津力达对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌+GLUT4表达的影响 (1)

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０１４．１５．００６

?论著?

津力达对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌ＧＬＵＴ４表达的影响

臧莎莎　刘颐轩　宋光耀　王超

作者单位：０５００１７　石家庄市，河北医科大学研究生学院（臧莎莎、刘颐轩）；河北省人民医院（宋光耀、王超）

【摘要】　目的　探讨津力达对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌ＧＬＵＴ４表达的影响。方法　ＳＤ大鼠分为正常对照组（ＮＤ

组），高脂对照组（ＨＦＤ组），津力达组及吡格列酮组，每组６只；灌胃８周后，进行腹腔注射葡萄糖耐量试验并计算曲线下面积（ＡＵＣ）；测得大鼠空腹血糖、胰岛素计算ＨＯＭＡ－ＩＲ指数；ＲＴ－ＰＣＲ及ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测大鼠骨骼肌ＧＬＵＴ４表达。结果　津力达明显改善了３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ血糖及ＡＵＣ，吡格列酮改善了６０、１２０ｍｉｎ血糖及ＡＵＣ（Ｐ＜０．０５）；津力达及吡格列酮明显改善ＨＯＭＡ－ＩＲ指数（Ｐ＜０．０５）；津力达及吡格列酮明显上调了骨骼肌ＧＬＵＴ４的表达。结论　津力达能够上调大鼠骨骼肌ＧＬＵＴ４的表达，改善高脂饮食诱导的胰岛素抵抗。

【关键词】　津力达；胰岛素抵抗；骨骼肌；ＧＬＵＴ４【中图分类号】　Ｒ５８７．１ 【文献标识码】　Ａ 【文章编号】　１００２－７３８６（２０１４）１５－２２５９－０３ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉｎｌｉｄａｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｏｆｒａｔｓｗｉｔｈｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ＺＡＮＧＳｈａｓｈａ倡

，ＬＩＵＹｉｘｕａｎ倡，ＳＯＮＧＧｕａｎｇｙａｏ，ｅｔａｌ．倡

ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅＳｔｕｄｅｎｔｓｏｆＨｅｂｅｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１７，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＪｉｎｌｉｄａｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｏｆｒａｔｓｗｉｔｈｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ（ＳＤ）ｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌｄｉｅｔｇｒｏｕｐ（ＮＤｇｒｏｕｐ），ｈｉｇｈ－ｆａｔｄｉｅｔｇｒｏｕｐ（ＨＦＤｇｒｏｕｐ），ｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔｗｉｔｈＪｉｎｌｉｄａｇｒｏｕｐ（Ｊｉｎｌｉｄａｇｒｏｕｐ）ａｎｄｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔｗｉｔｈｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅｇｒｏｕｐ（ｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅｇｒｏｕｐ），ｗｉｔｈ６ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒ８ｗｅｅｋｓ，ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｇｌｕｃｏｓｅｔｏｌｅｒａｎｃｅｔｅｓｔ（ＩＰＧＴＴ）ｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄａｎｄａｒｅａｕｎｄｅｒｔｈｅｃｕｒｖｅ（ＡＵＣ）ｗａｓｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅｃｕｒｖｅｓ；ｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｉｎｓｕｌｉｎｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｔｏｃａｌｃｕｌａｔｅＨＯＭＡ－ＩＲ；ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅａｌ－ｔｉｍｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ－ＰＣＲ）ａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｊｉｎｌｉｄａａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｂｖｉｏｕｓｌｙｉｍｐｒｏｖｅｄ３０ｍｉｎ，６０ｍｉｎｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅａｎｄＡＵＣｄｕｒｉｎｇＩＰＧＴＴ，ｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅｉｍｐｒｏｖｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ６０ｍｉｎ，１２０ｍｉｎｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅａｎｄＡＵＣ（Ｐ＜０．０５），ｂｏｔｈＪｉｎｌｉｄａａｎｄｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅｉｍｐｒｏｖｅｄｏｂｖｉｏｕｓｌｙＨＯＭＡ－ＩＲｉｎｄｅｘ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄｂｏｔｈｏｆｔｈｅｍｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｊｉｎｌｉｄａｃａｎｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＬＵＴ４ｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｏｆｒａｔｓ，ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ｗｈｉｃｈｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔ． 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】　Ｊｉｎｌｉｄａ；ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅ；ＧＬＵＴ４

胰岛素抵抗是２型糖尿病的病理基础［１］

。骨骼肌是一关键的代谢组织，能够处置餐后７０％～９０％葡萄糖，骨骼肌胰岛素抵抗的发生对全身胰岛素的敏感性

产生重要影响［２］

。骨骼肌组织中的葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）是胰岛素作用下的主要葡萄糖运载体。高脂饮食诱导的胰岛素抵抗的发生常伴随胰岛素刺激下ＧＬＵＴ４表达及转位的异常。中成药津力达主要用于胰岛素抵抗及２型糖尿病的治疗，但其分子机制尚未明确。本实验主要观察津力达对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌ＧＬＵＴ４表达的影响，进一步明确其作用机制。１　材料与方法１．１　主要材料　津力达中成药由河北以岭药业提供；盐酸吡格列酮片，规格１５ｍｇ／片，由日本武田制药有限公司生产；ＧＬＵＴ４抗体购于Ｓｉｇｎａｌｗａｙ公司，β－ａｃｔｉｎ抗体及辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的二抗购自Ｐｒｏ－ｔｅｉｎＴｅｃｈＧｒｏｕｐ公司；ＥＣＬ化学发光试剂盒购于上海生

工生物工程股份有限公司。１．２　实验动物　清洁级雄性ＳＤ大鼠３６只，体重（１４０±２０）ｇ均购自北京维通利华有限责任公司，许可证号：ｓｌｘｋ（京）７００９－００１７。１．３　实验饲料　基础饲料购自河北医科大学实验动物中心，热量组成：碳水化合物６５．５％，脂肪１０．３％，蛋白质２４．２％，总热量为３４８ｋｃａｌ／１００ｇ；自制高脂饲料热量组成：碳水化合物２０．１％，脂肪５９．８％，蛋白质占２０．１％，总热量为５０１ｋｃａｌ／１００ｇ。１．４　方法１．４．１　动物分组：３６只雄性ＳＤ大鼠随机分为２组：１２只予基础饲料喂养，２４只予高脂喂养。６周后每组各取６只行正葡萄糖高胰岛素钳夹实验判断ＩＲ模型造模成功。基础饲料喂养的剩余６只继续予基础饲料作为正常对照组（ＮＤ组）；高脂喂养造模成功的１８只进一步分组：高脂对照组（ＨＦＤ组），吡格列酮治疗组

给予４．５ｍｇ?ｋｇ－１?ｄ－１

，津力达治疗组给予

１．５ｇ?ｋｇ－１?ｄ－１

，吡格列酮与津力达溶液用０．５％的羟甲基纤维素钠配置。灌胃给药１次／ｄ，正常、高脂对

照组予同体积０．９％氯化钠溶液灌胃，每周测量体重及统计摄食量。灌胃第８周，腹主动脉放血处死大鼠，留取血清；留取股四头肌标本，－８０℃保存备用。１．４．２　高胰岛素－正葡萄糖钳夹试验：６０ｍｇ／ｋｇ戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，行右颈动脉、右颈静脉插管术，导管经皮下由耳后引出并固定，用１００Ｕ／ｍｌ肝素封管，结扎固定于颈后皮肤。插管术后３～５ｄ，待大鼠恢复体重，禁食１２ｈ过夜，次日在特制的鼠笼中行清醒状态下高胰岛素－正葡萄糖钳夹实验。测定基础血糖值后，以４ｍＵ?ｋｇ－１?ｍｉｎ－１匀速输注胰岛素，使大鼠体内的胰岛素水平迅速升高。其后每１０分钟测定１次静脉血糖，输注并调整３０％葡萄糖溶液的输注率，使维持血糖在（５．０±０．５）ｍｍｏｌ／Ｌ，连续３次以上血糖在上述范围即表明达到稳态，取稳态下５～６次葡萄糖输注率（ＧＩＲ）的平均值作为大鼠胰岛素敏感性的评价指标［３］。

１．４．３　腹腔注射葡萄糖耐量实验：首先尾静脉放血测得大鼠空腹血糖，然后腹腔注射５０％的葡萄糖（２ｇ／ｋｇ），注射后用快速血糖测定仪测定５、１０、３０、６０、１２０ｍｉｎ的血糖，并计算葡萄糖曲线下面积（ＡＵＣ）。

１．４．４　计算ＨＯＭＡ－ＩＲ：测得大鼠空腹血糖与胰岛素，胰岛素抵抗指数（ＨＯＭＡ－ＩＲ）＝空腹血糖×空腹胰岛素／２２．５［４］。

１．４．５　ＲＴ－ＰＣＲ检测：用Ｔｒｉｚｏｌ法提取小鼠骨骼肌总ＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ采用ＳｙｂｅｒＧｒｅｅｎＩＧｏＴａｑｑＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ试剂盒在ＡＢＩＰＲＩＳＭ７３００ＰＣＲ仪上进行。反应条件：９５℃预变性１０ｍｉｎ，随后９５℃变性１５ｓ４０个循环，５８℃退火２０ｓ，７２℃延伸３０ｓ。ＧＬＵＴ４上游引物５’－ＡＴＡＣＴＣＡＴＴＣＴＣＧＧＡＣＧＧＴＴＣ－３’，下游引物５’－ＣＣＣＡＣＡＴＡＣＡＴＡＧＧＣＡＣＣＡＡ－３’；β－ａｃｔｉｎ上游引物５’－ＴＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＧＴＡＴＧＧＧＴ－３’，下游引物５’－ＡＧ－ＧＡＴＧＣＣＴＣＴＣＴＴＧＣＴＣＴＧ－３’。反应结束后，按照各反应孔Ｃｔ值，以β－ａｃｔｉｎ基因为内参，根据公式２－△Ｃｔ计算各样品目的基因相对表达量。

１．４．６　骨骼肌ＧＬＵＴ４蛋白表达：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ－ｔｉｎｇ方法测定。冷冻的骨骼肌组织称质量，加入组织裂解液提取蛋白并定量。取３０μｇ进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白后转移至聚偏氟乙烯（ＰＶＤＦ）膜，封闭液室温封闭４ｈ，ＧＬＵＴ４、β－ａｃｔｉｎ一抗４℃摇床过夜，洗膜后再加入辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的二抗，室温孵育２ｈ，用ＥＣＬ化学发光试剂盒暗室显影。

１．５　统计学分析　应用ＳＰＳＳ１３．０统计软件，计量资料以珋ｘ±ｓ表示，采用的单因素方差分析，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。

２　结果

２．１　腹腔注射葡萄糖耐量实验　与ＮＤ组相比，ＨＦＤ组０、５、３０、６０、１２０ｍｉｎ血糖及ＡＵＣ明显升高（Ｐ＜０．０５）。津力达组３０、６０血糖及ＡＵＣ较ＨＦＤ组降低（Ｐ＜０．０５），较ＮＤ组升高（Ｐ＜０．０５）；吡格列酮组６０、１２０ｍｉｎ及ＡＵＣ较ＨＦＤ组降低（Ｐ＜０．０５），较ＮＤ组升高（Ｐ＜０．０５）。见表１。

２．２　ＨＯＭＡ－ＩＲ　与ＮＤ组相比，ＨＦＤ组ＨＯＭＡ－ＩＲ指数明显升高（Ｐ＜０．０５）；津力达及吡格列酮组

ＨＯＭＡ－ＩＲ指数较ＮＤ组升高，较ＨＦＤ组降低（Ｐ＜０．０５）。见表１。

表１　４组血糖和ＡＵＣ及ＨＯＭＡ－ＩＲ比较ｎ＝６，珋ｘ±ｓ

　项目ＮＤ组ＨＦＤ组津力达组吡格列酮组

血糖（ｍｍｏｌ／Ｌ）

　０ｍｉｎ４．６０±０．３２６．６０±０．５２倡５．７３±０．３８５．９７±０．３８

　５ｍｉｎ９．６３±０．４７１２．３３±０．５５倡１０．２０±０．６７９．６７±０．６０

　１０ｍｉｎ１２．８０±１．３２１６．７０±０．８５１１．８３±１．４４１３．５７±０．５５

　３０ｍｉｎ９．７０±０．２１１７．１０±０．２１倡１５．３０±０．６１倡１５．４７±０．７５倡

　６０ｍｉｎ７．０７±０．４１１４．４７±０．８１倡１０．１３±０．３８倡＃９．６７±０．５２倡＃　１２０ｍｉｎ５．４３±０．０９８．１７±０．１５倡６．１０±０．２６＃６．４０±０．２１＃ＡＵＣ１５．７２±０．５０２６．８４±０．６３倡２０．５８±０．９１倡＃２０．７８±０．５５倡＃ＨＯＭＡ－ＩＲ２．２７±０．２２８．７０±０．３９倡３．８８±０．３８倡＃３．５２±０．３４倡＃ 注：与ＮＤ组比较，倡Ｐ＜０．０５；与ＨＦＤ组比较，＃Ｐ＜０．０５

２．３　大鼠骨骼肌ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ及蛋白的表达　骨骼肌ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ及蛋白表达ＨＦＤ组低于ＮＤ组（Ｐ＜０．０５），津力达及吡格列酮组较ＨＦＤ组ｍＲＮＡ及蛋白表达升高（Ｐ＜０．０５）。见图

１。

图１　不同组间ＧＬＵＴ４蛋白及ｍＲＮＡ表达的比较

Ａ：Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ；Ｂ：ＲＴ－ＰＣＲ；Ⅰ：正常对照组；Ⅱ：高脂组；Ⅲ：吡格列酮组；Ⅳ：津力达组

３　讨论

随着生活方式的改变，糖尿病的发病率日益增加。中医药作为祖国传统医学在医学体系中占据重要地位，近年来一些中成药的降糖效果得到了人们的认可，在糖尿病治疗方面取得了一定成果。本课题研究的主要内容是降糖药物津力达，它是一种中成药，由人参、黄精、苍术（炒）、苦参、麦冬、地黄等十几味中药制成，但其具体的降糖机制尚不明确。

胰岛素抵抗（ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＩＲ）主要表现为胰

岛素对其靶组织的生理效应降低，胰岛素介导下骨骼肌、脂肪组织对葡萄糖的摄取、利用或储存的效力减弱［３］

。骨骼肌是胰岛素刺激葡萄糖利用的主要组织，因而也是ＩＲ的主要部位。骨骼肌ＩＲ的发生对于全身

ＩＲ的发生发挥重要作用［４］

。

葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）是一种糖蛋白，主要存在于胰岛素敏感组织如骨骼肌、心肌和脂肪细胞中，直

接参与细胞对葡萄糖的摄取和转运［５］

。ＧＬＵＴ４是骨骼肌细胞利用葡萄糖的主要限速步骤，其表达减少或转运障碍直接导致骨骼肌对葡萄糖的摄取障碍，进而

导致高血糖［６］

。未受到刺激时９０％ＧＬＵＴ４分布在细胞内：如微粒体、高尔基复合体、管型囊等囊泡样结构中，当肌肉收缩或受到胰岛素刺激后通过胰岛素受体－胰岛素受体底物１－磷脂酰肌醇３激酶－ＡＫＴ／ＰＫＢ等一系列信号转导通路使得ＧＬＵＴ４转位到细胞膜来摄取

葡萄糖［７］

。本研究中高脂饮食组与正常组比较，骨骼肌ＧＬＵＴ４ｍＲＮＡ及蛋白的表达明显减低，因而摄取葡萄糖的能力减低，ＨＯＭＡ－ＩＲ升高，出现了胰岛素抵抗，

津力达干预之后明显上调了骨骼肌ＧＬＵＴ４的表达，改

善了ＨＯＭＡ－ＩＲ及曲线下面积ＡＵＣ。

综上，本研究发现高脂饮食会诱导胰岛素抵抗的发生，伴随骨骼肌组织ＧＬＵＴ４表达的下调；津力达干预可以上调ＧＬＵＴ４的表达，增加葡萄糖的摄取，改善胰岛素抵抗，为津力达的临床应用提供了分子水平的理论支持。

参考文献

１　ＳｉｎａｉｋｏＡＲ，ＣａｐｒｉｏＳ．Ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｅｄｉａｔｒｉｃｓ，２０１２，

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肌脂肪酸转位酶表达的影响．中华老年医学杂志，２００７，２６：９３１－９３４．４　李宝毅，谢云．ＨＯＭＡ评估法及其研究进展．中国糖尿病杂志，２００８，１６：１２６－１２８．

５　ＬｅｔｏＤ，ＳａｌｔｉｅｌＡＲ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｂｙｉｎｓｕｌｉｎ：ｔｒａｆｆｉｃｃｏｎ－

ｔｒｏｌｏｆＧＬＵＴ４．ＮａｔＲｅｖＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ，２０１２，１３：３８３－３９６．６　ＫｏｎｇＤ，ＳｏｎｇＧ，ＷａｎｇＣ，ｅｔａｌ．Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｔｏｆｕｓｉｎ２ｉｍｐｒｏｖｅｓ

ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｇｌｕｃｏｓｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ４ｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｏｆｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔｆｅｄｒａｔｓｔｈｒｏｕｇｈＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓｉｇｎａｌｉｎｇ．ＭｏｌＭｅｄＲｅｐ，２０１３，８：２０５－２１０．

７　刘传道，江钟立．ＧＬＵＴ４转位和活性的研究进展．中国康复医学杂

志，２００４，１９：３１３－３１５．

（收稿日期：２０１４－０１－１４）

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０１４．１５．００７

?论著?

肾炎宁对ＩｇＡ肾病大鼠肾脏转化生长因子Ｓｍａｄ２

信号传导系统的影响

梁建英　陈欣华　苏白玉　寇立巧　高艳　郭登洲

作者单位：０５００１１　河北省石家庄市第一医院干部科（梁建英），心内科（陈欣华），内分泌科（苏白玉）；河北省石家庄市第二医院病案科（寇立巧）；唐山职业技术学院（高艳）；河北省中医院（郭登洲）

【摘要】　目的　观察肾炎宁对ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）大鼠肾脏病理学改变的影响，以探讨该方剂针对ＩｇＡＮ的治疗效果以及作用和机制。方法　将３０只健康雄性ＳＤ大鼠，适应性喂养１周后按重量（ｇ）随机分为３个组，每组分为１０只，分别分为正常组、模型组和肾炎宁组。除正常组外其余２组均给予隔日１次口服０．１％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）酸化水共６周，在第７周开始后每周连续给３ｄ尾静脉注射ＢＳＡ缓冲溶液，共连续给６周，并于第８周末追加注射葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ），每周只给１次，共给连续３周后以复制ＩｇＡＮ实验模型，正常组大鼠口服及注射均等量０．９％氯化钠注射液。于第９周末开始对肾炎宁组给予肾炎宁煎剂灌胃服用，正常组组、模型组均灌服等量０．９％氯化钠注射液，总共给药８周。并分别于造模型前、造模型后第６个周末、８个周末、１２个周末、第１６个周末用代谢笼收集２４ｈ的尿液，并进行２４ｈ的尿蛋白定量测定。于１６周末处死实验大鼠，股动脉取血样，留取实验大鼠肾脏组织，在光镜观察大鼠肾小球的变化，免疫荧光观察ＩｇＡ沉积情况，免疫组化及聚合酶链反应（ＰＣＲ）对肾组织中Ｓｍａｄ２进行半定量分析。结果　与正常组比较，模型组和肾炎宁组阳性增强的核占小球细胞的百分比值显示显著增加（Ｐ＜０．０５），与模型组比较，肾炎宁组的表达情况明显低下（Ｐ＜０．０５）。ＲＴ－ＰＣＲ结果可以显示：与正常组相比较，模型组和肾炎宁组Ｓｍａｄ２ｍＲＮＡ的值显著增加（Ｐ＜０．０５），与模型组比较，肾炎宁表达情况明显降低（Ｐ＜０．０５）。结论　肾炎宁能够抑制受体活化性蛋白ｓｍａｄ２的表达，从而抑制ＩｇＡＮ大鼠肾脏中ｓｍａｄ２信号传导通路的激活，减少大鼠肾脏ＥＣＭ沉积，延缓ＩｇＡＮ的进程。

【关键词】　ＩｇＡ肾病；肾炎宁；动物实验；肾脏转化生长因；ｓｍａｄ２信号传导系统【中图分类号】　Ｒ６９２．６ 【文献标识码】　Ａ 【文章编号】　１００２－７３８６（２０１４）１５－２２６１－０３

ＩｇＡ肾病又称Ｂｅｒｇｅｒ病，是指肾小球系膜区以ＩｇＡ

或ＩｇＡ沉积为主的一种原发性肾小球肾炎，临床上典