蛋白质分离纯化技术的相关研究进展
2017年07
月
蛋白质分离纯化技术的相关研究进展
张海杰蒋丹曹宇虹（正大天晴药业集团股份有限公司，江苏南京210000）
摘要：蛋白质对人体的健康具有重要价值，对蛋白质的应用最为广泛的两个领域是食品生产领域以及医疗领域。蛋白质的功能性较为强大，每一种功能的性质都会带来不同的功效。在对蛋白质进行应用过程中，需要提取出较纯的蛋白质有机物，这就涉及到蛋白质的分离处理。蛋白质多存在于较为复杂的混合体中，其自身稳定性较差，不易于分析。在本文中将对蛋白质的分离处理进行深入分析，其中主要所涉及到的内容为结合不同蛋白质性质的分离纯化技术应用，包括不同电解质蛋白质的分离技术以及不同溶解度蛋白质的分离技术。
关键词：蛋白质；分离；技术
对蛋白质的分离纯化处理是应用先关技术，将存在于混合物中的蛋白质进行分离，提取出所需要的蛋白质有机物的一个过程。蛋白质分离纯化技术属于当前生物领域中的核心应用技术，此类技术的应用难度较高，所需要花费的成本也相对较高，为此，需要合理的选择最为适宜的技术完成整个分离过程，确保分离质量。当前，针对蛋白质的分离纯化技术主要包括电泳、透析、层析等，而这些技术也被广泛的应用在医疗领域中，为医疗事业的发展做出了重要贡献。而具体分离纯化技术概念以及应用是下文中将要阐述的主要内容。
1沉淀法
部分学者对蛋白质分离纯化中的沉淀法研究中提出，蛋白质分离中的沉淀法包括多种方式：第一，盐析法。盐析法所指向的是结合蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会根据盐含量增高而上升，在水活度下降时，蛋白质分子表面的电荷会逐渐的被中和特点，可利用盐析法引起蛋白质分子之间的互相凝聚，进而促使其达到分离效果。第二，有机溶剂沉淀法[1]。此种方式的原理是，有机溶剂具有一定的脱水效果，且其介电常数比相对较小，致使其极性较小，有助于实现蛋白质分离纯化。第三，选择性沉淀法。依照不同蛋白质在不同物理化学因子作用下其稳定性会出现差异性的特点，选择适宜的沉淀方法，能够促使混合蛋白质进行沉淀，进而实现分离效果。
2离子交换层析
用离子交换剂作为填充物，在中性环境下，依照由于蛋白质与多肽带电性质的差异性而导致的离子交换亲和力不同完成分离。部分学者提出，将此种分离技术被分为阳离子层析与阴离子层析两个种类。在离子交换层析方法相关研究中，部分学者应用IEXC 方法，观察了分离牛碳酸酐酶异构体与牛血清白蛋白、鸡血清白蛋白酶的提取条件，在其研究中得到了具有较高价值的成果。
3分子印迹技术
分子印迹技术所指向的是选择受体-抗体作用机理，融合生物化学以及材料化学等专业的综合学科。将一种特定的分子作为模板，设计一个能够固定空穴大小与形状的排列功能基
团的交联高聚物，能够对模板分子的选择性进行明确[2]。分子
识别在生物活性领域承担着重要的职责，大部分的生物分离技术都需要借助于分子识别予以实现。部分学者应用分子印迹技术，设计了卵清白蛋白的人工抗体，对其抗原的特异性吸附功能展开了探究，同时对其进行模拟竞争型免疫反应，并卵清白蛋白仿生荧光免疫分析技术。
4膜分离技术
超滤是一种应用离心力或者是压力强制性促使水与其他小分子经由半透膜，而大分子蛋白会被截留在膜内腔体中，进而分离蛋白质有机物的技术。但是，值得注意的是，基于超滤过程中，滤膜表面会被所吸附的蛋白质堵塞，进而使整个过程的速度迟缓，所节流的物质也会逐渐变小，因此，在应用此种方式进行分离时，需要从膜的材质和膜的孔径进行考虑，选择一个最为适宜的滤膜[3]。膜分离技术在蛋白质分离纯化处理中具有着较好的发展前景，尤其是近几年正在逐步的向工业化方向发展。虽然其具有着处理体积大等优势，但是也同样存在着一些不足之处，例如，在整个过程中膜面可能会被污染，导致其膜性逐渐被弱化，为此还需要应用其他技术对这个污染情况进行控制；单纯的应用膜分离技术所能够实现的效果较为有限，为此，还需要参与其他相关技术的应用，以实现预期效果。部分学者对此提出，为确保将这种分离纯化技术的优势能够被保留，需要对此项技术进行不断的改进，促使其能够发挥更高的价值。
5结语
蛋白质是一种应用价值较高的有机物，在食品行业以及医
疗行业中均得到广泛的应用，为促使蛋白质能够更高效的被应用到各个领域中，需要不断加强其分离纯化技术。全文对蛋白质分离纯化的几种应用技术进行了分析，其中包括沉淀法与离子层析等多种方法，多属于单纯技术的应用，需要针对实际需求进行合理化的选择，若其实际需求标准较高，可采用联合应用方式，将两种或多种分离技术进行综合应用，能够获取到更高标准的蛋白质有机物。需要注意的是任何一种分离纯化方法都可能存在着一定的不足之处，需要在应用中对此进行控制，避免对所分离出的蛋白质造成污染、失活，或分离不彻底等情况出现。
参考文献：
[1]孙秀兰，单晓红，张银志，等.过敏原分离纯化技术的研究
进展[J].食品工业科技，2012，02（05）:391-395.
[2]白利涛，张丽萍.酶及蛋白质分离纯化技术研究进展[J].安徽农业科学，2012，06（14）:8018-8020.
[3]梁雅丽，赵邑，郝冬亮.重组蛋白质的分离纯化研究[J].生物技术世界，2015，08:10.
173