大程度提高这３个菌种后续研究和应用的效率，也为提高其他白腐菌相关领域研究和应用效率提供重要参考。
参考文献：
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０．７０．６０．５０．４０．３０．２
０．３９１０．４７３
０．４８５
０．４３１０．５０８０．４１５０．４０１
０．５３５０．４１３
０．５７９
０．３４４
０．４２５干质量／ｇ
３
４５
５．５６
６．５５０７５１０００．１０．２０．３
ｐＨ
装量／ｍＬ琼脂添加量／％时间／ｄ
食事传递
食品开发与机械
近日，中国绿色食品发展中心正式批准认证河套酒业集团腾格里塔拉奶酒公司生产的产品为绿色食品。同
时，该公司还取得了全国工业产品生产许可证，顺利通过了ＱＳ认证。
腾格里塔拉奶酒公司生产的发酵型奶酒，以内蒙古大草原天然、营养、健康无污染的纯牛奶为原料，采用现代生物技术精心酿制而成，通过５０余项质量指标的严格检测，产品具有奶香纯正、醇和爽净、甘甜醇厚的民族风格特点。
此次，腾格里塔拉奶酒公司顺利通过“双认证”，使该公司的产品获得了进入市场的有效通行证，确保了产品质量，提高了产品的市场知名度和美誉度。
（河川）
腾格里塔拉奶酒公司通过“双认证”
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鸡枞菌种植技术是什么
鸡枞菌种植技术是什么 一、菇棚的建造 二、母种的扩繁 1、母种培养基的制作，配制一千毫升母种培养基需要去皮土豆200克，麸皮100克，葡萄糖20克，琼脂20克，硫酸镁0.5克， 磷酸二氢钾2克，蛋白胨5克，清水一千毫升。首先选择质量较好 的土豆将皮削掉，称取200克，切成块状，加入锅中，在加入一千 毫升的清水，在称取100克麦麸，在放之前为了防止麦麸散乱在锅里，要先用纱布把麦麸包起来，文火煮沸，沸腾后小火保持30分钟。待土豆煮成浆状用1000目的纱布过滤煮好的土豆液，如果不够一千 毫升可以加入50摄氏度的温水补足。然后在将过滤好的土豆液继续 放在锅中煮3分钟左右，这时候将称量好的葡萄糖、琼脂、蛋白胨、磷酸二氢钾和硫酸镁放入锅中文火煮20分钟。为了防止锅底烧焦， 要边煮边搅拌。直到琼脂等原料完全溶化，在将煮好的溶液倒入量 水杯中，母种培养液就做好了。 2、分装，因为母种培养基的温度降到45度以下时会凝固，所以制备好的培养基要尽快乘热分装入试管。试管规格为直径20毫米， 长200毫米。分装时使每支试管的分装量相当于试管长度的四分之 一左右，分装好后还要进行封口，可以用未经脱脂的原棉，塞入的 松紧度以用手抓棉塞不脱落为标准。 4、接种。接种要在无菌室中的操作台上进行，接种前首先要准 备好以下工具，酒精灯，酒精棉，接种铲和接种耙。 接种时接种人员的手和接种针要用75%的酒精棉球擦洗，之后点 燃酒精灯，使火焰周围空间形成无菌区。接着一手拿着接种铲在火 焰上进行灼烧灭菌，一手拿着培养基试管和母种试管，试管口也要 在火焰上稍微烤一下以杀来管口上的杂菌。把试管上的棉塞取下， 用接种铲取一块体积大约为1立方厘米的母种，迅速放入母种培养
白腐真菌
白腐真菌 前言 白腐真菌(white rot fungi)为丝状真菌，系木腐真菌(wood—degrading fungi)的一种，绝大多数为担子菌纲，少数为子囊菌纲，着生在木材上，因其能降解木材中的木质素、纤维素和半纤维素使木材呈现特征性的白色腐朽状而得名。日前研究最多的有：黄孢原毛平革菌(Phanerochete chrysosporium)[1]、彩绒草盖菌(Coridusversicolor)、变色栓菌(Thametes versicolor)、射脉菌(Phlebia radiata)、风尾菇(Pleurotus pul—mononanus)等。其中黄孢原毛平革菌是其典型种，也是研究木质素降解的模式菌。白腐真菌是已知的唯一能在纯系培养中有效地将木质素降解为CO2和H2O 的一类微生物。木质素是由苯丙烷单元通过醚键和碳一碳键连接而成的具有三维空间结构的高分子芳香族类聚合物。组成单元的结构及其连接键复杂而稳定，使得木质素很难降解[2]。木质素结构的异质性和不规则性，决定了对其生物降解的复杂性和特殊性。白腐真菌经过长期进化，形成了相应的适应性特性：白腐真菌能分泌氧化酶到胞外，在催化氧化过程中形成自由基，进而攻击木质素结构，此过程不需要特异的电子供体，因此其作用具有非特异性[3]。1983年Kirk和Gold两个研究小组发现能够利用白腐真菌的上述生物学特性降解染料[4,5]。此后，白腐真菌受到许多研究者的高度关注，并在将白腐真菌应用于降解诸如染料、三硝基甲苯(TNT)等许多难降解有机物方面进行了有成效的探索[6]，在木质素降解酶的生理生化过程以及基因调控方面获得了一些有意义的研究成果。以下就酶系统基因结构，催化机制，应用及新发展几方面进行介绍。木质素降解酶系统 白腐真菌依赖一系列酶催化反应实现对难降解有机物的转化，这一过程殊为复杂，其中的关键酶系为木质素降解酶系。木质素降解酶主要包括了3 种酶:木质素过氧化物酶( lignin peroxidase，LiP) 、锰过氧化物酶( mangnase peroxidase，MnP) 、漆酶( laccase，Lac) 这3 种木质素降解酶均能单独降解木质素，也能两两联合，或者3 种酶一起作用对木质素进行降解。 1、木质素降解酶的比较 1.1 LiP、MnP 和Lac 三种酶的结构及组成特点
酵母富硒培养条件研究进展
酵母富硒培养条件研究进展 作者：周洋枝苏蒙蒙路栋时杰高玉荣 来源：《农产品加工·上》2019年第01期 摘要：在功能性食品开发生产方面，富硒酵母可以作为硒营养添加剂的替代品，其生物活性和食用安全性优于亚硒酸钠，具有很高的医用价值。对富硒酵母类型及筛选、酵母富硒发酵培养基成分和影响酵母富硒条件的因素进行了综述，以期为富硒酵母产品和合理利用提供参考。 关键词：富硒酵母;亚硒酸钠;有机硒;培养;研究 中图分类号：S816.7; ; ; 文献标志码：A; ; doi：10.16693/https://www.wendangku.net/doc/393095209.html,ki.1671-9646 （X）.2019.01.021 Research Progress on the Culture Conditions of Se-enriched Yeast ZHOU Yangzhi，SU Mengmeng，LU Dong，SHI Jie，GAO Yurong （College of Chemistry and Materials Engineering，Chaohu University，Hefei，Anhui 238000，China） Abstract：In the development and production of functional food，Se-enriched yeast can be used as a substitute for selenium nutrition additiveit has high medicinal value. Because its high biological activity and edible safety are superior to sodium selenite. This paper summarized the types and screening of Se-enriched yeast，the composition of yeast Se-enriched fermentation medium and the factors affecting the condition of Se-enriched yeast. In order to provide a reference for the production and rational utilization of Se-enriched yeast products. Key words：Se-enriched yeast;sodium selenite;organic selenium;culture;reseavch 硒作為一种抗氧化剂，参与阻断体内自由基反应，避免胰岛β细胞被氧化破坏，维持其正常功能运行，可降低尿糖和血糖，促进人体内糖分代谢[1]。研究发现，癌症发生与血硒水平的高低有着密不可分的关系，硒可调节人体对维生素吸收和相关酶的合成，可抑制致癌物。现如今研究主要集中在通过生物体内转化有机硒，用于开发功能性富硒食品和临床预防及治疗相关疾病，而酵母是有机硒富集最佳载体，富硒酵母可食用安全性和生理活性高，且生产周期相对较短，对人体或动物体内的血硒水平有改善作用，若能实现产业化，可以改善我国食品缺硒现状，带来巨大经济效益和社会效益。 1; ;用于富硒的微生物类型
真菌培养基
真菌培养基 一、沙保罗琼脂培养基 [用途] 供真菌及酵母样真菌的分离培养用。 [配法] 麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g，蒸馏水1L。 将上述成分溶于水，加热溶解，调pH至6.0±0.2，分装三角瓶或试管中，118℃灭菌15mi n，倾注平板或置斜面，无菌试验后备用。 [用法] 将标本接种培养基，如系血液标本，则采取1～2ml，与冷却至45℃左右沙保琼脂混合，倾注接种平板。分别置35℃和25℃恒温箱内同时培养。35℃培养48h,25℃需连续培养5天,逐日观察结果。发现真菌及酵母样可疑菌落，转种沙保菌斜面，获得纯培养后进行鉴定。 [质量控制] 白色念珠菌和新型隐球菌生长良好。 注： ⑴本培养基如不加入琼脂，即为沙保罗液体培养基，供真菌及念珠菌的增菌培养用。 ⑵增加氯霉素0.05～0.125mg/ml或放线菌酮0.5mg/ml，可抑制细菌和污染的霉菌及隐球菌生长。此二种药均耐热，可直接加入培养基内高压灭菌。 ⑶添加酵母浸膏5mg/ml，可促进皮肤癣菌生长。增加维生素B 0.1mg/ml，可促进紫色癣菌和断发癣菌生长。 ⑷将麦芽糖减少到20g/L，为沙保罗20g/L麦芽糖琼脂培养基，可供诱导真菌产生孢子用。 ⑸该培养基呈酸性，应提高20%的琼脂用量。 二、玉米粉琼脂培养基 [用途]
鉴定酵母样真菌用。白色念珠菌在该培养基上25℃24h培养可长出假菌丝，顶端有典型的厚壁孢子，可与其它念珠菌鉴别。 [配法] 玉米粉4g，琼脂粉8g，蒸馏水1L （pH6.0±0.2）。 将细米粉加水浸泡数分钟，扎紧瓶口，浸入60℃水浴4h，取出后用沙布过滤，除去粗渣，补足水分。无须调整pH。加入琼脂，煮沸溶解，有沉淀物再过滤1次，分装试管，121℃灭菌15min备用。 用玻璃片法点种后，置平皿内，保持一定湿度，置23～26℃下培养24～48h。取出玻片培养物，用高倍镜观察真假菌丝和有无厚壁孢子。 [质量控制] 白色念珠菌（ATCC 26790）厚膜孢子阳性；新型隐球菌（ATCC 9763）厚膜孢子阴性。注： ⑴玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同。 ⑵该培养基加入10ml/L Tween-80，制成玉米粉Tween-80琼脂，用途相同，效果更好。
植物组织培养具备的基本培养条件
植物组织培养具备的6大基本培养条件 在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、PH 值、渗透压等各种化学环境条件都是影响组织培养育苗的生长和发育重要因素。 一、温度(temperature) 因为温度是植物组织培养中的重要因素，所以植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数植物组织培养都是在23? 27C之间进行，一般采用25士2C。低于15C时培养，植物组织会表现生长停止，高于35 C时对植物生长不利。但是，不同植物培养的适温不同。白鹤非的最适温度是20C、月季是25?27C、番茄是28C。温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28C为最好，在12C以下，33C以上形成率皆最低。 不同培养目标采用的培养温度也不同，百合鳞片在30 C以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25%以下的高。桃胚在2?5C条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35C处理草莓的茎尖分生组织3?5d,可得到无病毒苗。 二、L ED光照(light) 组织培养中使用光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光照时间方面：
1、LED光照强度(light intensity) 光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的 研究情况看，光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。 2、LED光质(light wave) 光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养，8周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织，而唐菖蒲子球块接种15天后, 在蓝光下培养首先出现芽，形成的幼苗生长旺盛，而白光下幼苗纤细。 3、LED光周期(light period) 试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养，最常用的 周期是16h的光照，8h的黑暗。研究表明，对短日照敏感的品种的器官组织，在短日照下易分化，而在长日照下产生愈伤组织，有时需要暗培养，尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光下更好。如红花、乌饭树的愈伤组织。 三、湿度(humidity) 湿度的影响包括培养容器保持和环境的湿度条件，容器内主要受培养基水分含量和封口材料的影响。前者又受琼脂含量的影响。在冬季应当适当减少琼脂用量，否则，将使培养基干硬，以致不利于外植体接触或插进培养基，导致生长受阻。封口材料直接影响容器内湿度情况，
细菌真菌放线菌培养基配方
。 细菌培养基：肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的一． 培养基,肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。 肉膏蛋白胨培养基 1.药品比例： 牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl5g，琼脂15～20g，水1000mL， PH7.4～7.6 2.实验器材： 牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡
萄糖、孟加拉红、链霉素、 1mol/L NaOH、lmol/L HCl、KNO、NaCl、K HPO·3HO、MgSO·7HO、222434 FeSO·7HO、4.5mL 无菌水6 管，10%酚液，49.5mL 无菌水( 带玻璃珠)124 瓶。土壤样品、试管、培养皿、移液管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、称量纸、牛角匙、pH试纸、棉花、报纸、记号笔、线绳、纱布、酒清灯。电炉、高压蒸气灭菌锅、超净工作台 . 3.配置方法 （1）称药品：按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯中称量，用热水溶解后倒入大烧杯。蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。 （2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至．
所需量。若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中， 再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补 足所失的水分。 （3）调pH：检测培养基的pH，若pH 偏酸，可滴加lmol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH 范围。若偏碱，则用lmol/L HCl 进行调节。pH 的调节通常放在加琼脂之前。应注意 pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。 （4）过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4 层纱 布趁热过滤，以利培养的观察。但是供一般
鸡枞菌之栽培简介
鸡枞菌之栽培简介 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
鸡枞菌栽培介绍 一、介绍 鸡枞菌隶属担子菌亚门，层菌纲，蘑菇目，鹅膏科，蚁巢伞属，是着名的野生食用菌之一。其肉质鲜嫩、香味浓郁，味道鲜美，具有益胃、清神、治痔、治疗风湿病等功效，颇受国内外消费者青睬，具有极大的开发价值。由於鸡枞菌需与土栖性白蚁共生的特殊生活条件，人工驯化历尽艰辛。然而在大陆，鸡肉丝菇人工栽培已初获成功。 [学名] Termitomyces eurrhizus(Berk.) Heim [别名]鸡肉丝菇、桐菇、鸡菌。鸡菌、鸡枞、伞把菇、三坛菌。日本人称为姬白蚁菌。 [习性]约在5-8月间，气温於26℃以上时可於黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus)的旧蚁巢上发现。 [分布] 江苏、浙江、福建、江西、湖北、湖南、广东、广西、海南、四川、贵州、云南、台湾、西藏等地。 (一)形态特徵 鸡枞菌多数群生，3～10～100支不等，子实体初期菌盖呈圆锥状至钟形，後伸展，有时边缘翻起，中央具有一乳突笠状至宽圆锥形，直径3～33厘米，浅土黄色或灰褐色，边缘近白色，表面光滑，老熟後辐射状开裂。菌肉厚，白色； 菌褶稠密，不等长，白色，老後变成微黄色，宽5～15毫米，与菌柄弯生或近离生：菌柄近圆柱形，长7～19厘米，粗1～2厘米，白色，肉实，基部膨大具有褐色细长假根，一般长11～27厘米，最长假根可达70～80厘米。 图1. 鸡枞菌之形态 图2. 鸡肉丝菇与白蚁巢 (二)鸡枞菌与白蚁的关系： 鸡枞菌是与白蚁共生的真菌，其共生关系主要可从两方面探讨： 1.白蚁筑巢、管理真菌花园以抑制鸡肉丝菇之外的其它真菌过度生长。另外， 白蚁粪便含有大量氨基酸和蛋白酶，可为菌丝体生长和子实体生成提供氮源 和营养。 2.白蚁取食活菌丝体，并在白蚁体内体内分泌出多种酶，有助於白蚁将吞食的 植物残体进行消化、排泄；又白蚁的活动和繁殖可将鸡枞菌之担孢子得以传 播。 图3. 鸡枞菌与环境互动示意图 图4. A、长在野地的鸡枞菌子实体。B、由黑翅土白蚁的地下巢穴中取出约13 公分宽 的真菌花园。C、用显微镜放大真菌花园的一小部份可见到晶莹剔透的小菌球 (fungal nodules)。D、在更高倍的显微镜下可见到小菌球内混合着圆球形细胞与透 明、长椭圆形的分生孢子。 (三)用途 1.食用：菌肉细嫩，气味香浓，味道鲜美。鸡肉丝菇营养丰富，尤其蛋白质的 含量较高，蛋白质中含有20多种氨基酸，其中人体必需的8种胺基酸种类 齐全。100g干鸡枞中，含蛋白质、碳水化合物、热量286千卡、灰分、钙 23mg、磷750 mg、核黄素、尼古酸。100克鲜鸡枞中含维生素C 2.药用：据《本草纲目》记载有益胃、清神、治痔的功效。 3.其他：菌丝可以深层发酵制造各种调味品和保健食品。
白腐真菌对秸秆的降解效果及影响因素
饲料研究FEED RESEARCH NO .5,2011 15 综述 白腐真菌对秸秆的降解效果及影响因素 张爱武1 董 斌2 康 伟11.吉林农业大学中药材学院2.沈阳鑫育隆饲料有限公司 收稿日期：2010 - 12 - 21 基金项目：吉林省长春市科技计划项目（09YJ21）通信作者：张爱武 农作物秸秆是世界上数量最多的农业生产副产品之一。据联合国环境规划署报道，世界上种植的农作物每年可提供各类秸秆约20亿t。我国是农业大国，也是秸秆资源最丰富的国家之一，主要的秸秆约20种，而且数量巨大。目前秸秆的利用仍以原始利用为主，且利用方式单一，其中玉米秸秆分布广且数量多，利用潜力最大。由于目前用作饲料的数量还不到秸秆总量的10 ％，秸秆还田和副业加工利用等不到5 ％，大部分被浪费掉。麦秸和稻草等用作饲料的就更少。农作物秸秆由于营养品质低下，适口性差等原因，在饲料方面的利用率很低。饲喂反刍动物时，需对秸秆进行预处理，以提高其营养价值和适口性。基于我国国情，虽然物理和化学处理方法对秸秆品质均有较大改善，但是由于实际生产中成本、操作和环境污染等方面原因，推广使用范围较小。一系列的实验室研究和饲养试验表明：利用微生物降解方法处理秸秆具有广阔的前景。 利用微生物可转化秸秆，因为微生物能利用和分解多种畜禽不能利用的复杂有机化合物，合成含有丰富蛋白质和脂肪的菌体细胞，这些分解产物和菌体可用于饲料。微生物在秸秆转化中有用途多、营养价值高、周期短和可再生等优点，越来越受到国内外研究者重视。国内研究使用较多的是以乳酸菌-纤维分解菌-丙酸菌为主的微生物活菌制剂。自70年代以来，国外许多学者和研究人员致力于白腐真菌的研究。白腐真菌是一类丝状真菌，因腐生在树木或木材上，引起木质白色腐烂而得此名。它依靠降解木质纤维材料的能力穿入木质，侵入木 质细胞腔内，释放降解木质素和其他木质组分的酶，导致木质腐烂成为淡色的海绵状团块——白腐。分类学上，白腐真菌属于真菌门，绝大多数为担子菌纲，少数为子囊菌纲。白腐真菌分布十分广泛，无论高山或平原，凡是有树木生长、存放或使用木材的地方都有分布。各地区白腐真菌种类的变化常随树木种类与气候诸多条件而改变。 1 白腐真菌降解秸秆的效果 早在20世纪70年代，国外就比较重视对白腐真菌的研究。我国近来利用白腐真菌降解秸秆的研究已有所进展。白腐真菌通过次生代谢物包括，各种胞外酶、过氧化物酶、二价锰过氧化物酶及漆酶的催化作用有效降解木质素。王连稹报道，白腐菌处理秸秆主要是由于其在生长活动过程中能分泌多种酶，这些降解酶主要是木质素降解酶，其次是纤维素降解酶及半纤维素降解酶，以降解细胞壁物质中的木质素、纤维素及半纤维素。已知的白腐真菌包括，栓菌属、平革菌属、侧耳菌属、半胶菌属和黑管菌属等；常见的包括，长绒毛栓菌、云芝、黄孢原毛平革菌、糙皮侧耳菌、紫半胶菌、黑管菌和裂褶菌等，国际上很多研究者发现，有降解能力的是黄孢原毛平革菌，属非褶菌目、伏革科和显革菌属。Zadrazil 等(1984) 对包括桦多孔菌、漏斗状侧耳、云芝深褐色次革菌、辐射卧孔菌、粉状侧孢霉和拟革盖菌等200个品系进行筛选后发现，有几十种白腐真菌能显著改善秸秆的适口性，提高木质素的降解率，大幅度提高秸秆的瘤胃干物质消化率，从而使秸秆成为反刍动物的一种含较高营养价值的廉价能量饲料。 有关香菇菌的研究报道，香菇和平菇等木腐类真菌分解木质素和纤维素的能力较强，这类食用菌
虫草的一种培养条件的研究
毕业设计（论文） 题目：虫草的一种培养条件的研究TITLE； a culture conditions of Cordyceps 学生姓名： 学号： 专业：生物技术 指导教师： 二零一二年六月
Design graduates (Papers) TITLE； a culture conditions of Cordyceps Name ： Number ： Major ： Instructor： June 2012
摘要 为研究蛹虫草菌丝生长最适生长等人工栽培过程中所必须的适宜氮源、碳源、温度、PH、矿质元素，比较观察了常见的氮源、碳源、温度、PH、矿质元素对菌种质量、菌丝生长状况、发菌情况的影响。结果表明，各种氮源、碳源、不同PH、不同矿质元素、在不同的温和温度下蛹虫草菌丝体都能生长，在蛋白胨、葡萄糖、24℃、PH6.7、磷酸二氢钾加硫酸镁组合下生长最佳。 关键词：蛹虫草；人工栽培；氮源；碳源；温度；PH；矿质元素
ABSTRACT Cordyceps militaris growth optimum growth must be in the artificial cultivation of the process of suitable nitrogen source, carbon source, temperature, PH, mineral element comparative observation ofcommon elements of nitrogen, carbon source, temperature, PH,mineralstrain the quality of mycelial growth conditions, made thesituation in bacteria. The results showed that the nitrogen source,carbon source, different the PH, the different mineral elements in themoderate temperature mycelial can grow, pepton e, glucose, 24 ° C,PH6.7, potassium dihydrogen phosphate and grown undermagnesium sulfate combination. Keywords: Cordyceps militaris; artificial cultivation; nitrogen; carbon source; temperature; the PH; mineral elements
植物组织培养必须的条件
1.2研究的目的和意义 为什么要做这样的研究？？看前言 棉花是我国主要的经济作物,随着世界经济的一体化,棉纤维出口量增加,对棉纤维质量和种类的要求也越来越高,但我国棉花主要推广品种的纤维品质中等,纤维强度偏低,绒长偏短且类型单一,纺高支纱的优质棉仍需大量进口[1]。因而,在提高棉纤维产量的同时,改良棉纤维品质也成为棉花育种的主要目标。海岛棉以优良的纤维品质著称于世,但产量较低;陆地棉产量高,但品质较差。研究证明利用海陆种间杂交F1代优势是利用海岛棉优质纤维基因资源生产优质纤维的有效途径[2-4]。这一工作亲本选择很重要,而亲本各性状配合力是指导亲本选配的重要依据[5,6]。本文旨在通过对海陆种间杂交各亲本不同性状配合力研究,为海陆杂种优势利用亲本选配提供依据。 纤维品质是棉花生产的重要目标, 海岛棉棉纤维具有长细强等突出特点, 是纺织高支 精梳纱和特种织物不可缺少的原料[ 7] 。国内外对陆地棉配合力的研究已有较多报道[ 8 ] , 但有关海岛棉品种间配合力的研究目前还很少, 通过对海岛棉产量与品质性状的配合力及 遗传组分进行分析, 为明确海岛棉杂种优势的利用和新品种选育提供依据。 二．本课题所涉及的问题在国内外研究现状及分析 看摘要 配合力是自交系的一种内在属性，受多种基因效应支配，为自交系组配杂交种的一种潜在能力。配合力分为一般配合力（GCA)和特殊配合力(SCA)。一般配合力是指一个被测自交系和其它自交系组配的系列杂交组合的产量(或其它性状)的平均表现，由基因的加性效应决定，是可以遗传的部分。因此，一般配合力的高低是由自交系所含的有利基因位点的多少决定的。一个自交系所含的有利基因的位点越多，其一般配合力越高;否则，一般配合力越低。特殊配合力是在特定的组合中的F1产最(或其它性状)与双亲的一般配合力平均数的差数。配合力作为描述亲本材料性状遗传特征的重要遗传参数，是育种工作亲本选配的主要依据之一。大多数高产的杂交组合的两个亲本系都具有较高的一般配合力，双亲间又有较高的特殊配合力。 杂种优势(Heterosis)是指用两个具有不同性状和特点的亲本杂交，所产生的杂种后代，在生活力、生长势、繁殖力、抗逆性或产量、品质、对不良环境的适应性等方面有超过其双亲的现象。在作物杂种优势利用实践中，以杂种一代(F1)表现的杂种优势较为常见。虽然杂种优势的表现可能是多方面的，但在作物育种实践中，主要以提高产量、改良品质、增强抗性和提高经济效益为主要目标。如果亲本性状优良，组合选配得当，则有可能获得高优势杂交组合，其某些性状会明显优于亲本。 随着经济发展和纺织工业技术进步，人们对高档纺织品的需求日益增长，海岛棉（33-35㎜）和超级海岛棉（＞35㎜）占世界棉花总产份额从20世纪初的3%上升到20世纪末的6%左右。 我国改革开放以来海岛棉已从过去用于纺织少数特种产品拓展到衬衣、内衣等高档民用织物，这对提高我国纺织产品档次，增强行业竞争力发挥了重要的作用。 新疆塔里木盆地和吐鲁番盆地是我国一年生海岛棉的重要基地。据新疆年鉴统计 1960-2001年共生产65余万吨，其中80%以上供应国内纺织企业使用，基本满足特纺工业对海岛棉纤维的需求，80年代中期到90年代初国产海岛棉一度几乎完全替代进口海岛棉。我国海岛棉生产规模起伏剧烈，多数年份种植面积在1.3万-2.0万公顷，总产0.5万-1.5万吨，分别占全国同期棉花种植面积的0.5%和总产的0.3%，虽在我国植棉业中占比重很小，但填补了我国原来不能生产海岛棉的空白，丰富了棉花种植业结构，也为当地农村经济的发展发挥了重
鸡纵菌栽培技术要点
鸡枞菌栽培技术要点 鸡枞，又名鸡菌、鸡肉丝菇、伞把菇、三坛菌等，日本人称为姬白蚁菌。鸡枞菌隶属担子菌亚门，层菌纲，蘑菇目，鹅膏科，蚁巢伞属，是我国云、贵、川等省区最著名的野生食用菌之一。其肉质鲜嫩、香味浓郁，味道鲜美，具有益胃、清神、治痔、治疗风湿病等功效，颇受国内外消费者青睬，具有极大的开发价值。由于鸡枞菌需与土栖性白蚁共生的特殊生活条件，人工驯化历尽艰辛。通过我国广大食用菌科研工作者的多年努力，鸡枞菌人工栽培已初获成功。现将鸡枞菌的生物学特性及栽培技术要点介绍如下： 一、形态特征 鸡枞菌多数群生，3～10～100支不等，子实体初期菌盖呈圆锥状至钟形，后伸展，有时边缘翻起，中央具有一乳突笠状至宽圆锥形，直径3～33厘米，浅土黄色或灰褐色，边缘近白色，表面光滑，老熟后辐射状开裂。菌肉厚，白色；菌褶稠密，不等长，白色，老后变成微黄色，宽5～15毫米，与菌柄弯生或近离生：菌柄近圆柱形，长7～19厘米，粗1～2厘米，白色，肉实，基部膨大具有褐色细长假根，一般长11～27厘米，最长假根可达70～80厘米。 二、生物学特性 1．温度与湿度菌丝生长、原基分化适温为12～24℃，最适温为20℃；培养料含水量65%左右。子实体形成温度为25～35℃，最适温25～30℃；子实体生长发育期空气相对湿度85％～95%。 2．光照与空气菌丝生长阶段不需要光线；子实体的形成和发生均对光照和空气要求不严，且能抗高浓度二氧化碳。子实体开伞是则需要一定的散射光和充足的氧气。 3．酸碱度鸡枞菌适宜偏酸性生态环境。要求培养料及覆土材料PH值在4～5，最适PH值为4.5。 4．鸡枞菌与白蚁的关系鸡枞菌是与白蚁共生的真菌。一方面，白蚁建筑蚁巢、为鸡枞菌生长提供营养，为子实体的形成和发生创造条件；另一方面，白蚁取食鸡枞菌的活菌丝体，两者互助互利，同栖于一个生活环境，白蚁取食的鸡枞菌的活菌丝，在白蚁体内体内分泌出多种酶，有助于白蚁将吞食的植物残体进行消化，并排出大量的粪便。其粪便含有大量氨基酸和蛋白酶，为鸡枞菌的菌丝体生长和子实体生成提供氮源和营养。白蚁的活动和繁殖又将鸡枞菌担孢子得以传播。人工栽培可取白蚁巢土。 三、菌种生产 1．母种制作培养基配方：去皮马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、白蚁巢浸出液1000毫升（白蚁巢土250克于1200毫升水中煮沸5分钟或浸泡48小时，取滤液1000毫升）。制作方法按常规。 2．原种和栽培种制作培养基配方：①木屑78%，麸皮20%，白糖和石膏各1%。②阔叶树落叶40%，木屑35%，米糠22%，过磷酸钙、白糖、石膏各1%。③棉籽壳45%，木屑30%，麦麸22%，白糖1.5%，碳酸钙1%，硫酸镁0.5%。各配方加蚁巢滤液120%～140%（含水量65%左右）。制作方法按常规。 四、栽培要点 1．栽培季节安排当气温稳定在12～24℃之间时，可安排制袋，经40～60天培养菌丝长满袋后植入土中。此时气温巳回升至25℃以上，为最佳催蕾出菇季节。 2．培养基的制备①堵养基配方：木屑75%，麸皮20%，石膏1.5%，白糖1%，白蚁巢土3%，水140%。②配制方法：将配料分别称量后翻拌均匀、堆闷2小时后检查，含水量约65%左右，即用手抓培养料紧握指缝间有水珠形成却不下滴为度。③装袋接种：用17×
植物组织培养的培养条件
植物组织培养的培养条件 在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、PH值、渗透压等各种化学环境条件都会影响组织培养育苗的生长和发育。 一、温度(temperature) 因为温度是植物组织培养中的重要因素，所以植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数植物组织培养都是在23～27℃之间进行，一般采用 25±2℃。低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止，高于35℃时对植物生长不利。但是，不同植物培养的适温不同。白鹤非的最适温度是20℃、月季是25～27℃、番茄是28℃。温度不仅影响植物组织培养育苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。 不同培养目标采用的培养温度也不同，百合鳞片在30℃以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25%以下的高。桃胚在2～5℃条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35℃处理草莓的茎尖分生组织3～5d，可得到无病毒苗。 二、光照(light) 组织培养中光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光照时间方面： 1、光照强度(light intensity) 光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的研究情况看，光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。 2、光质(light wave) 光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养，8周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织，而唐菖蒲子球块接种15天后，在蓝光下培养首先出现芽，形成的幼苗生长旺盛，而白光下幼苗纤细。 3、光周期(light period) 试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养，最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。研究表明，对短日照敏感的品种的器官组织，在短日照下易分化，而
常用细菌培养基配方
常用抗生素 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素（streptomycin）（50mg/ml） 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨10g 酵母提取物5g 氯化钠10g 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。(实验室一般都不调PH) SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g 酵母提取物5g 氯化钠0.5g 1 mol/L 氯化钾2.5ml
白腐菌
野生白腐菌分离与纯化的初步试验 前言 白腐真菌是一类使木材呈白色腐朽的真菌,能够分泌胞外氧化酶降解木质素,且降解木质素的能力优于降解纤维素的能力,这些酶可以促使木质腐烂成为淡色的海绵状团块——白腐,故称为白腐真菌 白腐菌: white rot fungi 定义: 属担子菌纲丝状真菌，因腐朽木材呈白色而得名。代表菌株为黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)，在污染土壤修复中常有应用。 白腐菌是属于担子菌亚门的真菌,因腐朽木材呈白色而得名，是能够降解木材主要成分的微生物之一。木材在白腐过程中大部分纤维仍保持完整，且纤维素结晶度变化不大。由此设想利用对降解木质素选择性好的白腐菌进行生物制浆，能开辟制浆方法的新途径。白腐菌除了能降解木质素用于预理、生物漂白、生物制浆外，对其它有机异生物质也有很强的分解能力，因而在废水处理中也有广泛的应用前景。 为降低制浆能源消耗，可在制浆之前依靠白腐菌对木质素进行分解和改性，用选择过的微生物培养基对原料进行预处理。通过白腐菌对原料的预处理，可降低后阶段制浆能耗的50%，并且纤维强度性能也得到改进。 白腐菌预处理制浆不仅在木质材料制浆当中应用研究较多，在非木质制浆原料(如芦苇、蔗渣、剑麻、黄麻等)预处理制浆中的应用研究同样广泛。 可以看出，白腐菌预处理在硫酸盐法、碱法、机械法和烧碱-蒽醌法等制浆方法中都可以不同程度地降低制浆成本、提高纸张质量。但是菌种筛选困难和预处理周期较长是制约白腐菌应用的最大障碍，大规模应用于制浆预处理还需要相关方面技术的突破。 利用白腐菌可以降解木质素、半纤维素和纤维素的特性，白腐菌在制浆造纸各个环节的应用都得到了很广泛的研究，但是利用白腐菌直接制浆却鲜见报道。筛选对纤维素没有影响或影响较小的选择性极高的白腐菌种直接处理原料制浆是一个新的研究方向。20世纪90年代末，日本神户制钢所应用白腐菌在常温常压下分解木材成功制出优质纸浆。选定适宜温度，可以分解出80%的木质素，比一般化学制浆法成本降低了50%。这种白腐菌对木质素的脱除分解率极高，而对纸浆纤维中的纤维素分解极少，这样可使纸浆得率高达60%，超过化学法得浆率的50%。据此计算，木材的消耗量可节约1/9。此种制浆方法将是传统制浆方法的巨大挑战。同样，制浆周期长、白腐菌筛选困难是大规模生产的最大障碍。 在造纸工业中，为了使最终产品的白度既高又稳定，必须把浆中残余木质素所造成的棕黑色通过漂白来除去。用生物方法脱除浆中的残余木质素是现阶段人们研究最多的一种方法，普遍认为白腐菌是最有效的菌种。
微藻培养条件研究
微藻培养条件浅析 摘要:微藻利用光和CO 合成蛋白质、糖类、脂类以及色素等大分子物质并放出O2，在人 2 类食品、保健、医药、环保和生物炼制领域具有广阔的应用前景。本文针对目前微藻培养中存在的生产成本高、产率低的问题，主要从营养盐方面入手,浅析了碳、氮、磷等营养元素对微藻生长的影响，并在此基础上，概述了开放式及封闭式两种微藻培养系统。 关键词：微藻；营养盐；培养系统 1引言 藻类是地球上最早进行光合作用的生物体，具有太阳能利用效率高、适应环境能力强等特点。微藻细胞富含蛋白质、多糖、脂类以及色素等，在食品、饲料、医药、精细化工及染料领域己得到广泛的应用。目前，由于培养技术不成熟导致的生产成本高、效率低是限制微藻产业化培养的主要因素。高效、低成本、规模化的微藻培养技术，是实现微藻产业化培养的关键。降低微藻生产成本主要有两种途径:一是降低培养原材料成本，二是提高产量。营养盐成本占微藻培养原料成本比重很大，是影响微藻生长及产物积累的重要因素。在微藻培养中，通过优化营养盐的种类，监控培养中营养盐的水平，能够提高藻细胞或目标产物的产量，同时提高营养盐的利用率，是高效、低成本、规模化微藻培养的基础。 2微藻概述 微藻是指一些微观的单细胞群体，是最低等的、自养的水生生物。微藻能够利用阳光和CO2进行光合作用，合成有机物质并释放出O2，是自然界中光合效率最高、生长最为迅速的原始生物种类之一，其种类繁多，分布广泛。微藻富含蛋白质、氨基酸、多糖、维生素、不饱和脂肪酸和色素等多种高附加值的生物物质，可以概括为以下四类:蛋白质、糖类、脂类、核酸及各种矿物质[1]。不同种类的微藻，各种组分的含量不同。 3营养盐对微藻生长的影响 碳、氮、磷等营养元素是微藻细胞合成的基础。微藻光合作用的底物为CO2和水，产物除了糖类之外，还合成蛋白质、核酸及脂类等一系列生物活性物质，因此，需要氮、磷等元素的参与。碳源、氮源、磷源以及一些微量元素的种类和供应水平，在一定程度上影响着微藻光合作用的能力和水平，从而直接影响微藻的生长。营养盐的形态会影响微藻的生长。Chu 等[2]分别在BBM培养基中添加0.1%的乙酸钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠作为碳源培养卷曲纤维藻（Ankistrodesmus convolutus），发现添加乙酸钠作为碳源有利于藻细胞的生长，而添加柠檬酸钠和碳酸氢钠作为碳源对藻细胞的生长没有促进作用。Berman等[3]采用N03-N，NH3-N 以及次黄嘿吟、尿素、赖氨酸等有机氮源培养微藻，发现当使用尿素作为氮源时，蓝藻的生长最快且氮源得率系数最高。 许多研究表明，培养基中碳源、氮源、磷源的水平是影响微藻营养组成的主要因素。微藻对碳源的需求量很大，碳源主要影响藻细胞生长和脂类、糖类等物质的积累。Tang等[4]研究了不同CO2浓度对斜生栅藻(Scenedesmyus obliquus)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)总脂含量的影响，发现高CO2水平(30%～50%)有利于总脂和不饱和脂肪酸的积累。然而，Chen等[5]研究异养小球藻(Chorella sorokiniana )在不同的碳氮比(C/N )下细胞内总脂含量和脂肪酸组成时发现:碳源限制或者氮源限制均能促进细胞内油脂合成，且前者更为
146种细菌-真菌-酵母培养基配方
146种培养基配方 ——2009年2月1日星期日by尛森蟲1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 [Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基) KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1ｇ Na2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量) Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g Adjust (调) pH to 7.2 适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml [Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the li quid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围：植物乳杆菌(胚芽乳杆菌)、嗜热乳酸链球菌 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ(乳酸菌培养基Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围：植物乳杆菌(胚芽乳杆菌) 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基)