医学分子生物学实验技术

1、基因：是遗传的物质基础，是DNA 或者RNA分子中携带遗传信息的特定核苷酸序列。

2、基因组：是指单倍体细胞核、细胞器或病毒粒子所含的全部DNA 或RNA分子，每个生物的基因组携带者构成和维持该生物体生物形式所必需的所有生物信息。

3、逆转录：以RNA为模板，由反转录酶催化四种dNTP聚合，产生DNA的过程。

4、聚合酶链反应：是一种由引物介导利用DNA聚合酶在体外扩增目的基因的方法，也叫基因扩增技术。

5、限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链的核酸内切酶。

6引物：是一种与DNA模板链互补的线性核苷酸变短，其3’末端为游离的-OH，细胞内复制所需的引物是一小段RNA。催化游离dNTP之间相互聚合。

7、TaqDNA聚合酶：从一种嗜热菌株中分离得到的耐热的DNA聚合酶。

8、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程成为退火。

9、启动子：是位于转录起始点附近，且为转录所必需的序列元件。

10、DNA变性：当DNA收到某些理化因素作用时，DNA双链互补碱基对之间的氢键和相邻碱基之间的堆积力受到破坏，DNA分子被解开成单链，逐步形成为无规则线团的构象，不涉及核苷酸间共价键的断裂。

1、RT-PCR的基本原理

将RNA反转录与PCR过程结合的一种PCR技术，在反转录酶的作用下，以mRNA为模板，反转录生成DNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增。

2、DNA电泳的基本原理，按照支持物不同可以分为几类

基本原理：核酸是两性电解质，在中性或偏碱性的pH溶液中均带负电，在电场中向正极泳动，不同的核酸在相对分子质量、分子形状等方面各有不同，在凝胶的空隙中泳动时电泳迁移率各不相同，因此借助电泳即可使其得到分离。

分类：1琼脂糖凝胶电泳AGE

2聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE

3 毛细管电泳

3、总RNA提取后，如何鉴定RNA的纯度

（1）紫外分光光度法：先通过A260与A280的比值判断核算的纯度，纯RNA的A260与A280的比值等于2.0，比值升高或降低均表示样品不纯。

(2)琼脂糖凝胶电泳法：基因组DNA的分子量远远大于RNA，两者之间电泳迁移率存在很大差别，用荧光染料EB为示踪剂的AGE即可观察到RNA分子中是否含有DNA，细胞RNA的琼脂糖凝胶电泳一般可见三条条带，条带模糊比例不合适及弥散明显说明RNA有严重降解。

4、PCR的基本原理和基本步骤，知道几种PCR

（1）基本原理是以待扩增的DNA分子为模板，以一对人工合成的、分别与模板的5’端和3’端互补的单链寡核苷酸作为引物，在耐热DNA 聚合酶催化下，按照半保留复制的原则合成两个子代DNA；接着以子代DNA为模板再次合成，如此反复循环十数次，最终将原始模板放大数百万倍。

（2）PCR的基本步骤

1.反应体系：包括模板DNA，耐热DNA聚合酶，两种引物，

4种dNTP和含有镁离子的缓冲液。

2.反应过程

变性:将反应体系加热加热到94~95度，持续30秒左右，使待扩增DNA完全解链成单链。

退火：使温度迅速下降到适宜温度并维持30秒，使引物与模板DNA 两条链的3’端互补配对。退火温度由引物Tm决定，一般比引物的Tm低5度，其范围常在55~68度。

延伸：将反应体系温度升高到72度，此时DNA聚合酶将以单链DNA 为模板，将单核甘酸逐个添加到引物的3’端，使新链不断延长，直至合成结束。

（3）PCR种类：反转录PCR，定量RT-PCR，实时荧光定量PCR，

多重PCR,巢式PCR,反向PCR,原位PCR

5、基因组DNA提取的原理（主要应用的试剂和作用）

SDS蛋白酶法：主要用于提取动物组织细胞的基因组DNA。

（1）首先利用含有SDS、蛋白酶K等成分的DNA抽提缓冲液作用于组织匀浆液，以充分裂解细胞，破坏染色体结构，并使组蛋白及其他胞内蛋白质变性、降解，释放出游离的DNA；

（2）用酚/氯仿、氯仿/异戊醇等有机溶剂依此抽提，除去水相中的蛋白质、酚等杂质；

（3）最后以乙醇或异丙醇沉淀水相即可得到较纯的基因组DNA。抽提缓冲液中的RNA酶可降解胞内RNA，乙二胺四乙酸（EDTA）则能有效抑制DNA酶的活性，防止DNA的降解。

CTAB法与SDS蛋白酶法提取DNA的过程相似。

6、RT-PCR反应体系中包括哪些试剂？他们的作用如何？

1.RNA提取试剂：迅速破碎细胞并抑制细胞内RNase的同时，使核蛋

白复合物变性，释放RNA。

2.反转录酶：以mRNA为模板合成cDNA。

3.第一链cDNA合成试剂盒：合成cDNA。

4.RT-PCR引物：催化游离dNTP之间相互聚合。

5.dNTP：为扩增DNA的原料。

6.Taq DNA聚合酶：在高热条件下，催化聚合反应。

生物化学与分子生物学实习指导（中文版）

生物化学与分子生物学实习指导

实验一蛋白质含量测定(比色分析法和分光光度法)

实验二从小鼠肝脏中提取DNA

实验三DNA酶解及DNA片段琼脂糖凝胶电泳

实验四现代PCR技术

实验五人血清抗胰蛋白酶（α1－AT）的分离及鉴定

内容一盐析法，凝胶过滤法

内容二纤维素离子交换层析，蛋白含量测定，酶活性测定

内容三SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

内容四总结

实验六酶的特异性、激动剂、抑制剂

实验七温度、pH对酶促反应速度的影响

实验八运动对尿中乳酸含量的影响

实验九肝糖原实验

实验十肝脂质的提取及薄层层析

实验一蛋白质含量测定(比色分析法和分光光度法)

【目的要求】

1. 掌握比色分析法和分光光度法基本原理、标准曲线的制作及使用，标准管法结果计算

2. 熟悉蛋白质含量测定常用方法、原理及应用

3. 了解常用可见光、紫外分光光度计的测定原理及使用

【教学内容】

1. 酚试剂法蛋白质含量测定

Lambert-Beer定律，比色分析法和分光光度法基本原理, 722型分光光度计使用，常用蛋白质含量测定方法及应用，酚试剂法测定蛋白质含量原理、操作, 标准曲线的制备及使用

2. 双缩脲法蛋白质含量测定

自学和独立完成实验并与酚试剂法比较，结果计算

3. 紫外分光光度法蛋白质含量测定

紫外分光光度法测定蛋白质含量原理，方法，优缺点，注意事项；国产752型紫外分光光度计使用，UV—260分光光度计使用，注意事项，波长扫描，标准曲线制作

【实验原理】

一、比色分析法

许多物质本身具有一定的颜色，也有许多物质本身无颜色，在加入适当的显色剂后生成有色物质。溶液浓度越大，颜色越深。因此可以利用比较溶液颜色深浅的方法来测定有色溶液的浓度。这种方法叫比色分析法。

1. 物质的颜色和波长：

可见光：波长（λ）400—760nm

紫外光：λ小于400nm

红外光：λ大于760nm

光的互补：将两种适当颜色的可见光按一定强度比例混合可得到白光，这两种光叫互补光，该现象叫光的互补。

单色光：白光通过棱镜后可分解成各种波长不同的色光，把具有一种波长，不能再分解的光叫单色光。

2. 溶液的颜色和光吸收的关系：

溶液的颜色，是由于不同的有色物质有选择地吸收某种颜色的光而引起的。溶液呈现的颜色是与它主要吸收的光相互补的光的颜色。溶液吸收的光越多，呈现的颜色越深。

例如：一束白光通过核黄素溶液，溶液呈黄色，是因为蓝色光被吸收，而其它颜色的光均为两两互补，透过光只多余出黄色光，所以核黄素溶液呈黄色。

光吸收曲线：测定同一物质对不同波长光线的吸收程度，以波长为横坐标，光密度为纵坐标作图，所得曲线为光吸收曲线。

3. 物质浓度，液层厚度与光吸收的关系（Lambert--Beer定律）：

当一束单色光通过溶液后，光被溶液吸收的程度（D）与溶液的浓度（C），液层的厚（L）以及入射光的强度（I0）有关。溶液浓度越大，液层越厚，吸光越多，这就是物质（均匀透明固体，液体，气体）对光的吸收定律。

lg I0 / I 意义：

当I = I0 时，lg I0 / I=0，表示溶液完全不吸收光线；

当I＜I0时，lg I0 / I值较大，表示溶液对光吸收较多；

当I→0 时，lg I0 / I值无穷大，表示光线几乎被溶液完全吸收（溶液不透光）。

由此可见，lg I0 / I表示了溶液对光的吸收程度。

表示方法：光密度OD或D（opticaldensity）

吸光度A（Absorbance）

消光度E（Extinction）

于是，(3)式可写成：D = KCL

公式中K为消光系数，K = D/CL，表示有色溶液在单位浓度和单位厚度时的吸光度。

同一溶质，K值相同。

百分消光系数：C = 1%，L = 1cm

克分子消光系数：C = 1克分子浓度，L=1cm

D=KCL意义：物质对光吸收程度与该物质的消光系数K，溶液浓度C，液层厚度L成正比。

4. 待测溶液浓度的计算：

（1）标准管法：

在同样条件下，测得标准液和待测液的光密度（D）值，然后计算：标准液：Ds = KsCsLs

待测液：Du = KuCuLu

其中，Ls = Lu，Ks = Lu，Ds/Du = Cs/Cu

Cu =（Du/Ds）×Cs

（2）标准曲线法：

分析大批待测样品时，采用此法较方便。先配制一系列浓度由小到大的标准溶液，测出它们的光密度（D）值。在一定浓度范围内，溶液浓度（C）与其光密度（D）之间呈直线关系。以各管D为纵坐标，C 为横坐标，绘制标准曲线。待测溶液D值测出后，在曲线上查出C。（3）标准系数法：

多次测定标准溶液的光密度后求出平均值，标准系数= 标准液浓度/标准液平均光密度，同法测出待测液的光密度代入下式：

C = 待测溶液光密度×标准系数

（4）消光系数法：

1%浓度，1cm厚度溶液中测得：K = E1cm1%

或１克分子浓度，１cm厚度溶液中测得：K = ξ

C = D/E1cm%, 或C = D/ξ

常用于紫外吸收法测定蛋白质，核酸含量，二者分别在280nm和260nm处有最大吸收，其消光系数可查到，在同样条件下，测定待测溶液的光密度, 带入上式即可求得C。

优点：可直接测定，不需呈色，不损失样品, 操作简便

注意：选择1cm石英比色杯（玻璃杯在紫外光区强烈吸收紫外光，不能使用）

二、比色分析的测定方法

1. 比色分析法：

原理：白光透过滤光板后，可得到近似的单色光，让单色光透过有色溶液，然后射到光电池上，光电池受光放出电子，所产生的电流与光的强度成正比关系。

利用滤光板可获得近似的单色光，波长范围30-50nm。滤光板最易透过的光是有色溶液最易吸收的光。一般说来，选择滤光板的颜色应与被测溶液的颜色为互补色。

2. 分光光度法：

分光光度法使用分光光度计，利用棱镜或光栅获得单色光，波长范围3-5nm，所以比比色分析法的灵敏度，准确度和选择性都要高。

三、比色分析条件的选择

1. 波长的选择：原则“吸收最大，干扰最小”

例：A，B两种物质，A物质最大吸收峰在a处，B物质在a处也有吸收，对A物质的测定有干扰，故选b处波长进行比色测定以满足以上原则。

2. 光密度的选择：

D值读数在检流计标尺中部时，准确度较高，相对误差最小。一般D = 0.05—1

3. 显色条件的选择：

比色分析中，常需要利用空白溶液调节仪器的透光率为100%，此时D为0。空白溶液仅仅不含被测物质，而其它溶液，试剂和处理条件与被测溶液完全相同。因此，利用空白溶液可消除显色溶液中其它有

色物质的干扰，抵消比色杯和试剂对入射光的影响。

四、722型分光光度计的使用

1. 选择波长

2．比色杯：（1）液体3/4—2/3，不可过多或过少。（2）用擦镜纸擦干外表面液体。

3. 灵敏度：调整后不再动。

4. 将装有空白溶液的比色杯放入光路。原则：开盖调“D = 0”，关盖调“T = 100”。

五、752型紫外可见分光光度计的使用

1. 选择波长

2．比色杯：测蛋白、核酸时使用石英比色杯，专机专用，余同上。

3. 灵敏度：调整后不再动。

4. 注意：测蛋白、核酸时，开氘灯。

六、蛋白质的测定

常用方法：

1. 根据蛋白质含氮量进行测定的定氮法。

2. 根据蛋白质结构或组成的紫外吸收特性进行测定的紫外分光光度法。

3. 根据蛋白质与不同呈色试剂反应而进行测定的比色法。

【实验内容】

一、酚试剂法（Folin Method）

原理：蛋白质中肽键在碱性溶液中与铜离子形成络合物，此络合物能使酚试剂中的磷钼酸还原产生兰色化合物；同时，蛋白质中的酪氨酸、色氨酸也能与酚试剂的磷钼酸，磷钨酸作用产生兰色化合物，颜色深浅与蛋白质的含量成正比。

试剂：

1. 碱性铜液

2. 酚试剂

3. 0.9% NaCl

4. 标准牛血清白蛋白溶液（1％）

操作步骤：

1．取上述牛血清白蛋白溶液1.0ml用0.9% NaCl稀释10倍后，按下表操作：

温放置20分钟，每管加酚试剂0.5毫升，立即混匀

3．室温放置30分钟后，以第6管为空白管，选波长650nm比色，读取光密度。

二、双缩脲法（Biuret Method）

原理：凡具有两个以上肽键（—CO-NH—）的物质，在碱性溶液中与铜离子反应，形成紫红色络合物，称双缩脲反应。由于蛋白质含有肽键，也能发生双缩脲反应，颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

试剂：

1. 双缩脲试剂

2. 0.9% NaCl

3．标准血清

4．待测血清

步骤：

1．取3支干净的试管按下表操作：

2．混匀，30分钟后以第3管为空白管，用520nm波长比色，读取光密度。

3．计算：

蛋白质含量g% = （Du/Ds）×标准蛋白浓度

【注意事项】

1．试管洗刷干净，刻度吸管专管专用

2．双缩脲法和酚试剂法两个实验的波长分别为520nm和650nm，测定时注意转换波长

3．比色测定时，勿触及比色杯光面

实验二从小鼠肝脏中提取DNA

【目的要求】

1. 掌握DNA分离的原理、各试剂作用及操作过程

2. 掌握肝匀浆制备及注意事项

3. 熟悉DNA浓度、纯度测定原理及方法, 仪器使用

4. 了解分子生物学实验技术(录像)

【教学内容】

1. 从肝中提取DNA

小鼠处死方法, 试剂配制, 离心机使用, 肝匀浆制备, DNA分离纯化原理及注意事项

2. DNA浓度、纯度测定原理及方法,仪器使用

3. (录像带教学) 核酸分离纯化, DNA序列测定, 核酸探针标记与分子杂交

【实验原理】

1．生物组织中DNA是以DNA-蛋白质复合物的形式存在

2．在稀NaCl溶液中，DNA-蛋白质溶解度小，RNA-蛋白质溶解度大; 在浓NaCl溶液中，DNA-蛋白质溶解度大，RNA-蛋白质溶解度小（分开DNA和RNA）

3．SDS（十二烷基硫酸钠），使蛋白质变性（分开DNA和蛋白质）（1）SDS是一种阴离子表面活性剂，能使蛋白质的氢键和疏水键打开，并结合到蛋白质的疏水部位;

（2）SDS可引起蛋白质构象改变

（3）SDS是一种良好的解离剂，可使蛋白质溶解，变性

（4）形成SDS-蛋白质复合物，并使复合物带负电

4．氯仿-异丙醇可以将蛋白质除去

5．适量的冷无水乙醇可使DNA析出。

6．防止DNA酶解的办法——加入EDTA - 2Na（乙二胺四乙酸二钠）7．检查DNA纯度：A260/A280

（1）A260/A280 ＝1.8，高纯度DNA

（2）A260/A280 < 1.8，含蛋白质

（3）A260/A280 > 1.8，含RNA

【试剂】

(1) 0.14M NaCl，0.1M EDTA

(2) 5M NaCl

(3) 30% SDS

(4) 氯仿-异丙醇

(5) 0.015M NaCl-0.0015M柠檬酸钠

(6) 冷无水乙醇

【步骤】

一．提取脱氧核糖核蛋白

1.杀鼠取肝3克（2—3只小鼠），15ml 0.14M NaCl，0.1M EDTA洗去血液

2.肝匀浆制备

（1）乳钵中剪碎

（2）15ml 0.14M NaCl，0.1M EDTA

（3）不要用力研磨

3.离心3000rpm 10分钟，弃上清

沉淀加入0.14M NaCl，0.1M EDTA 15ml轻轻悬起

离心3000rpm 10分钟，弃上清

沉淀加入0.14M NaCl，0.1M EDTA 10ml 使之溶解，转至50毫升三角烧瓶中

二．除蛋白质

1.加入30% SDS 1ml 混匀，60℃水浴轻摇15分钟，取出冷至室温

2. 5M NaCl 2.75ml, 轻摇10分钟

3.氯仿-异丙醇19ml（沉淀蛋白）,轻摇20分钟,离心2500rpm 10分三．粗提DNA

1. 吸上清（水相）转入玻璃离心管（含DNA）, 弃沉淀（剩余物）

2. 加入1.5倍体积冰乙醇（无水乙醇）轻摇至DNA析出

四．检测

1．用镊子或玻璃棒取出置试管中，加入0.015M NaCl-0.0015M柠檬酸钠1毫升

2．稀释适当倍数：量取10-50μl (用0.1ml刻度吸管吸取) 原液，用0.015M NaCl-0.0015 M柠檬酸钠稀释到5ml（稀释100-500倍）3．测A260/A280（用0.015M NaCl-0.0015M柠檬酸钠做空白溶液）五．计算

1.DNA浓度：（μg/ml）=A260×50×稀释倍数

2.DNA纯度：A260/A280

【注意事项】

1. 研磨时上下用力，尽量避免DNA链断裂。

2．加入氯仿—异丙醇后勿剧烈摇动，以免大分子断裂。

3．有机溶剂对人体有害，操作时要注意。

实验三DNA酶解及DNA片段琼脂糖凝胶电泳

【目的要求】

1. 掌握限制性核酸内切酶概念、特点及作用原理，DNA酶解技术的应用

2. 掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段原理及其操作

3. 熟悉电泳基本原理及其影响因素

【教学内容】

1．限制性核酸内切酶概念、特点及作用原理，DNA酶解技术的应用2．DNA片段琼脂糖凝胶电泳

3．电泳概念、分类、应用、基本原理及其影响因素, 琼脂糖凝胶制备、加样、电泳及结果分析

【实验】

一．DNA酶解

原理：

1.限制性核酸内切酶：是一类能识别并水解双链DNA中特定碱基顺序的核酸水解酶。

一般能识别4-6个碱基对，并在特定位点切割。

如：HindⅢA↓A G C T T

EcoRⅠG↓A A T T C

HpuⅡC↓C G G

2.酶单位数：在最适温度、PH条件下，1小时完全水解1μgλDNA 所需的酶量为1个单位。

试剂：

(1)λDNA（0.38μg/μl）

(2) HindⅢ(16u/μl)

(3) 酶解Buffer(Tris-HCl,NaCl,MgCl2,DTT )

(4) 反应终止液（溴酚蓝1%，SDS 1%，EDTA 2%，甘油50%）

方法：1. 取两只EP管（1）λDNA 10μl，双蒸水10μl

（2）λDNA 10μl，HindⅢ10μl

充分混匀

2. 37℃水浴2小时。

3. 保温结束后加入终止液5μl。

二. 琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段（水平潜水式）

原理：

1．DNA含有PO43-基团，在pH7.5 Buffer中带负电, 在电场中向正极移动。由于不同大小的DNA片段的电荷密度大致相同，自由电泳时，各核酸分子的迁移率区别很小，难以分开

2．选用适当浓度的凝胶作为支持物，使之具备一定的孔径，即可发挥分子筛效应（凝胶孔径对大小不同的分子有不同的阻力），使大小不同的核酸片段迁移率出现较大差异，达到分离的目的，同样条件对Maker电泳，对比观察DNA酶解效果

3．DNA经溴乙锭（EB）染色，溴乙锭可以插入DNA双螺旋结构两

个碱基之间，与核酸形成络合物，在紫外（300nm,360nm）激发下，产生桔黄色荧光（590 nm可见光）。标准Maker经溴乙锭（EB）染色可以观察到6条带，分别为: 23Kb, 9.9Kb, 4.4Kb, 4.3Kb, 2.2Kb, 2.0Kb

试剂：

（1）1%琼脂糖

（2）TAE液

（3）Marker

（4）EB

方法：

1. 电泳仪接线：黑（负）—黑，红（正）—红

2．凝胶槽准备：用胶布固定胶槽两侧，调整梳子高度距离槽底2-3毫米，调好水平。

3．灌胶：

(1) 称取0.8克琼脂糖,加入80毫升TAE中,热浴溶解至透明

(2) 60℃左右加入EB100μl(终浓度0.5μg/ml), 倒入备好的凝胶槽中。应注意胶面平整,无气泡

(3) 冷却后,拔去梳子

4．加样:

(1) 去掉胶布，将灌好的胶板平放在电泳槽中

(2) 加入电极Buffer使之高出胶面(1-3毫米)

(3) 用进样器吸样品20μl加入样品槽中

5．电泳: v = 100V, 1-1.5小时,至溴酚蓝移出2/3

6．观察: (戴手套)紫外灯下（254-365nm）, 暗处观察, 记录。可见DNA 橙红色区带

【注意事项】

1．在EP管加入试剂时要用漩涡混合器混合后离心。

2．琼脂糖凝胶电泳时加样侧应位于负极端。

3．溴乙锭可引起基因突变，操作时要注意个人防护。

4．紫外光对人眼有害，观察时加盖玻璃罩，观察时间不宜太长。

实验四PCR技术

【目的要求】

1．掌握PCR技术概念、原理、方法及应用

2．熟悉PCR仪的使用及注意事项

3．了解TaqDNA聚合酶的来源和特点，引物的设计原则

4．了解现代PCR技术的扩展

【教学内容】

1．PCR技术概念、原理、方法、应用及技术扩展

2．TaqDNA聚合酶的来源和特点，引物的设计原则

3．PCR仪的使用及注意事项

4．模板的制备

【实验】

原理：以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5’末端和3’末端相互补的寡核苷酸片断为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照

机械制造技术基础试题及答案

1．刀具后角是指后刀面与切削平面间的夹角。 3．精车铸铁时应选用（YG3）；粗车钢时，应选用（YT5）。 4．当进给量增加时，切削力（增加），切削温度（增加）。 8．机床型号由字母与数字按一定规律排列组成，其中符号C代表（车床）。 11．定位基准与工序基准不一致引起的定位误差称（基准不重合）误差，工件以平面定位时，可以不考虑（基准位置）误差。 12．机床制造误差是属于（系统）误差，一般工艺能力系数C p应不低于（二级）。 15．工艺过程是指用机械加工方法直接改变原材料或毛坯的形状、尺寸和性能，使之成为合格零件的过程。 一、简述切削变形的变化规律，积屑瘤对变形有什么影响？（8分） 变形规律：ro↑，Λh↓；Vc↑，Λh↓；f↑, Λh↓; HB↑, Λh↓ 积屑瘤高度Hb↑,引起刀具前角增加，使Λh↓ 六、加工下述零件，以B面定位，加工表面A，保证尺寸10＋0.2mm，试画出尺寸链并求出工序尺寸L及公差。（8分） L＝mm 2201.0- 九、在六角自动车床上加工一批18 03 .0 08 .0 φ+-mm滚子，用抽样检验并计算得到全部工件的平均尺寸为Φ17.979mm，均方根偏差为0.04mm，求尺寸分散围与废品率。 尺寸分散围：17.859－18.099mm 废品率： 17.3% 1．工序是指一个工人在一台机床上对一个（或多个）零件所连续完成的那部分工艺过程。 2．剪切角增大，表明切削变形（减少）；当切削速度提高时，切削变形（减少）。 3．当高速切削时，宜选用（硬质合金）刀具；粗车钢时，应选用（YT5）。 4．CA6140车床可加工公制，英制，模数和径节等四种螺纹。 5．不经修配与调整即能达到装配精度的方法称为（互换法）。 6．当主偏角增大时，刀具耐用度（减少），当切削温度提高时，耐用度（减少）。 11．定位基准面和定位元件制造误差引起的定位误差称（基准位置）误差，工件以平面定位时，可以不考虑（基准位置）误差。 12．测量误差是属于（随机）误差，对误差影响最大的方向称误差敏感方向。 13．夹紧力的方向应与切削力方向（相同），夹紧力的作用点应该（靠近）工件加工表面。 一、金属切削过程的本质是什么？如何减少金属切削变形？（8分）

2015高级生物化学及实验技术试题答案

高级动物生化试题 问答题： 1. 简述非编码RNA（non-coding RNA）的种类、结构特点及其主要功能。 非编码RNA的种类结构和功能 1tRNA转运RNA（transfer RNA，tRNA） 结构特征之一是含有较多的修饰成分，核酸中大部分修饰成分是在tRNA中发现的。修饰成分在tRNA分子中的分布是有规律的，但其功能不清楚。5’末端具有G（大部分）或C。3’末端都以ACC的顺序终结。有一个富有鸟嘌呤的环。有一个反密码子环，在这一环的顶端有三个暴露的碱基，称为反密码子（anticodon）.反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。有一个胸腺嘧啶环。tRNA具有三叶草型二级结构以及“L”型三级结构，tRNA 的不同种类及数量可对蛋白质合成效率进行调节。tRNA负责特异性读取mRNA中包含的遗传信息，并将信息转化成相应氨基酸后连接到多肽链中。 tRNA为每个密码子翻译成氨基酸提供了结合体，同时还准确地将所需氨基酸运送到核糖体上。鉴于tRNA在蛋白质合成中的关键作用，又把tRNA称作第二遗传密码。tRNA还具有其他一些特异功能，例如，在没有核糖体或其他核酸分子参与下，携带氨基酸转移至专一的受体分子，以合成细胞膜或细胞壁组分；作为反转录酶引物参与DNA合成；作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。 2rRNA核糖体RNA（ribosomal RNA, rRNA） 核糖体RNA是细胞中最为丰富的RNA，在活跃分裂的细菌细胞中占80%以上。

他们是核糖体的组分，并直接参与核糖体中蛋白质的合成。核糖体是rRNA 提供了一个核糖体内部的“脚手架”，蛋白质可附着在上面。这种解释很直接很形象，但是低估了rRNA在蛋白质合成中的主动作用。较后续的研究表明，rRNA并非仅仅起到物理支架作用，多种多样的rRNA可起到识别、选择tRNA以及催化肽键形成等多种主动作用。例如：核糖体的功能就是,按照mRNA的指令将氨基酸合成多肽链。而这主要依靠核糖体识别tRNA 并催化肽键形成而实现。可以说核糖体是一个大的核酶( ribozyme)。而核糖体的催化功能主要是由rRNA来完成的,蛋白质并没有直接参与。 3 tmRNA tmRNA主要包括12个螺旋结构和4个“假结”结构，同时还包括一 个可译框架序列的单链RNA结构。tmRNA中H1由5’端和3’端两个末端形成，与tRNA的氨基酸受体臂相似。H1和H2的5’部分之间有一个由10-13nt 形成的环，类似tRNA中的二氢尿嘧啶环，称为“D”环。H3和H4，H6和H7，H8和H9，H10和H11之间分别形成Pk1，pK2，pK3，pK4。H4和H5之间则由一段包含编码标记肽ORF的单链RNA连接。H12由5个碱基对和7nt 形成的环组成，类似tRNA中的TΨC臂和TΨC环，称为“T”环。tmRNA 结构按照功能进行划分可分为tRNA类似域（TLD）和mRNA类似域（MLD），TLD主要包括H1,H2,H12,“D”环和“T”环，MDL则包括ORF和H5，这两部分分别具有类似tRNA和mRNA的功能。tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器（如叶绿体，线粒体）中的稳定小分子RNA。它具有mRNA分子和tRNA分子的双重功能，它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式中发挥重要作用。同时，它与基因的表达调控以及细胞周期的调控等生命过程密切相关，是细菌体内蛋白质合成中起“质量控制”的重要分子之一。识别翻译或读码有误的核糖体，也识别那些延迟停转的核糖体，介导这些有问

机械制造技术基础考试试题及答案

机械制造技术基础（试题1） 班级姓名学号成绩 一、填空选择题（30分） 1．刀具后角是指。 2．衡量切削变形的方法有两种，当切削速度提高时，切削变形（增加、减少）。 3．精车铸铁时应选用（YG3、YT10、YG8）；粗车钢时，应选用（YT5、YG6、YT30）。 4．当进给量增加时，切削力（增加、减少），切削温度（增加、减少）。 5．粗磨时，应选择（软、硬）砂轮，精磨时应选择（紧密、疏松）组织砂轮。 6．合理的刀具耐用度包括与两种。 7．转位车刀的切削性能比焊接车刀（好，差），粗加工孔时，应选择（拉刀、麻花钻）刀具。 8．机床型号由与按一定规律排列组成，其中符号C代表（车床、钻床）。 9．滚斜齿与滚直齿的区别在于多了一条（范成运动、附加运动）传动链。滚齿时，刀具与工件之间的相对运动称（成形运动、辅助运动）。 10．进行精加工时，应选择（水溶液，切削油），为改善切削加工性，对高碳钢材料应进行（退火，淬火）处理。 11．定位基准与工序基准不一致引起的定位误差称（基准不重合、基准位置）误差，工件以平面定位时，可以不考虑（基准不重合、基准位置）误差。 12．机床制造误差是属于（系统、随机）误差，一般工艺能力系数C p应不低于（二级、三级）。 13．在常用三种夹紧机构中，增力特性最好的是机构，动作最快的是 机构。 14．一个浮动支承可以消除（0、1、2）个自由度，一个长的v型块可消除（3，4，5）个自由度。 15．工艺过程是指 。

二、外圆车刀切削部分结构由哪些部分组成？绘图表示外圆车刀的六个基本角度。（8分） 三、简述切削变形的变化规律，积屑瘤对变形有什么影响？（8分） 四、CA6140车床主传动系统如下所示，试列出正向转动时主传动路线及计算出最高转速与 最低转速。（8分） 五、什么叫刚度？机床刚度曲线有什么特点？（8分） 六、加工下述零件，以B面定位，加工表面A，保证尺寸10＋0.2mm，试画出尺寸链并求出工序尺寸L及公差。（8分）

机械制造技术基础实验指导书本科

机械制造技术基础实验指 导书本科 Newly compiled on November 23, 2020

机械制造技术基础 实验指导书 编写：詹友基 福建工程学院机械与汽车工程学院 2013 年 8 月 目录 一、车刀几何角度测量 二、切削变形系数测量实验 三、切削力实验 四、机床动、静刚度的测定 五、加工精度统计分析 六、切削温度实验

实验1 车刀几何角度测量 一、实验目的与要求 1、了解车刀量角仪的结构与工作原理。 2、进一步熟悉车刀切削部分的构造要素，巩固和加深对刀具各标注平面参考系及标注角度基本定义的理解。并掌握车刀测量方法。 3、通过对车刀各剖面内角度的测量与计算，进一步理解它们之间几何关系。 4、测量给定车刀的几何角度，将测得的数据填入表格中，并对测量结果进行分析。 二、实验设备与工具 1、仪器：车刀量角仪 2、测量用车刀：45°外圆车刀，75°外圆车刀，90°外圆车刀，切断刀，大刃倾角车刀。 三、车刀量角仪的结构与使用方法 1、图1-1量角仪(本校制造) 图1-1 量角仪（本校） 量角仪由底置l、转盘9、立柱3和刻度盘6、测量片7等零件组成。底盘1用来安装立柱3，并以销2孔为中心刻着±100°的转盘9，当转盘9两侧面的基线对准底盘刻线转90°时。定位块10的d面是垂直的。当测量片7的指针对着刻度盘0°时，测量片7的b 面与转盘9的平面是平行的，而且垂直于C面、A面。立柱3的上下移动靠螺母4来调整。 2、图1-2量角仪（哈尔滨工业大学） 图1-2 量角仪（哈尔滨工业大学）

量角仪由底座l 、平台3、立柱7和大小扇形盘6、11、大小指针5、10等零件组成。 底座l 呈圆盘形，平台3可绕底座中心转动，底座外缘左、右各有刻度l00°，当基线板2对准圆盘刻线0°时，活动尺4侧边与指针5下端的测量板平面垂直。测量板5上有三个测量刃口A 、B 、C ，其所在平面即为测量车刀角度时的测量平面。当小指针l0和大指针5均为0°时，刃口A 与平台平面平行，B 、C 与平台平面垂直。 四、实验步骤和方法(本校制造) 要测量某一车刀角度时，首先应规定一个假定走刀方向，即要先辩明车刀的主、副切削刃及前、后刀面，以确定需要测量角度的位置。然后将车刀放在转动平台上，左或右侧面靠在活动尺的侧面上。 测量角度的顺序通常先测偏角，再测刃倾角，继而测前角、后角。这样调整方便，也可提高工作效率。即测量顺序为： 主切削刃：r k ——s λ——o γ——o α；副切削刃：r k '——s λ'——o γ'——o α'。 （1）主偏角的测量 首先把车刀放在转盘9上，使车刀的侧面与定位块l0的d 面紧密接触，这时可以调整螺母4，使滑块5上下移动，然后转动转盘9，使车刀主刀刃贴合于测量片7的A 面，这样转盘9刻线对着底盘l 的数据给予处理，即是主偏角的角度。 （2）刃倾角的测置 测量刃倾角的方法基本上是同测量主偏角角度一样，所不同的是调整测量片7的b 面与主刀刃贴合，这样可以在刻度盘6直接读出刃倾角的角度。 （3）前角的测量 测量前角的方法是车刀放转盘9上，使车刀的侧面与定位块l0的d 面紧密接触，然后转动转盘9，(测量片7处于车刀主剖面位置)，此时调整测量片7的b 面与车刀的前刀面贴合，这样可以在刻度盘6上直接读出前角角度。 （4）后角的测量

(完整版)《机械制造技术基础》期末考试试卷及答案,推荐文档

《机械制造技术基础》期末考试试题及答案 一、填空题（每空1分，共15分） 1．切削时工件上形成的三个表面是已加工表面、过渡表面和待加工表面。 2．工件与刀具之间的相对运动称为切削运动，按其功用可分为主运动和进给运动，其中 建议收藏下载本文，以便随时学习！ 主运动消耗功率最大。 3．在磨削过程中，磨料的脱落和破碎露出新的锋利磨粒，使砂轮保持良好的磨削能力的 特性称为砂轮的自锐性。 4．按照切削性能，高速钢可分为普通性能高速钢和高性能高速钢两种，超硬刀具材料主 要有陶瓷、金刚石和立方氮化硼三种 5．在CA6140车床上加工不同标准螺纹时，可以通过改变挂轮和离合器不同的离合状态 来实现。 6．CA6140上车圆锥面的方法有小滑板转位法、_尾座偏移法和靠模法。 7．外圆车刀的主偏角增加，背向力F p减少，进给力F f增大。 8．切削用量要素包括切削深度、进给量、切削速度三个。 9．加工脆性材料时，刀具切削力集中在刀尖附近，宜取较小的前角和后角。 10．在车削外圆时，切削力可以分解为三个垂直方向的分力，即主切削力，进给抗力和切深抗力，其中在切削过程中不作功的是切深抗力。 11．金刚石刀具不适合加工铁族金属材料，原因是金刚石的碳元素与铁原子有很强的化学亲和作用，使之转化成石墨，失去切削性能。 12．研磨可降低加工表面的粗糙度，但不能提高加工精度中的位置精度。 13．滚齿时，刀具与工件之间的相对运动称范成运动。滚斜齿与滚直齿的区别在于多了一条附加运动传动链。 14．为了防止机床运动发生干涉，在机床传动机构中，应设置互锁装置。 15．回转,转塔车床与车床在结构上的主要区别是,没有_尾座和丝杠 二、单项选择题（每题1分，20分） 1、安装外车槽刀时，刀尖低于工件回转中心时，与其标注角度相比。其工作角度将会：（ C ） A、前角不变，后角减小； B、前角变大，后角变小； C、前角变小，后角变大； D、前、后角均不变。 2、车外圆时，能使切屑流向工件待加工表面的几何要素是：（A ） A、刃倾角大于0°； B、刃倾角小于0°； C、前角大于0°； D、前角小于0°。 3、铣床夹具上的定位键是用来（B）。 A、使工件在夹具上定位 B、使夹具在机床上定位 C、使刀具对夹具定位 D、使夹具在机床上夹紧 4、下列机床中，只有主运动，没有进给运动的机床是（ A ） A、拉床 B、插床 C、滚齿机 D、钻床 5、车削外圆时哪个切削分力消耗功率为零？（ B ） A、主切削力； B、背向力； C、进给力； D、摩擦力。 6、在金属切削机加工中，下述哪一种运动是主运动（ C ） A、铣削时工件的移动 B、钻削时钻头直线运动 C、磨削时砂轮的旋转运动 D、牛头刨床工作台的水平移动 7、控制积屑瘤生长的最有效途径是（ A ）

机械制造技术基础实验指导书

安徽三联学院 《机械制造技术基础》实验指导书 交通工程学院实验中心

实验1 、车刀几何角度测量 一、实验目的与要求 1了解车刀量角台的构造与工作原理。 2掌握车刀几何角度测量的基本方法。 3加深对车刀各几何角度、各参考平面及其相互关系的理解。 二、实验实施的条件 仪器：回转工作台式量角台 = 00） 车刀： 1直头外圆车刀（λ s 2直头外圆车刀（λ < 00） s 三、实验具体步骤 图1-1所示，回转工作台式量角台主要由底盘1、平台3、立柱7、测量片5、扇形盘6、10等组成。底盘1为圆盘形，在零度线左右方向各有1000角度，用于测量车刀的主偏角和副偏角，通过底盘指针2读出角度值；平台3可绕底盘中心在零刻线左右1000范围内转动；图1-1 量角台的构造定位块4可在平台上平行滑动，作为车刀的基准；测量片5，如图1-2所示，有主平面（大平面）、底平面、侧平面三个成正交的平面组成，在测量过程中，根据不同的情况可分别用以代表剖面、基面、切削 平面等。大扇形刻度盘6上有正副450的刻度，用于 测量前角、后角、刃倾角，通过测量片5的指针指 出角度值；立柱7上制有螺纹，旋转升降螺母8就 可以调整测量片相对车刀的位置。 1利用车刀量角台分别测量λs = 00 、λs < 00 的直头外圆车刀的几何角度： 要求学生测量κr、κr＇、λs、γo、αo、αo ＇等 图1-2 测量片 共6个基本角度。 2记录测得的数据，并计算出刀尖角ε和楔角β。 1、实验方法 1根据车刀辅助平面及几何参数的定义，首先确定辅助平面的位置，在按着几何角度的定义测出几何角度。

2通过测量片的测量面与车刀刀刃、刀面的贴合（重合）使指针指出所测的各几何角度。 2、实验步骤 1首先进行测量前的调整：调整量角台使平台、大扇形刻度盘和小扇形刻度盘指针全部指零，使定位块侧面与测量片的大平面垂直，这样就可以认为：（1）主平面垂直于平台平面，且垂直于平台对称线。 （2）底平面平行于平台平面。 （3）侧平面垂直于平台平面，且平行于平面对称线。 2测量前的准备：把车刀侧面紧靠在定位块的侧面上，使车刀能和定位块一起在平台平面上平行移动，并且可使车刀在定位块的侧面上滑动，这样就形成了一个平面坐标，可以使车刀置于一个比较理想的位置。 3测量车刀的主（副）偏角 （1）根据定义：主（副）刀刃在基面的与走刀方向夹角。 （2）确定走刀方向：由于规定走刀方向与刀具轴线垂直，在量角台上即垂直于零度线，故可以把主平面上平行于平台平面的直线作为走刀方向，其与主（副）刀刃在基面的投影有一夹角，即为主（副）偏角。 （3）测量方法：顺（逆）时针旋转平台，使主刀刃与主平面贴合。如图1-3所示，即主（副）刀刃在基面的投影与走刀方向重合，平台在底盘上所旋转的角度，即底盘指针在底盘刻度盘上所指的刻度值为主（副）偏角κr（κr＇）的角度值。 4测量车刀刃倾角（λs） （1）根据定义：主刀刃和基面的夹角。 （2）确定主切削平面：主切削平面是过主刀刃与主加工表面相切的平面，在测量车刀的主偏角时，主刀刃与主平面重合，就使主平面可以近似地看作主切削平面（只有当λs =0时，与主加工表面相切的平面才包含主刀刃），当测量片指针指零时底平面可作为基面。这样就形成了在主切削平面内，基面与主刀刃的夹角，即刃倾角。 （3）测量方法：旋转测量片，即旋转底平面（基面）使其与主刀刃重合。如图1-4所示，测量片指针所指刻度值为刃倾角。 5测量车刀主剖面内的前角γo和后角αo

新机械制造技术基础综合实验指导书

制造技术综合实验 指导书 （机械设计制造及其自动化专业）机汽学院制造工程系

附录一：车刀几何角度测量方法 一、回转工作台式量角台的构造 图1-1为回转工作台式量角台组成原理。底盘1为圆盘形，在零度线左右方向各有1000角度，用于测量车刀的主偏角和副偏角，通过底盘指针2读出角度值；工作台3可绕底盘中心在零刻线左右1000范围内转动；定位块4可在平台上平行滑动，作为车刀的基准；测量 1－底盘、2－工作台指针、3－工作台、4－定位块、 5－测量片、6－大扇形刻度盘、7－立柱、8－大螺帽、 9－旋钮、10－小扇形刻度盘 图1-1 量角台的构造图1-2 测量片 片5，如图1-2所示，有主平面（大平面）、底平面、侧平面三个成正交的平面组成，在测量过程中，根据不同的情况可分别用以代表剖面、基面、切削平面等。大扇形刻度盘6上有正负450的刻度，用于测量前角、后角、刃倾角，通过测量片5的指针指出角度值；立柱7上制有螺纹，旋转升降螺母8可调整测量片相对车刀的位置。 二、测量内容 利用车刀量角台分别测量外圆车刀的几何角度：κr、κr＇、λs、γo、αo、αo ＇等基本角度。记录测得的数据，并计算出刀尖角ε和楔角β。 三、测量方法 1、根据车刀参考平面及几何参数的定义，首先确定参考辅助平面的位置，在按照几何 角度的定义测出几何角度。 2、通过测量片的测量面与车刀刀刃、刀面的贴合（重合）使指针指出所测的各几何角 度。 四、测量步骤 1、测量前的调整：调整量角台使平台、大扇形刻度盘和小扇形刻度盘指针全部指零，使定位块侧面与测量片的大平面垂直，这样就可以认为测量片： 1）主平面垂直于平台平面，且垂直于平台对称线。

《机械制造技术基础》实验指导书(新版)

《机械制造技术基础》实验指导书 机械工程教研室 集美大学机械工程学院

实验须知 实验是获得感性知识，巩固并加深理解课堂讲授的理论，掌握实验操作技术的重要教学环节，为了更好达到上述目的，学生在实验前后必须做到以下各点： 1、每次实验前必须认真预习实验指导书，了解实验目的、要求、工作原理以及实验的步骤和方法。 2、实验时应严格遵守实验室的规章制度及操作规程，不懂之处应主动争取指导，切勿不懂装懂，从而造成不应有的损坏事故。 3、实验必须爱护实验设备、仪器及工卡量具，不许乱摸乱动与本实验无关的设备仪器，不得在实验室游逛及闲谈说笑。 4、实验室当工件安装完毕，开动机床前，须得到指导教师的同意，方可接通电源，开动机床。 5、实验完毕，应将所用工具卡量具及仪器收拾整理好放回原处，并将机床擦拭干净。 6、实验结束后，应在指定时间内交出合乎要求的实验报告，不合格者，将退回重新补做。

实验一车刀几何角度的测量 一、实验目的和要求 1、通过车刀角度的测量，进一步明确各角度的定义； 2、掌握测量车刀几何角度的方法； 3、按1:1绘制外圆车刀工作图，用测量结果标出各角度。 二、实验设备及工具 该车刀量角仪是专供测量车床上各种刀具有关角度使用的量具。该量具主要由五个部分组成，即：如图1所示 1、刀具安放旋转板及测量指针； 2、扇形刻度盘和指针 3、垂直升降杆 4、右侧小刻度盘及指针 5、底座及底座刻度盘 使用时可根据所需测量刀具的角度要求，量得所需测量的角度。 三、仪器使用说明 现以外园车刀为例，说明其具体使用方法如下：测量前，先使量角仪对零，即底座刻度盘上的小指针指向0；同时扇形刻度盘上的指针及右侧刻度盘上的指针均指向0，此时，刀具（杆）的中心线应与扇形刻度盘及指针垂直。 1、测量主偏角 将刀具放在刀具安放旋转板上，刀具侧面紧贴安放旋转板上工字架侧面，位置可调整，转动安放旋转板，使刀具的主切削刃与垂直扇形刻度盘上的指针平面 贴紧，此时观察刀具安装转盘左下方的指针所指底座圆形刻度盘的刻度即为所需

机械制造技术基础试题及答案

1.刀具后角就是指后刀面与切削平面间的夹角。 3.精车铸铁时应选用(YG3);粗车钢时,应选用(YT5)。 4.当进给量增加时,切削力(增加),切削温度(增加)。 8.机床型号由字母与数字按一定规律排列组成,其中符号C代表(车床)。 11.定位基准与工序基准不一致引起的定位误差称(基准不重合)误差,工件以平面定位时,可以不考虑(基准位置)误差。 12.机床制造误差就是属于(系统)误差,一般工艺能力系数C p应不低于(二级)。 15.工艺过程就是指用机械加工方法直接改变原材料或毛坯的形状、尺寸与性能,使之成为合格零件的过程。 一、简述切削变形的变化规律,积屑瘤对变形有什么影响？(8分) 变形规律:ro↑,Λh↓;Vc↑,Λh↓;f↑, Λh↓; HB↑, Λh↓ 积屑瘤高度Hb↑,引起刀具前角增加,使Λh↓ 六、加工下述零件,以B面定位,加工表面A,保证尺寸10＋0、2mm,试画出尺寸链并求出工序尺寸L及公差。(8分) L＝mm 2201.0- 九、在六角自动车床上加工一批18 03 .0 08 .0 φ+-mm滚子,用抽样检验并计算得到全部工件的平均尺寸为Φ17、979mm,均方根偏差为0、04mm,求尺寸分散范围与废品率。 尺寸分散范围:17、859－18、099mm 废品率: 17、3% 1.工序就是指一个工人在一台机床上对一个(或多个)零件所连续完成的那部分工艺过程。 2.剪切角增大,表明切削变形(减少);当切削速度提高时,切削变形(减少)。 3.当高速切削时,宜选用(硬质合金)刀具;粗车钢时,应选用(YT5)。 4.CA6140车床可加工公制,英制,模数与径节等四种螺纹。 5.不经修配与调整即能达到装配精度的方法称为(互换法)。 6.当主偏角增大时,刀具耐用度(减少),当切削温度提高时,耐用度(减少)。 11.定位基准面与定位元件制造误差引起的定位误差称(基准位置)误差,工件以平面定位时,可以不考虑(基准位置)误差。 12.测量误差就是属于(随机)误差,对误差影响最大的方向称误差敏感方向。 13.夹紧力的方向应与切削力方向(相同),夹紧力的作用点应该(靠近)工件加工表面。 一、金属切削过程的本质就是什么？如何减少金属切削变形？(8分)

《机械制造技术基础》

《机械制造技术基础》实验指导书 康献民 五邑大学机电系 2007年9月印刷

目录 实验一刀具角度的测量 2 实验二金属切削变形观察7 实验三车床几何精度检测及调整10 实验四切削要素对表面加工质量的影响 20实验五切削力的测量24 实验六车床静刚度测试28 实验七加工误差的统计分析32

实验一刀具角度的测量 实验项目性质：验证性 实验计划学时：2学时 一、实验目的 1．学习测量车刀几何角度的方法及仪器使用。 2．加深对车刀几何角度的定义和理解。 二、实验内容和要求 1．使用车刀量角台，测量给定外圆车刀的前角Y。、后角α0、主偏角Kr和副偏角Kr，并将测量结果记入实验报告；了解刃倾角λs定义和作用。 2．每人测三把车刀，外圆、螺纹和切断刀各一把。 ⒊根据测量结果，绘制车刀简图，并回答问题。 三、仪器及工具 车刀量角台；5种车刀模型 四、车刀量角台结构介绍与测量方法 l．量角台的主要测量参数及其范围 车刀量角台能测量主剖面和法剖面内的前角、后角、主偏角、副偏角以及刃倾角。 测量范围： 前角（Y。）：—30°～＋40°；后角（α0）：＜30°；主偏角（Kr）：≤90°；副偏角（Kr＇）≤90°；刃倾角（λs）：±45° 2. 车刀量角台的组成 ⑴车刀量角台主要由底座、立柱、刻度板、指针、标尺、滑板及紧固螺钉等组成（如图1）， 松开锁紧螺钉10，刻度板8可绕立柱4旋转，并可用螺母5，将其调整到任意高度。指针9可绕其轴在刻度板8上转动，对淮零点时，互相垂直的A、B平面则分别平行和垂直于底座1的工作面（即滑板和底座的上平面）。 ⑵松开锁紧螺钉3，标尺11与标尺座2可绕立柱4旋转，标尺座2上零线与底座之零点对准时，固定在滑板14上的二档销之中心线垂直于标尺11。 ⑶松开锁紧螺钉12，刻度板8可绕其水平轴旋转，旋转度数由指针7在度板6上指出。 ⑷忪开锁紧螺钉15，滑板14可在底座上作横向滑动，行程70mm。

机械制造技术基础试题及答案

机械制造技术基础（试题1） 一、填空选择题（30分） 1．刀具后角是指。 2．衡量切削变形的方法有两种，当切削速度提高时，切削变形（增加、减少）。 3．精车铸铁时应选用（YG3、YT10、YG8）；粗车钢时，应选用（YT5、YG6、YT30）。 4．当进给量增加时，切削力（增加、减少），切削温度（增加、减少）。 5．粗磨时，应选择（软、硬）砂轮，精磨时应选择（紧密、疏松）组织砂轮。 6．合理的刀具耐用度包括与两种。 7．转位车刀的切削性能比焊接车刀（好，差），粗加工孔时，应选择（拉刀、麻花钻）刀具。 8．机床型号由与按一定规律排列组成，其中符号C代表（车床、钻床）。 9．滚斜齿与滚直齿的区别在于多了一条（范成运动、附加运动）传动链。滚齿时，刀具与工件之间的相对运动称（成形运动、辅助运动）。 10．进行精加工时，应选择（水溶液，切削油），为改善切削加工性，对高碳钢材料应进行（退火，淬火）处理。 11．定位基准与工序基准不一致引起的定位误差称（基准不重合、基准位置）误差，工件以平面定位时，可以不考虑（基准不重合、基准位置）误差。 12．机床制造误差是属于（系统、随机）误差，一般工艺能力系数C p应不低于（二级、三

级）。 13．在常用三种夹紧机构中，增力特性最好的是机构，动作最快的是 机构。 14．一个浮动支承可以消除（0、1、2）个自由度，一个长的v型块可消除（3，4，5）个自由度。 15．工艺过程是指 。 二、外圆车刀切削部分结构由哪些部分组成绘图表示外圆车刀的六个基本角度。（8分） 三、简述切削变形的变化规律，积屑瘤对变形有什么影响（8分） 四、CA6140车床主传动系统如下所示，试列出正向转动时主传动路线及计算出最高转速与 最低转速。（8分） 五、什么叫刚度机床刚度曲线有什么特点（8分） 六、加工下述零件，以B面定位，加工表面A，保证尺寸10＋0.2mm，试画出尺寸链并求出工序尺寸L及公差。（8分）

生化实验五大技术

生化实验五大技术 一.分光光度技术 1.定义:根据物质对不同孩长的光线具有选择性吸收,每种物质都具有其特异的吸收光语。而建立起来的一种定t 、定性分析的技术。 2.基本原理:（图1-1光吸收示意） 透光度T=It/lo 吸光度A=lg(lo/ I1) 朗伯-比尔(lambert-Beeri)定律:A=KLc K 为吸光率，L 为溶液厚度(em), c 为溶液浓度 (mol/L)] 摩尔吸光系数日ε:1摩尔浓度的溶液在厚度为 I.cm 的吸光度。 c=A/ε 3. 定量分析: (1)标准曲线(工作曲线)法 (2) 对比法元-KCLCx (3)计算法: e=A/ε (4)差示分析法(适用于浓度过浓成过稀) (5) 多组分湖合物测定 4.技术分类 分子吸收法&原子吸收法:

可见光(400-760 nm) &紫外光(200~ 40m) &红外光(大于760 nm)分光光度法； 5.应用方向 有机物成分分析&结构分析红外分光光度法测定人体内的微量元囊原子吸收分光光度法 二电脉技术 1.定义:带电荷的供试品在情性支持介质中，在电场的作用下，向其对应的电 极方向按各自的速度进行脉动。使组分分离成族窄的区带，用透宜的检洲方法记录其电泳区带图请或计算其百分含量的方法。 2.基本原理: 球形质点的迁移率与所带电成正比，与其半径及介质粘度成反比。v=Q/6xrη 3.影响电泳迁移率的因素: 电场强度电场强度大，带电质点的迁移率加速 溶液的PH值: 溶液的pH离pl越远，质点所带净电荷越多，电泳迁移幸越大 溶液的离子强度:电泳液中的高子浓度增加时会引起质点迁移率的降低 电渗:在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗 4:技术分类: 自由电泳(无支持体) 区带电泳(有支持体):法纸电泳(常压及高压)，博层电泳(薄膜及薄板).凝波电泳(琼脂，琼脂糖、淀粉胶、柔丙烁配胶凝胶)等 5. 电泳分析常用方法及其特点: 小分子物质滤纸、纤维素、硅胶薄膜电泳复杂大分子物质凝胶电泳 ⑴醋酸纤维素薄膜电泳 ①这种薄顺对蛋白质样品吸阴性小，消除纸电沫中出现的“拖尾”现象 ②分离理应快，电泳时间短 ③样品用最少: ④经过冰最酸乙醉溶液或其它看明液处理后可使膜透明化有利丁对电泳图潜的光吸收措测店和爱的长期保 ------别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测(胰岛素、游菌酶、胎儿甲种球

机械制造技术基础__实验指导书

工程技术系机电一体化专业 机械制造技术 实 训 指 导 书 编写人：王钧赵力杰 目录 实验一车刀几何角度测量 (2)

实验二车床三箱结构认识 (6) 实验三滚齿机的调整与加工 (13) 实验四机床工艺系统刚度测定 (19) 实验五加工误差统计分析 (24) 实验一车刀几何角度测量 一、实验目的 1、加深对刀具几何角度及各参考坐标平面概念的理解； 2、了解万能量角台的工作原理，掌握刀具几何角度的测量方法； 3、学会刀具工作图的表示方法。

二、实验设备 1、万能量角台一台。 2、测量用车刀若干把。 三、实验原理 刀具几何角度的测量是使用刀具角度测量仪完成的，刀具角度测量仪即万能量角台的测量原理如图1-1所示，立柱式万能量角台主要由台座、立柱、垂直升降转动套、水平回转臂、移动刻度盘和指度片等零件组成。松开侧锁紧螺钉，可使垂直升降转动套带动水平回转臂上下移动，松开前锁紧螺钉，可使水 1.台座 2.立柱 3.前锁紧杆 4.滑套 5. 侧锁紧螺杆 6.挡片 7.水平转臂 8.挡片 9.移动刻度盘 10.指度片 11.紧固螺钉 12.定位销钉 图1-1 万能量角台示意图 平回转臂和移动刻度盘绕水平轴转动。移动刻度盘可沿着水平回转臂上的水平槽水平移动，并根据测量需要紧固在某一确定位置。指度片可绕螺钉销轴转动，其底部靠近被测量的表面，指针指示测量角度。用上述这些零件位置的变动，即可实现各参考平面内刀具角度的测量。测量时，刀具放在台座上，以刀杆的一侧靠在两定位销内侧定位。

四、实验内容 1）测量主偏角 k r 滑套上的“0”刻度对准立柱上的标定线，测量时只可上下移动，不得转动。转动水平回转臂，使其上的“0”刻度线对准滑套上的标定线。调整测量指度片，使指度片的底面与主切削刃重合，制度片的指针所指的角度为主偏角 k。 r 2）测量负偏角' k r 方法同上，只是让指度片的底面与副切削刃重合，指针所指读数为负偏角' k。 r γ 3）测量前角 滑套上的“0”刻度对准立柱上的标定线后，再把滑套相对于标定线顺时针转动一个主偏角的余角，转动水平回转臂，使水平回转臂上的“90”刻度线对准滑套上的“90”刻度线，调整指度片，使指度片的底面与前刀面重合，制度片 γ。 的指针所指的角度为 α 4）测量后角 方法同上，只是让指度片的后侧面与主后面重合，指度片指针所指的角度为α。 后角 λ 5）测量刃倾角 s 滑套上的“0”刻度对准立柱上的标定线后，再把滑套相对于标定线逆时针旋转一个主片角使主刀刃与指度片的前侧面靠紧，再沿立柱移动滑套，使指度片 λ。 的底侧面与主刀刃贴紧，指度片指针所指的角度为 s 五、实验注意事项 1、调整角度要准确，该靠紧的面要全部靠紧。 2、该松的零件要放松，该紧固的零件要拧紧。 3、注意安全，不要让刀刃碰住身体。 六、实验报告（格式） 1、实验目的： 2、实验仪器： 3、实验数据： 表1-1 实验数据表

机械制造技术基础考试试卷

Time will pierce the surface or youth, will be on the beauty of the ditch dug a shallow groove 。Jane will eat rare!A born beauty, anything to escape his sickle sweep .-- Shakespeare

2. 切屑的类型分为（）、（）、 （）、（）四种类型。 3. 刀具前角增大，切屑变形（），切削力（），切削温度（）。 4．对于外圆表面，粗加工可以采用（）的加工方法，精加工可以采用 ( )或（）的加工方法。 5. 选择定位基准时，从保证工件重要表面加工余量均匀考虑，应选择工件上重要表面作为（）基准。 6．零件的加工一般要经过（）、（）、（）等三个加工阶段。如果零件的精度和表面质量要求更高，还要经过（）加工阶段。 7．对于小直径孔的精加工，较为经济的加工方法是（）。 8. 缩短基本时间能提高生产率，可以采用的工艺途径有（）、（）、（）。 二、选择（单选题，10分） 1．在工序图上用来确定本工序加工表面尺寸、形状和位置所依据的基准，称为（）。 A. 测量基准 B. 工序基准 C. 定位基准 D. 装配基准 2. 在下面孔的加工方法中，加工精度最高的方法是（）。 A. 钻孔 B. 铰孔 C. 扩孔 3.在下面几种车床导轨误差中，对加工精度影响最小的是（）。 A. 导轨在垂直平面内的误差 B. 导轨在水平面内的误差 C. 两导轨之间的平行度误差

4．对于相互位置精度要求高的大孔孔系的精加工（例如车床主轴箱箱体孔系的精加工），应该采用（）加工工艺。 A. 扩孔 B. 钻孔 C. 镗孔 D. 铰孔 5.分组装配法适用于（）的机器结构。 A. 大量生产，装配精度要求高，组成环多 B. 小批生产，装配精度要求高，组成环多 C. 大量生产，装配精度要求不高，组成环少 D. 大量生产，装配精度要求高，组成环少 6．在下列夹具元件中，不限制自由度的是（）。 A. 可调支承 B. 自位支承 C. 辅助支承 7. 磨削薄板时，由于工件的热变形，工件的（），加工误差就越大。 A.材料热膨胀系数小 B.长度和厚度小 C.长度大并且厚度小 D.长度和厚度都大 8. 工件装夹时，决不允许（）的情况发生。 A. 欠定位 B. 过定位 C. 产生夹紧变形 9. 切削用量三要素影响刀具寿命的规律是（）。 A. 切削速度>进给量>被吃刀量 B. 进给量> 切削速度>被吃刀量 C. 被吃刀量> 切削速度> 进给量 10.复杂刀具通常采用的刀具材料为（）。 A. 硬质合金 B. 高速钢 C. 陶瓷 D. 金刚石 三、简答分析题（35分）

机械制造技术基础期末考试试题与答案全解

一、名词解释 1.六点定位原理：采用六个按一定规则布置的支承点，并保持与工件定位基准面的接触，限制工件的六 个自由度，使工件位置完全确定的方法。 2.过定位：也叫重复定位，指工件的某个自由度同时被一个以上的定位支撑点重复限制。 3.加工精度：零件加工后的实际几何参数和理想几何参数符合程度。加工误差：零件加工后的实际参数 和理想几何参数的偏离程度。 4.原始误差：由机床，刀具，夹具，和工件组成的工艺系统的误差。 5.误差敏感方向：过切削刃上的一点并且垂直于加工表面的方向。 6.主轴回转误差：指主轴瞬间的实际回转轴线相对其平均回转轴线的变动量。 7.表面质量：通过加工方法的控制，使零件获得不受损伤甚至有所增强的表面状态。包括表面的几何形 状特征和表面的物理力学性能状态。 8.生产过程：从原料（或半成品）进厂一直到把成品制造出来的各有关劳动过程的总和统称工厂的生产 过程。 9.工艺过程：在生产过程中凡是改变生产对象的形状、尺寸、位置和性质等使其成为成品或半成品的过 程。 10.工艺规程：人们把合理工艺过程的有关内容写成工艺文件的形式，用以指导生产这些工艺文件即为工 艺规程。 11.工序：一个工序是一个或一组工人在一台机床（或一个工作地），对同一工件（或同时对几个）所连续 完成的工艺过程。 12.工步：在加工表面不变，加工刀具不变，切削用量不变的条件下所连续完成的那部分工序。 13.工位：在工件的一次安装后，工件相对于机床（或刀具）每次占据一个确切位置所完成的那一部分工 艺过程。例如：在一次安装中进行车端面，倒角属于2个工位。 14.走刀：在一个工步中，若金属分几次切削，则切削一次，称一次走刀。例如：粗车外圆分几次走刀。 15.定位：使工件在机床或夹具中占有准确的位置。 16.夹紧：在工件夹紧后用外力将其固定，使其在加工过程中保持定位位置不变的操作。 17.安装：工件一次装夹后所完成的那一部分工艺过程。装夹：就是定位和夹紧过程的总和。2者的区别： 安装是工艺过程的一部分，可由装夹次数衡量。装夹是定位和夹紧的过程。 18.基准：零件上用来确定点线面位置是作为参考的其他点线面。

生物化学实验思考题

生物化学实验思考题

————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:

生物化学实验考试试题

细胞破碎 1 常用的细胞破碎的方法有哪些？ 机械法：研磨，高速捣碎机;物理法:反复冻溶,超声波破碎，压榨法；化学与生物化学法:自溶，溶胀法，酶解法，有机溶剂处理。 2 有机溶剂法破碎细胞原理，常用的有机溶剂有哪些? 有机溶剂溶解细胞壁并使之失稳。比如笨、甲苯、氯仿、二甲苯及高级醇等 ３酶法破碎细胞原理:酶分解作用 4反复冻融法破碎细胞原理：通过反复将细胞放在低温下突然冷却和室温下融化达到破壁作用 层析技术 1.什么叫层析技术？ 层析技术是利用混合物中各组分理化性质的差别（分子亲和力、吸附力、分子的形状和大小、分配系数等),使各组分以不同程度分布在两个相，其中一个是固定相，另一个是流动相,从而使各组分以不同速度移动而使其分离的方法。 2、按层析过程的机理，层析法分哪几类？按操作形式不同又分哪三类? 根据分离的原理不同分类,层析主要可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。 按操作形式不同又分层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。 3.指出常用层析技术的应用范围。 凝胶层析法:⑴脱盐;⑵用于分离提纯；⑶测定高分子物质的分子量;⑷高分子溶液的浓缩离子交换层析法：主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质，也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子 高效液相层析法:⑴液-固吸附层析；⑵液-液分配层析；⑶离子交换层析 ４.ＳeｐhadｅxG-１0０凝胶柱层析分离蛋白质原理是什么? 大小不同的分子经过的路线长短不同而达到分离作用。 ５．用SeｐhａdeｘG2５脱盐时蛋白质和盐哪个先出峰?蛋白质 6．相对分子量为8万和1０万的蛋白质能否在SephadｅxＧ－７5柱中分开？为什么？不能,分子量差距太小。 7．将分子量分别为a(9０000）、b(45０0０）、c（１10 000)的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析,正常情况下,将它们按被洗脱下来的先后排序。ｃ、ａ、ｂ 8.离子交换层析与凝胶过滤哪种分辨率高?离子交换层析较高。 9.如果样品中只有Ala和His(Ala pI=6．0，Ｈis pＩ＝7.6)，在ｐH4条件下，这两种氨基酸那一种与CM(阳离子交换剂)结合的紧密?如果用pH4-7的洗脱液梯度洗脱，那种氨基酸先洗脱出来？Aｌa 10. 柱层析时湿装柱的注意事项有哪些？ 用水灌注、不能有气泡。 11.说说离子交换层析中洗脱液的选择原则

现代机械制造技术基础实验

c:\iknow\docshare\data\cur_work\https://www.wendangku.net/doc/4113435624.html,\ 机械制造技术基础 实验指导书 编写：詹友基

福建工程学院机电及自动化工程系 2006 年 2 月 目录 一、车刀几何角度测量 二、切削变形实验 三、切削力实验 四、车床三向静刚度测定实验 五、加工精度的统计分析实验 六、切削区平均温度的测量

实验1 车刀几何角度测量 一、实验目的与要求 1、了解车刀量角仪的结构与工作原理。 2、进一步熟悉车刀切削部分的构造要素，巩固和加深对刀具各标注平面参考系及标注角度基本定义的理解。并掌握车刀测量方法。 3、通过对车刀各剖面内角度的测量与计算，进一步理解它们之间几何关系。 4、测量给定车刀的几何角度，将测得的数据填入表格中，并对测量结果进行分析。 二、实验设备与工具 1、仪器：车刀量角仪 2、测量用车刀：45°外圆车刀，75°外圆车刀，90°外圆车刀，切断刀，大刃倾角车刀。 三、车刀量角仪的结构与使用方法 1、图1-1量角仪(本校制造) 图1-1 量角仪（本校） 量角仪由底置l、转盘9、立柱3和刻度盘6、测量片7等零件组成。底盘1用来安装立柱3，并以销2孔为中心刻着±100°的转盘9，当转盘9两侧面的基线对准底盘刻线转90°

时。定位块10的d 面是垂直的。当测量片7的指针对着刻度盘0°时，测量片7的b 面与转盘9的平面是平行的，而且垂直于C 面、A 面。立柱3的上下移动靠螺母4来调整。 2、图1-2量角仪（哈尔滨工业大学） 图1-2 量角仪（哈尔滨工业大学） 量角仪由底座l 、平台3、立柱7和大小扇形盘6、11、大小指针5、10等零件组成。 底座l 呈圆盘形，平台3可绕底座中心转动，底座外缘左、右各有刻度l00°，当基线板2对准圆盘刻线0°时，活动尺4侧边与指针5下端的测量板平面垂直。测量板5上有三个测量刃口A 、B 、C ，其所在平面即为测量车刀角度时的测量平面。当小指针l0和大指针5均为0°时，刃口A 与平台平面平行，B 、C 与平台平面垂直。 四、实验步骤和方法(本校制造) 要测量某一车刀角度时，首先应规定一个假定走刀方向，即要先辩明车刀的主、副切削刃及前、后刀面，以确定需要测量角度的位置。然后将车刀放在转动平台上，左或右侧面靠在活动尺的侧面上。 测量角度的顺序通常先测偏角，再测刃倾角，继而测前角、后角。这样调整方便，也可提高工作效率。即测量顺序为： 主切削刃：r k ——s λ——o γ——o α；副切削刃：r k '——s λ'——o γ'——o α'。