%b8%ad癌前病变阶段差异表达蛋白质的筛选
中华肝脏病杂志２００９年９月第１７卷第９期ＣｈｉｎＪＨｅｐａｔｏｌ，Ｓｅｐｔｅｍｔ】ｅｒ２００９，Ｖ０１．１７，Ｎｏ．９
离效果最好、点数多的一块胶作为参考胶，与其余两组的凝胶进行组间匹配分析，结果为：癌前病变组与之匹配的点数为（５４２±７）个，匹配率为６６．７％ｌ肝癌组与之匹配的点数为（５０７±６）个，匹配率为６２．４％（图２）。
４．差异表达蛋白质点的筛选及鉴定：在匹配分析基础上筛选出灰度差异≥２倍的蛋白质点共１２７个；经基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法分析，去冗余，共鉴定出差异表达蛋白质８２种，其中在癌前病变阶段即出现表达水平明显改变的蛋白质４７种。其表现形式多样，主要有：在正常肝组织一癌前病变组织一癌组织中表达依次上调，如６７ＬＲ、醛酮还原酶１８１０等８种蛋白质；在正常肝组织一癌前病变组织一癌组织中表达依次下调，如鲱精胺酶、谷胱甘肽过氧化物酶、铜一锌超氧化物歧化酶等２２种蛋白质，在肝癌组织中表达上调或下调，但在正常肝组织和肝癌前病变组织中表达水平相似。见表ｌ和图３。
５．差异蛋白６７ＬＲ，鲱精胺酶的表达验证：Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ—ＰＣＲ的检测结果与２一ＤＥ的结果基本一致，显示６７ＬＲ在大鼠正常肝组织、肝癌前病变组织和肝癌组织中的蛋白质水平以及ｍＲＮＡ水平均依次上调；而鲱精胺酶的蛋白质与ｍＲＮＡ水平均依次下调。见图４，５。
注：Ａ：正常对照肝组织，
Ｂ：肝癌前病变组织－Ｃ：
肝癌组织。１３：鲱精胺酶，
１２３：层黏连蛋白受体１
图３部分差异表达蛋白质
点局部放大图
注：Ｍ：ＤＮＡ相对分子质茸钿ｉ准。Ａ：层黏连蛋白受体ｌＲＴＰＣＲ产物电泳图ｌＢ：鲱精胺酶ＲＴ—ＰＣＲ产物电冰图。ｌ、４：正常对照肝组织；２、５：肝癌前病变组织?３、６：肝癌组织圈４ＲＴ—ＰＣＲ检测层黏连蛋白受体１和鲱精胺酶在大鼠
不同肝组织中的表达情况
Ａ：正常对照肝组织。Ｂ：肝癌癌前病变组织，Ｃ：肝痈组织
圈５Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测层黏连蛋白受体ｌ和鲱精胺酶在
大鼠不同肝组织中的表达情况
讨论
由于肝癌前病变的形态学变化出现较晚，某些具有表型改变特征的酶已被用于肝癌发生发展过程的相关研究，其中ＧＧＴ阳性肝细胞增生灶是比较公认的大鼠肝癌前病变标志。我们前期研究已证实它在大鼠肝癌形成过程中出现的数量和大小与实验后
Ａ：正常对照肝组织。Ｂ：肝癌前
病变组织?Ｃ：肝癌组织
圈２ｊ种组织样品的总蛋白质
双向凝胶电泳图
二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌过程中癌前病变阶段差异表达蛋
白质的筛选
作者：梁宏洁， 韦薇， 康晓楠， 郭坤， 曹骥， 苏建家， 杨春， 欧超， 李瑗， 刘银坤，LIANG Hong-jie， WEI Wei， KANG Xiao-nan， GUO Kun， CAO Ji， SU Jian-jia，
YANG Chun， OU Chao， LI Yuan， LIU Yin-kun
作者单位：梁宏洁,LIANG Hong-jie(广西医科大学第一附属医院临床医学实验部、广西医科大学医学检验系,南宁,530021)， 韦薇,曹骥,苏建家,杨春,欧超,李瑗,WEI Wei,CAO Ji,SU Jian-
jia,YANG Chun,OU Chao,LI Yuan(广西壮族自治区肿瘤防治研究所病理研究室)， 康晓楠
,郭坤,刘银坤,KANG Xiao-nan,GUO Kun,LIU Yin-kun(上海复旦大学附属中山医院肝癌研究
所)
刊名：
中华肝脏病杂志
英文刊名：CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
年，卷(期)：2009,17(9)
被引用次数：1次
参考文献(11条)
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引证文献(1条)
1.韦薇.梁宏洁.崔杰锋.郭坤.康晓楠.曹骥.苏建家.李瑗.刘银坤醛酮还原酶1B10基因沉默对MHCC97H细胞生长和基因表达的影响[期刊论文]-中华肝脏病杂志 2010(9)
本文链接：https://www.wendangku.net/doc/3d15329074.html,/Periodical_zhgzbzz200909008.aspx