茯苓多糖的提取纯化及应用研究进展
江汉大学文理学院
学年论文
论文题目茯苓多糖的提取纯化及药用价值
部（系）生物与环境工程学部
专业 07 生物技术及应用
姓名何力力
学号 200704021113
指导教师王忆娟
2009 年 6 月
茯苓多糖的提取纯化及药用价值
【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。为进一步优化茯苓多糖的提取工艺，促进其开发应用，文章参考大量国内外文献，对近几年茯苓多糖的提取、纯化及其应用作一综述。
【关键词】茯苓多糖；提取；纯化；应用
自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来，人们对多糖的研究产生了极大的兴趣，尤其是其生物活性方面的研究。茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖，来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%，其化学组成为（1→3）-β-D- 葡聚糖。茯苓多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、保肝、催眠、抗炎、消石等作用，也可广泛应用于医疗保健、食品、美容药膳,具有较好的开发前景。茯苓多糖可用于抗肿瘤药物的研发，从而为肿瘤、癌症的治疗提供新的方法，还可作为免疫增强剂，用于保健品的开发与研制。另外，羧甲基茯苓多糖具有水溶性及增稠性，可配制成各种保健食品。因此，茯苓多糖的提取及开发意义重大。现将茯苓多糖的提取、纯化及应用综述如下。
1 茯苓多糖的提取方法
茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中，按照溶解度的不同又分为水溶性茯苓多糖和碱溶性茯苓多糖。通常采用水提醇沉法、碱提醇沉法提取。
水溶性多糖的提取主要与提取次数、时间、固液比及温度等因素有关。随着提取次数增多，多糖的浸出率明显增高，但提取次数不易过多，一般为两次，否则，将造成后期工作量增大，提取成本过高。提取时间延长可提高多糖的浸出率，但浸提时间过长，将造成提取工艺延长。同时，还有可能增加杂质的溶出，通常选3h。固液比也影响多糖的浸出，在保证浸出率的前提下，尽可能减少液体体积，以减少浓缩工作量。多糖的浸出率还与浸提温度有关，随后者的升高而提高，但温度过高可能破坏多糖的结构，一般选择80℃提取。碱溶性多糖的提取一般在4℃下进行，其影响因素除以上几点外，还与碱浓度有关，常采用0.5mol/L。在乙醇沉淀步骤中，浸提液浓缩比及乙醇加量是影响茯苓多糖沉淀率的主要因素。
1.1 水提醇沉法
称取一定量茯苓粉末→热水浸提→抽滤→滤液减压浓缩(浸提液∶浓缩液
=10∶1) →95%乙醇沉淀（含醇量达80%）→于冰箱中静置过夜→离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→真空干燥得茯苓多糖粗品。该法采用水作为溶剂，具有价廉、无毒、操作安全等优点，其缺点是浸提时间长且提取率较低。
1.2 稀碱浸提法
稀碱法浸提碱溶性茯苓多糖应注意，在提取结束后应迅速用醋酸中和，以免多糖活性受影响。取一定量茯苓粉末溶于0.5 mol/L稀碱液中，4℃放置过夜，滤液以10%的醋酸中和至中性，再加入95%乙醇沉淀，以下步骤同水提醇沉法。该法提取率较水提醇沉法高，但浸提程序较繁琐，浸提条件较剧烈，极易破坏多糖的立体结构，使其生物活性受到限制。
1.3 酶+热水浸提法
该法通过外加酶降解茯苓的细胞壁，从而促进茯苓多糖的浸出。通常加入蛋白酶或植物复合酶，后者主要是由纤维素酶、中性蛋白酶、果胶酶等组成的混合酶系。采用植物精提复合酶+热水浸提法提取茯苓多糖，在普通热水浸提基础上加入酶解步骤，通过改变酶加入量、酶解温度、酶解时间等因素将茯苓多糖的浸出率提高到热水浸提法的2.32倍。采用有机溶剂预处理一木瓜蛋白酶水解加热水浸提法提取多糖，使得水溶性多糖的提取率明显提高，比常规浸泡水煮法的提取率约高85%。酶解法可以在较低的温度下提高多糖的提取率，与传统的热水浸提法相比，浸提时间缩短，得率提高，是水溶性茯苓多糖提取的好方法。
1.4 微波、超声波辅助提取法
微波提取法利用加热导致细胞内的极性物质，尤其是水分子吸收微波能，从而使胞内温度迅速上升，液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞壁冲破，形成微小的孔洞，进而出现裂纹，从而使胞外溶剂容易进入细胞内，溶解并释放出胞内产物。利用微波辅助法提取茯苓多糖，在微波占空比42%，固液比为1∶50，提取时间18 min条件下，提取率达2.792%，为传统水回流提取法的两倍。该法具有受热均匀、快速、高效、安全、节能等优点，近年来，普遍应用于多糖的提取。超声波提取技术也是近年来发展起来的一种提取生物活性物质的方法，具有方便、快速、提取物活性高的特点。采用超声波法提取茯苓多糖，但提取率不高，最高达到1.6%。
1.5发酵醇沉法
发酵醇沉法提取茯苓多糖包括胞外多糖的提取及胞内多糖的提取，前者将发酵液离心得上清液，浓缩至一定体积，乙醇沉淀，将沉淀物用丙酮、乙醚洗涤，得胞外多糖。后者包括胞内水溶性多糖及碱溶性多糖的提取。水溶性多糖的提取:取有机溶剂处理（脱脂）后的茯苓菌丝体粉末采用水提醇沉法进行提取；碱溶性多糖的提取:将上述提取水溶性多糖后的菌丝体滤渣用5 倍量0. 5 mol/L 的NaOH浸提，步骤同稀碱浸提法。
液体发酵具有易于操作、节约资源、产率高、周期短、可大规模投入工业生产等优点，已逐渐成为获取茯苓多糖的主要方法。但研究表明，发酵茯苓菌丝体中总多糖的提取率较天然茯苓低，这可能因为发酵茯苓菌丝体多糖的提取工艺不完善，有待进一步优化，也可能由于发酵茯苓菌丝体中总多糖占总糖的比例低于天然茯苓。
2 茯苓多糖纯化方法
茯苓多糖提取之后，经常混有蛋白质、色素、低聚糖等杂质，需对其进行除杂纯化，所得茯苓多糖为粗多糖，是多糖的混合物，化学组成不均一，可通过季胺盐沉淀法、分步沉淀法、凝胶层析法、超滤分级等方法分离纯化，成为单一组分多糖。一般多采用二乙基氨基乙基（DEAE）-纤维素法和其它不同类型的凝胶层析法。
2.1 蛋白质的去除方法多糖中去除蛋白质的方法常见的有Severge法、三氯乙酸法、鞣酸沉淀法、蛋白酶水解法等。
2.1.1 Severge法根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性的特点，从而去除蛋白。按多糖水溶液体积的1/4～1/3加入氯仿：戊醇(正丁醇)=5∶1，剧烈振摇20～30 min，除去含有蛋白质的氯仿和正丁醇混合液。该法条件温和，可避免多糖的降解，但除蛋白质效率不高。另外，在多糖的水提液中加入中性蛋白酶，与Severge 法结合脱蛋白，效果较好。
2.1.2 三氯乙酸法向多糖溶液加入1/5体积10%的三氯乙酸溶液磁力搅拌
3Omin，离心去除沉淀，用3倍体积的95%的乙醇沉淀，3 000r/min离心15min，沉淀加原来多糖溶液体积的1/5的水溶解，加入1/5体积10%三氯乙酸溶液，方法同上，处理3次，所得溶液用95%乙醇沉淀。此法缺点是易引起某些多糖的降解。
2.1.3 鞣酸沉淀法利用鞣酸与蛋白反应生成沉淀的原理除蛋白。在微沸状态下，向多糖溶液中滴加1%的鞣酸溶液，直至无沉淀产生为止。离心取上清液，再滴加1%的鞣酸溶液，直至无沉淀产生为止，取上清液，浓缩，醇沉。此法的缺点是易引起某些多糖的降解。
2.2 茯苓多糖的脱色多糖中常含有色素(游离色素或结合色素)。常用的脱色方法有：双氧水氧化法、离子交换法、金属络合物法、吸附法(纤维素、硅藻土、活性炭等)。双氧水是一种氧化剂，使用时浓度应控制在30%左右，其脱色耗时长，脱色不完全，有可能影响多糖的生物活性。离子交换纤维素和离子交换树脂能取得较好的脱色效果，但色素洗脱困难，难以重新获得交换能力。通常用活性炭吸附，但此法易造成多糖的损失，所以一般用弱碱性树脂、DEAE纤维素吸附色素。通过离子交换柱不仅能达到脱色的目的，而且可以进行分离，其缺点为色素的洗脱较耗时。
2.3 透析除小分子杂质该法利用一定大小孔目的膜，使茯苓多糖中的无机盐或小分子糖透过从而达到分离的目的。透析在逆相流水中进行，pH值保持在6.0～6.5。操作时将需要处理的茯苓多糖于双蒸水中过夜溶胀后，置于半透膜透析袋中，双蒸水透析，透析液浓缩后用乙醇沉淀多糖。
2.4 大孔吸附树脂纯化茯苓多糖大孔吸附树脂是一类不含交换基团，具有大孔结构的高分子吸附剂，其多孔性网状空穴可较好的吸附多糖中的杂质，主要用于分离、脱无机盐、浓缩及除去有机杂质。应用大孔树脂纯化茯苓多糖，取得了较好的效果。该法具有吸附量大、选择性好、吸附速度快、易于解吸附、机械强度高、再生处理简便等优点。
3 茯苓多糖的药用价值
3.1 茯苓多糖在抗肿瘤方面的应用茯苓多糖具有抗肿瘤作用，可用于抗肿瘤药物的研发，具有毒副作用低的特点。
研究表明，茯苓多糖可诱导S180肉瘤细胞的凋亡，其效果与茯苓多糖的浓度和作用时间有关。对茯苓多糖进行修饰或衍生化处理，可提高其抗肿瘤活性，且活性与剂量和给药途径相关。茯苓多糖抗肿瘤机理与细胞膜生化特性的改变有关，其影响膜的肌醇磷脂代谢，抑制磷脂酰肌醇通路中的PI转化，阻断通路中下游信使分子间的信息下传，从而抑制肿瘤细胞增殖。茯苓多糖抗肿瘤作用是通过增强机体免疫力、激活监视系统实现的［16～18］。它可提高肿瘤小鼠体内肿瘤坏死因子（TNF）的活性，后者通过直接参与单核细胞对肿瘤细胞的杀伤，抑制瘤基因的转录实现抗肿瘤作用。
刘吉成等研究表明，含茯苓多糖的复合多糖与化疗药物环磷酰胺联合对抑制移植性肿瘤S180具有显著的增效作用。羧甲基茯苓多糖（CMP）、硒与环磷酰胺合用后具有协同抗癌作用，通过下调bcl-2基因的表达、诱导癌细胞凋亡，从而延长荷瘤小鼠的生存期，同时减轻化疗药物的毒副作用。因此，可将茯苓多糖与化疗技术配合，用于临床上治疗恶性肿瘤。
3.2 茯苓多糖在免疫增强方面的应用茯苓多糖具有增强免疫功能的作用，它可保护免疫器官，抗胸腺萎缩、抗脾脏增大和抑瘤生长。因此，可作为免疫增强剂，用于提高机体免疫力。研究表明，羧甲基茯苓多糖能明显增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,明显增加小鼠脾抗体分泌细胞数(PFC)以及特异的抗
原结合细胞数(SRFC),明显增强小鼠对牛血清白蛋白(BSA)诱导的迟发型超敏反
应(DTH),明显增强小鼠脾T细胞生长因子的生长,这可能是其增强免疫应答功能及抑瘤率的机制之一。
对茯苓多糖增强免疫的机制表明，茯苓多糖通过产生毒因子、释放溶酶体酶、与淋巴细胞协同破坏抗原和癌细胞、合成和释放干扰素、消除组织变态等反应完成。它还可激活T、B淋巴细胞，从而增强机体的细胞免疫和体液免疫。
3.3 茯苓多糖在抗衰老方面的应用研究发现，茯苓多糖能不同程度增加血清中超氧化物歧化酶（T-SOD和Cu-SOD）活性，降低丙二醛（MDA）含量。SOD可清除体内自由基，MDA含量降低反应体内自由基累积水平下降，因此，该实验提示茯苓多糖具有清除自由基作用，从而抑制脂质过氧化的活性，起到保护生物膜和延缓衰老的作用。因而，茯苓多糖可用于中老年保健品的研发，起到延年益寿之功效。
3.4 茯苓多糖在抗病毒方面的应用茯苓多糖具有抗病毒作用，可用于抗病毒药物的研发，从而治疗各种病毒病。研究表明，100～1 000 μg/ml的CMP预处理的人胚肺细胞，具有抗滤泡性口腔炎病毒的作用。羧甲基茯苓多糖钠（2.0 mg/ml）对单纯疱疹病毒I型的致猪肾传代细胞的细胞病变具有抑制作用，提示CMP钠在体外有抗HSV-1作用。段会平等研究CMP在人肝癌细胞抗乙型肝炎病毒(HBV)中的作用表明，CMP对HBV表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的分泌具有较好的抑制作用。
3.5 茯苓多糖在防辐射方面的应用研究证明，许多多糖对各种电离射线照射后的动物有明显的防护作用。茯苓多糖对受60Coγ射线照射后K562白血病细胞及细胞培养上清液自由基的影响，发现茯苓多糖可引起照射后细胞中MDA含量降低，但仍明显高于未照射组。茯苓多糖对照射后肿瘤细胞自由基活性无显著影响。由此可推测茯苓多糖对正常细胞辐射防护作用的同时基本不会影响放疗的效果。因此，可用作新的临床抗辐射损伤药物，具有来源丰富、作用广泛、对机体几乎无毒副作用等优点。应用前景广阔。
3.6 茯苓多糖在其它方面的应用茯苓多糖还具有抗炎、消石、防肾功能衰竭、保肝、催眠等作用。对其进行开发利用，制备各种茯苓多糖产品，如茯苓多糖制剂、口服液等，已广泛用于医疗保健行业。
茯苓多糖对二甲苯所致小鼠急性炎症和无菌棉球所致大鼠慢性炎症实验表明，茯苓多糖具有抑制急、慢性炎症反应作用。茯苓多糖能有效抑制大鼠肾内草酸钙结晶的形成和沉积，具有较好的防石作用，可用于临床上结石病的治疗。硫酸酯化茯苓多糖对慢性肾功能衰竭大鼠肾功能指标及肾脏形态的影响表明，硫酸酯化茯苓多糖对大鼠慢性肾功能衰竭具有防治作用。CMP具有保肝作用，它可降低四氯化碳中毒小鼠血清谷丙转氨酶活性，保护肝功能，CMP还可促进部分肝切除大鼠的肝再生，并且再生肝重量增加。另外，其对肝硬化、慢性迁延性肝炎有较好的疗效。此外，CMP还具有催眠作用。
4 结语
近些年，随着医药、化学以及生物学的不断发展，茯苓多糖的提取纯化、药理学以及应用研究取得了很大进展。酶+热水浸提法显著提高了茯苓多糖的提取率，同时，缩短了提取时间。然而，水溶性多糖的提取率仍较低，一般不超过6%，因此，有必要进一步改进茯苓多糖的提取工艺，提高提取率。同时，应深入研究液体发酵生产茯苓多糖的方法，从而节约茯苓资源，适应大规模工业化生产的要求。
茯苓多糖的开发研究意义重大，具有广阔的前景。其在医疗保健领域的应用已取得一定进展。茯苓多糖对鼻咽癌和胃癌等患者有一定的疗效，在国外，20世纪70年代已将其作为抗癌剂，投入市场；它还可作为一种免疫调节剂，毒副作用低，特别引人注目的是羧甲基茯苓多糖不仅是低浓度干扰素的诱生剂，而且是理想的干扰素促生剂，可提高单位细胞干扰素的产量；茯苓多糖用于开发各种保健食品，具有“天然、营养、保健”的优点。然而，茯苓多糖及其衍生物的开发应用，目前仍处于研究阶段,还存在不少问题，应深入研究以提高其生物活性，降低毒副作用。另外，目前关于茯苓多糖结构与功能的关系、结构的测定方法、合成、其在体内的作用机制等一些问题仍有待进一步研究。
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茯苓多糖的提取及其抑菌研究
茯苓多糖的提取及其抑菌研究 胡朝暾, 肖 毅, 周鹏飞, 付 明, 胡 兴 (怀化学院11生命科学系; 21民族药用植物研究与利用湖南省重点实验室, 湖南怀化 418008) 摘 要:对茯苓多糖的提取方法和抑菌试验进行了初步的探索1设计了两种不同提取茯苓多糖的方法,分别为:稀碱浸提法和水提醇沉法1通过比较上述两种不同方法的多糖提取率,发现稀碱浸提法的提取率较高,是一种较好的茯苓多糖的提取方法1另外采用纸片扩散法(K-B 法)对两种方法所提茯苓多糖进行抑菌试验,实验结果表明:茯苓多糖对革兰氏阳性菌和阴性菌都有一定的抑制效果,特别对大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌效果明显1 关键词:茯苓; 茯苓多糖; 多糖提取; 抑菌试验 中图分类号:Q949195 文献标识码:A 文章编号:1671-9743(2012)08-0015-04 收稿日期:2012-07-28 基金项目:湖南教育厅一般项目(09C756);怀化学院青年基金项目(HHUQ2009-12);民族药用植物研究与利用湖南省 重点实验室委托项目(HHUW2011-53)1 作者简介:胡朝暾(1977-),男,湖南安化人,怀化学院讲师,博士生,主要研究蜘蛛生理学、生态学和蜘蛛毒素1 茯苓(poria cocos (Schw 1)Wolf)为多孔菌科卧孔菌属真菌茯苓的干燥菌核,多依附松树根生长1茯苓主要分布在我国的云南、贵州、湖北和湖南等地[1]1是我国传统的中药材和历史悠久的食品,也是湖南靖州重要的生物资源1在中国传统医学中,茯苓的药用已有二千多年的历史了15神农本草经6中,把茯苓列为上品,有/久服安魂养神,不饥延年0的作用1此外,茯苓也是我国一种历史悠久的食品1早在唐朝集市食摊上就有用茯苓、糯米、白术磨粉制成的茯苓糕,后来先后又出现了茯苓包子、茯苓粥1因此,茯苓也是国家卫生部、国家中药管理局颁布的/既是食品又是药品的品种名单0的一种1药理实验表明茯苓具有渗湿利尿、合胃健脾、宁心安神、抑菌、增强机体抗病能力及降低血糖的功效[2-5] 1其中主要功能体现者为 茯苓多糖1 茯苓多糖(pachy man)是近年来研究较多的一种真菌多糖,约占整个茯苓菌核干重的70%-90%[6]1茯苓多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、保肝、催眠、抗炎等作用[7],可广泛应用于医疗保健、食品等领域1茯苓多糖可用于抗肿瘤药物的研发,从而为肿瘤、癌症的治疗提供新的方法,还可作为免疫增强剂,用于保健品的开发与研制1因此,茯苓多糖的提取及开发意义重大1故对茯苓多糖的提取进行探索,并对其抑菌效果进行初步的检测1 2 材料与方法 211 材料 茯苓:购自湖南怀化市靖县茯苓大市场1带回实验室后切成小块后用粉碎机粉成粉末,放入30e 的烘箱中干燥后备用1 枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌、普通变形杆菌来自怀化学院生命科学系微生物学实验室1212 试剂与溶液的配置21211 基本培养基: 牛肉膏3克,蛋白胨10克,NaCl 5克,琼脂5克,水1000ml 、pH 710~712、121e 灭菌20min 121212 5%苯酚试剂的配制: 称取苯酚5g,加水100ml 使溶解,至棕色瓶中,得浓度为5%苯酚试液121213 标准葡萄糖溶液的配制: 精密称取105e 干燥恒重的葡萄糖50mg,加水溶解并定容至1000ml 容量瓶中121214 茯苓多糖溶液的配制: 精密称取茯苓多糖50mg,加水溶解并定容至500ml 容量瓶中,过滤,滤液备用121215 015麦氏比浊管的配制 01048mol P L 的Bacl 2015ml 和0118mol P L 的H 2SO 4 第31卷第8期 怀化学院学报 Vol 1311No 182012年8月 JOURN AL OF HUAIHUA U NIVERSITY Aug 1,2012
茯苓多糖的提取
茯苓多糖的提取技术 作者：周琳班级：食品0931班 【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。为进一步优化茯苓多糖的提取工艺，促进其开发应用，文章参考大量国内外文献，对近几年茯苓多糖的提取及其应用作一综述。 【关键词】茯苓多糖，提取，超声波法 1.引言 自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖(zymosan)具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来，人们对多糖的研究产生了极大的兴趣，尤其是其生物活性方面的研究。茯苓多糖到底是什么呢？它有什么作用呢？茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖，来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%［1］，其化学组成为（1→3）-β-D- 葡聚糖［2］。茯Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。茯苓是一味使用历史悠久的中药，在《神农本草经》中被列为上品，谓其“主胸胁逆气，利小便，久服安魂宁神，不饥延年。”《本草纲目》也记载：茯苓“治头风虚眩，暖腰膝，主五劳七伤。”历代医家均肯定茯苓既有滋补强身作用，又有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神之功。茯苓药性缓和，补而不峻，利而不猛，既能扶正，又可祛邪，能治疗脾胃虚弱、遗精早泄、心悸失眠、健忘多梦、小便不利、呕吐腹泻等症。其主要有效成分茯苓多糖是一种非特异性免疫促进剂，其不仅能够提高机体的抗病能力，还有较强的抗癌作用。其性味甘、淡、平，归脾胃肺肾经，有利水渗湿、益脾宁心之功效。主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。茯苓多糖是茯苓的有效部位之一，为灰白色粉末，味微咸，无臭，略有吸湿性。具有抗肿瘤、提高机体免疫力、保肝与催眠、
茯苓化学成分及药理作用
药用价值编辑 化学成份 茯苓-药用部分[2] 茯苓菌核含多种成份： 三萜类：茯苓酸（pachymic acid），16α-羟基齿孔酸（tumulosic acid）3β-羟基-7.9（11），24-羊毛甾三烯-21-酸 [3β-hydroxylanosta-7.9(11),24-TCMLIBien-21-oic acid]，茯苓酸甲酯（pachymic acid methyl ester），16α-羟基齿孔酸甲酯（tumulosic acid methyl ester），7，9（11）-去氢茯苓酸甲酯[7，9（11）-dehydropachymic acid methyl ester]，3β，16α-二羟基-7，9（11），24（31）-羊毛甾三烯-21-酸甲酯[3β，16α-dihydrox-ylanosta-7，9（11），24（31）-TCMLIBien-21-oic acid methyl ester]，多孔菌酸C甲酯（polypenic acid C methyl ester），3-氢化松苓酸（TCMLIBametenloic acid），齿孔酸（eburicoic acid），去氢齿孔酸 （dehy-droeburicoic acid），茯苓新酸（poricoic acid）A、B、C、D、DM、AM，β香树醇乙酸（β-羟基-16α-乙酰氧基-7，9（11），24-羊毛甾三烯-21-酸[3β-hydroxy-16α-acetylosy-lanosta-7，9（11），24-TCMLIBien-21-oic acid]及7，9（11）去氢茯苓酸[7，9（11）-dehydropachymic acid]。 多糖：茯苓聚糖（pachy-man）、茯苓次聚（Pachymaran）及高度（1，3）、（1，6）、分支的β-D-葡聚糖H11（gluan H11）。其他尚含麦角甾醇（ergo-sterol），辛酸（caprylic aid），十一烷酸（undecanoic），月桂酸（lauric acid），十二碳酸酯（dodecenoic acid），棕榈酸（palmitic acid），十二碳烯酸酯（dodecenoate），辛酸酸（caprylate）以及无机元素。 医学作用 1．多聚糖类主要为茯苓聚糖（pachyman），含量最高可达75%，为一种具有β（1→6）吡喃葡萄糖聚糖支链的β（1→3）吡喃葡萄糖聚糖，切断支链成β（1→3）葡萄糖聚糖，称茯苓次聚糖（pachymaran），常称为茯苓多糖（PPS），具抗肿瘤活性。羧甲基茯苓糖具免疫促进及抗肿瘤作用。[2]
年处理300吨茯苓提取车间浓缩工段工艺设计
引言 茯苓提取车间提取工段工艺设计的目的是培养学生运用所学知识解决制药车间设计实际问题的能力，掌握中药制药工艺流程设计，物料衡算，热量衡算和主要设备工艺计算及设备选型等的基本方法和步骤，从技术上的可行性与经济性上的合理性两方面树立正确的设计思想。茯苓有成效成分的提取采用水提醇沉法进行工艺设计。茯苓提取车间浓缩工段工艺设计主要为了蒸出水，是提取液浓度增大，主要研究浓缩工段的工艺路线、工艺流程、主要设备选型及其工艺计算并且绘制工艺管道及仪表流程图。提取液的浓缩是现代中药制药的关键工艺和技术之一。浓缩工艺技术的先进与否，直接影响着药品的质量。为此，开发了许多先进的提取液浓缩新工艺和新技术，如冷冻浓缩、蒸发浓缩、膜浓缩、树脂吸附分离浓缩，在茯苓提取车间浓缩工段即用了蒸发浓缩。蒸发作为浓缩的重要手段，既能保持中医药的特色，对中药的品种又有很强的适应性，在中药生产中应用最早也最广泛。
第1章茯苓提取工艺 1.1茯苓简介 【别名】茯灵、云苓、松苓。 【来源】多孔菌科真菌茯苓的菌核。 【性味】甘、淡、平。 【功能主治】利水、渗湿、健脾宁心。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠 1.1.1茯苓化学成份 1．多聚糖类主要为茯苓聚糖）, 含量最高可达75%, 为一种具有β（1→6）吡喃葡萄糖聚糖支链的β（1→3）吡喃葡萄糖聚糖，切断支链成β（1→3）葡萄糖聚糖，称茯苓次聚糖，常称为茯苓多糖（PPS）, 具抗肿瘤活性．羧甲基茯苓糖具免疫促进及抗肿瘤作用． 2．三萜羧酸茯苓酸、土莫酸、齿孔酸、松苓酸、松苓新酸等．又报道尚含7, 9（11）-去氢茯苓酸、7, 9（11）-去氢土莫酸、多孔菌酸C及3, 4-裂环-羊毛甾烷型三萜类化合物等．多孔菌酸外用于肝脏具细胞毒作用．此外，含组氨酸、腺嘌呤、胆碱、β-茯苓聚糖酶、蛋白酶、辛酸、月桂酸、棕榈酸、脂肪、卵磷脂、麦角甾醇、磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺等． 1.1.2茯苓的作用 1.药理作用 (1) 抑菌作用：体外抗菌试验表明茯苓煎剂对金黄色葡萄球菌、结核杆菌、变形杆菌等均有抑制作用。 (2) 利尿作用：25%茯苓醇浸剂给正常兔腹腔注射0.5g/Kg，出现利尿作用。用切除肾上腺的大鼠实验证明，利尿作用与影响肾小管Na+的吸收有关。 (3) 免疫作用：茯苓聚糖对正常及荷瘤小鼠的免疫功能有增强作用，能增强小鼠巨噬细胞吞噬功能。 (4) 镇静作用：茯苓煎剂腹腔注射，能明显降低小鼠的自发活动，并能对抗咖啡因所致小鼠过度的兴奋，同时对戊巴比妥钠的麻醉作用有明显的
茯苓化学成分及药理作用
茯苓化学成分及药理作 用 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT
药用价值 化学成份 茯苓-药用部分[2] 茯苓含多种成份： 类：（pachymic acid），16α-羟基齿孔酸（tumulosic acid）3β-羟基（11），24-羊毛甾三烯-21-酸[3β(11),24-TCMLIBien-21-oic acid]，茯苓酸甲酯（pachymic acid methyl ester），16α-羟基齿孔酸甲酯（tumulosic acid methyl ester），7，9（11）-去氢茯苓酸甲酯[7，9（11）-dehydropachymic acid methyl ester]，3β，16α-二羟基-7，9（11），24（31）-羊毛甾三烯-21-酸甲酯[3β，16α-dihydrox-ylanosta-7，9（11），24（31）-TCMLIBien-21-oic acid methyl ester]，多孔菌酸C 甲酯（polypenic acid C methyl ester），3-氢化松苓酸（TCMLIBametenloic acid），齿孔酸（eburicoic acid），去氢齿孔酸（dehy-droeburicoic acid），茯苓新酸（poricoic acid）A、B、C、D、DM、AM，β香树醇（β-羟基-16α-乙酰氧基-7，9（11），24-羊毛甾三烯-21-酸[3β-hydroxy-16α-acetylosy-lanosta-7，9（11），24-TCMLIBien-21-oic acid]及7，9（11）去氢茯苓酸[7，9（11）-dehydropachymic acid]。 ：茯苓聚糖（pachy-man）、茯苓次聚（Pachymaran）及高度（1，3）、（1，6）、分支的β-D-葡聚糖H11（gluan H11）。其他尚含麦角甾醇（ergo-sterol），辛酸（caprylic aid），十一烷酸（undecanoic），月桂酸（lauric acid），十二碳酸酯（dodecenoic acid），棕榈酸（palmitic acid），十二碳烯酸酯（dodecenoate），辛酸酸（caprylate）以及无机元素。 医学作用 1．多聚糖类主要为茯苓聚糖（pachyman），含量最高可达75%，为一种具有β （1→6）聚糖支链的β（1→3）吡喃葡萄糖聚糖，切断支链成β（1→3）葡萄糖聚糖，称茯苓次聚糖（pachymaran），常称为茯苓多糖（PPS），具抗肿瘤活性。羧甲基茯苓糖具免疫促进及抗肿瘤作用。[2] 2．羧酸茯苓酸（pachymic acid）、土莫酸（tumulosic acid）、齿孔酸（eburicoic acid）、松苓酸（pinicolic acid）、松苓新酸（3β-hydroxylanosta-7,9（11），24-trien-21-oic acid）等。又报道尚含7,9（11）-去氢茯苓酸、7,9（11）-去氢土莫酸、多孔菌酸C（polyporenic acid C）及3,4-裂环-羊毛甾烷型（3,4-secolanostane）三萜类化合物等。多孔菌酸外用于肝脏具细胞毒作用。此外，含、、、β-茯苓聚糖酶、、、、、、、、和等。 临床使用
茯苓酸提取方法研究
茯苓酸提取方法研究 【摘要】目的：建立茯苓酸的含量测定方法。方法：反相高效液相色谱法、保留时间定性和外标两点法定量。结果：茯苓酸的最佳提取方法为为把茯苓粉末过60目筛后用甲醇超声提取1小时。结论：该提取方法稳定可行，适用于茯苓酸的提取。 茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos （Schw.）Wolf的干燥菌核。其味甘、淡、平、归肺、胃、肾经。具有利水渗湿，健脾宁心的功效。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠[1]。茯苓酸为四环三萜酸，是茯苓中的主要活性成分之一[2～3]，具有增强人体免疫力、抗癌、增强胰岛素的分化诱导及止吐等作用。本文采用高效液相色谱法，建立其含量测定方法，为茯苓的质量评价提供依据。 1、仪器与材料 1.1仪器与试药 1.1.1仪器LC200高效液相色谱仪（美国PE）；PL-203电子天平（瑞士）；HUMANpowerl（Scholar）纯水/超纯水系统（韩国）；SK-18TC超声波清洗器。 1.1.2试剂试剂乙腈为色谱，纯水为自制高纯水，其他试剂均为AR。茯苓酸对照品。 2、高效液相色谱条件的选择 用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂（DiamonsilC18，4.6×250nm，5um）；柱温25℃；乙腈-0.4%乙酸（85：15）为流动相；流速1mLmin-1；206nm检测。此条件下，茯苓酸和样品中的其它物质可以达到良好的分离。 3、方法与结果 3.1对照品溶液制备 精密称取茯苓酸对照品4.9mg，用甲醇溶解并定容于10mL容量瓶中，摇匀。即配制得0.49mg/mL的茯苓酸对照品溶液。 3.2标准曲线的制备 在上述色谱条件下分别精密吸取对照品溶液（0.49mg/mL）2ul、4ul、6ul、8ul、10ul注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以峰面积为横坐标茯苓酸进样质量为纵坐标，绘制标准曲线。茯苓酸质量在0.49ug-5.88ug范围内与峰面积呈良好的线性关系，线性回归方程为：Y=2.059×10-6X-0.121146，相关系数r=0.9997。
茯苓酸的提取及含量测定
茯苓酸的提取及含量测定 目的：建立茯苓乙醇提取物中茯苓酸的含量测定方法，为该提取物的质量控制提供依据。 方法：采用反相高效液相色谱法( R P —H P L C )对茯苓乙醇提取物中茯苓酸进行定性定量分析，利用保留时间定性和外标两点法定量。 一、仪器与试药 1、仪器：A g l i e n t 1 1 0 0 s e r i e s高效液相色谱仪、，A g l i e n t 色谱工 作站，色谱柱；十万分之一天平、；万分之一天平 2、试药：茯苓乙醇提取物由本实验室提供；茯苓酸对照品乙腈为色谱纯， 水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。 二、色谱条件 K r o m a s i l 1 0 0 - 5 C 1 8 色谱柱( 250mm×4.6 mm，5μm) ，流速为1. 0 m L/mi n ；进样量：1 0 μI x L；柱温：3 0℃；流动相：乙腈0.2％醋酸( 8 2 ： 1 8 ) ；检测波长： 2 1 0 n m 三、对照品溶液的制备 1、精密称取减压至恒重的茯苓酸对照品3 mg ，置于1 0 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得0 .3 mg /m L 的茯苓酸对照品溶液。 2、供试品溶液的制备 精密称取茯苓乙醇提取物0 .2 5 g 置于1 0 0 mL 具塞锥形瓶中，加甲醇 2 5 mL ，密塞，称定，浸泡3 0 m i n ，超声3 0 m i n ，放冷，用甲醇补足减失的重量，过滤；得续滤液即为供试品。 四、重复性试验 精密称取茯苓乙醇提取物6份，按样品含量测定项下的方法处理，并进行测定，结果表明茯苓酸的含量平均为 2 ．7 2％，R S D=1.3 8％( n=6 ) ，表明该方法重复性良好。 五、回收率试验 精密称取已知含量茯苓乙醇份0 .125 g 分别精密加入对照液的制备方法处理，测定茯苓率为9 9.7 6％，R S D=1.1 3％ 六、样品含量测定 分别取0 7 1 8 2 0，0 7 1 8 2 1 ，0 7 1 8 2 2 3批茯苓乙醇提取物样品，按供试品制备方法制备溶液，按上述色谱条件测定，计算样品溶液中茯苓酸的含量分别 为2 ．6 7％，1 ．6 0％，2 ．7 7％。 七、讨论 茯苓三萜类成分具有抗肿瘤、抗炎、调节免疫功能等多种生物活性。茯苓药材的乙醇提取物主要含三萜类成分，总三萜含量达 4 0％。
茯苓多糖的提取方法优选
茯苓多糖的提取方法优选 茯苓多糖的提取方法优选 【摘要】目的优选茯苓多糖的提取方法。方法以茯苓多糖为评价指标，采用 正交实验法对茯苓多糖加热回流及超声波提取工艺进行优选，并将两种方法进行比较。结果两种方法的提取得率有显着性差异(P0.05)。结论超声波提取茯苓多糖较优。 【关键词】茯苓; 正交实验法; 超声波提取; 加热回流提取 Abstract: ObjectiveTo optimize extraction method of pachyman in poria cocos (Schw.) wolf. MethodsThe orthogonal test was used to optimize extraction technique of pachyman in poria cocos(Schw.) wolf by ultrasonic and heating reflux with the content of pachyman in poria cocos(Schw.) wolf as the index, and the two extraction methods were pared.ResultsThere were significant differences between the two methods (P0.05) with the extraction rate.ConclusionUltrasonic extraction is better than heating reflux extraction. Key words: Poria cocos(Schw.)Wolf; Orthogonal test; Ultrasonic extraction; Heating reflux extraction 茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。茯苓是一味使用历史悠久的中药，在《神农本草经》中被列为上品，谓其“主胸胁逆气，利小便，久服安魂宁神，不饥延年。”《本草纲目》也记载: