朱柠等:DCIK细胞用于肺癌临床免疫治疗253
I度+II度+III度+Ⅳ度为毒性反应发生率。
随访:所有患者在疗效评价之后每3个月随访1
次,行相关检查。如怀疑有肿瘤转移,加做相关检
查。病情进展的患者接受其他肺癌的治疗方案。仍
然接受随访。截止时间为2007年5月31日。
1.11统计学处理
数据采用均数±标准差的方式表示,采用f检验,所有统计学处理均采用统计软件SPSS15.O完成。
2结果
2.1细胞形态
DC制备标本在电镜下观察细胞表面呈绒毛状突起,且随诱导培养时间的延长,其突出的绒毛更为明显(图1)。用相差显微镜直接观察培养的DcIK细胞,细胞形态规则透亮(图2)。
2.2DCIK细胞体外杀伤A549肺腺癌细胞活性分析
本试验采用人体肺腺癌细胞A549作为靶细胞,检测诱导培养13天的DcIK细胞对人体肺腺癌细胞A549杀伤率:效靶比不同时,DCIK细胞的细胞毒活性强度不同,当效靶比为2.5:1、5:l、10:l、20:1时,DCIK细胞杀伤率分别为20.1%、29.5%、46.2%、55%。DcIK细胞对A549的杀伤活性随着效靶比的增加而增强(图3)。
2.3临床疗效评价
12例患者随访时间为5也4个月,中期随访时间为16个月。近期疗效评价中,完全缓解l例,部分缓解4例,病情稳定1例,近期有效率为41.6%,疾病控制率为50%,无肿瘤进展时间为11以O个月,中位无肿瘤进展时间为17个月。其中近期评价有效的患者临床主观症状改善明显,如:疼痛症状减轻至可以耐受,咳嗽症状减轻,声音嘶哑改善等。病情进展共6例,为远处转移或者为肺内转移,其中死亡2例,死亡原因为多器官功能衰竭(表1)。
2.4免疫学疗效评价
治疗结束后2周末。所有患者CD4+、CD8+、CD56+均较治疗之前有明显升高(P<O.05),CD3+未见明显升高;在DcIK细胞治疗之前,CD3+平均百分率为77.70%,治疗之后平均百分率为77.66%,扛0.019,P>0.05:在DCIK细胞治疗之前,CD4+平均百分率为24.63%,治疗之后平均百分率为35.78%,f=8.33。P<0.05;在DcIK细胞治疗之前,cD8+中位百分率为32.10%,治疗之后中位百分率为41.05%,扭7.38,P.<
图lDC在电子显微镜下细胞形态
左图为培养早期的Dc。右图为培养成熟的Dc。
图2DCIK细胞在相差显微镜下所示细胞形态
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DcIK细胞毒活性
2.5:l5:110:l20:l
效靶比(DcIK:A549)
图3诱导培养13天的DCIK细胞对人体肺腺癌细胞A549杀伤率分析
0.05:在DCIK细胞治疗之前,CD56+平均百分率为11.46%,治疗之后平均百分率为25.96%,扭30.05,P<0.05。提示该疗法可使CD3+CD56+双阳性细胞明显升高,增强了杀伤肿瘤细胞活性;并且提高了患者体内的CD4+、cD8+基础水平,可诱导患者产生特异性的抗肿瘤免疫反应(图4)。
2.5不良事件分析
在接受DcIK细胞过继免疫治疗的12例患者中,依据美国国立癌症研究所制定的通用药物毒性反应标准,并未出现III度+Ⅳ度的严重不良反应。有2例患者出现一过性的发热症状。
3讨论
DC是到目前为止发现的人体最有效的抗原提呈