护用药理学总论实验

第三章护用药理学总论实验

实验3-1 常用实验动物的捉拿方法与给药方法

【目的】结合实验内容逐步学会常用实验动物的捉拿及给药方法。

【材料】家兔小白鼠蟾蜍

【方法】

一、小鼠的捉拿和给药方法

（一）捉拿法

捉拿方法有二种：一种办法是用右手提起尾部，放在鼠笼盖铁网或其他粗糙面上，向后上方轻拉，此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面，迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并以小指和掌部夹持其尾根部固定于手上；另一种抓法是只用左手，先用食指和拇指抓住尾部，再用手掌尺侧及小指夹住尾根，然后用拇指及食指捉住其颈部皮肤。前一方法简单易学，后一方法稍难，但便于快速捉拿给药。

（二）给药方法

1 灌胃法

左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手掌上，使小鼠腹部朝上。右手持连有小鼠灌胃管的注射器，小心经口角将灌胃管插入口腔，用灌胃管向后上方压迫小鼠头部，使口腔与食道成一直线，再将灌胃管沿上腭壁轻轻推进食道，针插入时应无阻力。一般在此位置推注药液即可。如此时动物呼吸无异常．可将药液注入。如遇阻力应抽出胃管重新插入，以免损伤或误入气管。若误插入气管注药可引起动物立即死亡。推注药液后轻轻拉出灌胃管。一次灌注量为0.1～0.25ml/10g体重。操作时切忌粗暴，以防损伤食道及隔肌。

2 皮下注射法

注射部位可选背部或腋部皮下。左手抓鼠，右手将装有药液的注射器针头刺入背部或腋部皮下。稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖的位置确在皮下。此时注入药液。拔针时，轻捏针刺部位片刻，以防药液漏出．大批动物注射时，可将小鼠放在鼠笼盖或粗糙平面上，左手拉住尾部，小鼠自然向前爬动，此时右手持针迅速刺入背部皮下，注射药液。

3肌内注射法

小鼠固定同上。将注射器的针头刺入小鼠后肢大腿外侧肌肉, 再注入药液。注射量一般为0.2ml／次／只。

4腹腔注射法

左手固定动物，使小鼠腹部朝上。右手持注射器,在左或右侧下腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进2～3mm，然后使针头与皮肤呈45o角方向穿过腹肌刺入腹腔。针头不宜进入太深或距上腹部太近以免损伤内脏。此时可轻轻推注药液。一次注射量为0.1ml～0.25ml／1Og

体重。

5尾静脉注射法

将小鼠装入固定器内或玻璃钟罩内,使其尾部外露。尾部用40～45℃温水浸泡半分钟或用75％

酒精棉球擦试，使其血管扩张和表皮角质软化。以拇指和中指捏住尾尖部的两侧，食指压迫鼠根以阻断其静脉回流，使尾静脉充盈明显。用4号或5号针头选其一侧尾静脉穿刺．如针头确在血管内，则推注药液无阻力。否则皮肤隆起发白，阻力增大，此时可退回针头重新穿刺。注射完毕后，把尾巴折曲或按压片刻止血。需反复静脉注射时，宜从尾端开始，逐渐向尾根部移动。一次注射量为0.05～0.1ml/l0g体重。

二、家兔的捉拿和给药方法

（一）捉拿法

捉拿时一手抓其颈背部皮肤，轻轻将兔提起，另一手托住其臀部。不要采用抓双耳的方法。

（二）给药方法

1灌胃法

如用兔固定箱，一人可操作。右手将开口器固定于兔口中，左手插入导尿管。如无固定箱，需两人合作进行。助手左手固定兔身及头部，右手将开口器横放于兔口中，将兔舌压在开口器下面。双手固定开口器。术者将导尿管开口器中央小孔慢慢沿上腭避插入食道约15cm。为避免误入气管，可将胃管的外口端放入水中，如有气泡从胃管口逸出，说明已插入气管，应拔出重新插入。若无气泡逸出，则用注射器将药液灌入，并注入少量空气，将导尿管中残存的药液全部注入胃中。灌胃完毕后，先拔出导尿管，再拿出开口器。

2腹腔注射法

参照小鼠腹腔注射法

3 静脉注射法

兔静脉注射法一般选用耳缘静脉。如两人合作，一人固定兔身。如一人操作则用途固定箱。兔耳外缘的血管为静脉，中央的血管为动脉。先剪去注射部位的兔毛，用手指弹耳缘静脉部皮肤是血管扩张。以左手食指和中指夹住静脉的近端，右手持带有针头的注射器，尽量从血管远端刺入血管。注射时针头刺入血管，针头刺入血管后再稍向前推进，以手指固定针头，放开食指和中指，轻轻推动针栓，若无阻力和局部皮肤发白隆起现象，即可注药。若推药有阻力或发现皮肤发白隆起，表示针头在血管外，这时应将针头稍退回，再重新穿刺血管。注射完毕后，用棉球压住针眼，将针抽出。注射量 0.5～2.5ml/kg。

三、蛙和蟾蜍的捉拿和给药方法

（一）捉拿法

蛙和蟾蜍用左手握持动物，以食指和中指夹住双侧前肢。破坏脑和脊髓时,左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部，右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔摆动探针捣毁脑组织。毁脑后，退回探针向后刺入椎管破坏脊髓。根据实验要求采取俯卧位或仰卧位固定。

（二）给药方法

蛙或蟾蜍蛙及蟾蜍皮下有数个淋巴囊，注入药物容易吸收。一般常以腹淋巴囊作为绐药途径。给药方法：一手抓住蛙，固定四肢，将其腹部朝上，另一手取注射器，将注射器针头先经蛙大腿上端刺入，经大腿肌层，再入腹壁皮下刺入腹淋巴囊内，然后注入药液。因为针刺通过肌层，因此拔除针头时刺口易于闭塞，可防止拔出针头时药液外漏。注射量0.25～1.0ml／只。 (张春艳)

实验3-2 不同给药剂量对药物作用的影响

【目的】观察不同剂量时药物作用的差异。

【原理】镇静催眠药巴比妥类是中枢神经系统抑制药。巴比妥类药物对中枢神经系统的抑制作用在一定范围内可随着剂量增大而出现明显的药效变化。镇静作用的表现是动物自发活动减少，错眠作用则是动物出现共济失调，但环境安静时，可以逐渐入睡。翻正反射的消失可以代表催眠作用，又可以反映催眠药的麻醉作用。

【材料】 0.5％，0.2％和0.05％戊巴比妥钠溶液，1ml 注射器3 支，5 号针头3

个，电子称1 个，鼠笼1 个，250ml 玻璃烧杯3 个。健康小白鼠，体重18-22g，

雌雄兼用。

【方法】

1. 取体重接近、性别相同的小鼠3 只，分别称重、编号。

2. 观察小鼠正常活动情况及翻正反射。

3. 3 只小鼠分别腹腔注射不同浓度（0.5％，0.2％和0.05％）戊巴比妥

钠溶液, 注射剂量0.2ml/10g。

4. 置玻璃烧杯中观察比较3 只小鼠的活动变化，记录翻正反射消失时

间和翻正反射恢复时间

【注意事项】

1. 翻正反射：正常小鼠轻轻用手将其侧卧或仰卧，小鼠会立即恢复正常姿势即为翻正反射。如轻轻用手将小鼠侧卧或仰卧，超过1 分钟以上小鼠不能恢复正常姿势即为翻正反射消失，是小鼠产生睡眠的客观指标。

2. 各项实验用的注射器及针头应注意区分，以免污染影响实验结果。

3. 药物注射剂量要准确。

【问题讨论】药物剂量对药物作用速度、强度有何影响？

(张春艳)

实验3-3 给药途径对药物作用的影响

【目的】观察不同给药途径对药物作用的影响

【原理】对于大多数药物，不同给药途径主要影响药物吸收而影响药物作用强度和速度，但有时不同给药途径药物作用也会出项“质”的差异，即产生不同性质的反应。如口服硫酸镁产生导泻、利胆作用，静脉应硫酸镁则产生中枢抑制、降压、肌松作用。原因是口服硫酸镁时，硫酸根和镁离子在肠道难以吸收而造成肠道高渗环境，抑制肠道水分吸收，在同时大剂量饮水时，大量水分在肠道蓄积增加肠容积而刺激肠道蠕动增加，导致泻下作用，同时由于高浓度硫酸镁刺激肠粘膜，反射性引起胆总管括约肌松弛、胆囊收缩、促进胆囊排空产生利胆作用。硫酸镁静脉注射后血浆镁离子水平升高，通过拮抗钙离子作用而发挥中枢抑制作用，同时减少运动神经末梢释放胆碱而阻断外周神经肌肉传导，使骨骼肌松弛，通过直接引起交感神经节冲动传递障碍，使外周血管舒张而降压。

【材料】鼠秤大烧杯硫酸镁注射液注射器小白鼠

【方法】

取2只小白鼠，称重，标号，观察其正常活动。以硫酸镁注射液0.2 ml/10g，分别给药，甲鼠灌胃，乙鼠肌注。观察两鼠给药后反应。

【实验结果】

【问题讨论】为什么药物相同，给药后会出现不同反应？

(张春艳)

第四章传出神经系统药物实验

实验4-1 传出神经系统药物对兔瞳孔的影响

【目的】

1 . 观察拟胆碱药、抗胆碱药对瞳孔的作用并分析其作用机制。

2. 练习家兔的捉拿、滴眼及量瞳方法。

【原理】

虹膜内两种平滑肌控制瞳孔大小，一种是瞳孔括约肌，其上分布有 M受体，当M受体激动后，引起瞳孔括约肌向眼中心方向收缩，瞳孔缩小；另一种是瞳孔开大肌，其上主要分布的是α受体，当α受体激动时，瞳孔开大肌向眼外周方向收缩，瞳孔扩大。阿托品是M 受体阻断药，产生扩瞳作用；而毛果芸香碱是M受体激动药，激动 M受体产生缩瞳作用。

【材料】

1. 家兔1 只，体重2kg～ 3kg

2. 1 %硫酸阿托品溶液、 1 %硝酸毛果芸香碱溶液

3.剪刀、测瞳器、注射器(1 m1 )、免固定箱

【方法】

1.取健康家兔1 只，标记后放入兔固定箱内，剪去眼睫毛，在自然光线下测量并记录两侧正常瞳孔直径(mm)，然后按下列顺序给药(每只眼2 滴)：左眼状，并用手指按住鼻泪管，使其在眼睑内保留lmin，然后将手轻轻放开，任其自然溢出。

2. 滴药1 5min 后，在同样强度的光线下，再分别测量并记录各眼瞳孔大小。

【实验结果】

【注意事项】

1.测量瞳孔勿刺激角膜，否则会影响瞳孔大小。

2.滴药时应按压内眦部的鼻泪管，以防药液进入鼻腔，经鼻粘膜吸收。

3. 各眼滴药量要准确，眼内停留时间要一致，以确保药液充分作用。

4.测量瞳孔条件务求给药后一致：如光线的强度，光源的角度等。

5.实验动物应为一周内未用过眼药者。

【问题讨论】毛果芸香碱和阿托品对眼有什么作用？

(赵艳平)

实验5-2 烟碱的毒性反应

【目的】观察香烟对小鼠作用，证明吸烟对人类有害

【原理】

烟草中的尼古丁是一种高度成瘾的药物，与可卡因相似，吸烟者95%会成瘾。大剂量尼古丁会引起恶心及呕吐，严重时会导致死亡。

【材料】鼠秤大烧杯玻璃水烟斗香烟蒸馏水注射器

【方法】取蒸馏水4ML，置于玻璃水烟斗内，振摇后，去1ML留作实验对照，点燃香烟，插入水漏斗内，直至香烟燃烧完毕。将烟斗内的香烟烟雾通，液置于量筒中留作实验用。

去2只小白鼠，称重，标号，观察其正常活动。甲鼠腹腔注射香烟烟雾通过液 0.2ml/10g，乙鼠腹腔注射同等剂量蒸馏水做对照，分别观察比较两鼠反应。

【实验结果】

【注意事项】烟碱毒性大，尽量不要用手接触。

【问题讨论】烟草中的尼古丁与人体内尼古丁受体结合，产生什么生理效应？

(赵艳平)