三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进
作者简介:冯亮(1980-),男,正攻读药剂学专业的博士学位。3通讯作者(C orrespondent author ),jxh1013@https://www.wendangku.net/doc/4012555002.html,
三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进
冯 亮,蒋学华3,叶利民
(四川大学华西药学院,四川成都610041)
摘要:目的 用薄层扫描法(T LSC )和高效液相色谱法(HP LC )测定三七总皂苷中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参皂苷Rg 1(Rg 1)和三
七皂苷R 1(R 1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法
T LSC 法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs =535nm ,λR =460nm ;HP LC 法用C 18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0min (25∶75)～15min (45∶55);流速1.5ml ?min -1;测定波长200nm 。结
果 T LSC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HP LC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、
Rg 1、R 1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。结论 HP LC 法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。其准
确度和测定结果的稳定性均优于T LSC 法。
关键词:薄层扫描法;高效液相色谱法;三七总皂苷;人参皂苷Rb 1;人参皂苷Rg 1;三七皂苷R 1中图分类号:R927
文献标识码:A
文章编号:1006-0103(2006)02-0187-03
Improvement of determination method of the main components in Panax notoginseng saponions
FE NGLiang ,J I ANG Xue -hua 3,YE Li -ming
(West China School o f Pharmacy ,Sichuan Univer sity ,Chengdu 610041,China )
Abstract :OBJECTIVE T LSC and HP LC were adopted to determine the contents of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions.And results of the tw o methods were compared ,which could provide the basis of revising the determination method in quality standard.METH ODS T LSC has been established with the upper layer of the mixture of butanol -ethyl acetate -H 2O (4∶1∶5)as developing s olvent ,and 27%sulphuric acid ethanol s olution as coloring reagent ,λs =535nm ,λR =460nm.HP LC was adopted with C 18column ,acetonitrile -H 2O (25∶75at 0min and 45∶55at 15min ,linear gradient elution )was used as m obile phase and detective wave 2length was set at 200nm.The flow rate was 1.5ml ?min -1.RESU LTS The content of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions determined by T LSC was 31.07%,23.30%and 9.35%;and that determined by HP LC was 30.46%,22.65%and 5.83%,respectively.CONC L USION HP LC could separate and determine various components in Panax notoginseng saponions and determine them.Its accuracy and stability are better than T LSC.
K ey w ords :T LSC ;HP LC ;Panax notoginseng saponions ;G insenoside Rb 1;G insenoside Rg 1;Sanchinoside R 1C LC number :R927
Document code :A
Article I D :1006-0103(2006)02-0187-03
三七是五加科人参属植物Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen 的干燥根;含有皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分。其中三七总皂苷(Panax noto 2
ginseng saponions )为其主要的有效成分,具有活血化
淤的功效。三七总皂苷含有人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 、R f 、Rg 1、Rg 2、Rh 1和三七皂苷R 1、R 2、R 3、R 4、R 6等20余种皂苷成分,均属达玛烷型(Dammarane type )四环三萜皂苷。其中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参
皂苷Rg 1(Rg 1)是三七总皂苷中含量最高的两个成分,而三七皂苷R 1(R 1)则是三七总皂苷的特征化合物[1]。对于三七总皂苷原料及其口服制剂,文献[2]规定采用比色法测定总皂苷含量。而比色法在操作过程中存在操作烦琐、影响因素多及重复性差等问题[3],尤其是不能分别测定三七总皂苷中各主要成
分的含量。为此,特建立了薄层扫描法(T LSC )测定
三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1和R 1的含量[4];同时建立了HP LC 含量测定法,并与T LSC 法进行比较,为重新修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。
1 实验部分
1.1 仪器与试药
LC -9A 高效液相色谱仪,SPD -6AV 紫外检测
器(日本岛津);CS -930薄层扫描仪;Dikma Diam on 2sil C 18色谱柱(200mm ×4.6mm ,5μ
m ,美国Dikma 公司);硅胶G 板(大连化物所)。Rb 1、Rg 1和R 1对照
品(中国药品生物制品检定所);三七总皂苷(云南特
安钠制备厂);乙腈(色谱纯,美国Dikma 公司);水(超纯水);其余试剂均为分析纯。1.2 T LSC 法1.2.1 含量测定 取三七总皂苷样品约50mg ,精
华西药学杂志
W C J ?P S
2006,21(2):187～189
密称定后置25ml 量瓶中,加甲醇溶解定容,摇匀。用干燥滤纸滤过,弃初滤液,精密量取续滤液2ml ,置10ml 量瓶中,加甲醇定容,摇匀,作为供试品溶液。另取经过60℃真空干燥3h 的对照品Rb 13mg 、Rg 13mg 和R 11mg ,精密称定后置同一25ml 量瓶
中,加甲醇溶解定容,摇匀,作为对照品溶液。吸取供试品溶液2μl 、对照品溶液2、4μl ,分别交叉点于同一薄层板上(使用前105℃活化约30min ),以正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层液为展开剂;27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂;l05℃烘至斑点清晰,
取出放冷至室温。测定波长λs =535nm ,λR =460
nm ,SX =4,反射式锯齿扫描,灵敏度中。取峰面积,采用外标法分别计算样品中Rb 1、Rg 1和R 1的含量。1.2.2 线性范围的考察 分别取3种对照品适量,精密称定后置1ml 量瓶中,加甲醇溶解,定容;分别
精密吸取0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μ
l 点于同一薄层板上。按“1.2.1”项下方法展开,显色,测定峰面积。将峰面积对点样量进行线性回归。回归方程分别为:A Rb1=2.097×103C +1.107×104(r =0.9914),点样量在2.30～36.80μg 范围内,线性关系良好;A
Rg1=6.549×103C +1.970×104(r =0.9921),点样量在1.25～20.00μg 范围内,线性关系良好;A R1=2.211×103
C +1.130×104
(r =0.9964),点样量在1.75～28.00μg 范围内,线性关系良好。
1.2.3 峰面积检测精密度 分别精密吸取3种对照品溶液2μ
l ,点于薄层板上,按“1.2.1”项下方法展开,显色,测定峰面积。对同一待测斑点连续重复扫描测定5次。峰面积的RSD 为1.04%～1.85%,表明峰面积检测精密度良好。1.2.4 板内精密度 精密吸取3种对照品溶液,在同一块薄层板上点5个点,每次点样2μl 。按“1.2.1”项下方法展开,显色,测定峰面积。峰面积的RSD 为6.34%～7.30%。RSD 值大于5%,可见板内精密度低,故需多取几个样品点样测定,并取平均值。1.2.5 板间精密度 精密吸取3种对照品溶液,分别在5块薄层板上点样,每次点样2μl 。按“1.2.1”项下方法展开,显色,测定峰面积。峰面积的RSD 为9.54%～14.85%。RSD 大于5%,可见板间精密度低,故在测定时必须保持色谱条件的稳定并使用随行对照。1.2.6 方法精密度 精密称取三七总皂苷样品5份(每份约50mg ),按“1.2.1”项下方法制备供试品溶液。展开,显色,测定每份样品中Rb 1、Rg 1和R 1的含量,其RSD 为7.74%～10.65%。3种组份含量的RSD 均大于5%(n =5)。表明方法精密度低。1.2.7 显色稳定性考察 分别精密吸取3种对照
品溶液2μl ,点于薄层板上。按“1.2.1”项下方法展
开,显色,对待测斑点于显色后0、1、2、3h 测定峰面积。其RSD 为1.39%～4.20%。表明三七总皂苷的3个主成分显色后的斑点在3h 内基本稳定。1.2.8 回收率试验 精密称取已测定含量的样品9份,分别加入相应的对照品适量。按“1.2.1”项下方法展开,显色,测定其含量并计算回收率。测定结果见表1。3种成分高、中、低3个浓度的回收率均在91%～105%之间。
表1 T LSC 法的回收率测定结果(μg ,n =3)
T able 1 R esults of recovery test of T LSC(μg ,n =3)C om ponents Original Added Recovered Recovery (x ±s )/%Rb 1
low 6.900 3.45010.384100.99±6.07middle 6.900 4.60011.43998.67±5.27high
6.900 6.90013.6149
7.30±12.32Rg 1
low 3.750 1.250 5.000100.00±10.45middle 3.750 2.500 6.08993.56±6.17high
3.750 3.7507.43698.29±6.31R 1
low 5.250 1.750 6.85291.54±7.69middle 5.250 3.5008.73799.63±1.37high
5.250
5.250
10.759
104.93±5.91
1.3 HP LC 法
1.3.1 含量测定 除溶解和稀释所用溶剂改为蒸馏
水外,其余操作均按照“1.2.1”项下方法制备供试品溶液和对照品溶液。分别吸取供试品溶液和对照品溶液各20μl ,注入液相色谱仪分析。使用的色谱条件为:Dikma diam onsil C 18分析柱(200mm ×4.6mm ,5μm );流动相为乙腈-水,采用线性梯度洗脱,0min (25∶75)～15min (45∶55);流速1.5ml ?min -1;测定波长200nm 。所有组分在15min 内出峰(图1)。以外标法用峰面积计算样品中Rb 1、Rg 1和R 1的含量。
图1 三七总皂苷(A)、三七皂苷R 1(B)、人参皂苷R g 1(C)、人参皂苷
R b 1(D)和空白对照(E)的色谱图
Fig 1 HP LC chrom atograms of Panax notoginseng saponions solution
(A),sanchinoside R 1solution(B),ginsenoside R g 1solution(C),ginsenoside R b 1solution(D)and blank solution(E)
1.3.2 线性关系 取3种对照品适量,精密称定后
置同一25ml 量瓶中。用蒸馏水定容,然后依次作等倍稀释。分别吸取各稀释液20μl ,注入液相色谱仪,测定不同浓度对照品的峰面积。以色谱峰面积对浓度(mg ?ml -1)进行线性回归,得各组分的回归
8
81 华西药学杂志第21卷
方程:A Rb1=2.932×106C+2.200×103(r= 0.9999),线性范围1.1～280.0μg?ml-1;A Rg1= 3.645×106C+9.712×103(r=0.9999),线性范围1.2～304.0μg?ml-1;A R1=3.094×106C-1.693×103(r=0.9999),线性范围1.5～380.0μg?ml-1。1.3.3 精密度 取“1.3.1”项下对照品溶液,于测定条件下进样,重复5次。以3种组分峰面积,分别计算其浓度,RSD为0.58%～0.91%。3种组分的RSD均小于1.0%(n=5),表明进样精密度高。
1.3.4 方法精密度 分别精密称取三七总皂苷原料5份。按照“1.3.1”项下方法测定含量,其RSD 为0.34%～1.04%。3种组分的RSD均小于1.5% (n=5)。表明方法精密度高。
1.3.5 加样回收率试验 分别精密吸取3种对照品溶液各9份,分成高、中、低3组。再分别精密加
表2 HP LC法的回收率实验结果(μg,n=3)
T able2 R esults of recovery test of HP LC(μg,n=3)
Ingredients Original Added Recovered Recovery(x±s)/% Rb1low0.1400.0560.196100.00±0.86 middle0.1400.1120.253100.89±1.33
high0.1400.1680.309100.60±0.44
Rg1low0.1520.0410.19297.56±0.40
middle0.1520.0820.236102.44±0.32
high0.1520.1230.275100.00±0.59
R1low0.1280.0110.140109.09±1.07 middle0.1280.0220.151104.55±0.97
high0.1280.0330.16096.97±0.33
入已知量的三七皂苷原料,混匀。按“1.3.1”项下方法测定其含量,再计算回收率(表2)。3种成分高、中、低3个浓度的回收率在97%～110%之间。
1.4 T LSC法与HP LC法的比较
1.4.1 T LSC法与HP LC法测定结果的比较 用T LSC法与HP LC法测定同一批三七总皂苷样品中各组分的含量,测定结果见表3。
表3 T LSC法与HP LC法的测定结果比较
T able3 Comp arison of results determined by T LSC and HP LC
N o.
Rb1/%
T LSC HP LC
Rg1/%
T LSC HP LC
R1/%
T LSC HP LC 129.3030.6424.0122.858.96 5.77
231.9630.3323.7622.799.69 5.83
330.4330.4224.5922.3410.08 5.91
432.1530.3322.1422.699.44 5.72
531.4830.5921.9822.568.58 5.93
X31.0730.4623.3022.659.35 5.83
RSD 3.81%0.48% 5.02%0.90% 6.33% 1.54%对两种方法所得结果进行双侧t检验,T LSC法和HP LC法测得的人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1含量无显著性差异(P>0.05),而三七皂苷R1含量则有显著性差异(P<0.05),T LSC法测得值明显偏高。
1.4.2 方法学比较 将T LSC与HP LC的方法学考察结果进行比较(表4)。从表4可知:T LSC法的灵敏度、线性范围、精密度、回收率等均低于HP LC法。2 讨论
用T LSC法测得的三七皂苷R1含量一般在9%以上,而HP LC法测得值在6%左右,其原因是T LSC 法不能有效地分离三七皂苷R1与人参皂苷Rd两种成分[5],致测定结果偏高。而HP LC法能够将其有效分离并测定,结果也准确。
T LSC法操作烦琐,影响因素很多,测定条件不易控制,结果重复性差,而HP LC法测定条件容易控制,测定所需时间短,测定的灵敏度、线性范围、精密度、回收率均优于T LSC法。用HP LC梯度洗脱同时测定三七总皂苷中3种主要成分,简便易行。样品整个分析过程在15min内完成,进样间隔3～5min 即可达平衡。
表4 T LSC法与HP LC法的方法学考察结果(x±s)
T able4 R esults of methodological inspect for T LSC and HP LC(x±s)
Items
T LSC
Rb1Rg1R1
HP LC
Rb1Rg1R1
Linear range/mg 2.30-36.80 1.25-20.00 1.75-28.000.02-5.600.24-6.080.03-7.60
r0.99140.99210.99640.99990.99990.9999
RSD/%8.617.7410.650.910.760.58
Recovery low100.99%±6.07%100.00%±10.45%91.54%±7.69%100.00%±0.86%97.56%±0.40%109.09%±1.07% middle98.67%±5.27%93.56%±6.17%99.63%±1.37%100.89%±1.33%102.44%±0.32%104.55%±0.97% high97.30%±12.32%98.29%±6.31%104.93%±5.91%100.60%±0.44%100.00%±0.59%96.97%±0.33%
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收稿日期:2005-08
981
第2期冯 亮,等。三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进
云南省不同产地三七皂苷含量的比较
文山学院学报 Vol. 26 No. 6Dec. 2013 8 第 26 卷第 6 期2013 年 12 月JOURNAL OF WENSHAN UNIVERSITY 云南省不同产地三七皂苷含量的比较 孙玉琴1，向飞军2，曾 江1，刘云芝1，朱云飞1，陈昱君1，王朝梁1* （1.文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.康美药业股份有限公司，广东 普宁515300） 摘要：对云南省不同产区的三七取样，采用HPLC 法测定人参皂苷Rb 1、Rg 1和三七皂苷R 1的含量，从 三七皂苷含量变化角度探索不同产地三七的种植适应性。结果表明，来自不同的8个县，11个地点的三七样品中，皂苷含量（R 1+ Rg 1+ Rb 1）最高的是文山州丘北县腻脚乡，皂苷含量达10.84%，不同产地三七样品之间的皂苷含量有较大差异，统计学分析可以达1%的极显著水平，但11个地点的三七样品皂苷含量均高于国家相关标准的要求。 关键词：三七；不同产地；皂苷含量 中图分类号：R282.71 文献标识码： A 文章编号：1674-9200（2013）06-0008-03收稿日期：2013 - 07 - 04 基金项目：云南省中药现代化科技产业基地项目“三七种植新区评价及栽培技术优化和新型育苗模式研究与示范”（2012CG024）。 作者简介：孙玉琴（1975 -），女，吉林临江人，文山学院文山三七研究院副研究员，硕士，主要从事三七栽培育种研究。通信作者：王朝梁（1965 -），男，云南文山人，文山学院文山三七研究院研究员，主要从事三七栽培及营养研究，E-mail：1010816954@https://www.wendangku.net/doc/4012555002.html,。 三七Panax notoginseng （Bruk.） F. H. Chen 为五加科人参属植物，是我国特有的传统名贵药材。近年来由于三七在心脑血管方面的独特疗效越来越被人们所认可，需求量逐年增加。三七栽培对环境要求比较特殊，分布范围很小，其分布仅局限于北纬23°30′附近的中高海拔地区，主要为云南省文山州境内［1］。文山州是公认的三七道地产区，但是由于受连作障碍的影响，文山州适宜种植三七的土地资源已十分紧缺［2］，目前种植户已经难以在文山州内的三七种植适宜区内找到基础条件较好的、成规模的种植地块，三七的种植区开始拓展到文山州周边的昆明、红河、曲靖等地区，最远的甚至到了大理、保山等滇西地区。三七种植外移后，对其有效成分含量影响的相关研究至今未见报导，笔者通过测定云南省境内的11个不同三七栽培地点的三七样品，了解不同种植地点对三七有效成分含量的影响，为云南省合理规划三七种植区域提供依据。 1 材料与方法 1.1 样品来源 在三七收获期收集11个不同地点的三年生三七，每个点收集大小相同的10株样品，清洗后取 主根部分干燥，干燥后的三七规格均为40头三七，粉碎后测定。来自于文山州的样品3个，分别是：1号样品（砚山县者腊乡）、2号样品（马关县仁和乡）、3号样品（丘北县腻脚乡），来自于红河州的样品7个，分别是：4号样品（建水县官厅镇）、5号样品（石屏县牛街镇）、6号样品（建水县普雄乡）、7号样品（屏边县新华乡）、8号样品（蒙自市十里铺乡）、9号样品（个旧市卡房镇）、10号样品（开远市李子凹村），来自玉溪市红塔区的样品1个，为11号样品。1.2 皂苷含量测定 采用HPLC 含量测定方法［3］，测定部位为三七主根。仪器：岛津Lc-10AT vp 高效液相色谱仪，Shim-Pack VP-ODS 250×4.6色谱柱，SPD-10A vp 紫外检测器，Class-VP 工作站控制处理，电子分析天平SHIMADZU AX200（日本岛津），CQ-250超声波清洗器（中船七院七二六研究所）。试剂：CH3CH （色谱纯）、CH3CN（色谱纯）均购自sigma 公司，标准品（人参皂苷Rg 1、Rb 1、三七皂苷R 1）均购自中国药品生物制品检定所。样品皂苷含量为Rg 1、Rb 1、R 1之和表示。1.3 数据统计 采用DPS 统计软件处理［4］。
三七总皂苷最新药理作用研究
三七总皂苷最新药理作用研究 摘要：三七总皂苷是三七的主要有效成分，研究表明三七总皂苷在中枢神经系统、心脑血管系统、血液系统、免疫系统以及抗纤维化、抗衰老、抗肿瘤等方面具有广泛而显著的药理理活性。随着研究的不断深入近年来又发现一些新的药理活性，同时也对其作用机制做了深入研究。现对三七总皂苷最新药理作用研究作一综述。 关键词：三七总皂苷(PNS)；药理作用 三七为五加科人参属植物三七[Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen] 的干燥根及根茎，性味甘，微苦，温，入肝、胃经，具有散淤止血、消肿止痛之功效[1]。三七含有三七皂苷、黄酮、三七素、三七多糖等活性物质。三七总皂苷（PNS）是三七主要有效成分，含量8-12%，其结构主要是达玛烷型20（S）-原人参二醇型（ppd）和20（S）-原人参三醇型（ppt）四环三萜皂苷[2]。国内外学者对PNS 进行了一系列研究，揭示了其具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板凝集、延长凝血时间、降血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化等药理作用。为了了解其最新的研究情况，现对近三年来PNS 最新研究进展作一简要概述。 1抗抑郁样作用 付珊等[3]利用强迫游泳实验与悬尾模型实验这两个经典模型对三七总皂苷进行了初步的抗抑郁活性筛选，在所创造的压迫环境中小鼠表现出“对强压环境适应的失败”和“行为绝望和扭曲的状态”。实验发现10 mg /kg 剂量组与空白相比都能够显著降低小鼠强迫游泳和悬尾的不动时间。表明PNS可能具有一定的抗抑郁活性，PNS 可能导致在中枢神经系统中5 -H T 和N E 的增加，影响多巴胺合成或分解。 2对骨折愈合的作用 杨军等[4]研究发现PNS 可以缩短骨折愈合时间，提高骨痂质量，具有促进骨折愈合的作用，其潜在的效应机制可能是降低全血黏度及血浆粘度，改善血液流变性。PNS 对胫腓骨骨折[5]和Colles 骨折[6]能明显减轻肿胀疼痛，促进骨折愈合及功能康复，提高总有效率。刘东宁等[7]探讨了低氧诱导因子-1α在骨折愈合过程中的表达及PNS 的干预作用，结果PNS 可上调骨折愈合过程中骨痂组织低氧诱导因子-1α (HIF-1α) 的表达，改善骨折部位的血液供应，促进骨折愈合。
实验六 异烟肼片的质量分析
实验六异烟肼片的质量分析 实验目的： 1、掌握溶出度的测定方法及溶出量的计算。 2、掌握溴酸钾法测定异烟肼的原理与操作。 3、掌握容量法测定药物片剂的含量计算方法。 4、掌握滴定度、片剂取样量、标示量的概念与计算。 5、掌握容量仪器的正确操作。 实验原理： 1、溶出度是指药物从片剂或胶囊剂等口服固体制剂中溶出的速度和程度。溶出度测定法是将某种固体制剂的一定量分别置于溶出度仪的烧杯中，在（37±0.5）℃恒温下，在规定的转速、溶剂中依法操作，在规定的时间内测定其溶出的量. 2、异烟肼在强酸性介质中可被溴酸钾氧化为异烟酸和氮气，溴酸钾被还原为溴化钾，终点时微过量的溴酸钾可将甲基橙指示剂氧化，使粉红色消失而指示终点。 实验器材： 试药：盐酸、甲基橙指示剂、溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）、异烟肼片等 仪器：溶出度测定仪、分光光度计、量筒、容量瓶、酸式滴定管、锥形瓶。 实验内容与方法： 一、性状 本品为白色片。含异烟肼（C6H7N3O）应为标示量的95.0%~105.0%。 二、溶出度检查 取本品，照溶出度测定法，以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，经30分钟时，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液适量，用水定量稀释制成每中含10～20μg的溶液，照分光光度法，在263nm的波长处测定吸收度，按C6H7N3O的吸收系数（E1%1cm）为307计算出每片的溶出量。限度为标示量的60%，应符合规定。 三、含量测定 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于异烟肼0.2g），置100ml量
瓶中，加水适量，振摇使异烟肼片溶解并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液25ml，加水50ml，盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）缓缓滴定（温度保持在18～25℃）至粉红色消失。每1ml溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于3.429mg的C6H7N3O。 实验注意事项： 1、指示剂褪色是不可逆的，滴定过程中必须充分振摇，以避免滴定剂局部过浓而引起指示剂提前褪色，可补加1滴指示剂以验证终点是否真正到达。 2、过滤前必须充分振摇，使异烟肼完全溶解。 3、过滤用漏斗、烧杯必须干燥，弃去初滤液。 实验报告： 实验结束后，书写实验报告。 实验指导要点: 1、滴定终点时，过量1滴的溴酸钾与滴定反应生成的溴化钾在酸性溶液中形成溴，氧化破坏指示剂的呈色结构，使其红色褪去。由于指示剂褪色是不可逆的，故在滴定过程中必须充分振摇，以避免由于滴定剂局部过浓引起指示剂提前褪色，可在指示剂褪色时再补加1滴以验证终点是否真正到达。 2、滴定反应的计量关系与滴定度计算。 3、进一步强调容量分析的称量、定量稀释、定量转移和滴定等的正确操作。
比色法测定总皂苷含量
比色法测定总皂苷含量 1、仪器 紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发器、大孔树脂柱(内径0．8 cm，长20 cm)。 试剂 无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯；大孔树脂 DM-301、对照品、洋金花药品。 2、方法 2.1 对照品溶液的制备 取对照品 10 mg,加甲醇溶解定容至 10 ml，制成 1 mg／ml对照品溶液。 2.2供试品溶液的制备 取药材粉末(过4号筛)约0．2 g，准确称定，置于150 ml具塞锥形瓶中。精密加入50 ml 甲醇后，准确称重。浸泡60 min，超声提取30 min，再次称重，补加甲醇至超声前重量。过滤，精密移取续滤液25 ml于蒸发皿中，水浴蒸发至干，用5 ml水溶解残留物，所得溶液缓缓通过已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1：5)，以水50 ml洗脱，弃去水液，之后再以50 ml 95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干。用20 ml水分次将残留物溶解转移至60 ml分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取(4×20 ml)，合并正丁醇层，减压蒸干。残留物用70％甲醇溶解转移至10 ml量瓶中，定容，摇匀，即得。 2．3测定波长的选择 精密移取1．5 ml的对照品及l ml供试品溶液，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛一冰醋酸(临用新配)0．2ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15 min后流水冷却 lO min。加冰醋酸5 ml，摇匀。立即在紫外分光光度计于400～800 nm波长下扫描，同时空白溶液作参比。对照品及供试品的最大吸收波长均在475 nm，故选取475 nm为检测波长。 2．4线性关系考察 精密量取对照品溶液0．60，1．50，2．40，3．30，4．20 ml，置具塞试管中，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛-冰醋酸(临用新配)O．2 ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15min后流水冷却10 min。各加冰醋酸5 ml，摇匀，以同法平行处理的空白溶剂为空白，在475 nm处测定吸光度。以对照品质量c(mg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，使用软件OriginPro 7．0进行回归分析，得到回归方程为：A=0．007 4+1．120 83c, r=0．999 97。在0．096—0．672 mg内线性关系良好。 2．5精密度试验 精密吸取对照品溶液1．5 ml，依“2．4”项下方法显色测定吸收度，连续测定5次，结果RSD为0．254％，说明仪器的测试性能良好。 2．6稳定性试验 取对照品和样品溶液，依“2．4”项下方法操作，按不同时间测定吸光度，结果见表1。2．7样品含量测定 取供试品溶液6份，每份精密吸取80 μ L，按“2．3”项的方法显色后，在540nm测定吸光度，计算样品含量。 2．8加样回收率试验 取供试品溶液8份，每份精密吸取80μL，加入0．2mg／mL齐墩果酸溶液50 u I。，按“2．3”项的方法显色后，在540hm测定吸光度，计算加样回收率。
三七总皂苷对心脑血管的药理作用研究
三七总皂苷对心脑血管及中枢神经系统的药理作用研究 【摘要】三七具有滋补强壮,活血化瘀,消肿止痛等功效。三七总皂苷是中药三七的主要成分,具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板凝集、延长凝血时间、降血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化等药理作用。目前主要集中在其对心脑血管作用的研究。本文主要综述我国这几年对这一药理作用的研究。 关键字三七总皂苷（PNS）心脑血管药理作用中枢神经系统 我国名贵中药三七为五加科人参属植物三七Panax notoginseng (Burk.)F. H. Chen的根茎,具有滋补强壮,活血化瘀,消肿止痛等功效。三七总皂苷(PNS)是从中药三七中提取的有效活性成分,主要含三七皂苷、黄酮、蛋白氨基酸及非蛋白氨基酸、多糖、蛋白、甾醇、无机物、挥发油和油脂等成分[1]。现就PNS对心、脑血管的药理作用及其作用机制做一综述。 1 对心血管系统的影响 三七药理研究的一个重点是其对心血管系统的作用,三七皂苷被 认为是主要活性成分,在此基础上已开发了三七冠心宁、血塞通等心 血管疾病治疗药物。 1.1降低心肌耗氧量,改善心肌缺血三七制剂能扩张冠脉，增加冠脉 血流量, PNS能增加心肌营养血流量,改善心肌微循环,明显降低心肌 耗氧量[2]; PNS还被证明是三七治疗缺血性心脏病的基础[3]，其机理可 能与其非选择性钙拮抗作用和抗氧化作用有关。于泽等[4]观察了三七 五参汤对心肌缺血损伤的保护作用及其与HSP70心肌表达的关系,发 现三七五参汤和热休克预处理均能保护缺血心肌,这种保护作用可能 与HSP70表达有关。 1.2抗心律失常PNS对几种实验性心律失常模型(氯仿诱发的小鼠心 室纤颤、氯化钡和乌头碱诱发的心律失常)均有明显对抗作用,其作用 机制可能通过拮抗钙的作用而PNS能非竞争性对抗异丙肾上腺素加速 心律作用,且因此减慢心律作用不为阿托品抑制,提示其抗心律失常 作用并不是通过竞争性阻断肾上腺素β-受体或兴奋M-胆碱受体所致, 而是与心肌的直接抑制有关[5]。Rbl和Rgl对大鼠心肌缺血再灌注所 致心律失常均有保护作用其效应与SOD相似,提示其作用机制可能与 自由基清除有关;Rbl和Rgl亦可对抗哇巴因所致豚鼠室早、室速和室 颤作用[6]。 1.3抗动脉粥样硬化(AS)的作用: 李韬等[7]观察三七粉对饲料所致兔 实验性动脉粥样硬化的影响。结果高脂血症对照组动物主动脉壁出现 明显动脉粥样硬化斑块而高脂血症治疗组动物主动脉内膜病变轻微, 未见明显动脉粥样硬化斑块形成。提示三七能抑制或减轻动脉粥样硬 化病变的发生和发展。以三七等为主要成分的复方血栓通胶囊具有扩 张细动脉和细静脉的口径,改善微循环,增加组织的血流灌注量,延长 组织缺氧生存时间。并且,三七既有增加凝血酶、缩短凝血时间,又具 有促使血块溶解、促进纤溶的作用,王美玲等用其治疗闭塞性周围动 脉粥样硬化患者有效率达88%。 1.4抗冠心病作用增加冠脉血流量,改善心肌微循环,从而调整心肌 缺血缺氧状态,是三七抗冠心病的药理学基础。PNS能改善左心室舒张 功能,这与其提高肌浆内膜上钙泵活性,纠正心肌细胞内Ca2+超负荷 及提高左心室心肌能量有关。冯培芳等[8]实验显示PNS能提高心肌细
Fusariumsacchari转化三七茎叶皂苷的稀有抗肿瘤成分
4 讨论 从上述分析结果可以看出,根皮的脂肪酸量高达83165%,主要以棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸为主,其他16种非脂肪酸成分总量只有8129%,而且各个化合物量均未超过1%。根芯中7种脂肪酸仅占总量的23121%,而且除邻苯二甲酸二丁酯和1,22苯二甲酸二异辛酯2种脂肪酸与根皮中的脂肪酸相同外,其余5种成分也完全不同;22种非脂肪酸成分总量高达51160%,而且与根皮中的非脂肪酸成分完全不同,主要以烃类化合物和醇类为主。以上结果表明巴戟天根皮和根芯中的脂溶性成分差别较大。 医学研究表明,不饱和脂肪酸有明显降低血清胆固醇的作用,进而降低高血压、心脏病及中风等疾病的发病率[9,10]。巴戟天根皮中含有较高的不饱和脂肪酸油酸和亚油酸,具有较高的医疗保健作用,但是根芯中却不含这些不饱和脂肪酸,这表明传统中药巴戟天的根皮部相对具有较高的应用前景和开发价值。因此,在巴戟天的开发和利用中,可根据所需成分考虑通过部位提取来提高提取效率。References: [1] State A dm inistrati on of T raditi onal Ch inese M edicine T raditi onal Ch inese M edicine Board T rad itional Ch inese M ed icine(中华本草)[M]1Shanghai:Shanghai Scientific and T echnical P ress,19991 [2] N ati onal Group p repared Ch inese T raditi onal H erb D rug M edicine Series1N ational Ch inese T rad itional H erb D rug s S eries(全国中草药汇编)[M]1Beijing:Peop le′s M edical P ress,19751 [3] Zhou F X1Studies on the chem ical constituents of M orind a of f icinalis How1[J]1B u ll Ch in M ater M ed(中药通报), 1986,11(9):5541 [4] W ang Y F,W u Z H,Zhou X Y,et al1Chem ical constituents of M orind a of f icinalis How1[J]1A cta B ot S in(植物学报), 1986,28(5):5561 [5] Yo sh ikaw a M,Yam aguch i S,N ish isaka H,et al1Chem ical constituents of Ch inese natural m edicine,O rind ae R ad ix, dried roo ts of M orind a of f icinalis How:structures of mo rindo lide and mo rofficinalo side[J]1Che m P har m B u ll, 1995,43(9):14621 [6] Cui C B,Yang M,Yao Z W,et al1Studies on the antidep ressant active constituents in the roo ts of M orind a of f icinalis How1[J]1Ch ina J Ch in M ater M ed(中国中药杂 志),1995,20(1):361 [7] L i S1Studies on the chem ical constituents of Ch inese m edicine M orind a of f icinalis How1[J]1Ch in T rad it P at M ed(中成药),1988,10(10):331 [8] L iu W W,Gao Y Q,L iu J H,et al1D eterm inati on of chem ical constituents of the vo latile o il from R ad ix M orind ae Of f icinalis[J]1B iotechnology(生物技术),2005,15(6): 592611 [9] W u G X,L i Y X,Chen M Y,et al1D eterm inati on of fatty acid compo siti on in P hy llanthus e m bilica seed o il by GC2M S [J]1J Ch in M ed P har m acol(中医药学报),2003,31(6): 212241 [10] Zheng J X1T he P rod uction of F unctional F ood(功能性食 品)[M]1Beijing:Ch ina L igh t Industry P ress,19951 F usa rium saccha ri转化三七茎叶皂苷的稀有抗肿瘤成分 韩 颖1,姜彬慧1,胡筱敏1,赵余庆2Ξ (11东北大学资源与土木工程学院,辽宁沈阳 110004;21沈阳药科大学,辽宁沈阳 110016) 大量现代药理研究证实,五加科植物如人参、三七、西洋参等的摄入对抑制肿瘤的生长具有明显的作用,且这些植物的抗癌活性是通过其体内含有的特殊活性成分——达玛烷型三萜皂苷中的稀有次生皂苷成分实现的[1,2],如人参皂苷R g3、人参皂苷R h2、人参皂苷C2K和原人参二醇等。利用生物转化技术对人参皂苷的结构进行转化,既可以保持原有皂苷母核的结构不变,又可以获得活性更高的次生苷。本研究已经从种植人参的土壤中分离、筛选出一种活性菌株,经鉴定为芽孢杆菌,三七叶皂苷经其转化后可生成人参皂苷C2K和少量的20(S)2原人参二醇[3]。在近期的实验中又获得一种稀有菌种和活性菌株,经中国科学院微生物研究所张向民研究员鉴定为F usa rium saccha ri,其对三七茎叶皂苷具有极强的转化作用。转化后的产物通过硅胶、凝胶及制备液相色谱进行分离,得到4个单体化合物,通过理化常数测定和光谱数据分析,分别鉴定为20(S)2原人参二醇(PPD, )、20(S)2原人参二醇2202O2Β2D2吡喃葡萄糖苷(C2K, )、20(S)2原人参二醇2202O2Β2D2吡喃木糖苷(1→6)2Β2D2吡喃葡萄糖苷(M x, )、20(S)2原人参二醇2202O2Α2L2呋喃阿拉伯糖基(1→6)2Β2D2吡喃葡萄糖苷(M c, ),均为达玛烷型 ? 3 8 ?中草药 Ch i nese Trad itiona l and Herba l D rugs 第38卷第6期2007年6月 Ξ收稿日期:2007201226 基金项目:辽宁省自然科学基金资助项目(20062031,20062069) :(024)23986522:4885@126
三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进
作者简介:冯亮(1980-),男,正攻读药剂学专业的博士学位。3通讯作者(C orrespondent author ),jxh1013@https://www.wendangku.net/doc/4012555002.html, 三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进 冯 亮,蒋学华3,叶利民 (四川大学华西药学院,四川成都610041) 摘要:目的 用薄层扫描法(T LSC )和高效液相色谱法(HP LC )测定三七总皂苷中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参皂苷Rg 1(Rg 1)和三 七皂苷R 1(R 1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法 T LSC 法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs =535nm ,λR =460nm ;HP LC 法用C 18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0min (25∶75)～15min (45∶55);流速1.5ml ?min -1;测定波长200nm 。结 果 T LSC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HP LC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、 Rg 1、R 1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。结论 HP LC 法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。其准 确度和测定结果的稳定性均优于T LSC 法。 关键词:薄层扫描法;高效液相色谱法;三七总皂苷;人参皂苷Rb 1;人参皂苷Rg 1;三七皂苷R 1中图分类号:R927 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2006)02-0187-03 Improvement of determination method of the main components in Panax notoginseng saponions FE NGLiang ,J I ANG Xue -hua 3,YE Li -ming (West China School o f Pharmacy ,Sichuan Univer sity ,Chengdu 610041,China ) Abstract :OBJECTIVE T LSC and HP LC were adopted to determine the contents of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions.And results of the tw o methods were compared ,which could provide the basis of revising the determination method in quality standard.METH ODS T LSC has been established with the upper layer of the mixture of butanol -ethyl acetate -H 2O (4∶1∶5)as developing s olvent ,and 27%sulphuric acid ethanol s olution as coloring reagent ,λs =535nm ,λR =460nm.HP LC was adopted with C 18column ,acetonitrile -H 2O (25∶75at 0min and 45∶55at 15min ,linear gradient elution )was used as m obile phase and detective wave 2length was set at 200nm.The flow rate was 1.5ml ?min -1.RESU LTS The content of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions determined by T LSC was 31.07%,23.30%and 9.35%;and that determined by HP LC was 30.46%,22.65%and 5.83%,respectively.CONC L USION HP LC could separate and determine various components in Panax notoginseng saponions and determine them.Its accuracy and stability are better than T LSC. K ey w ords :T LSC ;HP LC ;Panax notoginseng saponions ;G insenoside Rb 1;G insenoside Rg 1;Sanchinoside R 1C LC number :R927 Document code :A Article I D :1006-0103(2006)02-0187-03 三七是五加科人参属植物Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen 的干燥根;含有皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分。其中三七总皂苷(Panax noto 2 ginseng saponions )为其主要的有效成分,具有活血化 淤的功效。三七总皂苷含有人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 、R f 、Rg 1、Rg 2、Rh 1和三七皂苷R 1、R 2、R 3、R 4、R 6等20余种皂苷成分,均属达玛烷型(Dammarane type )四环三萜皂苷。其中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参 皂苷Rg 1(Rg 1)是三七总皂苷中含量最高的两个成分,而三七皂苷R 1(R 1)则是三七总皂苷的特征化合物[1]。对于三七总皂苷原料及其口服制剂,文献[2]规定采用比色法测定总皂苷含量。而比色法在操作过程中存在操作烦琐、影响因素多及重复性差等问题[3],尤其是不能分别测定三七总皂苷中各主要成 分的含量。为此,特建立了薄层扫描法(T LSC )测定 三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1和R 1的含量[4];同时建立了HP LC 含量测定法,并与T LSC 法进行比较,为重新修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。 1 实验部分 1.1 仪器与试药 LC -9A 高效液相色谱仪,SPD -6AV 紫外检测 器(日本岛津);CS -930薄层扫描仪;Dikma Diam on 2sil C 18色谱柱(200mm ×4.6mm ,5μ m ,美国Dikma 公司);硅胶G 板(大连化物所)。Rb 1、Rg 1和R 1对照 品(中国药品生物制品检定所);三七总皂苷(云南特 安钠制备厂);乙腈(色谱纯,美国Dikma 公司);水(超纯水);其余试剂均为分析纯。1.2 T LSC 法1.2.1 含量测定 取三七总皂苷样品约50mg ,精 华西药学杂志 W C J ?P S 2006,21(2):187～189
异烟肼含量测定方法
本科生毕业论文 异烟肼含量测定方法比较 姓名： XXX 指导教师： XXX 院系：化学化工学院 专业：制药工程 学号： 提交日期： 2012-03-30
目录 中文摘要 (3) 外文摘要 (4) 引言 (5) 1．异烟肼简介 (5) 1.1物理化学性质 (5) 1.2药理作用 (6) 1.2.1作用原理 (6) 1.2.2临床应用 (6) 1.2.3 不良反应 (6) 1.3 异烟肼制剂研究发展 (7) 1.4 异烟肼含量测定方法简介 (7) 2.实验部分 (7) 2.1 实验仪器和试剂 (7) 2.1.1 实验仪器 (7) 2.1.2实验试剂 (8) 2.2 实验应用公式 (8) 2.3溴酸钾滴定法 (8) 2.3.1实验原理 (8) 2.3.2试剂溶液配制 (9) 2.3.3异烟肼含量测定 (9) 2.3.4稳定性实验 (9) 2.3.5回收率实验 (10) 2.3.6精密度实验 (10) 2.3.7 结果分析与讨论 (10) 2.4紫外分光光度法 (11) 2.4.1实验原理 (11) 2.4.2试剂溶液配制 (11) 2.4.3 测定波长选择 (11) 2.4.4 标准曲线绘制 (11) 2.4.5稳定性实验 (12) 2.4.6回收率实验 (13) 2.4.7精密度实验 (13)
2.4.8结果分析与讨论 (13) 2.5 钼磷酸杂多蓝分光光光度法 (14) 2.5.1实验原理 (14) 2.5.2试剂溶液配制 (14) 2.5.3实验方法 (14) 2.5.4测定波长选择 (14) 2.5.5 标准曲线绘制 (15) 2.5.6稳定性实验 (16) 2.5.7回收率实验 (16) 2.5.8精密度实验 (16) 2.5.9结果分析与讨论 (17) 3.实验结论 (17) 参考文献 (18) 致谢 (20)
HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量_曾荣华
中国医药指南 2010 年 2 月第 8 卷第 6 期Guide of China Medicine, February 2010, V ol.8, No.621 论 著 和预后的辅助指标。 综上所述，采用免疫组织化学SP法检测p53、VEGF、PCNA在膀胱移行细胞癌组织中的表达，对于判断膀胱移行细胞癌恶性程度和预后有较好的临床应用价值。 参考文献 [1] Lane DP. P53 guanlian of the genoma [J].Nature,1992,358(6381): 15-16. [2] 阎洪涛,龚百生,廖勇,等.膀胱移行细胞癌组织中P53和血管内皮 生长因子表达的关系及临床意义[J].中华泌尿外科杂志,2006, 27(3):178-180.[3] Ferrara N,Henzel WJ. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding. Growth factor. Speci? c for vascular endothelial cells [J]. Biochem Biophys Res Commun,1989,161(2):851-858. [4] 郭雪涛,崔明玉.P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF在膀胱移行 细胞癌组织中的表达及意义[J].现代泌尿外科杂志,2007,14(4): 225-228. [5] Miyachi K,Frilzler MJ,Tan EM,et al. Autoantibody to a nuclear antigen in proliferating cells [J].J Immunol,1978,121(6):2228-2234. [6] 卢童,杨为民,章群. 膀胱移行细胞癌组织中P16、P53和PCNA的 表达及其意义[J].临床泌尿外科杂志,2008,23(1):58-60. 复方丹参片是2005年版《中国药典》一部收载的品种，由丹参、三七和冰片三昧药组成，有活血化瘀、理气止痛之功效，用于心血管疾病可显著扩张冠状动脉，增加血流量，减少心肌耗氧量，改变血液流变性。同时也能改善糖尿病患者心、脑血管及神经系统并发症的症状及体征。三七是复方丹参片的重要药物组成，国内文献报道[1-3]。对不同厂家生产的本品的含量比较只是针对丹参中主要成分丹参酮ⅡA和丹酚酸B。三七总皂苷含量变化幅度较大，致使药品质量和疗效存在很大的差异。三七中的主要有效成分是人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，已有文献报道采用HPLC法测定以上成分的含量来控制制剂的质量[4,5]。本文采用HPLC法，同时对复方丹参片中的三七总皂苷3种主要有效成分进行了含量测定，可用于控制复方丹参片的质量，保证其临床用药有效性提供参考。 1 资料与方法 1.1 资料 仪器与试剂：Agilentl100高效液相色谱仪（美国惠普公司）； Agilentl100系列可变波长检测器；Diamonsil C18柱（5μm，250mm×4.6mm，迪马公司）；BP211D电子分析天平（北京塞多利斯天平有限公1 广东省肇庆市第一人民医院药剂科（526021） 2 广东省肇庆医学专科学校（526021） HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量 曾荣华1邓雪媚1卢慧娴1莫肇江1刘燕2 【摘要】目的建立复方丹参片中三七有效成分的含量测定方法。方法采用HPLC法测定本品中三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1线性范围分别依次为0.850~8.524、0.922~9.013、0.377~3.317μg；平均回收率分别为101.1%、101.2%、103.2%，RSD分别为1.5%、1.6%、1.8%。结论本方法简便可靠，结果稳定，可用于丹心舒胶囊中三七的有效成分的含量测定。 【关键词】复方丹参片；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；三七皂苷R1；含量测定 中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2010）06-0021-03 Determiation the Contents of Panax Notoginseng Saponins in Compound Danshen Tablets by HPLC ZENG Rong-hua1,DENG Xue-mei1,LU Hui-xian1,MO Zhao-jiang1, LIU Yan2 (1 Department of Pharmacy, The First People' s Hospital of Zhaoqing, Zhaoqing 526021,China; 2 Zhaoqing Medical College, Zhaoqing 526021, China) [Abstract]Objective To analyze the active compounds of Panax notoginseng and Salviae miltiorrhizae in Compound Danshen Tablets. Methods HPLC was used to analyze the contents of ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1 and notoginsenoside R1 in Compound Danshen Tablets. Results The linear ranges of ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1, and notoginsenoside R1 were 0.850~8.524, 0.922~9.013, 0.377~3.317μg. With average recoveries of 101.1%(RSD=1.5%), 101.2% (RSD =1.6%), 103.2% (RSD=1.8%). Conclusion The method is simple, reliable and stable, which could be used for the quality control of Compound Danshen Tablets. [Key words]Compound Danshen Tablets; Ginsenoside Rg1; Ginsenoside Rb1; Notoginsenoside R1; Determination 司）；KQ100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 人参皂苷Rg1（批号：110703-200637）、人参皂苷Rb1（批号： 110704-200634）、三七皂苷R1（批号：110745-200619），对照品均供 含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供。实验中乙腈为色谱纯， 水为纯净水，甲醇为分析纯；复方丹参片（广州白云山中药厂）。 1.2 方法 1.2.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18柱（5μm，250mm×4.6mm）；以乙腈为 流动相A，0.05%磷酸水溶液为流动相B，进行二元梯度洗脱，洗脱程 序[6]：0→12min流动相A 22%，12→20min流动相A 22%→28%，20→ 60min流动相A 28%→43%；流动相B 81%→64%；流速：1.0mL/min； 柱温：30 ℃；检测波长：203nm，进样量为10μL。 1.2.2 供试品溶液的制备 取复方丹参片20片(除去包衣)，研碎，精密称取约0.8g，加乙醚DOI:10.15912/https://www.wendangku.net/doc/4012555002.html,ki.gocm.2010.06.024
三七的成分
三七的成分 目前国家批准实验的保健品共有24种功能中三七就占19种功能。三七的成分为三七皂苷、黄酮类化合物、三七的糖类成分、三七中的挥发油、三七中的氨基酸成分、三七中的微量 元素、植物油脂、淄醇和炔、烯、烃类化合物等 临床研究目前所发现的三七有效成分为 前人对三七的化学成分进行了较为系统的研究。到目前为止，从三七中分离得到的化学成分主要有皂苷、黄酮、挥发油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白质等以及部分无机化学成分如氮、磷、钾等大量元素和钴、钼、铯等微量元素。 三七的成分-三七皂苷 三七皂苷皂苷（Saponins）是三七主要有效活性成分，也是目前研究较为系统的化学物质。20世纪30年代起，我国学者与日本学者相继开展了对三七皂苷的研究，通过对三七粉、三七花、三七叶、三七梗茎、三七果实等的深入细致研究，迄今共分离得到了24种达玛烷型皂苷。70年代以后，随着现代分离手段及测试仪器的广泛应用，三七皂苷类化学成分的研究才取得显著的进展。迄今为止，已从三七的不同部位分离得到50种单体皂苷成分，这些单体皂苷成分大多数为达玛烷型的20(S)一原人参二醇型20(S)一rotopanaxdiol和20一(S)原人参三醇型[20(s)一protopanaxtriol]，但未发现含有齐墩果酸型皂苷。这与同属植物人参和西洋参有着显著区别。这些单体皂苷中也有很多与人参和西洋参中所含皂苷成分相同， 如人参皂苷(ginsenoside)Rb1，Rb2，Rb1，Rc，F2，Rg1，Rg2等，其中，尤以人参皂苷Rg1，和Rb1。含量最高。除此以外，也有一些是三七所独有的皂苷类成分，如三七皂苷(notoginoside)R1，R2，R4，R5，Fa，Fc，Fe等。三七的地下部分既有20(S)一原人参二醇型皂苷，也含20(S)原人参三醇型皂苷。20世纪90年代以来，赵平和马伟光等从三七根中分离到了3个微量皂苷，命名为三七皂苷(notoginsenoside)R7，R8和R9。而后，1997年，Yoshikawa(系川秀志)等人从三七的根中分离出新的10种三七皂苷，命名为Notoginsenoside A，B，C，D，E，G，H，I，J，K；2001年Yoshikawa等人又从三七的根中分离出3种新的三七皂苷，命名为Notoginoside L，M，N。最近李海舟等又从三七根中 分离到了1种微量皂苷，命名为三七皂苷R10。主根和根茎中皂苷均以Rg1和Rb1为主要成分。以前的化学研究多集中在对三七主根、绒根、茎叶、花等部位。对三七根茎的化学成分研究较少。杨崇仁等从中分离到了9个皂苷，分别是人参皂苷Rb1，Rd，Re，Rg1，Rg2及三七皂苷R1，R2，R4。并发现各单体皂苷
三七总皂苷性质及结构
三七总皂苷性质及结构一、三七总皂苷含有主要成份为： 三七皂苷R1 人参皂苷Rb1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rd 人参皂苷Re 二、主要成份结构式及分子量 三七皂苷R1: 【分子式】C 47H 80 O 18 【分子量】933.131 人参皂苷Rb1: 【分子式】C 54H 92 O 23
【分子量】1109.31 人参皂苷Rg1: 【分子式】C 42H 72O 14 【分子量】801.01 人参皂苷Rd: 【分子式】C 48H 82O 19 【分子量】963.17
人参皂苷Re : 【分子式】C 42H 82 O 18 【分子量】947.14 三、三七总皂苷主要成分的性质 三七皂苷R1：暂无 人参皂苷Rb1：白色粉末（乙醇-丁醇）。熔点197～198℃。旋光度+12.42 （c=0.91，甲醇）。 人参皂苷Rg1：四环三萜类衍生物。结晶性粉末（正丁醇-甲基乙基酮或甲酸乙酯）。熔点194～196.5℃，旋光度+32 （吡啶）。旋光度[α]D+24.80 。溶于甲醇、吡啶、热丙酮，稍溶于乙酸乙酯及氯仿。其乙酰化物溶于甲醇、吡啶、热丙酮，稍溶于乙酸乙酯及氯仿。其乙酰化物为针晶，熔点245℃。 人参皂苷Rd：四环三萜类衍生物。白色粉末（乙醇-醋酸乙酯）。熔点206～209℃，旋光度+19.38（c=1.03，甲醇），旋光度[α]D +17.8 。o-甲基化人参皂苷Rd，白色粉末（含水甲醇），熔点91～93℃，旋光度+14.43 （c=0.97，氯仿）。其乙酰化物，晶粉，熔点127℃。 人参皂苷Re ：四环三萜类衍生物。无色针状结晶（50%乙醇或含水甲醇）。熔点201～203℃。旋光度0～-1.00 （c=1.00，甲醇）。L-B反应（+），Molish 反应（+）。全乙酰化物为晶粉，熔点136℃。o-甲基化人参皂苷re为昌粉（甲醇），熔点115℃，旋光度+0.58 （c=1.02，氯仿）。