喜格干细胞库建设之操作规范

《人间充质干细胞库建设与管理规范》

DB33/T2030—2017

SICOLAB干细胞库建设之操作规范

范围：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库的建设、操作规范、质量管理的基本方法。

适用：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库建设与管理。

一、概要

1、符合GB/T22278要求，并严格按照标准和规范执行；

2、制定相应标准和管理规范（样本采集、运输、接收、分离、培养、冻存和复苏等涉及干细胞操作所有过程）；

3、人组织样本采集由专业的医护人员完成，样本制备由经过专业培训的人员完成。

二、样本采集场所

1、洁净手术室（无菌采集）：人组织样本。

2、无洁净级别要求：人月经血样本、乳牙样本（并保持个人基本卫生）。

3、Ⅱ级洁净手术室要求：新生儿脐带、胎盘、骨髓样本。

4、Ⅲ级洁净手术室要求：脂肪组织样本。

三、样本采集方法

1、新生儿脐带来源间充质干细胞

①胎儿分娩后，在距胎儿脐部5cm至8cm处，用止血钳分别夹住脐带上下两端，消毒剂消毒脐带。

②用消毒剪刀于两钳中间断脐，截取至少15cm无针孔的脐带置于无菌采集瓶中，同时加入保存液以浸没脐带组织。贴条形码作为唯一标识。

③脐带的两端需要用手术线结扎。

2、新生儿胎盘来源间充质干细胞或造血干细胞

①胎儿娩出后，待胎盘与母体完全分离，用生理盐水充分清洗胎盘，再用75%医用酒精快速冲洗表面。

②迅速将胎盘放入胎盘采集盒，再加入保存液予以全部浸没。

③采集盒密闭包装，并贴上条形码作为唯一标识。

3、人脂肪来源间充质干细胞

①脂肪组织采集过程由整形科医生实施，需制定抽脂方案和术前术后的防感染措施。

②行脂肪抽吸术时应尽可能保证抽脂过程无菌，采集完毕转移至采集瓶中，确保密封，并贴上条形码作为唯一标识。

4、人骨髓来源间充质干细胞

①骨髓组织采集前应联系负责骨髓采集医师，制定骨髓穿刺方案和术前术后的防感染措施。

②行骨髓穿刺术，抽取骨髓液，即时转移至无菌采集瓶中保存，确保密封，并贴上条形码作为唯一标识。

5、人子宫内膜来源间充质干细胞

①组织来源：手术切除成年女性子宫内膜增厚组织或子宫内膜异位组织，置于采集液中保存，并贴上条形码作为唯一标识。

②月经血来源：成年女性月经期第二天开始采集，将月事杯消毒后置于阴道内，收集月经血。约6h～10h 将收集满月经血后的月事杯取出，将月经血转移至采集液中保存，并贴上条形码作为唯一标识。

6、人乳牙来源间充质干细胞

①收集没有牙体和牙髓病变、自然脱落的乳牙。

②将乳牙置入采集液中保存，并贴上条形码作为唯一标识。

四、样本运输

1、运输装置在设计与用材上须防渗漏、防辐射、抗震动、耐压、耐热等，并标识清楚。

2、新生儿脐带或胎盘、人脂肪、骨髓、子宫内膜和乳牙样本的运输温度为2℃～8℃,运输时间不超过36h。

3、运输须采用平稳、安全、快速的运输途径。

4、运输人员应是经过培训合格的专门人员。

五、样本接收

1、样本接收应遵从安全与准确的原则，做到样本与供者一一对应。

2、样本接收时，应做好自我防护工作，接触样本之前应佩戴手套与口罩。

3、接收样本后应先观察样本容器外包装的外观，检查有无破损并记录。

4、检查外观后，工作人员再检查样本采集信息记录表是否齐全，同时确认记录表上信息已经填写完整，检查信息记录表信息是否与样本信息一一对应，样本及记录表上应贴有一致对应的条形码，确认无误后进行接收。

5、样本接收后，使用医用酒精消毒清理容器外表面，如不能及时对样本进行处理，需把样本保存在2℃～8℃条件下，最长时间不超过12h。

6、样本量应能够满足制备方和检测方的最低要求。

7、样本接收后应及时将信息反馈给样本发送方。

8、干细胞库应制定样本拒收标准，按照样本拒收标准拒收样本，并及时通知有关部门或负责人，同时做好相应记录。

六、人间充质干细胞分离与原代培养方法

1、新生儿脐带间充质干细胞

新生儿脐带组织剥取华通氏胶，以组织块贴壁法或胶原酶消化法分离新生儿脐带间充质干细胞，使用贴壁法进行原代培养。

2、新生儿胎盘间充质干细胞

去除胎盘羊膜及母体面组织，剪取脐带近端的胎盘组织以酶消化法分离胎盘间充质干细胞，贴壁法进行原代培养。

3、新生儿胎盘造血干细胞

去除胎盘羊膜及母体面组织后，将剩下的胎盘组织剪碎至糜状，再用胶原酶消化获取有核细胞，经分离纯化步骤后进一步获得造血干细胞。

4、人脂肪间充质干细胞

成人脂肪组织剪碎至糜状，以胶原酶消化法分离脂肪间充质干细胞，贴壁法进行原代培养。

5、人骨髓间充质干细胞

人骨髓液样本，以密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞，贴壁法进行原代培养。

6、人宫内膜间充质干细胞

宫内膜组织样本通过胶原酶消化法分离宫内膜干细胞，贴壁法进行原代培养。月经血样本以密度梯度离心法，通过人淋巴细胞分离液获取宫内膜干细胞，贴壁法进行原代培养。

7、干细胞换液

为了确保干细胞生长所必须的营养水平和消除代谢物毒害作用，换液需根据干细胞生长情况及培养基状态进行综合判断，换液操作通常是移走培养瓶中原有的部分或全部培养液，再加入新鲜培养液。首次换液需要在镜下观察到原代细胞完全贴壁和延展后方可进行，不得超过一周。换液操作需符合GMP要求。

8、干细胞传代

原代干细胞一般情况在达到80%～90%融合度可进行传代操作，传代操作应即时、迅速、密度适宜。整个操作应符合GMP要求，并有严格的质量控制措施，保证无外源微生物污染。

干细胞中心建设项目申报书

目录 内容提要 第1章总论....................................................... １1 §1.1 项目背景 ................................................ １1 §1.1.1 项目名称........................................... １1 §1.1.2 项目出资方及资本结构............................... １1 §1.1.3 项目拟建地点....................................... １1 §1.1.4 立项依据........................................... １1 §1.2 可行性研究结论 .......................................... ２2 §1.2.1 市场预测和项目规模................................. ２2 §1.2.2 公用系统供应.. (2) §1.2.3 项目地址 (102) §1.2.4 环境保护 (102) §1.2.5 组织及劳动定员 (113) §1.2.6 项目建设进度 (114) §1.2.7 投资估算和资金筹措 (114) §1.2.8 项目财务和经济评价 (124) §1.2.9 项目综合评价结论 (126) 第2章项目背景和发展概况 (137) §2.1 项目提出的背景 (137) §2.1.1 国家及行业发展规划 (137) §2.1.2 项目发起人和发起原因 (7) §2.2 项目发展概况 (148) §2.3 投资的必要性 (15) 第3章市场分析与营销方案 (1710) §3.1 市场调查 (1710) §3.2 市场预测 (11)

间充质干细胞

间充质干细胞及来源 间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell，MSC）是干细胞的一种，因能分化为间质组织而得名，具有亚全能分化潜能，在特定的体内外环境下，能够诱导分化成为多种组织细胞。间充质干细胞具有干细胞的共性，即自我更新、多向分化和归巢的能力。 间充质干细胞具有向多种类型细胞分化的能力，可以分化为神经、心脏、肝脏、骨、软骨、肌腱、脂肪、上皮等多种细胞。这种多向分化的能力给人类多种疾病的治疗提供了重要的原材料。 间充质干细胞来源：间充质干细胞广泛分布于胎儿和成体的骨髓、骨膜、松骨质、脂肪、滑膜、骨骼肌、胎肝、乳牙、脐带、脐带血中，其中脐带来源的间充质干细胞质量高、纯净、数量多。 间充质干细胞生物学特性 间充质干细胞具有以下特性： 1）具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为造血细胞，还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。 2）具有免疫调节功能，通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应，从而发挥免疫重建的功能。 3）具有来源方便，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，不存在免疫排斥的特性。 正是由于间充质干细胞所具备的这些免疫学特性，使其在自身免疫性疾病以及各种替代治疗等方面具有广阔的临床应用前景。通过自体移植可以重建组织器官的结构和功能，并且可避免免疫排斥反应。

间充质干细胞的临床应用 1.间充质干细胞在细胞替代治疗中的前景 以组织工程学为手段可望解决的问题几乎涉及人类面临的大多数医学难属，如烧伤、放射损伤等患者的植皮；肌肉、骨及软骨缺损的修补；髋、膝等关节的替换；血管疾病或损伤后的血管替代；糖尿病患者的胰岛植入；心脏病患者的瓣膜替代、房室间隔缺损的修补；癌症患者手术切除后组织或器官的替代；放射损伤及大剂量放疗、化疗后的造血与免疫重建；肝、肾等重要脏器因损伤或功能衰竭的置换；部分遗传缺陷性疾病的治疗等。在不久的将来，某些组织工程产品，如人造皮肤、血管、骨、软骨、肌肉、瓣膜、神经甚至胰岛、肾、肝等组织器官或细胞将相继问世，然后植入患者体内，用以恢复损伤、替代退行性组织器官以及改变遗传缺陷性组织器官的功能。人类也将进入实际应用现代组织工程产品的新时代。 目前，在组织干细胞定向分化领域取得了明显的进展。在体外可以定向诱导一些多能干细胞分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、肌腱、神经等多种组织细胞，这些成果很令人鼓舞。造血干细胞的移植已得到广泛开展，通过输注造血干细胞来对恶性血液病患者进行造血重建已取得成功，这为组织干细胞的研究提供了成功的范例。 MSC因其具有高度的自我更新能力和多向分化潜能，以及取材方便、体内植入后不良反应较弱等优点而备受关注，将成为细胞替代治疗的理想种子细胞。 MSC与生物材料相结合，能够修复骨、软骨、肌腱等各种组织的缺损，这是组织工程中的新领域。 MSC在治疗组织09官退行性疾病方面也展示了前景。随着年龄的增长，机体的组织器官会出现退行性的改变，从而引发一些相关疾病，如肌肉萎缩、肌营养不良、脑萎缩、帕金森病、阿尔茨海默综合征等。而这些组织的再生比较固难，MSC在体内外能够分化为肌肉细胞和神经细胞，为治疗这些退行性疾病带来了希望。 遗传缺陷性疾病发病率也很高，而且治疗难度极大。利用体外分离的MSC或其诱导分化后的细胞来改善遗传缺陷组织的功能，这一治疗途径正在被尝试。 2. 间充质干细胞在基因治疗中的前景 一些干细胞不仅具有多向分化潜能，而且易于外源基因的转染和表达。将体外经过基因修饰的干细胞用于治疗，可以避免转染载体进入受体产生的不良影响。基因修饰的干细胞可以在多个靶位发挥作用。 (1)干细胞潜能的改变——干细胞靶位基因转染以后可以改变干细胞的某些特性。从成人或成年动物分离的干细胞有时会表现出年龄相关性、遗传性或获得性疾病相关性再生能力损伤，基因转录或酶切修饰可以有效地维持、加强或抑制干细胞的分化和增殖能力。 (2)器官系统性能的改善——干细胞子代靶位转入干细胞的基因可以随着干细胞的分化传代而遗传给子代细胞，在基因转导的干细胞重建的器官系统中持续表达，改善重建

喜格干细胞库建设之设计要求

《人间充质干细胞库建设与管理规范》 DB33/T2030—2017 SICOLAB干细胞库建设之设计要求 范围：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库的建设、操作规范、质量管理的基本方法。适用：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库建设与管理。 一、喜格选址要求 1、选择周围环境较好的场地，空气质量标准应符合GB3095标准分级二级标准； 2、不能建设在易发生自然灾害（地震、洪水、海啸等）的地区； 3、不能建设在将要拆迁的建筑；不能建设在市政规划不明确区域。 二、建设基本要求 1、干细胞库实验室建设与设计应与GB19489、GB50346、GB50591规定相符 2、干细胞库实验室应包括业务区与办公区。 ①业务区包括：样本接收室、干细胞制备室、配液室、检验室、干细胞存储室、更衣室、缓冲室、物料存储室、医疗垃圾存放室、消毒清洗室等（应标识洁净和风险级别）。 ②办公区包括办公室、会议室、档案室和监控室等。 3、设计注意 ①洁净区、非洁净区完全分开。 ②办公区域与实验区域的通风系统应独立分开； ③不同科室应设有防污染措施，如缓冲间、气闸室和传递窗等。 4、人流、物流通道应独立设置，避免混杂和交叉污染。 5、物料、废弃物应设专用传递窗，并具备消毒灭菌功能。 6、办公区域与实验区域应进行物理隔离，工作人员由专用通道进入实验区。 7、门、窗、压差 ①洁净室内的密闭门应朝空气洁净度较高的房间开启并加设闭门器； ②无窗洁净室的密闭门上宜设观察窗； ③不同等级的洁净室、洁净区与非洁净区的压差，应不小于5Pa； ④洁净区与室外的压差，应不小于10Pa。 8、建设材料应防渗漏、防火、耐腐蚀、防水和不起尘等，易于清洁和消毒灭菌。 9、库内所有窗户应为密闭窗，玻璃耐撞击、防破碎。 10、洁净室内不宜安装水池和地漏。 三、设施系统 1、消防要求 ①应符合GB50016要求。 ②干细胞库内宜安装火灾自动烟感报警装置、消防疏散警示标识、紧急逃生通道、安全出口； ③安全出口（全封闭的玻璃门，并备有安全锤），安全出口设计应能够使仪器设备进出。

临床级干细胞实验室建设标准中英文对照

临床级干细胞实验室建设标准Rating Scale Definitions

Assessment Objectives评估目标

1.Standard Operating Procedures and Methods 标准化操作规程（SOP）和方法 a.SOP in writing and available to approved personnel. SOP正确编写，并且对工作人员来说是切实可用的。 b.Personnel properly performing SOP as stated. 工作人员能够按照SOP正确操作。 c.Are current SOPs being implemented? 当前使用的SOP是有效的？ https://www.wendangku.net/doc/3514473950.html,b Facilities and Environmental Control 实验室设施及环境控制 a.Facility of suitable size and properly maintained. 实验室设备的匹配性及恰当的维护。 b.Facility divided into separate or defined areas for each operation. 仪器设备分区放置及每项操作有专门的区域。 c.Does the facility maintain a proper access/egress? 实验室的出入口安排恰当。 d.Proper environmental control for equipment and facilities. 实验室环境控制安排合理性。 e.Facility restricted to authorized personnel. 出入实验室人员的权限。 3.Equipment Maintenance and Calibration 设备维护和校正 a.Equipment properly maintained. 仪器设备的正确维护。 b.Equipment of suitable design and use. 仪器设备合理匹配和使用。 c.Proper SOP established for the cleaning, maintenance, testing, calibration, use, and standardization of the equipment established. 建立正确的清洁、维护、测试、校准、使用设备的SOP。 4.Supplies and Reagents Management Control 耗材和试剂管理控制

干细胞资源储存库建设项目可行性研究报告方案

干细胞资源储存库建设项目可行性研究报告方案（可用于发改委立项及银行贷款+2013详细案例范文） 【编制机构】：博思远略咨询公司（360投资情报研究中心） 【研究思路】：

【关键词识别】：1、干细胞资源储存库建设项目可研 2、干细胞资源储存库建设市场前景分析预测 3、干细胞资源储存库建设项目技术方案设计 4、干细胞资源储存库建设项目设备方案配置 5、干细胞资源储存库建设项目财务方案分析 6、干细胞资源储存库建设项目环保节能方案设计 7、干细胞资源储存库建设项目厂区平面图设计 8、干细胞资源储存库建设项目融资方案设计 9、干细胞资源储存库建设项目盈利能力测算 10、项目立项可行性研究报告 11、银行贷款用可研报告 12、甲级资质13、干细胞资源储存库建设项目投资决策分析 【应用领域】： 【干细胞资源储存库建设项目可研报告详细大纲——2013年发改委标准】： 第一章干细胞资源储存库建设项目总论 项目基本情况 项目承办单位 可行性研究报告编制依据 项目建设内容与规模 项目总投资及资金来源 经济及社会效益 结论与建议

第二章干细胞资源储存库建设项目建设背景及必要性项目建设背景 项目建设的必要性 第三章干细胞资源储存库建设项目承办单位概况 公司介绍 公司项目承办优势 第四章干细胞资源储存库建设项目产品市场分析 市场前景与发展趋势 市场容量分析 市场竞争格局 价格现状及预测 市场主要原材料供应 营销策略 第五章干细胞资源储存库建设项目技术工艺方案 项目产品、规格及生产规模 项目技术工艺及来源 项目主要技术及其来源 项目工艺流程图 项目设备选型 项目无形资产投入 第六章干细胞资源储存库建设项目原材料及燃料动力供应主要原料材料供应 燃料及动力供应 主要原材料、燃料及动力价格 项目物料平衡及年消耗定额 第七章干细胞资源储存库建设项目地址选择与土建工程项目地址现状及建设条件 项目总平面布置与场内外运 总平面布置 场内外运输 辅助工程 给排水工程 供电工程

间充质干细胞培养方法

间充质干细胞培养方法 1. 间充质干细胞MSC基本形态 2. 干细胞应用与干细胞调控。 3. 间充质干细胞MSC生长过程 4. 间充质干细胞MSC培养的合适气体环境 5. 细胞培养板的选择 6. 如何选用细胞培养基 7. 如何维持培养液p H 8. 血清与干细胞的培养 9. 胎牛血清（F B S ）是否需要灭活 10. 细胞的细菌、真菌污染及排除 11. 细胞培养污染的预防 12. 使用胰蛋白酶时加入E DTA的目的是什么 13. 胶原酶的种类和选型 14. 胶原酶V S胰酶 15. 干细胞的种类和表面标记 16. 间质干细胞培养原理概述 17. 间质干细胞成脂和成骨诱导分化 18. 干细胞老化的表现和处理 19. 细胞传代消化过程指导 20. 冷冻保护剂作用和选择 21. 细胞冻存指导 22. 干细胞冷冻和复 23. 移植细胞的基因修饰 1．间充质干细胞MSC基本形态 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。 间充质干细胞MSC基本形态：形态与成纤维细胞类似，细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵圆形核，胞质向外伸出2－3 厘米个长短不同的突起。可看到细胞成螺旋状生长。 2．干细胞应用与干细胞调控 干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。 2.1源性调控 干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞调控因子的制约。 （1）胞蛋白对干细胞分裂的调控 干细胞分裂可能产生新的干细胞或分化的功能细胞。这种分化的不对称是由于细胞本身成分的不均等分配和周围环境的作用造成的。细胞的结构蛋白，特别是细胞骨架成分对细胞的发育非常重要。如在果蝇卵巢中，调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器，包含有许多调节蛋白，如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位，从而把维持干细胞性状所必需的成分保留在子代干细胞中。

间充质干细胞研究进展及其临床应用前景

?２２８?生国篮旦匡煎！Ｑ塑生！！旦笠！鲞筮丝塑￡！ｉ塑旦墼丛鲤：堕！！！Ｑ嫂：Ｙ丛：堡：些！：１２ 病情持久不愈，气血郁滞，经脉失畅，化湿生痰，痰血瘀结而致。根据其病机，选用小金丸治疗，取得较好疗效，值得推广。５治疗乳腺囊性增生病悼３ 将５００例乳腺囊性增生病患者随机分为治疗组和对照组各２５０例，对照组单用三苯氧胺治疗，治疗组在对照组相同治疗的基础上加用小金丸治疗。结果：治疗组总有效率为９２．０％，对照组总有效率为６７．６％，两组有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。乳腺囊性增生病系内分泌障碍性增生病，一是体内女性激素代谢障碍，尤其是雌孕激素比例失调，使乳腺实质增生过度和复旧不全；二是部分乳腺实质成分中女性激素受体的质和量的异常，使乳房各部分增生程度参差不齐。三苯氧胺与此激素竞争受体，阻断过高的雌激素作用于乳腺组织，但部分患者临床效果甚微，或服药期间疗效较好，停药后复发。小金丸的药理实验证实对乳腺泡和导管增生有明显抑制作用，同时能抑制纤维母细胞摄取１４．甘氨酸减少胶原纤维合成，又能促进细胞吞噬胶原纤维及其断片，增强细胞溶酶体释放组织蛋白水解胶原纤维，从而消降纤维细胞的增生、粘连，疗效肯定，不良反应小，但疗程较长。中医学认为乳腺增生病主要是气机郁滞，痰瘀互结，冲任失调所致，治当理气化瘀散结，活血祛瘀为原则。小金丸方中麝香走窜通络，散结开壅，枫香脂调气血，土鳖消肿定痛，地龙通络，制草乌祛风湿，温经散寒，当归活血，香墨消肿化瘀，五灵脂、乳香、没药活血化瘀、消肿定痛。诸药合用有温通、活血、消壅、散结之效。可使气旺络通，痰散结消。配合三苯氧胺治疗乳腺增生病，标本兼治，故能取得较好疗效。 ６治疗慢性盆腔炎包块怕１ 将６０例患者（疾湿疥阻兼脾肾两虚型）分为２组各３０例，治疗组口服小金丸和血宝胶囊配合宫颈湿敷血竭粉治疗。对照组用西医抗炎治疗。治疗前后Ｂ超测量盆腔包块的大小、检测雌激素水平、观察临床症状消失的情况。结果：总有效率治疗组８６．６７％，对照组为６３．３３％，２组比较，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）；随访半年复发率，治疗组为２３．０８％，对照组为６３．１５％，２组比较，差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）；雌激素水平治疗前后比较及治疗后组问比较，差异均无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。慢性盆腔炎包快属中医学瘢瘕范畴，多起于经行产后，胞脉胞络空虚，血室正开，痰湿之邪乘虚而入，蕴结胞宫；失治误治，余邪未净，迁延１３久，病及血分，致瘀积胞中，积聚成瘾。小金丸功能散结消肿，化瘀止痛，原用于痰气凝滞所致的瘰疬、瘿瘤、乳岩、乳癖，用于此药治疗盆腔炎包块属异病同治，有异曲同工之妙。现代药理研究表明小金丸具有抗炎、消肿、抗肿瘤和镇痛作用。血宝胶囊具有益肾健脾、补阴培阳之效。血宝既可助小金丸化痰散结、活血消ｊ｝毂之力，又可防止小金丸攻邪太过损伤正气。廊竭粉是伤科活血疗伤之圣药，取其破散瘾积宿血之功。内服外用双管齐下，共奏化痰散结、化瘀消瘕之功，使邪去而不伤正。本研究表明，用中成药扶正消瘾法治疗慢性盆腔炎包块具有无创性、服用简便、疗效好，复发率低的优点。 ７治疗结节性筋膜炎ｏ¨ ５例结节性筋膜炎患者，内服小金丸０．６ｇ，２次／ｄ。局部服用黄金膏（金黄散＋凡士林）＋四虎散（由生草乌、生半夏、生南星、狼毒组成）外敷，方法：根据肿块大小，先用金黄膏涂布于纱布上，再掺加四虎散，外面用单层纱布包裹，最后在药物表面撒少量蒸馏水，敷贴患处，每２ｄ换１次。结果５例均治愈。最短治愈时间２６ｄ，最长治愈时间３５ｄ，平均治愈时间３０．８ｄ。结节性筋膜炎又称为假肉瘤性筋膜炎，是一种发生于浅筋膜的良性增生性病变。小金丸具有消痰化坚、活血止痛、消结散毒的作用；金黄散清热、解毒、消肿、定痛；四虎散化痰散结止痛。内外治结合，共奏解毒化肿、化痰散结、活血止痛之效，故用于治疗本病能取得较满意的疗效。 参考文献 ［１］秦树光，等．小金丸联合甲状腺素片治疗甲状腺肿的ｌ｜缶床分析．现代中西医结合杂志，２００５，１４（８）：１０１８． ［２］屈江宁．小金丸治疗良性前列腺增生８０例．世界中医药，２００８，３（５）：２７７． ［３］马宝华，等．小金丸治疗带状疱疹后遗神经痛４４例．中国中医急诊，２００３，１２（５）：４７３． ［４］余勇．小金丸治疗聚合性痤疮２４例．医药导报，２０００，１９（３）：２６３． ［５］杨玉国，等．小金丸与三苯氧胺合用治疗乳腺囊性增生病２５０例分析．实用中医药杂志，２００５，２１（５）：２６１． ［６］邱明英，等．小金丸为主治疗慢性盆腔炎包块的临床研究．新中医，２００８，４０（４）：５５ ［７］吴亚旭．中药治疗结节性筋膜炎５例．江苏中医药，２００５，２６（１１）：２７． 间充质干细胞研究进展及其临床应用前景李玲玲李晶 【关键词】骨髓间充质干细胞；多向分化；组织工程 间充质干细胞（ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）通常是指从骨髓或其他组织中分离到的在体外具有多向分化潜能的一类细胞。自Ｆｒｉｅｄｅｎｓｔｅｉｎ等首次报道骨髓中有少量细胞在培养过程中能贴壁分化形成类似骨、软骨的集落后，人们对这些细胞产生了浓厚兴趣。随后从鼠、兔、犬、人等多种动物的骨髓中均分离到了这种贴壁细胞。它们具有多向分化潜能， 作者单位：１３００２１吉林省前卫医院（李玲玲）；吉林省人民医院中西医结合科（李晶）在体外不同诱导条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及神经细胞…。 与软骨细胞、骨髓基质细胞、胚胎干细胞等相比，ＭＳＣｓ具有强大的增殖力、较强的多向分化潜能，而且具有取材方便、便于自体移植、便于外源基因转染及表达调控等诸多优点。最近。还发现ＭＳＣｓ具有免疫调节功能嵋ｏ。因此，ＭＳＣｓ是组织工程的一种新的理想种子细胞。目前，已知ＭＳＣｓ是源于中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于全身结缔组织和器官间质中¨１。本文就ＭＳＣｓ 万方数据

人类间充质干细胞库建设与管理规范

SZDB/Z 126—2015 I SZDB/Z 深 圳 市 标 准 化 指 导 性 技 术 文 件 人类间充质干细胞库建设与管理规范 2015 - 02 -06发布 2015-03 -01实施 深圳市市场监督管理局 发布 ICS 07.080 C 04 SZDB/Z 126-2015

SZDB/Z 126—2015 II 目次 前言................................................................................. I II 1 范围 (1) 2 规范性引用文件 (1) 3 术语和定义 (1) 4 生命伦理 (4) 5 人类间充质干细胞库建设 (4) 6 机构设置 (5) 7 操作规范 (6) 8 安全管理 (10) 附录A（资料性附录）供者健康信息采集 (16) 附录B（资料性附录）人类间充质干细胞样本编码规则 (17) 附录C（资料性附录）人类间充质干细胞库整体的操作流程 (18) 参考文献 (19)

SZDB/Z 126—2015 III 前言 本指导性技术文件按GB/T 1.1–2009给出的规则起草。 本标准由深圳市经济贸易和信息化委员会归口。 本标准负责起草单位：深圳华大基因研究院。 本标准主要起草人：周欣、张勇、张曦、冀旭、燕舞、林洁璇、张家文、黄海军、彭冬秀、孙长斌、 杨阳、黎苑杰。 本标准为首次发布。

SZDB/Z 126—2015 人类间充质干细胞库建设与管理规范 1 范围 本标准规定了人体来源间充质干细胞库相关的生命伦理、间充质干细胞库建设、机构设置、操作规范和安全管理的基本方法。 本标准适用于人体来源间充质干细胞库的建设与管理规范。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本 适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 1.1-2009 标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写 GB 2894-2008 安全标志及其使用导则 GB/T 5458-2012 液氮生物容器 GB 7000.2-2008 应急照明灯具安全要求 GB/T 12905-2000 条码术语 GB 13690-2009 化学品分类和危险性公示通则 GB 15258 化学品安全标签编写规定 GB/T 17172-1997 417 条码 GB/T 18347-2001 128 条码 GB/T 18883-2002 室内空气质量标准 GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求 GB 19652-2005 放电灯（荧光灯除外）安全要求 GB/T 20269-2006 信息安全技术信息系统安全管理要求 GB/T 22278-2008 良好实验室规范原则 GB/T 27025-2008 检测和校准实验室能力的通用要求 GB 50016-2006 建筑设计防火规范 GB 50034-2004 建筑照明设计标准 GB 50052-2009 供配电系统设计规范 GB 50140-2005 建筑灭火器配置设计规范 GB 50346-2012 实验室建筑技术规范 GB 50351-2005 储罐区防火堤设计规范 AQ 3013-2008 危险化学品从业单位安全标准化通用规范 CNAS-CL05-2009 实验室生物安全认可准则 MH/T 1019-2005 民用航空危险品运输文件 WS/T 224-2002 真空采血管及其添加剂 WHO Third Edition 实验室生物安全手册 3 术语和定义 1

干细胞库建设项目可行性研究报告

干细胞研究项目 二OO九年十一月十日

目录 内容提要 第1章总论....................................................... １1 §1.1 项目背景 ................................................ １1 §1.1.1 项目名称........................................... １1 §1.1.2 项目出资方及资本结构............................... １1 §1.1.3 项目拟建地点....................................... １1 §1.1.4 立项依据........................................... １1 §1.2 可行性研究结论 .......................................... ２2 §1.2.1 市场预测和项目规模................................. ２2 §1.2.2 公用系统供应.. (2) §1.2.3 项目地址 (102) §1.2.4 环境保护 (102) §1.2.5 组织及劳动定员 (113) §1.2.6 项目建设进度 (114) §1.2.7 投资估算和资金筹措 (114) §1.2.8 项目财务和经济评价 (124) §1.2.9 项目综合评价结论 (126) 第2章项目背景和发展概况 (137) §2.1 项目提出的背景 (137) §2.1.1 国家及行业发展规划 (137) §2.1.2 项目发起人和发起原因 (7) §2.2 项目发展概况 (148) §2.3 投资的必要性 (15) 第3章市场分析与营销方案 (1710) §3.1 市场调查 (1710) §3.2 市场预测 (11) §3.3 价格策略 (28) §3.4 销售收入预测 (13)

干细胞研究中心实验室设计要求

干细胞研究中心实验室设计要求 一、干细胞研究中心实验室选址要求 1、选择周围环境较好的场地，空气质量标准应符合GB 3095标准分级二级标准； 2、不能建设在易发生自然灾害（地震、洪水、海啸等）的地区； 3、不能建设在将要拆迁的建筑；不能建设在市政规划不明确区域。 二、干细胞实验室建设基本要求 1、干细胞研究中心实验室的环境需求 培养环境无毒和无菌室保证培养细胞生存的首要条件按照现行国内GMP标准，细胞培养的环境，核心功能区的洁净等级应整体达到C级，局部达到百级（可通过生物安全柜达到百级要求）。 2、干细胞库实验室应包括功能区与办公区 ①功能区包括：样本接收室、干细胞制备室、配液室、检验室、干

细胞存储室、更衣室、缓冲室、细胞存储区域（冻存室）、医疗垃圾存放室、消毒清洗室等（应标识洁净和风险级别）。 ②办公区包括办公室、会议室、档案室和监控室等。 3、干细胞研究中心实验室的流程 合格的干细胞实验室，要有严格的流程控制，应尽可能的区分人流、物流、成品流、污物流等，避免交叉污染。 4、设计注意 ①洁净区、非洁净区完全分开。 ②办公区域与实验区域的通风系统应独立分开； ③不同科室应设有防污染措施，如缓冲间、气闸室和传递窗等。 5、人流、物流通道应独立设置，避免混杂和交叉污染。 6、物料、废弃物应设专用传递窗，并具备消毒灭菌功能。 7、办公区域与实验区域应进行物理隔离，工作人员由专用通道进入

实验区。 8、门、窗、压差 ①洁净室内的密闭门应朝空气洁净度较高的房间开启并加设闭门器； ②无窗洁净室的密闭门上宜设观察窗； ③不同等级的洁净室、洁净区与非洁净区的压差，应不小于5Pa； ④洁净区与室外的压差，应不小于10Pa。 9、建设材料应防渗漏、防火、耐腐蚀、防水和不起尘等，易于清洁和消毒灭菌。 10、库内所有窗户应为密闭窗，玻璃耐撞击、防破碎。 11、洁净室内不宜安装水池和地漏。 三、干细胞研究中心实验室设施系统 1、消防要求 ①应符合GB 50016要求。 ②干细胞库内宜安装火灾自动烟感报警装置、消防疏散警示标识、紧急逃生通道、安全出口； ③安全出口（全封闭的玻璃门，并备有安全锤），安全出口设计应能够使仪器设备进出。 2、通风、空调 ①应符合GB/T 18883的规定，气流“清洁”→“污染”，最大限度减少室内回流与涡流；

可行性研究报告-干细胞中心

组建成都ＸＸ干细胞中心有限公司（暂名） 成都恒春之源生物科技有限公司 二OO九年十一月十日

目录 内容提要 第1章总论.......................................................１1§1.1项目背景.................................................１1§1.1.1项目名称...........................................１1 §1.1.2项目出资方及资本结构...............................１1 §1.1.3项目拟建地点.......................................１1 §1.1.4立项依据...........................................１1§1.2可行性研究结论...........................................２2§1.2.1市场预测和项目规模.................................２2 §1.2.2公用系统供应 (2) §1.2.3项目地址 (102) §1.2.4环境保护 (102) §1.2.5组织及劳动定员 (113) §1.2.6项目建设进度 (114) §1.2.7投资估算和资金筹措 (114) §1.2.8项目财务和经济评价 (124) §1.2.9项目综合评价结论 (126) 第2章项目背景和发展概况 (137) §2.1项目提出的背景 (137) §2.1.1国家及行业发展规划 (137) §2.1.2项目发起人和发起原因 (7) §2.2项目发展概况 (148) §2.3投资的必要性 (15) 第3章市场分析与营销方案 (1710) §3.1市场调查 (1710) §3.2市场预测 (11) §3.3价格策略 (28)

干细胞库建设项目可行性研究报告

XXXX有限公司 干细胞库建设项目 可行性研究报告 编制单位：北京中投信德国际信息咨询有限公司 高级工程师：高建

目录 第一章总论 (1) 1.1项目概要 (1) 1.1.1项目名称 (1) 1.1.2项目建设单位 (1) 1.1.3项目建设性质 (1) 1.1.4项目建设地点 (1) 1.1.5项目负责人 (1) 1.1.6项目投资规模 (1) 1.1.7项目建设内容 (1) 1.1.8项目资金来源 (2) 1.1.9项目实施工期 (2) 1.2项目单位简介 (2) 1.3编制依据 (2) 1.4编制原则 (3) 1.5研究范围 (4) 1.6主要经济技术指标 (4) 第二章项目背景及必要性分析 (6) 2.1项目提出背景 (6) 2.2项目建设必要性分析 (9) 2.2.1顺应我国“十三五”时期战略性新兴产业快速发展的需要 (9) 2.2.2推动我国高端生物技术产业快速发展的需要 (10) 2.2.3促进粤港澳地区干细胞库快速发展进程的需要 (11) 2.2.4满足干细胞市场需求造福于全人类健康事业的迫切需要 (11) 2.3项目建设的可行性 (12) 2.3.1政策可行性 (12) 2.3.2技术可行性 (16) 2.3.3管理可行性 (20) 2.4可行性分析结论 (20) 第三章行业市场分析 (21) 3.1全球干细胞市场发展现状及规模预测分析 (21) 3.2我国干细胞行业市场规模预测分析 (23) 3.3干细胞行业发展趋势及前景分析 (24) 3.4市场分析结论 (26) 第四章项目建设条件 (28) 4.1地理位置选择 (28) 4.2区域投资环境 (28)

干细胞医疗可行性研究报告

干细胞医疗项目可行性研究报告 2016年

前言 可行性研究报告是从事一种经济活动（投资）之前，双方要从经济、技术、生产、供销直到社会各种环境、法律等各种因素进行具体调查、研究、分析，确定有利和不利的因素、项目是否可行，估计成功率大小、经济效益和社会效果程度，为决策者和主管机关审批的上报文件。 中商产业研究院每年完成项目数量达数百个，在养老产业、商业地产、产业地产、产业园区、互联网、电子商务、民营银行、民营医院、农业、养殖业、生态旅游、酒店、机械电子等行业积累了丰富的项目案例，可对同行业项目提供具有参考性、建设性意见，为客户设计该项目的建设方案，完成包括市场和销售、规模和产品、厂址及建设工程方案、原辅料供应、工艺技术、设备选择、人员组织、实施计划、投资与成本、效益及风险等的计算和评价；内容详实、严密地论证项目的可行性和投资的必要性。我们策划编制的干细胞医疗X项目可行性研究报告在发改委、投资商与金融机构的审慎下处于同行领先水平。

【出版日期】2016年 【交付方式】Email电子版/特快专递【价格】订制 干细胞医疗项目可行性研究报告 第一章项目总论 一、项目背景 二、项目简介 三、项目可行性与必要性分析 四、主要经济指标说明 五、可行性研究报告编制依据 第二章项目建设单位介绍 一、项目建设单位介绍 二、经营业绩 三、资质证书 第三章干细胞医疗市场分析 一、干细胞医疗行业发展现状 二、干细胞医疗行业市场规模分析与预测 三、干细胞医疗市场分析小结 第四章项目总体规划 一、项目定位 二、项目功能 三、主要服务内容 第五章运营管理 一、商业模式 二、运营模式 第六章项目建设条件 一、项目选址 二、地理位置

间充质干细胞药物开发策略

间充质干细胞药物开发策略 干细胞药物开发的目的是，从“一对一”的个体化干细胞临床应用转向“一对多”的临床治疗方案，为临床提供标准化的干细胞制品。药物的开发需要遵循常规药物开发的流程，包括：药学研究、非临床研究、临床试验申请、早期临床试验、确证性临床试验、新药申请和批准上市等过程。 1干细胞制剂开发要点概述 干细胞制剂药学研究，主要包括工艺开发与质量评价： ①干细胞库与工作细胞库建立： 供者筛查、组织采集，细胞分离、纯化、培养、保藏、鉴别、效力检测，以及生物学特性、遗传学稳定性研究，干细胞库技术标准及工作标准建立； ②干细胞制剂工艺开发与药学研究： 大规模细胞扩增、细胞制备工艺、剂型选择、包装选择、处方筛选、制剂冻存/复苏工艺，体外操作对干细胞生物学特性的影响，过程质量控制，干细胞药物放行标准建立； ③干细胞制剂冷链运输和稳定性研究： 产品冻存与复苏、冷链运输技术、临床快速检验、稳定性研究等，稳定性研究包括冻存条件下制剂影响因素试验、长期试验，模拟临床应用条件的试验等，通过这些实验获得的药品稳定性信息来确定药物的储存运输条件、包装以及有效期。 干细胞制剂开发原则 干细胞制剂开发过程服从GMP原则，但应充分考虑活的药物与传统药物区别： ①供者细胞的合理性及筛查； ②生产材料应考虑，供者细胞、生产过程细胞分类分级管理，生产用原材料的风险评估， 外源因子去除，限制动物及人来源材料，基因修饰/改造按高风险管控，辅料使用考虑必要性、安全性和合理性； ③制备工艺与过程控制应证明可行性与稳健性，生产工艺的设计（QbD）应避免细胞发生 非预期的或异常的变化，全过程监控、持续改进，用连续自动化、全封闭手段减少污染； ④强调过程控制与制品放行互补，高风险操作评估，细胞制剂与回输制剂转换验证； ⑤质量研究取代表批次及生产阶段细胞的特性、功能性、纯度和安全性等分析； ⑥质量控制基于过程理解，兼顾认知，逐步完善，确证性与商业化保持一致； ⑦临床质量核准，方法验证与药典适用性验证，快速微量方法相互验证； ⑧稳定性研究应采取连续工艺，适用包装密封性研究、冷冻储存适应性研究等，运输条件，

临床干细胞制备设计建设方案SICOLAB

临床干细胞制备设计建设方案SICOLAB 一、设计标准 GB/T-16292医药业洁净室(区〉悬浮粒子的测试方法 GB/T-16293医药业洁净室(区〉浮游菌的测试方法 GB19489-2008实验室生物安全通用要求 GB50346-2011生物安全实验室建筑技术规范 DB31/T687-2013临床细胞治疗细胞制备实验室基本要求 二、组织工程技术 根据细胞生物学和程学的原理，将具有特定生物学活性的组织细胞与生物支架材料综合，在体外或体内形成组织或器官，以维持、修复、再生或改善受损组织或器官结构和功能的一项生物技术。 三、临床组织工程 实施临床级组织工程化组织制备的软硬件集成系统该系统采用物联网信息技术实现细胞/支架/材料/组织制备环境参数受控、数据-罔像处理和设备集成等智能化管控功能，满足医疗专业人员从事临床级支架材料处理、人体细胞组织样本采集、细胞分离纯化、培养扩缩、人体组织体外构建、熔养、功能 鉴定与质控等技术的临床应用 四、设计要求 干细胞制备实验室应符合组织工程化组织特定的生产工艺流程和技术特点。 干细胞制备实验室应满足组织工程化组织制备及其临床应用的生物安全性、技术稳定性和质量可控性。 干细胞制备实验室庇满足无菌操作要求应能避免外源致病微生物引人以及供体间的交叉污染。 干细胞制备实验室应满足可迫溯运行管理要求。 五、分区要求 1.干细胞制备实验室用房分为洁净区和非洁净区。 2.洁净区包括支架材料处理室、组织样本处理室、细胞分离室、细胞培养室、组织构建室组织培养室、无菌质量检测与控制室、清洗消毒室、废弃物灭活处理室等；非洁净区包括组织学检测室、分子生物学检测室、储存室、监控中心、资料档案室等。 六、环境要求 1.环境设计应符合GB19489、GB50333、GB50346、GB50457、DB31/T687的要求。 2.环境参数〈温度湿皮照皮、新鲜空气盘等〉应符合GB5059、DB31/T68的要求。 3.干细胞制备实验室以控制微生物污染为核心，洁净度等级及微生物检测参数要求如下，不得有污染源。 4.B级环境背景、局部A级：包含细胞/组织制备处理过程相关的功能分区，与细胞/材料/组织制备直接相关的操作应在生物安全柜内操作。 5.C级环境背景、局部A级：包含材料/组织预处理以及无菌质量检测与控制相关的功能分区，与细胞/材料/组织处理直接相关的操作应在生物安全柜内操作。 6.C级环境背景：包含洗衣、清洗、消毒功能分区。 7.D级环境背景：包含废弃物灭活处理相关功能分区。 8.洁净区应由具有资质的第三方专业机构定期进行净化指标的检测，检测方法应符合GB/T16292、GB/T 16293、GB50591的要求。 七、布局要求 干细胞制备实验室总平面布局应符合GB19489、GB50333、GB50346、GB50457的要求应有利于环榄净化、避免交叉污染等要求。建筑平而和间布局应具有适当的灵活性。主体结构的耐久性应与室内装备、装修水平相协调。清洁物与污物的放置应严格分隔。洁净区内物品传递距离应尽可能短捷，清洁物与污物传递通

2015-新版-GMP标准制备间充质干细胞

Standard Operating Procedure for the Good Manufacturing Practice-Compliant Production of Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Livia Roseti,Marta Serra,and Alessandra Bassi Abstract According to the European Regulation (EC 1394/2007),Mesenchymal Stem Cells expanded in culture for clinical use are considered as Advanced Therapy Medicinal Products.As a consequence,they must be produced in compliance with Good Manufacturing Practice in order to ensure safety,reproducibility,and ef?cacy.Here,we report a Standard Operating Procedure describing the Good Manufacturing Practice-compliant production of Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells suitable for autologous implan-tation in humans.This procedure can be considered as a template for the development of investigational medicinal Mesenchymal Stem Cells-based product protocols to be enclosed in the dossier required for a clinical trial approval.Possible clinical applications concern local uses in the regeneration of bone tissue in nonunion fractures or in orthopedic and maxillofacial diseases characterized by a bone loss. Keywords:Bone marrow,Mesenchymal stem cells,Good manufacturing practice,Quality control,Advanced therapy medicinal products,Bone regeneration 1 Introduction Mesenchymal Stem Cells (MSCs)display a low density in bone marrow,thus an in vitro expansion step is required in order to obtain a cell number suitable for clinical applications (1–3).Euro-pean regulations de?ne such expanded cells as Advanced Therapy Medicinal Products (ATMPs)that must be produced in accordance with the current Good Manufacturing Practice (GMP)(4,5).Those rules,which have been already encoded for conventional drugs,allow for the manufacture of medicinal products in a stan-dardized and controlled way minimizing,at the same time,con-tamination risks. Here,we report a Standard Operating Procedure (SOP)describing the multistep GMP-compliant manual production of Bone Marrow-derived MSCs to be used for autologous implanta-tion in humans (6–8).MSCs,isolated from an eparinated (1,000I.U.of heparin)bone marrow sample harvested from the iliac crest of adult donors (9,10)(about 10–20ml),are expanded in monolayer Methods in Molecular Biology (2015)1283:171–186DOI 10.1007/7651_2014_103 ?Springer Science+Business Media New York 2014Published online:05August 2014 w w w w c e l l 8 .c n w w w . s t e m c e l l 8 .c n w w w .s t e m c c e l l 8.c n w w w .s t e m c e l l 8.c n w w w .s t e m c c e l l 8 .c n w w w .s t e m c e l l 8 .c n w w w . s t e m c c e l l 8 .c n w w w .s t e m c e l l 8 .c n w w w .s t e m c c e l l 8.c n w . s t e m c e l l 8 .c n w .s t e m c