葡萄球菌鉴定管11

用途及使用方法：本品供葡萄球菌鉴定用。使用时玻璃管上端用砂轮划痕折断，然后用接种针挑取纯菌落接种，置灭菌平皿内或小试管架上放36°C±1°C孵育箱内，18-24小时培养后，观察并记录结果。

注:

“d”11-89%阳性“( )”迟缓反应

用途及使用方法：本品供葡萄球菌鉴定用。使用时玻璃管上端用砂轮划痕折断，然后用接种针挑取纯菌落接种，置灭菌平皿内或小试管架上放36°C±1°C孵育箱内，18-24小时培养后，观察并记录结果。

有临床意义的8种葡萄球菌生化鉴定结果:

注:“＋”90%以上阳性“±”90%以上弱阳性“-”90%以上阴性“d”11-89%阳性“( )”迟缓反应

葡萄球菌属检验

1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2. 标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的?溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 3.4.3 与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡

萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 表1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 菌名 凝固 酶触酶溶血 硝酸 盐 海藻 糖 半乳糖 苷酶 金黄色葡萄球菌金黄色亚 种 +++++- 金黄色葡萄球菌厌氧亚种+-+--- 施氏葡萄球菌聚集亚种++++-ND 中间葡萄球菌++d+++ 海豚葡萄球菌++++-ND S.lutrae++++++ 猪葡萄球菌d+-++- 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“-”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND”为无资料。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。

链球菌和葡萄球菌分离鉴定

青岛农业大学 兽医微生物学课程论文 题目：链球菌和葡萄球菌分离鉴定 姓名： 学院：动物科技学院 班级：马业科学1201 学号： 2012 任课教师：温建新 二0一四年四月十二日

链球菌和葡萄球菌分离鉴定 班 2012 指导教师温建新 摘要：为了鉴别致病性葡萄球菌和链球菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。 关键词：葡萄球菌；链球菌 引言：葡萄球菌是一群革兰氏染色阳性球菌【1】，因常常堆聚成葡萄串状而得名。多数葡萄球菌为非致病菌，少数可致病。代表种有金黄色葡萄球菌。白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌等。典型的葡萄球菌为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，革兰氏染色阳性，无鞭毛，无荚膜，不产生芽胞，呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。易被常用的碱性染料着色，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧【2】., 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。致病性菌株能分解甘露醇. 链球菌是一类球形的革兰氏阳性细菌【2】，属于厚壁菌门的一个属。这些细菌细胞分裂时总是沿一个轴，所以通常成对或者链状的。因为这些特征，他们被称作“链球菌” . 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，多数呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。链的长短与菌种及生长环境有关，在液体培养基中形成链状排列比在固体培养基中形成的链长。幼龄菌大多可见到透明质酸形成的荚膜，如延长培养时间，荚膜可被细菌自身产生的透明质酸酶分解而消失。无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结构，含M蛋白，革兰氏染色阳性。能发酵简单的糖类，产酸不产气, 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高。【1】普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。血琼脂平板上形成灰白色、有乳光、表面光滑、边缘整齐、直径0.5—0.75mm的细小菌落，不同菌株有不同溶血现象。肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌均产生α溶血环【3】。

实验 金黄色葡萄球菌的分离和鉴定

实验题目金黄色葡萄球菌的分离和鉴定 一、实验目的 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害，我们要分离出它们并研究。 二、实验原理 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8um左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1—2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10—15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，V—P反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 三、实验材料和设备 1.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（13%NaCl）：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠130g，琼脂15g，蒸 馏水1000ml，121℃灭菌20min后倒平板。 肉汤培养基：酵母膏5g，蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000ml，121℃灭菌20min。 甲苯胺兰-DNA平板 2.试剂 磺胺类药物、革兰氏染液 3.仪器和设备 显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。 四、实验方法 金黄色葡萄球菌的分离： 1.称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，再加入200ul 磺胺类药物，振荡10min，使土样充分混匀。利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。 2.从上述锥形瓶中取5ml上清液放入一只干净的试管中，30℃，200rpm，24h。 3.取培养好的菌液，按梯度稀释法稀释土壤悬液，依次制备成100、1000、10000、100000倍悬液后，分别取200ul涂布于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，置于37℃培养箱中培养24h。利用高盐培养基抑制其他细菌的生长，从而分离金黄色葡萄球菌。 金黄色葡萄球菌的鉴定： 1.菌落形态：菌落较小，较湿，较透明，边缘整齐，隆起。

葡萄球菌属检验

精心整理1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2.标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3.鉴定 3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌 O/F试 ”为3.5.1涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。 3.5.4鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4.药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。 5.质量控制 参见《质量管理程序》。 6.检验结果解释与分析 6.1由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌时应慎重。

精心整理 应根据凝固酶试验进一步确认。对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据生化图谱进行确定。表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通常视为致病菌。溶血性葡萄球菌从泌尿感染病人分离得到时，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。 6.2甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和?-内酰胺药/?-内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苷类和大环内酯类抗生素常协同耐药。若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。临床感染葡萄球菌的病人用喹诺酮类治疗3-4日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。大环内酯类耐药葡萄球菌包括固有耐药和诱导耐药。所以临床试验室须进行“D”试验以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。 7.临床意义 金黄等， 等。 MRSA 物。 8. [1] [2] [3]

葡萄球菌属检验

文件页码：1/3 1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2. 标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 3.4.3 与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 表1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 菌名凝固酶触酶溶血硝酸盐海藻糖半乳糖苷酶 金黄色葡萄球菌金黄色亚种+ + + + + - 金黄色葡萄球菌厌氧亚种+ - + - - - 施氏葡萄球菌聚集亚种+ + + + - ND 中间葡萄球菌+ + d + + + 海豚葡萄球菌+ + + + - ND S.lutrae + + + + + + 猪葡萄球菌 d + - + + - 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“-”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND”为无资料。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3 凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。 3.5.4 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。 5. 质量控制

葡萄球菌属检验

蒈1．概述 蒅葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 芀2.标本类型 袈血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 薈3.鉴定 袆3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 羂3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 袁3.3生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 蚈3.4鉴别要点 羃3.4.1本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 蚄3.4.2与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 蚀3.4.3与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 螈3.4.4凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 莄表1凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 膂菌名葿凝固 酶 袇触 酶 螅溶 血 袄硝酸 盐 膈海藻 糖 羇半乳糖 苷酶 膆金黄色葡萄球菌金黄色亚种莂+ 芁+ 肇+ 莃+ 肄+ 羀- 肇金黄色葡萄球菌厌氧亚种螄+ 蒁- 蝿+ 膇- 膄- 芃- 螁施氏葡萄球菌聚集亚种芇+ 薅+ 蚁+ 薀+ 莇- 羆ND 莃中间葡萄球菌荿+ 蒇+ 肃d 袁+ 膈+ 薆+ + - ND

金黄色葡萄球菌的分离及鉴定(4)

金黄色葡萄球菌的分离及鉴定（食品检验） 1.金黄色葡萄球菌检验程序： 2.金黄色葡萄球菌鉴定程序： （1）：金黄色葡萄球菌在Baird-parker平板上菌落直径为2mm-3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围有一周浑浊带，外围有一层透明圈，用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。 （2）：染色镜检：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，无荚膜，直径约为0.5 μm～1 μm。

（3）：血浆凝固酶试验：挑取、Baird-Parker 平板或血平板上可疑菌落1 个或以上，分别接种到5 mL BHI和营养琼脂小斜面，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。取 新鲜配置血浆0.5 mL，放入小试管中，再加入BHI 培养物0.2 mL～0.3 mL，振荡摇匀，置36℃±1 ℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落到5 mL BHI，36 ℃±1 ℃培养18 h～48 h，重复试验。 （4）：结果判定：符合（1）、（2）、（3），可判定为金黄色葡萄球菌。 结果报告：在25 g（mL）样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。

金黄色葡萄球菌的分离和初步鉴别

品种名称：金黄色葡萄球菌显色培养基 品种编号：CRM012 英译名称：Chromogenic Staph. aureus Agar 金黄色葡萄球菌显色培养基用途：用于金黄色葡萄球菌的分离和初步鉴别。 金黄色葡萄球菌显色培养基使用原理： 蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;显色剂与金黄色葡萄球菌具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在无色透明平板上，金黄色葡萄球菌产生粉红-紫红的边缘整齐菌落;抑菌剂可抑制杂菌的生长。 操作步骤： 1、称取67.4g培养基干粉，加入1L蒸馏水或去离子水(可按比例扩大增或缩小)，搅拌加热煮沸至完全溶解(避免过度加热)，无需高压灭菌，冷至50℃左右倾注平板备用; 2、待检样品按照相应的标准(GB、SN、FDA等)进行取样及前增菌，挑取一环增菌液划线接种于制备好的该培养基平板上，于36±1℃培养18～24 h，观察结果，挑取典型可疑菌落进行鉴定试验。 结果判断： 菌属菌落特征 金黄色葡萄球菌粉红-紫红色菌落 其它菌蓝绿色或无色或受抑制 金黄色葡萄球菌显色培养基质量控制： 外观：流动性良好的淡黄色粉末，制备好的平板呈浅黄色透明固体培养基。 生物学：下列菌株接种后于36±1℃培养24h生长情况如下表： 质控菌菌落特征 金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长良好，粉红-紫红色 单核增生李斯特菌ATCC19115 蓝绿色 表皮葡萄球菌(CMCC(B)26069 受抑制

粪肠球菌ATCC29212 受抑制 普通变形杆菌CMCC(B)49027 受抑制 规格：67.4克 /瓶，可配置1L的培养基。 贮存： 脱水培养基：2～8℃，在标签上注明的保质期内使用。制备好平板：2～8℃，最多保存一周。

葡萄球菌属鉴定

葡萄球菌属鉴定 一、目的 对某一细菌的鉴定水平，可提供以下几方面的价值：（1）决定 治病方法；（2）作流行病学研究；（3）了解细菌与感染的关系； （4）进行学术交流。 二、原理 根据葡萄球菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造等 将葡萄球菌由属鉴定到具体种类。 三、标本 不同病种及不同检查目的而定，可为脓汁、渗透液、咽拭子、 血、脑脊液、食物、呕吐物、粪便等，置于无菌瓶内送检。四、试剂及器材 革兰氏染液、培养皿、培养瓶、生化鉴定管、血浆、玻片、接 种针（环）、酒精灯等。 五、鉴定程序 标本 涂片、染色 痰、脓汁、血、脑脊液粪便、呕吐物

平皿 可凝菌落 纯培养 涂片、染色、触酶实验 葡萄状（G+）、触酶（+） 血浆凝固酶、葡萄糖甘露醇分解、高盐耐受实验 甘露醇分解（需O2、甘露醇分解（—） 厌O2均+） 血浆凝固酶（+）、新生霉素（+）血浆凝固酶（—） 新生霉素 S R 表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌 六、质量控制 每周进行一次葡萄球菌标准菌株的革兰氏染色、触酶、血浆凝固酶及新生霉素实验。 七、实验室解释及临床意义

1、葡萄球菌广泛存在于自然界，医院内葡萄球菌的存在成为院 内交叉感染的重要因素。 2、葡萄球菌是化脓性感染的重要病原菌。 3、葡萄球菌引起尿路感染的比例很大。 八、安全防护措施 在操作过程中，要穿好工作衣，戴好口罩、手套，必要时戴眼 罩，严格按操作规程，结束后，用次氯酸溶液（0.2%）擦拭实 验台、显微镜手柄、载物台，浸泡手，然后紫外线消毒30分钟。 九、标本处理 废弃标本，培养基等统一由专门人员高压消毒处理。 十、参考文献 诊断细菌学，李仲兴等主编、第一版、香港、黄河文化出版社，1992。

细菌鉴定流程

细菌鉴定流程： 取一环标本四区划线接种平板（如为粪便标本接种SS,MAC平板） 培养18-24小时后取一区菌落革兰染色，报告为革兰阳性球菌/革兰阴性球菌/革兰阳性杆菌/革兰阴性杆菌，注意区分细菌和真菌 一般情况下不会给你们做革兰阳性杆菌和革兰阴性球菌 革兰阳性球菌鉴定流程： 先做3%触酶试验：阳性的为葡萄球菌或微球菌，阴性为链球菌或肠球菌 葡萄球菌和微球菌的区别：葡萄糖OF试验，葡萄球菌为F型，微球菌为O型 所以如果做到一个触酶阳性的革兰阳性球菌都要做下葡萄糖OF试验，DNA酶试验，新生霉素试验，血浆凝固酶试验 链球菌和肠球菌的区别：链球菌高盐和胆汁七叶苷试剂均为阴性，而肠球菌都为阳性。 链球菌属内区别：本来可以通过溶血来区分一些的，但是由于实验室的平板αβ溶血比较难区分 所以如果做到一个触酶阴性的革兰阳性球菌都要做下高盐，胆汁七叶苷，杆菌肽，奥普托欣，CAMP 如果做到一个奥普托欣敏感的革兰阳性球菌再加做胆汁溶菌试验和菊糖试验（阳性为变红）可判定为肺炎链球菌 革兰阴性杆菌鉴定流程： 先做氧化酶试验： 氧化酶阴性的革兰阴性杆菌都要做下KIA，MIU，葡磷两支(做MR，VP)，苯丙，枸橼酸盐，硝还，蛋白胨水（做吲哚试验），赖氨酸，鸟氨酸，氨对 如果KIA结果为A/A或者K/A的应为肠杆菌科细菌，如上面向个反应还不能区分细菌到种根据教科书307页加做试验。 一般情况下只会给你们做大肠埃希菌，志贺菌属（四种），沙门菌属（甲副，乙副，伤寒），弗劳地枸橼酸杆菌，肺炎克雷伯，产酸克雷伯，产气肠杆菌，阴沟肠杆菌，普通变形杆菌，奇异变形杆菌，沙雷菌属，摩根菌属，普罗威登斯菌属。 如果KIA结果为K/K应怀疑为不动杆菌属或者嗜麦芽窄食单胞菌：这两个菌区分可通过麦芽糖和赖氨酸试验区分， 如为氧化酶阳性，要做葡萄糖的OF试验（用非发酵），硝还产气，精氨酸双水解酶，一般情况下只有两种菌给你们做一个是铜绿假单胞菌，一个是粪产碱杆菌， 真菌给你们做的一般情况只有白色念珠菌和新生隐球菌，通过墨汁负染，芽管试验，厚膜孢

沃氏葡萄球菌的分离与鉴定

牙膏中沃氏葡萄球菌的分离与鉴定 摘要：采用金黄色葡萄球菌检测方法从牙膏中分离出一种葡萄球菌，应用VITEK 2全自动微生物分析系统鉴定为沃氏葡萄球菌，通过对其形态和生化特性进行鉴定，以期为今后沃氏葡萄球菌的深入研究提供参考依据。 关键词：葡萄球菌；分离；鉴定；生化鉴定 葡萄球菌属广泛的分布于自然界，是一种革兰氏阳性的球形细菌，显微镜下排列成葡萄串状，是医院感染的重要病原菌。沃氏葡萄球菌是葡萄球菌属的一种，有报道从人外伤分泌物中分离出沃氏葡萄球菌[1]，并有沃氏葡萄球菌致动脉栓塞的报道[2]。但也有学者在难治性牙周炎的龈下菌丛中发现了沃氏葡萄球菌[ 3-4 ]，并认为沃氏葡萄球菌是牙周致病菌[5]，王艳等[6]应用PCR技术克隆了沃氏葡萄球菌尿素酶基因的保守序列。但有关沃氏葡萄球菌的研究很少，本文在对牙膏进行金黄色葡萄球菌检测时，检出沃氏葡萄球菌，并对其生化特性进行研究，以期为今后沃氏葡萄球菌的研究提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 检验样品为旅游用牙膏（3g/支），来自送检样品，包装完好。 1.2 仪器和设备 所有试验用培养基均购自北京陆桥技术有限责任公司，VITEK 2 全自动微生物分析系统及相关配套试剂购自法国生物梅里埃公司。 1.2 方法 检验方法依据《化妆品卫生规范》（2007版）中金黄色葡萄球菌检测方法进行。操作步骤为： 1.2.1 样品的制备称取10g样品，加到装有玻璃珠及90ml灭菌生理盐水的三角烧瓶中，充分振荡均匀，静置15min。用其上清液作为1：10的检液。 1.2.2 增菌取1：10稀释的样品接种到90ml SCDLP液体培养基中，置36℃±1℃培养箱，培养24h±2h。 1.2.3 分离从增菌液中取1-2接种环，划线接种在Baird Parker氏培养基，置36℃±1℃培养24h-48h。 1.2.4 纯化挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上，置36℃±1℃培养箱，培养24h±2h。 1.2.5 染色镜检挑取分纯菌落，涂片，进行革兰氏染色，镜检。 2 结果与分析 2.1 菌落观察 菌落在Baird Parker培养基上呈圆形、光滑、较湿润，颜色为灰黑色，周围有晕圈；在血琼脂平板上菌落为圆形，灰白色，表面光滑，有少量溶血。 2.2 革兰氏染色镜检 将可疑菌落进行革兰氏染色，染色镜检为革兰氏阳性菌，排列成葡萄状，无芽孢和荚膜。 2.3 甘露醇发酵试验 将菌落接种于甘露醇发酵培养基中，36℃±1℃培养24h±2h，结果显示不能发酵甘露醇产酸。 2.4 血浆凝固酶试验 血浆和肉汤培养物混匀培养6h之内不凝固，结果显示血浆凝固酶阴性，而金黄色葡萄球菌阳性对照、阴性对照、肉汤对照结果分别为阳性、阴性和阴性。

金黄色葡萄球菌的分离及鉴定

金黄色葡萄球菌的分离 及鉴定 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020

金黄色葡萄球菌的分离及鉴定（食品检验） 1.金黄色葡萄球菌检验程序： 2.金黄色葡萄球菌鉴定程序： （1）：金黄色葡萄球菌在Baird-parker平板上菌落直径为2mm-3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围有一周浑浊带，外围有一层透明圈，用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生

的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。 （2）：染色镜检：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，无荚膜，直径约为μm～1 μm。 （3）：血浆凝固酶试验：挑取、Baird-Parker 平板或血平板上可疑菌落1 个或以上，分别接种到5 mL BHI和营养琼脂小斜面，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。取新鲜配置血浆 mL，放入小试管中，再加入BHI 培养物 mL～ mL，振荡摇匀，置36℃±1 ℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落到5 mL BHI，36 ℃±1 ℃培养18 h～48 h，重复试验。 （4）：结果判定：符合（1）、（2）、（3），可判定为金黄色葡萄球菌。 结果报告：在25 g（mL）样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。

05葡萄球菌属鉴定

标题：葡萄球菌属鉴定版本号：A修订号：O 文件编号：XXXX-XJ-SOP—005发布日期：2006年07月01日 生效日期：2006年07月01日发布部门：质量管理小组 编制人：审核人： 批准人（签章）：页码：第1页，共4页 葡萄球菌属鉴定 1、目的 对某一细菌的鉴定水平，可提供以下几方面的价值：（1）决定治病方法；（2）作流行病学研究；（3）了解细菌与感染的关系； （4）进行学术交流。 2、原理 根据葡萄球菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造等将葡萄球菌由属鉴定到具体种类。 3、标本 不同病种及不同检查目的而定，可为脓汁、渗透液、咽拭子、 血、脑脊液、食物、呕吐物、粪便等，置于无菌瓶内送检。 4、试剂及器材 革兰氏染液、培养皿、培养瓶、生化鉴定管、血浆、玻片、接种针（环）、酒精灯等。 5、鉴定程序 标题：葡萄球菌属鉴定版本号：A修订号：O 文件编号：XXXX-XJ-SOP—005发布日期：2006年07月01日 生效日期：2006年07月01日发布部门：质量管理小组 编制人：审核人： 批准人（签章）：页码：第2页，共4页 标本 涂片、染色 接种（视标本不同而定） 痰、脓汁、血、脑脊液粪便、呕吐物

渗出液、咽拭子增菌培养麦康凯或SS平皿 血平皿、麦康凯血平板 可凝菌落 纯培养 涂片、染色、触酶实验 葡萄状（G+）、触酶（+） 血浆凝固酶、葡萄糖甘露醇分解、高盐耐受实验甘露醇分解（需O2、甘露醇分解（—） 厌O2均+） 血浆凝固酶（+）、新生霉素（+）血浆凝固酶（—） 金黄色葡萄球菌 标题：葡萄球菌属鉴定版本号：A修订号：O 文件编号：XXXX-XJ-SOP—005发布日期：2006年07月01日 生效日期：2006年07月01日发布部门：质量管理小组 编制人：审核人： 批准人（签章）：页码：第3页，共4页 新生霉素 S R 表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌 6、质量控制 每周进行一次葡萄球菌标准菌株的革兰氏染色、触酶、血浆凝固酶及新生霉素实验。 7、实验室解释及临床意义 1、葡萄球菌广泛存在于自然界，医院内葡萄球菌的存在成为 院内交叉感染的重要因素。 2、葡萄球菌是化脓性感染的重要病原菌。 3、葡萄球菌引起尿路感染的比例很大。 8、安全防护措施 在操作过程中，要穿好工作衣，戴好口罩、手套，必要时戴眼

实验_金黄色葡萄球菌的分离和鉴定

鸡蛋卵清芽孢杆菌的分离和鉴定 专业：11生技姓名：张媛梦学号：201111001086 摘要：芽孢杆菌，细菌的一科，能形成芽孢（内生孢子）的杆菌或球菌。它们对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。绝大多数是一个菌体仅形成一个芽孢芽孢位于菌体内,由核心、皮层、芽孢壳和外壁组成。核心是芽孢的原生质体，内含DNA、RNA、可能与DNA相联系的特异芽孢蛋白质以及合成蛋白质和产生能量的系统。 关键字：芽孢杆菌分离纯化革兰氏染色 1、实验原理 1.1芽孢杆菌的分离： 芽孢杆菌无湿状态可耐低温－60℃、耐高温+280℃，耐强酸、耐强碱、抗菌消毒、耐高氧（嗜氧繁殖）、耐低氧（厌氧繁殖）。所以，在微量的磺胺药物的环境中依然可以繁殖。芽孢是芽孢杆菌特有的结构，其主要特点是抗性强，对高湍、紫外线、干燥、辐射等有毒化学物质有较强的抵抗力。 1.2芽孢杆菌的革兰氏染色： 革兰氏染色法可将细菌分成革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G－）两种类型，这是由于这两种细菌细胞壁结构和组合的差异所决定。首先利用草酸铵结晶紫初染，所有细菌都会着上结晶紫的蓝紫色。然后利用卢戈氏碘液作为媒染剂处理，由于碘与结晶紫形成碘-结晶紫复合物，增强了染料在菌体的滞留能力。 之后用95%乙醇作为脱色剂进行处理时，两种细菌的脱色效果不同。革兰氏染色细菌细胞壁含糖量高，壁厚且脂质含量低，肽聚糖本身并不结合染料，但其所有的网孔结构可以滞留碘-结晶紫复合物滞留在细胞壁，菌体保持原有的蓝紫色。而革兰氏阴性细菌细胞壁肽聚糖含量低，壁薄且脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，细胞壁通透性增加原先滞留下来的碘-结晶紫复合物容易被洗脱下来，菌体变为无色，用复染剂染色后又复变为染色剂颜色。 2、实验材料和设备 2.1.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏0.75g，蛋白胨2.5g，氯化钠1.25g，琼脂3.75g，蒸馏水250ml，PH7.0-7.2 121℃灭菌20min后倒平板。 2.2试剂 磺胺类药物、革兰氏染液 2.3仪器和设备

葡萄球菌属

葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌 形态染色：呈圆形或椭圆形，无鞭毛，无芽孢，除了少数菌株外不能形成荚膜。为革兰阳性球菌。 培养特性：兼性厌氧。对营养要求不高。最适生长温度：35-37℃，最适pH：7.4-7.6。 在普通培养基上形成2-3mm大小，呈金黄色，白色，柠檬色等不透明圆形凸起的菌落。 在血平板上菌落较大，致病性葡萄球菌可形成透明的β-溶血环。 耐盐，能在含10%-15%NaCl的培养基上生长。 在20%-30%CO2环境中，有利于其毒素的产生。 生化反应：葡萄球菌生化反应活泼： 1.触酶（+） 2.能分解葡萄糖，麦芽糖，乳糖和蔗糖，产酸不产气。 3.能分解氨基酸和蛋白质。 4.分解甘露醇。 5.液化明胶。 6.产生血浆凝固酶。 7.硝酸盐还原（+） 抗原构造：1.葡萄球菌A蛋白 2.多糖抗原 致病性：酶类：1.血浆凝固酶：结合凝固酶结合于菌体表面，能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集。游离凝固酶由细菌分泌至体外，可使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而是血浆凝固。 2.耐热核酸酶（TN）:能耐受100℃，15分钟加热，水解DNA和RNA 。 3.透明质酸酶（HAase）:能水解细胞外成分透明质酸，协助细菌在组织内传播扩散。 4.磷酸酶等。 毒素：致病性葡萄球菌能产生溶血毒素，为外毒素。 葡萄球菌产生的杀白细胞素（PVL）能损伤中性粒和巨噬细胞，形成脓液，导致组织坏死等。金黄色葡萄球菌根据其噬菌体可分为三群：噬菌体Ⅰ群可产生毒性休克综合征毒素。 噬菌体Ⅱ群产生表皮脱落样毒素，能引起人类烫伤样皮肤综合征。噬菌体Ⅲ群可产生耐热的肠毒素，能引起食物中毒，表现为急性肠胃炎。 致病类型：1.化脓性疾病：如皮肤化脓性感染，器官化脓性感染如气管炎，肺炎，心内膜炎等，以及全身感染如败血症及脓毒血症等。 2.毒素性疾病： 3.医院感染：主要为凝固酶阴性葡萄球菌产生，如表皮葡萄球菌引起人工瓣膜心内膜炎，静脉导管感染和人工关节感染等。 耐药性：对β-内酰胺类抗生素耐药。

病原菌的分离鉴定

竭诚为您提供优质文档/双击可除 病原菌的分离鉴定 篇一：常见病原菌采样分离过程 金黄色葡萄球菌采样分离过程 1、样本采集及初步分离 （1）奶样的采集： 采集有乳房炎和隐形乳房炎症状较明显的奶牛，消毒挤奶人手、奶牛乳头，弃2-3把乳，以乳样收集管无菌收集每个乳区乳样10-30mL，编好编号，4个乳区按：左前LF、左后Lh、右前RF、右后Rh编号，采集后尽快返回实验室，如不能尽快返回，应放在低温环境中带回。 （2）乳房皮肤拭子 用0.5mL肉汤润湿的消毒棉球拭子从乳房皮肤檫拭到乳头顶端，如果乳房土较多的话先檫掉土。拭子放入5mL离心管中，再放入冰盒中，迅速带回实验室处理。 （3）鼻腔拭子 用消毒棉球拭子插入动物鼻腔中，取出后放到盛有 0.5mL肉汤的5mL离心管中，放入冰盒中，迅速带回实验室

处理。 菌种的初步分离 首次分离时，用接种环蘸取样品在科玛嘉金黄色葡萄球菌显色平板上涂布接种，37℃，16-18小时培养后，从显色平板上挑取红色的单菌落，用脑心浸液（bhI）肉汤35℃培养18小时左右。 需要注意的是金葡菌初次分离时，接种显色培养基后培养时间最好不超过18h进行观察，因为超过24h后所有的葡萄球菌属细菌皆会导致显色培养基变色，进而出现假阳性。 2、菌种的保存 2mL灭菌离心管中加入400μL新鲜菌液+200μL60%灭菌甘油，-80℃（长期）或-20℃（临时）冻存。 3、菌种的复苏 如需再次纯化，或进行进一步实验，可将甘油保种的菌液在显色平板或哥伦比亚血琼脂平板上划线培养，或者将保种的菌液直接接入液体培养基培养。 肠球菌采样分离过程 1、样本采集及初步分离 （1）肛门拭子 以灭菌长棉签采集猪肛门拭子或蘸取新鲜粪便，棉拭子应以捻转方式插入肛门4-5厘米深，取出后放入1mL营养肉汤的灭菌离心管中，如不能立即接种，应放于低温环境中迅

葡萄球菌感染

【葡萄球菌感染】 葡萄球菌感染是常见的细菌感染性疾病，多表现为皮肤、软组织感染，也可由此导致病情严重、危及生命的败血症、心内膜炎、肺炎、脑膜炎等;此外尚可引起异物相关感染、尿路感染、骨髓炎、关节炎、肠炎等。 葡萄球菌为革兰阳性球菌，属于微球菌科，葡萄球菌属，此属有细菌32种，除金黄色葡萄球菌(金葡菌)产生血浆凝固酶外，其余多数菌种为凝固酶阴性，寄殖于人类皮肤。其中较常见的致病菌为表皮葡萄球菌 (表葡菌)、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌，少见的致病菌有:头葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、人葡萄球菌、吕克杜纳西葡萄球菌、解糖葡萄球菌、施氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、华纳葡萄球菌和木糖葡萄球菌；罕见致病或致病性不肯定的有:阿尔莱葡萄球菌、耳葡萄球菌、山羊葡萄球菌、肉葡萄球菌、溶酪葡萄球菌、产色葡萄球菌、海豚葡萄球菌、马胃葡萄球菌、胆汁葡萄球菌、鸡葡萄球菌、家畜葡萄球菌、中间葡萄球菌、克氏葡萄球菌、缓慢葡萄球菌、家蝇葡萄球菌、巴士德葡萄球菌、鱼发酵葡萄球菌、松鼠葡萄球菌和小牛葡萄球菌。 葡萄球菌直径为0.5～1.5μm，无动力、无芽胞、一般不形成荚膜。葡萄球菌在普通培养基生长良好，多数为需氧或兼性厌氧菌，生长最适宜的温度为30～370C和最适pH4～7.5，但在6.5～400C和pH4.2～9.3均可生长。耐盐性较强，在含10～15%氯化钠培养基中仍能生长。 葡萄球菌的基因组包括一条约280Okb的环状染色体、前噬菌体、质粒和转座子。染色体和染色体外的遗传因子均有编码细菌毒力和对抗生素耐药的基因，这些基因可通过染色体外的遗传因子在葡萄球菌不同菌株之间传播，也可向其他革兰阳性球菌传播。 （一）分型可根据葡萄球菌表型特征如：噬菌体溶解、血清反应、生化反应和耐药谱等分型;目前主要根据DNA的特征用DNA指纹图谱、质粒指纹图谱、凝固酶基因型等方法分型。根据表型特征的分型方法与根据DNA特征的分型方法相结合对调查耐药菌流行特征、追踪感染源、传播途径、考察感染控制效果等方面有重要作用。 （二）葡萄球菌的毒力金葡菌致病性最强，主要与其产生各种毒素和酶以及某些细菌抗原有关。 1.毒素

实验金黄色葡萄球菌的分离和鉴定

实验金黄色葡萄球菌的分 离和鉴定 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020

实验题目金黄色葡萄球菌的分离和鉴定 一、实验目的 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害，我们要分离出它们并研究。 二、实验原理 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1—2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10—15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，V—P反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 三、实验材料和设备

1.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（13%NaCl）：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠 130g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，121℃灭菌20min后倒平板。 肉汤培养基：酵母膏5g，蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000ml，121℃灭菌20min。 甲苯胺兰-DNA平板 2.试剂 磺胺类药物、革兰氏染液 3.仪器和设备 显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。 四、实验方法 金黄色葡萄球菌的分离： 1.称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，再加入200ul磺胺类药物，振荡10min，使土样充分混匀。利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。 2.从上述锥形瓶中取5ml上清液放入一只干净的试管中，30℃，200rpm，24h。 3.取培养好的菌液，按梯度稀释法稀释土壤悬液，依次制备成100、1000、10000、100000倍悬液后，分别取200ul涂布于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，置于37℃培养箱中培养24h。利用高盐培养基抑制其他细菌的生长，从而分离金黄色葡萄球菌。

牙膏中沃氏葡萄球菌的分离与鉴定

牙膏中沃氏葡萄球菌的分离与鉴定论文导读：血浆和肉汤培养物混匀培养6h之内不凝固，结果显示血浆凝固酶阴性，而金黄色葡萄球菌阳性对照、阴性对照、肉汤对照结果分别为阳性、阴性和阴性。将血平板上少量溶血菌落划线接种于营养琼脂，挑取菌落制成菌悬液，用GP鉴定卡通过VITEK2全自动微生物鉴定系统进行鉴定。关键词：葡萄球菌，分离，鉴定，生化鉴定 葡萄球菌属广泛的分布于自然界，是一种革兰氏阳性的球形细菌，显微镜下排列成葡萄串状，是医院感染的重要病原菌。论文参考网。论文参考网。沃氏葡萄球菌是葡萄球菌属的一种，有报道从人外伤分泌物中分离出沃氏葡萄球菌[1]，并有沃氏葡萄球菌致动脉栓塞的报道[2]。但也有学者在难治性牙周炎的龈下菌丛中发现了沃氏葡萄球菌[ 3-4 ]，并认为沃氏葡萄球菌是牙周致病菌[5]，王艳等[6]应用PCR技术克隆了沃氏葡萄球菌尿素酶基因的保守序列。但有关沃氏葡萄球菌的研究很少，本文在对牙膏进行金黄色葡萄球菌检测时，检出沃氏葡萄球菌，并对其生化特性进行研究，以期为今后沃氏葡萄球菌的研究提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 检验样品为旅游用牙膏（3g/支），来自送检样品，包装完好。 1.2 仪器和设备 所有试验用培养基均购自北京陆桥技术有限责任公司，VITEK 2 全自

动微生物分析系统及相关配套试剂购自法国生物梅里埃公司。 1.3 方法 检验方法依据《化妆品卫生规范》（2007版）中金黄色葡萄球菌检测方法进行。操作步骤为： 2 结果与分析 2.1 菌落观察 菌落在Baird Parker培养基上呈圆形、光滑、较湿润，颜色为灰黑色，周围有晕圈；在血琼脂平板上菌落为圆形，灰白色，表面光滑，有少量溶血。 2.2 革兰氏染色镜检 将可疑菌落进行革兰氏染色，染色镜检为革兰氏阳性菌，排列成葡萄状，无芽孢和荚膜。 2.3 甘露醇发酵试验 将菌落接种于甘露醇发酵培养基中，36℃±1℃培养24h±2h，结果显示不能发酵甘露醇产酸。 2.4 血浆凝固酶试验 血浆和肉汤培养物混匀培养6h之内不凝固，结果显示血浆凝固酶阴性，而金黄色葡萄球菌阳性对照、阴性对照、肉汤对照结果分别为阳性、阴性和阴性。 2.5 VITEK 2生化鉴定 将血平板上少量溶血菌落划线接种于营养琼脂，挑取菌落制成菌悬液，用GP鉴定卡通过VITEK2全自动微生物鉴定系统进行鉴定。生化编码

葡萄球菌

葡萄球菌链球菌肺炎链球菌 形态结构属G+菌，无鞭毛，无芽孢，为需氧或兼性厌氧。【葡萄球菌的有毒株也没有荚膜，剩下二者的有毒株都有荚膜】 培养 特征 普通培养基中正常生长 血琼脂平板上可形成完 全透明的溶血环。普通培养基中不能生长。 【必须加入血液，组织液 及葡萄糖才可培养。】 血琼脂平板上形成三种不 同的溶血环，只有乙型的 溶血环才是致病性菌形成 的。 普通培养基中与葡萄球菌 类似的菌落。但因为会产生 自溶酶，故如果向培养基中 加入胆汁，会产生菌体自溶 现象，出现“脐状”菌落。 血琼脂平板上形成甲型溶 血环。 生化反应分解菊糖不分解菊糖，不被胆汁溶 解 分解菊糖，被胆汁溶解 抵抗 力 强于其他无芽孢菌种较弱较弱 免疫 力 不能获得牢固的免疫同型间可获得牢固的免疫建立较稳定的特异性免疫 首选药物对多种抗生素敏感首选青霉素G荚膜多糖菌苗首选青霉 素 致病物质葡萄球菌溶血素 凝固酶 杀白细胞素 肠毒素 表皮剥脱毒素 毒性休克综合症 链球菌溶血素 链激酶 链道酶 透明质酸酶 荚膜 致热外毒素 M蛋白 脂磷壁酸 肺炎链球菌溶血素 荚膜 紫癜因子 所致疾病一病原菌寄生造成的： 化脓性感染：疥 病原菌寄生造成的： 化脓性感染：局部感染如 中耳炎，和如淋巴管炎。 大叶性肺炎 所致疾病二毒素造成的： 食物中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征 致热外毒素：猩红热 所致疾病三葡萄球菌性肠炎（假膜 性肠炎）是菌群失调引 起的。 M蛋白造成的变态反应性 疾病：急性肾小球肾炎， 心肌炎，风湿热。以上三 种疾病都是由乙种链球菌 造成。 所致疾病四由甲种链球菌（条件致病菌）造成的亚急性细菌性心内膜炎。 微生 物学 肠毒素检测