神经营养因子

神经营养因子在周围神经损伤后的作用

神经营养因子在周围神经损伤后的作用 周围神经损伤后的修复和再生是个复杂的临床问题，如何提高周围神经损伤后重建的治疗效果一直是临床的研究热点。周围神经损伤后，发生瓦勒氏变性，雪旺细胞随即分裂、增殖，在原来的神经膜管内形成Burgner带，引导轴突以出芽方式再生并长入远侧残端，同时分泌神经营养因子等促进神经的再生[1]。脑源的神经营养因子（BDNF）是1982年Barde由猪脑提取液中获得的一种神经营养因子，其基本功能是促进神经元存活和突起生长，参与调节神经元的分化、增殖和存活。近年来研究发现BDNF在外周神经损伤后的修复中也发挥了重要作用。本文对这方面的研究进展综述如下： 1 BDNF的理化性质 BDNF是一种碱性蛋白，由120个氨基酸组成，分子量为l2.3KD，等电点为10，在生理状态下以二聚体的形式存在，氨基酸序列55%~60%与NGF、NT-3具有同源性，1989年，Leibroch等[3]实验证明BDNF与NGF、NT-3为同一个基因家族，被统称为神经营养素家族BDNF有两种不同的前体形式，分别是长链和短链前体，目前已知短链前体由248个氨基酸组成。人BDNF基因全长共744 bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG。BDNF所诱导的突触增强作用由cAMP介导的门控系统来调控。 2 BDNF的分布及来源 BDNF广泛分布于大脑和外周组织中，大脑皮质、海马及纹状体为BDNF 的主要分布区域，在中枢神经系统的背索与上丘含量亦较高。部分初级感觉神经元也可合成BDNF，并在周围靶组织和脊髓背角释放，其靶组织位于中枢和周围神经系统中。Wetmore等[4]在实验中发现，海马有能与BDNF特异结合的编码crKB基因高度表达，海马锥体细胞中有BDNF的存在；BDNF mRNA在海马锥体细胞、齿状回的颗粒细胞和皮质表现为阳性分布。目前公认的BDNF来源有神经元、雪旺细胞、血小板等。雪旺细胞是应激状态下周围神经组织BDNF增多的主要来源，损伤后神经断端远侧部有较多的BDNF。人类血小板中也含有BDNF，对于神经损伤部位的周围感觉神经元再生提供了一个重要来源。BDNFmRNA组成性表达于肺呼吸上皮组织，呼吸道变应性炎症时BDNF含量增加，并且T淋巴细胞可能是BDNF的细胞来源之一。

鼠神经生长因子合康复技术对脊髓损伤后神经源性膀胱治疗的研究

鼠神经生长因子合康复技术对脊髓损伤后神经源性膀胱治疗的 临床研究 王瑞科，刘岳，徐存理，史开太山东省济宁市第一人民医院 [摘要] 目的探讨鼠神经生长因子合康复技术对脊髓损伤后神经源性膀胱的治疗作用。方法将确诊为脊髓损伤后神经源性膀胱尿潴留的患者71例随机分为2组：治疗组41例，应用鼠神经生长因子合康复技术治疗；对照组30例，应用维生素B1、甲钴胺注射液、注射液丹参治疗。结果治疗前两组各项指标无显著性差异(p＞0.05)，治疗后治疗组各项指标优于对照组(p＜0.05)。结论鼠神经生长因子合康复技术对促进患者脊髓损伤后神经源性膀胱功能恢复，有一定程度的改善，能有效提高患者排尿障碍性相关生活质量。 [关键词] 鼠神经生长因子康复技术脊髓损伤神经源性膀胱尿潴留 英文：题目、姓名、单位、 Abstract： Objective Methods Results Conclusion Kry words： 神经源性膀胱是脊髓损伤的临床常见合并症之一。膀胱的中枢或周围神经损伤所引起的排尿功能控制障碍，称为神经源性膀胱[1]。据报道，截瘫患者伤后25年的病死率为49%，其中膀胱功能障碍引起的严重的尿潴留和尿路感染甚至慢性肾功能衰竭是脊髓损伤截瘫患者死亡的第一位原因[2]。因此，降低膀胱功能障碍程度，改善膀胱容积状态，减少尿潴留，对于提高脊髓损伤截瘫患者的生存质量，降低死亡率具有十分重要的现实意义。本研究尝试用鼠神经生长因子(mouse nerve growth factor，mNGF)和康复技术促进患者脊髓损伤后神经源性膀胱功能恢复，有一定程度的改善，能有效提高患者排尿障碍性相关生活质量。现报告如下。 1 资料与方法

10 鼠神经生长因子

注射用鼠神经生长因子 Zhusheyong Shu Shenjing Shengzhangyinzi Mouse Nerve Growth Factor for Injection 本品系由健康小鼠颌下腺提取的生物活性蛋白质。经分离、纯化后加入适宜稳定剂后冻干制成，不含防腐剂。 1 基本要求 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 小鼠颌下腺来源及采集 2.1.1 采用体重为20克以上60-90日龄健康雄性小鼠，小鼠应符合清洁级动物相关要求（附录XXX）。 2.1.2 采用适宜方法处死小鼠，经局部消毒处理后摘取颌下腺，剔除其他组织后备用。如需存放应冻存于-20℃以下，并规定保存时间。 2.2 原液 2.2.1 提取 采用适宜的方法将小鼠颌下腺破碎匀浆，离心取上清。 2.2.2 纯化 采用经批准的方法进行纯化、病毒去除或灭活后即为鼠神经生长因子原液。 2.2.3 原液检定 按3.1项进行。 2.3 半成品 2.3.1 配制 按成品规格配制，并加入适宜稳定剂。 2.3.2 半成品检定 按3.2项进行。 2.4 成品 2.4.1 分批 应符合“生物制品分批规程”规定。 2.4.2 分装及冻干 应符合“生物制品分装和冻干规程”及附录I A有关规定。 2.4.3 规格 应为经批准的规格。30μg(≥15000AU) /支18μg(≥9000AU) /支20μg(≥9000AU)/支 2.4.4 包装 应符合“生物制品包装规程“及附录I A有关规定。 2.5 病毒去除和灭活 生产过程中应采用经批准的方法去除和灭活病毒。如用灭活剂(如有机溶剂、去污剂)灭

重组人神经营养因子3说明书

重组人神经营养因子3说明书 产品名称 通用名称：重组人神经营养因子3 如需分装，可用注射用水、生理盐水、培养基或PBS稀释，稀释后浓度保持在100ug/mL以上。 稀释后置于-20℃保存期6个月，-80℃保存期12个月。 参考文献 1、Kalcheim C, Carmeli C, Rosenthal A (1992). "Neurotrophin 3 is a mitogen for cultured neural crest cells.". Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89 (5): 1661–5. doi:10.1073/pnas.89.5.1661. PMC 48512. PMID 1542658. CS1 maint: Multiple names: authors list (link) 2、Oz?elik T, Rosenthal A, Francke U (1991). "Ch romosomal mapping of brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin-3 genes in man and mouse.". Genomics 10 (3): 569–75. doi:10.1016/0888- 7543(91)90437-J. PMID 1889807. CS1 maint: Multiple names: authors list (link) 3、Hallb??k F, Ibá?ez CF, Persson H (1991). "Evolutionary studies of the nerve growth factor family reveal a novel member abundantly expressed in Xenopus ovary.". Neuron 6 (5): 845–58. doi:10.1016/0896-6273(91)90180-8. PMID 2025430.

鼠神经生长因子

注射鼠神经生长因子： 本品主要成分系从小鼠颌下腺提取的神经生长因子（mNGF），沉降系数2.5g，分子量13.5Kd，纯度≥98%，比活性≥5.0×105AU/mg蛋白，成品中含5%甘露醇和1%人血白蛋白作保护剂。本品为白色冻干疏松体。按瓶标示量溶解后溶液为无色澄明液体，不应有异物，混浊和沉淀。注射用鼠神经生长因子 - 药品名称 通用名：注射用鼠神经生长因子 商品名：恩经复 药理作用：大鼠体内试验结果表明：本品可改善由己二酮和丙烯胺造成的大鼠中毒性周围神经病所致的肢体运动功能障碍，缩短神经-肌肉动作电位潜伏期，并提高神经-肌肉动作电位幅度。组织病理学检查结果表明，本品有减轻动物胫神经的髓鞘肿胀发生率和降低变性胫神经纤维数量等作用。以上结果提示本品可能有促进损伤神经恢复的作用。 毒理研究：重复给药的毒性试验结果表明：1）Wistar大鼠肌注本品剂量分别为30μg/kg、60μg/kg和120μg/kg，连续给药12周，仅见120μg/kg剂量组的动物在给药28天后出现食欲减低，体重增长延缓，活动减少等。2）杂种犬肌注本品高剂量为17.8μg/kg，连续给药60天后，动物未见明显毒性反应。上海种小鼠的一般生殖毒性、致畸敏感期和围产期毒性试验结果表明：剂量在高达200μg/kg时，对动物的生育力、胚胎器官形成及时F1代仔鼠的发育无明显的影响。 目前尚无人体药代动力学资料。 正己烷中毒性周围神经病。

本品用2ml注射用水溶解，肌肉注射。一天1次，每次1支，4周为一疗程，根据病情经重可遵医嘱多疗程连续给药。 1．无严重不良反应。临床试验中未发现有肝、肾、心脏等功能损害。2．用药后常见注射部位痛或注射侧下肢疼痛（发生率分别为85%和29%），一般不需处理。个别症状较重者，口服镇痛剂即可缓解。3．偶见其它症状（如头晕、失眠等），发生率与安慰剂组比较无明显差别。 对本品过敏者禁用。 1．过敏体质者慎用。2．本品加注射用水振荡后即可完全溶解，如有不溶的沉淀、混浊或絮状物时不可使用。3．使用前应仔细检查药瓶，如有裂缝或破损等异常情况时不可使用。4．用药过程中，如有任何不适症状及时与医生联系询问。 孕妇及哺乳期妇女用药 本品对神经细胞有促进生长、发育的作用，建议孕妇及哺乳期妇女慎用。 儿童用药 因目前尚没有儿童应用本品的资料，故儿童用药请遵医嘱。 老年患者用药 尚不明确。 本品应按说明书规定剂量使用，除特殊需要，不应过量用药（每日用量不超过80μg），否则有可能出现神经敏感性增强现象。

神经生长因子的研究进展

神经生长因子的研究进展 赵永芳秦妮张愚 （武汉大学生命科学院430072） 神经生长因子（Nerve Growth Factor,NGF)是一种由118个氨基组成的蛋白质，已成为神经科学领域中最引人注目的课题之一。NGF是维持交感神经元和感觉神经元生长、发育和功能所必需的营养因子。NGF的营养作用与一些神经元退行性疾病，如人们关注的Alzheimer's疾病的发生与发展有关密切作用；在某些神经系统损伤时，多次给予明显降低；在一些肿瘤中NGF及其受体常有高浓度表达。这些现象都促使人们将目光越来越多地集中到NGF上，并对其临床应用寄予很大的期望。现将近年来有关这方面的研究和进展介绍如下。 1 神经生长因子（NGF）的发现及理化性质 NGF的最早发现在S-180细胞中。Buerker试验了给发育中的神经系统施加额外的同源性的组织（例如小鼠肿瘤组织），将小鼠肉瘤S-180接种在3天鸡胚的体腔内，发现感觉和交感神经链加大了20%，瘤内有了密集的神经支配。Levi-Montalcini用两组实验检测，S-180的神经营养作用是由于瘤细胞产生了一种可扩散和物质，它有刺激神经元生长以及神经纤维延长的功能。后来人们发现小鼠会颌下腺含的NGF比S-180细胞的效力大一万倍。通达对小鼠颌下腺NGF的研究，获得了许多关于NGF理化性质的数据。 小鼠颌下腺中NGF以Ts NGF复合物的β-NGF亚基存在。7s NGF复合物由α、β、γ3个亚基和锌离子构成，化学计算式为α2βγ2，分子量为14万，在酸（pH<5 ）、碱（pH>8）或单纯衡释时会被解离。α亚单位是非匀质的酸性糖蛋白，分子量为26KD，pH为4.3。一般认为它起保护性或携带载体作用，因为它能阻止γ亚单位对β亚单位的分解；而γ亚单位是一种精基酸特异性酯肽酶，参予NGF前体的加工，pI为5.5；锌离子则有稳定亚单位结构的作用；具备生物学功能的β亚单位是一个26.5KD的聚体由3个二硫键共价结合起来的二聚体，等电点是9.3。 从小鼠颌下腺分离纯化NGF的方法已建立子多种，其中一种是利用7sNGF复合物和βNGF亚基的不同等电点，通过两次离子交换柱层析得到NGF。这种方法所分离出来的NGF二聚体缺少17-20%C末端Arg残基和35%N末端8肽序列，这是由于当暴露在颌下腺抽提物中的两种特异性酶切造成。其中缺少1个或2个C末端Arg的β-NGF的生物学活性。但却阻碍了β-NGF与α、γNGF的重新合成7sNGF复合物。但也有人认为，完整分子与缺失Arg的分子相比，在生物学效应上有不同，并会导致生理上的相关变化。这些争论还有待有一步探讨。 2 NGF的生物学作用 NGF对生命某阶段的一些神经元群的生存和发展是必需的。交感神经元始终都对NGF起反应，但在胚胎和初生期的敏感性最高。孵化鸡胚在14天之前，感觉神经节有敏感性，此后敏感性就降低。NGF在机体组织器官（包括脑）中分布广泛。它在靶组织中的浓度与交感神经在靶区分布的密度和mR-NA含量有关系。 从头所周知，无论是体外或体内，NGF对神经元的存活和生长是必须的，以抗NGF血清处理神经节细胞的组织进行培养，或去除培养基中的NGF，都能使细胞迅速死亡。Cohen和Levi-Montalcini发现，注入抗NGF的血清，可使初生小鼠产生的天然NGF的活性丧失。这些

金路捷(注射用鼠神经生长因子)A

金路捷（注射用鼠神经生长因子）A & Q 1. 什么是神经生长因子？ 神经生长因子（NGF）是神运营养因子中最早被发现，目前研讨最为透彻的，具有神经元养分和促突起生长双重生物学功用的一种神经细胞生长调理因子，它对中枢及四周神经元的发育、分化、生长、再生和功用特性的表达均具有重要的调控作用。NGF包括α、β、γ三个亚单位，活性区是β亚单位，由两个118个氨基酸组成的单链经过非共价键结合而成的二聚体，与人体NGF的构造具有高度的同源性，生物效应也无分明的种间特异性。 2. 神经生长因子研讨历程 1953年意大利迷信家Levi-Montalcini发现了NGF。 1960年美国迷信家Cohen提取纯化NGF，证明其生物活性。 1970年Cohen证明NGF是个复合蛋白。 1984年NGF的研讨重点从四周神经零碎拓展到中枢神经零碎，乃至非神经零碎。 1986年Montalcini和Cohen因对NGF研讨的出色而荣获诺贝尔生理医学奖。 90 年代国际外多家制药公司和药物研讨机构相继开端停止NGF开发研讨。 2000年注射用鼠神经生长因子金路捷研讨成功并上市 3. NGF在机体中的散布？ NGF在人体内次要散布于脑、神经节、虹膜、心脏、脾、胎盘等组织及成纤维细胞、平滑肌、骨骼肌、胶质细胞、雪旺氏细胞等。 4. 制备来源 （1）雄性小鼠颌下腺：与人类NGF有90%同源性 （2）牛精浆 （3）蛇毒 （4）豚鼠前列腺 5. 理化特性 （1）7s NGF：分子量接近140kD，沉降系数为7s的复合物．它由α，β，γ三个亚单位和锌离子构成。其生物活性位于β亚单位。β亚单位是2条由118个氨基酸组成的单链，经过非共价键结合而成的二聚体。 （2）2.5s NGF：分子量13～14kD，沉降系数为2.5s。其构造与β亚基根本相反。故又称β－NGF。 6. 受体分类 （1）膜受体： 低亲和力受体：快NGF受体，跨膜糖蛋白，分细胞内部分、跨膜衔接区、胞浆局部，具有G蛋白偶联的信号转导功用。 高亲和力受体：慢NGF受体，跨膜糖蛋白，具有酪氨酸蛋白激酶活性。 （2）核受体

大鼠神经营养因子3(NT-3)说明书

大鼠大鼠神经营养因子神经营养因子3（NT-3）酶联免疫酶联免疫分析分析分析 试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围检测范围：： 96T 20 ng/L -480 ng/L 使用目的使用目的：： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及组织样本中神经营养因子3（NT-3）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠神经营养因子3（NT-3）水平。用纯化的大鼠神经营养因子3（NT-3）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入神经营养因子3（NT-3），再与HRP 标记的神经营养因子3（NT-3）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的神经营养因子3（NT-3）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠神经营养因子3（NT-3）浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液 6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（960 ng/L ） 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B 液 6ml ×1/瓶 12 密封袋 1个 标本标本要求要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 480 ng/L 5号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液 240 ng/L 4号标准品 150μl 的5号标准品加入150μl 标准品稀释液 120 ng/L 3号标准品 150μl 的4号标准品加入150μl 标准品稀释液 60 ng/L 2号标准品 150μl 的3号标准品加入150μl 标准品稀释液 30 ng/L 1号标准品 150μl 的2号标准品加入150μl 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、

注射用鼠神经生长因子说明书

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【成分】苏肽生主要成分系从小鼠颌下腺中提取纯化的神经生长因子(mNGF)，沉降系数2.5S，分子量13.5Kd，纯度≥98%，比活性≥5.0×105AU/mg蛋白。成品中含5%甘露醇和1%人血白蛋白作保护剂。 【性状】苏肽生为白色或类白色疏松体或粉末。按瓶标示量溶解后溶液应为无色澄明液体，不应有异物、混浊和沉淀。加入2ml生理盐水或灭菌注射用水后迅速溶解为无色澄明液体。 【适应症】苏肽生具有促进神经损伤恢复的作用。用于治疗视神经损伤。 【用法用量】 1、临用前每瓶注射用鼠神经生长因子用2ml氯化钠注射液(或灭菌用水)溶解; 2、肌肉注射，每次30ug，一日一次，3-6周为一疗程。小儿用量一般为25ug/次，或遵医嘱使用。 【药代动力学】小鼠肌肉注射10μg/kg的125I-NGF血药浓度时间曲线符合二室开放模型，T1/2(?)为 4.83hr，Tmax为O.71hr，Cmax为1.74ng/m1，生物利用度为52.7%。 胃、肠、肾等组织的浓度高，其次是心、肝、脾、颌下腺等组织，脑和脊髓等组织也有一定分布。肌肉注射125I-NGF，以尿排出为主，48hr排出总放射性的65.5%。lng/ml125I-NGF与

人脑源性神经营养因子(BDNF)elisa试剂盒使用说明书

人脑源性神经营养因子(BDNF)elisa试剂盒使用说明书 Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置 标准品稀释液：1.5ml×1瓶 酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96） 【人脑源性神经营养因子(BDNF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算： 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒组成： 封板膜:2片（48）/2片（96） 说明书:1份 密封袋:1个 标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脑源性神经营养因子(BDNF) 水平。用纯化的人脑源性神经营养因子(BDNF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(BDNF) ，再与HRP 标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(BDNF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下