CA50凝血四项操作规程
Sysmex-CA50凝血四项操作规程
1.目的
规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。
2.实验原理
凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm 的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，求得血液凝固时间。3.标本要求
3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。
3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。
3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。
4.材料
4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂，并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。
4.2.正常对照血浆：正常对照血浆有商品供应，多为冻干品，也可自制，要求采集20份以上男女各半，年龄在18-25岁之间的健康个体，删除服药者，须在平静状态下采血，血液经抗凝离心后分离血浆。取等量的各份个体血浆进行混匀，然后分装小瓶，冻存于-80℃或冷冻干燥备用。
4.3.参比血浆或称标准血浆（质控血浆）：为了使检测结果在同一实验室的不同时期或不实验室间具有可比性，就要使用标准品。
5.仪器与试剂
5.1仪器：sysmex CA-50半自动化血凝分析仪。
5.2试剂：上海太阳生物技术有限公司。
5.3仪器安装后应对其主要性能参数进行评价，内容包括精密度、线性范围、可比性、抗干扰试验试验等。评价结果应在仪器说明书标示范围之内。
5.4 仪器在测定常规标本前应使用配套的校正物建立标准曲线，在更换新批号的试剂或仪器维修后，要重新建立标准曲线。无校正物的测定项目，可伤使用配套的定值质控物进行测定，测定结果应在定值质控物标示的允许范围内。
5.5 每台仪器上使用的凝血活酶试剂应有特定的ISI（国际敏感指数）值，这样才能使患者INR（国际标准化凝血酶原时间）比值的结果有可比性。
自动终点测定目前得到广泛应用，仪器有半自动和全自动两种类型。仪器应用的检测系统有化学的、机械的或电子等，形成凝块所需时间也有差异。对每种方法都应建立自己正常参考范围，一些光学系统进行测定的仪器对血脂高、溶血、黄疸血浆不易得出精确的检测结果。
6.操作步骤
6.1 PT 检测步骤
6.1.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，等待机器预温完成，显示测试界面。6.1.2 设置测试项目：按”select“键进入主菜单，在主菜单上按“1”显示通道选择画面。输入选择测试项目的通道号“1-4”选择“1”，再按“ENTER”键，按”select“键返回测试界面。
6.1.3 将PT应用试剂根据测试样本多少取适量于试剂预温位预热至37摄氏度10分钟。
6.1.4 加血浆50ul于空比色杯内（样本应加入杯子底部，不能有气泡），置于测试通道。6.1.5当检测部LED绿灯亮时，按“ch1/start”键，屏幕以倒计时的方法显示试剂加入时间，检测部LED红灯闪亮；试剂添加时间一到，报时鸣声响起，检测部的LED绿灯闪亮，此时加样时间有10秒钟，用加样枪吸取100ulPT工作试剂加入比色杯中，当加样器按到底后迅速盖上吸液管架，仪器自动开始检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.6质控品、正常对照血浆：操作方法同样品。
6.1.7关机：取出比色杯，盖上吸液管架即可直接关机。
6.2 APTT检测步骤
6.2.1打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，等待机器预温完成，显示测试界面。
6.2.2 设置测试项目：方法同6.1.2
6.2.3将APTT应用试剂根据测试样本多少取适量于试剂预温位预热至37摄氏度10分钟；加血浆50ul于空比色杯内，置于测试通道或预温位预温3分钟。
6.1.4当检测部LED绿灯亮时，按“ch2/start”键，屏幕以倒计时的方法显示试剂加入时间，检测部LED红灯闪亮；试剂添加时间一到，报时鸣声响起，检测部的LED绿灯闪亮，此时加样时间有10秒钟，用加样枪吸取50ulAPPT工作试剂加入比色杯中，当加样器按到底后迅速盖上吸液管架，仪器继续倒计时显示试剂加入时间，报时鸣声响起，用加样枪加入50ul0.02 5mol/l的cacl2,盖上吸液管架，仪器自动开始检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.6质控品、正常对照血浆：操作方法同样品。
6.1.6 关机：取出比色杯，盖上吸液管架即可直接关机。
6.3 TT检测步骤
6.3.1打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，等待机器预温完成，显示测试界面。
6.3.2 设置测试项目：方法同6.1.2
6.3.3将TT应用试剂根据测试样本多少取适量于试剂预温位预热至37摄氏度10分钟；加血浆50ul于空比色杯内，置于测试通道。
6.1.4当检测部LED绿灯亮时，按“ch4/start”键，屏幕以倒计时的方法显示试剂加入时间，
检测部LED红灯闪亮；试剂添加时间一到，报时鸣声响起，检测部的LED绿灯闪亮，此时加样时间有10秒钟，用加样枪吸取100ulTT工作试剂加入比色杯中，当加样器按到底后迅速盖上吸液管架，仪器自动开始检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.5 质控品：操作方法同样品。
6.1.6关机：取出比色杯，盖上吸液管架即可直接关机。
6.3 FIB检测步骤
6.3.1打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，等待机器预温完成，显示测试界面。
6.3.2 设置测试项目：方法同6.1.2
6.3.3将FIB应用试剂根据测试样本多少取适量于试剂预温位预热至37摄氏度10分钟；加F IB缓冲液90ul+血浆10ul于空比色杯内，轻轻混均，不要起泡，置于测试通道。
6.1.4当检测部LED绿灯亮时，按“ch3/start”键，屏幕以倒计时的方法显示试剂加入时间，检测部LED红灯闪亮；试剂添加时间一到，报时鸣声响起，检测部的LED绿灯闪亮，此时加样时间有10秒钟，用加样枪吸取50ulFIB工作试剂加入比色杯中，当加样器按到底后迅速盖上吸液管架，仪器自动开始检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.5 质控品：操作方法同样品。
6.1.6关机：取出比色杯，盖上吸液管架即可直接关机。
7.质量控制
7.1质控品跟随常规标本一起测定，意即质控品必须与患者标本在同样条件下进行检测，建立质控图信息后，以判断结果是否在控。
7.2为了使检测结果在同一实验室的不同时期具有可比性，必须使用标准品或参比血浆进行室内质量控制。
8.参考区间
PT：10-14秒。待检者的测定值较正常对照延长3秒以上有临床意义。
APTT：28-44秒。待检者的测定值较正常对照延长10秒以上有临床意义。
TT：14-21秒
FIB：2-4g/l
9.注意事项
9.1血栓与止血实验的质量控制和标准化是实验结果可靠性、可比性的基本保证。其实验项目繁多，现阶段大部分是应用形成可见的纤维蛋白丝为终点。这种方法所采用的均为生物性材料，其凝血活性或抗凝、纤溶活性可随时间、温度、生理变化、个体差异而变化，故其质量控制更为重要。
9.2 要重视检测前的质量控制，包括合理的标本采集和处理；试剂的选择；器材、仪器、质控品、正常对照品的质量保证。
9.3 实验操作时应警惕许多实验误差来源于技术错误。在实验技术、试剂、温度及PH值上微小的变化都有导致试验结果明显的变化。例如，在一期法PT测定时孵育时间和温度应严格控制。血浆绝不能在37℃放置超过10分钟；凝血活酶放置时间也不能超过说明书所规定的期限。
血浆凝固主要是酶催化的反应。PH环境和溶液离子强度在实验过程中要严格控制，反应混合物PH必须处于7.2-7.4之间.
每次APTT实验时,活化部分凝血活酶试剂和血浆混合物的孵育时间决定了APTT试验中接触活化的量,所以其混合的时间和技术对检测结果影响很大.
9.4 实验前应检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。红细胞膜含有磷脂，溶血标本具有与血小板第3因子（磷脂）相似的凝血活性，能缩短溶血血浆的APTT值。
9.5 标本中如出现凝块，无论多小的凝块均会影响实验结果。
9.6 APTT、TP需去血小板血浆，一般3000r/min离心10min后分离血浆。
9.6 试剂应在预热槽中预热10分钟以上，但也要注意试剂的老化，不能使用超过20分钟的APTT和超过40分钟的其它试剂。
10.临床意义：
10.1 PT检测的临床意义
10.1.1 PT延长
a.外源凝血系统的因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原减低，如先天性某因子缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症，但均很少见，获得性的见于DIC、原发性纤溶、维生素K缺乏症、肝脏疾病等。
b.血循环中抗凝物质增加，如肝素或FDP增多等。
10.1.2 PT缩短
口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。
10.1.3 用于香豆素类等口服抗凝剂的监控
10.1.3.1一般认为以维持PT值在参考值的2倍左右（1.3—2.5倍）即25—30s，或PT R为1.3—1.5（最大不超过2）为宜。
10.1.3.2 PT%应控制在40%以上，减低到40%有出血倾向。
10.1.3.3不同情况下口服抗凝药治疗的最佳抗凝强度时INR的范围：
a.术前两周或术中口服抗凝药，INR为1.5—3.0；
b.原发或继发静脉血栓的预防，INR为2—3；
c.活动性静脉血栓、肺梗塞、复发性静脉血栓的预防，INR为2—4；
d.动脉血栓栓塞的预防，心脏换瓣术后，INR为3—4.5。
10.2 APTT检测的临床意义
10.2.1.受检者的测定值较正常对照延长超过10s以上才有病理意义。
10.2.2 对内源凝血途径因子（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ）缺乏较CT敏感（血小板异常不影响APTT）能检出Ⅷ：C小于25%的轻型血友病。对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感，故APTT延长的最常见疾病为血友病。此时可进一步做纠正试验，即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清（试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验），再做APTT，如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正，则为因子Ⅷ缺乏；如吸附血浆不能纠正，其余两者都能纠正，则为因子Ⅸ缺乏；如三者都不能纠正，则为病理性循环抗凝物质。
10.2.3 在使用肝素治疗时，多用APTT监测药物用量，一般以维持结果为基础值的2倍左右（1.5—3.0倍）为宜（75—100s之间）。但应事先检测所用部分凝血活酶试剂是否对肝素敏感，即向正常人血浆中加入不同量肝素（从每毫升0.1—1.0IU），看其APTT是否相应延长。
10.3 TT检测的临床意义
10.3.1 TT延长：患者血循环中AT-Ⅲ活性明显增高，肝素增多或类肝素抗凝物质存在，如SLE、肝病肾病等，异常纤维蛋白原血症，低（无）纤维蛋白原血症，FDP增多（如DIC），异常球蛋白增多（如MM）等。
10.3.2 TT缩短：常见于血样本有微小凝块或钙离子存在时。
10.4 FIB检测的临床意义
10.4.1 FIB减少见于：
先天性低（无）纤维蛋白原血症、严重肝脏疾病、原发性纤维蛋白溶解、DIC、异常纤维蛋白原血症、新生儿及早产儿、某些产科意外、恶性肿瘤等。
10.4.2 FIB增高见于：
各种血栓前状态及血栓栓塞病、月经期及妊娠期、糖尿病、动脉硬化、结缔组织病、手术后、休克、癌肿、骨髓瘤、放射治疗后等。
11.参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第4版）.2015
凝血四项内容及正常值
凝血四项内容及正常值(总 7页) 本页仅作为文档页封面，使用时可以删除 This document is for reference only-rar21year.March
凝血四项内容与正常值及意义 乐安中心卫生院钟恒 一.凝血因子测定： 1活化部分凝血活酶时间（APTT）：秒数:25-37，需与正常对照比较超过10s以上异常 2凝血酶原时间（PT）：秒数:11-14 ，需与正常对照超过3s以上异常。活动度:80-120% INR:0.8-1.2 3纤维蛋白原（FIB）：2-4 g/L 二.纤维蛋白溶解检测： 4凝血酶时间（TT）：秒数:12-16 需与正常对照超过3s以上异常 各项意义： PT：主要反映外源性凝血系统状况，其中INR常用于监测口服抗凝剂。延长见于先天性凝血因子ⅡⅤⅦⅩ缺乏及纤维蛋白原缺乏，后天凝血因子缺乏主要见于维生素K 缺乏、严重的肝脏疾病、纤溶亢进、DIC、口服抗凝剂等；缩短见于血液高凝状态和血栓性疾病等； APTT：主要反映内源性凝血系统状况，常用于监测肝素用量。增高见于血浆因子Ⅷ、因子Ⅸ和因子XI水平减低：如血友病A、血友病B及因子XI缺乏症；降低见于高凝状态：如促凝物质进入血液及凝血因子的活性增高等情况； TT：主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间。增高见于DIC纤溶亢进期，低（无）纤维蛋白原血症，异常血红蛋白血症，雪中纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）增高；降低无临床意义。 2
FIB：主要反映纤维蛋白原的含量。增高见于急性心肌梗死减低见于DIC消耗性低凝溶解期、原发性纤溶症、重症肝炎、肝硬化； 凝血酶原时间（PT）：秒数:11-14 ，需与正常对照超过3s以上异常。活动度:80-120% INR:0.8-1.2 PT:凝血酶原时间是检查外源性凝血因子的一种过筛试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在，其中INR用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标活化部分凝血活酶时间（APTT）：秒数:25-37，需与正常对照比较超过10s以上异常 APTT 检查内源性凝血因子的一/种过筛试验，是用来证实先天性或获得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷或是否存在它们相应的抑制物，同时，APTT也可用来凝血因子Ⅻ、激肽释放酶原和高分子量激肽释放酶原是否缺乏，由于APTT的高度敏感性和肝素的作用途径主要是内源性凝血途径，所以APTT 成为监测普通肝素首选指标。 凝血酶时间（TT）：秒数:12-16 需与正常对照超过 3s以上异常 TT凝血酶时间测定凝血酶时间延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在、如SLE、肝病、肾病等，低（无）纤维蛋白血症、异常纤维蛋白原血症、纤维蛋白原降解产物（FDP）增多、如DIC、原发性纤溶等。 纤维蛋白原（FIB）：2-4 g/L FIB纤维蛋白原纤维蛋白原即凝血因子Ⅰ，是凝血过程中的主要蛋白质，FIB 增高除了生理情况下的应激反应和妊娠晚期外，主要出现在急性感染、烧伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、糖尿病、妊 3
凝血四项操作规程
凝血四项操作规程 1.目的 规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。 2.实验原理 凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得血液凝固时间。 3.标本要求 3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。 3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。 3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。 4.材料 4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂，并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。
静脉采血操作技术规范评分表流程图
静脉采血技术操作规范 一、操作目的为患者采集、留取静脉血标本 二、准备 1、个人准备：着装整齐，洗手，戴口罩 2、用物准备：治疗盘内：治疗盘、碘伏、棉签、止血带、采血针1-2个、真空采血管，污物杯、输液贴、一次性治疗巾，试管架、手消毒凝胶、锐器盒 3、环境准备：洁净，宽敞，光线适宜 三、评估要点 1、询问、了解患者是否按要求进行采血前准备。 2、是否空腹。 3、病情、一时状态、合作程度。 4、局部皮肤及血管情况。 四、操作程序 1、核对医嘱及试管条形码。 2、核对患者姓名、床号、住院号（呼唤患者、核对床头卡及手腕带），评估患者病情、血管情况，向患者解释目的和注意问题、询问患者是否进食 3、一看：初步选择采血静脉，在穿刺部位肢体下放一次性治疗巾、止血带 二扎：在穿刺部位上方（近心端）约6cm处扎止血带，末端向上，嘱患者握拳 三摸：以手指探明所选静脉的走向和深浅 4、以穿刺点为中心常规消毒，待干，消毒直径范围大于5cm 5、再次核对患者检验时间、项目及标本容器是否一致。 6、左手拇指绷紧静脉下端皮肤，使其固定。一手持采血针，针头斜面向上，与皮肤成15~30角自静脉上方或者侧方刺入皮下，再沿静脉走向滑行入静脉，见回血，再顺静脉进针少许，用胶贴固定蝶翼，采血针另一端与真空管相连，当采集到需要量时反折针头，换采血管，采血顺序：血培养--不含添加剂的采血管--凝血标本管--其他标本管 7、松止血带，嘱患者松拳，用干棉签轻压穿刺点上方快速拔出针头，指导患者或家属正确按压。 8、再次核对标本标签条形码内容、床号姓名，撤去治疗巾。 9、协助患者取舒适卧位，予相关知识宣教，整理床单位，处理生物垃圾，洗手。 五、注意事项 1、核对：患者身份：床号、姓名、电子条形码、腕带 2评估：患者病情、意识及合作程度，需空腹采血者了解空腹时间、血管状况和肢体活动度等 3、采集：按无菌操作原则穿刺，见回血后按顺序依次插入采试管中（血培养—红管—蓝管—绿管—紫管—黑管） 4、操作完毕宣教：穿刺部位压迫力度、时间以不出血为宣，禁止局部按摩 5、一般在早晨空腹安静状态下或禁食6h以上采集，输入脂肪乳时应等待8h后采集，否则为脂血 6、禁止从输液测肢体采血，避免用力挤压或指腹按摩取血 7、同时采集多种标本时，根据采血管的要求依次采集 8、尽可能缩短止血带的结扎时间 9、采集时血液速勿过快或过慢，以免引起溶血；血液沿着试管壁流入 10、标本避免过度震荡及禁止旋转在高温、低温的环境中以免溶血 11、注意不同体位采血，检验的结果不同，如：立位比卧位血浆总量少12% 12、及时送检 13如遇多项检验者，应捆绑送检
凝血四项检测应注意的问题
凝血四项检测应注意的问题 血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)简称凝血四项，是临床常用的血栓与止血筛查试验，它的准确检测对出血性或血栓性疾病初步诊断、指导临床用药、患者术前准备等起到非常重要的作用。但在工作中发现有一些因素常影响到结果的准确性，现总结如下。 1 标本因素 1.1 抗凝剂的选择及其与血液的比例抗凝剂为109 mmol/L的枸橼酸钠，因枸橼酸钠对凝血因子Ⅴ、Ⅷ有保护作用。枸橼酸钠0.2 ml，血液1.8 ml，按1：9比例，当HCT＞55%或HCT＜25%时，应调整抗凝剂用量：抗凝剂量(ml)=(100%-HCT)×血量(ml)×0.001 85［1］。据报道血液量增加0.05 ml可使凝固时间缩短，减少0.5 ml可使凝固时间延长。 1.2 标本采集采血前患者应处于空腹，平静、放松状态，因剧烈运动和情绪激动都会引起因子活性及血小板数量上升，凝血和纤溶活性增强，影响检测结果。采血时止血带不应扎得太紧、时间过长，采血针头不能太细，要一针见血，以防穿刺损伤或组织液混入血液，促使凝血酶形成，加速血液凝固，影响结果。采血后立即将血液和抗凝剂充分混匀，但不要用力过大，以免标本出现凝集或溶血，凝血因子消耗或激活，影响结果。绝对禁止从输液管或输液侧手臂取血，以防药物影响及血液稀释。 1.3 标本的存放与运送标本在正确采集并准确核对后(切忌张冠李戴)，需在室温下立即送检，低温会损伤血小板，活化部分凝血因子，使PT、APTT结果缩短。血液离体后即开始变化，随存放方式和时间的不同，凝血因子逐渐消耗而导致检验结果不同［3］。 2 仪器与试剂 我们使用的是法国STAGO公司生产的全自动血凝仪，仪器状态的好坏直接影响实验的结果，所以环境条件一定要适合仪器的要求，做好仪器的保养与维护，确保仪器的正常运行，不要在仪器附近接打手机。试剂应选择匹配试剂，稀释试剂要用去离子蒸馏水。试剂应放4℃保存，复溶的试剂需新鲜配制，否则复溶时间越长对结果的准确性影响越大。试剂要在有效期内使用，所用计量器具要准确无误，标本经离心机离心后不应升温。 3 实验人员因素 操作人员的能力及责任心对于结果的准确性起至关重要的作用。操作人员必须经过培训、熟悉仪器性能、能处理常见故障方可上机。同时操作人员要具备一定的临床知识，了解影响凝血4项的常见疾病和药物，以免不必要的复查，浪费试剂和时间。操作人员要加强与患者和与临床的沟通，对于一些与临床不符、难
凝血四项的临床意义
一、凝血酶原时间（prothrombin time，PT） 1、正常参考值：12-16秒。 2、临床应用：凝血酶原时间是检查外源性凝血因子的一种过筛试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在，同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标。据报道，在口服抗凝剂的过程中，维持PT在正常对照的1-2倍最为适宜。 PT异常意义： 1 延长：先天性因子Ⅱ Ⅴ Ⅶ Ⅹ缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝脏疾病；血循环中有抗凝物质如口服抗凝剂肝素和FDP以及抗因子Ⅱ Ⅴ Ⅶ Ⅹ的抗体。 2缩短：先天性因子Ⅴ增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。3口服抗凝剂的监测：凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常用指标，在ISI介于时,凝血酶原时间比值在 INR在用药为合理和安全.世界卫生组织（WHO）规定应用口服抗凝剂时INR的允许范围：非髋部外科手术前髋部外科手术前深静脉血栓形成治疗肺梗塞预防动脉血栓 形成人工瓣膜手术。 凝血酶原时间；报告方式；即报告被检标本的凝血酶原时间（秒）也同时报告正常对照的结果（秒）并用凝血酶原比值报告之待检血浆的凝血酶原时间 凝血酶原时间比值= 正常血浆的凝血酶原时间 二、国际标准化比值（international normalized ratio，INR） 1、正常参考值：。 2、临床应用：INR是病人凝血酶原时间与正常对照凝血酶原时间之比的ISI 次方（ISI：国际敏感度指数，试剂出厂时由厂家表定的）。同一份在不同的实验室，用不同的ISI试剂检测，PT值结果差异很大，但测的INR值相同，这样，使测得结果具有可比性。目前国际上强调用INR来监测口服抗凝剂的用量，是一种较好的表达方式。 世界卫生组织（WHO）规定应用口服抗凝剂时INR的允许范围如下：临床适应症 INR允许范围预防静脉血栓形成非髋部外科手
凝血四项内容及正常值
凝血四项内容与正常值及意义 乐安中心卫生院钟恒 一.凝血因子测定： 1活化部分凝血活酶时间（APTT）：秒数:25-37，需与正常对照比较超过10s以上异常 2凝血酶原时间（PT）：秒数:11-14 ，需与正常对照超过3s以上异常。活动度:80-120% INR:0.8-1.2 3纤维蛋白原（FIB）：2-4 g/L 二.纤维蛋白溶解检测： 4凝血酶时间（TT）：秒数:12-16 需与正常对照超过3s以上异常 各项意义： PT：主要反映外源性凝血系统状况，其中INR常用于监测口服抗凝剂。延长见于先天性凝血因子ⅡⅤⅦⅩ缺乏及纤维蛋白原缺乏，后天凝血因子缺乏主要见于维生素K 缺乏、严重的肝脏疾病、纤溶亢进、DIC、口服抗凝剂等；缩短见于血液高凝状态和血栓性疾病等； APTT：主要反映内源性凝血系统状况，常用于监测肝素用量。增高见于血浆因子Ⅷ、因子Ⅸ和因子XI水平减低：如血友病A、血友病B及因子XI缺乏症；降低见于高凝状态：如促凝物质进入血液及凝血因子的活性增高等情况； TT：主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间。增高见于DIC纤溶亢进期，低（无）纤维蛋白原血症，异常血红蛋白血症，雪中纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）增高；降低无临床意义。
FIB：主要反映纤维蛋白原的含量。增高见于急性心肌梗死减低见于DIC消耗性低凝溶解期、原发性纤溶症、重症肝炎、肝硬化； 凝血酶原时间（PT）：秒数:11-14 ，需与正常对照超过3s以上异常。活动度:80-120% INR:0.8-1.2 PT:凝血酶原时间是检查外源性凝血因子的一种过筛试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在，其中INR用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标活化部分凝血活酶时间（APTT）：秒数:25-37，需与正常对照比较超过10s以上异常 APTT 检查内源性凝血因子的一/种过筛试验，是用来证实先天性或获得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷或是否存在它们相应的抑制物，同时，APTT也可用来凝血因子Ⅻ、激肽释放酶原和高分子量激肽释放酶原是否缺乏，由于APTT的高度敏感性和肝素的作用途径主要是内源性凝血途径，所以APTT成为监测普通肝素首选指标。 凝血酶时间（TT）：秒数:12-16 需与正常对照超过3s 以上异常 TT凝血酶时间测定凝血酶时间延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在、如SLE、肝病、肾病等，低（无）纤维蛋白血症、异常纤维蛋白原血症、纤维蛋白原降解产物（FDP）增多、如DIC、原发性纤溶等。 纤维蛋白原（FIB）：2-4 g/L FIB纤维蛋白原纤维蛋白原即凝血因子Ⅰ，是凝血过程中的主要蛋白质，FIB 增高除了生理情况下的应激反应和妊娠晚期外，主要出现在急性感染、烧伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、糖尿病、妊高症及急
静脉血标本采集操作规程
静脉血标本采集操作规程 1. 目的 抽取静脉血标本以做各项检验。 2. 适用范围 适用于本科做生化、免疫、血常规等项目所需血液标本的采集。 3. 物品准备：止血带、一次性垫巾、无菌棉签、复合碘消毒液、一 次性采血针、负压真空管（数量和种类根据要求选取后检查灭菌日期、有效期及有无漏气）、试管架、编号笔、口罩。 4. 检验申请单填写要求： 4.1 检验申请单用钢笔填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。 4.2 填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。 5. 操作步骤： 5.1 查对检验申请单、受检者姓名及是否已按医嘱准备，向受检者解释操作目的，以取得合作。在采血管上贴好与检验申请单相对应的标签。 5.2 选择血管，常用肘窝静脉、肘正中静脉、前臂内侧静脉，小儿可采用颈外静脉、大隐静脉。 5.3 在穿刺部位肢体下放一次性垫巾、止血带。 5.4 用复合碘棉签消毒穿刺部位。
5.5 在静脉穿刺部位上方4-7厘米处扎止血带，嘱受检者握紧拳头，使静脉充盈显露。 5.6 穿刺:推荐使用真空采血技术。摘掉静脉穿刺针上的保护套，进行静脉穿刺，穿刺成功后，用贴好标签的负压真空管采集静脉血，松开止血带，受检者松拳，用棉签压住进针处，拔出针头，嘱采血对象按压2-3分钟。 5.7 为受检者整理衣袖。 5.8 采血完毕后，产生的医疗垃圾按规定分类处理。 6. 注意事项 6.1 采血前应核对好姓名和检验项目，明确标本要求。 6.2抗凝管收集血标本后，立即将试管轻轻颠倒5～6次，使血液与抗凝剂充分混匀。 6.3 一般生化、免疫检验用干燥非抗凝管收集标本，采样量3-5ml。若检验项目较多，应适当增加采样量。 6.4 血常规检验用EDTAK2抗凝管收集标本，采样量0.5-1毫升。 6.5 凝血四项、血红蛋白电泳、3P试验用枸橼酸钠（0.2ml）抗凝管收集标本，采样量必须准确，为1.8ml。血沉用枸橼酸钠0.4ml抗凝，抽血1.6ml。 6.6 高铁血红蛋白还原试验（G6PD）以枸橼酸钠0.2ml抗凝，另加入葡萄糖20mg，抽静脉血1.8ml，混匀。 6.7 糖化血红蛋白测定需用肝素管抗凝。 6.8 血液粘度测定需同时抽取血常规、血沉和肝素抗凝血（5ml）三份样本。 6.9 餐后，血糖、血脂可增加而影响测定结果，故一般应空腹抽血。有些食物成分：高蛋白、高脂及饮食可引起血中蛋白、血脂、尿酸增高；香蕉、咖啡等可引起尿中儿茶酚胺代谢产物的测定等。 6.10 药物影响：如异菸肼、庆大毒素、氨芐青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因
凝血四项
凝血四项 1、凝血酶原时间（PT）参考范围：11~14S PT即加入组织凝血活酶和钙离子使血浆凝固的时间，主要用于检测外源性凝血系统有无障碍。 延长：常见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症，低或无纤维蛋白原血症，DIC，FDP增多，恶性贫血，原发性纤溶症，维生素K缺乏，肝实质性损伤时损害凝血因子与凝血酶原的合成，口服抗凝剂如肝素等。 缩短：见于先天性凝血因子Ⅴ增多，口服避孕药，高凝状态，血栓性疾病等。2、凝血酶时间（TT）参考范围：16~18S TT在凝血酶作用下，血浆的纤维蛋白原转变成纤维蛋白的时间。 延长：常见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在，DIC，FDP增多，SLE，肝病，肾病，低或无纤维蛋白原血症，异常纤维蛋白原血症等疾病。 缩短：标本可能有微小凝块或有钙离子存在。 3、活化部分凝血活酶时间（APTT）参考范围：30~45S APTT为脑磷脂具有部分凝血活酶的作用，能加速因子X的活化，使凝血酶原转变为凝血酶，促使血液凝固的时间。 APTT延长：可见于先天性凝血因子缺乏，如甲、乙、丙型血友病；后天性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、血液循环中的抗凝物质增加等。缩短：见于高凝状态，血栓性疾病，Ⅴ、Ⅷ、血小板增多，幼儿，DIC高凝期，标本离心不足，标本混有血小板等。 4、纤维蛋白原（FIB、Fib或Fbg）参考范围：2~4g/L FIB即凝血因子I，是血液中含量最高的凝血因子，既是凝血酶作用的底物又是高浓度纤溶酶的靶物质，在凝血系统和纤溶系统中同时发挥重要作用，FIB作为底物，在凝血酶的作用下转变为纤维蛋白。 含量增高：可见于糖尿病、糖尿病酸中毒、动脉粥样硬化、急性传染病、急性肾炎尿毒症、骨髓瘤、休克、外科手术后、轻度肝炎等。 含量减低：可见于DIC、原发性纤溶症、重症肝炎、肝硬化等。 ------------------------------------------------------------- 影响因素： （1）、抗凝剂：草酸钠、EDTA、肝素不适用。 （2）、黄疸、脂血、重度溶血和冰冻血浆影响结果。 （3）、使用纤溶药物如：双香豆素、链激酶、尿酶等。 （4）、超过治疗剂量的肝素可使凝固延长。 （5）、FDP增加使凝固延长。 （6）、某些药物如避孕药、雌激素有影响。 （7）、标本采集和处理不当有影响。 （8）、妊娠和急性炎症会影响某些测定结果。 乙肝五项检查 求助编辑百科名片
检验项目标准操作规程(SOP)
检验项目标准操作规程（SOP -1 -检验标本的米集 一、标本的正确采集 标本米集必须符合 2个条件，即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情，避免干扰因素的存在。 二、标本的贮存 标本采集后尽快送至实验室，若不能及时送检，已采集的标本要按检验规定的贮存条 件，如室温、冰浴、温浴或防腐贮存，将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中， 避免振摇，以免标本遗洒或溶血影响检测结果。 三、标本的运送 必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结 果一致。 四、标本的签收 临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验 室人员接收临床标 本，均应按标准化要求进行，做到认真核对，包括标本来源、标本属
性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等，标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。 五、标本的处理 1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理，否则会影响检测结果的准确 性。 2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆，血清与血块簪时间接触可发生变化。 3、实验室接收标本后处理应注意事项： （1）、时间：实验室接收标本后应尽快予以分类和离心。①、促凝 标本应尽早处理，可在米血5-15分钟后离心；②抗凝标本可米血后立即离 心；③非抗凝（无促凝）标本采血30-60分钟后离心； ④抗凝全血标本（全血细胞分析、ESF等）不需要离心。 （2）、温度：一般标本为室温（最好是22-25 C）放置；冷藏标本（对温度依赖性分析物）应保持在2-8 C直到温度控制离心。 （3）、采血管放置：应管口（盖管塞）向上，保持垂直立位放置。 （4）、采血管必须封口：管塞移去后会使血PH改变，影响检测结果, 封口可以减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。 六、分析前的可变因素 1、生物因素：可引起所检测物质在体内的变化，此种变化与检测方法无 关，分为可变的和固定的生物因素。 2、干扰因素：在收集和分析标本过程中，干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符。 七、标本采集的基本原则
纤维支气管镜操作流程(新)
呼吸科纤维支气管镜操作流程
气管镜室工作检查人员须知 一、严格执行无菌操作规程。 二、气管镜室内勿大声喧哗，手机置于静音状态。 三、检查操作时勿穿隔离衣外出。 四、检查完毕后物归原处（拖鞋等）和按要求将医用、生活垃圾分 类放置。 五、气管镜操作时内禁止会客、饮食、摆放与气管镜检查无关的物 品。
气管镜室医护技工人员岗位职责 1、在科主任的领导下，做好本管理室的各项工作，严格 执行岗位责任制，严格执行各项仪器操作规程。 2、遵守院规、院纪、不迟到、不早退，有事、有病需请假， 得到允许后方可离开。 3、做好气管镜检查病人的预约工作，做好病人的术前解释， 术中配合，术后指导工作，审核患者知情告知书签字情况。 4、严格核查气管镜病人的标本，及时送检、及时分发气管 镜报告并做好登记工作。 5、严格执行操作室的清洁、消毒制度，预防院内感染，严 格执行医疗废物管理条例制度。 6、严格执行气管镜消毒隔离制度实施细则，严格执行气管 镜定期细菌培养与登记制度。 7、做好突发事件、不良事件、院内感染的上报登记工作。 8、保证抢救仪器、物品、药品的完好和备用状态（登记、 更换、补充、整理）。 9、做好仪器设备使用、维修、保养记录（气管镜测漏和登 记）。 10、严格执行呼吸内镜操作准入制度。
气管镜室消毒隔离管理制度 1、病人诊疗室、清洗消毒室、内镜储藏柜、清洗消毒室应保持良 好的通风，诊疗室配空气消毒机，确保室内空气清洁。 2、保持各室的清洁，诊疗室、清洗消毒室操作结束后，吸引器、 吸引管、用含氟消毒剂清洗消毒。 3、从事内镜诊疗时，医护人员需戴好口罩和帽子。 4、工作人员清洗和消毒内镜时，应穿戴必要的防护用品，包括工 作服、口罩、帽子、手套防护眼罩等。 5、活检钳必须一人一用一消毒，供应室高压灭菌。 6、每日诊疗工作开始前，必须对当日拟定使用的消毒内镜进行再 次消毒，消毒时间不少于5分钟，冲洗、干燥后，方可用于病 人诊疗。 7、使用后的内镜及附件应按照《内镜清洗消毒技术操作规范》的 有关隔离要求（水洗—酶洗—清洗—消毒火灭菌—冲洗）。禁止 使用非流动水对内镜进行清洗。内镜及附件的清洗、消毒时间 应使用计时器控制。 8、使用后的气管镜采用邻苯二甲醛浸泡，浸泡时间不少于5分钟； 结核杆菌、其他分支杆菌的的书感染患者使用后的内镜浸泡时 间不少于15分钟，当日不再继续的内镜采用邻苯二甲醛浸泡消 毒5分钟，浸泡消毒后的气管镜用灭菌蒸馏水冲洗。 9、气管镜室应当做好内镜清洗消毒的登记工作（包括患者姓名、 内镜编号、清洗时间、消毒时间、操作者姓名）。
医院检验科检验技术操作规程
检验技术操作规程 目录 一、全自动血液细胞分析仪操作规程-------------------1 二、尿液分析仪使用规程-----------------------------4 三、自动凝血仪操作规程-----------------------------6 四、半自动生化分析仪操作规程-----------------------8 五、血常规检验操作规程-----------------------------9 六、尿常规检验操作规程----------------------------11 七、肝功能检验操作规程----------------------------12 八、肾功能检验操作规程----------------------------14 九、血脂检验操作规程------------------------------18 十、血液葡萄糖测定技术操作规程--------------------24 十一、凝血四项检验操作规程------------------------26 十二、AB0血型正反血型鉴定技术操作规程-------------28
一、全自动血液细胞分析仪操作规程 1.样品分析前准备 1.开机前的检查准备 2．在开启分析仪电源之前操作者须按以下要求进行检查 3.释液清洗液溶血素是否充足有无过期试剂管路是否弯折连接是否可靠 4.电源线是否正确连接 5.废液桶是否清空 6.UPS电是否足够打印纸安装是否正确是否足够 7.确保键盘正确连接到键盘接口上 8.打开分析仪后面的电源开关电源指示灯亮屏幕上显示Initializing 9.分析仪进行初始化整个初始化过程持续约4～7分钟 10.初始化过程结束后系统自动进入计数界面 2.动物类型选择 1.按[菜单]键移动光标选择动物按[确认]进入动物界面
D-D二聚体测定标准操作程序
D-二聚体测定 （分析仪器法） 1实验原理：免疫比浊法 当混合标本中含有D-二聚体时，聚苯乙烯颗粒包被到单克隆抗体（DD5），与交联纤维蛋白降解产物（D-二聚体）的交联区域结合。交联区域呈立体结构，有两个单克隆抗体表位。总之，一个单克隆抗体就能触发凝集反应，随后检测浊度的增加。仪器在575nm处通过对浊度改变的监测，将吸光度转换成浓度值，由此获得样本中D-二聚体的量。 2标本采集 2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。 2.2 3.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。 3标本存放 1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）,只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。 4标本运输：低温条件下运输。 5标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。 6. 实验材料: 6.1 德国Dade Behring Marburg 公司D-Dimer PLUS乳胶试剂, 用4mlD-二聚体PLUS复溶液溶解一瓶 D二聚体PLUS试剂，室温（15℃~25℃）放置约5分钟，并不时混匀。将试剂放于仪器相应的试剂位置上。未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂2～8℃保存不超过2天，室温保存不超过5天。 6.2 D-Dimer PLUS加速剂：用5ml蒸馏水溶解，室温（15℃~25℃）放置约15分钟，并不时混匀。将 试剂放于仪器相应的试剂位置上。使用前，轻轻振荡试剂。未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂2～8℃保存不超过5天。 6.3D-Dimer PLUS复溶液：液体。用于溶解D-二聚体PLUS 乳胶试剂。未开封试剂2～8℃贮存到说明 书上有效期，开瓶后试剂2～8℃保存不超过12周。 6.4 Dade D-二聚体质控血浆I/II.用蒸镏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装。复溶后,室温保 存2小时,2～8℃4小时。 7. 仪器设备: 7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪 7.2 仪器厂家:日本Sysmex公司
凝血四项的临床意义
凝血四项的临床意义 一、凝血酶原时间（prothrombin time，PT） 1、正常参考值：12-16秒。 2、临床应用：凝血酶原时间是检查外源性凝血因子的一种过筛试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在，同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标。据报道，在口服抗凝剂的过程中，维持PT在正常对照的1-2倍最为适宜。 PT异常意义： 1 延长：先天性因子Ⅱ Ⅴ Ⅶ Ⅹ缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝脏疾病；血循环中有抗凝物质如口服抗凝剂肝素和FDP以及抗因子Ⅱ Ⅴ Ⅶ Ⅹ的抗体。 2缩短：先天性因子Ⅴ增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。3口服抗凝剂的监测：凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常用指标，在ISI介于2.2-2.6时,凝血酶原时间比值在1.5-2.0 INR在3.0-4.5用药为合理和安全.世界卫生组织（WHO）规定应用口服抗凝剂时INR 的允许范围：非髋部外科手术前1.5-2.5;髋部外科手术前2.0-3.0;深静脉血栓形成2.0-3.0;治疗肺梗塞2.0-4.0;预防动脉血栓形成3.0-4.0;人工瓣膜手术3.0-4.0。 凝血酶原时间；报告方式；即报告被检标本的凝血酶原时间（秒）也同时报告正常对照的结果（秒）并用凝血酶原比值报告之待检血浆的凝血酶原时间 凝血酶原时间比值= 正常血浆的凝血酶原时间 二、国际标准化比值（international normalized ratio，INR） 1、正常参考值：0.8-1.5。 2、临床应用：INR是病人凝血酶原时间与正常对照凝血酶原时间之比的ISI 次方（ISI：国际敏感度指数，试剂出厂时由厂家表定的）。同一份在不同的实验室，用不同的ISI试剂检测，PT值结果差异很
凝血四项分析的质量控制
凝血四项分析的质量控制 核心提示:【摘要】nbsp;nbsp; 目的：探讨影响凝血四项分析质量的主要因素。方法：采用Thromboscreennbsp;400C自动血液凝血分析仪测定。结果：样本量采集过多或过少，样本溶血，有凝块以及离心时间不足都将影响凝血四项结果的准确性。结论：样本的正确采集与检验人员的 作者：李华,顾胜芳,刘静作者单位：(遵义市人民医院,贵州遵义563000) 【摘要】目的：探讨影响凝血四项分析质量的主要因素。方法：采用Thromboscreen 400C自动血液凝血分析仪测定。结果：样本量采集过多或过少，样本溶血，有凝块以及离心时间不足都将影响凝血四项结果的准确性。结论：样本的正确采集与检验人员的规范操作是凝血四项检测结果准确性的保障。 【关键词】凝血四项；分析；质量控制 随着血栓与止血疾病有不断上升的趋势，血栓与止血的检验技术也有新的发展。凝血酶原时间(PT)，活化部分凝血活酶时间(APTT)，凝血酶时间(TT)，纤维蛋白原(FIB)测定是临床上常用的血栓与止血筛查试验，对患者的术前准备，出血性疾病或血栓性疾病的初步诊段和用药疗效的评估与监测有直接指导作用。因此，凝血四项分析的质量控制显得十分重要，无论是分析前患者的准备，样本的采集，运送，保存，试剂的选用，复溶，预温和储存，仪器的选择，保养，监控和校准，检验人员的熟悉程度，操作规范的执行情况，都将影响检测结果的准确性。为了提高血凝的检测质量，本文对我院2005年1月至2008年7月在检测中遇到的影响检测结果的因素作如下报道。 1 材料和方法 1.1 样本来源 2005年1月至2008年7月在我院就诊的门诊和住院病人，收集重新采集复查有问题样本63例。 1.2 仪器和试剂 Thromboscreen 400C自动血液凝血分析仪试剂为上海太阳生物技术公司生产。 1.3 样本采集与检测 使用真空静脉抽血管，抗凝剂为109 mmol/l枸橼酸钠0.2 ml，抽取静脉血1.8 ml，抗凝剂与血的比例应为1:9，3 000 r/min离心15 min，4 h内测定。 1.4 统计方法 采用两样本均数的t检验。 2 结果 2.1 样本采集量对检测结果的影响 (见表1) 无论是血量>1.8 ml，还是<1.8 ml，都将使PT，APTT结果延长。表1 样本采集量对检测结果的影响（略）注：与原检测结果比较P<0.01。
检验项目标准操作规程模板
检验项目标准操作 规程
检验标本的采集 一、标本的正确采集 标本采集必须符合2个条件, 即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情, 避免干扰因素的存在。 二、标本的贮存 标本采集后尽快送至实验室, 若不能及时送检, 已采集的标本要按检验规定的贮存条件, 如室温、冰浴、温浴或防腐贮存, 将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中, 避免振摇, 以免标本遗洒或溶血影响检测结果。 三、标本的运送 必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。 四、标本的签收 临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本, 均应按标准化要求进行, 做到认真核对, 包括标原来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等, 标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档。 五、标本的处理 1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理, 否则会影响检测
结果的准确性。 2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆, 血清与血块簪时间接触可发生变化。 3、实验室接收标本后处理应注意事项: ( 1) 、时间: 实验室接收标本后应尽快予以分类和离心。 ①、促凝标本应尽早处理, 可在采血5-15分钟后离心; ②抗凝标 本可采血后立即离心; ③非抗凝( 无促凝) 标本采血30-60分钟后离心; ④抗凝全血标本( 全血细胞分析、ESR等) 不需要离心。 ( 2) 、温度: 一般标本为室温( 最好是22-25℃) 放置; 冷藏标本( 对温度依赖性分析物) 应保持在2-8℃直到温度控制离心。 ( 3) 、采血管放置: 应管口( 盖管塞) 向上, 保持垂直立位放置。 ( 4) 、采血管必须封口: 管塞移去后会使血PH改变, 影响检测结果, 封口能够减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。 六、分析前的可变因素 1、生物因素: 可引起所检测物质在体内的变化, 此种变化与检测 方法无关, 分为可变的和固定的生物因素。 2、干扰因素: 在收集和分析标本过程中, 干扰因素常导致分析结 果与被测物真实浓度不符。 七、标本采集的基本原则 遵照医嘱采集各种标本均应按医嘱执行。凡对检验申请单有疑问, 应核实清楚后再执行。
凝血四项内容及正常值
凝血四项内容及正常值： 一.凝血因子测定： 1活化部分凝血活酶时间（APTT）：秒数:25-37，需与正常对照比较超过10s以上异常 2凝血酶原时间（PT）：秒数:11-14 ，需与正常对照超过3s 以上异常。活动度:80-120% INR: 3纤维蛋白原（FIB）：2-4 g/L 二.纤维蛋白溶解检测： 4凝血酶时间（TT）：秒数:12-16 需与正常对照超过3s以上异常 各项意义： PT：主要反映外源性凝血系统状况，其中INR常用于监测口服抗凝剂。延长见于先天性凝血因子ⅡⅤⅦⅩ缺乏及纤维蛋白原缺乏，后天凝血因子缺乏主要见于维生素K缺乏、严重的肝脏疾病、纤溶亢进、DIC、口服抗凝剂等；缩短见于血液高凝状态和血栓性疾病等； APTT：主要反映内源性凝血系统状况，常用于监测肝素用量。增高见于血浆因子Ⅷ、因子Ⅸ和因子XI水平减低：如血友病A、血友病B及因子XI缺乏症；降低见于高凝状态：如促凝物质进入血液及凝血因子的活性增高等情况； TT：主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间。增高见于DIC 纤溶亢进期，低（无）纤维蛋白原血症，异常血红蛋白血症，雪中纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）增高；降低无临床意义。 FIB：主要反映纤维蛋白原的含量。增高见于急性心肌梗死减低见于DIC消耗性低凝溶解期、原发性纤溶症、重症肝炎、肝硬化； 凝血酶原时间（PT）：秒数:11-14 ，需与正常对照超过3s 以上异常。活动度:80-120% INR:凝血酶原时间是检查外源性凝血
因子的一种过筛试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在，其中INR用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标活化部分凝血活酶时间（APTT）：秒数:25-37，需与正常对照比较超过10s以上异常 APTT 检查内源性凝血因子的一/种过筛试验，是用来证实先天性或获得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷或是否存在它们相应的抑制物，同时，APTT也可用来凝血因子Ⅻ、激肽释放酶原和高分子量激肽释放酶原是否缺乏，由于APTT的高度敏感性和肝素的作用途径主要是内源性凝血途径，所以APTT成为监测普通肝素首选指标。 凝血酶时间（TT）：秒数:12-16 需与正常对照超过3s以上异常 TT凝血酶时间测定凝血酶时间延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在、如SLE、肝病、肾病等，低（无）纤维蛋白血症、异常纤维蛋白原血症、纤维蛋白原降解产物（FDP）增多、如DIC、原发性纤溶等。 纤维蛋白原（FIB）：2-4 g/L FIB纤维蛋白原纤维蛋白原即凝血因子Ⅰ，是凝血过程中的主要蛋白质，FIB 增高除了生理情况下的应激反应和妊娠晚期外，主要出现在急性感染、烧伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、糖尿病、妊高症及急性肾炎、尿毒症等，FIB减少主要见于DIC、原发性先溶亢进、重症肝炎、矸硬化和溶栓治疗时。凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原三者同时检测已被临床用于筛查病人凝血机制是否正常，特别是心胸外科、骨科、妇产科等手术前检查病人的凝血功能尤为重要。 凝血四项的临床意义 一、凝血酶原时间（prothrombin time，PT） 1、正常参考值：12-16秒。 2、临床应用：凝血酶原时间是检查外源性凝血因子的一种过筛试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在，同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标。据报道，在口服抗凝剂的过程中，维持PT在正常对照的1-2倍最为适宜。
CA50凝血四项操作规程
Sysmex-CA50凝血四项操作规程 1.目的 规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。 2.实验原理 凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm 的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，求得血液凝固时间。3.标本要求 3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。 3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。 3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。 4.材料 4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂，并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。 4.2.正常对照血浆：正常对照血浆有商品供应，多为冻干品，也可自制，要求采集20份以上男女各半，年龄在18-25岁之间的健康个体，删除服药者，须在平静状态下采血，血液经抗凝离心后分离血浆。取等量的各份个体血浆进行混匀，然后分装小瓶，冻存于-80℃或冷冻干燥备用。 4.3.参比血浆或称标准血浆（质控血浆）：为了使检测结果在同一实验室的不同时期或不实验室间具有可比性，就要使用标准品。 5.仪器与试剂 5.1仪器：sysmex CA-50半自动化血凝分析仪。 5.2试剂：上海太阳生物技术有限公司。 5.3仪器安装后应对其主要性能参数进行评价，内容包括精密度、线性范围、可比性、抗干扰试验试验等。评价结果应在仪器说明书标示范围之内。 5.4 仪器在测定常规标本前应使用配套的校正物建立标准曲线，在更换新批号的试剂或仪器维修后，要重新建立标准曲线。无校正物的测定项目，可伤使用配套的定值质控物进行测定，测定结果应在定值质控物标示的允许范围内。 5.5 每台仪器上使用的凝血活酶试剂应有特定的ISI（国际敏感指数）值，这样才能使患者INR（国际标准化凝血酶原时间）比值的结果有可比性。
凝血四项临床意义
凝血酶时间 简称：TT (thrombin time)，是指在血浆中加入标准化的凝血酶原后血液凝固的时间。 目录 1正常范围 2检查介绍 3临床意义 4相关拓展 1正常范围 16～18s；超过正常对照3s以上为异常。 2检查介绍 凝血酶时间（TT）是检测凝血、抗凝及纤维蛋白溶解系统功能的一个简便试验。 3临床意义 凝血酶时间（TT）延长见于血浆纤维蛋白原减低或结构异常；临床应用肝素，或在肝病、肾病及系统性红斑狼疮时的肝素样抗凝物质增多；纤溶蛋白溶解系统功能亢进。 纤维蛋白原 纤维蛋白原一种由肝脏合成的具有凝血功能的蛋白质。纤维蛋白是在凝血过程中，凝血酶切除血纤蛋白原中的血纤肽A和B而生成的单体蛋白质。简单地说，就是一种与凝血有关的蛋白质，即凝血因子。 目录 1中文名称 2英文简写 3英文名称 4所属类别 5适应症 6用量用法 7注意事项 8规格 9临床意义 10测定方法 1中文名称纤维蛋白原 2英文简写FIB 3英文名称Human Fibrinogen 4所属类别促凝血药 5适应症用于先天性低纤维蛋白原血症、原发性和继发性纤溶引起的低纤缩蛋白原血症。 6用量用法静滴，60滴/分钟，视病情而定。 7注意事项偶有过敏反应。仅供静脉输注，速度宜慢，快速过量输入可发生血管内凝血。反复多次输注可产生抗纤维蛋白原抗体，少数人可形成血栓。可成为传播传染性肝炎的媒介。本品一旦被溶解后，应立即使用。溶解后应为澄清并略带乳光的溶液，允许有微量细小的蛋白颗粒存在，输注时应使用带有过滤网的输血器。血栓静脉炎、动脉血栓形成、心肌梗死、心功能不全者忌用。 8规格1．0/瓶，1．5/瓶。 纤维蛋白原（xianweidanbaiyuan）一种由肝脏合成的具有凝血功能的蛋白质，是纤维蛋白的前体。分子量340，000，半衰期4～6日。血浆中参考值2～4克/升。纤维蛋白原由α、β、γ三对不同多肽链所组成，多肽链间以二硫键相连。在凝血酶作用下，α链与β链分别释放出A肽与B肽，生成纤维蛋白单体。在此过程中，由于释放了酸性多肽，负电性降低，单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。但此时单体之间借氢键与疏水键相连，尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca+2与活化的ⅩⅢ因子作用下，单体之间以共价键相连，则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块，完成凝血过程。肝功能严重障碍或先天性缺乏，均可使血浆纤维蛋白原浓度下降，严重时可有出血倾向 进一步研究显示，纤维蛋白原与一种叫β3黏合素的受体结合，启动神经细胞上的表皮生长因子受体，后者会抑制神经轴突的生长。 这项研究显示脊髓受伤后血液的渗透会妨碍神经再生，揭示了血液与中枢神经系统损伤在分子水平上的联系。如果能找到方法阻止纤维蛋白原启动神经细胞受体，可望促进脊髓的修复，缓解脊髓受伤导致的瘫痪症状。纤维蛋白原发挥凝血功能时，结合的受体蛋白质与此不同，因此有关疗法并不会妨碍它发挥正常凝血作用。 9临床意义 1．纤维蛋白原与肝脏疾病 纤维蛋白原系肝脏合成,主要分布在血浆,亦存在于血小板和巨核细胞。正常血浆浓度为1.5～3.5g/L,因此当肝脏严重受损,使肝脏合成纤维蛋白原功能发生障碍,则血浆中纤维蛋白原浓度降低。纤维蛋白原是肝脏合成的一种血浆糖蛋白.可参与血栓及冠状动脉的形成和发展，是反映血栓状态一个指标，也是急性冠状动脉事