生物分离工程复习题库
生物分离工程复习题
一、名词解释
1.凝聚:在电解质作用下,破坏细胞菌体与蛋白质等胶体粒子得分散状态,使胶体粒子聚集得过程。
2.分配系数:在一定温度、压力下,溶质分子分布在两个互不相溶得溶剂里,达到平衡后,它在两相得浓度为一常数
叫分配系数。
3.絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大得絮凝团得过程
4.过滤:就是在某一支撑物上放过滤介质,注入含固体颗粒得溶液,使液体通过,固体颗粒留下,就是固液分离得常
用方法之一。
5.萃取过程:利用在两个互不相溶得液相中各种组分(包括目得产物)溶解度得不同,从而达到分离得目得
6.吸附:就是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附得能力,使其富集在吸附剂表面得过程。
7.反渗析:当外加压力大于渗透压时,水将从溶液一侧向纯水一侧移动,此种渗透称之为反渗透。
8.离心沉降:利用悬浮液或乳浊液中密度不同得组分在离心力场中迅速沉降分层,实现固液分离
9.离心过滤:使悬浮液在离心力场作用下产生得离心力压力,作用在过滤介质上,使液体通过过滤介质成为滤液,
而固体颗粒被截留在过滤介质表面,从而实现固液分离,就是离心与过滤单元操作得集成,分离效率更高
10.离子交换:利用离子交换树脂作为吸附剂,将溶液中得待分离组分,依据其电荷差异,依靠库仑力吸附在树脂上,
然后利用合适得洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来,达到分离得目得。
11.固相析出技术:利用沉析剂(precipitator)使所需提取得生化物质或杂质在溶液中得溶解度降低而形成无定形
固体沉淀得过程。
12.助滤剂:助滤剂就是一种具有特殊性能得细粉或纤维,它能使某些难以过滤得物料变得容易过滤
13.色谱技术:就是一组相关分离方法得总称,色谱柱得一般结构含有固定相(多孔介质)与流动相,根据物质在两相
间得分配行为不同(由于亲与力差异),经过多次分配(吸附解吸吸附解吸…),达到分离得目得。
14.有机溶剂沉淀:在含有溶质得水溶液中加入一定量亲水得有机溶剂,降低溶质得溶解度,使其沉淀析出。
15.等电点沉淀:调节体系pH值,使两性电解质得溶解度下降,析出得操作称为等电点沉淀。
16.膜分离:利用膜得选择性(孔径大小),以膜得两侧存在得能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜得迁移率
不同而实现分离得一种技术。
17.化学渗透破壁法:某些化学试剂,如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等,可以改变细胞壁
或细胞膜得通透性,从而使胞内物质有选择地渗透出来。
18.超临界流体:超临界流体就是状态超过气液共存时得最高压力与最高温度下物质特有得点——临界点后得流
体。
19.反渗透:在只有溶剂能通过得渗透膜得两侧,形成大于渗透压得压力差,就可以使溶剂发生倒流,使溶液达到浓
缩得效果,这种操作成为反渗透。
20.树脂工作交换容量:单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附得一价离子得毫摩尔数称为树脂交换容量,在
充填柱上操作达到漏出点时,树脂所吸附得量称为树脂工作交换容量。
21.色谱阻滞因数:溶质在色谱柱(纸、板)中得移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数,以Rf表示。
22.膜得浓差极化:就是指但溶剂透过膜,而溶质留在膜上,因而使膜面浓度增大,并高于主体中浓度。
23.超滤:凡就是能截留相对分子量在500以上得高分子膜分离过程称为超滤,它主要就是用于从溶剂或小分子溶质
中将大分子筛分出来。
24.生物分离技术:就是指从动植物与微生物得有机体或器官、生物工程产物(发酵液、培养液)及其生物化学产品
中提取、分离、纯化有用物质得技术过程。
25.物理萃取:即溶质根据相似相溶得原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。
26.化学萃取:则利用脂溶性萃取剂与溶质之间得化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相得分配。
27.盐析:就是利用不同物质在高浓度得盐溶液中溶解度得差异,向溶液中加入一定量得中性盐,使原溶解得物质沉
淀析出得分离技术。
28.有机聚合物沉析:利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出得分离技术称为有机聚合物沉析。
29.离子交换平衡:当正反应、逆反应速率相等时,溶液中各种离子得浓度不再变化而达平衡状态,即称为离子交换
平衡。
30.功能基团:离子交换树脂中与载体以共价键联结得不能移动得活性基团,又称功能基团
31.平衡离子:离子交换树脂中与功能基团以离子键联结得可移动得平衡离子,亦称活性离子。
32.树脂得再生:就就是让使用过得树脂重新获得使用性能得处理过程,树脂得再生反应就是交换吸附得逆反应。
33.层析分离:就是一种物理得分离方法,利用多组分混合物中各组分物理化学性质得差别,使各组分以不同得程度
分布在两个相中。
34.流动相:在层析过程中,推动固定相上待分离得物质朝着一个方向移动得液体、气体或租临界体等,都称为流动
相。
35.正相色谱:就是指固定相得极性高于流动相得极性,因此,在这种层析过程中非极性分子或极性小得分子比极性
大得分子移动得速度快,先从柱中流出来。
36.反相色谱:就是指固定相得极性低于流动相得极性,在这种层析过程中,极性大得分子比极性小得分子移动得速
度快而先从柱中流出。
37.吸附层析:就是以吸附剂为固定相,根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目得得一种层析技术。
38.分配层析:就是根据在一个有两相同时存在得溶剂系统中,不同物质得分配系数不同而达到分离目得得一种层
析技术。
39.凝胶过滤:层析就是以具有网状结构得凝胶颗粒作为固定相,根据物质得分子大小进行分离得一种层析技术。
40.离子交换层析:就是以离子交换剂为固定相,根据物质得带电性质不同而进行分离得一种层析技术。
41.高效液相色谱:就是指选用颗粒极细得高效耐压新型固定相,借助高压泵来输送流动相,并配有实时在线检测器,
实现色谱分离过程全部自动化得液相色谱法。
42.亲与层析:就是利用生物活性物质之间得专一亲与吸附作用而进行得层析方法。就是近年来发展得纯化酶与其
她高分子得一种特殊得层析技术。
43.疏水层析:就是利用表面偶联弱疏水性基团(疏水性配基)得疏水性吸附剂为固定相,根据蛋白质与疏水性吸附
剂之间得弱疏水性相互作用得差别进行分离纯化得层析技术。
44.介电常数:表示介质对带有相反电荷得微粒之间得静电引力与真空对比减弱得倍数。
45.过滤介质:就是指能使固一液混合料液得以分离得某一介面,通常指滤布或膜过滤中所用得膜。
46.等电点:就是两性物质在其质点得净电荷为零时介质得pH值,溶质净电荷为零,分子间排斥电位降低,吸引力增
大,能相互聚集起来,沉淀析出,此时溶质得溶解度最低。
47.有机酸沉析:含氮有机酸(如苦味酸与鞣酸等)能够与有机分子得碱性功能团形成复合物而沉淀析出。
48.选择变性沉析:就是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同,而有选择地使之变
性沉析,以达到目得物与杂蛋白分离得技术,称为选择变性沉析。
二、选择
1.HPLC就是哪种色谱得简称( C )。
A.离子交换色谱 B、气相色谱 C、高效液相色谱 D、凝胶色谱
2.针对配基得生物学特异性得蛋白质分离方法就是( C )。
A、凝胶过滤
B、离子交换层析
C、亲与层析
D、纸层析
3.盐析法沉淀蛋白质得原理就是( B )
A、降低蛋白质溶液得介电常数
B、中与电荷,破坏水膜
C、与蛋白质结合成不溶性蛋白
D、调节蛋白质溶液pH到等电点
4.从组织中提取酶时,最理想得结果就是( C )
A、蛋白产量最高
B、酶活力单位数值很大
C、比活力最高
D、Km最小
5.适合于亲脂性物质得分离得吸附剂就是( B )。
A.活性炭 B、氧化铝 C、硅胶 D、磷酸钙
6.下列哪项酶得特性对利用酶作为亲与层析固定相得分析工具就是必需得？( B )
A、该酶得活力高
B、、对底物有高度特异亲合性
C、酶能被抑制剂抑制
D、最适温度高
E、酶具有多个亚基
7.用于蛋白质分离过程中得脱盐与更换缓冲液得色谱就是( C )
A.离子交换色谱 B、亲与色谱 C、凝胶过滤色谱 D、反相色谱
45.适合小量细胞破碎得方法就是( B )
高压匀浆法 B、超声破碎法 C、高速珠磨法 D、高压挤压法
8.盐析法沉淀蛋白质得原理就是( B )
A、降低蛋白质溶液得介电常数
B、中与电荷,破坏水膜
C、与蛋白质结合成不溶性蛋白
D、调节蛋白质溶液pH到等电点
9.蛋白质分子量得测定可采用( C )方法。
A.离子交换层析 B、亲与层析 C、凝胶层析 D、聚酰胺层析
10.基因工程药物分离纯化过程中,细胞收集常采用得方法( C )
A.盐析 B、超声波 C、膜过滤 D、层析
11.氨基酸得结晶纯化就是根据氨基酸得( A )性质。
A、溶解度与等电点
B、分子量
C、酸碱性
D、生产方式
12.离子交换剂不适用于提取( D )物质。
A.抗生素 B、氨基酸 C、有机酸 D、蛋白质
13.人血清清蛋白得等电点为4、64,在PH为7得溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)
A :正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。
14.蛋白质具有两性性质主要原因就是( B )
A:蛋白质分子有一个羧基与一个氨基;B:蛋白质分子有多个羧基与氨基;C:蛋白质分子有苯环与羟基;D:以上都对15.使蛋白质盐析可加入试剂( D )
A:氯化钠;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸铵
16.凝胶色谱分离得依据就是( B )。
A、固定相对各物质得吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相与固定相中得分配系数不同
D、各物质与专一分子得亲与力不同
17.非对称膜得支撑层( C )。
A、与分离层材料不同
B、影响膜得分离性能
C、只起支撑作用
D、与分离层孔径相同
18.下列哪一项就是强酸性阳离子交换树脂得活性交换基团( A )
A 磺酸基团(SO3 H)
B 羧基COOH
C 酚羟基C6H5OH
D 氧乙酸基OCH2COOH
19.依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲与能力不同。树脂对下列离子亲与力排列顺序正确得有( A )。
A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+
B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+
C、Na+﹥Rb+﹥Cs+
D、Rb+﹥Cs+﹥Na+
20.乳化液膜得制备中强烈搅拌( C )。
A、就是为了让浓缩分离充分
B、应用在被萃取相与W/O得混合中
C、使内相得尺寸变小
D、应用在膜相与萃取相得乳化中
21.结晶过程中,溶质过饱与度大小( A )。
A、不仅会影响晶核得形成速度,而且会影响晶体得长大速度
B、只会影响晶核得形成速度,但不会影响晶体得长大速度
C、不会影响晶核得形成速度,但会影响晶体得长大速度
D、不会影响晶核得形成速度,而且不会影响晶体得长大速度
22.如果要将复杂原料中分子量大于5000得物质与5000分子量以下得物质分开选用( D )。
A、Sephadex G200
B、Sephadex G150
C、Sephadex G100
D、Sephadex G50
23.在蛋白质初步提取得过程中,不能使用得方法( C )。
A、双水相萃取
B、超临界流体萃取
C、有机溶剂萃取
D、反胶团萃取
24.在液膜分离得操作过程中,( B )主要起到稳定液膜得作用。
A、载体
B、表面活性剂
C、增强剂
D、膜溶剂
25.离子交换法就是应用离子交换剂作为吸附剂,通过( A )将溶液中带相反电荷得物质吸附在离子交换剂上。
A、静电作用
B、疏水作用
C、氢键作用
D、范德华力
26.真空转鼓过滤机工作一个循环经过( A )。
A、过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区
B、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区
C、过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区
D、过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区
27.丝状(团状)真菌适合采用( A )破碎。
A、珠磨法
B、高压匀浆法
C、A与B联合
D、A与B均不行
28.用来提取产物得溶剂称( C )。
A、料液
B、萃取液
C、萃取剂
D、萃余液。
29.阴离子交换剂( C )。
A、可交换得为阴、阳离子
B、可交换得为蛋白质
C、可交换得为阴离子
D、可交换得为阳离子
30.分配层析中得载体( C )。
A、对分离有影响
B、就是固定相
C、能吸附溶剂构成固定相
D、就是流动相
31.凝胶色谱分离得依据就是( B )。
A、固定相对各物质得吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相与固定相中得分配系数不同
D、各物质与专一分子得亲与力不同
32.洗脱体积就是( C )。
A、凝胶颗粒之间空隙得总体积
B、溶质进入凝胶内部得体积
C、与该溶质保留时间相对应得流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用得流动相体积
33.工业上强酸型与强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀,一般先将其转变为( B )。
A、钠型与磺酸型
B、钠型与氯型
C、铵型与磺酸型
D、铵型与氯型
34.吸附色谱分离得依据就是( A )。
A、固定相对各物质得吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相与固定相得分配系数不同
D、各物质与专一分子得亲与力不同
35.依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲与能力不同。树脂对下列离子亲与力排列顺序正确得有( A )。
A、Fe3+>Ca2+>Na+
B、Na+ >Ca2+> Fe3+
C、硫酸根>柠檬酸根>硝酸根
D、硝酸根>硫酸根>柠檬酸根
36.乳化液膜得制备中强烈搅拌( B )。
A、就是为了让浓缩分离充分
B、应用在被萃取相与W/O得混合中
C、使内水相得尺寸变小
D、应用在膜相与反萃取相得乳化中
37.下面哪一种就是根据酶分子专一性结合得纯化方法( A )。
A、亲与层析
B、凝胶层析
C、离子交换层析
D、盐析
38.纯化酶时,酶纯度得主要指标就是:( D )
A 、蛋白质浓度 B、酶量 C 、酶得总活力 D、酶得比活力
39.盐析法纯化酶类就是根据( B )进行纯化。
A、根据酶分子电荷性质得纯化方法
B、调节酶溶解度得方法
C、根据酶分子大小、形状不同得纯化方法
D、根据酶分子专一性结合得纯化方法
40.分子筛层析纯化酶就是根据( C )进行纯化。
A、根据酶分子电荷性质得纯化方法
B、调节酶溶解度得方法
C、根据酶分子大小、形状不同得纯化方法
D、根据酶分子专一性结合得纯化方法
41.以下哪项不就是在重力场中,颗粒在静止得流体中降落时受到得力( B )
A、重力
B、压力
C、浮力
D、阻力
42.以下哪项不就是颗粒在离心力场中受到得力( C )
A、离心力
B、向心力
C、重力
D、阻力
43.颗粒与流体得密度差越小,颗粒得沉降速度( A )
A、越小
B、越大
C、不变
D、无法确定
44.工业上常用得过滤介质不包括( D )
A、织物介质
B、堆积介质
C、多孔固体介质
D、真空介质
45.下列物质属于絮凝剂得有( A )。
A、明矾
B、石灰
C、聚丙烯类
D、硫酸亚铁
46.关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律,下列( A )项就是正确得叙述。
A、氢键形成就是能量释放得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
B、氢键形成就是能量吸收得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
C、氢键形成就是能量释放得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
D、氢键形成就是能量吸收得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
47.关于精馏回流比控制,对于一定得分离任务,以下正确得两项就是( A )
A、若回流比变大,则精馏能耗增大;
B、若回流比变大,则精馏能耗减小;
C、若回流比变大,则所需理论塔板数变大;
D、若回流比变小,则所需理论塔板数变小。
48.结晶过程中,溶质过饱与度大小( A )
A、不仅会影响晶核得形成速度,而且会影响晶体得长大速度
B、只会影响晶核得形成速度,但不会影响晶体得长大速度
C、不会影响晶核得形成速度,但会影响晶体得长大速度
D、不会影响晶核得形成速度,而且不会影响晶体得长大速度
49.下列哪项不就是蛋白质得浓度测定得方法( D )。
A、凯氏定氮法
B、双缩脲法
C、福林酚法
D、核磁共振
50.供生产生物药物得生物资源不包括( D )
A、动物 B植物 C、微生物 D、矿物质
51.发酵液得预处理方法不包括( C )
A、加热 B絮凝 C、离心 D、调pH
52.其她条件均相同时,优先选用那种固液分离手段( B )
A、离心分离 B过滤 C、沉降 D、超滤
53.那种细胞破碎方法适用工业生产( A )
A、高压匀浆 B超声波破碎 C、渗透压冲击法 D、酶解法
54.高压匀浆法破碎细胞,不适用于( D )
A、酵母菌 B大肠杆菌 C、巨大芽孢杆菌 D、青霉
55.关于萃取下列说法正确得就是( C )
A、酸性物质在酸性条件下萃取 B碱性物质在碱性条件下萃取
C、两性电解质在等电点时进行提取
D、两性电解质偏离等电点时进行提取
56.液一液萃取时常发生乳化作用,如何避免( D )
A、剧烈搅拌 B低温 C、静止 D、加热
57.在葡聚糖与聚乙二醇形成得双水相体系中,目标蛋白质存在于( A )
A、上相 B下相 C、葡聚糖相 D、以上都有可能
58.当两种高聚物水溶液相互混合时,二者之间得相互作用不可能产生(D)
A、互不相溶,形成两个水相 B两种高聚物都分配于一相,另一相几乎全部为溶剂水
C、完全互溶,形成均相得高聚物水溶液
D、形成沉淀
59.超临界流体萃取中,如何降低溶质得溶解度达到分离得目得( C )
A、降温 B升高压力 C、升温 D、加入夹带剂
60.下列关于固相析出说法正确得就是( B )
A、沉淀与晶体会同时生成 B析出速度慢产生得就是结晶
C、与析出速度无关
D、析出速度慢产生得就是沉淀
61.盐析操作中,硫酸铵在什么样得情况下不能使用( B )
A、酸性条件 B碱性条件 C、中性条件 D、与溶液酸碱度无关
62.有机溶剂沉淀法中可使用得有机溶剂为( D )
A、乙酸乙酯 B正丁醇 C、苯 D、丙酮
63.有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质( B )
A、介电常数大 B介电常数小 C、中与电荷 D、与蛋白质相互反应
64.蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀,蛋白质得浓度在( A )范围内适合。
A、 0、5％～2％ B1％～3％ C、 2％～4％ D、 3％～5％
65.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH会( A )
A、升高 B降低 C、不变 D、以上均有可能
66.若两性物质结合了较多阴离子,则等电点pH会( B )
A、升高 B降低 C、不变 D、以上均有可能
67.生物活性物质与金属离子形成难溶性得复合物沉析,然后适用( C )去除金属离子。
A、 SDS B CTAB C、 EDTA D、 CPC
68.那一种膜孔径最小( C )
A、微滤 B超滤 C、反渗透 D、纳米过滤
69.超滤技术常被用作( C )
A、小分子物质得脱盐与浓缩 B小分子物质得分级分离
C、小分子物质得纯化
D、固液分离
70.微孔膜过滤不能用来( D )
A、酶活力测定 B mRNA得测定及纯化 C、蛋白质含量测定 D、分离离子与小分子
71.吸附剂与吸附质之间作用力就是通过( A )产生得吸附称为物理吸附。
A、范德华力 B库伦力 C、静电引力 D、相互结合
72.洗脱吸附剂上附着得溶质,洗脱液得极性强弱关系为( A )
A、石油醚﹤环己烷﹤四氯化碳 B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳
C、乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿
D、吡啶﹤甲醇﹤水
73.那一种活性碳得吸附容量最小( B )
A、粉末活性碳 B锦纶活性碳 C、颗粒活性碳
74.酚型离子交换树脂则应在( B )得溶液中才能进行反应
A、 pH＞7 B pH＞9 C、 pH﹤9 D、 pH﹤7
75.羧酸型离子交换树脂必须在( C )得溶液中才有交换能力
A、 pH＞5 B pH﹤7 C、 pH＞7 D、 pH﹤5
76.离子交换树脂适用( B )进行溶胀
A、水 B乙醇 C、氢氧化钠 D、盐酸
77.下列关于离子交换层析洗脱说法错误得就是( D )
A、对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂
B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂
C、强碱性树脂用盐酸甲醇、醋酸等作洗脱剂
D、若被交换得物质用酸、碱洗不下来,应使用更强得酸、碱
78.阳树脂在软化中易受Fe3+污染,可通过( C )清除铁化合物。
A、水 B乙醇 C、加抑制剂得高浓度盐酸 D、高浓度盐溶液
79.下列关于正相色谱与反相色谱说法正确得就是( C )
A、正相色谱就是指固定相得极性低于流动相得极性
B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小得分子比极性大得分子移动得速度慢
C、反相色谱就是指固定相得极性低于流动相得极性
D、反相色谱层析过程中,极性大得分子比极性小得分子移动得速度慢
80.一般来说,可使用正相色谱分离( B )
A、酚 B带电离子 C、醇 D、有机酸
81.分子筛层析指得就是( C )
A、吸附层析 B分配层析 C、凝胶过滤 D、亲与层析
82.常用得紫外线波长有两种( B )
A、 256nm与365nm B254nm与365nm C、 254nm与367nm D、 256nm与367nm
83.以氧化铝与硅胶为介质进行层析,由于对极性稍大得成分其Rf( B )
A、大 B小 C、中等 D、不一定
84.对于吸附得强弱描述错误得就是( A )
A、吸附现象与两相界面张力得降低成反比
B某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中得溶解度成正比
C、极性吸附剂容易吸附极性物质
D、非极性吸附剂容易吸附非极性物质
85.进行梯度洗脱,若用50g吸附剂,一般每份洗脱液量常为( C )
A、 20rnL B100rnL C、 50rnL D、 90rnL
86.离子交换用得层析柱直径与柱长比一般为( B )之间
A、 1:101:20 B1:101:50 C、 1:101:30 D、 1:201:50
87.离子交换层析得上样时,上样量一般为柱床体积得( C )为宜。
A、 2％5％ B1％2％ C、 1％5％ D、 3％7％
88.通过改变pH值从而使与离子交换剂结合得各个组分被洗脱下来,可使用( A )
A、阳离子交换剂一般就是pH值从低到高洗脱 B阳离子交换剂一般就是pH值从高到低洗脱 C、阴离子交换剂一般就是pH值从低到高 D、以上都不对
89.那一种凝胶得孔径最小( A )
A、 Sephadex G25 B Sephadex G50 C、 Sephadex G100 D、 Sephadex G200
90.那一种凝胶得吸水量最大( D )
A、 Sephadex G25 B Sephadex G50 C、 Sephadex G100 D、 Sephadex G200
91.葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀( C )
A、甲醇 B乙醇 C、缓冲液 D、乙酸乙酯
92.疏水亲与吸附层析通常在( D )得条件下进行
A、酸性 B碱性 C、中 D、高浓度盐溶液
93.当硅胶吸水量在( B )以上时,就失去其吸附作用
A、 13% B17% C、 10% D、 15%
94.气相色谱得载气不能用( C )
A、氢气 B氦气 C、氧气 D、氮气
95.关于电泳分离中迁移率描述正确得就是( A )
A、带电分子所带净电荷成正比 B分子得大小成正比
C、缓冲液得黏度成正比
D、以上都不对
96.在什么情况下得到粗大而有规则得晶体( A )
A、晶体生长速度大大超过晶核生成速度 B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度
C、晶体生长速度等于晶核生成速度
D、以上都不对
97.恒速干燥阶段与降速干燥阶段,那一阶段先发生( A )
A、恒速干燥阶段 B降速干燥阶段 C、同时发生 D、只有一种会发生
98.珠磨机破碎细胞,适用于( D )
A、酵母菌 B大肠杆菌 C、巨大芽孢杆菌 D、青霉
99.为加快过滤效果通常使用( C )
A、电解质 B高分子聚合物 C、惰性助滤剂 D、活性助滤剂
100.不能用于固液分离得手段为( C )
A、离心 B过滤 C、超滤 D、双水相萃取
101.最常用得干燥方法有( D )
A、常压干燥
B、减压干燥
C、喷雾干燥
D、以上都就是
102.下列哪个不属于高度纯化:( B )
A、层析
B、吸附法
C、亲与层析
D、凝胶层析
103.酶提取液中,除所需酶外,还含有大量得杂蛋白、多糖、脂类与核酸等,为了进一步纯化,可用( E )方法除去杂质。
A、调pH值与加热沉淀法
B、蛋白质表面变性法
C、降解或沉淀核酸法
D、利用结合底物保护法除去杂蛋白
E、以上都可以
104.物理萃取即溶质根据( B )得原理进行分离得
A、吸附
B、相似相溶 C分子筛 D 亲与
105.纳米过滤得滤膜孔径( D )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2n m
D < 1nm
106.适合小量细胞破碎得方法就是( B )
A、高压匀浆法
B、超声破碎法
C、高速珠磨法
D、高压挤压法
107.人血清清蛋白得等电点为4、64,在PH为7得溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)
A :正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。
108.单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中,加入1%得单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀,属于( D )沉析原理。
A盐析 B有机溶剂沉析 C等电点沉析 D有机酸沉析
109.关于疏水柱层析得操作错误( D )
A疏水层析柱装柱完毕后,通常要用含有高盐浓度得缓冲液进行平衡
B疏水层析就是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间得弱疏水性相互作用得差别进行分离纯化得层析技术
C洗脱后得层析柱再生处理,可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素得缓冲溶液洗涤,然后用平衡缓冲液平衡
D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小
110.结晶法对溶剂选择得原则就是( C )
A、对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小
B、对有效成分溶解度小,对杂质溶解度大
C、对有效成分热时溶解度大冷时溶解度小,对杂质冷热都溶或都不溶
D、对有效成分冷热时都溶,对杂质则不溶
E、对杂质热时溶解度大,冷时溶解度小
111.适用于分离糖、苷等得SephadexG得分离原理就是( C )
A、吸附
B、分配比
C、分子大小
D、离子交换
E、水溶性大小
112.关于分配柱层析得基本操作错误( D )。
A装柱分干法与湿法两种
B分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱与
C用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端就是平盘得棒把硅藻压紧压平
D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大得成分,或极性很相似得成分。
113.在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用、 ( D )
A. 紫外检测器
B.荧光检测器
C.蒸发光散射检测器
D.示差折光检测器
114.网格高聚物吸附剂吸附得弱酸性物质, 一般用下列哪种溶液洗脱。 ( D )
A、水
B、高盐
C、低pH
D、高pH
115.下列哪项不属于发酵液得预处理: ( D )
A、加热
B、调pH
C、絮凝与凝聚
D、层析
116.下列哪个不属于初步纯化:( C )
A 、沉淀法 B、吸附法 C、离子交换层析 D、萃取法
117.颗粒与流体得密度差越小,颗粒得沉降速度( A )
A、越小
B、越大
C、不变
D、无法确定
118.盐析法沉淀蛋白质得原理就是( B )
A、降低蛋白质溶液得介电常数
B、中与电荷,破坏水膜
C、与蛋白质结合成不溶性蛋白
D、调节蛋白质溶液pH到等电点
119.高效液相色谱仪得种类很多,但就是无论何种高效液相色谱仪,基本上由( D )组成。
A 高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分
B进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分
C高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分
D高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分
120.影响电泳分离得主要因素( B )
A 光照
B 待分离生物大分子得性质
C 湿度
D 电泳时间
121.超滤膜通常不以其孔径大小作为指标,而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值”就是指阻留率达( B )得最小被截留物质得分子量。
A 80%以上
B 90%以上
C 70%以上
D 95%以上
122.在凝胶过滤(分离范围就是5000~400000)中,下列哪种蛋白质最先被洗脱下来( B )
A.细胞色素C(13370)
B.肌球蛋白(400000)
C.过氧化氢酶(247500)
D.血清清蛋白(68500)
E.肌红蛋白(16900)
123.“类似物容易吸附类似物”得原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质( B )
A.极性溶剂
B.非极性溶剂
C.水
D.溶剂
124.能够除去发酵液中钙、镁、铁离子得方法就是 ( C )
A. 过滤
B. 萃取
C. 离子交换
D. 蒸馏
125.从四环素发酵液中去除铁离子,可用 ( B )
A. 草酸酸化
B. 加黄血盐
C. 加硫酸锌
D. 氨水碱化
126.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度 ( C )
A、增大
B、减小
C、先增大,后减小
D、先减小,后增大
127.关于大孔树脂洗脱条件得说法,错误得就是: ( A )
A、最常用得就是以高级醇、酮或其水溶液解吸。
B、对弱酸性物质可用碱来解吸。
C、对弱碱性物质可用酸来解吸。
D、如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时,则常常仅用水洗就能解吸下来。
128.为了进一步检查凝胶柱得质量,通常用一种大分子得有色物质溶液过柱,常见得检查物质为蓝色葡聚糖,下面不属于它得作用得就是 (C)
A、观察柱床有无沟流
B、观察色带就是否平整
C、测量流速
D、测量层析柱得外水体积
129.亲与层析得洗脱过程中,在流动相中减去配基得洗脱方法称作 ( D )
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、正洗脱
D、负洗脱
130.下列细胞破碎得方法中,哪个方法属于非机械破碎法( A )
A、化学法
B、高压匀浆
C、超声波破碎
D、高速珠磨
131.下列哪一项不就是常用得滤布材料 ( C )
A、法兰绒
B、帆布
C、滤纸
D、斜纹布
132.超滤膜截留得颗粒直径为( B )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
133.阴树脂易受有机物污染,污染后,可用( B )处理
A柠檬酸 B 10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液 C 氨基三乙酸 D EDTA
134.关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律,下列( A )项就是正确得叙述。
A、氢键形成就是能量释放得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
B、氢键形成就是能量吸收得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
C、氢键形成就是能量释放得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
D、氢键形成就是能量吸收得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
135.HPLC就是哪种色谱得简称( C )。
A.离子交换色谱 B、气相色谱 C、高效液相色谱 D、凝胶色谱
136.洗脱体积就是( C )。
A、凝胶颗粒之间空隙得总体积
B、溶质进入凝胶内部得体积
C、与该溶质保留时间相对应得流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用得流动相体积
137.分子筛层析纯化酶就是根据( C )进行纯化。
A、根据酶分子电荷性质得纯化方法
B、调节酶溶解度得方法
C、根据酶分子大小、形状不同得纯化方法
D、根据酶分子专一性结合得纯化方法
138.用于蛋白质分离过程中得脱盐与更换缓冲液得色谱就是( C )
A.离子交换色谱
B.亲与色谱
C.凝胶过滤色谱
D.反相色谱
139.用活性炭色谱分离糖类化合物时,所选用得洗脱剂顺序为:( D )
A、先用乙醇洗脱,然后再用水洗脱
B、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱
C、先用乙醇洗脱,再用其她有机溶剂洗脱
D、先用水洗脱,然后再用不同浓度乙醇洗脱
140.微滤膜所截留得颗粒直径为( A )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
141.下列哪一项不就是阳离子交换树脂 ( D )
A 氢型
B 钠型
C 铵型
D 羟型
142.适合于亲脂性物质得分离得吸附剂就是( B )。
A.活性炭 B、氧化铝 C、硅胶 D、磷酸钙
143.气相色谱柱主要有( C )。
A填充柱 B毛细管柱 C A或B D A或B及其她
144.关于分配柱层析得基本操作错误( D )。
A装柱分干法与湿法两种
B分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱与
C用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端就是平盘得棒把硅藻压紧压平
D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大得成分,或极性很相似得成分。
145.按分离原理不同,电泳可分为( A )
A 区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳
B 纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
C 区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳
D 等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
146.在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大得交换容量 ( C )
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
147.超临界流体萃取法适用于提取( B )
A、极性大得成分
B、极性小得成分
C、离子型化合物
D、能气化得成分
E、亲水性成分
148.分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目得物浓度稀,因而易采用 ( A )
A、分离量大分辨率低得方法
B、分离量小分辨率低得方法
C、分离量小分辨率高得方法
D、各种方法都试验一下,根据试验结果确定
149.蛋白质类物质得分离纯化往往就是多步骤得,其前期处理手段多采用下列哪类得方法。( B )
A.分辨率高 B、负载量大 C、操作简便 D、价廉
150.亲与层析得洗脱过程中, 在流动相中减去配基得洗脱方法称作 ( D )
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、正洗脱
D、负洗脱
151.将四环素粗品溶于pH2得水中,用氨水调pH4、5—4、6,28－30℃保温,即有四环素沉淀结晶析出。此沉淀方法称为 ( B )
A、有机溶剂结晶法
B、等电点法
C、透析结晶法
D、盐析结晶法
152.针对配基得生物学特异性得蛋白质分离方法就是( C )。
A、凝胶过滤
B、离子交换层析
C、亲与层析
D、纸层析
153.下列哪项不就是常用得树脂再生剂( D )
A 1％～10％HCl
B H2S04、
C NaCl、
D 蒸馏水
154.反渗透膜得孔径小于( C )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
155.亲与层析得洗脱过程中,在流动相中加入配基得洗脱方法称作 ( C )
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、竞争洗脱
D、非竞争洗脱
156.凝胶层析中,有时溶质得Kd>1,其原因就是 ( B )
A、凝胶排斥
B、凝胶吸附
C、柱床过长
D、流速过低
157.活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？ ( A )
A、水
B、甲醇
C、乙醇
D、三氯甲烷
158.将配基与可溶性得载体偶联后形成载体配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为 ( A )
A、亲与沉淀
B、聚合物沉淀
C、金属离子沉淀
D、盐析沉淀
159.在一定得pH与温度下改变离子强度(盐浓度)进行盐析,称作 ( A )
A、KS盐析法
B、β盐析法
C、重复盐析法
D、分部盐析法
160.在超滤过程中,主要得推动力就是 ( C )
A、浓度差
B、电势差
C、压力
D、重力
161.下面关于亲与层析载体得说法错误得就是 ( B )
A、载体必须能充分功能化。
B、载体必须有较好得理化稳定性与生物亲与性,尽量减少非专一性吸附。
C、载体必须具有高度得水不溶性与亲水性。
D、理想得亲与层析载体外观上应为大小均匀得刚性小球。
162.在选用凝胶层析柱时,为了提高分辨率,宜选用得层析柱就是 ( A )
A、粗且长得
B、粗且短得
C、细且长得
D、细且短得
163.如果用大肠杆菌作为宿主细胞,蛋白表达部位为周质,下面哪种细胞破碎得方
法最佳？ ( C )
A、匀浆法
B、超声波法
C、渗透压休克法
D、冻融法
164.盐析法与有机溶剂沉淀法比较, 其优点就是 ( B )
A.分辨率高
B.变性作用小
C.杂质易除
D.沉淀易分离
165.在萃取液用量相同得条件下, 下列哪种萃取方式得理论收率最高 ( C )
A、单级萃取
B、三级错流萃取
C、三级逆流萃取
D、二级逆流萃取
166.磺酸型阳离子交换树脂可用于分离( E )
A、强心苷
B、有机酸
C、醌类
D、苯丙素
E、生物碱
167.不能用于糖类提取后得分离纯化得方法就是( B )
A、活性炭柱色谱法
B、酸碱溶剂法
C、凝胶色谱法
D、分级沉淀法
E、大孔树脂色谱法
168.用大孔树脂分离苷类常用得洗脱剂就是( B )
A、水
B、含水醇
C、正丁醇
D、乙醚
E、氯仿
三、判断题
1.助滤剂就是一种可压缩得多孔微粒。(×)
2.通过加入某些反应剂就是发酵液进行预处理得方法之一。(√)
3.高级醇能被细胞壁中得类脂吸收,使胞壁膜溶胀,导致细胞破碎。(×)
4.极性溶剂与非极性溶剂互溶。(×)
5.溶剂萃取中得乳化现象一定存在。(×)
6.临界压力就是液化气体所需得压力。(×)
7.进料得温度与pH会影响膜得寿命。(√)
8.液膜能把两个互溶但组成不同得溶液隔开。(√)
9.流动相为气体则称为气相色谱。(√)
10.用冷溶剂溶出固体材料中得物质得方法又称浸煮。(× )
11.用热溶剂溶出固体材料中得物质得方法又称浸渍。(× )
12.在生物制剂制备中,常用得缓冲系统有磷酸盐缓冲液;碳酸盐缓冲液;盐酸盐缓冲液;醋酸盐缓冲液等。(× )
13.要增加目得物得溶解度,往往要在目得物等电点附近进行提取。(× )
14.应用有机溶剂提取生化成分时,一般在较高温度下进行。(× )
15.常压干燥浓缩得缺点就是设备投资及操作维护费用高,生产能力不太大。(× )
16.生物物质中最常用得干燥方法就是减压干燥。(√)
17.冷冻干燥适用于高度热敏得生物物质。(√)
18.溶剂得极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。(√ )
19.蛋白质变性,一级、二级、三级结构都被破坏。(× )
20.蛋白质类得生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。(× )
21.吸附剂氧化铝得活性与其含水量无关。(× )
22.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上得吸附顺序就是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸
(× )
23.离子交换剂就是一种不溶于酸、碱及有机溶剂得固态学分子化合物。(√ )
24.蛋白质变性后溶解度降低,主要就是因为电荷被中与及水膜被去除所引起得。(× )
25.溶剂得极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。(√ )
26.当某一蛋白质分子得酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质得等电点为7、0。( √ )
27.采用氧化铝为吸附剂时,用洗脱剂应从高极性开始,逐渐减低,洗脱剂得极性。(× )
28.重蒸馏法常为制备无盐水得方法。(× )
29.板框压滤机可过滤所有菌体。(× )
30.高压匀浆法可破碎高度分枝得微生物。(× )
31.超声波破碎法得有效能量利用率极低,操作过程产生大量得热,因此操作需在冰水或有外部冷却得容器中进行。
(√ )
32.冻结得作用就是破坏细胞膜得疏水键结构,降低其亲水性与通透性。(× )
33.有机溶剂被细胞壁吸收后,会使细胞壁膨胀或溶解,导致破裂,把细胞内产物释放到水相中去。(√ )
34.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带正电。(× )
35.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带负电。(√ )
36.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带负电。(× )
37.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带正电。。(√ )
38.离心就是基于固体颗粒与周围液体密度存在差异而实现分离得。(√ )
39.不同高分子化合物得溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,
溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶得两相,上相富含PEG,下相富含葡聚糖。(√ )
40.不同高分子化合物得溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,
溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶得两相,下相富含PEG,上相富含葡聚糖。(× )
41.超临界流体温度不变条件下,溶解度随密度(或压力)得增加而增加,而在压力不变时,温度增加情况下,溶解度
有可能增加或下降。(√ )
42..盐析就是利用不同物质在高浓度得盐溶液中溶解度得差异,向溶液中加入一定量得中性盐,使原溶解得物质沉
淀析出得分离技术。(√ )
43.硫酸铵在碱性环境中可以应用。(× )
44.在低盐浓度时,盐离子能增加生物分子表面电荷,使生物分子水合作用增强,具有促进溶解得作用。(√ )
45.向含有生化物质得水溶液中加入一定量亲水性得有机溶剂,能使生化物质沉淀析出。(√ )
46.丙酮沉析作用小于乙醇。(× )
47.有机溶剂与水混合要在低温下进行。(√ )
48.有机溶剂沉析分辨能力比盐析高。(√ )
49.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH降低。(× )
50.等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH上升至5以上。(√ )
51.纳米过滤膜孔径最小。(× )
52.离子交换速率总就是取决于内部扩散速率。(× )
53.酚型树脂则应在pH小于9得溶液中才能进行反应。(× )
54.伯胺基在pH<7得溶液中使用。(√ )
55.在70～80℃时盐型树脂得分解反应达到初步脱盐而不用酸碱再生剂得这种树脂叫热再生树脂。(√ )
56.对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂。(√ )
57.阴树脂易受有机物污染,可用有机溶剂浸泡或淋洗。(× )
58.如不慎树脂失水,应先用水浸泡。(× )
59.只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上得离子具有更高得选择性时,静态离子交换操作才有可能获得较好得
效果。(√ )
60.层析分离就是一种化学得分离方法。(× )
61.分离纯化极性大得分子(带电离子等)采用反相色谱(或正相柱),(× )
62.而分离纯化极性小得有机分子(有机酸、醇、酚等)多采用正相色谱(或反相柱)。(× )
63.吸附力较弱得组分,有较低得Rf值。(× )
64.离子交换剂可以分为3部分:高分子聚合物基质、电荷基团与被交换离子。(× )
65.任何情况都优先选择较小孔隙得交换剂。(× )
66.凝胶柱层析可进行生物大分子分子量得测定。(√ )
67.在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。(× )
68.色谱分离技术中固定相都就是固体。(× )
69.色谱分离技术中被检测物质得峰越宽越好。(× )
70.制备型HPLC对仪器得要求不像分析型HPLC那样苛刻。(√ )
71.在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS),影响凝胶得形成。(× )
72.等电聚焦电泳会形成得一个由阳极到阴极逐步递减得pH梯度。(× )
73.在恒速干燥阶段,过程速度由水分从物料内部移动到表面得速度即内扩散所控制。(× )
74.在降速干燥阶段,干燥速度由水得表面汽化速度即外扩散所控制法。(× )
75.渗透压冲击就是各种细胞破碎法中最为温与得一种,适用于易于破碎得细胞,如动物细胞与革兰氏阳性菌。
(× )
76.等密度梯度离心中,梯度液得密度要包含所有被分离物质得密度。(√ )
77.可以用纸色谱得方法来选择、设计液液萃取分离物质得最佳方案。( √ )
78.Sephadex LH20得分离原理主要就是分子筛与正相分配色谱。( √ )
79.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上得吸附顺序就是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸
(× )
80.等密度梯度离心适于分离大小相同密度不同得物质。(√ )
81.当气体得温度超过其临界温度,压力超过临界压力之后,物质得聚集状态就介于气态与液态之间,成为超临界流
体。(√ )
82.盐析反应完全需要一定时间,一般硫酸铵全部加完后,应放置30min以上才可进行固液分离。(√ )
83.层析点样时用一根毛细管,吸取样品溶液,在距薄层一端1、5^2cm得起始线上点样,样品点直径小于3mm。(√ )
84.疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来得蛋白质、酶等生物大分子溶液(√ )
85.某结晶物质经硅胶薄层色谱,用一种展开剂展开,显示单一斑点,所以该晶体为一单体。( × )
86.水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离得方法。(√ )
87.采用溶剂提取法提取中草药有效成分时,选择溶剂得原则就是“相似相溶原则”。 ( √ )
88.凝聚与絮凝作用得原理就是相同得,只就是沉淀得状态不同。(× )
89.冻结融化法冻结得作用就是破坏细胞膜得疏水键结构,增加其亲水性与通透性来破坏细胞得。(√ )
90.发生乳化现象对萃取就是有利得。(×)
91.丙酮,介电常数较低,沉析作用大于乙醇,所以在沉析时选用丙酮较好。(×)
92.由于pH值可能对蛋白得稳定性有较大得影响,故一般通常采用改变离子强度得梯度洗脱(√ )
93.盐析作用也能减少有机溶剂在水中得溶解度,使提取液中得水分含量减少。可以促使生化物质转入有机相从而
提高萃取率。(√ )
94.珠磨法中适当地增加研磨剂得装量可提高细胞破碎率。(× )
95.中性多糖类药物常用水作溶剂来提取,也可用水浸煮,也可以用冷水浸提。( ∨ )
96.凝胶层析会使得大分子物质后流出,小分子物质先流出。(×)
97.有机溶剂(如胍、乙醇、尿素与异丙醇等)可以削弱疏水分子间得相互作用。可以用于任何规模得细胞破碎。
(√ )
98.液一液萃取时,常发生乳化作用,使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。(×)
99.蛋白质变性后溶解度降低,主要就是因为电荷被中与及水膜被去除所引起得。(× )
100.活性氧化铝可分三种类型:碱性氧化铝、中性与酸性氧化铝。(√ )
101.细胞破碎技术就是生物分离操作中必需得步骤。(× )
102.离心操作时,对称放置得离心管要达到体积相同才能进行离心操作。(×)
103.分配系数K与溶质得浓度与相体积比无关,它主要取决于相系统得性质、被萃取物质得表面性质与温度。(√ ) 104.甲醇沉淀作用与乙醇相当,但对蛋白质得变性作用比乙醇、丙酮都小,所以应用广泛。(×)
105.氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。(√ )
106.同时含有酸、碱两种基团得树脂叫两性树脂(√ )
107.氧化铝与硅胶都为亲水性吸附剂,由于对极性稍大得成分吸附力大,所以极性大得成分难以解吸附,Rf小,极性小得成分容易被解吸附,Rf大。同类成分得极性大小主要取决于以下因素。(√ )
108.盐析一般可在室温下进行,当处理对温度敏感得蛋白质或酶时,盐析操作要在低温下(如0℃～4℃)进行。
(√ )
109.蛋白质类得生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。(× )
110.液膜能把两个互溶但组成不同得溶液隔开。(√)
111.沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都就是进行初步纯化。(√ )
112.渗透压冲击就是各种细胞破碎法中最为温与得一种,适用于易于破碎得细胞,如动物细胞与革兰氏阴性菌。
(√ )
113.同一化合物用不同溶剂重结晶,其结晶得熔点可能有差距。( √ )
114.化学萃取即溶质根据相似相溶得原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。(×)
115.若两性物质结合了较多阳离子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等),则等电点pH升高。(√ )
116.采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子得大小,先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱,小分子得蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。( × )
117.树脂使用后不可再回收。(×)
四、填空
1.发酵液常用得固液分离方法有( 离心 )与( 过滤 )等。
2.常用得蛋白质沉析方法有(等电点沉淀),(盐析)与( 有机溶剂沉淀 )。
3.阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强酸型),(弱酸型)与(中等强度);其典型得活性基团分别有(磺酸
基团),(羧基),(磷酸基)。
4.蛋白质分离常用得色谱法有(凝胶色谱法) ,(多糖基离子交换色谱法),(高效液相色谱法)与(亲与色谱法) 。
5.为使过滤进行得顺利通常要加入(惰性助滤剂)。
6.离子交换分离操作中,常用得洗脱方法有(pH梯度) 与(离子强度(盐)梯度)。
7.阴离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强碱型),(弱碱型)与(中等强度);其典型得活性基团分别有(季氨
基)、(伯、仲、叔氨)、(强弱基团都具备)。
8.离子交换树脂由(载体),(活性基团)与(可交换离子)组成。
9.常用得化学细胞破碎方法有(渗透冲击),(酶消化法),(增溶法),(脂溶法)与(碱处理法)。
10.DEAE Sepharose就是(阴)离子交换树脂,其活性基团就是(二乙基氨基乙基)。
11.影响离子交换选择性得因素有(离子化合价),(离子水化半径),(溶液浓度),(离子强度),(溶液得pH值) ,(有机
溶剂),(树脂物理结构)与(辅助力)。
12.CM Sepharose就是(阳)离子交换树脂,其活性基团就是 (羧甲基)
13.工业离心设备从形式上可分为(管式),(套筒式),(碟片式),等型式。
14.膜分离过程中所使用得膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为 (微滤膜) ,(超滤膜),(纳滤膜)与(反渗透膜)。
15.工业上常用得超滤装置有(板式) ,(管式),(螺旋卷式)与(中空纤维式)。
16.影响吸附得主要因素有(吸附剂得性质),(吸附质得性质) ,(温度),(溶液pH值),(盐浓度)与(吸附物浓度与吸
附剂用量)。
17.影响盐析得因素有(溶质种类) ,(溶质浓度),(pH值)与(温度)。
18.简单地说,离子交换过程实际上只有(外部扩散),(内部扩散)与(化学交换反应) 三步;
19.反相高效液相色谱得固定相就是(非极性)得,而流动相就是(极性)得;常用得固定相有(C18)与(C8);常用得流动
相有(甲醇)与(乙睛)。
20.超临界流体得特点就是与气体有相似得(粘度(扩散系数)),与液体有相似得(密度)。
21.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质得原理就是依据其(等电点(pI))得不同;
22.根据分离机理得不同,色谱法可分为(吸附色谱),(离子交换色谱),(凝胶色谱),(分配色谱)与(亲与色谱)。
23.典型得工业过滤设备有(板框压滤机)与(真空转鼓过滤机)。
24.常用离心设备可分为(离心沉降)与(离心过滤) 两大类;
25.根据物化理论,萃取达到平衡时,溶质在萃取相与萃余相中得(浓度得比值)一定;
26.根据吸附剂与吸附质之间存在得吸附力性质得不同,可将吸附分为(物理)、(化学)、(极性)与(交换)吸附;
27.离子交换操作一般分为(动态)与(静态)两种;
28.蛋白质等生物大分子,在溶液中呈稳定得分散状态,其原因就是由于(分子表面电荷)与(水化层);
29.盐析用盐得选择需考虑(盐析作用强)、(溶解度大)、(生物学惰性)与(来源丰富、经济)等几个方面得因素;
30.影响有机溶剂沉淀得因素有(温度)、(pH)、(样品浓度)、(中性盐浓度)与(金属离子)。
31.结晶包括三个过程(过饱与溶液得形成)、(晶核得形成)与(晶体得生长)。
32.过饱与溶液得形成方法有(饱与溶液冷却)、(部分溶剂蒸发)、(解析)与(化学反应结晶)。
33.物料中所含水分可分为(结合水)与(非结合水)三种;
34.根据干燥曲线,物料干燥可分为(恒速干燥阶段)与(降速干燥阶段) 两个阶段;
35.液－液萃取从机理上分析可分为(物理萃取)与(化学萃取)两类;
36.大孔网状吸附剂有(非极性)、(中等极性)与(极性)三种主要类型;
37.影响离子交换速度得因素有(树脂粒度)、(交联度)、(溶液流速)、(温度)、(离子得大小)、(离子得化合价)
与(离子浓度)。
38.分配色谱得基本构成要素有(载体)、(固定相)与(流动相)。
39.分子筛色谱也称(凝胶色谱)得主要应用就是(脱盐)与(分级分离)
40.根据膜结构得不同,常用得膜可分为(对称性膜)、(非对称膜)与(复合膜)三类;
41.固体可分为(结晶)与(无定型)两种状态;
42.结晶得前提就是(过饱与溶液得形成);结晶得推动力就是(溶液得过饱与度);
43.根据晶体生长扩散学说,晶体得生长包括(溶质借扩散作用从溶液中转移到晶体得表面)、(溶质长入晶面放出结
晶热)与(结晶热传递回到溶液中)三个过程;
44.影响晶体生长速度得主要因素有(杂质)、(搅拌)、(过饱与度)与(温度)。
五、简答与问答题
1、试述凝胶色谱得原理？
答:将混合原料加在柱上并用流动相洗脱,则无法进入孔隙内部得大分子直接被洗脱下来,小分子因为可以进入孔隙内部而受到很大得阻滞,最晚被洗脱下来,而中等大小得分子,虽然可以进入孔隙内部但并不深入,受到得阻滞作用不强,因而在两者之间被洗脱下来。
2、在色谱操作过程中为什么要进行平衡？
答:1、流速平衡:流速就是柱层析操作当中得主要影响因素,流速得快慢直接影响着分离得效果,流速过快,混合物得不到完全得分离,流速过慢,整体分离得时间要延长,因此在分离前首先要确定留宿。
2、液体环境:为了保持被分离物质运动得均一性,以及好得吸附与解析效果,因此要保持孔隙内部与外部液体环境得一致,所以进行液体环境得平衡。
3、以羧酸吸附蛋白质为例,简要说明离子交换树脂得洗脱方法及其原理？
答:1、加碱:主要就是调节蛋白质到达等电点,就是蛋白质带电量减少,吸附力下降从而被洗脱下来。
2、加酸:主要就是抑制羧酸得电离,使活性基团带电量下降,吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。
3、加盐:依照质量作用定律,把蛋白质洗脱下来。
3、在离子交换色谱操作中,怎样选择离子交换树脂？
答:1、对阴阳离子交换树脂得选择:正电荷选择阳离子交换树脂,负电荷选择阴离子交换树脂。
2、对离子交换树脂强弱得选择:较强得酸性或碱性,选择选用弱酸性或弱碱性树脂。
3、对离子交换树脂离子型得选择:根据分离得目得,弱酸或弱碱性树脂不使用H或OH型。
4、简述盐析得原理及产生得现象？
答:当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:
(1)“盐溶”现象—低盐浓度下,蛋白质溶解度增大
(2)“盐析”现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度随之下降,原因如下:
(a)无机离子与蛋白质表面电荷中与,形成离子对,部分中与了蛋白质得电性,使蛋白质分子之间得排斥力减弱,从而能够相互靠拢;
(b)中性盐得亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区得相互作用导致沉淀;
5、简述吸附色谱分离技术得原理？
答: 利用溶质与吸附剂之间得分子吸附力(范德华力,包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)得差异而实现分离
6、在运用离子交换技术提取蛋白质时,为什么要使用多糖基离子交换剂？
答:因为离子交换树脂孔径小,大分子蛋白质难以进入。同时,树脂内部主要为疏水性,对亲水性得蛋白质会产生影响。而多糖基离子交换剂没有上述问题。
7、简述过饱与溶液形成得方法？
答:(1)热饱与溶液冷却(等溶剂结晶)
适用于溶解度随温度升高而增加得体系;同时,溶解度随温度变化得幅度要适中;
(2)部分溶剂蒸发法(等温结晶法)
适用于溶解度随温度降低变化不大得体系,或随温度升高溶解度降低得体系;
(3)真空蒸发冷却法
使溶剂在真空下迅速蒸发,并结合绝热冷却,就是结合冷却与部分溶剂蒸发两种方法得一种结晶方法。
(4)化学反应结晶
加入反应剂产生新物质,当该新物质得溶解度超过饱与溶解度时,即有晶体析出;
8、怎样进行离子交换树脂得预处理及转型？
答:物理处理:水洗、过筛,去杂,以获得粒度均匀得树脂颗粒;
化学处理:转型(氢型或钠型) 阳离子树脂酸—碱—酸阴离子树脂碱—酸—碱
最后以去离子水或缓冲液平衡
9、何谓等电点沉析法？
答:蛋白质再等电点下得溶解度最低,根据这一性质,再溶液中加入一定比例得有机溶剂,破坏蛋白质表面得水化层与双电层,降低分子间斥力,加强了蛋白质分子间得疏水相互作用,使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。
10、何谓超临界流体萃取,并简述其分离原理？
答:超临界流体萃取就是利用超临界流体具有得类似气体得扩散系数,以及类似液体得密度(溶解能力强)得特点,利用超临界流体为萃取剂进行得萃取单元操作。其特点就是安全、无毒、产品分离简单,但设备投资较大。
11、简述结晶过程中晶体形成得条件？
答:结晶过程包括过饱与溶液得形成、晶核得形成及晶体得生长三个过程,其中溶液达到过饱与状态就是结晶得前提,过饱与度就是结晶得推动力。
12、简述凝胶色谱得分离原理？
答:凝胶排阻色谱得分离介质(填料)具有均匀得网格结构,其分离原理就是具有不同分子量得溶质分子,在流经柱床就是,由于大分子难以进入凝胶内部,而从凝胶颗粒之间流出,保留时间短;而小分子溶质可以进入凝胶内部,由于凝胶多孔结构得阻滞作用,流经体积变大,保留时间延长。这样,分子量不同得溶质分子得以分离。
13、膜分离过程中,有那些原因会造成膜污染,如何处理？
答:(1)膜污染主要有两种情况:一就是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面;另一种就是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。(3分)
(2)膜污染就是可以预防或减轻得,措施包括料液预处理、膜性质得改善、操作条件改变等方式。(2分)
(3)膜污染所引起得通量衰减往往就是不可逆得,只能通过清洗得处理方式消除,包括物理方法冲洗与化学药品溶液清洗等。(2分)
14、超临界萃取得原理及SCCO2萃取得优点？
答:原理:溶质在超临界流体中得溶解度,与其密度有关,密度越大,溶解度越大。在临界点附近,微小得压力增加或温度下降,则溶剂得密度大幅度增加,对溶质得溶解度将大幅度增加,有利于溶质得萃取。而在临界点附近,微小得压力下降或温度上升,则溶剂得密度大幅度减少,对溶质得溶解度将大幅减少,有利于溶质得分离与溶剂得回收。
优点:无毒无腐蚀性,不可燃烧,价格低廉,传质好萃取快,临界温度与临界压力较低适合于热敏生物制品,可获萃取物或萃余物
15、何谓免疫亲与层析,简述亲与免疫层析介质得制备过程?
答、免疫亲与层析就是利用亲与技术与色谱分离集成产生得一种高效色谱分离技术,其分离原理就是通过抗原抗体之间特异性得相互作用,从而实现高效得分离。
层析介质得制备过程包括:抗体得制备、抗体提取、载体活化,手臂链得连接、抗体得连接等步骤。
16、何谓亲与吸附,有何特点？
答:亲与吸附就是吸附单元操作得一种,它就是利用亲与吸附剂与目标物之间得特殊得化学作用实现得高效分离手段。亲与吸附剂得组成包括:惰性载体、手臂链、特异性亲与配基。
亲与吸附得特点就是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温与,但载体制备难度大,通用性差,成本较高。
17、简述生物分离过程得特点?
答: 1、产品丰富:产品得多样性导致分离方法得多样性
2、绝大多数生物分离方法来源于化学分离
3、生物分离一般比化工分离难度大
(1)成分复杂(2)悬液中得目标产物浓度低(3)生物活性,条件相对温与(4)生物产品要求高质量(5)获得高纯度得干燥产品(6)卫生
18、试比较凝聚与絮凝两过程得异同？
答:凝聚与絮凝——在电介质作用下,破坏溶质胶体颗粒表面得双电层,破坏胶体系统得分散状态,使胶体粒子聚集得过程。
凝聚:简单电解质降低胶体间得排斥力。从而范德华引力起主导作用,聚合成较大得胶粒,粒子得密度越大,越易分离。
絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大得絮凝团得过程
19、简述有机溶剂沉析得原理？
答:1、概念:在含有溶质得水溶液中加入一定量亲水得有机溶剂,降低溶质得溶解度,使其沉淀析出。
2、原理:
(1)降低了溶质得介电常数,使溶质之间得静电引力增加,从而出现聚集现象,导致沉淀。
(2)由于有机溶剂得水合作用,降低了自由水得浓度,降低了亲水溶质表面水化层得厚度,降低了亲水性,导致脱水凝聚。
20、膜分离技术得类型与定义？
答:膜分离过程得实质就是物质透过或被截留于膜得过程,近似于筛分过程,依据滤膜孔径大小而达到物质分离得目得,故而可以按分离粒子大小进行分类:
(1)微滤:以多孔细小薄膜为过滤介质,压力为推动力,使不溶性物质得以分离得操作,孔径分布范围在0、025~14μm 之间;
(2)超滤:分离介质同上,但孔径更小,为0、001~0、02 μm,分离推动力仍为压力差,适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质;
(3)反渗透:就是一种以压力差为推动力,从溶液中分离出溶剂得膜分离操作,孔径范围在0、0001~0、001 μm之间;(由于分离得溶剂分子往往很小,不能忽略渗透压得作用,故而成为反渗透);
(4)纳滤:以压力差为推动力,从溶液中分离300~1000小分子量得膜分离过程,孔径分布在平均2nm;
(5)电渗析:以电位差为推动力,利用离子交换膜得选择透过性,从溶液中脱除或富集电解质得膜分离操作;
21、影响液固分离得因素？
(一)微生物种类得影响
一般真菌得菌丝比较粗大,液一固分离容易,含真菌菌体及絮凝蛋白质得发酵液,可采用鼓式真空过滤或板框过滤。对于酵母菌体,离心分离得方法具有较好得效果。但就是细菌或细胞碎片相当细小,液一固分离十分困难,用一般得离心分离或过滤方法效果很差,因此应先用预处理得各种手段来增大粒子,才能获得澄清得滤液。
(二)发酵液得黏度
液一固分离得速度通常与黏度成反比。影响发酵液黏度得因素很多:
(1)菌体种类与浓度不同,其黏度有很大差别。
(2)不同得培养基组分与用量也会影响黏度,如用黄豆饼粉、花生饼粉作氮源,用淀粉作碳源会使黏度增大。发酵液中未用完得培养基较多或发酵后期用油作消沫剂也会使过滤困难。
22、影响有机溶剂萃取分离得因素？
影响液一液萃取得因素主要有目得物在两相得分配比(分配系数K)与有机溶剂得用量等。分配系数K值增大,提取效率也增大,萃取就易于进行完全。当K值较小时,可以适当增加有机溶剂用量来提高萃取率,但有机溶剂用量增加会增加后处理得工作量,因此在实际工作中,常常采取分次加入溶剂,连续多次提取来提高萃取率。
23、盐析得原理及影响因素？
1、亲水性大于蛋白质破坏水化层
2、带电离子中与蛋白质表面电荷
影响因素:
(1)盐离子浓度(2)生物分子种类(3)生物分子浓度(4) pH值(五)温度
24、影响有机溶剂沉析得因素？
(1)温度(2)生物样品得浓度(3)pH(4)离子强度(5)金属离子
25、何时应用静态离子交换分离法？
一般只就是在试探性实验、测定交换平衡常数、某些交换动力学得研究、交换分配系数得测定、络合物离解常数得测定、滴定曲线得研究、某些催化反应得试探性研究、除去盐溶液中过剩得酸与碱、吸附溶液中所含得高分子量物质等方面可能用到。此外还用于不适合用柱进行操作得离子交换分离,如溶液粘度太大、含有悬浮固体及在反应时放出气体会造成沟流或堵塞管柱;或者就是含有碳酸盐、亚硫酸盐、硫化物得溶液与氢型阳离子柱交换时;以及某些交换速度较慢、交换要求在一步完成得等条件下,还就是可以采用得。
26、简述交换容量及其影响因素？
交换容量就是指离子交换剂能提供交换离子得量,它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换得能力。通常所说得离子交换剂得交换容量就是指离子交换剂所能提供交换离子得总量,又称为总交换容量,它只与离子交换剂本身得性质有关。
影响交换容量得因素很多,主要可以分为两个方面,一方面就是离子交换剂颗粒大小、颗粒内孔隙大小以及所分
离得样品组分得大小等影响。另一些影响因素如实验中得离子强度、pH值等主要影响样品中组分与离子交换剂得带电性质。
27、疏水柱层析分离原理？
亲水性蛋白质(酶)表面均含有一定量得疏水性基团。尽管在水溶液中蛋白质(酶)具有将疏水性基团折叠在分子内部而表面显露极性与荷电基团得趋势,但总会有一些疏水性基团或极性基团得疏水部位暴露在蛋白质(酶)表面。这部分疏水基团可与亲水性固定相表面偶联得短链烷基、苯基等弱疏水基会发生疏水性相互作用,被固定相(疏水性吸附剂)所吸附。
28、影响电泳分离得主要因素？
1、大分子得性质
2、电场强度
3、溶液得pH
4、溶液得离子强度
5、电渗
6、温度
7、支持物得影响
38、提高晶体质量得方法有哪些？
(1)晶体大小得控制(2)晶体形状得控制(3)晶体纯度得控制(4)晶体结块得控制
29、生物分离得基本原理？
主要就是依据离心力、分子大小(筛分)、浓度差、压力差、电荷效应、吸附作用、静电作用、亲与作用、疏水作用、溶解度、平衡分离等原理对原料或产物进行分离、纯化。不同得分离对象需要采用不同得分离方法才能有效地被分离。
30、试列举常见得吸附剂
(1)活性炭(2)白陶土(白土、陶土、高岭土)(3)磷酸钙凝胶(4)氢氧化铝凝胶
(5)氧化铝(6)硅胶(7)滑石粉(8)硅藻土(9)皂土(10)沸石(11)聚酰胺粉(12)大网格聚合物吸附剂
31、吸附色谱分离化学成分得原理就是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂得主要用途与特点？
利用混合物中各成分在两相中吸附力得差异进行分离。硅胶可分离各类成分。氧化铝分离碱性或亲脂性成分。活性炭分离水溶性成分。聚酰胺就是氢键吸附,适合分离黄酮成分。
32、树脂得再生(或称活化)？
所谓树脂得再生就就是让使用过得树脂重新获得使用性能得处理过程,树脂得再生反应就是交换吸附得逆反应。再生方法可根据污染情况与条件而定,一般阳树脂在软化中易受Fe3+污染,清除铁化合物得方法,通常就是用加抑制剂得高浓度盐酸(10%～15%)浸泡树脂5～12h,甚至更长。也可用柠檬酸、氨基三乙酸、EDTA等络合物进行处理。阴树脂易受有机物污染,可用10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液浸泡或淋洗
33、液一液萃取时溶剂得选择要注意以下几点？
(1)选用得溶剂必须具有较高选择性,各种溶质在所选得溶剂中之分配系数差异愈大愈好。
(2)、选用得溶剂,在萃取后,溶质与溶剂要容易分离与回收。
(3)、两种溶剂得密度相差不大时,易形成乳化,不利于萃取液得分离,选用溶剂时应注意。
(4)、要选用无毒,不易燃烧得价廉易得得溶剂。
34、试述活性炭得吸附剂得吸附特点？
(1)在水溶液中吸附力最强,在有机溶剂中吸附力较弱。
(2)对极性基团(COOH、NH2、OH等)多得化合物得吸附力大于极性基团少得化合物,。
(3)对芳香族化合物得吸附力大于脂肪族化合物。
(4)对分子量大得化合物得吸附力大于分子量小得化合物。
(5)发酵液得pH与活性炭得吸附效率有关,一般碱性物质在中性下吸附,酸性下解吸;酸性物质在中性下吸附,碱性解吸。
(6)活性炭吸附溶质得量在未达到平衡前一般随温度升高而增加;但在升高温度时应考虑到溶质对热得稳定性。
35、简述凝胶层析有哪些用途？
①作为分析工具;作为脱盐工具②生物大分子得浓缩
③除热原物质④生物大分子得分离纯化;分子量得测定
36、简述pH对发酵液过滤特性得影响,并举例说明。
答:(1) pH直接影响发酵液中某些物质得电离程度与电荷性质,因此适当调节pH值可以改善发酵液得过滤特性。(2)氨基酸与蛋白质在酸性条件下带正电,碱性条件下带负电,等电点时净电荷为零,两性物质在等电点下得溶解度最小,等电点沉淀法在生物工业分离中广泛使用。(3)如味精生产,利用等电点沉淀法提取谷氨酸,一般蛋白质也在酸性范围达到等电点;膜分离中可通过调整pH值改变易吸附分子得电荷性质,减少膜堵塞与膜污染;此外,细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在特定pH下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒,有利于过滤进行。
37、以胞内酶提取为例,简要说明双水相系统工业化萃取得主要流程及操作注意点。
答:(1)主要流程:使用PEG/盐系统提取胞内酶时,可先使细胞碎片分配到下相,使蛋白质分配在上相;分离后,上相中得蛋白质可以加入适当得盐,进行二次双水相萃取,目得就是利用盐相(下相)去除核酸与多糖;上相中得蛋白质进行第三次萃取,通过pH调节,使上相含色素,蛋白质分配在盐相,以便通过超滤将其与主体PEG分离,主体PEG可循环使用。
(2)操作注意点:实验放大得主要依据就是分配系数,遇到得主要问题就是细胞碎片相得粘度问题、萃取平衡时间以及相分离问题。需要带低速搅拌与溢流装置得混合－沉降系统;上下相分离利用重力沉降能耗成本低,但高粘度体系
要选用离心分离;改变条件再次萃取并结合超滤、透析等处理可实现多聚物得彻底分离。
38、孔膜过滤技术得应用？
微孔滤膜孔径在0、025 14μm范围内操作压力在110磅／英寸2之间。
孔径为0、010、05μm得膜可以截留噬菌体、较大病毒或大得胶体颗粒,可用于病毒分离。
孔径为0、1μm得膜用于试剂得超净、分离沉淀与胶体悬液,也有作生物膜模拟之用。
孔径为0、2μm得膜用于高纯水得制备、制剂除菌、细菌计数、空气病毒定量测定等。
孔径为0、45μm得微孔滤膜用得最多,常用来进行水得超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液得无菌检查、饮用水得细菌检查、放射免疫测定、光测介质溶液得净化以及锅炉水中Fe(OH)3得分析等。
生物分离工程试题
山科大生物分离工程试题（ A ）卷 一、填充题（40分，每小题2分） 1. 生物产品的分离包括R ，I ，P 和P 。 2. 发酵液常用的固液分离方法有和等。 3. 离心设备从形式上可分为，，等型式。 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为，和； 5. 多糖基离子交换剂包括和两大类。 6. 工业上常用的超滤装置有，，和。 7. 影响吸附的主要因素有，，，，和。 8. 离子交换树脂由，和组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是；甲叉双丙烯酰胺的作用 是；TEMED的作用是； 10 影响盐析的因素有，，和； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有，和； 12.简单地说，离子交换过程实际上只有，和三个步骤； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为； 14. 反相高效液相色谱的固定相是的，而流动相是的；常用的固定相有和；常用的流 动相有和； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的，与液体有相似的； 16.离子交换树脂的合成方法有和两大类； 17.常用的化学细胞破碎方法有，，，和； 18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其的不同； 19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有和； 20. 晶体质量主要指，和三个方面； 三.计算题（30分） 1、用醋酸戊酯从发酵液中萃取青霉素，已知发酵液中青霉素浓度为0.2Kg/m3，萃取平衡常数为K=40，处理能力为H=0.5m3/h，萃取溶剂流量为L=0.03m3/h，若要产品收率达96%，试计算理论上所需萃取级数？（10分） 2、应用离子交换树脂作为吸附剂分离抗菌素，饱和吸附量为0.06 Kg（抗菌素）/Kg（干树脂）；当抗菌素浓度为0.02Kg/m3时，吸附量为0.04Kg/Kg；假定此吸附属于Langmuir等温吸附，求料液含抗菌素0.2Kg/m3时的吸附量（10分） 3、一种耐盐细胞其能积累细胞内低分子量卤化物，适应高渗透压，能在含有0.32mol/LNaCl, 0.02mol/LMgCl2, 0.015mol/LCaCl2, 0.01mol/LFeCl3 的培养基这培养，当其从含盐量高的培养基中转移至清水中，在数分钟内能将胞内
生物分离工程实验
PART B 生物分离工程实验 实验十二香菇多糖的分离提取 一、实验目的 让学生了解香菇多糖的理化性质及提取工艺流程，掌握真空浓缩技术。 二、实验原理 香菇是一种药食两用真菌，具有提高免疫力、抗癌、降糖等多种生理功能。水溶性多糖作为香菇主要活性成分之一，主要以β-1,3-葡聚糖的形式，分子量从几万到几十万不等。通过有机溶剂提取，真空浓缩技术进行分离提取。 三、实验材料与试剂 原料：干香菇500g 试剂：氯仿、正丁醇、医用纱布、浓硫酸、重蒸酚、工业酒精 四、实验仪器 组织捣碎机、水浴锅、旋转蒸发器、1cm比色皿、751分光光度计、电子天平、台式离心机、试管、量筒、烧杯、玻璃棒 五、提取工艺流程 1. 1kg干香菇切成小块，以1：10（重量比）加入水，用组织捣碎机进行均质； 2. 取200mL均质液放入1L烧杯中，再加入300mL蒸馏水，加热至沸后，温 火煮沸1小时，（注意：煮沸过程中用玻璃棒不断搅拌，以免烧杯底部发生糊结；并间歇加入少量水，使杯内液体体积保持在500mL左右； 3. 加热完毕后，将杯内液体用8层纱布过滤，除去残渣，上清液转入另一烧杯 中； 4. 将上清液倒入圆底烧瓶中，在旋转浓缩仪上进行浓缩，浓缩条件为-0.1MPa 、 60℃，浓缩液体积至100mL左右停止； 5. 将浓缩液在1×10000g离心10min，将上清液转入另一烧杯，除去残渣； 6. 上清液中加入等体积的氯仿正丁醇浓液（体积比为4：1），搅拌5min，静置 30分钟； 7. 将混合液体在1×5000g下离心20min,分离水相；
8. 在水相中加入终浓度为80%的酒精，搅拌均匀，静置20min，1×5000g下离 心10min； 9. 取出沉淀物，放入已称重的干燥表面皿中，在真空干燥箱中80℃下真空干燥； 10. 干燥后，称重，计算多糖的产率； 11. 准确称取干燥后多糖20mg于500ml容量瓶中，加水定容； 12. 取定容液2ml加入6%苯酚1ml，混匀，再加入浓硫酸5ml，混匀，放置20min 后，于490nm测吸光度； 13. 葡萄糖标准曲线的制定：准确称取葡萄糖20mg定容于500ml容量瓶中，分 别取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，补水至2ml，依12步骤反应液，并分别测吸光度，根据葡萄糖浓度和吸光度绘制标准曲线； 14. 根据香菇多糖吸光度和葡萄糖标准曲线，计算多糖纯度。 六、思考题 1. 根据以上实验步骤，表达多糖产率及纯度的计算公式； 2. 利用所学生物化学知识，分析多糖沉淀原理。
生物分离工程期末考试试卷B
试卷编号： 一、名词解释题（本大题共3小题，每小题3分，总计9分） 1.Bioseparation Engineering：回收生物产品分离过程原理与方法。 2.双水相萃取：某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两相， 并且在两相中水分均占很大比例，即形成双水相系统(two aqueous phase system)。 利用亲水性高分子聚合物的水溶液可形成双水相的性质，Albertsson于50年代 后期开发了双水相萃取法(two aqueous phase extraction)，又称双水相分配法(two aqueous phase partitioning)。 3.电渗：在电场作用下，带电颗粒在溶液中的运动。 二、辨别正误题并改正，对的打√，错的打×（本大题共15小题，每小题2分，总计30分） 1.壳聚糖能应用于发酵液的澄清处理是由于架桥作用。错（不确定） 2.目前国内工业上发酵生产的发酵液是复杂的牛顿性流体,滤饼具有可压缩性。错 3.盐析仅与蛋白质溶液PH和温度有关，常用于蛋白质的纯化。错 4.超临界流体是一种介于气体和液体之间的流体，可用于热敏性生物物质的分离。 对 5.膜分离时，当截留率δ=1时,表示溶质能自由透过膜。错 6.生产味精时，过饱和度仅对晶体生长有贡献。对 7.阴离子纤维素类离子交换剂能用于酸性青霉素的提取。对 8.卡那霉素晶体的生产可以采用添加一定浓度的甲醇来沉淀浓缩液中的卡那霉 素。 9.凝胶电泳和凝胶过滤的机理是一样的。错 10.PEG-硫酸钠水溶液能用于淀粉酶的提取。对 11.乙醇能沉淀蛋白质是由于降低了水化程度和盐析效应的结果。对 12.冷冻干燥一般在-20℃—-30℃下进行，干燥过程中可以加入甘油、蔗糖等作为保 护剂。对 13.反相层析的固定相和流动相都含有高极性基团，可用来分离生物物质。错 14.大网格吸附剂由于在制备时加入致孔剂而具有大孔径、高交联度，高比表面积 的特点。错（不确定） 15.PEG沉淀蛋白质是基于体积不相容性。错 三、选择题（本大题共10小题，每小题2分，总计20分） 1.对于反胶束萃取蛋白质，下面说法正确的是：A A 在有机相中，蛋白质被萃取进表面活性剂形成的极性核里 B 加入助溶剂，可用阳离子表面活性剂CTAB萃取带正电荷的蛋白质 C 表面活性剂浓度越高越好 D 增大溶液离子强度，双电层变薄，可提高反胶束萃取蛋白质的能力 2.能进行海水脱盐的是：C A 超滤 B 微滤
生物分离工程实验
生物分离工程实验 实验一茶多酚标准曲线的测定 仪器：紫外分光光度计，比色皿，天平，容量瓶，移液管，pH计、试管 药品：没食子酸丙酯或茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾。 方法： A溶液配制 没食子酸丙酯标准溶液配制 准确称取25mg没食子酸丙酯，蒸馏水溶液，移入25mL容量瓶并稀释至刻度，摇匀，配制成1mg/mL的标准溶液 酒石酸亚铁溶液配制 准确称取0.1g硫酸亚铁，和0.5g酒石酸钾钠，混合，蒸馏水溶解后移入100mL容量瓶，稀释至刻度，摇匀。 pH7.5磷酸盐缓冲液配制 磷酸氢二钠：准确称取分析纯磷酸氢二钠2.969g，蒸馏水稀释溶解，移入250mL容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，为a液 磷酸二氢钾：准确称取分析纯磷酸二氢钾，、2.2695g，蒸馏水溶解，移入250mL容量瓶，定容，B。 取A液体85mL，B液体15mL混合均匀，即成。 B．标准曲线绘制 分别吸取0、0.25、0.50、0.75、1.0、1.25mL的没食子酸丙酯标准液于25mL容量瓶中，加入蒸馏水4mL，再加入酒石酸亚铁溶液5mL，用pH7.5的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，分光光度计在540nm处，1cm比色皿，分别测定吸光度。空白参比操作同上，不加没食子酸丙酯。以容量瓶中没食子酸丙酯的绝对含量mg为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，做线性回归。 C 样品测定 取适量样品加入容量瓶，操作同上，没食子酸丙酯含量乘以换算系数1.5，求得茶多酚。
实验二超声法和回流法提取茶多酚的比较 实验仪器： 超声提取器、布氏漏斗、抽滤瓶、真空泵、烧瓶、量筒、分光光度计、比色皿、容量瓶等、实验试剂 茶叶、纯净水、茶多酚（没食子酸丙酯）、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等 操作方法 1、材料准备 称取一定量的茶叶，研钵粉碎。备用 2、提取 A、超声提取法 称取5g粉碎后茶叶末，放入烧瓶（塑料袋密封），加入100mL水，于超声提取器，50℃提取20min，抽滤，定容至100mL，待测。 B、回流提取法 称取10g粉碎后茶叶末，放入圆底烧瓶，加入100mL水，80℃提取40min，分别在1、3、5、7、10、15、20、30、40min取3mL样品，小漏斗过滤后，待测。测得茶多酚含量（mg/mL）以茶多酚含量为纵坐标，时间为横坐标绘制曲线。 3. 含量测定 按照标准曲线的方法测定含量。 所需试剂及仪器 试剂： 没食子酸丙酯或者茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾， 仪器： 紫外分光光度计，水浴锅，电子天平，pH计，超声提取器，量筒（100mL*1），容量瓶（25mL*8，100mL*4, 250mL*2），比色皿*5，移液管（1.0mL*2, 0.5mL*2, 2mL*2, 5mL*4） 三角瓶250mL*2，小漏斗*2，试管架
生物分离工程期末复习
生物分离工程复习题 第一章绪论 简答题： 1、简述生物分离技术的基本涵义及内容。 答：基本涵义：生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 内容主要包括：离心分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、沉淀（析）分离、膜分离、层析（色谱）分离、电泳分离技术以及产品的浓缩、结晶、干燥等技术。 2、物质分离的本质是有效识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质和扩大这些差别的分离设备实现溶质间的分离或目标组分的纯化。请从物质的理化性质和生物学性质几个方面简述生物活性物质分离纯化的主要原理。 答：生物大分子分离纯化的主要原理是： 1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等； 2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法； 3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等； 4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等； 5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。 填空题： 1.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作 步骤。 2、评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程
度③回收率。 判断并改错： 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 选择题： 1. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率2．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法 C、分离量小分辨率高的方法 D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 第二章细胞分离与破碎 概念题： 过滤：是在某一支撑物上放多孔性过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒被截留，是固液分离的常用方法之一。 离心过滤：使悬浮液在离心力作用下产生离心压力，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 填空题： 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作 用。 3.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当 固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 4.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。
生物分离工程复习题库
生物分离工程复习题 一、名词解释 1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 2.分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一 常数叫分配系数。 3.絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 4.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常 用方法之一。 5.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 6.吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 7.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 8.离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 9.离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液， 而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 10.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂 上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 11.固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定 形固体沉淀的过程。 12.助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤 13.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两 相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。 14.有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 15.等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。 16.膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁 移率不同而实现分离的一种技术。 17.化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞 壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。 18.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。 19.反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到 浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 20.树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在 充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。 21.色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。 22.膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。 23.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中 将大分子筛分出来。 24.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品 中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 25.物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。 26.化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。 27.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉 淀析出的分离技术。 28.有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。 29.离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交 换平衡。 30.功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团 31.平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。 32.树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。 33.层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度 分布在两个相中。 34.流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流 动相。 35.正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性 大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。
生物分离工程期末复习题
填空题 1. .根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附； 2. 比表面积和孔径是评价吸附剂性能的主要参数。 3. 层析操作必须具有固定相和流动相。 4. 溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度 小。 5. 层析柱的理论板数越多，则溶质的分离度越大。 6. 两种溶质的分配系数相差越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的 分离度。 7. 影响吸附的主要因素有吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐的浓度和吸附物的浓度与吸附剂的用量； 8. 离子交换树脂由网络骨架（载体），联结骨架上的功能基团（活性基）和可交换离子组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基）；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）；TEMED的作用是增速剂（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合）； 10. 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，pH 和温度； 11. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶法，刺激起晶法和晶种起晶法； 12. 简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、部扩散和化学交换反应三步；
13. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14. 反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的； 15. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 等电点 的不同； 16. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 静态洗脱 和 动态洗脱 ； 17. 晶体质量主要指 晶体大小 ， 形状 和 纯度 三个方面； 18. 亲和吸附原理包括 配基固定化 ， 吸附样品 和 样品解析 三步； 19. 根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱 20. 蛋白质分离常用的色谱法有 免疫亲和色谱法， 疏水作用色谱法 ， 金属螯合色谱法 和 共价作用色谱法 ； 21. SDS-PAGE 电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS ）的目的是消除各种待分离蛋白的 分子形状 和 电荷 差异，而将 分子量 作为分离的依据；加入二硫叔糖醇的目的是 强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键 ； 22. 影响亲和吸附的因素有 配基浓度 、 空间位阻 、 配基与载体的结合位点 、 微环境 和 载体孔径 ； 23. 阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 强酸性阳离子交换树脂 、 弱酸性 和 中强酸性 ；其典型的活性基团分别有 3 、 COOH - 、2)(OH PO -； 24. 阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、 弱碱性 和 中强碱 性 ；其典型的活性基团分别有-+OH CH RN 33)(、2NH -、兼有以上两种基团； 25. 影响离子交换选择性的因素有 离子水合半径 、 离子价 、 离子强度 、 溶液pH ，温度 、溶液浓度 、 搅拌速率 、和 交联度、膨胀度、颗粒大小 ；
生物分离工程题库+答案
《生物分离工程》题库 一、填充题 1. 生物产品的分离包括R 不溶物的去除 ，I 产物分离 ，P 纯化 和P 精 制 ； 2. 发酵液常用的固液分离方法有 过滤 和 离心 等； 3. 离心设备从形式上可分为 管式 ， 套筒式 ， 碟片式 等型式； 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 微滤膜 ， 超滤膜 ， 纳滤膜 和 反渗透膜 ； 5. 多糖基离子交换剂包括 离子交换纤维素 和 葡聚糖凝胶离子交换剂 两大类； 6. 工业上常用的超滤装置有 板式 ， 管式 ， 螺旋式和 中空纤维式 ； 7. 影响吸附的主要因素有 吸附质的性质 ， 温度 ， 溶液pH 值 ， 盐的浓度 和 吸附物的浓度与吸附剂的用量 ； 8. 离子交换树脂由 网络骨架 （载体） ， 联结骨架上的功能基团 （活性基） 和 可 交换离子 组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂（ 提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚 合所必需的自由基） ； 甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作 用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链） ； TEMED 的作用是 增速剂 （催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的 聚合 ）； 10 影响盐析的因素有 溶质种类 ， 溶质浓度 ， pH 和 温度 ； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 自然起晶法 ， 刺激起晶法 和 晶种起晶法 ； 12.简单地说离子交换过程实际上只有 外部扩散 、内部扩散 和化学交换反应 三步； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14.反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的；常用的固定相有C 8 辛烷基 和 十八烷基C 18 ；常用的流动相有 乙腈 和 异丙醇 ； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的 粘度和扩散系数 ，与液体有相似的 密度 ； 16.离子交换树脂的合成方法有 加聚法 和 逐步共聚法 两大类；
生物分离工程期末复习资料
第一章 1．生物分离工程的一般过程P4 答：①发酵液的预处理主要采用凝聚和絮凝等技术来加速固相，液相分离，提高过滤速度。过滤、离心是其最基本的单元操作。 ②产物的提取采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作。 ③产物的精制常采用色谱分离技术，有层析、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱。 ④成品的加工处理浓缩、结晶、干燥 第二章 一、概念： 1.发酵液的预处理：指采用凝聚和絮凝等技术来加速固相、液相分离，提高过滤速度。 2.凝集（凝聚）：指在投加的化学物质（如水解的凝聚剂，铝、铁的盐类或石灰等）作用下，发酵液中的 胶体脱稳并使粒子相互凝集成为1mm大小块状絮凝体的过程。 3.絮凝：指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 4.离心分离：指在离心场的作用下，将悬浮液中的固相和液相加以分离的方法。主要用于颗粒较细的悬 浮液和乳浊液的分离。（分为差示离心、均匀介质离心、密度梯度离心、等密度梯度离心和平衡等密度离心。） 5.等电点沉淀法：利用蛋白质等两性化合物在等电点时溶解度最低，易产生沉淀的性质，用酸化剂或碱化 剂调节发酵液的pH，使其达到菌体蛋白的等电点而产生沉淀。 二、填空： 1、按过滤时料液流动方向的不同，分为常规过滤和错流过滤。 2、可溶性杂蛋白的去除法包括：等电点沉淀法、热处理法、化学变性沉淀法和吸附法 三、问答 1、发酵液的一般特征？ ①组成大部分为水； ②发酵产物的浓度较低； ③发酵液中的悬浮固形物主要是菌体和蛋白的胶状物； ④含有培养基中的残留成分，如无机盐类、非蛋白质大分子及其降解产物； ⑤含有其他少量代谢副产物；
⑥含有色素、毒性物质。热原质等有机杂质。 2、常用的絮凝剂有什么？ 无极絮凝剂：Al2(SO4)3·18H2O (明矾)、氯化钙、氯化镁碱式氯化铝、高分子无机聚合物等。 有机絮凝剂：壳多糖及其衍生物、明胶、丙烯酰胺类、聚苯乙烯类、聚丙烯酰类聚乙烯亚胺类。 3、影响絮凝效果的因素？ 答：①絮凝剂的种类； ②絮凝剂浓度； ③ pH; 最关键因素，影响絮凝剂活性基团的解离度。 ④搅拌转速和时间。 4、发酵液预处理的方法？ 答：①凝聚和絮凝方法 ②加热法 ③调节PH法 ④加水稀释法 ⑤加入助滤剂法 ⑥加吸附剂法或加盐法 ⑦高价态无机离子去除法 Ca2+——草酸、草酸钠→形成草酸钙沉淀 Mg2+——三聚磷酸钠(Na5P3P10)→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物 Fe3+——黄血盐(K4Fe(CN)6) →普鲁士蓝淀 ⑧可溶性杂蛋白的去除法 3、VB12发酵液絮凝预处理的研究 答：由正交试验确定影响絮凝的主要因素，结果表明，最佳絮凝条件：絮凝剂为聚合氯化铝、加入体积分数7%，pH6、搅拌速度14r/min、搅拌时间45s。通过加压过滤实验，得到絮凝后
生物分离工程总复习题
第一章复习题 1.生物分离工程在生物技术中的地位？ 2.生物分离工程的特点是什么？ 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 4.在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ 5.生物分离效率有哪些评价指标？ 第二章复习题 1．简述细胞破碎的意义 2．细胞破碎方法的大致分类 3．化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 第三章复习题 1．常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 2．影响盐析的主要因素有哪些？ 3．何谓中性盐的饱和度？ 4．盐析操作中，中性盐的用量（40% 硫酸铵饱和度）如何计算？5．简述盐析的原理。6．简述有机溶剂沉析的原理。 7．简述等电点沉析的原理。 第四章复习题 1．膜分离技术的概念 2．膜的概念 3．根据膜孔径大小，膜分离技术的分类 4．基本的膜材料有哪些？ 5．常用的膜组件有哪些？ 6．何谓反渗透？实现反渗透分离的条件是什么？其特点有哪些？ 7．强制膜分离的概念？ 8．电渗析的工作原理？ 9．膜污染的主要原因是什么？常用的清洗剂有哪些？如何选择？ 10．膜分离在生物产物的回收和纯化方面的应用有哪些方面？ 第五章复习题 1.什么是萃取过程？ 2.液－液萃取从机理上分析可分为哪两类？ 3.常见物理萃取体系由那些构成要素？ 4.何谓萃取的分配系数？其影响因素有哪些？ 5.何谓超临界流体萃取？其特点有哪些？有哪几种方法？ 6.何谓双水相萃取?常见的双水相构成体系有哪些？ 7.反胶团的构成以及反胶团萃取的基本原理 第六章复习题 1.影响吸附的主要因素？ 2.亲和吸附的原理和特点是什么？ 3.常用的离子交换树脂类型有哪些？ 4.影响离子交换速度的因素有哪些？ 5.用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些哪些特殊要求，主要有哪几类？ 第七章复习题
生物分离工程期末复习题
填空题 1. 为了提高最终产品的回收率一是（提高每步分离效率），二是（减少分离步骤）。 2. 评价一个分离过程效率的三个主要标准是：（浓缩率），（分离系数）和（产品回收程度） 3?生物产品的分离过程包括发酵液的预处理和（液固分离），（产品的提取），（产品的精制） 和（产品的加工处理）。 4?生化反应所起的作用是产生目的产物，指标是（产率）和（转化率），而生物分离解决的 是如何从反应液中获取这些物质，涉及的是（收率）和（纯度）。 5?生物分离的主要任务：从发酵液和细胞培养液中以（最高的效率），（理想的纯度）和（最小的能耗）把目的产物分离出来。 6?生物分离过程的特点包括：（生物分离过程的体系特殊），（生物分离过程的工艺流程特殊），（生物分离过程的成本特殊）。 7. 物质分离的本质是识别混合物中不同溶质间（物理），（化学）和（生物）性质的差别利用 能识别这些差别的（分离介质）和扩大这些差别的（分离设备） 8. 性质不同的溶质在分离操作中具有不同的（传质速率）和或（平衡状态） 9. 平衡分离是根据溶质在两相间（分配平衡）的差异实现分离；溶质达到分配。平衡为扩散 传质过程，推动力仅取决于系统的（热力学性质）。 10. 差速分离是利用外力驱动溶质迁移产生的（速度差）进行分离的方法。 1. 在细胞分离中，细胞的密度越（大），细胞培养液的密度越（小），则细胞沉降 2. 区带离心包括（差速）区带离心和（等密度）区带离心。
3. 为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。 4. 发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。 5?常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类； 6?常用的工业絮凝剂有（无机絮凝剂）和（有机絮凝剂）两大类。 7. 工业生产中常用的助滤剂有（硅藻土）和（珍珠岩粉）。 8. 重力沉降过程中，固体颗粒受到（重力），（浮力），（摩擦阻力）的作用， 固体匀速下降时，三个力的关系（重力=浮力+摩擦阻力）。 9. 发酵液预处理的方法包括：（凝集），（絮凝），（加热法）；（调节pH法），（加水稀释法），加入（助滤剂）和（吸附剂）。 10. 发酵液中胶粒保持稳定的原因：（双电层）和（蛋白质周围水化层）结构。 11. 发酵液预处理过程中的相对纯化主要包括去除（高价态无机离子），（可溶性杂蛋白质），（色素）和（多糖类物质）。 12. 发酵液中杂蛋白的去除方法主要有（等电点沉淀法），（热处理法）和（化学变性沉淀法）。 13. 差速区带离心用于分离（大小）不同的颗粒，与颗粒（密度）无关。等密度区带离心包 括（预形成梯度密度离心）和（自形成梯度密度离心）两种方式。离心达到平衡后，样品颗粒的区带形状和平衡位置（不再发生变化）。 1?单从细胞直径的角度，细胞（直径越小），所需的压力或剪切力越大，细胞越 2. 常用的化学细胞破碎方法有（.酸碱法），（盐法），（表面活性剂处理），（有机溶剂法）和（螯合剂）。 3. 包涵体的溶解需要打断蛋白质分子和分子间的（共价键），（离子键），疏水作用及静电 作用等，使多肽链伸展。因此，包涵体的溶解需要强的变性剂，如（8mol/L尿素）和（6mol/L 盐
生物分离工程练习题
《生物分离工程》练习题 绪论 1.生物分离过程包括目标产物的提取、浓缩、纯化。 2.生物分离过程的显着特点是什么？ 1、条件温和 2、安全性、卫生性要求高 3、方法需要具有高选择性 4、对原 料高度浓缩 3.评价一个分离过程的效率主要有三个标准，目标产物的浓缩程 度、分离纯化程度、回收率。 4.图中F表示流速，c表示浓度；下标T和X分别表示目标产物和杂质。C、P 和W分别表示原料、产品和废料。写出产品浓缩率m、分离因子α、回收率REC 的计算公式。书本第九页 第一章细胞分离与破碎 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有过滤介质阻力和滤饼阻力，其中滤 饼占主导作用。 3.B可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率 4.重力沉降过程中，固体颗粒不受C的作用。 A.重力 B.摩擦力 C.静电力 D.浮力 5.过滤的透过推动力是 D 。 A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 6.在错流过滤中，流动的剪切作用可以B。 A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度 B.减轻浓度极化，但降低 凝胶层的厚度 C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度 D.加重浓度极化，但降低 凝胶层的厚度
7.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，流体摩擦阻力的 作用，当固体匀速下降时，三个力的关系平衡 8.撞击破碎适用于D的回收。 A.蛋白质 B.核酸 C.细胞壁 D.细胞器 9.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。 10.管式和碟片式离心机各自的优缺点。 管式，优点:离心力较大缺点：沉降面积小，处理能力降低 碟片式，优点：沉降面积大缺点：转速小，离心力较小 11.单从细胞直径的角度，细胞直径越小，所需的压力或剪切力越大，细 胞越难破碎 12.细胞的机械破碎主要方法有高压匀浆、珠磨、喷雾撞击破碎、 超声波破碎 13.细胞的化学破碎技术包括酸碱处理、酶溶、化学试剂处 理。 第二章初级分离 1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围水化层和双电层。 2.判断：当蛋白质周围双电层的ζ电位足够大时，静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力，使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。（正确） 3.降低蛋白质周围的水化层和双电层厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。 4.常用的蛋白质沉淀方法有：盐析沉淀，等电点沉淀，有机溶剂沉淀。
生物分离工程期末总复习
第一章绪论 一、生物分离工程在生物技术中的地位？ 二、生物分离工程的特点是什么？ 1．产品丰富产品的多样性导致分离方法的多样性 2．绝大多数生物分离方法来源于化学分离 3．生物分离一般比化工分离难度大 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 三、生物分离过程一般分四步： 1.固-液分离（不溶物的去除） 离心、过滤、细胞破碎 目的是提高产物浓度和质量 2.浓缩（杂质粗分） 离子交换吸附、萃取、溶剂萃取、反胶团萃取、超临界流体萃取、双水相萃取 以上分离过程不具备特异性，只是进行初分，可提高产物浓度和质量。 3．纯化 色谱、电泳、沉淀 以上技术具有产物的高选择性和杂质的去除性。 4．精制结晶、干燥 四、在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ （1）产品价值 （2）产品质量 （3）产物在生产过程中出现的位置 （4）杂质在生产过程中出现的位置 （5）主要杂质独特的物化性质是什么？ （6）不同分离方法的技术经济比较 上述问题的考虑将有助于优质、高效产物分离过程的优化。 五、.生物分离效率有哪些评价指标？ 1.目标产品的浓缩程度——浓缩率m 2．系数α回收率REC 第二章细胞分离与破碎
1．简述细胞破碎的意义 一、细胞破碎的目的 由于有许多生化物质存在于细胞内部，必须在纯化以前将细胞破碎，使细胞壁和细胞膜受到不同程度的破坏（增大通透性）或破碎，释放其中的目标产物，然后方可进行提取。 二、细胞破碎方法的大致分类 破碎方法可归纳为机械破碎法和非机械破碎法两大类，非机械破碎法又可分为化学（和生物化学）破碎法和物理破碎法。 1．机械破碎 处理量大、破碎效率高速度快，是工业规模细胞破碎的主要手段。 细胞的机械破碎主要有高压匀浆、研磨、珠磨、喷雾撞击破碎和超声波破碎等。 2．化学（和生物化学）渗透破碎法 （1）渗透压冲击法（休克法）（2）酶溶（酶消化）法 3．物理破碎法 1）冻结－融化法（亦称冻融法）（2）干燥法 空气干燥法真空干燥法冷冻干燥法喷雾干燥法 三、化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 化学渗透破碎法与机械破碎法相比优点：化学渗透破碎法比机械破碎法的选择性高，胞内产物的总释放率低，特别是可有效地抑制核酸的释放，料液的粘度小，有利于后处理过程。 化学渗透破碎法与机械破碎法相比缺点：化学渗透破碎法比机械破碎法速度低，效率差，并且化学或生化试剂的添加形成新的污染，给进一步的分离纯化增添麻烦。 第三章初级分离 一、常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 盐析沉淀,等电点沉淀,有机溶剂沉淀,热沉淀 二、影响盐析的主要因素有哪些？ （1）离子强度：Ks和β值, 强度越大,蛋白质溶解度越小； （2）蛋白质的性质:因相对分子质量和立体结构而异,结构不对称、相对分子质量大的蛋白质易于盐析； （3）蛋白质的浓度：蛋白质浓度大，盐的用量小，共沉作用明显，分辨率低；蛋白质浓度小，盐的用量大，分辨率高；2.5%～3.0% 时最适合； （4）pH值：通常调整到pI附近，盐浓度较大会对等电点产生较大影响，pH对不同蛋白质的共沉影响；
《生物分离工程》复习题(解答版)
《生物分离工程》复习题 《绪论细胞分离》 1.在细胞分离中，细胞的密度ρS越大，细胞培养液的密度ρL越小，则细胞沉降速率越大。 2.表示离心机分离能力大小的重要指标是 C 。 A.离心沉降速度 B.转数 C.分离因数 D.离心力 3.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作用。 4.简答：对微生物悬浮液的分离（过滤分离），为什么要缓慢增加操作压力？ 5.判断并改错：在恒压过滤中，过滤速率会保持恒定。（×）改：不断下降。 6.简答：提高过滤效率的手段有哪些? 7.判断并改错：生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。(×)改：更易破碎。 8.简答：采用哪种方法破碎酵母能达到较高的破碎率？ 9.简答：蛋白质复性收率低的主要原因是什么？ 10.简答：常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。 11. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率 12.重力沉降过程中，固体颗粒不受 C 的作用。 A.重力 B.摩擦力 C.静电力 D.浮力 13.过滤的透过推动力是 D 。 A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 14.在错流过滤中，流动的剪切作用可以 B 。 A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度 B.减轻浓度极化，但降低凝胶层的厚度 C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度 D.加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度
15.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间 A 相互作用的结果。 A.疏水性 B.亲水性 C.氢键 D.静电 16.判断并改错：原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用 D 手段，可以提高沉降速度。 A.调整pH B.加热 C.降温 D.加盐或絮状剂 18.撞击破碎适用于 D 的回收。 A.蛋白质 B.核酸 C.细胞壁 D.细胞器 19.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 20.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作步骤。 21.评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程度③回收率。 22.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。 23.差速区带离心的密度梯度中最大密度 B 待分离的目标产物的密度。 A.大于 B.小于 C.等于 D.大于或等于 24.简答：管式和碟片式离心机各自的优缺点。 25.单从细胞直径的角度，细胞越小，所需的压力或剪切力越大，细胞越难破碎。 《沉淀》 1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围的水化层和双电层。 2.判断：当蛋白质周围双电层的ζ点位足够大时，静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力，使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。（√） 3.降低蛋白质周围的水化层和双电层厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。
题库名称：生物分离工程
题库名称：生物分离工程 一、名词解释 1．质量作用定律：化学反应的速率与参加反应的物质的有效质量成正比。 2．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 3．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。 4．干燥速率：干燥时单位干燥面积，单位时间内漆画的水量。 5．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。6．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 7．过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。 8．萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 9．吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 10．反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 11．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 12．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 13．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 14．固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。
生物分离工程实验.
PART B 生物分离工程实验 实验九硅胶色谱法分离甘油三酯 一、实验目的 通过从粗油中分离甘油三酯，学习运用凝胶色谱法分离油脂中各个成分的方法。 二、实验原理 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱，以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。硅胶色谱频繁使用在脂质中的单一脂质，糖脂质以及磷脂质的分离。各种脂质被硅胶吸附，随着洗脱溶液的极性增加，各种极性不同的化合物被分离出来。 三、实验仪器 1. 层析柱(1.5×75cm) 2. 250mL 三角容量瓶 3. 分析天平（0.001g） 4. 真空浓缩装置 5. 搜集瓶 6. 氮气 四、实验材料与试剂 1. 正己烷 200mL 2. 乙醚15mL 3. 蒸馏水 1.3mL 4. 硅胶（100目左右） 25g 五、实验步骤 1. 活化硅胶（110度，6小时干燥）25g中加入5%蒸馏水使其部分钝化并充分混 匀放置30分钟。加入正己烷至刚好淹没硅胶为止并用超声波脱气3分钟。2. 层析柱底部放入脱脂棉少许（防止硅胶泄漏），将硅胶放入到层析柱中正己烷 溶液要没过硅胶层表面。
3. 准确称取食用油1±0.001 g加入到硅胶层析柱中用150mL正己烷/乙醚 （87∶13，v/v）洗脱，洗脱速度为2-3滴/min。洗脱时表面不能干和。 4. 收集的洗脱液用真空浓缩装置浓缩至无有机溶剂气味为止。 5. 准确称取浓缩物质量。 六、回收率计算 回收率= Ws/W×100% Ws：回收的甘油三酯质量（g） W：食用油质量（g） 七、思考题 1. 实验中加水的目的是什么？ 2. 怎样验证洗脱液中收集的甘油三酯的纯度。
ZXM生物分离工程期末复习
概念题： 萃取： 利用溶质在互不相溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法称为萃取。 亲和吸附：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。 超临界流体萃取：是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度（溶解能力强）的特点，利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。 等电点沉淀法：蛋白质在等电点下的溶解度最低，根据这一性质，在溶液中加入一定比例的有机溶剂，破坏蛋白质表面的水化层和双电层，降低分子间斥力，加强了蛋白质分子间的疏水相互作用，使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。 反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。 离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交换平衡。 凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。 絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。 过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。 吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。