FPLC教程

AKTAbasic层析系统操作入门

为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。

一系统组件及系统功能介绍

1 系统组件

(1) 泵 Pump

系统泵：(system pump)双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。

上样泵：(sample pump)样品输送。

(2) 阀 Valve

七通阀：(INV-907)两个。

1. 上样阀(sample valve)，用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时

废液管 (waste) 切换；

2. 流向切换阀(flow direction valve)，用于层析柱流向切换

(downflow/upflow)。

(4) 其它组件

梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900) 。

2 系统功能

系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。

(1) 缓冲液pH及梯度配制

(a)梯度制备 (Gradient)

A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。

(2) 层析柱

柱顶连接进样（七通）阀1号口，柱后连接紫外流通池。

(3) 上样

上样阀上样：将样品储存在样品环(Sample loop)，再由阀门切换将样品带入层析柱；

系统泵上样：由系统泵将样品泵入层析柱。

(4) 收集 (选购)

收集器收集：设置收集体积(Frac size)，可自动按条件收集。

二开机程序

1 开启电脑；

2打开AKTAbasic电源；

3启动UNICORN软件，输入用户名( User name) 和密码(Password)，默认用户(default) 密码为 default，待AKTA自检结束后，在system control窗口中显示系统准备就绪（Instruments are ready) 。

三 UUNICORN 软件简介

Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：

Main: 1. 系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off)；

2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志

等；

3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；

4. 方法组编辑(MethodQueues)，将几个方法组合在一起，依次运行。

Method Editor: 1.方法编辑；

2.缓冲液配方设置（如配方修改或新增配方等）

System Control: 1. 系统控制，可以手动控制(Manual)或运行方法(Run Method)；

2. 系统设置，包括Alarms/Special/Monitors/Curves；

3. 运行监测，有四个窗口：Run data/Curves/Flow

scheme/Logbook。

Evaluation: 结果处理，如积分(intergrate)、移动(shift)、计算

(Subtract/Add/Multiply/Divide )、平滑(Smooth)、截取(Cut

Curve)、绘制(Creat Curve)、打印(Print)等

在每个窗口中均有专家建议(Adviser)和帮助信息(Help)。

四系统控制 (System Contral)

1 手动操作 (Manual)

1.1手动操作命令简介

(1) Pump 泵

Flow: 设定系统泵流速

Gradient: 梯度设定

PumpWashbasic: 系统泵清洗

SystemWash: 使用缓冲液配置功能时，清洗系统

(2) Flowpath 流路

InjectionValve: 上样阀切换

InjectionMark: 插入记号

(3) Alarm & Mon 报警、检测

WaveLength: 选择监测波长（1-3个）

AutoZeroUV: 紫外吸收校零

AveragingTime: 计算紫外吸收平均值的间隔时间

SetCondScale 0%: 输入0%B时的电导

SetCondScale 100%: 输入100%B时的电导

Alarm: 设置压力、紫外、电导、pH等报警限

Watch: 监测参数设置，配合方法编辑中的watch功能

(4) Frac 收集：（选购）

Peak_Frac_Parameters: 计峰收集参数设定

FracCollect_900: 分布收集每管体积

Frac_Stop_900: 停止分别收集

FeedTube: 换管收集

Peak_Fraction: 计峰收集每管体积

Peak_FracStop: 停止计峰收集

OutletFraction: 出口阀每风分段收集每段体积等设置

ResetFracNumber: 将当前分布收集的管号计为第一管

(5) Others 其它

Block: 调用程序块（只在方法运行时可用）

Next_breakpoint: 跳到下一程序块（只在方法运行时可用）

BufferPrepRecipe: 选择缓冲液配方

Set_Mark: 插入提示语

End_Timer: 设定结束运行时间

Record on/off: 手动运行时开始或结束数据记录

1.2 手动操作示例

(1) 梯度洗脱

设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。各命令无先后次序要求。

(2) 自动配制缓冲pH及梯度

必须最先设定缓冲液配方，然后设定其它参数如流速、pH、梯度等。

(3) 记录图谱

运行“Record on”命令，开始记录图谱，停止记录则运行“Record off”命令。

1.3运行监测（Monitoring a run)

在系统运行过程中，系统控制窗口同步显示系统检测的数据及各部件当前状态，共有四个窗口，显示不同内容，可同时打开：

Rundata: 运行参数

Curves: 数据曲线

Flow scheme: 系统流路图

Logbook: 运行记录

2 方法运行( Run Method)

启动方式

方法一：从主菜单(main)窗口方法(method)栏中，双击所选方法。

方法二：从系统(system control)窗口中，依次点击File、 Run，选择运行方法。

方法三：从系统(system control)窗口中，点击运行(Run)键，选择运行方法。

五方法编辑

利用 Wizard 编程精灵进行

六数据处理 (Evaluation)

1数据浏览

Evaluation窗口中可查看层析结果(Chromatogram_Layout)和程序档案(Documentation)等。

2数据加工

最常用有曲线的积分、移动、计算（加减乘除）等：

2.1积分 (integrate)

(1)选择Integrate>Peak integrate或点击Peak integrate按钮，打开积分窗口；

(2)在积分窗口中选择曲线、基线和积分表后，点OK键即可；

(3)如果想优化积分结果，则可在积分窗口中选择基线设定、积分范围和参数。

2.2 移动 (Shift)

多条曲线重叠比较时，可用移动功能，使每条曲线错开适当距离，便于分析。

移动可以左右移动，也可上下移动。

2.3 相除计算 (Divide)

将两条UV曲线相除，可判定吸收峰的纯度：如果一个峰的组分是单一的，则整个峰的相除结果应是恒定值。根据峰的相除值，还可判定峰的成分，因为不同物质的两个波长相除值应是不同的。

(1)选择Operation>Divide，打开Divide (相除)窗口；

(2)选择两条相除的曲线，点OK键，即可；

(3)若需优化计算结果，可设定极限范围(Threshold)，也可在计算前用相减(Subtract)

功能，消除基线漂移的影响，还可用平滑(Smooth)功能，减小计算结果的波动。

2.4输出报告 (Report and Print)

(1)打印当前窗口显示的内容，选择 File>Print,出现打印窗口，选择打印格式(Print format)，点OK键，即可。

(2)按报告形式打印，选择File>Report，再选择报告格式(Format)，点OK键，即可。

七系统管理

(1) 用户设置

在主窗口中，可设置用户、密码、路径及使用权限等。

(2) 系统设置

在系统控制窗口中，可设置系统报警、检测、曲线记录等参数。

(3) 缓冲体系设定

在方法编辑窗口中，可更改缓冲液配方参数或增加新的缓冲液配方。

(4) 报告格式

在数据处理窗口中，可编辑数据浏览格式、打印报告格式等。

晨会操作流程及细节

晨会操作流称及细节 每周晨会由各职能管理中心轮流组织。主持人则由各职能中心总监担任，另选择一人为助理主持人，负责播放音乐及协助主持人工作。如总监因工外出，则需指定本中心经理级以上人员代为主持，并提前报人力资源管理中心备案。 晨会流称： 8：30各中心全体员工至集团三楼培训轿辰开会； 主持人：我是×××中心的×××，今天的晨会由我主持，大家早上好！ 全体员工：好！很好！非常好！ 主持人：今天晨会的第一个环节，队列整理，现在开始！ 全体员工以前排侧平举、后排前平举的形式列队站好，并保持立正站姿。 主持人：请各职能中心汇报人数！ 中心指定人员向右横跨一步，立正汇报：“本中心应到××人，实到××人，×××人因××原因未到，报告完毕！”报告完毕后归队。 主持人：现在进行第二项着装整理！头饰是否佩戴——衣领是否整齐——丝巾或领带是否按标准佩戴——司徽是否佩戴——衬衫下摆是否塞入裤子或裙子内——皮鞋是否符合要求 *主持人带领全体员工一起整理，从头花（男生跳过）、丝巾/领带、司徽、衬衫衣摆、皮鞋。整理过程中要做到“手到眼到”。

主持人：着装整理完毕！请着装不规范的员工出列！ *对于着装不规范的员工，请他们出列展示，并由主持人对其着装进行指正。 主持人：下面进入晨会的第三个环节，员工风采展示！ 态度决定一切、细节决定成败、品质决定未来！ *全体员工跟着颂读两遍。 主持人：在我们轿辰集团的企业文化中，有一个很重要的元素，那就是感恩。滴水之恩，涌泉相报，以感恩的心营造家的亲情和温暖，是轿辰人的做人原则。希望大家都怀着一颗感恩的心，善待我们身边的人和事。那么接下来，就让我们共同走进本次晨会的第四个环节——手语演示《感恩的心》。 *主持人站到队列的一侧，与大家共同演示。 主持人：不经历风雨，怎么见彩虹，没有人能随随便便成功。让我们为了心中的那个梦，在接下来的时间里把握生命中的每一分钟，努力工作。最后，让我们共同演唱歌曲《真心英雄》。 主持人：今天的晨会到此结束，祝愿大家在新的一周里工作愉快，有所收获。请各中心按秩序退场。

澳洲维省高中课程VCE Mathematical methods与国内数学对比研究

关于Further Mathematics 与Mathematics Methods 注：11年级的课时计划会打乱书上章节的顺序 ●分析： 1) Further Mathematics内容覆盖广(6年级~大一)，与现行高中数学教材接轨小，在内容上仅有不到20%相同的地方，且难度较小，但除应用性强外，对国内数学帮助不大；但国内高中数学对Math有较大帮助。 2) Mathematics Methods 内容与国内高中数学内容相近，大约有70~80%相同，尽管在要求上更重于应用，理论难度要略低于国内数学，但它与国内数学互相辅助程度较大。然而要考虑的是：学生的英语水平及难度会对学生的VCE总分产生影响。 3) 假设只学习Mathematical Methods，根据Mathematical Methods教学安排调整中文数学的教学顺序例如：中文数学中的数列、向量内容后置，将Mathematical Methods中的概率统计前移。 ●方向 1)为了保证学生VCE的总分，应该保留Further Mathematic； 2)而为了让学生在报考国外大学的专业时有更多的选择(尤其指理工科)或得到更高的分数，应该学习Mathematical Methods，且Methods与国内数学的关系更为紧密。只是在学科的课时上，外教的配置上，学生的学费改变与否上考虑。 ●建议： 1、鉴于学生水平的参差不齐，理想状态：所有学生必修Further Mathematic，数学不错的(将来可 能报国外理科专业)的同学选修Mathematical Methods。这将会增加学生的课时。 2、学生学Further Mathematic和Mathematical Methods，多增加一门Mathematical Methods。 ------- 11年级学生学习Further Mathematic的3,4单元；12年级学生学习Mathematical Methods的3,4单元，最后参加5个学科的VCE大考。若这样可行，则可在不增加课时的基础上，多学了一个VCE学科。 ●初拟结论： 1、Methods代表国内数学的课改趋势 2、Methods尽管难度提高了，但因为计算的是标准分(按标准分折算)，故与Victoria省比较，应该占优，并不影响VCE总分。 3、Methods与国内数学接近，更利于二者的整合与互助。 4、Methods与国内数学接近，更利于学生对中外数学的统一认识------即：要学好Math，就必须将国内数学学好，反之亦然。尽管它们在内容和深度上还各有特点。

vce教程

VCE题库打开软件Visual CertExam详细使用教程 VCE题库打开软件-Visual Certexam Suite免费版 https://www.wendangku.net/doc/3918668802.html,/thread-36170-1-1.html 发现论坛有的会员对VCE软件使用不熟悉，影响做题效率，现在给大家奉上一个详细的使用教程。感谢各位会员对鸿鹄论坛的支持，我们一直在努力做到更好！ 1.打开Visual CertExam软件

2.选择Add按钮添加.VCE格式后缀题库文件

3.选择start直接可以做题，但是该软件不仅仅有这些功能，请往下看吧，选择Exam按钮 4.如上图所示选择history，对了，这就是每次做题的历史记录，可以看到自己历次的成绩。

5.再回到3中选择Operation选项，如图所示 Randomize questions--勾选表示随机抽题，不勾选表示从题库的第一题开始做，建议刚开始接触题库的同学不用勾选，先熟悉一遍题目，等熟悉了再勾选随机抽题选项。 Randomize choices where enable-勾选表示题目的ABCD等选项也是随机出现的，不勾选表示选项跟题库给的顺序一样。

6.回到2中，选strat开始做题，可以选择做所有题目或者自己选择题目的类型，这样便于重点练习自己不熟悉的知识点，查漏补缺，底部Time on选项，默认考试时间是120分钟，可以根据自己的情况适当设置做题时间。 7. 点击上图的OK按钮，会有题库的介绍和相关说明如下图所示，按Begin按钮正式开始答题。

8. 选择题有单选跟多选，题干会题库该题有几个选项，注意下图左上角的Mark按钮，勾选表示对该题做了标记。黄色M即表示标记的题目。

服务员工作流程细节

服务员工作细节： （1）微笑迎宾，礼貌，热情迎宾，合理给客人安排位置。 （2）注意点酒水时各种推销技巧的应用，买单时必须唱单，如果有找零一定要给买单的客人，要让客人明白消费。 （3）吧台开单必须请吧哥吧丽签字，签完之后找主管或经理核单。 （4）注意上酒水的速度，如果收银台一定要自动排队打单。 （5）服务员应主动给客人斟酒，兑饮1/2。 （6）注意台面的摆放保证台面的整洁美观，酒水，小吃，果盘，烟缸等。 （7）对于酒水和果盘的赠送一定要大声告诉客人：这是**经理或主管赠送的，请慢用！ （8）一定要随时注意烟灰缸，斟酒及点烟，做到超前服务。 （9）对生日的客人要签送生日果盘，并通知管理人员去祝贺。 （10）备藏柜上的冰桶或小吃必须用托盘盖住。 （11）员工应每五分钟整理台面一次，多余的酒杯空酒瓶要勤收勤换，烟缸内不得有三个烟头。 （12）要根据情况把多余的凳子搬出，方便客人跳舞，不要防碍客人过路，如发现有坏的凳子马上给工程部维修。 （14）如管理人员和客人喝酒的时候必须换上干净的杯具，并要保护好管理人员，在客人不注意时尽量给管理人员倒饮料。 （15）在人多的时候让客人先过，对客人点头微笑问候。 （16）服务员应随时注意客人坐的凳子的正反面。 （17）对存取酒芭芘卡或免单的客人必须以最好的服务去服务客人，不能有不满的情绪，绝不能引起投诉。 （18）各个区域的转台必须以客人为中心，满足客人要求，不能恶意转台，及时还单。 （19）服务员有空可以寻问客人意见即时上报。 （20）整个服务过程中客人要找管理人员时服务员必须第一时间给客人回应。 （21）客人离开时，服务员应提醒客人是否存酒，并送上存酒卡，客人签字确认以后把客人联交给客人，并说明存酒期限，并把客人联给客人，提醒客人带好随身物品并礼貌送客。

Visual CertExam(VCE)试题制作教程

制作方案一：将PDF制作成VCE文件 制作相关软件： 1、Exam Formatter (把PDF转成RTF) 2、Visual CertExam Suite (主要用designer把RTF转成VCE) 具体操作步骤： 1、打开exam formatter软件 2、选择file->import导入相应PDF文件 3、自动导入后，exam formatter如下 4、选择file->save as，保存成rtf文件 5、运行visual certexam designer->import导入刚才保存的rtf文件 6、next->选择rtf格式（刚才保存的为rtf格式）) 8、next，选择刚才保存的rtf文件 9、next，选择第三项 10、next，进行导入预览 11、next->import导入完成 12、file->save as保存成vce文件 详情请参阅：https://www.wendangku.net/doc/3918668802.html,/s/blog_6c991f270101a7bj.html 感谢@明旭2010分享的制作方案 制作方案二：将PDF转换成TXT后，制作成VCE文件 用第一种方案制作，依赖于Exam Formatter 对PDF的OCR识别，但事实上Exam Formatter并不是一款专业的OCR识别软件，它对PDF的文字识别效果很差。通过方案一制作出来的.VCE文件通常是这样的:

上面图片所属题库里面有280多道题，用方案一只识别出来9道题，而且题目标题，不同的题目也不能识别开来，所以方案一只适用于Exam Formatter 能对PDF完全识别的少部分情况。 VCE题库文件制作2种方法:一种是PDF文件导入（方案一），另一种就是直接将TXT文件导入designer 制作。既然Exam Formatter对PDF的文字识别效果不好，那我们可不可以先用专业的PDF文字识别软件现将题库文字识别出来，再用TXT来制作VCE题库呢？ 制作相关软件： 1、CAJViewer 7.2 ：中国知网的专用浏览器，文字识别效果尚可。（免费） 2、ABBYY_FineReader：一家俄罗斯软件公司开发的OCR识别软件，识别准确率可以达到95% 以上。（收费） 3、Visual CertExam Suite (主要用designer把TXT转成VCE) 具体操作步骤： 1、用CAJViewer 7.2 打开你要识别的PDF文件 2、选择文件->另存为，在弹出的选项框里面，保存类型选择TXT 3、打开你识别好的TXT文件： 将QUESTION 替换成Q ,比如QUESTION1=Q1，QUESTION2=Q2以此类推 将Correct Answer 替换成Answer

餐厅服务员餐前准备工作流程注意细节

工作行为规范系列 餐厅服务员餐前准备工作流程注意细节 （标准、完整、实用、可修改）

编号：FS-QG-23787餐厅服务员餐前准备工作流程注意 细节 Restaurant waiter pre-dinner preparation workflow pay attention to details 说明：为规范化、制度化和统一化作业行为，使人员管理工作有章可循，提高工作效率和责任感、归属感，特此编写。 正所谓“好的开始是成功的一半”，充分的餐前准备工作是良好的餐厅服务、高效流畅的餐厅营运工作的重要保证，餐前准备工作不仅能够为服务员后续的服务工作奠定好的基础，而且也能很好的分担服务员在餐中服务过程中的压力。所以，餐厅服务员要搞好餐前准备工作，餐厅领班、前厅部长等管理人员则要做好餐前准备工作的检查——餐厅的所有工作人员都应当在迎接第一位客人的到来之前，做好餐厅的餐前准备工作。 餐前准备工作包含着众多的细节，而这些细节工作在繁忙的餐前准备过程中，又是很容易被忽视的，不论是餐厅的环境卫生、台面整理、备用餐具，还是餐厅的灯光、温度等，

每个餐前准备工作的细节，都会影响餐厅服务的质量水平，并且会对餐厅的高效顺畅的营运产生直接的影响。所以，我们餐厅服务员在做餐前准备工作时，不仅要严格按照相关的流程来执行工作标准，更应在每日的工作中，不断发现餐前准备工作的细节，并一丝不苟的做好它们。 下面我们就从餐厅环境卫生准备、用餐设备设施准备、营运基本情况了解等方面，来一同分享餐厅服务员在做餐前准备工作时的工作流程来，以及在餐厅准备工作时应当注重的工作细节。 一、餐厅环境卫生准备工作流程及细节 1、个人卫生的准备 服务员在首先对自己的仪容仪表进行全面的检查，要求做到表情要开朗，面带微笑，端庄大方，头发梳理整洁，前不遮眉，后不过领。 男员工要做到:不留鬓角，胡须，坚持每天刮胡子，不留长指甲，不带耳钉，不留怪发。 女员工要做到:用统一样式发卡把头发盘起，不擦浓味发油，发型美观大方，上班不佩带项链，手镯，戒指，耳钉，

业务流程操作流程图

·风险控制部业务流程图：

开始 风险控制部搜集企业相关信息 业务经理尽职企业调查，完整收集资料后与风控专员对接 风控专员核对资料，与业务经理及时沟通完善企业资料审部、授信部、法务部开会 通过提出否定原因 制定风险控制部意见书 申请召开贷审会 法务部制定合同

签署合同 风险控制部办理反担保物登记手续 资料归档（填写归档登记表） ·风险控制业务流程操作细则：

1、基本对接：业务经理在去企业调查之前与风险控制部基本对接，包括贷款企业名称，贷款金额，贷款期限，担保费率，企业从属行业性质。 2、搜集信息：风险控制部基本了解企业情况之后搜集企业基 本信息与从属行业相关信息。 3、风控专员对接：通过业务部尽职调查，风险控制部根据企 业所处行业及经营状况、借款人实际情况的不同，秉承务实高效，抓大放小且实质重于形式的原则，对企业的贷款用途及信用状况，经营管理能力、经营理念、发展趋势及近期财务指标主项核证（应收、应付主要客户往来记录，其他应付项目落实、成本分布明细等）进行详细对接。 4、审核及完善资料：通过对借款人的贷前，贷中审核内容主要有：◆借款方的实际贷款用途； ◆借款方的基本信息（包括其基础资料，充分了解借款方的偿还能力及信誉程度）； ◆抵押物的基本情况，质押物的基本情况； ◆第三方保证情况等相关的资料的核证 5、风险控制部论证风险： 风险控制部贯穿整个贷款业务操作的全过程，组织内审、授信、法务，秉承齐抓共管，协调一致，从企业内部管理上把握贷款担保风险，其主要风险论证包括： ◆担保申请人的基本资料

A、法人 1、营业执照、税务登记证、组织机构代码证、工商信息查询单； 2、公司简介、验资报告、公司章程； 3、法人代表身份证、法人代表证明书和授权委托书； 4、申请担保的董事（股东）会决议及董事（股东）会成员签字样本； 5、借款用途有关的证明材料（购销合同、合作协议等）； 6、内审部审核近二年财务审计报告、近三个月财务报表（资产负债表、损益表、现金流量表）、银行对账单和近三个月的税单及水电费清单； 7、贷款卡及银行信贷登记咨询系统信息单，与报表不符应详细说明； 8、内审部审验存货明细、固定资产明细、应收账款明细及账龄分析表、或有负债情况表等； 9、反担保人\物\企业的有关资料； 10、其他有关资料。 B、自然人 1、个人简介； 2、身份证件及婚姻证明（如身份证、公务员证、教师证、警官证等）； 3、银行征信报告；

澳州VCE高中课程

澳州VCE高中课程 什么是 VCE? ●澳大利亚维多利亚州授予的高中证书 ●一个单元是一门学科一学期的课程，需要通过至少16个单元以完成学业 ●成绩由学校内部考试和学校外部维州统一考试及综合评估组成，取得规定学 分，即获得澳大利亚高中VCE证书 谁认可VCE? ●VCE在世界范围内被广泛承认，尤其是英语国家 ●所有澳大利亚的大学认可VCE，录取取决于你的VCE评估成绩在澳洲的排名 有哪些VCE课程？ ●VCE课程与澳大利亚维洲开设的完全一致 ●起初开设4至6门核心科目，通常是英语、数学、中文和商科或科学等科目●第一学期开设英语预备课程，以确保学生达到接受英语授课的能力 如果管理VCE项目？ ●澳大利亚维州教育评估署官员每年都要对海外学校进行检查 ●澳洲半岛学校经常性派专业人士现场访问指导 ●澳洲半岛学校为在中国教授相同学科的老师提供指导老师 ●学生的成绩报告及学籍档案由澳洲半岛学校统一存档管理 VCE课程有哪些特色？ ●VCE课程全部用英语教学 ●由维州教育评估署提供教学大纲和考试评估 ●由澳洲半岛学校提供课程计划，浦外参与整合设置 ●绝大多数教学和评估资源在澳洲准备并与澳洲同步 VCE课程有何益处？ ●VCE课程为中国学生开辟了一条入读澳大利亚和其它国家大学的途径 ●学生可在自己的国家中学习得到世界承认的优质学历课程 ●节省了到国外就读高中所需的高额度的生活费用 ●学生可习得流利的英语，英语教学的经历为前去英语国家大学深造作好了充 分的准备 如果招生？ ●VCE课程学制：全日制三年，全部在浦外校园学习。 ●今年9月开班，计划招生100名。本市具有较好英语水平的初中毕业生，通 过相应的考核，即可成为课程项目正式学生就读。

最详细最好的Multisim仿真教程

第13章Multisim模拟电路仿真本章Multisim10电路仿真软件，讲解使用Multisim进行模拟电路仿真的基本方法。 目录 1. Multisim软件入门 2. 二极管电路 3. 基本放大电路 4. 差分放大电路 5. 负反馈放大电路 6. 集成运放信号运算和处理电路 7. 互补对称（OCL）功率放大电路 8. 信号产生和转换电路 9. 可调式三端集成直流稳压电源电路 13.1 Multisim用户界面及基本操作 13.1.1 Multisim用户界面 在众多的EDA仿真软件中，Multisim软件界面友好、功能强大、易学易用，受到电类设计开发人员的青睐。Multisim用软件方法虚拟电子元器件及仪器仪表，将元器件和仪器集合为一体，是原理图设计、电路测试的虚拟仿真软件。 Multisim来源于加拿大图像交互技术公司（Interactive Image Technologies，简称IIT公司）推出的以Windows为基础的仿真工具，原名EWB。 IIT公司于1988年推出一个用于电子电路仿真和设计的EDA工具软件Electronics Work Bench（电子工作台，简称EWB），以界面形象直观、操作方便、分析功能强大、易学易用而得到迅速推广使用。 1996年IIT推出了EWB5.0版本，在EWB5.x版本之后，从EWB6.0版本开始，IIT对EWB进行了较大变动，名称改为Multisim（多功能仿真软件）。 IIT后被美国国家仪器（NI，National Instruments）公司收购，软件更名为NI Multisim，Multisim经历了多个版本的升级，已经有Multisim2001、Multisim7、Multisim8、Multisim9 、Multisim10等版本，9版本之后增加了单片机和LabVIEW虚拟仪器的仿真和应用。 下面以Multisim10为例介绍其基本操作。图13.1-1是Multisim10的用户界面，包括菜单栏、标准工具栏、主工具栏、虚拟仪器工具栏、元器件工具栏、仿真按钮、状态栏、电路图编辑区等组成部分。

澳大利亚维州VCE会计课程教育与思考

摘要教育国际化引发越来越多的国际高中课程进入了中国学生的视野。中国学生在国内就能参加全球各国的大学入学考试，顺利进入世界各地的大学深造学习。本文将介绍澳大利亚维多利亚州的高中ＶＣＥ课程体系中的会计学科，比较中澳两国在课程设计、教育目标以及评价体系中的差异，并对我国会计课程教学现状给出分析、建议和思考。关键词澳大利亚ＶＣＥ会计高中教育评价体系Analysis and Reflection on VCE Accounting Curriculum Education in Australian State of Victoria／／ＴａｎｇＸｉａｏｍｉｎAbstractＷｉｔｈｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｅｄｕｃａｔｉｏｎ，ｍｏｒｅａｎｄｍｏｒｅｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｈｉｇｈｓｃｈｏｏｌｃｕｒｒｉｃｕｌｕｍｇｅｔｉｎｔｏｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｓｔｕｄｅｎｔｓ＇ｈｏｒｉｚｏｎｓ．Ｃｈｉｎｅｓｅｓｔｕｄｅｎｔｓｗｉｌｌｂｅａｂｌｅｔｏｐａｒ－ｔｉｃｉｐａｔｅｉｎｔｈｅｇｌｏｂａｌｎａｔｉｏｎａｌｃｏｌｌｅｇｅｅｎｔｒａｎｃｅｅｘａｍｓ．Ａｕｓｔｒａｌｉａｎｅｄｕｃａｔｉｏｎｅｎｊｏｙｓａｈｉｇｈｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｒｅｐｕｔａｔｉｏｎ，ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｗｉｌｌｄｅｔａｉｌｔｈｅＡｕｓｔｒａｌｉａｎｓｔａｔｅｏｆＶｉｃｔｏｒｉａＨｉｇｈＳｃｈｏｏｌＶＣＥａｃｃｏｕｎｔ－ｉｎｇｅｄｕｃａｔｉｏｎｃｕｒｒｉｃｕｌｕｍｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ，ｃｕｒｒｉｃｕｌｕｍｄｅｓｉｇｎ，ｔｅａｃｈｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ａｎｄａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｇｉｖｅｒｅｃｏｍ－ｍｅｎｄａｔｉｏｎｓｔｏＣｈｉｎｅｓｅｅｄｕｃａｔｉｏｎ． Key wordsＶＣＥ；ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ；ｈｉｇｈｓｃｈｏｏｌｅｄｕｃａｔｉｏｎ；ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ 随着教育国际化的进程，越来越多的国际高中课程进入了中国学生的视野。例如英联邦国际的Ａ－ｌｅｖｅｌ课程，澳大利亚ＶＣＥ课程，美国的ＩＢ、ＧＡＴ课程，德国课程等，中国学生在国内就能参加全球各国的大学入学考试，顺利进入世界各地的大学深造学习。本文将介绍澳大利亚维多利亚州的高中ＶＣＥ课程体系中的会计学科，比较中澳两国在课程设计、教育目标以及评价体系中的差异，并对我国会计课程教学现状给出分析、建议和思考。 １澳大利亚ＶＣＥ会计（Ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ）课程设置澳大利亚维多利亚州高中阶段ＶＣＥ教育课程是指“ｔｈｅＶｉｃｔｏｒｉａｎＣｅｒｔｉｆｉｃａｔｅｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ”教育证书，该教育证书既是学生高中毕业的证明，也是澳大利亚大学录取的重要指标，它得到全球认证，不仅仅可以申请澳大利亚大学，还可以申请世界范围内包括英国、美国、加拿大、中国香港、新加坡等一流大学。澳大利亚ＶＣＥ的高中学习科目设置多元化。高中阶段学科设置有数学（专业数学、数学方法等）、社会学科（中文、会计、经济、地理、历史等）、自然科学（ＩＴ、物理、生物、化学等）以及语言学科（中文、法语、英语、英语文学、英语作为第二语言等）。在澳大利亚高中阶段就开设实用性很强的会计学对学生了解商业运营模式，很具有实践意义［１］。 澳大利亚维多利亚州ＶＣＥ的高中阶段就开设了中国国内只有在本科教育中才有的会计课程（Ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ），供学生选择学习［２］。会计课程不仅是学生在大学阶段学习会计、商科、经济、金融等专业的必修课程，还为学生从中学起就了解社会商业运转，设定未来职业理想目标提供了良好的基础。 ２澳大利亚ＶＣＥ会计课程教学特点 澳大利亚ＶＣＥ会计教学方法体现了自主性、灵活性和多样性。会计学科又具备其独特的特点，是知识性和实践性紧密结合的学科。 澳洲ＶＣＥ会计教学的特点之一就是强调自主性。澳大利亚的高中更像国内的大学，学生没有固定的教室，可以自己挑选每年学习的科目。学校拥有先进的教学设备，老师在教学中使用电脑投影，学生们听课都使用电脑，每个人都有无线网络账号，能随时上网，这不论对老师的课堂控制力还是学生的学习自觉性都是一种考验。仔细研究校园网络系统，发现每个学生所选课程安排、上课内容、待完成的作业及时间安排等都有详细的模块分类，这也是每个学生每天必看的。首先上课前老师会把本堂课提纲通过学校网络发给每个同学，学生可以先作预习，在上课时在老师的提纲上将笔记补充完整，起到了提纲挈领的作用。既让学生明确了本节课学习的目标，又能进一步检查学生掌握程度，同时也锻炼了学生的动手能力，会计课程教学就注重学生的笔记的完善，条理的清楚，以便于抓住重点复习考试，而作业等也是直接在电脑上完成即可。当然有利也有弊，老师在讲课时就得有所要求，比如合上电脑等。会计这门学科教学要求中有计算机完成部分，例如运用ＯＦＦＩＣＥ的软件Ｅｘｃｅｌ、现在国际通用的会计软件Ｑｕｉｃｋｂｏｏｋ进行操作练习等，多样性的教学让学生有更多的机会将会计教学融入到社会实践中。通过多种途径建构学生的会计知识，并且这部分的成绩在学校评价体系（ＳＡＣ）中占到一定比重。 澳洲ＶＣＥ会计教学的特点之二是强调计划性和目的性。通常每天只有四节课，每节课７０分钟，早上９点开始， 澳大利亚维州VCE会计课程教育分析与思考 唐晓敏 (南京外国语学校仙林分校国际高中部江苏·南京210023)中图分类号：Ｇ４２４文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－７８９４（２０１３）２１－００９０－０２ 作者简介：唐晓敏（1982—），女，湖北荆州人，经济学硕士。 教改教法 ９０

操作流程图如下.doc

操作流程图如下： 1.将采血针拧开，把采血针拧在针器上。（软针采血无此项） 2.扎紧止血带，消毒穿刺部位，打开针冒，进行穿刺。 3.固定持针器，（软针采血无 此项）；将采血管推倒持针器的底部，（软针采血无此项）；见到血液回流时；解开止血带，进行采血。4.血液停止流动后，拔下采血管 5.需多管采血时，更换共他采血管 6.采血完毕，先拔下静脉穿刺针，再拔下采血管 情感语录 1.爱情合适就好，不要委屈将就，只要随意，彼此之间不要太大压力 2.时间会把最正确的人带到你身边，在此之前，你要做的，是好好的照顾自己 3.女人的眼泪是最无用的液体，但你让女人流泪说明你很无用 4.总有一天，你会遇上那个人，陪你看日出，直到你的人生落幕 5.最美的感动是我以为人去楼空的时候你依然在 6.我莫名其妙的地笑了，原来只因为想到了你 7.会离开的都是废品，能抢走的都是垃圾 8.其实你不知道，如果可以，我愿意把整颗心都刻满你的名字 9.女人谁不愿意青春永驻，但我愿意用来换一个疼我的你 10.我们和好吧，我想和你拌嘴吵架，想闹小脾气，想为了你哭鼻子，我想你了 11.如此情深，却难以启齿。其实你若真爱一个人，内心酸涩，反而会说不出话来 12.生命中有一些人与我们擦肩了，却来不及遇见；遇见了，却

来不及相识；相识了，却来不及熟悉，却还要是再见 13.对自己好点，因为一辈子不长；对身边的人好点，因为下辈子不一定能遇见 14.世上总有一颗心在期待、呼唤着另一颗心 15.离开之后，我想你不要忘记一件事：不要忘记想念我。想念我的时候，不要忘记我也在想念你 16.有一种缘分叫钟情，有一种感觉叫曾经拥有，有一种结局叫命中注定，有一种心痛叫绵绵无期 17.冷战也好，委屈也罢，不管什么时候，只要你一句软话，一个微笑或者一个拥抱，我都能笑着原谅 18.不要等到秋天，才说春风曾经吹过;不要等到分别，才说彼此曾经爱过 19.从没想过，自己可以爱的这么卑微，卑微的只因为你的一句话就欣喜不已 20.当我为你掉眼泪时，你有没有心疼过 情感语录 1.爱情合适就好，不要委屈将就，只要随意，彼此之间不要太大压力 2.时间会把最正确的人带到你身边，在此之前，你要做的，是好好的照顾自己 3.女人的眼泪是最无用的液体，但你让女人流泪说明你很无用 4.总有一天，你会遇上那个人，陪你看日出，直到你的人生落幕 5.最美的感动是我以为人去楼空的时候你依然在 6.我莫名其妙的地笑了，原来只因为想到了你 7.会离开的都是废品，能抢走的都是垃圾 8.其实你不知道，如果可以，我愿意把整颗心都刻满你的名字 9.女人谁不愿意青春永驻，但我愿意用来换一个疼我的你 10.我们和好吧，我想和你拌嘴吵架，想闹小脾气，想为了你哭

家具油漆工工作流程细节

家具油漆工工作流程细节

家具油漆工工作流程细节 家具上漆是一道很关键的步骤，上漆是决定家具最后品质的一道工序，所以下面介绍一下家具的上漆过程，让大家有所了解。 一〉、家具制作工艺流程 木工检砂→油工检砂→检修→擦色→检修→底油涂装→油磨包装←面油涂装←检修←修色←检修 二〉、家具油漆工艺指导 一、家具检砂 检砂是整个油漆品质的前奏，检砂质量的好坏直接的影响着整件产品的后期质量问题。也是油漆车间不可缺少的工序之一，对产品检砂之前需对产品的上道工序进行检验，对有质量问题存在但不能处理的要及时通知车间主管或QC，有他们对产品进行反馈。对纹理比较深、有小缺角或局部有小掉皮的地方需要进行刮灰处理。然后用平板砂光机对有平面的产品用24 0#砂纸进行研磨，有些产品局部不能、用机器操作的可用手或自制工具进行研磨。研磨完毕后再用40 0#的进行二次研磨，直到达到符合本工序的质量验收标准为止。 注意事项： 1.喷油组管理员对于木工组装所交付的产品首先检查有无质量问题，是否漏件，产品是否与订单要求相符，再将产品按指定位置摆放。 2.管理人员将当天工作分配落实到各生产台位 3.各员工清理自己台位，戴上口罩 4按管理人员分配的工作，领换所需砂纸后，将产品搬到自己台位。 5.补灰时调灰色彩要和木材相一致，打磨时必须顺木纹方向，不能将边、角等部位磨变形。 6.集中精力，眼直视打磨产品，砂纸一定要用尽。

7.打磨好的产品，必须仔细检查，合格产品堆放整齐，并且要配套、配序、以防漏件现象。 8.产品线条平直流畅，划痕的打磨处理不允许打穿，板面、角线平整，扣手光滑，砂纸痕迹不能太明显。 9.平面或其它部位不能有波浪现象 10.边角不能有割手或缺角现象研磨区域需光滑手摸无障碍感。 11.补灰：将产品吹干净后才补灰，如有钉突出现象需打入木头内，用力将灰补入木边、线条、钉眼及板材交接处等部位，不易打磨的地方需用灰刀平刮干净； 12.光身打磨：灰干后方可进行打磨（约20—30分钟），对于平板面一般是用机磨，所用砂带是240＃，打磨时一定要顺木纹，完工产品要打磨平整、光滑，面上的灰疤、花印、胶痕、砂印要磨掉，用力要均匀，将线、线槽里外顺木纹仔细打磨。 二、家具擦色 擦色的目的是为了更好的显示出材质的纹理质感，能够适当的纠正材质的色差，提高修色效率。擦色的过程中需要操作工能够准确的分辨出不同的色差，如有大的色差需要从新上色或调色，直到颜色相匹配为止。但要注意的是每件产品在擦色的过程中必须要彻底的把浮色擦拭干净，以免引起产品与产品之间的色差。 1.擦色前检查实木家具产品是否按符合质量要求，不合格品要求退还实木或打磨小组，重新加工，合格后产品再擦色 2.擦色必须一致，不允许擦花现象，用抹布擦净浮色。 3.确认家具产品颜色后进行喷色、试喷，确保和样板相符，经班长确认后生产，所有外露部位必须一致，无漏色现象。 4.点色线条边角必须同颜色一样，线条平直、颜色均匀。

stata入门教程

Stata 快速入门 1、Stata的窗口 ?在最上方有一排菜单，即“File Edit Data Graphics Statistics User Window Help”。?左上“Review”（历史窗口）：此窗口记录着自启动Stata以来执行过的命令。?右上“Variables”（变量窗口）：此窗口记录着目前Stata内存中的所有变量。?正上方“Results”（结果窗口）：此窗口显示执行Stata命令后的输出结果。 ?正下方“Command”（命令窗口）：在此窗口输入想要执行的Stata命令。 2、将数据导入Stata ?打开Stata软件后，点击Data Editor(Edit)图标（也可以点击菜单“Window”→“Data Editor”），即可打开一个类似Excel的空白表格。 ?用Excel打开文件“nerlove.xls”，复制文件中的所有数据，并粘贴到Data Editor 中。 ?导入数据的另一方法是，点击菜单“File”→“Import”，然后导入各种格式的数据。但这种方法有时不如直接从Excel表中粘贴数据来得方便直观。 3、变量窗口 ?关闭Data Editor后，即会看到右上方的“Variables”窗口出现了5个变量：?分别为tc（total cost，总成本），q（total output, 总产量），pl（price of labor，小时工资率），pf（price of fuel，燃料价格），与pk（user cost of capital，资本的租赁价格。 4、存为dta数据文件 ?此时，可以点击Save图标（也可以点击菜单“File”→“Save”），将数据存为Stata格式的文件（扩展名为dta），比如nerlove.dta。 ?以后就可以用Stata直接打开这个数据集了（不需要再从Excel表中粘贴过来）。 5、打开dta数据文件 打开的方式有三种： 1.点击Open图标（也可以点击菜单“File”→“Open”），然后寻找要打开的dta 文件的位置。 2.直接双击想要打开的dta文件 3.在命令窗口输入以下命令（假设文件在E盘的根目录）并回车（按Enter键）

封装FA分析教程

第二单元 集成电路芯片封装可靠性知识—郭小伟 （60学时） 第一章、可靠性试验 1．可靠性试验常用术语 试验名称 英文简称 常用试验条件 备注 温度循环 TCT （T/C ） －65℃~150℃, dwell15min, 100cycles 试验设备采用气冷的方式，此温度设置为设备的极限温度 高压蒸煮 PCT 121℃，100RH., 2ATM,96hrs 此试验也称为高压蒸汽，英文也称为autoclave 热冲击 TST （T/S ） －65℃~150℃, dwell15min, 50cycles 此试验原理与温度循环相同，但温度转换速率更快，所以比温度循环更严酷。 稳态湿热 THT 85℃,85%RH., 168hrs 此试验有时是需要加偏置电压的，一般为Vcb=0.7~0.8BVcbo,此时试验为THBT 。 易焊性 solderability 235℃,2±0.5s 此试验为槽焊法，试验后为10~40倍的显微镜下看管脚的 上锡面积。 耐焊接热 SHT 260℃,10±1s 模拟焊接过程对产品的影响。 电耐久 Burn in Vce=0.7Bvceo, Ic=P/Vce,168hrs 模拟产品的使用。（条件主要针 对三极管） 高温反偏 HTRB 125℃, Vcb=0.7~0.8BVcbo, 168hrs 主要对产品的PN 结进行考核。回流焊 IR reflow Peak temp.240℃ （225℃） 只针对SMD 产品进行考核，且 最多只能做三次。 高温贮存 HTSL 150℃,168hrs 产品的高温寿命考核。 超声波检测 SAT CSCAN,BSCAN,TSCAN 检测产品的内部离层、气泡、裂缝。但产品表面一定要平整。

澳大利亚维多利亚州教育课程VCE简介

VCE课程简介 VCE（Victorian Certificate of Education），是澳大利亚维多利亚州教育课程评估署（VCAA）向完成国际高中课程学习并达到教学要求的毕业生颁发的学历证书。 VCE证书是衡量学生能否进入澳洲各大学进行本科课程学习的主要标准，毕业后可直接申请澳洲大学，并广泛地被世界主要发达国家的高等学府所承认。 VCE留学课程以满足学生对国际化教育的需求为目标，提供澳洲模式的课程，融合中外课程的核心内容，既有严谨高效卓越的中方课程管理优势，又强调国外教育的创新思维和灵活运用能力，开阔国际视野，培养高端素质，使学生具备国际竞争力。 1、适应学生群体 VCE项目实质上等于把澳大利亚的高中课程与考试体系放到了中国来进行，所以招生范围主要是应届初中优秀毕业生。考试结束后得到和澳大利亚本地高中生在同一平台被大学录取的机会。 2、课程模式——“双证班” 参与 VCE课程的学生将在中国的主办高中和澳大利亚高中同时注册。VCE将中国高中学历教育和澳大利亚高中教育融合在一起，取双方教育教学之长，实现中西教育珠联璧合的一种新的教育教学模式。被VCE班录取的学生，注册中澳两国学籍，既可接受中国的高中教育，学习中国的基础高中课程，参加学业水平考试成绩合格后被授

予中国的高中毕业证书，同时接受澳大利亚的高中教育，学习澳大利亚的相关课程成绩合格后被授予澳大利亚的高中毕业证书。 3、VCE核心课程 总体来说，VCE课程分两个阶段进行： 第一阶段（高一）：在学习中国高一课程同时，补充学习澳洲文化及语言课，由澳洲教育部门认可的具有丰富高中英语教学经验的外籍教师担任。该课程作为VCE预备课程，使学生尽快提高英语能力、熟悉澳大利亚文化背景，潜移默化地培养澳大利亚学习方法，逐步适应之后的澳大利亚VCE课程授课模式。 第二阶段（高二和高三）：在学习中国高二课程同时，主要学习澳大利亚高中的 5 门核心课程。推荐的 5 门 VCE课程是：a) EAL b) CHI c) MME/MMFU d) PHY 上述课程从内容上与中国现有教学大纲相似，可作为中国对应课程的延伸和补充。 4、“VCE双证班”教学特点 以学生为中心，尊重学生，在轻松、平等的氛围和环境中与学生沟通、交流并传授知识和技能，启发式教学，鼓励团队合作和交流，注重学生的独立思考和动手能力。分层教学，照顾学生的个性需求。 跨越三年的 VCE课程项目的教学采用中、英文双语教学。学生学习澳方课程全部用英语完成作业，并用纯正英文完成各种考试，从而使学生在三年学习中接触英文词汇量可以达到近万个，并可以掌握几千个词汇。同时英语听、说、读、写等方面的强化将渗透在整个教

家长会流程及操作细节汇编

培训学校家长会召开流程 一、会前准备 （一）材料准备 1、宣传单页（课程、教育理念、收费标准等） 2、邀请函、家长常规问题答案（附件三） 3、讲稿（XXX市场计划、首次招生、再次招生、扩大招生、产品推展等） 4、家长入场券、调查问卷（附件四） 5、设备：投影仪、音响效果、电脑、PPT演示板、小插板、话筒、插座、 6、会议前播放物料：暖场宣传片、PPT、会场音乐 7、好的音响、麦克风（最好有两只无线的，便于家长提问、互动），如在室内最好有投 影仪 8、主席台：最好铺有桌布 9、专家、领导的桌签（牌）、胸花、装饰性的鲜花） 10、礼仪，可以专业礼仪公司担任。为节约资金，建议挑选2-4名年轻漂亮的培训学校 老师工作人员担任，统一服装（校服或旗袍）即可 11、铅笔/圆珠笔和纸条若干，家长提问时使用 12、根据天气情况，做好当天下雨的准备，备用室内会场 13、现场报名交费台，摆放位置要注意放在离专家近的地方，以便于排队时家长与专家 沟通 14、培训学校报名表、教材费和报名费，其中报名费可以少些，钱不在多少，只是为那 些没带够钱的家长承诺做个方便，最大程度沿用会议乘热打铁的效果 15、家长会宣传海报，必须明确标注家长会时间地点，在培训学校醒目的位置提前一周 张贴 （二）现场准备 1、家长会召开时机：a大型家长会应该选择周末的白天，利用家长休息时间会有更高的 参会b、校内的小型家长会和公开展示课程召开的具体时间应选在下午或晚上，借助家长接孩子的时间开会，可以保证更多的家长参与 2、现场布置：展板、讲台、桌椅、X展架、桌布、鲜花、桌牌、会场中条幅、易拉宝、 展板等宣传物料提前一天准备就位 3、最好在展厅设置一个电视机和DVD反复播放布朗英语演示课程 4、产品展示（教材、教辅、教具等）安排专人管理产品、提供家长互动和翻阅

ADS晶体管直流仿真教程

2 . This chapter introduces the mixer circuit and shows all the basics of DC simulations, including a family of curves and device biasing calculations. Lab 2: DC Simulations

Lab 2: DC Simulations 2-2 OBJECTIVES ? Build a symbolized sub-circuit for use in the hierarchy ? Create a family of curves for the device used in the mixer ? Sweep variables, pass parameters, and the plot or list the data ? Use equations to calculate bias resistor values from simulation data NOTE about this lab: This lab and the remaining labs will use the BJT mixer to demonstrate all types of simulations. Regardless of the type of circuit you design, the techniques and simulations presented in these labs will be applicable to many other circuit configurations. PROCEDURE The following steps are for creating the mixer BJT sub-circuit with package parasitics and performing the dc simulations as part of the design process.1. Create a New Project and name it: mixer 2. Open a New Schematic Window and save it as: bjt_pkg 3. Setup the BJT device and model: a. Insert the BJT generic device and model: In the schematic window, select the palette: Devices–BJT . Select the BJT-NPN device and insert it onto the schematic. Next insert the BJT Model (model card with default Gummel Poon parameters).

WB操作原理以及流程细节.pdf

WB实验的基本原理及操作流程 【实验原理】 一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要 标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸称为Western(西)印迹法，该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的 蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并与第一抗体共孵。第一抗体专一地与待分离蛋自质的抗原决 定簇结合，然后用另一种蛋自质，如135I-蛋白A或辣根过氧化物酶连接的山羊抗IgG检测已结合上去的抗体。本法所需时间6小时或过夜。 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所用条件总要确保蛋白质解离成单 个多肽亚基并尽可能减少其相互间的聚集。最常用的方法是将强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，并通过加热使蛋白质解离后再加样于电泳凝胶上。变性的多肽与SDS结合并因此而带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在聚丙烯酰凝胶电泳中的迁移只与多肽的大小相关。在达到饱和的状态下， 每克多肽约可结合 1.4克去污剂，借助已知分子量的标准参照物，则可测算出多肽链的分子量。 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳大多在不连续缓冲系统中进行，其电泳槽缓冲液的pH值与离子强度不同于配胶缓冲液，当两电极间接通电流后，凝胶中形成移动界面，并带动加入凝胶的样品中所含的SDS多肽复合物向前推进。样品通过高度多孔性的积层胶后，复合物在分离胶表面聚集成一条很薄的区带(或称积层)。曲于不连续缓冲系统具有把样品中的复合物全部浓缩 于极小体积的能力，故大大提高了SDS聚丙烯酰胺凝胶的分辨率。 最广泛使用的不连续缓冲系统最早是由Ornsstein(1964)和Davis(1964)设计的，样品和积层胶中含Tris-Cl(pH6.8)，上下槽缓冲液含Tris-甘氨酸(pH8.3)，分离胶中含 Tris-Cl(pH8.8)的。系统中所有组分都含有0.1％的SDS(Laemmli, 1970)，样品和积层胶中的氯离干形成移动界面的先导边界而甘氨酸分子则组成尾随边界，在移动界面的两边界之间是一电导较低而电位滴度较陡的区域，它推动样品中的多肽前移并在分离胶前沿积聚，此处pH值较高，有利于甘氨酸的离子化，所形成的甘氨酸离子穿过堆集的多肽并紧随氯离子之 后，沿分离胶泳动。从移动界面中解脱后，SDS多肽复合物成一电位和pH值均匀的区带泳动穿过分离胶，并被筛分而依各自的大小得到分离。 【常用试剂】 1)30%丙烯酰胺/0.8% N,N’-亚甲丙烯酰胺