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常用苏木素几种配方与染色结果的比较

常用苏木素几种配方与染色结果的比较
常用苏木素几种配方与染色结果的比较

解剖学杂志

CHINESE JOURNAL OF ANATOMY

2000 Vol.23 No.4 P.393-394

常用苏木素几种配方与染色结果的比较

李文 张赛霞 

苏木素是组织切片最常用的细胞核染料,H.E染色中配方甚多,染色效果也有差异,影响染色的因素颇多,未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作用,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。如何优化三者的比例和判断染液的有效期,使苏木素染色达到最佳效果,为此我们进行了以下探讨。

1方法与结果

1.1Ehrlich苏木素染液这是一种自然氧化成熟的苏木素染液,比较合理的配方是:苏木素5g,无水乙醇200ml,硫酸铝钾20g,甘油200ml,蒸馏水100ml,冰醋酸20ml。按此方配好的苏木素染液盛人玻璃瓶内,瓶口盖上数层纱布,放在有阳光照射的台面上,六周后成熟。此种苏木素染液经久耐用,细胞核染成深蓝色,不易褪色,我室在1958年制作的组织切片至今仍在使用。未见褪色。Ehrlich苏木素溶液是我室常备染液,每年夏季配置一次,使用一年即换新液。

1.2Harris苏木素染液是一种添加氧化剂,使苏木素快速成熟的染液,比较合理的配方是:苏木素3g,无水乙醇20ml,硫酸铝钾20g,氧化汞1g,蒸馏水500ml,冰醋酸

20ml。此染液配置好后一周至三个月内使用,染色效果最好,不能久存,细胞核染呈紫蓝色。

1.3Carazzi苏木素染液这是近年来,我室使用较多的一种苏木素染液,用碘酸钠代替氧化汞作为氧化剂,使苏木素快速成熟,安全可靠,节约染料,染色效果优于前二种染液,比较合理的配方是,苏木素1.5g,无水乙醇5ml,硫酸铝钾20g,碘酸钠0.2g,蒸馏水400ml,甘油100ml。制备方法是;苏木素用5ml无水乙醇溶解,蒸馏水溶解钾明矾(加温至90度,勿煮沸),将溶解的苏木素和碘酸钠同时加人钾明矾水溶液内,流水冷却至室温,再加甘油,震荡1小时后即可使用,染液可保用6个月。细胞核染呈鲜蓝色,与伊红对比鲜明亮丽,特别对于脱钙骨和长时间甲醛固定的组织染色效果同样满意。

2讨论

2.1经过我们多年的实践,不断探索认为,上述三种苏木素染液的配方比例较为合理,既不会使苏木素过度氧化,给染色过程增添麻烦,也不会浪费试剂,而使苏木素的染色达到最佳效果。

2.2配制苏木素染液所用的氧化剂、媒染剂最好用分析纯(AR),纯度高、杂质少,才能保证苏木素的染色效果。

2.3新配方与原配方比较,主要是苏木素和硫酸铝钾的份量稍有增减,这并不影响两者结合后所形成的色精。是否改变染液的PH值,有待进一步探讨。我们认为过量的硫酸铝钾不但造成试剂的浪费,且容易使染液产生沉淀物。

2.4苏木素从配制→成熟→失效,有一个过程,如何判断其是否成熟、何时失效?

现介绍一个简便的方法供参考:取一滴苏木素染液,滴入一杯自来水中,如果沉在水底不散开,且呈红色,是未成熟的;如果很快散开,且呈紫蓝色,为成熟,此时染色效果最好,如果呈蓝色,表示染液失效。

作者单位:李文(广州中医药大学组织学与胚胎学教研室,广州,510405) 

张赛霞(广州中医药大学组织学与胚胎学教研室,广州,510405) 

 

常用苏木素几种配方与染色结果的比较

作者:李文, 张赛霞

作者单位:广州中医药大学组织学与胚胎学教研室,广州,510405

刊名:

解剖学杂志

英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ANATOMY

年,卷(期):2000,23(4)

被引用次数:5次

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6.狄宝安.杨举伦.李棠丽.李霞.李涛.蔡琳.戴芳.宋蜀伶HE切片中苏木素沉渣去除方法探讨[期刊论文]-西南国防医药 2005(5)

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2.制作方法 先将松香、蜂蜡、花生油熬至滴水成珠,加入前四种药粉至不粘手为度,入冷水一周后加后三种药粉即成。每贴用3-5天。 3.主治范围 风湿腰腿痛及跌打损伤。 4.方剂来源 黑膏药网。 新型黑膏药 1.药物组成 A.麻黄45 稀签草50 海风藤50 羌活50 桂枝35 生马钱子30 田七10 生龙骨15 炮甲15 白附子30 乳香20 没药20筚拨30 山萘20 独活20 玄参25 当归40 荆芥35 双花30 川椒40 干姜45 急性子30 木瓜45 川芎40 牛膝50杜仲50 生川乌40 生草乌40 生南星40 生半夏40 牙皂50 云南一枝篙50 B公丁香血竭各12 土鳖虫炒白介子煅自然铜红花川断蜈蚣全虫五倍子水牛角粉各20 乳香没药各6共为细末. 2.制作方法 将处方A的药物水煎三次,头两次煎三小时过滤,第三次煎两小时过滤,合并三次滤液熬成流浸膏.膏药制作方法:医用压敏热溶胶1000克,放入锅内加热融化,先将药粉徐徐加入搅拌均匀,然后再加入流浸膏,50毫升氮酮,继续搅拌,然后摊膏. 3.主治范围 跌打损伤,风湿性关节炎,肩周炎,骨质增生,腰椎间盘突出症. 4.注意事项 忌食鱼腥,牛肉,狗肉,鸡,竹笋等发物。

5.方剂来源 黑膏药网。 自制痹痛膏 1.药物组成 川乌80g 草乌80g 川芎80g 威灵仙80g全蝎80g 土元80g 乳香80g 透骨草8g 没药80g 大黄80g 杜仲80g 川断80g 僵蚕80g 白芷80g 丹参80g 骨碎补80g 远志80g 冰片80g 黄芩80g 黄柏80g 姜黄80g 地龙80g 山奈8 0g 苦参80g 干姜80g 防己80g 甘草80g 2.制作方法 共研极细沫,加入2%的72-6透皮剂,采用水凝胶技术制成水凝胶痹痛药贴,贴患处,1贴/48小时,20天/1疗程。 3.主治范围 腰腿痛,腰椎间盘突出。 4.治疗效果 组别n 治愈好转无效有效率 治疗组80 66 13 1 98.7% 5.方剂来源 wu警北京总队医院高山张军宋蓓王翠娟姚佳春。 五虎蠲痹膏(2) 1 药物组成 生马钱子20克,生川乌18克,生草乌18克,生南星15克,生半夏20克,洋金花20克,闹洋花20克,三七24克,乳香18克,没药18克,肉桂15克,葛根30克,玄胡20克,丹参30克,川牛膝20克,蜈蚣3条,穿山甲20克,川楝子20克,红花20克,桃仁18克,生大黄25克,麻黄20克,狗脊20克,寄生20克,土别虫20克,威灵仙25克,桂枝30克,赤芍药20

苏木素-伊红染色液 (混合型)

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书 【产品名称】 苏木素-伊红染色液(H-E) 【型号】 混合型 【包装规格】 货号:DH0003 单瓶包装规格分别为:50ml、100ml、250ml、500ml、5000ml。 【预期用途】 主要用于对细胞组织进行染色。 【检验原理】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法,在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强;细胞浆则相反,它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色,红细胞则呈橙红色,本染色液系将苏木素和伊红混合成一种溶液,染色后可不分化即可达到常规HE染色效果。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 苏木素-伊红染色液(H-E)混合型苏木色精伊红 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 涂片和切片必须充分固定,石蜡切片要充分脱蜡。 【检验方法】 l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟; 2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟,经80%乙醇若干分钟,自来水冲洗若干分钟; 3、苏木素-伊红染色液(H-E)(混合型)染色若干分钟; 4、自来水冲洗返蓝若干分钟;亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干分钟,自来水洗若干分钟; 5、95%乙醇I、II中各调色约若干分钟,时间不宜过长; 6、无水乙醇I、II中各脱水若干分钟,二甲苯I、II中各透明I、II中各透明若干分钟; 7、封片胶封片,镜检。 【检验结果的解释】 细胞核呈蓝紫色,细胞质、间质、各种纤维呈不同程度的红色。 【检验方法的局限性】 仅供细胞和组织形态学观察染色使用。 【产品性能指标】 pH值(25℃±1℃)应为2.4±0.5。 【注意事项】 1、温度较低时染色液不易着色,可适当延长染色时间。

十大类药物用药介绍

十大类药物用药介绍 一、《青霉素类药物》 1、常用的品种:青霉素、氨苄青霉素(氨苄西林)、青霉素Ⅴ、氯唑青霉素、阿莫西林。 2、药物的适应症:对葡萄球菌、链球菌病部分种类较好.对大肠杆菌、鸡白痢、绿脓杆菌病效果比庆大霉素和卡那霉素差。青霉素Ⅴ耐鸡胃中的酸性,与抗球虫药物配合使用,防治球虫发病后继发细菌病。 3、目前使用的效果 抗金黄色葡萄球菌效果:氯唑青霉素>苯唑青霉素>阿莫西林>青霉素; 抗大肠杆菌、绿脓杆菌效果:羧苄青霉素>阿莫西林>青霉素。 4、使用剂量:阿莫西林预防量为100kg水加水5g,治疗量为100kg水加10g;阿莫西林+棒酸治疗量为100kg水加3-5g,连续使用4-5天。氨苄西林预防量为1000kg水加100g,治疗量为150g。 5、药物的配伍 阿莫西林可以与硫酸链霉素、庆大霉素、氯霉素及其它半合成青霉素搭配。阿莫西林配合棒酸,可以使抗菌活性提高1000倍,配方比例为4:1。 阿莫西林配合磺胺增效剂(TMP),常用的比例为5:1,增强治疗大肠杆菌的疗效。阿莫西林配合盐酸环丙沙星,增强抗大肠杆菌的效果。此外,还有氨苄西林与盐酸环丙沙星(比例为3:1)、氨苄西林配合硫酸链霉素(比例为1:3)。 6、不能配合使用的药物 ⑴青霉素与四环素类抗生素配合使用,能使青霉素的作用减弱。 ⑵青霉素与氯霉素配合使用,能使青霉素的作用减弱。由于青霉素药物处于最强的对数期时,氯霉素则受到抑制,从而使青霉素作用减弱。 ⑶青霉素不与土霉素、红霉素、万古霉素、卡那霉素、多粘菌素、放线菌素D、庆大霉素配合使用。 ⑷青霉素不要与小苏打、维生素C、磺胺类钠盐、阿托品混合使用。主要是因为酸、碱、氧化剂、重金属盐可以失效。

Ehrlich苏木素染色液

北京吉美生物技术有限公司 Ehrlich苏木素染色液 产品简介: 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需3~6个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。EhrlichE和Delafield苏木素就属于这种。Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖,骨和软骨的染色也推荐使用Ehrlich苏木素染液。 Jimei Ehrlich苏木素染液非常稳定,成熟后密封可保存2年。对核染色质染得很清晰细致,染色时间也稍长,约15~20min。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。 染色原理 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA 双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来不浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

改良Lillie-Mayer苏木素染色液

仅供科研版本号:070505 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 【产品组成】 【保存条件】 室温,避光,12个月 【产品概述】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。 改良Lillie-Mayer苏木素染色液无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris 苏木素染色液。对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后可以不用盐酸乙醇分化,染色时间约5~8min,如果是充分氧化后可染色3~5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色,尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中,常不天青石蓝B液联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。 【染色原理】 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色不染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书 货号:L9406 规格:10ml/100ml 保存:本试剂盒常温保存,复检期至少1年。 注意:环境温度低时,分化液可能会结晶析出,将分化液37℃水浴融化后即可,不影响使用。 产品说明: 苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining ),简称HE染色法,切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 染色过程需要优化,着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多 细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在 老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。 操作说明: 石蜡组织切片的HE染色(以下步骤仅供参考)。 1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,切片。 2.切片用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%乙 醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。 3.苏木素染液染色5-20min(可以根据染色结果和要求调整时间),自来水冲洗。 4.分化液分化30s。 5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。 6.置伊红染液2min。 7.自来水冲洗。 8.常规脱水,透明,封片:95%乙醇(I)1min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min →中性树脂封固,镜下观察。 冰冻切片不用脱蜡,可固定后直接染色,其方法与石蜡切片相同。

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苏木素染色原理

苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色,简称HE 染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用机器广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。苏木素伊红染色试剂盒中,苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成,不含氧.化.汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点:长期保存,不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。 染色原理: 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷

的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后

巴氏染色原理及操作步骤

巴氏染色原理及操作步骤 巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。苏木素染液,细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。分化:苏木素染色之后,用水洗去未结合在细胞上的染液,但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色的分明,把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构,使色素与组织解离,分化不可过度。蓝化:分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,在碱性条件下处于蓝色离子状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝,也可用温水(50度温水最佳)变蓝。EA50染液的酸碱度对于巴氏染色的成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成。伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料,在溶解媒中其发色团是负离子部分,发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合,从而是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色,但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的PH值而改变的,在偏碱环境中,蛋白质的羧基游离增多(带负电),在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多(带正电),磷钨酸在染色过程中,不但作为媒染剂可增加染料的着色力,同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱,实际上是一对缓冲剂,可中和分化及蓝化时可能留下的少量酸或碱,保证染色达到理想效果,其适用于上皮细胞及间皮组织的标本,是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法,该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点。 巴氏染色法将胞核染为深蓝色;鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色,表层不全角化细胞胞质染粉红色,完全角化细胞胞质呈桔黄色;细菌:灰色;滴虫:淡蓝灰色;黏液:淡蓝色或粉红色;中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色;红细胞染粉红色;高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色;腺癌胞质呈灰蓝色。

部分常用抗生素配制

常用抗生素配制 一、试验中抗生素应用的种类: 1.倍他-内酰胺类:(1).青霉素类:如青霉素V、阿莫西林、氨苄西林;哌拉西林针,氨氯西林针、青霉素G针等;(2).头孢类:头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢呋辛酯、头孢克洛、头孢克肟;头孢唑林针、头孢拉定针、头孢曲松针、头孢哌酮针、头孢他啶针、头孢夫辛针等; 2.大环内酯类(红霉素类):乙酰螺旋霉素、麦迪霉素、罗红霉素、琥乙红霉素、阿奇霉素、克拉霉素等; 3.喹诺酮类(含针剂):诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、司帕沙星、帕珠沙星、依诺沙星等; 4.氨基糖苷类:庆大霉素、阿米卡星等; 5.其他类(分子结构各不相同,属于几个小类):甲氧苄啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺嘧啶;林可霉素、克林霉素;呋喃妥因、呋喃唑酮等。还有一大类是四环素类如土霉素、四环素、米诺环素,美满环素等,这类药副作用比较大,现已很少用! 对乙酰胺基酚不是抗生素,他属苯胺类解热镇痛药,主要用感冒引起的发热,头痛,以及痛经,关节痛等。 二、试验中常用抗生素配制 1、氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)

份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 2、羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 3、甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 4、卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml) 溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 5、氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml) 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 6、链霉素(streptomycin)(50mg/ml) 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 7、萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)

HE染色原理

苏木精-伊红染色方法 苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是细胞与组织学最广泛的染色方法。 一、HE染色的基本原理 (一)细胞核染色的原理 细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两边链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 (二)细胞浆染色的原理 细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与pH 值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染我以,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。(三)、二甲苯的作用

烤片后切片进入二甲苯是脱蜡的作用。组织处理和染色后进入二甲苯是透明作用。组织处理的透明是为了石蜡能进入到细胞中去,染色后透明是为了使细胞的折光率与玻璃相同,以便显微镜观察。(四)、酒精的作用 酒精用于苏木精染色前由高浓度至低浓度是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯。 伊红染色以后的酒精由低浓度至高浓度酒精逐渐过度是为了彻底脱去组织中的水份。 (五)、水洗的作用 在脱蜡经酒精处理之后,水洗切片,是为了苏木精染液能更好的进入细胞核中去,使细胞核染色均匀。 染色之后的水洗作用是为洗去未与切片结合的染液。 分化以后的水洗则是为了除去分化液和脱下的染料,中止分化作用。 在伊红染色之后也可以水洗,是为了减少伊红染液进入脱水的酒精中。 (六)分化和蓝化作用 1、分化作用 苏木精染色之后,先用水洗去未结合在切片中的染液。然后用分化液1%盐酸酒精脱去细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附 的染料,这个过程称为染色的分化作用。 2、蓝化作用

Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍

Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明: 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单,操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟,蒸馏水2 分钟, b)对于冰冻切片:蒸馏水2 分钟, c)对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10 分钟以上,蒸馏水洗涤2 分钟,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2 分钟。 2、苏木素(HE)染色对于上述处理好的样品,用苏木素染色5-10 分钟(可以根据染色结果和要求调整时间),用自来水洗去残留的染色液,约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片:95%乙醇脱水2 分钟,换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟;二甲苯透明 5 分钟,换用新鲜的二甲苯,再透明 5 分钟,用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色:如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色,在苏木素染色后,70%乙醇洗涤2 次,每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用

于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次,但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地:国产 提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。 保存:室温避光储存,有效期至少12 个月。 关键词:Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:

十大类药物用药介绍

十大类药物用药介绍 药物, 用药 一、《青霉素类药物》 1、常用的品种:青霉素、氨苄青霉素(氨苄西林)、青霉素Ⅴ、氯唑青霉素、阿莫西林。 2、药物的适应症:对葡萄球菌、链球菌病部分种类较好(氯唑青霉素、苯唑青霉素)。对大肠杆菌、鸡白痢、绿脓杆菌病效果比庆大霉素和卡那霉素差。青霉素Ⅴ耐鸡胃中的酸性,与抗球虫药物配合使用,防治球虫发病后继发细菌病。 3、目前使用的效果 抗金黄色葡萄球菌效果:氯唑青霉素>苯唑青霉素>阿莫西林>青霉素; 抗大肠杆菌、绿脓杆菌效果:羧苄青霉素>阿莫西林>青霉素。 4、使用剂量:阿莫西林预防量为100kg水加水5g,治疗量为100kg 水加10g;阿莫西林+棒酸治疗量为100kg水加3-5g,连续使用4-5天。氨苄西林预防量为1000kg水加100g,治疗量为150g。 5、药物的配伍 阿莫西林可以与硫酸链霉素、庆大霉素、氯霉素及其它半合成青霉素搭配。阿莫西林配合棒酸,可以使抗菌活性提高1000倍,配方比例为4:1。

阿莫西林配合磺胺增效剂(TMP),常用的比例为5:1,增强治疗大肠杆菌的疗效。阿莫西林配合盐酸环丙沙星,增强抗大肠杆菌的效果。此外,还有氨苄西林与盐酸环丙沙星(比例为3:1)、氨苄西林配合硫酸链霉素(比例为1:3)。 6、不能配合使用的药物 ⑴青霉素与四环素类抗生素配合使用,能使青霉素的作用减弱。 ⑵青霉素与氯霉素配合使用,能使青霉素的作用减弱。由于青霉素药物处于最强的对数期时,氯霉素则受到抑制,从而使青霉素作用减弱。 ⑶青霉素不与土霉素、红霉素、万古霉素、卡那霉素、多粘菌素、放线菌素D、庆大霉素配合使用。 ⑷青霉素不要与小苏打、维生素C、磺胺类钠盐、阿托品混合使用。主要是因为酸、碱、氧化剂、重金属盐可以失效。 7、本类药物的残留时间:青霉素、氨苄青霉素2天,阿莫西林5天。 二、《头孢菌素类药物》 1、常用的品种 第一代头孢:头孢拉定、头孢唑啉(仅供注射)、头孢氨苄、头孢噻吩、头孢羟氨苄等。 第二代头孢:头孢孟多、头孢呋辛、头孢替安等。 第三代头孢:头孢噻肟钠、头孢他定、头孢哌酮钠、头孢唑肟、头孢噻呋等。 2、药物的适应症 头孢氨苄用于鸡金黄色葡萄球菌和大肠杆菌病的治疗。头孢呋辛用于

由苏木素氧化原理谈苏木素染液配制过程中的几个问题

由苏木素氧化原理谈苏木素染液配制过程中的几个问题 一、苏木素的氧化反应产物 苏木素 ↓ 氧化苏木素(为需要的产物,染色的成分。氧化分子中一个羟基成为羰基,形成共轭π键) ↓ 过氧化苏木素(其余的羟基进一步被氧化,共轭π键破坏,发色团破坏,失去颜色) 二、苏木素染液配制选用的氧化剂种类、氧化剂使用剂量。 氧化还原半反应和标准电极电位值越大,得电子的能力越强,氧化力越强。 氧化能力弱的氧化剂反应速度慢,升高反应体系的温度以加快反应速度, 越强的氧化剂的反应速度越快,须控制反应体系的温度使反应速度减慢。 2、不同氧化剂的使用剂量 根据苏木素氧化反应式可以计算出氧化1克纯苏木素所需要的不同氧化剂量(理论值)。 C16H14O6 + HgO → C16H12O6 + Hg↓+ H2O 摩尔质量302.28 216.61 质量1g 0.72g 6C16H14O6 + 2NaIO3 → 6C16H12O6 + I2 +6 H2O + 2Na+ 摩尔质量302.28×6 197.9×2 质量1g 0.2g 4C16H14O6 + KMnO4 → 4C16H12O6 + 4H2O + Mn2+ + K+

摩尔质量302.28×4 158.03 质量1g 0.13g 注意:这是理论值,在实际配制染液时,氧化剂的使用量要减少至理论值的1/2量为宜。 理由: (1)、我们使用的氧化剂品质多为分析纯的,含量比较保证,而苏木素为天然染料,含量不是很保证,所以氧化剂需减少用量。 (2)、配制染液时应刻意保留1/3量的苏木素不被氧化,使之在使用过程中再被氧化,令染液耐用。 三、媒染剂的使用 氧化苏木素羰基中的氧原子最外层轨道含有孤对电子,能与Al3+++、Fe3+++等金属离子形成外轨型配合物。氧化苏木素通过金属离子与细胞核内DNA双链外侧磷酸基上带有孤对电子的氧原子形成配位键而使细胞核内的DNA着色。媒染剂的使用不但大大提高了氧化苏木素对DNA 的上染率,也加强了染液的水洗牢度。 媒染剂一般为二价或三价金属的盐或氢氧化物。 常用于苏木素染液配制的媒染剂为KAl(SO4)2·12H2O、FeK(SO4)2·12H2O、NH4Fe(SO4)2·12H2O等,也可以用其他的如Al2(SO4)3·18H2O、AlCl3·6 H2O、 FeCl3·6 H2O等可电离Al3+++ 或Fe3+++的盐作为媒染剂。 四、乙酸的使用 冰乙酸的作用是降低苏木素染液的PH值,增强DNA着色的特异性,减少蛋白质的非特异性着色。 蛋白质分子具有游离的氨基端与羧基端,为两性分子。溶液的PH值高于蛋白质的等电点时,蛋白质羧基端电离时负电,与氧化苏木素的Al3+++ 结合,引起蛋白质的非特异性染色。当溶液的PH值低于蛋白质的等电点时,蛋白质的羧基端不电离,而氨基端以阳离子形式存在,与Al3+++相斥,氧化苏木素不能 与蛋白质结合,减少蛋白质的非特异性染色。 五、苏木精染液常见问题的原因分析及解决方法 1、苏木精染液表面“氧化膜”与沉淀的形成 苏木精染液表面的氧化苏木精与空气中的氧气接触而进一步氧化,氧化苏木精3位羟基被氧化成羰基,羰基氧原子的孤对电子充分暴露在外,更容易进入Al3+++ 的杂化空轨道形成配位键,使过氧化物形成聚合物。苏木素染液表层过氧化物氧聚合物成片层样,形成“氧化膜”,溶液内部的过氧化物聚合物形成沉淀。 解决办法: (1)、避免氧化反应过度引起过氧化苏木精增多。 (2)染液加入丙三醇:丙三醇俗称甘油,丙三醇1、2、3位均连有一个羟基(极性基团),羟基中的H原子带部分正电荷,与氧化苏木精分子中的羟基上的O 原子(带部分正电荷)形成氢键。丙三醇分子占据了氧化苏木精的羟基旁的位置形成“空间阻隔效应”,有效阻断了Al3+++ 与O原子形成配位键,使氧化苏木精分子不能聚合,减少了沉淀和“氧化膜”的产生。 2、苏木精染液染色能力下降过快。 苏木精染液染色能力下降的原因: (1)苏木精染液在使用过程中,因染液中的氧化苏木精浓度逐步降低导致的染色颜色变淡,此属正常现象。 (2)染液中的氧化苏木精进一步被氧化成过氧化物,过失去染色能力。 根据化学反应平衡原理及化学反应速率理论,苏木精染液配制时,反应物浓度逐渐下降,生成物浓度逐渐增加,氧化反应达到了初步的平衡。但在反应体系

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明书

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明书 货号:G3272 规格:2×50ml/2×100ml 保存:RT避光,有效期12个月。 产品内容: 名称 2×50ml2×100ml Storage 规格 试剂A:Weil苏木素A50ml100ml RT避光 试剂B:Weil苏木素B50ml100ml RT 取A、B等量混合即为Weil苏木素染色液,不宜提前配制。 产品说明: 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。 Weil铁明矾苏木素染色液可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义,例如神经纤维受损时,髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 注意: 明矾溶液、分化液、蓝化液均需自备,初次操作我们更推荐G3270试剂盒,该试剂盒已配备所有染色用试剂,节省您的时间。 操作步骤(仅供参考): 1、石蜡切片,脱蜡至水洗。 2、蒸馏水冲洗。 3、入配制好的Weil苏木素染色液,置于温箱或水浴锅染色20min。 4、蒸馏水冲洗。 第1页,共2页

5、用明矾溶液分化,并镜下控制区分正常髓鞘与灰质或变性区域。 6、蒸馏水冲洗。 7、Weil分化液中完成分色(清除背景)。 8、蒸馏水冲洗。 9、滴加Weil蓝化液处理,充分水洗。 10、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 髓鞘黑色 背景无色 注意事项: 1、此试剂盒简便快速,明矾分化这一步很关键,需在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的福尔马林为佳。 3、置于温箱或水浴锅染色时,应注意防止染色液挥发。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作 第2页,共2页

抗生素的配制

常用抗生素溶液 抗生素贮存液a 工作浓度 浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒 氨苄青霉素50mg/ml(溶于水) -20℃20μg/ml60μg/ml 羧苄青霉素50mg/ml(溶于水) -20℃20μg/ml60μg/ml 氯霉素34mg/ml(溶于乙醇) -20℃25μg/ml170μg/ml 卡那霉素10mg/ml(溶于水) -20℃10μg/ml50μg/ml 链霉素10mg/ml(溶于水) -20℃10μg/ml50μg/ml 四环素b 5mg/ml(溶于乙醇) -20℃10μg/ml 50μg/ml a:以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。 b:镁离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基(如LB培养基)。 常用抗生素 氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml) 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)

常见几种三伏贴的配方

常见几种三伏贴的配方 一、慢性阻塞性肺疾病三伏贴配方。 药物组成: 以白芥子、延胡索、甘遂、细辛、生姜作为基本处方,可结合既往的临床经验和地域特点等进行加减。配伍加减常用的药物有麝香、麻黄、肉桂、小茴香等。 药材炮制: 白芥子、延胡索、甘遂和细辛采用道地药材,且均用生药,其中生白芥子可以加强对其他药物的透皮吸收作用。由于白芥子外用可使皮肤发热、发红,甚至起泡。临床上可以适当调整白芥子在药物中的配伍比重,既可以保证临床疗效,又可以保障用药的安全性。 贴敷时机: 一般在每年夏季,农历三伏的初、中、末伏的第一天进行贴敷治疗(如果中伏为20天,间隔10天可加贴1次)。在三伏期间也可进行贴敷,每两次贴敷之间间隔7~10天。 疗程: 连续贴敷3年为一疗程。疗程结束后,患者可以继续进行贴敷,以巩固或提高疗效。 贴敷部位: 肺俞是冬病夏治穴位贴敷的基本穴位,主要配伍穴位有膻中、大椎、定喘、膏肓,临床应用中可以结合中医辨证论治选用心俞、膈俞、肾俞、脾俞等穴位。 二、支气管哮喘三伏贴配方。 药物组成:

黄芪、苍术、沉香、肉桂、补骨脂等。 xx驱寒方: 白芥子、细辛、甘遂、干姜、仙灵脾、延胡索、小茴香。 药材炮制: 上述药物均采用道地药材,药物均采用生药。药物用量按一定比例确定。 实施时间: 头伏开始,隔7天贴1次,至末伏止,连贴3年。 实施方法虚贴方: 属肺虚、脾虚、肾虚患者选用。选择肺俞(双侧)、脾俞(双侧)、肾俞(双侧)、心俞(双侧)、定喘(双侧)。肺虚者加太渊穴(双侧),脾虚者加足三里(双侧),肾虚者加太溪(双侧)。 xx驱寒方: 脾肾阳虚患者可选用。选择肺俞(双侧)、脾俞(双侧)、肾俞(双侧)、膈俞(双侧)、气海(双侧)。 三、小儿哮喘三伏贴配方。 药物组成: 白芥子、延胡索、甘遂、细辛、肉桂,其比例为4∶4∶2∶2∶1。 贴敷时机: 一般在每年三伏天进行,每两次贴敷之间间隔两天,1个疗程共贴10次。 疗程: 每年贴敷1个疗程,连续贴敷3年。

苏木精苏木素染色液溶液配制方法

华越洋苏木素(苏木精) 染色液的配制 各类溶液的配制方法如下: 1) Harry`s苏木素苏木素1g 无水酒精10ml 硫酸铝钾20g蒸馏水200ml氧化汞冰醋酸8ml分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌至溶液为深紫色,立即冷却,恢复至室温后过滤备用。 (2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素无水酒精20ml硫酸铝钾5g蒸馏水 330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸10ml 分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水溶解硫酸铝钾,然后两液混合后,依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。 (3) Mayer`s苏木素苏木素100mg 蒸馏水100ml碘酸钠20mg硫酸铝铵5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后,依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛,过滤后备 (4)Ehrlich氏苏木素(1886) 苏木素1g 无水酒精50ml 甘油50ml 硫酸铝钾 蒸馏水50ml 冰醋酸5ml 将苏木素溶于无水酒精里,硫酸铝钾溶于蒸馏水中,然后所有的试剂都加在一起,充分搅拌均匀后,放于窗台上阳光充足的地,让其慢慢氧化成熟,大约需四个星期,才可使用。该液量种很好的细胞核染色液,用它染后,细胞核染色清晰,不易过染。对于用酸脱钙组织细胞核的染色,该试剂优于其它各种苏木素。这种自然氧化成熟的苏木素,可长期使用,不会变质。但染色时间较长,需要20分钟以上。 如需急用而苏木素又未成熟时,该液可加入20-30mg的碘酸钠,以促使其迅速氧化成熟,但这试剂配成后,就不是原来的苏木素,不能长期使用,但起码可用半年左右。 (5)Weigert氏铁苏木素 A液:苏木素1g 无水酒精100ml 将苏木素溶于酒精,让其慢慢氧化成熟,约四周以后,便可以使用,或者用成熟的10%

常用苏木素几种配方与染色结果的比较

解剖学杂志 CHINESE JOURNAL OF ANATOMY 2000 Vol.23 No.4 P.393-394 常用苏木素几种配方与染色结果的比较 李文 张赛霞  苏木素是组织切片最常用的细胞核染料,H.E染色中配方甚多,染色效果也有差异,影响染色的因素颇多,未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作用,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。如何优化三者的比例和判断染液的有效期,使苏木素染色达到最佳效果,为此我们进行了以下探讨。 1方法与结果 1.1Ehrlich苏木素染液这是一种自然氧化成熟的苏木素染液,比较合理的配方是:苏木素5g,无水乙醇200ml,硫酸铝钾20g,甘油200ml,蒸馏水100ml,冰醋酸20ml。按此方配好的苏木素染液盛人玻璃瓶内,瓶口盖上数层纱布,放在有阳光照射的台面上,六周后成熟。此种苏木素染液经久耐用,细胞核染成深蓝色,不易褪色,我室在1958年制作的组织切片至今仍在使用。未见褪色。Ehrlich苏木素溶液是我室常备染液,每年夏季配置一次,使用一年即换新液。 1.2Harris苏木素染液是一种添加氧化剂,使苏木素快速成熟的染液,比较合理的配方是:苏木素3g,无水乙醇20ml,硫酸铝钾20g,氧化汞1g,蒸馏水500ml,冰醋酸 20ml。此染液配置好后一周至三个月内使用,染色效果最好,不能久存,细胞核染呈紫蓝色。 1.3Carazzi苏木素染液这是近年来,我室使用较多的一种苏木素染液,用碘酸钠代替氧化汞作为氧化剂,使苏木素快速成熟,安全可靠,节约染料,染色效果优于前二种染液,比较合理的配方是,苏木素1.5g,无水乙醇5ml,硫酸铝钾20g,碘酸钠0.2g,蒸馏水400ml,甘油100ml。制备方法是;苏木素用5ml无水乙醇溶解,蒸馏水溶解钾明矾(加温至90度,勿煮沸),将溶解的苏木素和碘酸钠同时加人钾明矾水溶液内,流水冷却至室温,再加甘油,震荡1小时后即可使用,染液可保用6个月。细胞核染呈鲜蓝色,与伊红对比鲜明亮丽,特别对于脱钙骨和长时间甲醛固定的组织染色效果同样满意。 2讨论 2.1经过我们多年的实践,不断探索认为,上述三种苏木素染液的配方比例较为合理,既不会使苏木素过度氧化,给染色过程增添麻烦,也不会浪费试剂,而使苏木素的染色达到最佳效果。 2.2配制苏木素染液所用的氧化剂、媒染剂最好用分析纯(AR),纯度高、杂质少,才能保证苏木素的染色效果。 2.3新配方与原配方比较,主要是苏木素和硫酸铝钾的份量稍有增减,这并不影响两者结合后所形成的色精。是否改变染液的PH值,有待进一步探讨。我们认为过量的硫酸铝钾不但造成试剂的浪费,且容易使染液产生沉淀物。 2.4苏木素从配制→成熟→失效,有一个过程,如何判断其是否成熟、何时失效?

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