大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列特征[设计+开题+综述]

开题报告

生物技术

大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列特征

一、选题的背景与意义

大黄鱼，隶属于脊索动物门（Chordata）、脊椎动物亚门（Vertebrata）、硬骨鱼纲（Osteichthyes）、鲈形目（Perciformes）、鲈形亚目（Percoidei）、石首鱼科（Sciaenidae）、黄鱼属（Larimichthys），为暖温性集群洄游鱼类，为传统“四大海产”之一，是我国主要海产经济鱼类之一。大黄鱼肉质较好且味美，含有丰富的蛋白质、微量元素和维生素，除鲜食和制成特色风味水产品外，还具有药用价值。中医认为，黄鱼有和胃止血、益肾补虚、健脾开胃、安神止痢、益气填精之功效；对贫血、失眠、头晕、食欲不振及妇女产后体虚有良好疗效。但由于过度捕捞以及海洋环境恶化，野生大黄鱼产量急剧下降，大黄鱼养殖因此兴起。然而，近年来，在大黄鱼的人工养殖过程中，出现性成熟提早、病害频繁发生等问题，这些都说明大黄鱼的种质资源出现退化现象。

在长期的鱼类病害防治过程中，人们逐步认识到通过鱼类的适应性免疫系统进行病害免疫防治的重要性。由于免疫球蛋白是鱼类适应性体液免疫应答中最主要的介质。免疫球蛋白基本结构是由四肽链组成的，即由二条相对分子量较小的轻链和二条相对分子量较大的重链组成，在免疫球蛋白分子轻链和重链的N端，氨基酸的种类和排列顺序随抗体特异性不同而有所变化，称为可变区，它赋予抗体以特异性。

因此，通过对大黄鱼免疫球蛋白基因的研究对增强大黄鱼免疫力，提高抗病害能力显得尤为重要。

二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：

（一）、课题研究的基本内容

随机测序大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库的克隆菌，获得免疫球蛋白重链可变区序列；运用生物信息学进行序列同源性分析，进行系统进化树分析，蛋白质结构预测分析，总结分析其特征。

（二）、拟解决的主要问题

1.大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因的结构分析。

2.大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列与其他物种相比有何特征。

三、研究的方法与技术路线：

四、研究的总体安排与进度：

2010.11—2010.12：查询与论文有关的资料，撰写综述、试验计划。

2010.12—2011.01：确定实验方法，熟悉相关软件的应用，翻译外文文献。

2011.03—2011.05：进行实验，收集整理实验材料和撰写论文，准备答辩。

五、主要参考文献：

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毕业论文文献综述

生物技术

鱼类免疫球蛋白的研究进展

摘要：免疫球蛋白是体液特异性免疫的主要参与者，鱼类免疫球蛋白的多样性在地域病害中发挥着重要作用。本文对鱼类免疫球蛋白的结构组成，产生过程，多样性产生的机制进行了简要概述。

关键词：鱼；免疫球蛋白

近年来，水产动物病危害频繁发生，有些病害的流行甚至对水产业造成了毁灭性的打击。鱼类作为水产养殖的主要对象，在对其病害防治研究的过程中，人们逐渐认识到免疫防病技术的优越性，即通过免疫手段有效增强水产动物的抗病能力以维持机体内环境的稳定，从而达到健康养殖和持续发展的目的。鱼类免疫系统是鱼体执行免疫防御功能的机构，包括免疫组织、免疫细胞和体液免疫因子三大类。其中，鱼类的体液免疫包括两个方面：一是非特异性免疫，主要有溶菌酶、补体、C反应蛋白等体液因子参与；另一种是特异性免疫主要有免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)参与。本文就免疫球蛋白的结构，产生过程以及抗体多样性产生的机制等方面的研究进展作一综述。

1. 免疫球蛋白的结构

免疫球蛋白是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，具有高特异性和高亲和性，普遍存在于哺乳动物的血液、组织和外分泌中。具有分泌型和膜型两种存在形式。分泌型免疫球蛋白存在于体液中，具有抗体的各种功能；膜型免疫球蛋白是B细胞膜表面的抗原受体，与中和抗原有关。根据重链(H链)恒定区化学结构的不同，可将免疫球蛋白划分为多种类型：即G、A、D、M和E。鱼类是最早产生免疫球蛋白的脊椎动物，普遍含有IgM。软骨鱼类除IgM外，据报道还有IgNAR、IgNARC和IgX等，并被认为可能是抗体的原始类型[1]。

1.1 基本结构

免疫球蛋白分子的基本结构是由四肽链组成的，即由二条相对分子量较小的轻链（light chain, L链）和二条相对分子量较大的重链（heavy chain, H链）组成，链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的“Y”形的单体分子。一些类型的Ig还含有其他辅助成分，分别是J链(joining chain)和分泌片(secretory piece)[2]。在Ig分子L链和H链的N端，L链1/2和H链约1/4处区域,氨基酸的种类和排列顺序随抗体特异性不同而有所变化，称为可变区(variable region, V区)，它赋予抗体以特异性；在Ig分子L链和H链的C端，轻链的

其余1/2及重链的约3/4处，这个区的氨基酸种类和排列顺序及含糖量都比较稳定，故称为恒定区(constant region, C区)[3]。可变区内氨基酸的排列顺序变化最剧烈的特定部位称为超变区(HVR)，在空间结构上可与抗原决定簇形成精密的互补，因此也称为互补性决定区(CDR)。轻链和重链各有3个互补性决定区，即CDR1、CDR2、CDR3。其中CDR3变异程度最大，是决定与抗原特异性结合的重要部位。

1.2 鱼类免疫球蛋白结构

1.2.1 IgM的结构

硬骨鱼类体内主要的免疫球蛋白种类为四聚体的IgM，其重链基因座的组织形式与两栖动物和哺乳动物的一样，即数百个可变区基因区段(variable segment, VH)位于多变区基因区段聚簇(cluster of diversity segment, D)的上游，紧接着是连接区基因区段(joining segment, JH)，而在3端是4个恒定区基因区段(constant segment, Cμ1～4)和2个跨膜区基因区段(trans—membrane segment, TM1～2)。总的来说，H、D和JH区段的拷贝数多于C区段。这种基因组织形式称为“易位子(translocon)”排列[4~6]。而其轻链基因中只有可变区基因片段(V)、连接区基因片段(J)和恒定区基因片段(C)相互连接[7]。

软骨鱼类中的IgM是以五聚体的形式存在，其基因是“聚簇”结构(multicluster)[8]，其可变区基因(V)、多样性基因(D)、连接区基因(J)和恒定区基因(C)的片段聚合排列成簇，作为一个整体在基因组中多次复制，在种系中大约半数的聚簇表现出重链的VH-D-JH连接，并且具有功能。

1.2.2 IgD的结构

与其他脊椎动物IgD相比,鱼类IgD存在两大特点：第一，鱼类IgD的转录本是嵌合体结构，它与IgM共用μ1作为第一个恒定区，原因可能是鱼类δ1外显子中缺乏合适的半胱氨酸介导L链的结合，只有通过μ1来形成链间二硫键，从而实现与L链的结合[9]。第二，鱼类IgD的恒定区数目较多，一般存在外显子的复制，并且在一些不同的鱼类中恒定区的复制数目存在明显差异。

1.2.3 IgW、IgNAR

除了IgM以外，软骨鱼类还产生2种特殊的免疫球蛋白类型IgW和IgNAR[7]。其中IgW 存在两种形式，一种重链C区有6个结构域，另一种只有2个结构域，长型IgW还可以通过不同的剪接方式形成6个CH结构域的分泌型和4个结构域的膜型。

软骨鱼类护士鲨和须鲨中克隆到了一种抗原受体，命名为NAR(new or nurse shark antigen receptor)，后来称为IgNAR。IgNAR具有5个恒定区，后4个恒定区与IgW的重链恒

定区具有较高的相似性。IgNAR没有相应的轻链，直接由2条相同的重链分子组成，这是惟一一种不具备轻链的只有重链分子的Ig类型[10~11]。并且，与其他Ig和TCR分子不同的是，IgNAR的两条重链并不形成紧密结合的二聚体，而是以相对独立的，松散的形式存在[12]。

1.2.4 IgZ、IgT、新型IgH和IgM -IgZ

从斑马鱼中首次报道了IgZ的存在，重链基因为由4个恒定区组成。最近从草鱼中也报道了IgZ的存在，由4个恒定区组成[13]。从虹鳟中也报道的免疫球蛋白，命名为IgT，其结构形式与IgZ类似，也包含4个恒定区[14]。此外，在三棘刺鱼(Gasterosteus aculeatus)中也报道了IgT的存在，但三棘刺鱼IgT只具有3个恒定区[15]。红鳍东方鲀中报道了一种新型IgH,其重链由2个恒定区组成[16]。鲤中报道了[17]一种IgM -IgZ嵌合体，只具有2个恒定区，第1个恒定区由鲤IgM的CH1构成，第二个恒定区与斑马鱼IgZ的CH4有很高的相似性，但没有扩增到编码IgM- IgZ重链基因的基因组序列，因此推测这种Ig是在转录过程中由鲤IgM和IgZ嵌合而成。

2. 鱼类免疫球蛋白产生的过程

鱼类产生Ig的基本过程和哺乳动物一样[18]，当颗粒性或可溶性抗原进入鱼体后，通过巨噬细胞的吞噬或胞饮作用，送至肾和脾内初步加工积累，通过抗原递呈机制将信息传送给淋巴效应细胞，与特异性体液免疫有关的淋巴细胞如T辅助细胞(Th)、T抑制细胞(Ts)和B细胞开始分化增殖，成熟的B细胞在Th(主要为Th2细胞)和Ts细胞的调节下转化为浆细胞，产生Ig。

与哺乳动物相比，鱼类的免疫应答一般较缓慢[19]，Ig的产生受温度影响较大，在最适温度，接种抗原7~10d后，Ig产生细胞才出现，7~14d后血清中才出现Ig。造成这种现象的主要原因[20]：首先，低温能阻止或延缓鱼类免疫应答的产生，各种鱼类都有不同的免疫临界温度，一般来说温水性鱼类的高，冷水性鱼类的低，在低于临界温度时鱼类的免疫应答机制可能丧失；其次，低温会限制浆细胞释放抗体，鱼类的免疫记忆比哺乳动物弱，并且同样受到温度影响。

3. 鱼类免疫球蛋白多样性产生的机制

3.1种系学说

鱼类种系免疫球蛋白基因的结构是产生其多样性的最根本的基础，它们代表了所能够产生的抗体种类的最少数量。在一个物种内，VH基因显示出广泛的序列多样性，一个物种的VH基因家族数越大，则表明其VH基因的多样性可能越大。免疫球蛋白可变区结构域的前

两个互补决定区(CDR1&CDR2)全部是由V区基因编码的，硬骨鱼类CDR3由D区基因和部分J区基因编码，因此，在同一物种当中，不同的V、D、J片段的数目，尤其是V片段的数目决定了抗体多样性产生的可能性[21]。在同一基因簇内不同的D段总是与相同的H段结合，这将制约IgH链的多样性。但是，不同D区段间的变异性将提高CDR3区的变异性，尤其当两个D区段或其中任何一个用于基因重组时[22]。

3.2 基因组合机制

3.2.1 基因片段组合的多样性

真骨鱼类在B细胞分化的过程中，一个D基因区段首先与一个JH区段重组，接着一个H区段与D—JH重组，其中每一个不同的区段都能够以随机的方式互相组合，因此，这三种基因区段的组合构成了IgH链多样性的第二种机制。IgL链基因也是“随机”选择VL和JL 区段来实现重组的，因为其基因簇之间是紧密连接(1.8～5kb)的，加之VL区段与JL—CL区段转录方向相反，因此也增大了IgL链的潜在可变性[23~24]。

通过对角鲨、护士鲨、小型鳐鱼的相关研究表明[25]，软骨鱼类免疫球蛋白基因簇内的基因片段是在胚系水平发生连接，因而也只能产生有限的组合和连接多样性。

此外，抗体中抗原结合位点是通过H和L链中V功能区的组合形成的[23]。在两个B细胞克隆中，产生具有相同V区的H链的同时产生相同的L链，概率极低。因此，不同H链和L链的组合将会增加抗体的多样性。

3.2.2 连接和插入多样性

DH-JH、VH-DH-JH和VL-JL的交界处所出现的连接方式的不明确性也会进一步增加免疫球蛋白的多样性。在连接方式中可能由于下面三种原因产生多样性[21]：一是在基因片段连接过程中由于额外的核苷酸插入而增加了重链的多样性；二是在核酸密码子内的任何地方都可出现发生连接的位置，因此在两个片段之间，同样两种基因片段的连接可以产生不同的氨基酸；三是在某种情况下，由于连接方式不明确可直接导致读码框架移动。在DH-JH或VH-DH-JH连接处可出现核苷酸缺失，导致V区内氨基酸序列的完全改变。有时可以不产生读码框架移动，而将终止密码子引入核酸序列中。

3.3 体细胞突变

通过分离产生单克隆抗体的杂交瘤细胞并测定其IgH和IgL基因的核苷酸序列证实：V 基因的突变随着免疫接种和重复免疫以后时间的推移而增加，主要集中在互补决定区，抗体的亲和性随着突变的增加而增加[21]。因此，体细胞突变也是造成抗体多样性的原因之一。

4. 结束语

研究鱼类免疫球蛋白的组成、种类、产生机制不仅对人们认识动物免疫球蛋白的个体发生和利用特异性体液免疫进行免疫防御具有重要的意义，而且对脊椎动物免疫系统的进化都具有相当重大的意义。相信随着研究的深入，会给鱼类病害防治，免疫疫苗方面带来一番新的景象。

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本科毕业设计

（20_ _届）

大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列特征

目录

引言 (1)

1 材料和方法 (2)

1.1 实验材料 (2)

1.1.1 材料 (2)

1.1.2 实验试剂 (2)

1.1.3主要仪器 (2)

1.1.4 主要耗材 (2)

1.2 实验方法 (2)

1.2.1 细菌扩大培养 (2)

1.2.2 质粒提取 (2)

1.2.3 EST测序 (3)

1.2.4 目的基因的生物信息学分析 (3)

2 结果与分析 (3)

2.1 大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列测定 (3)

2.2 大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列分析 (4)

2.2.1 与NCBI数据库中大黄鱼免疫球蛋白重链的比对 (4)

2.2.2 与其他鱼类的同源性的对比 (6)

2.2.3 免疫球蛋白重链可变区基因系统进化树分析 (8)

2.3 大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因蛋白质结构分析 (9)

2.3.1 一级结构分析 (9)

2.3.2 二级结构分析 (10)

2.3.3 三级结构分析 (11)

3 讨论 (12)

4 小结 (13)

致谢 (14)

参考文献 (15)

摘要：鱼类免疫球蛋白重链可变区中氨基酸的种类排列顺序千变万化，可形成许多种具有不同结合抗原特异性的抗体，因此该基因的研究对提高鱼类免疫和防治病毒害有重要意义。本实验通过对大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库进行随即测序和分析得到大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因部分序列，然后进行生物信息学分析。本序列长度为422bp，编码117个氨基酸。本实验得到的序列与花狼鱼、双棘牛鱼、条纹婢翁、斜带石斑鱼、伯氏豚鰕虎鱼、南极鳕鱼的同源性较高，都有72%，与北极红点鲑的同源性较低，只有68%。系统进化树分析中可知大黄鱼与笛鲷的亲缘关系较近，与硬头鳟、北极红点鲑的关系较远。蛋白质分析中可知本序列分子量为13207.8DA。等电点为6.71。该试验结果为大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因功能的实验性鉴定工作奠定了基础。

关键词：大黄鱼；免疫球蛋白重链可变区；序列分析

Abstract:Fish immunoglobulin heavy chain variable region amino acid sequence of ever-changing species, can be formed with different combination of many types of antigen-specific antibodies, so the genes for improving fish immune and control virus and damage is significant. In this experiment, Random sequencing and analysis of Pseudosciaena crocea skeletal muscle cDNA library, and analysis of biological information. The sequence length of 422bp, encoding 117 amino acids. The sequence of this experiment compared the gene with the Anarhichas mino, Bovichtus diacanthus, Latris lineata, Epinephelus coioide s, Pseudotrematomus bernacchii and Notothenia coriiceps, their homology have reached 72%, with Salvelinus alpinus have low homology, only is 68%. Phylogenetic tree analysis shows that Pseudosciaena crocea and Lutjanus sanguineu s in the closest relationship, with Oncorhynchus mykiss and Salvelinus alpinus are distant. Analysis shows that the sequence of the protein molecular weight 13207.8DA, isoelectric point of 6.71. The experiment results for Pseudosciaena crocea immunoglobulin heavy chain variable region gene provided a basis for further study on gene function.

Key words: Pseudosciaena crocea; immunoglobulin M heavy chainvariable region; sequence analysis

引言

大黄鱼（Larimichthys crocea），属于脊索动物门（Chordata）、硬骨鱼纲（Osteichthyes）、鲈形目（Perciformes）、鲈形亚目（Percoidei）、石首鱼科（Sciaenidae）、黄鱼属（Larimichthys），俗称黄鱼、黄瓜鱼、黄花鱼等，为暖温性集群洄游鱼类，分布于我国东海、南海和黄海南部，是我国主要海产经济鱼类之一。主要生活在近海的中、下层，分为3个地理种群：岱衢族、闽一粤东族和硇洲族。大黄鱼肉质较好且味美，含有丰富的蛋白质、微量元素和维生素，除鲜食和制成特色风味水产品外，还具有药用价值。中医认为，黄鱼有和胃止血、益肾补虚、健脾开胃、安神止痢、益气填精之功效；对贫血、失眠、头晕、食欲不振及妇女产后体虚有良好疗效。

免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，具有高特异性和高亲和性，普遍存在于哺乳动物的血液、组织和外分泌中[1]。免疫球蛋白分子的基本结构是由四肽链组成的，即由二条相对分子量较小的轻链（light chain, L链）和二条相对分子量较大的重链（heavy chain, H链）组成，链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的“Y”形的单体分子。在Ig分子L链和H链的N端，L链1/2和H链约1/4处区域，氨基酸的种类和排列顺序随抗体特异性不同而有所变化，称为可变区（variable region, V区），它赋予抗体以特异性[2]。硬骨鱼类体内主要的免疫球蛋白种类为四聚体的IgM[3]，其重链基因座的组织形式与两栖动物和哺乳动物的一样，即上百个可变区基因区段（variable segment, VH）位于多变区基因区段（cluster of diversity segment, D）的上游，然后是连接区基因区段（joining segment, JH），在3端则是4个恒定区基因区段（constant segment, Cμ1~4）和2个跨膜区基因区段（trans-membrane segment, TM1~2）[4]。在一个物种内，VH基因显示出广泛的序列多样性，一个物种的VH基因家族数越大，则表明其VH基因的多样性可能越大，产生的免疫球蛋白种类就越多。

一直以来，在科学家们的不懈努力下，已经成功突破了大黄鱼网箱养殖、人工繁殖的难关，使大黄鱼人工养殖得到迅猛发展，生产规模逐渐扩大，大黄鱼己成为我国海水网箱养殖数量最大的鱼种之一。但是随着大黄鱼养殖密度的提高、养殖规模的扩大、养殖管理相对滞后以及养殖环境的污染，病害问题也陆续出现，已成为制约大黄鱼养殖业持续稳定发展的主要因素。近年来，多方面的研究结果表明长期人工繁殖育种的大黄鱼出现了养殖品系的遗传退化、病危害频生、生长缓慢、性成熟提早、亲鱼个体变小及肉质变差等一系列问题。目前，养殖大黄鱼的主要疾病有病毒病、细菌病和寄生虫病。病害的防治主要使用抗生素。滥用抗生素造成了耐药性增加、药物残留、污染环境等一系列负面影响[5~6]。所以从大黄鱼自身的抗病能力入手，通过提高鱼体的自身免疫力来抵御病原微生物的侵袭是一个很好的途径。

免疫球蛋白是鱼类适应性体液免疫应答中最主要的介质，其基因结构是免疫球蛋白多样性产生的最根本的原因，它们代表了所能够产生的抗体种类的最少数量。因此，大黄鱼免疫蛋白分子基础研究，相关基因分子特点与功能的研究，不仅可以对以鱼类为代表的低等脊椎动物免疫系统有个更深入的了解和认识，也可以为大黄鱼病害防治提供更为明确的理论证明。

获得整个基因组的信息有两种途径，一种是源于mRNA的cDNA测序，另一种是全基因

组DNA测序。全基因组测序虽然很有效，但耗费资金数额巨大，并且需要有效的计算机软件，有时还需要国际间合作；而cDNA 是指用于编码的基因，仅占全部基因组的2%[7]，长度为500～8000 bp，方便克隆和测序，cDNA测序的流程一般是从cDNA文库中随机挑取克隆，然后进行单向测序，产生大量的约300～500 bp的部分cDNA短序列，即ESTs（expressed sequence tags）序列。自Adams 等[8]在人类基因组计划研究中使用ESTs这一概念以来，ESTs 技术已被广泛应用于组织特异性基因表达谱分析、新基因的克隆和基因组序列功能分许等多项研究领域。EST技术是将mRNA反转录成cDNA并克隆到载体构建成cDNA文库后，大规模随机挑选cDNA克隆，对其5’或3’端进行一步法测序，所获序列与基因数据库已知序列比较，从而获得对生物体生长发育、繁殖分化、遗传变异、衰老死亡等一系列生命过程认识的技术[9]。ESTs 测序分析目前已经成为大规模获取功能基因的一种最为有效和快捷的研究技术[10]。

本实验通过对大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库进行EST测序及分析，获得免疫球蛋白重链可变区基因序列片段，然后对所得基因进行生物信息学分析。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 材料

-80℃冷藏的大黄鱼肌肉组织cDNA文库质粒。

1.1.2实验试剂

（1）质粒提取溶液I：50mmol/L葡萄糖，10mmol/L EDTA (pH8.0)，25mmol/L Tris.Cl(pH8.0)，高压蒸汽锅灭菌15min，40℃贮存；

（2）质粒提取溶液II：0.2mo1/L NaOH（使用前需要用10mol/L贮存液稀释），1%SDS；（3）质粒提取溶液III：5ml冰乙酸，60m1 5mol/ L乙酸钾，乙酸根终浓度为5mol/L，钾离子终浓度为3mo1/L，28.5m1水；

（4）异丙醇：购于宁波奥博科学仪器有限公司；

（5）70 %的乙醇：取70 ml的无水乙醇，加入蒸馏水定容到100 ml。无水乙醇为AR 级，购于宁波奥博科学仪器有限公司；

（5）LB液体培养基：蛋白胨10g，Yeast Extract 5g，NaCI 5g，氨苄青霉素终浓度100μg/ml，pH7.0，定容到1L，高温高压灭菌30min；

（6）质粒提取试剂盒，TIANprep。

1.1.3 主要仪器

（1）DYY-8B型稳压稳流电泳仪：北京六一仪器厂；

（2）LX-100手掌型离心机：江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司；

（3）吉尔森可调精密移液器PEPETMAN：法国GILSON公司；

（4）TCL-16B高速台式离心机：上海安亭科学仪器厂；

（5）HZ-9211K恒温振荡器：太仓市科教器材厂；

（6）DELTA 320 pH计：梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；

（7）REVCD 1386-3V型超低温冰箱：美国REVCD公司；

（8）Biofuge fresco高速台式冷冻离心机：美国SORVALL公司。

1.1.4 主要耗材

1.5 ml离心管、各型号枪头、无粉乳胶手套和口罩：均购自江苏省通州市南兴申海玻璃仪器厂。

1.2 实验方法

1.2.1 细菌扩大培养

将带有质粒的大肠杆菌接种到LB液体培养基中，37℃振荡培养12～16小时，直至长出菌落。

1.2.2 质粒提取

常规提取质粒步骤按文献[11~12]进行，再根据本实验室情况加以调整。

（1）将菌落接种到96孔板上，每孔中加入1 ml的培养物，37℃过夜，室温培养；3000rpm离心5min，弃去上清液，倒置至晾干。

（2）加入200μl 质粒提取液solution I，封膜后，用振荡器充分振荡，直到板底无沉淀出现为止，再加入200μl 质粒提取液solution II，用胶带封住口，轻轻反复颠倒5次（切勿剧烈振荡）。

（3）然后加入200μl冷的质粒提取液solutionIII，同样用胶带封口，反复颠倒15次。4000rpm离心20min，将上清液倒入另一个新的96孔深孔板中。

（4）深孔板中每孔加入450μl异丙醇，用胶带封牢口，反复颠倒5次，4000rpm离心20min，DNA沉淀。

（5）弃去上清液，加入600μl 70％乙醇，用硅胶垫封口，充分振荡后，离心4000rpm，5min。

（6）去掉上清液，重复上一步。

（7）晾干，加入30μl超纯水用于溶解DNA，-20℃贮存备用。

（8）电泳检测。先加入3μl溴芬兰，再加入3μl质粒。然后将6μl液体全部点入加样孔。电压200V，时间20min。

1.2.3 EST测序

通过对大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库进行随机测序及分析，大规模测序工作由北京华大基因公司完成，使用型号为ABI3730的测序仪进行大规模测序[12]。采用M13正向引物从cDNA的5’端测取，通用引物可以用5'-d(GCCAGGGTTTTCCCAGTCACGA)-3'。测得序列再通过Cross-match软件以及辅以手工处理，剪切去掉载体序列和低质量序列，然后经过BlastX检索NCBI及SWISSPROT蛋白质数据库，最终获得免疫球蛋白重链可变区基因序列片段。

1.2.4目的基因的生物信息学分析

序列同源性比对和相似性搜索用BLAST-N（https://www.wendangku.net/doc/442763370.html,/）进行，采用DNAMAN软件将其翻译成对应的氨基酸序列；多重序列的比对采用ClustalW2 （http:https://www.wendangku.net/doc/442763370.html,/Tools/msa/clustalw2/）；采用ExPASy（Expert Protein Analysis System）中的ProtParam(https://www.wendangku.net/doc/442763370.html,/tools/protparam.html）分析蛋白质的一级结构，SOPMA

（http://npsa-pbil.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=npsa_sopma.html）分析蛋白质的二级结构，并且使用SWISS-MODEL（https://www.wendangku.net/doc/442763370.html,/）对蛋白质三级结构进行预测；采用ClustalX和MEGA 3.1软件，以邻位相连法（Neighbor-joining）构建进化树等生物信息学方法分析大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列特征。

参与同源性比对和构建进化树的物种如下：花狼鱼Anarhichas mino（EU627008.1）、双棘牛鱼Bovichtus diacanthus（EU240584.3）、条纹婢翁Latris lineata（FJ864715.1）、斜带石斑鱼Epinephelus coioide s（GU988694.1）、伯氏豚鰕虎鱼Pseudotrematomus bernacchii （AF303564.1）、南极鳕鱼Notothenia coriiceps（AF437739.1）、乌鳢Channa argus （EU822510.1）、笛鲷Lutjanus sanguineus（HQ322494.1）、硬头鳟Oncorhynchus mykiss （HQ322494.1）、北极红点鲑Salvelinus alpinus（AJ000361.1）。

2 结果与分析

2.1大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列测定

通过对大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库部分序列的EST测定及分析，获得免疫球蛋白重链可变区序列片段，经BLAST在NCBI上查询可得知，得到的是大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因部分序列，长度为422bp，编码117个氨基酸。1-69位是非编码区，70位出现起始密码子ATG，无终止子。序列如图1所示。

图1 大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因部分序列

2.2 大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列分析

2.2.1 与NCBI数据库中大黄鱼免疫球蛋白重链的比对

本实验得到的序列只是大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列的一部分，与NCBI数据库中大黄鱼免疫蛋白重链cDNA完整序列比对后有如下不同，如图2所示。在核苷酸序列比对中发现，在实验序列中，第19-24位核苷酸是AAATCGC，第69-83位核苷酸是CAATG ATCA GACCTG，第92-116位核苷酸是GGTTGTTTTTCTCATCCTGTCTATTAA，在第290-292位核苷酸序列是ATG，但在数据库序列中，相应位置上的核苷酸都表现为缺少；保守区大体集中在117-199位，235-289位，294-422位。在氨基酸序列比对中发现，本实验获得的序列中，第3-4位氨基酸是RP，第7位氨基酸是L，第9位氨基酸是V，第16-17位氨基酸是NC，第45位氨基酸是Y，第52-53位氨基酸是PP，第50位缺少，第55位氨基酸是S，第73位氨基酸是H，第79位氨基酸是E，第116位氨基酸是N；而在数据库中的序列中，第3-4位氨基酸缺失，第7位氨基酸是R，第9位氨基酸是G，第16-17位氨基酸是CW，第45位氨基酸是A，第52-53位氨基酸是NY，第50位氨基酸是F，第55位氨基酸是T，第73位氨基酸是T，第79位氨基酸是L，第116位氨基酸是Y。

图2.1 核酸序列比对。“*”表示该列核苷酸完全一致。

图2.2 氨基酸序列比对。“*”表示该列氨基酸完全一致，“：”和“.”表示该列都含有保守氨基酸，其中前

者保守性大于后者。

图2 实验序列与GENBANK中的大黄鱼重链cDNA完整序列的比对

2.2.2 与其他鱼类的同源性的对比

通过BLAST（https://www.wendangku.net/doc/442763370.html,/）将大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列与其它鱼类即上述实验方法中所提及的鱼类免疫球蛋白重链可变区基因序列的序列进行同源性比对[13]，如表1所示。结果显示，本实验得到的序列与花狼鱼、双棘牛鱼、条纹婢翁、斜带石斑鱼、伯氏豚鰕虎鱼、南极鳕鱼的同源性较高，都有72%，与北极红点鲑的同源性较低，只有68%。

表1 大黄鱼与其他鱼类的免疫球蛋白重链可变区基因序列同源性比较登录号基因名称同源性(%)

AY188782.1 花狼鱼Anarhichas minor72

EU240584.3 双棘牛鱼Bovichtus diacanthus72

FJ864715.1 条纹婢翁Latris lineata72

GU988694.1 斜带石斑鱼Epinephelus coioides72

AF303564.1 伯氏豚鰕虎鱼Pseudotrematomus bernacchii72

AF437739.1 南极鳕鱼Notothenia coriiceps 72

EU822510.1 乌鳢Channa argus71

HQ322494.1 笛鲷Lutjanus sanguineus71

HQ322494.1 硬头鳟Oncorhynchus mykiss69

AJ000361.1 北极红点鲑Salvelinus alpinus68 将本实验中得到的序列通过DNAMAN软件将其翻译成对应的氨基酸序列后，采用ClustalW2（http:https://www.wendangku.net/doc/442763370.html,/Tools/msa/clustalw2/）进行多重序列的核酸比对和氨基酸比对[14]，参与比对的物种如实验方法中所述，比对结果如图3所示。

第四章 免疫球蛋白剖析

第四章免疫球蛋白 第一节基本概念 1、抗体：B淋巴细胞在有效的抗原刺激下分化为浆细胞，产生具有与相应抗原发生特异性结合功能的免疫球蛋白，这类免疫球蛋白称为抗体。 1937年，Tiselius用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分，其后又证明抗体的活性部分是在γ球蛋白部分。因此，相当长一段时间内，抗体又被称为γ球蛋白（丙种球蛋白）。实际上，抗体的活性除γ球蛋白外，还存在于α和β球蛋白处。 20世纪40年代初期，Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔，证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。肺炎球菌多糖免疫家兔后可获得高效价免疫血清。然后加入相应抗原吸收以除去抗体，将除去抗体的血清进行电泳图谱分析，发现丙种球蛋白（γ-G）组分明显减少，从而证明了抗体活性是存在于丙种球蛋白内。 2、免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。 区别： 抗体都是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并不都是抗体。如骨髓瘤蛋白，巨球蛋白血症、冷球蛋白血症等患者血清中存在的异常免疫球蛋白结构与抗体相似，但无抗体活性。 免疫球蛋白可分为分泌型（secreted Ig,SIg）和膜型（membrane Ig, mIg）。 前者主要存在于血清及其他体液或外分泌液中，具有抗体的各种功能；后 者是B细胞表面的抗原识别受体。 第二节免疫球蛋白结构

一、免疫球蛋白的基本结构 （一）重链和轻链 免疫球蛋白分子是由两条相同的重链（heavy chain，H链）和两条相同的轻链（light chain，L链）通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。X 射线晶体结构分析发现，IgG分子由3个相同大小的节段组成。 1. 重链 分子量约为50～75kD，由450～550个氨基酸残基组成。免疫球蛋白重链恒定区由于氨基酸的组成和排列顺序不同，故其抗原性也不同。据此，可将免疫球蛋白分为五类，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。不同的同种型具有不同的特征，包括链内二硫键的数目和位置、连接寡糖的数量、功能区的数目以及铰链区的长度等。同一类Ig根据其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目和位置的差别，又可分为不同的亚类。如IgG可分为IgG1～IgG4；IgA可分为IgA1和IgA2。IgM、IgD和IgE尚未发现有亚类。 2.轻链 免疫球蛋白轻链的分子量约25 kD，由214个氨基酸残基构成。轻链可分为两型，即κ(kappa)型和λ(lambda)型，一个天然Ig分子上两条轻链的型别总是相同的,两型轻链的功能无差异。不同种属中，两型轻链的比例不同，正常人血清免疫球蛋白κ:λ约为2:1，而在小鼠则为20:1。κ:λ比例的异常可能反映免疫系统的异常，例如人类免疫球蛋白λ链过多，提示可能有产生λ链的B细胞肿瘤。根据λ链恒定区个别氨基酸的差异，又可分为λ1、λ2、λ3和λ 4 四个亚型。 （二）可变区和恒定区 通过分析不同免疫球蛋白重链和轻链的氨基酸序列，发现重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸的序列变化很大，称为可变区（variable

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毕业论文开题报告模板范文 [1]毕业论文开题报告 开题报告是指开题者对科研课题的一种文字说明材料。这是一种新的应用写作文体，这种文字体裁是随着现代科学研究活动计划性的增强和科研选题程序化管理的需要应运而生的。开题报告一般为表格式，它把要报告的每一项内容转换成相应的栏目，这样做，既便于开题报告按目填写，避免遗漏；又便于评审者一目了然，把握要点。 开题报告包括综述、关键技术、可行性分析和时间安排等四个方面。 开题报告作为毕业论文答辩委员会对学生答辩资格审查的依据材料之一。 由于开题报告是用文字体现的论文总构想,因而篇幅不必过大,但要把计划研究的课题、如何研究、理论适用等主要问题。 开题报告的总述部分应首先提出选题,并简明扼要地说明该选题的目的、目前相关课题研究情况、理论适用、研究方法。 开题报告是由选题者把自己所选的课题的概况(即"开题报告内容")，向有关专家、学者、科技人员进行陈述。然后由他们对科研课题进行评议。亦可采用"德尔菲法"评分；再由科研管理部门综合评议的意见，确定是否批准这一选题。开题报告的内容大致如下：课题名称、承担单位、课题负责人、起止年限、报名提纲。报名提纲包括： (1)课题的目的、意义、国内外研究概况和有关文献资料的主要观点与结论； (2)研究对象、研究内容、各项有关指标、主要研究方法(包括是否已进行试验性研究)； (3)大致的进度安排； (4)准备工作的情况和目前已具备的条件(包括人员、仪器、设备等)； (5)尚需增添的主要设备和仪器(用途、名称、规格、型号、数量、价格等)； (6)经费概算； (7)预期研究结果； (8)承担单位和主要协作单位、及人员分工等。 同行评议，着重是从选题的依据、意义和技术可行性上做出判断。即从科学技术本身为决策提供必要的依据。 [2]如何撰写毕业论文开题报告 开题报告的基本内容及其顺序：论文的目的与意义；国内外研究概况；论文拟研究解决的主要问题；论文拟撰写的主要内容（提纲）；论文计划进度；其它。 其中的核心内容是“论文拟研究解决的主要问题”。在撰写时可以先写这一部分，以此为基础撰写其他部分。具体要求如下： 1．论文拟研究解决的问题 明确提出论文所要解决的具体学术问题，也就是论文拟定的创新点。 明确指出国内外文献就这一问题已经提出的观点、结论、解决方法、阶段性成果、……。 评述上述文献研究成果的不足。 提出你的论文准备论证的观点或解决方法，简述初步理由。 你的观点或方法正是需要通过论文研究撰写所要论证的核心内容，提出和论证它是论文的目的和任务，因而并不是定论，研究中可能推翻，也可能得不出结果。开题报告的目的就是要请专家帮助判断你所提出的问题是否值得研究，你准备论证的观点方法是否能够研究出来。 一般提出3或4个问题，可以是一个大问题下的几个子问题，也可以是几个并行的相关问题。

第四章免疫球蛋白

第四章免疫球蛋白 抗体（antibody，Ab）是介导体液免疫的重要效应分子，是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，主要存在于血清等体液中，通过与相应抗原特异性地结合，发挥体液免疫功能。早在十九世纪后期，von Behring和Kitasato就发现白喉或破伤风毒素免疫动物后可产生具有中和毒素作用的物质，称之为抗毒素（antitoxin），随后引入抗体一词来泛指抗毒素类物质。1937年Tiselius和Kabat用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白以及α1、α2、β和γ球蛋白等组分，并发现抗体活性主要存在于γ区，故相当长一段时间内，抗体又被称为γ球蛋白（丙种球蛋白）（图4-1）。1968年和1972年世界卫生组织和国际免疫学会联合会的专门委员会先后决定，将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统一命名为免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。免疫球蛋白可分为分泌型（secreted Ig，sIg）和膜型（membrane Ig, mIg）。前者主要存在于血液及组织液中，具有抗体的各种功能；后者构成B细胞膜上的抗原受体。 第一节免疫球蛋白的结构 一、免疫球蛋白的基本结构 X射线晶体衍射结构分析发现，免疫球蛋白由四肽链分子组成，各肽链间有数量不等的链间二硫键。在结构上Ig可分为三个大小大致相同的片段，其中两

个大小完全一致的片段位于分子的上方，通过一易弯曲的区域与主干连接，形成一“Y”字型结构（图4－2），组成Ig单体，是免疫球蛋白分子的基本单位。 （一）重链和轻链 任何一类天然免疫球蛋白分子均含有四条多肽链，其中，分子量较大的称为重链(heavy chain，H)，而分子量较小的为轻链(light chain，L)。同一天然Ig分子中的两条H链和两条L链的氨基酸组成完全相同。 1．重链分子量约为50~75kD，由450~550个氨基酸残基组成。各类免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不尽相同，因而其抗原性也不同。据此，可将免疫球蛋白重链分为五类（class）或五个同种型（isotype），即μ链、δ链、 链、α链和ε链，其相应的Ig分别为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。不同类的重链具有不同的特征，如链内二硫键的数目和位置、连接寡糖的数量、结构域的数目以及铰链区的长度等均不完全相同。即使是同一类Ig重链其铰链区氨基酸组成和二硫键的数目、位置也不同，据此又可将同一类Ig分为不同的亚类（subclass）。如人IgG可分为IgG1~IgG4；IgA可分为IgA1和IgA2。IgM、IgD

大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列特征[设计+开题+综述]

开题报告 生物技术 大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列特征 一、选题的背景与意义 大黄鱼，隶属于脊索动物门（Chordata）、脊椎动物亚门（Vertebrata）、硬骨鱼纲（Osteichthyes）、鲈形目（Perciformes）、鲈形亚目（Percoidei）、石首鱼科（Sciaenidae）、黄鱼属（Larimichthys），为暖温性集群洄游鱼类，为传统“四大海产”之一，是我国主要海产经济鱼类之一。大黄鱼肉质较好且味美，含有丰富的蛋白质、微量元素和维生素，除鲜食和制成特色风味水产品外，还具有药用价值。中医认为，黄鱼有和胃止血、益肾补虚、健脾开胃、安神止痢、益气填精之功效；对贫血、失眠、头晕、食欲不振及妇女产后体虚有良好疗效。但由于过度捕捞以及海洋环境恶化，野生大黄鱼产量急剧下降，大黄鱼养殖因此兴起。然而，近年来，在大黄鱼的人工养殖过程中，出现性成熟提早、病害频繁发生等问题，这些都说明大黄鱼的种质资源出现退化现象。 在长期的鱼类病害防治过程中，人们逐步认识到通过鱼类的适应性免疫系统进行病害免疫防治的重要性。由于免疫球蛋白是鱼类适应性体液免疫应答中最主要的介质。免疫球蛋白基本结构是由四肽链组成的，即由二条相对分子量较小的轻链和二条相对分子量较大的重链组成，在免疫球蛋白分子轻链和重链的N端，氨基酸的种类和排列顺序随抗体特异性不同而有所变化，称为可变区，它赋予抗体以特异性。 因此，通过对大黄鱼免疫球蛋白基因的研究对增强大黄鱼免疫力，提高抗病害能力显得尤为重要。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题： （一）、课题研究的基本内容 随机测序大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库的克隆菌，获得免疫球蛋白重链可变区序列；运用生物信息学进行序列同源性分析，进行系统进化树分析，蛋白质结构预测分析，总结分析其特征。 （二）、拟解决的主要问题 1.大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因的结构分析。 2.大黄鱼免疫球蛋白重链可变区基因序列与其他物种相比有何特征。

第四章免疫球蛋白

第四章 免疫球蛋白 抗体(antibody，Ab)是介导体液免疫的重要效应分子，是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合，显示免疫功能。早在十九世纪 后期，von Behring及其同事Kitasato就发现白喉或破伤风毒素免疫动物后可产生具有中和毒素作用的物质，称之为抗毒素(antitoxin),随后引入抗体一词来泛指抗毒素类物质。1937年Tiselius和Kabat用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分，并发现抗体活性存在于从α到γ的这一广泛区域（图4-1），但主要存在于γ区，故相当长一段时间内，抗体又被称为γ球蛋白（丙种球蛋白）。1968年和1972年世界卫生组织和国际免疫学会联合会的专门委员会先后决定，将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统一命名为免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。免疫球蛋白可分为分泌型（secreted Ig，SIg）和膜型（membrane Ig, mIg）。前者主要存在于血液及组织液中，具有抗体的各种功能；后者构成B细胞膜上的抗原受体。 第一节 免疫球蛋白的结构 一、免疫球蛋白的基本结构

X射线晶体衍射结构分析发现，免疫球蛋白由四肽链分子组成，各肽链间有数量不等的链间二硫键。结构上Ig可分为三个长度大致相同的片段，其中两个长度完全一致的片段位于分子的上方，通过一易弯曲的区域与主干连接，形成一”Y”字型结构（图4－2），称为Ig单体，构成免疫球蛋白分子的基本单位。 图4?2 （一）重链和轻链 任何一类天然免疫球蛋白分子均含有四条异源性多肽链，其中，分子量较大的称为重链(heavy chain, H)，而分子量较小的为轻链(light chain, L)。同一天然Ig 分子中的两条H链和两条L链的氨基酸组成完全相同。 1. 重链 分子量约为50～75kD，由450～550个氨基酸残基组成。各类免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不尽相同，因而其抗原性也不同。据此，可将免疫球蛋白分为5类（class）或5个同种型（isotype），即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。不同类的免疫球蛋白具有不同的特征，如链内和链间二硫键的数目和位置、连接寡糖的数量、结构域的数目以及铰链区的长度等均不完全相同。即使是同一类Ig其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目、位置也不同，据此又可将同类Ig分为不同的亚类（subclass）。如人IgG可分为IgG1～IgG4；IgA可分为IgA1和IgA2。

艺术设计毕业论文开题报告

毕业论文（设计）题目： 广告创意 毕业论文（设计）工作内容：随着社会的进步和科学技术的飞速发展,优秀的富有创意的招贴设计在视觉传达的领域起着越来越重要的作用。通过阐述招贴设计的特征,并结合对自己作品的评析,着重探讨了创意在招贴创作中的重要性。招贴是广告设计中的重要表现形式之一，在公共广告媒介中占有很重要的位置。招贴，又称海报、宣传画，是一种张贴在公共场合，传递信息，以达到宣传目的的印刷广告形式。招贴设计以它独特的方式出现在各种公共场合，远距离就能吸引社会公。众的注意力，具有时效性强、信息传递快等特点。创意是招贴设计的灵魂，彰显个性的构思，出奇制胜的表现，能够使招贴作品具有生命力。创意，是指通过创造性思维、联想、构思，创造出能够表现主题的具有实际意义的艺术化心理过程，是主题概念化、视觉化的思维过程和实际操作过程。创意依附与主题，主题通过创意来表现。 论文题目_____ 广告创意_________________________________________ 指导教师：（签名）年月日 教研室主任：（签名）年月日 学院院长：（签名）年月日 学生姓名：专业：指导教师： 本科毕业论文（设计）开题报告 学院（系）_________________ 专业________________________ 班级________________________ 姓名________________________ 学号________________________ 指导教师________________________ 填表日期________________________ 00 年月说明 1、毕业设计的开题报告是保证毕业设计质量的一个重要环节，为规范毕业设计的开题报告，特印发此表。 2、学生应在开题报告前，通过调研和资料搜集，主动与指导教师讨论，在指导教师的指导下，完成开题报告。 3、此表一式二份，交学院装入毕业设计（论文）档案袋。

4免疫球蛋白

第四章 免疫球蛋白 第一部分：学习习题 一、 填空题 1．免疫球蛋白分子是有两条相同的____和两条相同的____通过链____连接而成的四肽链结构。 2．根据免疫球蛋白重链抗原性不同，可将其分为IgA 、IgM 、 IgG 、IgE 、IgD 等五类，其相应的重链分别为___、___、___、___、___。 3．免疫球蛋白轻链可分为___型和___型。 4．用木瓜蛋白酶水解IgG 可得到两个相同的____片段和一个____片段，前者的抗原结合价为1；用胃蛋白酶水解IgG 则可获得一个抗原结合价为2的_____片段和无生物学活性的____片段。 二、 多选题 [A 型题] 1．抗体与抗原结合的部位： A.V H B. V L C. C H D.C L E. V H 和 V L 2．免疫球蛋白的高变区(HVR)位于 A.V H 和 C H B. V L 和V H C.Fc 段 D.V H 和C L E. C L 和C H 3．能与肥大细胞表面FcR 结合，并介导I 型超敏反应的Ig 是： A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 4．血清中含量最高的Ig 是： A.IgA B. IgM C. IgG

D.IgD E. IgE 5．血清中含量最低的Ig是： A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 6．与抗原结合后激活补体能力最强的Ig是： A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 7．脐血中哪类Ig增高提示胎儿有宫内感染？ A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 8．在免疫应答过程中最早合成的Ig是： A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 9．下面哪一类Ig参与粘膜局部抗感染： A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 10．分子量最大的Ig是： A.IgA B. IgM C. IgG D.IgD E. IgE 11．ABO血型的天然抗体是： A.IgA类抗体 B. IgM类抗体 C. IgG类抗体 D.IgD类抗体 E. IgE类抗体 12．在种系发育过程中最早出现的Ig是： A.IgA类抗体 B. IgM类抗体 C. IgG类抗体

毕业设计和开题报告说明

石家庄学院 毕业设计开题报告撰写说明 开题报告作为毕业论文答辩委员会对学生答辩资格审查的依据材料之一。此报告应在指导教师指导下，由学生在毕业设计（论文）工作前期完成，经指导教师审查签署意见后生效。学生查阅资料的参考文献应在5篇以上（不包括辞典、手册），开题报告字数不少于1500字。相关内容格式要求如下 1.字体字号要求 （1）开题报告要统一打印，采用计算机排版、A4纸纵向打印。正文用宋体小四号字，版面上下空2.5cm，左右空2.8cm，左侧装订； （2）标题用三号黑体字，加粗，居中； （3）一级标题用小三号黑体字，加粗； （4）二级标题用四号黑体字，加粗； （5）三级标题用小四号黑体字（不加粗）； （6）正文为小四宋体，行间距为18磅，外文用Times New Roman 字体,首行缩进。 （7）各层标题与段前、段后间距为0.5行，左对齐。 2.数字和日期时间 （1）测量、统计数据一律用阿拉伯数字并正确使用法定计量单位，如5.25 km，-123.09，21 337等； （2）4位以上的数字一般不采用千分位号，而采用四分之一字的空隙，如34 567 890而不写作34,567,890等； （3）小于10的数字时，一般不宜用阿拉伯数字； （4）固定用语、词组、缩略语等也不采用阿拉伯数字，如第三世界，三叶虫，相隔十万八千里等； （5）数字较大时，采用科学记数法，如：10 000可写成1×104等； （6）乘法符号一般不用“·”而使用“×”； （7）日期用阿拉伯数字，如20世纪90年代，2007年11月27日或2008-11-27等，不采用08年等表达方式。 （8）时刻表达一般采用中文计量单位，如上午8时45分，也可

毕业设计论文开题报告

先进制造技术工程中心毕业设计（、论文 南京工程学院 文开红题色报告范例 字体及文 本框部分 ':匀为填写 说明，看 后请删 除！ -------- 先进制造技术工程中心 本科毕业设计（论文）开题报告 题 目： SKRT32数控回转工作台设计 专 业： 机械设计制造及其自动化 班级： D 机加工051 学号：_ 学生姓名： XXX XXX 2009年3月 填：自然科学基金与部、扌省导教师 级以上科研课题；企、事业单位 委托课题；院级基金课题；自拟 课题。 填：工程设计；工程技术研究； 软件工程（如CAI 课题等）；文 献型综述；其它。 本科毕业设计（论文）开 _________ 课题名称 SKRT32数控回转工作台设计

英文书籍引用：作 者.书名.岀版社, 出版年：起止页码 英文期刊文章引用：作 者.题名.期刊名，岀版 年份，期号：起止页码 文 献 综 述 ------------------------------------------------------------ （文献序号用上标标注） （一定要结合课题来写！！） 进入21世纪，我国机床制造业既面临着提升机械制造业水平的需求而引发的制造装备 发展的良机，也遭遇到加入 WTO 后激烈的市场竞争的压力。从技术层面上来讲，加速推 进数控技术将是解决机床制造业持续发展的一个关键。而从国际上来说，代表机床制造业 最高境界的是五轴联动数控机床系统 ⑴，从某种意义上来说，反映了一个国家的工业发展 水平状况。长期以来，以美国为首的西方工业发达国家，一直把五轴联动数控机床系统作 为他们重要的战略物资，由于五轴联动数控机床系统价格十分昂贵，加之 NC 程序制作较 难，使五轴系统难以“平民”化的应用。 数控转台的发展趋势是 [2-4] :在规格上将向两头延伸，即开发小型和大型转台；在性能 上将研制以钢为材料的蜗轮，大幅度提高工作台转速和转台的承载能力；在形式上继续研 标准引用：主要责任者，标 制多轴并联，甚至于五轴并联的回转式数控转台。 准编号，标准名称.岀版 地：出版者，出版年 …… 数控回转工作台除了可以实现数控机床的圆周进给运动之外，还可以完成精确的自动 分度运动呵。回转工作台与 X 、Y 、Z 三个坐标轴联动，它以水平方式安装于主机工作台面 上，工作时，利用主机的控制系统或专门配套的控制系统，完成与主机相协调的各种加工 的分度回转运动。工作台上可安装板、盘或其它形状较复杂的被加工零部件，从而实现等 分的和不等分的连续的孔、槽以及曲面的加工，且能达到很高的精度。另外也可和非数控 一 门配套的控制系统，独立完成等分的，不等分的以及连续的分度、圆弧 英文文章引用：作 曲弧曲面的加工， 者. 题名参期刊献：， 出版年，期号：起 止页 码 1 、吴祖育? 控机床发展的新趋势?机电产品开发与创新， 它是各类数控机床理想的配套附件。 <. 按在文章中岀现的顺序，按规定标注 数控机床?上海：上海科学技术出版社, 书籍引用：作者.书名.出版 98地:：出版社，岀版年份：弓I 用起 2005， 5： 7-9 .北京：机械工业岀版社, 2004 4、 MORIWAKI. Development of intelligent monitoring and optimization of cutting process for CNC turning. International Journal of Computer Integrated Manufacturing, 2006, 2: 106-109 5、Xiao-Sha n Gao and Dongming Wang. NC Tech no logy and Applicati ons. Academic Press, 2000: 20-27 期刊文章引用：作者?论文题目期刊 名，岀版年份，期号：引用起止页码 1 3、机械设计手册编委会 ，机械设计手册

免疫球蛋白轻链和重链 immunoglobu

免疫球蛋白轻链和重链( immunoglobulin light chain and he... 返回上一级免疫球蛋白轻链和重链( immunoglobulinlight chain and heavy c... 【参考范围】 免疫电泳法：正常为阴性。 免疫速率散射比浊法（ARRAY-360测定仪参考值）:Kappa链血清0.598～1.329g/L；尿液＜18.5mg/L； Lambda链血清0.280～0.665g/L；尿液＜500mg/L；Kappa/Lambda血清 1.47～ 2.95。 【影响因素】 1．免疫电泳法标本要新鲜不可污染或有沉淀，否则电泳时会出现拖尾现象；用抗κ或抗λ血清电泳时，其中一种抗血清有时出现2条沉淀线，是靠近加样孔较粗的为骨髓瘤蛋白所致，另一条通常较弱为游离轻链所致，极少数情况下提示标本与抗血清中可能存在非特异性反应物质，应用抗IgD、抗IgE血清进一步鉴定；另外琼脂浓度、缓冲液离子强度、电压等要合适，每次实验必须做阴性、阳性血清对照。 2．速率散射比浊法抗血清效价高、特异性和亲和力强是实验的关键；PEG 的分子量、浓度要适当、所用器具必须清洁；注意抗原和抗体比例，防止hook 效应的发生。 【临床意义】 1．正常Ig分子的基本结构是由4条多肽链组成，即2条相同的分子量较小的轻链（L链）和2条相同的分子量较大的重链（H链）。L链共分为两型κ型和λ型，同一个天然Ig分子L链的型均相同，正常人血清中κ型：λ型约为2：1。

H链大小约为L链的2倍，根据H链抗原性可将其分为5类Υ链、α链、μ链、δ链、ε链，不同的H链与L链（κ型或λ型）分别组成一个完整的Ig分子，称为IgG(γ）、IgA(α）、IgM（μ）、IgD（δ）、IgE(ε）。 2.L链阳性或升高见于多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性白血病、巨球蛋白血症、淀粉样变性和恶性肿瘤等。在多发性骨髓瘤患者中，约20％患者只分泌游离轻链，50%的既有单克隆免疫球蛋白，又有单克隆尿轻链，前者预后较差。免疫电泳只出现单一L链沉淀线提示多属于恶性疾病，两条同时出现则多属于SLE、肝脏疾病等。 尿液中游离L链又称为本周蛋白或凝溶蛋白，由于其分子量较小，易通过肾小球迅速从尿中排出，因此血中可呈阴性反应。将轻链病患者尿液加热至56℃，15min凝固，继续加热至100℃时溶解，在冷至60℃以下又重新凝固而沉淀，本周蛋白含量＜1.45g/L时加热法检测常为阴性。 3.H链升高见于重链病，重链病是一类淋巴细胞和浆细胞的恶性肿瘤，在患者血清/尿液中大量出现某一类型Ig的H链或片段，其中Υ、α及μ重链病较常见。

本科毕业论文设计开题报告

本科毕业论文设计开题报告 本科毕业论文设计开题报告 无论是在学校还是在社会中，大家都写过论文，肯定对各类论文都很熟悉吧，论文一般由题名、作者、摘要、关键词、正文、参考文献和附录等部分组成。你知道论文怎样写才规范吗？下面是我们为大家整理的本科毕业论文设计开题报告，欢迎阅读，希望大家能够喜欢。 本科毕业论文设计开题报告1 一、研究或设计的目的和意义： 目的： 通过一些心理学知识和实践意义，阐述教师的个人特长对小学生存在的影响，增强教师提高个人特长素质的意识。让家长了解到个人特长对小学生的全面发展及性格塑造有正面影响，打破家长只重视孩子考试成绩的旧观念，让学生更健康的学习、成长。 意义： 在教师个人特长的熏陶下，给小学生提供一个展现自我的平台，有利于激发小学生各方面的学习兴趣、表现欲望和不断进取的精神。在特长学习过程中，磨练小学生的意志，培养小学生吃苦耐劳的精神和交际能力。学以致用的过程中，让小学生理论联系实践，融入到校园之外的生活圈，体验生活，开拓小学生的眼

界，让他们的思维更加敏捷，促使小学生的身心更健全的成长，充分实现教师有价值的“教”和学生有价值的“学”。 二、研究或设计的国内外现状和发展趋势： 现状： 目前，国内外开设了许多特长培训班，但这些班级几乎都是一些在校外开办的私立班级，没有把特长学习和学校里的书面学习有机结合起来，无法实现小学生真正意义上的德、智、体、美、劳全面发展。学校里有特长的教师很少，而且具有的特长比较单一，或者大多数有特长的教师只注重按时授予关于特长的基础知识，不能充分利用课堂资源来发现和激发小学生的兴趣爱好，导致一些小学生对特长所具有的天赋被抹杀，或者一些小学生的家长不了解自己孩子的兴趣爱好，盲目地把家长自己的意愿强加给孩子，让他们去学习自己并不感兴趣的东西，不利于学生的健康成长。 小学生特长的兴趣激发和培养不能与学校课本知识的教学有机结合，忽视了教师的个人特长对小学生的影响，一个身心健康、活泼的孩子才能够更好的接纳和理解教师授予的课本知识，促进其发展，而国内外对这一问题的研究还是比较少，不够全面，不够成熟。 发展趋势：

免疫球蛋白的结构

第一节免疫球蛋白的结构（The Structure of Immunoglobulin) B淋巴细胞在抗原刺激下增殖分化为浆细胞，产生能与相应抗原发生特异性结合的免疫蛋白，这类免疫球蛋白被称为抗体（antibody, Ab）。 1937年，Tiselius用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分，其后又证明抗体的活性部分是在γ球蛋白部分。因此，相当长一段时间内，抗体又被称为γ球蛋白（丙种球蛋白）。 实际上，抗体的活性除γ球蛋白外，还存在于α和β球蛋白处。1968年和1972年的两次国际会议上，将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统一命名为免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。 Ig是化学结构的概念，它包括正常的抗体球蛋白和一些未证实抗体活性的免疫球蛋白，如骨髓瘤病人血清中的M蛋白及尿中的本周氏（Bence Jones, BJ）蛋白等。 免疫球蛋白可分为分泌型（secreted Ig,SIg）和膜型（membrane Ig, mIg）。前者主要存在于血清及其他体液或外分泌液中，具有抗体的各种功能；后者是B细胞表面的抗原识别受体。 ☆☆相关素材☆☆ 图片正常人血清电泳分离图 一免疫球蛋白的基本结构 The basical structure of immunoglobulin 免疫球蛋白分子是由两条相同的重链（heavy chain，H链）和两条相同的轻链（light chain，L链）通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。 X射线晶体结构分析发现，IgG分子由3个相同大小的节段组成，位于上端的两个臂由易弯曲的铰链区（hinge region）连接到主干上形成一个"Y"形分子，称为Ig分子的单体，是构成免疫球蛋白分子的基本单位。

本科毕业设计开题报告评语

从文献综述的内容可以看出，该生以毕业设计课题为中心查阅了相关的基本资料，掌握了相关的基本知识。课题研究的主要方向和内容明确，研究的方法及措施基本可行。 该课题具有一定深度，编制建筑工程的投标文件，内容较多，有一定的难度，工作量较为饱满，符合工程管理专业毕业设计的要求。如果该生能够按时按质顺利完成，预期该学生成果能够达到优良。 该课题具有一定深度，编制建筑工程的投标文件，内容较多，有一定的难度，工作量较为饱满，符合工程管理专业毕业设计的要求。从该生在研究的问题和拟采用的研究手段中可以看出，其基本掌握了相应的理论和方法，应该能够顺利完成毕业设计的任务。 所在专业审查意见： 该开题报告符合工程管理专业人才培养方案和本科毕业设计的相关要求，书写的规范性良好。符合要求，审核通过。 该开题报告符合工程管理专业人才培养方案和本科毕业设计的相关要求，书写的规范性良好。符合要求，审核通过。 文献综述较系统的阐述了我国目前建筑工程招投标文件编制的重要性，强调了在编制投标文件中招投标中的重要作用。文献综述与本课题联系较紧密，对本项目工程实际情况概括合理，内容较丰富，联系恰当，具有指引性作用，做到了文献综述对课题了解的作用，符合本科工程管理学科要求。 文献综述能够结合设计主题展开，对课题的研究现状和发展趋势的描述基本到位，参考文献的格式、篇数及内容均符合要求。课题研究的主要方向和内容明确，研究的方法及措施基本可行。

该生选择的课题具有一定深度，编制建筑工程的投标文件，内容较多，专业涉及面较广、有一定的难度，工作量较为饱满，符合工程管理专业毕业设计的要求。 课题的广度和深度适宜，毕业设计工作量合适。在保证按时按质量完成的情况下，应该能够顺利完成毕业设计的任务。

土木工程专业毕业设计开题报告范本.doc

土木工程专业毕业设计开题报告范本 导读：是指开题者对科研课题的一种文字说明材料，是随着现代科学研究活动计划性的增强和科研选题程序化管理的需要而产生的。下面小编为大家带来土木工程专业毕业设计范本，希望能帮助到大家。 土木工程专业毕业设计开题报告： 课题名称：建设工程项目现场施工安全管理问题研究—以绣川新城项目为例 一、课题的来源及意义 在近年来,随着经济的发展和城镇化不断加快，建筑行业已经成为我国的重要组成部分。现场施工安全管理一直是建筑中的大问题。国家一直贯彻“安全第一，预防为主”的安全管理方针，毕竟建筑业的危险性仅此于采矿业，可见建筑行业的危险性还是比较大的。但随着建筑市场数量不断地增加，工地上安全事故发生的次数越来越多，建筑施工安全管理不容乐观，这些安全事故将带来巨大的经济和财产损失，因此应该把安全生产放在第一位，安全生产关系到效益的最大化。造成这些事故的原因各种各样，主要就是工人的施工过程中安全意识较低和安全监督管理制度不完善，施工过程中缺乏防护措施。如何采取措施来减少安全事故的发生，一直是业内人士研究的问题，本文也结合实际案例谈了一些安全生产的措施。 二、国内外发展状况 通过很多国内外学者对施工过程中安全事故原因的研究，认为造成安全事故的根本原因是管理系统。相比之下，中国的管

理系统远远落后于发达国家。 在建筑施工过程中具有复杂性、露天高处作业多、劳动密集等特点，一直以来都是非常危险的工作。而我国建筑安全事故时常发生，伤亡的人数也是很多，并没有减少。反而每年呈现上升的趋势，给国家和人民带来巨大的经济和财产损失。而相比一些发达国家，随着这些国家建筑施工技术的提高和管理水平的提高，这些国家建筑安全事故也越来越少。根本是国家对待安全事故的态度不一样，重视程度和理念不同。我国贯彻的就是“安全第一，预防为主”的方针。而国外普遍采用的“安全零容忍”理念。我国在施工过程中的安全投入平均水平也远低于国外，中国在安全教育、劳动保护、文明施工和现场安全设施这几个方面的投入也是远低于国外的平均水平的。因此，在未来随着我国的法规不断的完善，每个企业不断完善自己的管理水平和施工技术来大大降低我国安全死亡事故率。让我们国家经济稳步健康可持续发展。 三、课题的研究目标、研究内容、研究方法及研究手段 (一)研究目标 为了将来我们能运用更好的施工技术和管理水平去安全施工，降低安全事故 率。减少事故对国家和家庭带来沉重的经济和财产损失。 (二)研究内容 根据本文的研究目标，的研究内容将主要分为三个部分。 第一部分是的第一章，也就是的绪论部分，主要涉及的研究背景、研究意义、究方法以及国内外和我国目前施工的现状等等。 第二部分是的第二章，第三章，第四章，阐述案例中的基

工业设计-毕业设计-开题报告

人生最大的幸福，是发现自己爱的人正好也爱着自己。 本科毕业设计(论文) 开题报告（含论文综述） 系 ( 院 )：艺术学院 所属教研室：工业设计 课题名称：订书机改良设计 专业(方向)：工业设计 班级：班学号： 学生： 指导教师：职称：讲师 开题日期： 2011年12月19日 一、毕业设计（论文）选题的目的和意义 [ ⑴课题名称；⑵有关的研究方向的历史、现状和发展情况分析；⑶前人在本选题研究领域中的工作成果简述] 毕业设计论文的题目： 订书机改良设计 毕业设计题目： 订书机改良设计 目前市场上办公文具产品中用于搜集整理文件资料的主要有订书机 胶水 文件夹等 这里我选择了其中相对比较常用的订书机作为我这个毕业设计的研究对象 首先是市场现状的分析 市场上的办公文具类产品普遍存在这样一个问题 在设计上仅仅满足于一定的使用功能 忽视产品的新功能 外观上同质化严重 缺少独特的品牌个性特征 难以打动消费者 而且假冒伪劣商品盛行

大大降低了品牌信誉 设计与企业活力紧密相关 设计左右着企业的形象 好的产品设计在无形中提升了企业的形象 使其在剧烈的市场竞争中树立突出的、新颖的、令公众可信任的 不断开拓发展的形象 设计不仅是设计产品 同样设计着企业文化的本身 当然也有一些比较好的订书机的设计 比如在结构上的改良 使用上了更省力的杠杆原理的设计；还有在装订的效果上融入了企业的文化将一个公司印章与订书机结合 每当装订的时候都会在文件上留下自己公司的符号 也有在订书机上添加一个日期的表盘 在我们装订文件资料的同时就会印上当时设定好的日期 方便文件按日期的分类 我们需要更多这样的好的设计 办公文具类产品在我们的日常工作中所扮演的是一个很重要的角色 不但关系影响到我们的工作效率 同时还会对我们的工作质量有一定的影响 一个好的办公工具甚至可以带来我们一天活力 以最好的状态投入到工作中 当然一个不适用的工具将会影响到一天的好心情 还有可能会拖累搞砸一些其他做得好的工作 通过调查分析我们得出办公文具类产品市场的现状和解决的方案 要设计一个什么样的产品才比较符合人们的审美 什么样的色彩和造型才会在办公室这个环境中显得比较协调 同时满足人们对功能上的需求 二、设计或研究主要内容和重点 预期达到的目标及拟解决的主要问题和技术关键 有何创新之处 （此部分为重点阐述内容） 主要内容： 通过前期的一些资料的搜集以及订书机市场现状调研的分析 我们了解到这样一个情况办公室是最常用的订书机的场所 所以我们需要一个在色彩造型上都和办公场所比较搭调的订书机 办公室大多都是以比较明亮的浅色为主 因为比较明亮的工作环境可以缓解人们比较紧张的工作压力 比较强烈的色彩会刺激人的神经 不利于缓和人们的情绪

免疫球蛋白重链结合蛋白和钙网蛋白在肝细胞癌中的表达与转移的关系

免疫球蛋白重链结合蛋白和钙网蛋白在肝细胞癌中的表达 与转移的关系 傅哲;叶健文;唐文超;王刚;唐红卫;闫冰;冯若 【期刊名称】《中华医学杂志》 【年(卷),期】2016(096)010 【摘要】Objective To investigate the relationship between the expression of immunoglobulin heavy chain binding proetin (Bip)and calreticulin (CRT) and metastasis in hepatocellular carcinoma.Methods Western blot and RT-qPCR were used to detect the expression of Bip and CRT in normal hepatic cells and hepatocellular carcinoma cells.43 cases of hepatocellular carcinoma tissues were collected from the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University between June 2014 and May 2015,Western blot and immunohistochemistry assay were used to detect the expression of Bip and CRT in hepatocellular carcinoma tissues,adjacent non-cancer tissues,5 cases adjacent liver hemangioma tissues and the clinical significance was also analyzed.Results The expression of Bip and CRT in hepatocellular carcinoma cells and hepatocellular carcinoma tissues was higher than normal hepatic cells and adjacent noncancer tissues and also adjacent liver hemangioma tissues.The positive rate of Bip and CRT were 86.0％ (37/43) and 65.1％(28/43) in 43 hepatocellular carcinoma tissues,which was significantly higher than those adjacent non-cancer tissues and adjacent liver

视觉毕业设计开题报告

视觉毕业设计开题报告 “视觉传达专业”是相关设计院校开设的课程名称，培养目的是掌握本专业所必需的基础理论和专业知识，能够运用专业设计的方法技能，独立从事包装、广告、平面设计等工作，具有一定的艺术修养和审美能力。下面，橙子为大家分享视觉毕业设计开习题汇报，希望对大家有所帮助! 习题目：涂鸦艺术的图式在视觉传达设计中的应用研究 一、选习题来源与研究背景 选习题来源 信步于欧洲城市街头，不管是在罗马、巴黎、柏林、马德里等各个文化都市，还是在街头的门窗、墙壁、抑或飞驰的地铁上，都充斥着一种兼具野趣与生命力的艺术形式--涂鸦。上个世纪末，嘻哈文化如泉涌般不断四散，涂鸦艺术这方丽水也开始缓缓流入亚洲大地，这一新生的艺术文化现象相继出现在日本、中国、泰国、新加坡等国家。 涂鸦艺术这种生长于草根、丰富于后现代主义风格上的艺术形式，在极短的时间内蓬勃壮大，可谓是影响到了当代生活的各式领域。 笔者在欧洲以及国内各大城市走访时，便被这种开放的艺术形式所震慑。涂鸦艺术家们将本身对世界的体验与感知，透过最质朴、原生的艺术形式表达出来，创造出一系列或惊艳怪诞、或趣意幼稚的绘画图式与艺术符号。涂鸦艺术纯真朴实、个性时尚的特质和自由的创1 / 12

作精神亦与视觉传达设计的内核相得益彰，它也开始悄无声息地渗透着视觉传达设计的各个方面，在颠覆与整合中逐步成为一种不可多得的视觉元素进入大众息息相关的生活。 从一方面而言，涂鸦艺术虽然看似处于“亚文化”之中，但却是真正来自民间的艺术，其大众性和视觉传达设计实质相同，反映出平民化的审美需求;从另一方面而言，涂鸦的绘画图式、艺术符号及其色彩均是视觉表达的形式之一，与视觉传达设计有种不尽相同但又密不可分的联络。翻阅相关文献资料不难发现，目前对涂鸦艺术的图式和视觉传达设计的研究中，部分是以一种陈旧和静态的观点去对待二者之间的关系。在审美“泛化”的时代，如何让视觉传达设计与个性化的涂鸦艺术结合产生新的形式?如何不单单停留在涂鸦艺术的表层，而是内外深度分析寻找与视觉传达设计之间的桥梁?在当代语境和新媒体科技下，涂鸦艺术介入设计领域后又会有怎样新的开展?带着这一系列的疑问与思考，笔者立足于涂鸦艺术的图式，开始了本文的研究。希望能够通过对这一领域的探索，不仅提升涂鸦艺术的社会影响，赋予它在新时代语境下的多维度价值;更为此艺术形式的多元和开展添砖加瓦，开启一种与视觉设计联结的跨界新形式，也为今后在此方向研究的人们提供一个新的参考，增添一份新的探索。 研究背景 涂鸦艺术在全球化时代背景下，俨然成为一种世界性现象。这种在争议中开展却又兴盛不绝的图画传统，起源于 60 年代美国城市底 2 / 12

免疫球蛋白Fc段受体Ig根据其重链抗原性的差异分为IgMIgGIgA...

三、免疫球蛋白Fc段受体 Ig根据其重链抗原性的差异分为IgM、IgG、IgA、IgD和IgE五类。各类Ig的不同功能主要与其结构有关。机体内许多细胞表面具有不同类Ig Fc的受体，通过Fc受体与Ig Fc的结合，参与Ig介导的生理功能或病理损伤过程。目前已鉴定明确属于CD抗原的Fc受体有FcγR、FcαR和FcεR。 (一) FcγR(CD64、CD32、 1. FcγR的结构和分布 FcγR可分为FcγRⅠ、FcγRⅡ和FcγRⅢ三类,它们的结构和分布有所不同。 (1) FcγRⅠ(CD64)：70kDa穿膜糖蛋白,属Ig超家族成员,胞膜外区有3个C2结构,基因染色体定位于1q23～24。识别CD64的代表性McAb有McAb22、McAb32.2、197和10.1等。 FcγRⅠ是高亲合力受体,Kd10-8～10-9M,主要与人的单体IgG1、IgG3以及小鼠IgG2a和IgG3结合。与人IgG4结合的亲合力明显降低,与IgG2则无结合能力。FcγRⅠ主要分布于单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等,但表达水平各不相同。FcγRⅠ位点数:15000～40000/每个单核细胞,＞50000/巨噬细胞,＜1000/新鲜中性粒细胞。IFN-γ可刺激单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞表达FγRⅠ水平增加5～10倍，G-CSF也有这种促进作用。 (2) FcγRⅡ(CD32)：40kDa穿膜糖蛋白，属于Ig超家族成员，胞膜外区有2个C2结构，基因染色体定位于1q23～24。识别CD32的代表性McAb有CIkM5、IV·3、KuFc79和41H16等。 FcγRⅡ与单体人IgG1，IgG3、IgG4结合为低亲合力,Kd5×10-7M。FcγRⅡ 表达于除红细胞外的其它血细胞，分子数目：20000～40000/每个细胞。根据DNA序列和功能不同，FcγRⅡ 可分为三种形式，不同形 式FcγRⅡ的差别主要在于胞浆区的结构不同。 (3)FcγRⅢ(CD16)：50～70kDa糖蛋白,属Ig超家族成员, 有2个C2结构,基因染色体位于1q23～24。识别CD16代表性的McAb有HUNK2、Leu11、3G8、Gran1和B73.1等。FcγRⅢ结合人IgG1、IgG3，为低亲和力受体。FcγRⅢ有FcγRⅢA 和FcγRⅢB两种异型：①FcγⅢA，穿膜结构，主要分布于巨噬细胞、NK细胞和嗜酸性粒细胞,巨噬细胞表达高水平FcγRⅢA，而单核细胞表达水平较低。FcγⅢA与二硫键连接的CD3ζ或FcεRⅠγ链双体相关，巨噬细胞上FcγRⅢ A 与CD3复合体γ链相关,NK/LGL上FcγRⅢA则与ζ链相关。 TGF-β促进培养的单核细胞表达FcγRⅢA。②FcγRⅢB,通过GPI“锚”在中性粒细胞表面, 每个人中性粒细胞表达10万～20万,血液中可溶性的FcγRⅢ主要来自这种形式, 中性粒细胞激活剂短时间处理后可明显降低FcγRⅢ B的表达水平，可能与通过激活内源性蛋白酶切除GPI连接分子有关。