文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › Challenges and Prospects

Challenges and Prospects

脐带干细胞综述

脐带间充质干细胞的研究进展 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC S )是来源于发育早期中胚层 的一类多能干细胞[1-5],MSC S 由于它的自我更新和多项分化潜能,而具有巨大的 治疗价值 ,日益受到关注。MSC S 有以下特点:(1)多向分化潜能,在适当的诱导条件下可分化为肌细胞[2]、成骨细胞[3、4]、脂肪细胞、神经细胞[9]、肝细胞[6]、心肌细胞[10]和表皮细胞[11, 12];(2)通过分泌可溶性因子和转分化促进创面愈合;(3) 免疫调控功能,骨髓源(bone marrow )MSC S 表达MHC-I类分子,不表达MHC-II 类分子,不表达CD80、CD86、CD40等协同刺激分子,体外抑制混合淋巴细胞反应,体内诱导免疫耐受[11, 15],在预防和治疗移植物抗宿主病、诱导器官移植免疫耐受等领域有较好的应用前景;(4)连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能,可作为理想的种子细胞用于组织工程和细胞替代治疗。1974年Friedenstein [16] 首先证明了骨髓中存在MSC S ,以后的研究证明MSC S 不仅存在于骨髓中,也存在 于其他一些组织与器官的间质中:如外周血[17],脐血[5],松质骨[1, 18],脂肪组织[1],滑膜[18]和脐带。在所有这些来源中,脐血(umbilical cord blood)和脐带(umbilical cord)是MSC S 最理想的来源,因为它们可以通过非侵入性手段容易获 得,并且病毒污染的风险低,还可冷冻保存后行自体移植。然而,脐血MSC的培养成功率不高[19, 23-24],Shetty 的研究认为只有6%,而脐带MSC的培养成功率可 达100%[25]。另外从脐血中分离MSC S ,就浪费了其中的造血干/祖细胞(hematopoietic stem cells/hematopoietic progenitor cells,HSCs/HPCs) [26, 27],因此,脐带MSC S (umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSC S )就成 为重要来源。 一.概述 人脐带约40 g, 它的长度约60–65 cm, 足月脐带的平均直径约1.5 cm[28, 29]。脐带被覆着鳞状上皮,叫脐带上皮,是单层或复层结构,这层上皮由羊膜延续过来[30, 31]。脐带的内部是两根动脉和一根静脉,血管之间是粘液样的结缔组织,叫做沃顿胶质,充当血管外膜的功能。脐带中无毛细血管和淋巴系统。沃顿胶质的网状系统是糖蛋白微纤维和胶原纤维。沃顿胶质中最多的葡萄糖胺聚糖是透明质酸,它是包绕在成纤维样细胞和胶原纤维周围的并维持脐带形状的水合凝胶,使脐带免受挤压。沃顿胶质的基质细胞是成纤维样细胞[32],这种中间丝蛋白表达于间充质来源的细胞如成纤维细胞的,而不表达于平滑肌细胞。共表达波形蛋白和索蛋白提示这些细胞本质上肌纤维母细胞。 脐带基质细胞也是一种具有多能干细胞特点的细胞,具有多项分化潜能,其 形态和生物学特点与骨髓源性MSC S 相似[5, 20, 21, 38, 46],但脐带MSC S 更原始,是介 于成体干细胞和胚胎干细胞之间的一种干细胞,表达Oct-4, Sox-2和Nanog等多

二、分析天平的基本操作

模块二滴定分析基本操作任务一分析天平的基本操作 一、分析天平的分类 分析天平是定量分析中最常用的准确称量物质的仪器。分析天平分类:等臂(双盘)分析天平、不等臂(单盘)分析天平、电子天平。 二、电子天平的介绍 1、工作原理:电磁平衡原理,秤盘通过支架连杆支架作用于线圈上,重力方向向下。线圈内有电流通过时,根据电磁基本理论,通电的导线在磁场中将产生一个向上作用的电磁力,与秤盘重力方向相反大小相同,与之相平衡,而通过导线的电流与被称物体的质量成正比。 2、性能特点:a.使用寿命长,性能稳定,灵敏度高,体积小,操作方便 b.称 量速度快、精度高 c.具有自动校准、累计称量、超载显示、自动去皮等功能 3、称量的一般程序 水平调节——打扫——预热——开启显示器——校准——称量——结束工作 ①水平调节检查水平仪,调节水平调节脚,使水泡位于水平仪中心。 ②打扫打扫天平秤盘 ③预热通电预热30min以上 ④开启显示器按ON键,显示器亮,显示屏出现0.0000g ⑤校准按“校准”键 ⑥称量被称物置于秤盘中间进行称量 ⑦称量结束工作取下被称物,核对零点,关闭天平,进行使用登记 4、基本称量方法 ①直接称量法将称量物直接放在天平盘上直接称量物体的质量。例如,称量 小烧杯的质量,容量器皿校正中称量某容量瓶的质量,重量分析实验中称量某坩埚的质量等,都使用这种称量法。 ②固定质量称量法

用于称量某一固定质量的试剂(如基准物质)或试样。适于称量不易吸潮、在空气中能稳定存在的粉末状或小颗粒样品。 A、去皮将干燥的容器置于秤盘上,待显示平衡后按“去皮”键扣除皮重并显示零点 B、加样打开天平门,用药匙将试样抖入容器内,使之达到所需质量。 固定质量称量法注意:若不慎加入试剂超过指定质量,用牛角匙取出多余试剂,直至试剂质量符合指定要求为止。严格要求时,取出的多余试剂应弃去,不要放回原试剂瓶中。操作时不能将试剂散落于天平盘等容器以外的地方,称好的试剂必须定量地由表面皿等容器直接转入接受容器,此即所谓“定量转移”。 ③递减称量法(减量法) 用于称量一定质量范围的样品或试剂。样品易吸水、易氧化或易与二氧化碳等反应时,可选择此法。。 称量步骤:试样的保存——取出盛试样的称量瓶——称出称量瓶质量——敲样——再称出其质量——样品质量——连续称样——称量工作结束 A、试样保存待称样品放于洁净的干燥容器(称量瓶)中,置于干燥器中保存 B、取出称量瓶左手戴手套取出称量瓶或者用折叠成约1cm的纸取出 C、称出称量瓶质量称出称量瓶质量,记录数据 D、敲样将称量瓶取出,在接收容器的上方倾斜瓶身,用称量瓶盖轻敲瓶口上部使试样慢慢落入容器中,瓶盖始终不要离开接受器上方。当倾出的试样接近所需量时,一边继续用瓶盖轻敲瓶口,一边逐渐将瓶身竖直,使粘附在瓶口上的试样落回称量瓶,然后盖好瓶盖,准确称其质量。两次质量之差,即为试样的质量。按上述方法连续递减,可称量多份试样。

脐带血造血干细胞库管理办法(试行)

脐带血造血干细胞库管理办法(试行) 第一章总则 第一条为合理利用我国脐带血造血干细胞资源,促进脐带血造血干细胞移植高新技术的发展,确保脐带血 造血干细胞应用的安全性和有效性,特制定本管理办法。 第二条脐带血造血干细胞库是指以人体造血干细胞移植为目的,具有采集、处理、保存和提供造血干细胞 的能力,并具有相当研究实力的特殊血站。 任何单位和个人不得以营利为目的进行脐带血采供活动。 第三条本办法所指脐带血为与孕妇和新生儿血容量和血循环无关的,由新生儿脐带扎断后的远端所采集的 胎盘血。 第四条对脐带血造血干细胞库实行全国统一规划,统一布局,统一标准,统一规范和统一管理制度。 第二章设置审批 第五条国务院卫生行政部门根据我国人口分布、卫生资源、临床造血干细胞移植需要等实际情况,制订我 国脐带血造血干细胞库设置的总体布局和发展规划。 第六条脐带血造血干细胞库的设置必须经国务院卫生行政部门批准。 第七条国务院卫生行政部门成立由有关方面专家组成的脐带血造血干细胞库专家委员会(以下简称专家委

员会),负责对脐带血造血干细胞库设置的申请、验收和考评提出论证意见。专家委员会负责制订脐带血 造血干细胞库建设、操作、运行等技术标准。 第八条脐带血造血干细胞库设置的申请者除符合国家规划和布局要求,具备设置一般血站基本条件之外, 还需具备下列条件: (一)具有基本的血液学研究基础和造血干细胞研究能力; (二)具有符合储存不低于1 万份脐带血的高清洁度的空间和冷冻设备的设计规划; (三)具有血细胞生物学、HLA 配型、相关病原体检测、遗传学和冷冻生物学、专供脐带血处理等符合GMP、 GLP 标准的实验室、资料保存室; (四)具有流式细胞仪、程控冷冻仪、PCR 仪和细胞冷冻及相关检测及计算机网络管理等仪器设备; (五)具有独立开展实验血液学、免疫学、造血细胞培养、检测、HLA 配型、病原体检测、冷冻生物学、 管理、质量控制和监测、仪器操作、资料保管和共享等方面的技术、管理和服务人员; (六)具有安全可靠的脐带血来源保证; (七)具备多渠道筹集建设资金运转经费的能力。 第九条设置脐带血造血干细胞库应向所在地省级卫生行政部门提交设置可行性研究报告,内容包括:

电子天平使用说明书.

电子天平使用说明书 使用方法 ◎准备 1、将天平安放在稳定及水平的工作台上,避免振动、气流、阳光直射和剧烈的温度波动; 2、安装称盘; 3、接通电源前请确认当地交流电压是否与天平所附的电源适配器所需电压一致; 4、为获得准确的称量结果,在进行称量前天平应接通电源预热30分钟。 ◎电源 1. 天平随机附配交流电源适配器,输入220+22-33V ~ 50Hz 输出9V 300mA 2. 天平选用电池供电时可打开天平底部的电池盖按极性指示装入电池即可,建议使用9伏碱性电池,可连续工作约12小时。 当天平电池供电时,显示屏左上角电量指示框显示段数表明电池的状态(显示3段:电池充足,显示0段:电池耗尽,当电池电量将耗尽时,最后一个显示段闪烁。 ◎开机 在称盘空载情况下按<开/关>键,天平依次进入自检显示(显示屏所有字段短时点亮、型号显示和零状态显示,当天平显示零状态时即可进行称量; 当遇到相关功能键设置有误无法恢复时,按<开/关>键重新开机即可恢复初始设置状态。

◎校准 为获得准确的称量结果,必须对天平进行校准以适应当地的重力加速度。校准应在天平预热结束后进行,遇到以下情况必须使用外部校准砝码对天平进行校准。 1. 首次使用天平称量之前; 2. 天平改变安放位置后。 校准方法与步骤: 1.准备好校准用的标准砝码并确保称盘空载; 2.按<去皮>键:天平显示零状态; 3.按<校准>键:天平显示闪烁的CAL—XXX,(XXX一般为100、200或其它数字,提醒使用相对应的100g、200g或其它规格的标准砝码 4.将标准砝码放到称盘中心位置,天平显示CAL-XXX,等待几秒钟后,显示标准砝码的量值。此时移去砝码,天平显示零状态,则表示校准结束,可以进行称量。如天平不零状态,应重复进行一次校准工作。 ◎称量 天平经校准后即可进行称量,称量时必须等显示器左下角的“○”标志熄灭后才可读数,称量过程中被称物必须轻拿轻放,并确保不使天平超载,以免损坏天平的传感器。 ◎清零或去皮 清零:当天平空载时,如显示不在零状态,可按<去皮>键,使天平显示零状态。此时才可进行正常称量。

分析天平使用说明书

TG-328分析天平使用说明书 一、分析天平结构及作用原理: 1.该分析天平,是属于双盘等臂式,横梁采用铜镍合金制成,上面装有玛瑙刀三把,中间为固定的支点刀,两边可调整的承重刀。 好仪器,好资料,尽在沧州建仪(https://www.wendangku.net/doc/4e1652159.html,)。欢迎查询。 打造中国建仪销售第一品牌,树立沧州产品全新形象 2.支点刀位于支点刀垫上,支点刀垫固定在天平立柱上端。 3.横梁停动装置为双层折翼式,在天平开启时,横梁上的承重刀必须比支点刀先接角触,为了避免刀锋损坏和保证横梁位置的再现性,开启天平求轻稳,避免冲击,摇晃。 4.横梁的左右两端悬挂承重挂钩,左承重挂钩上装有砝码承重架,该二零碎件分别挂在小刀刃上,另有秤盘各一件分别挂在承重挂钩上。 5.整个天平固定在大理石的基座板上,底板前下部装有二只可供调整水平位置的螺旋脚,后面装有一只固定脚,天平木框前面有一扇可供启闭及随意停止在上下位置的玻璃门,右侧有一扇玻璃移门。 6.秤盘上节中间的阻尼装置,是用铝合金板制成,固定在中柱上。是利用空气阻力来减少横梁的摆动时间,达到静止迅速,从而提高工作效率。

7.光学报影装置,固定在底板上前方,可直接读出0.1-10毫克以内的重量值。 8.天平外框左侧装有机械加码装置,通过三档增减砝码的指示旋钮来变换自10毫克-199.99克砝码以内所需重量值。 二、分析天平主要技术指标: 规格型号技术参数:秤盘尺寸 TG328A200g/0.1mg80mm TG328B200g/0.1mg80mm1 TG628A200g/1mg80mm 三、分析天平性能特点: 1.TG系列双盘机械天平,采用空气阻尼,光电读数,具有称量准确,读数简便,价格实惠。 2.专供实验室,学校,工矿等作精密称量分析用。 四、天平的安装方法: a.安装前的准备工作安装前的准备工作安装前的准备工作安装前的准备工作 1.安装选择:天平必须放在牢固的台上,不准有震动,气流存在,室内气温要求干燥明亮,温度最好保持在20℃±2℃左右,避免阳光晒射单面受热和气温潮湿,反之影响天平的灵敏度和正确性。

电子精密天平秤的使用方法及注意事项(正式版)

电子精密天平秤的使用方法及注意事项 刘维彬电子精密天平秤是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌握其使用方法,是获得可靠分析结果的保证。精密天平的种类很多,有普通精密天平、半自动/全自动加码电光投影阻尼精密天平及电子精密天平等。下面就电子精密天平的使用方法及注意事项做一介绍。 操作方法: 1.检查并调整天平至水平位置。 2.事先检查电源电压是否匹配(必要时配置稳压器),按仪器要求通电预热至所需时间。 3.预热足够时间后打开天平开关,天平则自动进行灵敏度及零点调节。待稳定标志显示后,可进行正式称量。 4.称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,轻按一下去皮键,天平将自动校对零点,然后逐渐加入待称物质,直到所需重量为止。 5.称量结束应及时除去称量瓶(纸),关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。 注意事项: 1.天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥及较恒定的温度,同时应避免光线直接照射到天平上。 2.称量时应从侧门取放物质,读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。前门仅在检修或清除残留物质时使用。 3.电子精密天平若长时间不使用,则应定时通电预热,每周一次,每次预热

2h,以确保仪器始终处于良好使用状态。 4.天平箱内应放置吸潮剂(如硅胶),当吸潮剂吸水变色,应立即高温烘烤更换,以确保吸湿性能。 5.挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。 6.称量重量不得过天平的最大载荷。 7.经常对电子天平进行自校或定期外校,保证其处于最佳状态。 8.天平发生故障,不得擅自修理,应立即报告测试中心质量负责人。 9.天平放妥后不宜经常搬动。必须搬动时,移动天平位置后,应由市计量部门校正计量合格后,方可使用。

卫生部办公厅关于印发《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)

卫生部办公厅关于印发《脐带血造血干细胞治疗技术管理规 范(试行)》的通知 【法规类别】采供血机构和血液管理 【发文字号】卫办医政发[2009]189号 【失效依据】国家卫生计生委办公厅关于印发造血干细胞移植技术管理规范(2017年版)等15个“限制临床应用”医疗技术管理规范和质量控制指标的通知 【发布部门】卫生部(已撤销) 【发布日期】2009.11.13 【实施日期】2009.11.13 【时效性】失效 【效力级别】部门规范性文件 卫生部办公厅关于印发《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)》的通知 (卫办医政发〔2009〕189号) 各省、自治区、直辖市卫生厅局,新疆生产建设兵团卫生局: 为贯彻落实《医疗技术临床应用管理办法》,做好脐带血造血干细胞治疗技术审核和临床应用管理,保障医疗质量和医疗安全,我部组织制定了《脐带血造血干细胞治疗技术管理规范(试行)》。现印发给你们,请遵照执行。 二〇〇九年十一月十三日

脐带血造血干细胞 治疗技术管理规范(试行) 为规范脐带血造血干细胞治疗技术的临床应用,保证医疗质量和医疗安全,制定本规范。本规范为技术审核机构对医疗机构申请临床应用脐带血造血干细胞治疗技术进行技术审核的依据,是医疗机构及其医师开展脐带血造血干细胞治疗技术的最低要求。 本治疗技术管理规范适用于脐带血造血干细胞移植技术。 一、医疗机构基本要求 (一)开展脐带血造血干细胞治疗技术的医疗机构应当与其功能、任务相适应,有合法脐带血造血干细胞来源。 (二)三级综合医院、血液病医院或儿童医院,具有卫生行政部门核准登记的血液内科或儿科专业诊疗科目。 1.三级综合医院血液内科开展成人脐带血造血干细胞治疗技术的,还应当具备以下条件: (1)近3年内独立开展脐带血造血干细胞和(或)同种异基因造血干细胞移植15例以上。 (2)有4张床位以上的百级层流病房,配备病人呼叫系统、心电监护仪、电动吸引器、供氧设施。 (3)开展儿童脐带血造血干细胞治疗技术的,还应至少有1名具有副主任医师以上专业技术职务任职资格的儿科医师。 2.三级综合医院儿科开展儿童脐带血造血干细胞治疗技术的,还应当具备以下条件:

卫生部关于印发《脐带血造血干细胞库设置管理规范(试行)》的通知

卫生部关于印发《脐带血造血干细胞库设置管理规范(试行)》的通知 发文机关:卫生部(已撤销) 发布日期: 2001.01.09 生效日期: 2001.02.01 时效性:现行有效 文号:卫医发(2001)10号 各省、自治区、直辖市卫生厅局: 为贯彻实施《脐带血造血干细胞库管理办法(试行)》,保证脐带血临床使用的安全、有效,我部制定了《脐带血造血干细胞库设计管理规范(试行)》。现印发给你们,请遵照执行。 附件:《脐带血造血干细胞库设置管理规范(试行)》 二○○一年一月九日 附件: 脐带血造血干细胞库设置管理规范(试行) 脐带血造血干细胞库的设置管理必须符合本规范的规定。 一、机构设置 (一)脐带血造血干细胞库(以下简称脐带血库)实行主任负责制。 (二)部门设置 脐带血库设置业务科室至少应涵盖以下功能:脐带血采运、处理、细胞培养、组织配型、微生物、深低温冻存及融化、脐带血档案资料及独立的质量管理部分。 二、人员要求

(一)脐带血库主任应具有医学高级职称。脐带血库可设副主任,应具有临床医学或生物学中、高级职称。 (二)各部门负责人员要求 1.负责脐带血采运的人员应具有医学中专以上学历,2年以上医护工作经验,经专业培训并考核合格者。 2.负责细胞培养、组织配型、微生物、深低温冻存及融化、质量保证的人员应具有医学或相关学科本科以上学历,4年以上专业工作经历,并具有丰富的相关专业技术经验和较高的业务指导水平。 3.负责档案资料的人员应具相关专业中专以上学历,具有计算机基础知识和一定的医学知识,熟悉脐带血库的生产全过程。 4.负责其它业务工作的人员应具有相关专业大学以上学历,熟悉相关业务,具有2年以上相关专业工作经验。 (三)各部门工作人员任职条件 1.脐带血采集人员为经过严格专业培训的护士或助产士职称以上卫生专业技术人员并经考核合格者。 2.脐带血处理技术人员为医学、生物学专业大专以上学历,经培训并考核合格者。 3.脐带血冻存技术人员为大专以上学历、经培训并考核合格者。 4.脐带血库实验室技术人员为相关专业大专以上学历,经培训并考核合格者。 三、建筑和设施 (一)脐带血库建筑选址应保证周围无污染源。 (二)脐带血库建筑设施应符合国家有关规定,总体结构与装修要符合抗震、消防、安全、合理、坚固的要求。 (三)脐带血库要布局合理,建筑面积应达到至少能够储存一万份脐带血的空间;并具有脐带血处理洁净室、深低温冻存室、组织配型室、细菌检测室、病毒检测室、造血干/祖细胞检测室、流式细胞仪室、档案资料室、收/发血室、消毒室等专业房。 (四)业务工作区域应与行政区域分开。

脐带血间充质干细胞的分离培养和鉴定

脐带血间充质干细胞的分离培养和鉴定 【摘要】目的分离培养脐带血间充质干细胞并检测其生物学特性。方法在无菌条件下用密度梯度离心的方法获得脐血单个核细胞,接种含10%胎牛血清的DMEM培养基中。单个核细胞行贴壁培养后,进行细胞形态学观察,绘制细胞生长曲线,分析细胞周期,检测细胞表面抗原。结果采用Percoll(1.073 g/mL)分离的脐血间充质干细胞大小较为均匀,梭形或星形的成纤维细胞样细胞。细胞生长曲线测定表明接后第5天细胞进入指数增生期,至第9天后数量减少;流式细胞检测表明50%~70%细胞为CD29和CD45阳性。结论体外分离培养脐血间充质干细胞生长稳定,可作为组织工程的种子细胞。 【关键词】脐血;间充质干细胞;细胞周期;免疫细胞化学 Abstract: Objective Isolation and cultivation of mesenchymal stem cells (MSCs) in human umbilical cord in vitro, and determine their biological properties. Methods The mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation from human umbilical cord blood in sterile condition, and cultured in DMEM medium containing 10% fetal bovine serum. After the adherent mononuclear cells were obtained, the shape of cells were observed by microscope, then the cell growth curve, the cell cycle and the cell surface antigens were obtained by immunocytochemistry and flow cytometry methods. Results MSCs obtained by Percoll (1.073 g/mL) were similar in size, spindle-shaped or star-shaped fibroblasts-liked cells. Cell growth curve analysis indicated that MSCs were in the exponential stage after 5d and in the stationary stages after 9d. Flow cytometry analysis showed that the CD29 and CD44 positive cells were about 50%~70%. Conclusions The human umbilical cord derived mesenchymal stem cells were grown stably in vitro and can be used as the seed-cells in tissue engineering. Key words:human umbilical cord blood; mesenchymal stem cells; cell cycle; immunocytochemistry 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在一定条件下具有多向分化的潜能,是组织工程研究中重要的种子细胞来源。寻找来源丰富并不受伦理学制约的间充质干细胞成为近年来的研究热点[1]。脐血(umbilical cord blood, UCB)在胚胎娩出后,与胎盘一起存在的医疗废物。与骨髓相比,UCB来源更丰富,取材方便,具有肿瘤和微生物污染机会少等优点。有人认为脐血中也存在间充质干细胞(Umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)。如果从脐血中培养出MSCs,与胚胎干细胞相比,应用和研究则不受伦理的制约,蕴藏着巨大的临床应用价值[2,3]。本研究将探讨人UCB-MSCs体外培养的方法、细胞的生长曲线、增殖周期和细胞表面标志等方面,分析UCB-MSCs 作为间充质干细胞来源的可行性。

(完整版)电子天平的使用方法

电子天平的使用方法 一、概述 分析天平是定量分析操作中最主要最常用的仪器,常规的分析操作都要使用天平,天平的称量误差直接影响分析结果。因此,必须了解常见天平的结构,学会正确的称量方法。我们用到的天平有以下二类:普通的托盘天平和电子天平。 普通的托盘天平是采用杠杆平衡原理,使用前须先调节调平螺丝调平。称量误差较大,一般用于对质量精度要求不太高的场合。调节1g以上质量使 用砝码,以下使用游标。砝码不能用手去拿,要用镊子夹。 电子天平是最新一代的天平,它是根据电磁力平衡原理,直接称量,全量程不需要砝码,放上被测物质后,在几秒钟内达到平衡,直接显示读数,具有称量速度快,精度高的特点。它的支撑点采取弹簧片代替机械天平的的玛瑙刀口,用差动变压器取代升降枢装置,用数字显示代替指针刻度。因此具有体积小、使用寿命长、性能稳定、操作简便和灵敏度高的特点。此外,电子天平还具有自动校正、自动去皮、超载显示、故障报警等功能。以及具有质量电信号如何输出功能,且可与打印机计算机联用,进一步扩展其功能,如统计称量的最大值、最小值、平均值和标准偏差等。由于电子天平具有机械天平无法比拟的优点,尽管其价格偏高,但也越来越广泛的应用于各个领域,并逐步取代机械天平。 称量时,要根据不同的称量对象和不同的天平,应当根据实际情况选用合适的称量方法操作。一般称量使用普通托盘天平即可,对于质量精度要求高的样品和基准物质应使用电子天平来称量。电子天平的称量: 二、称量前的检查 1、取下天平罩,叠好,放于天平后。 2、检查天平盘内是否干净,必要的话予以清扫。 3、检查天平是否水平,若不水平,调节底座螺丝,使气泡位于水平仪中心。 4、检查硅胶是否变色失效,若是,应及时更换。 三、开机 关好天平门,轻按ON/OFF键,LTD指示灯全亮,松开手,天平先显示型号,稍后显示为0.0000g,即可开始使用。 四、电子天平的一般使用方法 电子天平的使用方法较半自动电光天平来说大为简化,无需加减砝码,调节质量。复杂的操作由程序代替。下面简单介绍电子天平的两种快捷称量方法: 1、直接称量 在LTD指示灯显示为0.0000g时,打开天平侧门,将被测物小心置于秤盘上,关闭天平门,待数字不再变动后即得被测物的质量。打开天平门,取出被测物,关闭天平门。2、去皮称量 将容器至于秤盘上,关闭天平门,待天平稳定后按TAR键清零,LTD指示灯显示重量为0.0000g,取出容器,变动容器中物质的量,将容器放回托盘,不关闭天平门粗略读数,看质量变动是否达到要求,若在所需范围之内,则关闭天平门,读出质量变动的准确值。

脐带血干细胞检测

脐带血干细胞检测 对每份脐血干细胞进行下列检测: ①母体血样做梅毒、HIV和CMV等病原体检测,这一检测使脐血干细胞适合于其它家庭成员应用。如任何一种病原体测试阳性,需重复测定。 ②每份脐血干细胞样本同时检测确定没有微生物污染。 ③细胞活性检测、有核细胞数、CD34+细胞数、集落形成试验等。CD34是分子量115KD 的糖蛋白分子,使用特定单克隆抗体(抗-CD34)确定,脐血祖细胞的大部分,包括体外培养产生造血集落的细胞都包含在表达CD34抗原的细胞群中。 ④HLA组织配型、ABO血型。 一、采血方式及其优点 再生缘生物科技公司采用最严谨的封闭式血袋收集法,避免在收集脐带血液时可能遭受微生物污染的发生,且以最少之操作步骤,收集最大量之脐带血液方式,在产房内即可完成。 二、脐带血处理与保存 脐带血收集于血袋,经专人运送至再生缘生物科技公司之无菌细胞分离实验室后,由专业的技术人员于完全无菌的环境下,依标准操作程序将血液进行分离,收集具有细胞核的细胞,其中含有丰富的血液干细胞,经加入冷冻保护剂和适当品管检测后,并进行以最适合

血液干细胞的冷冻降温程序方式,进行细胞冷冻程序,达到避免细胞受到冷冻过程之伤害。完成后,冷冻细胞立刻保存于摄氏零下196度的液态氮槽中。所有操作程序记录和细胞保存相关数据,均由计算机条形码系统追踪确认,完全符合国际脐带血库之标准操作程序和品管要求。 母亲血液之检测 为确保所操作和保存的脐带血液细胞,符合国际血液操作规范,并提供客户最大的保障,对于产妇血液必须同时进行一些病毒传染病的检测,以确保没有下列病毒,如艾滋病毒(HIV)、C型肝炎病毒(HCV)、人类T细胞淋巴病毒(HTLV)和梅毒(syphilis),同时对于B型肝炎病毒(HBV)和巨细胞病毒(CMV)加以侦测和纪录,作为将来可能应用脐带血细胞时之必要参考数据并符合卫生医疗之要求。 脐带血细胞之品管 对于所保存之脐带血细胞均进行多项操作流程监控和品管检测,如微生物污染检测、血液细胞浓度、细胞存活率、细胞活性测定等,每一步骤均有详细之纪录,在操作方法和使用仪器方面均定期进行验证和校验,以符合国际医疗标准。 三、实验室、贮存处所介绍 再生缘生物科技公司拥有符合美国联邦标准(FED-STD-209E)和中华民国优良药品制造标准(一区、二区、三区)的生物安全实验室和无菌操作设备,在专业的技术人员依标准操作程序下进行血液分离和保存步骤,保障客户珍贵样品和权益。 分离后之细胞将依浓度分装入4-6个冷冻管,计算机降温冷冻完成后,即由食品工业发展研究所国家细胞库专业液态氮库房人员,将冷冻细胞分别存放于二个不同的脐带血细胞专属液态氮槽中保存,在安全机制上更有保障。液态氮库房拥有五吨的液态氮供应系统,每一液氮槽均有自动充填装置和异常警报系统,和每日值勤人员监控,确保冷冻细胞处于最佳的冷冻状态。 四、安全管制措施 脐带血液经快递送达无菌细胞分离实验室后,每一步骤均有专业技术人员操作和监督,并将所有分析数值详细填于具有条形码管制之分析表格和计算机数据表中,利用条形码和读码系统确认样品之专一性,避免人为失误,且便于追溯和数据品管。 在冷冻细胞保存上

TG-328A分析天平使用说明书

TG-328A 分析天平使用说明书 产品特点产品特点:: tg 系列双盘机械天平,采用空气阻尼,光电读数,具有称量准确,读数简便,价格实惠。·专供实验室,学校,工矿等作精密称量分析用。 产品具体型号及参数产品具体型号及参数:: 电光精密机械天平型号技术参数秤盘尺寸出厂价tg328a200g/0.1mg80mm1,200.00tg328b200g/0.1mg80mm1,000.00tg628a200g/1mg80mm680.00 tg328a 分析天平使用说明书成套一览表分析天平使用说明书成套一览表:: 1:横梁1件,2:挂钩2件,3:阻尼器上盖2只,4:秤盘2件,5:托盘2件,6:开关旋钮1件,7:避震垫脚3件,8:照明器1套,9:变压器1件,10:备泡2件,11:圆形毫克砝码8个,12:克砝码13个,13:合格证1份,14:天平使用说明书1本,15:装箱单1份,16:产品质量征求用户意见书. 一、用途及使用范围用途及使用范围:: tg328s 分析天平,可供工矿企业,科学研究机构,高等院校,实验室,化验室作精密衡量分析测定只用。 二.主要技术规范主要技术规范:: 最大量程200克,分度值0.1毫克,机械加码范围10毫克—199.990克。光学读数范围:微分刻度全量值10毫克,每小格刻度值0.1毫克,分度值误差不大于以指针在标牌全长内最大倾斜幅度

时,计空载±1分度,全载+2分度-,1分度示值变动性误差空载,全载不大于1分度。不等臂性误差全载不大于9分度。机械组合砝码允差毫克组不大于2分度克组,与全量不大于5分度。秤盘直径φ75毫米,高155毫米,变压器输入ac220v,50hz,5w,输出ac6.3v,0.5a 天平外形长390毫米,宽300毫米,高440毫米,净重约18千克。 : 三.结构及作用原理 结构及作用原理: 1.该分析天平,是属于双盘等臂式,横梁采用铜镍合金制成,上面装有玛瑙刀三把,中间为固定的支点刀,两边可调整的承重刀。 2.支点刀位于支点刀垫上,支点刀垫固定在天平立柱上端。 3.横梁停动装置为双层折翼式,在天平开启时,横梁上的承重刀必须比支点刀先接角触,为了避免刀锋损坏和保证横梁位置的再现性,开启天平求轻稳,避免冲击,摇晃。 4.横梁的左右两端悬挂承重挂钩,左承重挂钩上装有砝码承重架,该二零碎件分别挂在小刀刃上,另有秤盘各一件分别挂在承重挂钩上。 5.整个天平固定在大理石的基座板上,底板前下部装有二只可供调整水平位置的螺旋脚,后面装有一只固定脚,天平木框前面有一扇可供启闭及随意停止在上下位置的玻璃门,右侧有一扇玻璃移门。 6.秤盘上节中间的阻尼装置,是用铝合金板制成,固定在中柱上。是利用空气阻力来减少横梁的摆动时间,达到静止迅速,从而提高工作效率。 7.光学报影装置,固定在底板上前方,可直接读出0.1-10毫克

分析天平的使用方法

分析天平的使用方法 1.慢慢旋动升降枢钮,开启天平,观察指针的摆动范围,如指针摆动偏向一边,可调节天平梁上零点调节螺丝。 2.将要称量的物质从左门放入左盘中央,按先在托盘天平上称得的初称质量用镊子夹取适当砝码从右门放入右盘中央,用左手慢慢半升升降枢钮(因天平两边质量相差太大时,全升升降枢钮可能会引起吊耳脱落。损坏刀刃),视指针偏离情况由大到小添减砝码。待克组砝码试好后,再加游码调节。在加游码调节天平平衡过程中,右门必须关闭,这时可以将升降枢钮全部升起,待指针摆动停止后,要使标牌上所指刻度在零点或附近。 3.称量方法有: (1)直接称量法:所称固体试样如果没有吸湿性并在空气中是稳定的,可用直接称量法。先在天平上准确称出洁净容器的质量,然后用药匙取适量的试样加入容器中,称出它的总质量。这两次质量的数值相减,就得出试样的质量。 (2)减量法:在分析天平上称量一般都用减量法。先称出试样和称量瓶的精确质量,然后将称量瓶中的试样倒一部分在待盛药品的容器中,到估计量和所求量相接近。倒好药品后盖上称量瓶,放在天平上再精确称出它的质量。两次质量的差数就是试样的质量。如果一次倒入容器的药品太多,必须弃去重称,切勿放回称量瓶。如果倒入的试样不够可再加一次,但次数宜少。

(3)指定法:对于性质比较稳定的试样,有时为了便于计算,则可称取指定质量的样品。用指定法称量时,在天平盘的两边各放一块表面皿(它们的质量尽量接近),调节天平的平衡点在中间刻度左右,然后在左边天平盘内加上固定质量的砝码,在右边天平盘内加上试样(这样取放试样比较方便),直至天平的平衡点达到原来的数值,这时,试样的质量即为指定的质量。 4.使用分析天平时除应遵循托盘天平有关操作规则外,还应注意:添加砝码、取放称样或其它原因接触天平时应先把天平梁托住,否则易使刀口损坏,这是使用天平规则中最重要的一条。每次称量时,应将天平门关好。加砝码后开启天平时,指针摆幅应控制在2~4格之间。被称样品视其性质放在洁净干燥的称量瓶或表面皿中称量。称量瓶不得用手拿,要用滤纸条夹取。称量结束,要检查天平梁是否托好,砝码是否齐全,有无药品撒落到天平内,天平门是否关紧,布罩是否罩好。天平使用一段时期后,要送计量部门进行检定和调修。天平的全面清洁工作每年应进行两次。 分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌握其使用方法,是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,有普通分析天平、半自动/全自动加码电光投影阻尼分析天平及电子分析天平等。下面就电子分析天平的使用方法及注意事项做一介绍。 操作方法 1.检查并调整天平至水平位置。 2.事先检查电源电压是否匹配(必要时配置稳压器),按仪器要求通电预热至所需时间。

胎盘干细胞与脐带血干细胞的区别

胎盘干细胞与脐带血干细胞的区别 干细胞是一类具有自我复制和多向分化能力的原始的未分化的细胞,它可以向多种类型细胞分化,并具有相应的功能,可以用来修复和替代受到损伤,病变的组织和器官。目前主要的成体干细胞来源有胎盘来源、脐带来源、脐带血来源和骨髓来源的干细胞,本文主要介绍一下胎盘来源的干细胞和脐带血来源的干细胞的区别: 1、分离部位不同:胎盘干细胞是从胎盘组织中分离提取的干细胞,脐带血干细胞是从脐带里面血液中分离提取的干细胞。 2、种类不同:胎盘中的干细胞主要指的是间充质干细胞,而脐带血干细胞主要指的是造血干细胞。 3、分化能力不同:1)胎盘干细胞分化能力强,在特定的诱导条件下可以分化成血管干细胞、神经干细胞、肝干细胞等多种类型的干细胞,从而修复受损和病变的组织和器官2)脐带血干细胞可以在体内向红细胞、血小板等各种血液细胞分化。 4、数量不同:1)胎盘体积大,从中提取的干细胞数量丰富,并可以在体外培养扩增,扩增培养的子细胞数量达十亿个,可以供成人多次使用2)脐带血干细胞的数量要根据抽取的脐带血多少而定,不可以在体外培养扩增,一份脐带血干细胞可以供40kg以下患者一次使用。 5、治疗使用:1)胎盘干细胞目前在治疗脑瘫、糖尿病、肝硬化、心血管疾病等诸多疾病都显示了良好的效果2)脐带血干细胞可以治疗白血病,再生障碍性贫血等血液系统疾病。不过对于儿童白血病多以先天性为主,所以对于这种情况,自己的脐带血干细胞是不能使用的,需要配型使用捐献的脐血干细胞。 6、配型方面:二者自体使用都不需要配型,如果异体使用,胎盘干细胞由于免疫源性低的特点,所以配型成功率非常高,有血缘关系的亲属都可以使用;脐带血干细胞与父母配型有1/2的几率,与兄弟姐妹有1/4的几率。

脐带血造血干细胞库技术规范

脐带血造血干细胞库技术规范(试行) I 脐带血造血干细胞库(简称脐带血库)的质量控制 1 规章制度和操作规程 脐带血库必须制定脐带血采集、制备、检测、库存、选择和发放的规章制度、操作规程。 1.1 脐带血供者筛选标准和咨询。 1.2 脐带血采集和运送。 1.3 脐带血制备、冷冻、库存。 1.4 标签。 1.5 传染性疾病、人类组织相容性抗原(HLA)分型、造血干细胞和其他检测。 1.6 库存脐带血和脐带血检测标本的确认。 1.7 脐带血的发放。 1.8 脐带血库与移植机构之间的运输。 1.9 数据管理、申请查询、供者与受者配型、脐带血的选择。 1.10 移植随访资料的收集和分析。 1.11 人员培训和继续教育。 1.12 材料、试剂和设备。 1.13 不合格产品、操作错误和事故的报告。 1.14 卫生清洁。 1.15 保密制度。 2 规章制度和操作规程的执行 2.1有脐带血库主任的签字及开始实施的日期。 2.2各项规章制度和操作规程修改,须由脐带血库主任或文件起草人进行审查、签字并标明日期。 2.3 规章制度和操作规程应置于方便工作人员随时取用的位置。 2.4 存档的各种规程和标准记录应长期保留。 2.5 如认为本技术规范不适应当前发展,允许各脐带血库根据情况适当调整,但应报脐带血造血干细胞库专家委员会备案,备案期为30天。专家委员会如不同意备案的规章制度和操作规程,应在备案期间内通知备案单位停止执行。 3 质量控制 3.1 应有专门的质量控制规程,以便对脐带血库工作人员在常规操作中所使用的规程、试剂、设备和材料进行质量控制。 3.2 脐带血库内部的质量控制 3.2.1应由脐带血库主任或指定专人进行质量控制。 3.2.2脐带血库内部的质量控制包括质量评估,改进和修正的措施,错误和事故的处理。 3.2.2.1 脐带血库必须有不合格产品的记录和报告。 3.2.2.2 脐带血库主任应定期召开质量评价会议,对错误和事故进行评价;对重大事故应及时处理。 3.2.2.3 脐带血库主任必须签发对规程的修正。

分析天平的详细说明

分析天平的详细说明 一.概念 精确度0.1mg的电子天平是电子分析天平,也叫万分之一天平。 二.安装要求 安装平台要稳定、平坦,避免震动,避免阳光直射和受热,避免湿度大的环境,避免在空气直接流通的通道上。 三.使用步骤 1.调水平 电子分析天平开机前应观察天平后部水平仪内的水泡是否位于圆环的中央,否则通过电子分析天平的地脚螺栓调节,左旋升高,右旋下降。 2.预热 电子分析天平在初次接通电源或长时间断电后开机时,至少需要30分钟的预热时间。因此,实验室电子电子分析天平在通常情况下,不要经常切断电源。 3.称量 (1)按下ON/OFF键, 接通显示器,等待仪器自检。 (2)当显示器显示零时,自检过程结束,电子分析天平可进行称量。 (3)放置称量纸,按显示屏两侧的Tare键去皮,待显示器显示零时,在称量纸加所要称量的试剂称量。 (4)称量完毕,按ON/OFF键, 关断显示器。 四. 注意事项 1.熟悉电子分析天平状态。 如显示器右上角显示o表示显示器处于关断状态;显示器左下角显示O表示仪器处于待机状态,可进行称量;显示器左上角出现菱形标志表示仪器的微处理器正在执行某个功能,此时不接受其他任务。 2.电子分析天平在安装时已经过严格校准,故不可轻易移动电子分析天平,否则校准工作需重新进行。 3.严禁不使用称量纸直接称量。 每次称量后,请清洁电子分析天平,避免对电子分析天平造成污染而影响称量精度,影响工作。 五.应用举例:电子分析天平在食品检验方面的应用 电子分析天平在食品检验中扮演着重要的角色。食品质量监督检验中心介绍说,某一种食品的检验过程都需要经过称样、样品前处理、上机检测、数据分析等很多程序。就拿普通的点心来说,检测也很复杂,但送检第一关就是需要用电子天平进行称样。而所使用的电子天平的精度要求必须达到万分之一,即我们所说的电子分析天平。 由于电子分析天平精确度高、稳定性好等特点,它是定量分析工作中所必须的称量仪器。

脐带血干细胞的基础与应用研究

生命科学 Chinese Bulletin of Life Sciences 第18卷 第4期2006年8月 Vol. 18, No. 4Aug., 2006 脐带血干细胞的基础与应用研究 顾东生, 刘 斌, 韩忠朝* (中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津 300020) 摘 要:作为造血干/祖细胞(hematopoietic stem cells/hematopoietic progenitor cells, HSCs/HPCs)的另一 来源,脐带血已经应用于临床治疗多种恶性和非恶性疾病。脐带血中HSCs/HPCs 的质与量是决定其临床应用效果的最重要因素。同时,脐带血中还存在多种非造血的干细胞和前体细胞,如间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)、内皮前体细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)和非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells, USSCs)等,这些细胞可能会在未来的细胞治疗和再生医学中发挥重要作用。本综述还讨论了脐带血的临床应用及HSCs/HPCs 的体外扩增、增加HSCs 归巢和再植能力等提高其临床应用能力的相关研究。关键词:脐带血;造血干细胞;移植 中图分类号:R322.2; R323.3; Q813 文献标识码:A The research and application of cord blood stem cells GU Dong-Sheng, LIU Bin, HAN Zhong-Chao* (State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute of Hematology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Tianjin 300020, China) Abstract: Umbilical cord blood (UCB), as an alternative source of hematopoietic/progenitor stem cells (HSCs/HPCs), has been used clinically for a large number of malignant and non-malignant disorders. The quality and quantity of HSC and HPC may be the most important factors on which the capacity of UCB to perform clinical function depends. Other non-HSCs/HPCs, such as mesenchymal stem cells (MSCs), endothelial progenitor cells (EPCs) and unrestricted somatic stem cells (USSCs), also present in cord blood, which may play a future role in cell therapy and regenerative medicine. This review also covers the efforts to expand HSCs and HPCs ex vivo and recent studies on attempts to enhance the homing and engrafting capability of HSCs as means to enhance the clinical utility of UCB. Key words: umbilical cord blood; hematopoietic stem cells; transplantation 收稿日期:2006-04-25 基金项目:“863”计划(2003AA205060);“973”项目子项(2001C B5101) 作者简介:顾东生(1981—),男,硕士研究生;刘 斌(1973—),男,硕士,助理研究员;韩忠朝(1953—),男,博士,教授,博士生导师,*通讯作者。 文章编号 :1004-0374(2006)04-0323-05 1988年,Broxmeyer 首先以实验证明脐带血(umbilical cord blood, UCB)中富含造血干细胞(hematopoietic stem cells, HSCs)。法国Gluckman 等[1]在巴黎圣路易斯医院为一位患有先天性再生不良性贫血的儿童实施了世界上首例脐带血移植术,并取得成功。从此,人们对于一直被当成废弃物丢掉 的胎盘和脐带血有了全新的评价和认识,至今,各国学者对脐带血的基础研究和临床应用进行了大量工作并取得很大成绩。本文对脐带血中存在的多种干/祖细胞的生物学特性及临床应用研究进行综述。1 脐带血干细胞 在现阶段,脐带血之所以能够应用于临床治疗

相关文档