Bst DNA聚合酶介绍

Bst DNA聚合酶（Large Fragment）

內容物保存溫度 Cat.

Number 規格定價

-20℃C040-1 2U/ul,

250

ul 499 Bst DNA聚合酶(Large Fragment)

-20℃ C040-5 X5 1999

-20℃C041-1 1ml/vial

49

10X Bst buffer

-20℃C041-5 X5

199 ☆產品特色︰Bst DNA聚合酶單位定義︰

☆

Bst DNA聚合酶，乃是將Bacillus

stearothermophilus中的聚合酶基因，保留了5’?3’聚

合酶(pol)的片段，但是去除5’?3’

外切酶(exo)基因片段

而成的Large Fragment。本酵素最主要的特性是具有超

強的股取代能力（strand displacement）

1.1個活性單位：在65°C，30分鐘內於下述反應條件

中可將10nmole的dNTP結合至DNA片段上所需要

的量。

2.反應條件: 50 mM KCl, 20 mM Tris-HCl (pH 8.8),

10mM MgCl

a，因此在不具

有5’?3’外切酶活性的情況下，因阻礙到前端聚合反應

而被取代釋出的一股並不會被水解。這種被釋出的單股

DNA具有可被專一性引子(primer)辨識與做為模板的功

能，因此許多恆溫增幅的反應，包含LAMP

（Loop-mediated isothermal amplification）

2

, 30 nM M13mp18 SS DNA, 70nM

M13 sequencing primer, 200 uM dATP, 200 uM

dCTP, 200 uM dGTP, 100uM 3H dTTP 與100

ug/ml BSA，總反應體積為50 ul。

b與RCA

(Rolling Circle Amplification)

Bst DNA聚合酶熱失活條件︰

☆

c反應，都是利用這種原

理而設計，也因此Bst DNA聚合酶自然就成為這類型反

應中酵素的首選。

80℃加熱10分鐘。

☆小米貼心叮嚀：

1.除了Bst DNA聚合酶Large Fragment適用於恆溫增

幅反應之外，其他具有股取代能力並且缺乏5’?3’

外切酶活性的DNA聚合酶，例如φ29 DNA

polymerase

☆10X Bst buffer的組成︰

200 mM Tris-HCl (pH8.8 @25℃)，100 mM

(NH)SO，100 mM KCl，20mM MgSO

4244，1%(v/v)

Triton X-100。d、Vent DNA polymerase、PRD1 DNA

polymerase、甚至於DNA polymerase I (Klenow

fragment)都有被報導使用在恆溫增幅反應上。

☆酵素保存條件：

10 mM Tris-HCl (pH 7.5 @25℃)，50 mM KCl，

1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% (v/v) glycerol，

0.1% (v/v) Triton X-100。

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