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抗体介导的针对SHIV的保护

(bNAbs)targeting HIV-1envelope (Env)have demonstrated complete protection against simian-human immunodeficiency virus (SHIV)challenges in rhesus mon-keys (1–6)and are currently being evaluated as a strategy to prevent HIV-1acquisition in humans.However,the anatomic sites and mechanisms of antibody-mediated protection have not been fully elucidated.In particular,it remains un-clear whether bNAbs completely block virus at the local portal of entry after mucosal virus challenge.To address this question,we performed comprehensive necropsies following intravagi-nal SHIV-SF162P3challenge of rhesus monkeys that received a fully protective dose of the potent V3glycan –dependent bNAb,PGT121(7).

We verified the protective efficacy of PGT121against intravaginal challenge with SHIV-SF162P3(8–10)in a preliminary study in 12female rhesus monkeys (Macaca mulatta ).Consistent with pre-viously published data (1),an intravenous infusion of 2mg PGT121per kilogram of body weight (mg/kg)afforded complete protection against intravaginal challenge with 5×104median tissue

50as evidenced by no detectable plasma viral RNA for more than 6months following challenge (fig.S1).To evaluate the mechanism of this observed protection,24female rhesus monkeys received 2mg/kg PGT121(N =12)or an isotype-matched sham control antibody (N =12)by the intra-venous route on day –1and were challenged in-travaginally with 5×104TCID 50SHIV-SF162P3on day 0.Serum PGT121levels were 20to 50m g/ml on the day of challenge in all animals.We per-formed serial necropsies on day 1(N =4),day 3(N =4),day 7(N =10),and day 10(N =6)fol-lowing challenge for comprehensive assessments of virologic,immunologic,and transcriptomic profiles in multiple tissues in each animal (11).Tissue viral RNA levels were quantified by an ultrasensitive nested reverse transcription poly-merase chain reaction assay (12),which assessed 30independent tissues from each animal from the female reproductive tract,draining lymph nodes,gastrointestinal tract,distal lymph nodes,tonsil,spleen,bone marrow,thymus,lung,liver,and central nervous system.In 75%(three out of four)of PGT121-treated animals on day 1and day 3following SHIV challenge,we observed low levels of viral RNA in at least one tissue distal to the female reproductive tract,primarily in drain-ing lymph nodes and gastrointestinal tissue (Fig.1A).Viral RNA was observed more frequently in PGT121-treated animals than in sham controls at these time points (P =0.02,two-sided Fisher ’s exact test)(Fig.1A);this observation suggested that the antibody may have facilitated transloca-tion of virus across the mucosal barrier.On day 7,viral RNA distal to the female reproductive tract was still detected sporadically in 75%(three out of

four)of PGT121-treated animals but was not de-tected in plasma.Viral RNA was detected far more extensively in sham controls than in PGT121-treated animals on day 7(P =0.01)(Fig.1B).On day 10,viral RNA was not detected in any PGT121-treated animals at distal sites but was present at high levels in all tissues in the sham controls (P =0.01),as expected (13–15)(Fig.1C).

Viral DNA was also observed sporadically and at a declining frequency in PGT121-treated ani-mals on days 1,3,and 7after challenge (Fig.2,A to C).In contrast,viral DNA was detected at in-creasing magnitude and frequency over time in the sham controls,as expected.Taken together,these data show that low but declining levels of viral RNA and viral DNA were detectable in dis-tal tissues in PGT121-treated animals for ~7days following SHIV-SF162P3challenge but were un-detectable by day 10(Figs.1and 2and fig.S2).In our SHIV-SF162P3challenge stock,the level of viral gag RNA (7.5×108copies/ml)was ~3logs as great as the corresponding level of viral gag DNA (7.9×105copies/ml)(Fig.2D).In the four animals that exhibited viral DNA in distal tissues on days 1to 7(BD66,CP20,E41,and 6345),the median level of viral RNA (6.9×103copies/108cell equivalents)was similarly ~3logs as high as the median level of viral DNA (<10copies/108cell equivalents)at the site of inoculation in the female reproductive tract,consistent with the notion that this virus largely represented the in-put challenge stock.In contrast,in distal tissues,the median level of viral RNA (4.0×101copies/108cell equivalents)was slightly lower than the me-dian level of viral DNA (2.2×102copies/108cell equivalents)(Fig.2D).Moreover,in the day 1genital-pelvic lymph node from monkey BD66,viral RNA and viral DNA were detected in purified (>99%)CD4+T lymphocytes (Fig.2E).These data sug-gest that the viral DNA detected in distal tissues reflected a limited degree of new virus replication at the distal sites.

We next assessed Gag-specific CD8+and CD4+T lymphocyte responses in multiple tissues from each animal by multiparameter intracellular cytokine staining assays (16,17).CD8+T lympho-cyte responses were not detected in any tissue at any time point in the PGT121-treated animals,but these responses were observed in the female genital tract in all sham controls on day 7and day 10(figs.S3to S5).The lack of detectable T lymphocyte responses in the PGT121-treated ani-mals indicates insufficient antigen exposure to induce measurable cellular immune responses and suggests that virus-specific T cell responses were likely not responsible for the clearance of virus in distal tissues at these early time points.

We next evaluated gene expression profiles in multiple tissues in each animal at necropsy (11,18).A multidimensional scaling plot revealed differ-ences between PGT121-treated animals and con-trols for all tissues analyzed (fig.S6).We compared transcriptomic profiles in viral RNA –positive com-pared with viral RNA –negative tissues in the PGT121-treated animals.Inflammasome-related genes [P =0.00013;the NLR domain,pyrin domain containing 3(NLRP3),Toll-like receptor genes],

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Center for Virology and Vaccine Research,Beth Israel Deaconess Medical Center,Boston,MA 02215,USA.2Case Western Reserve University,Cleveland,OH 44106,USA.3The Scripps Research Institute,La Jolla,CA 92037,USA.4AIDS and Cancer Virus Program,Leidos Biomedical Research,Frederick National Laboratory,Frederick,MD 21702,USA.5

Harvard Medical School,Boston,MA 02115,USA.6Bioqual,Rockville,MD 20852,USA.7University of Massachusetts Medical School,Worcester,MA 01655,USA.8Ragon Institute of Massachusetts General Hospital,Massachusetts Institute of Technology,and Harvard,Cambridge,MA 02139,USA.

*These authors contributed equally to this work.?Corresponding author.Email:dbarouch@https://www.wendangku.net/doc/4115040724.html,

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and interferon-stimulated

genes [P =0.000046;IFITM2,interleukin 8(IL8),S100A8]were up-regulated specifically in viral RNA –positive local and distal tissues from animals that received PGT121(Fig.3A and fig.S7).Pathway analysis (19)confirmed up-regulation of several path-ways associated with host response to viruses (interferon-a and interferon-b )and cellular acti-vation (hypoxia,tumor necrosis factor signaling via nuclear factor k B,and Janus kinase signal

transducers and activators of transcription sig-naling)in these tissues (fig.S8).Moreover,a linear regression analysis revealed a transcrip-tomic signature that correlated with viral RNA levels in PGT121-treated animals necropsied on days 1,3,and 7(P =0.00029)(Fig.3B).Network inference analysis (20,21)revealed that this sig-nature involved activation of innate immunity and antiviral pathways,including type 1interferon signaling [false discovery rate (FDR)=1.64×10?46],host response to viral infection (FDR =2.85×10?29),regulation of viral replication (FDR =2.49×10?17),and response to interferon-g (FDR =1.91×10?16)(Fig.3C and fig.S9).

We also observed an increase in the number of differentially expressed total and interferon-stimulated genes over the first 7days in viral RNA –positive tissues from PGT121-treated ani-mals (fig.S10).By day 7,up-regulation of classic antiviral restriction factors such as IRF7,TRIM5,

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Fig.1.Viral RNA in tissues following SHIV-SF162P3challenge.Tissue viral RNA (log RNA copies/108cell equivalents)across multiple tissues at necropsy in PGT121-treated animals and sham controls on (A )day 1(AY56,AY96,BD66,and BE34)and day 3(BB60,BB90,CP20,and E41),(B )day 7,and (C )day 10following SHIV-SF162P3challenge.Colors on each plot reflect individual animals (see keys).Values plotted below the horizontal line indicate samples for which viral RNA was not measured above the threshold of detection.Values to the right of the vertical line reflect samples distal to the female reproductive tract.Red arrows highlight viral RNA –positive distal tissues in the PGT121-treated animals.P values reflect Fisher ’s exact tests.Data are presented based on calculations normalized as log viral RNA copies/108diploid genome equivalents of DNA;for this study,the majority of the specimens analyzed contained 106to 107cell equivalents.

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Fig.2.Viral DNA in tissues following SHIV-SF162P3challenge.Tissue viral DNA (log DNA copies/108cell equivalents)across multiple tissues at necropsy in PGT121-treated animals and sham controls on (A )days 1and 3,(B )day 7,and (C )day 10following SHIV-SF162P3challenge.Colors on each plot refer to indi-vidual animals (see keys).Values plotted below the horizontal line indicate samples for which viral DNA was not measured above the threshold of detection.Values to the right of the vertical line indicate samples distal to the female reproductive tract.Red arrows highlight viral DNA –positive distal tissues in the PGT121-treated animals.

Data are presented based on calculations normalized as log viral DNA copies/108diploid genome equivalents of DNA;for this study,the majority of the specimens analyzed contained 106to 107cell equivalents.(D )Viral RNA and viral DNA in the SHIV-SF162P3stock (left)and in female reproductive tract (FRT)and distal tis-sues in the four animals that were viral DNA –positive on days 1to 7(BD66,CP20,E41,and 6345)(right).Median,red line.(E )Viral RNA and viral DNA in total cells (circles)and in purified CD4+T lymphocytes (triangles)from BD66genital-pelvic lymph node on day 1.Data are based on analysis of 2.7×106purified CD4+T lymphocytes.

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APOBEC,and IFITM was evident in these tissues,suggesting an evolving antiviral innate response.The late expression of these antiviral restriction factors is consistent with our previous findings in

simian immunodeficiency virus SIVmac251infec-tion (11).The up-regulated genes in viral RNA –positive tissues from PGT121-treated animals also partially overlapped with a previously de-fined transcriptomic signature for viral replica-tion (22)(fig.S11).

To investigate whether the low levels of de-tectable virus in distal tissues in PGT121-treated

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Fig.3.T ranscriptomic signature in viral

RNA –positive tissues from PGT121-treated animals.(A )Heat maps reveal inflammasome and interferon-stimulated gene (ISG)signatures in viral RNA –positive compared with viral RNA –negative local and distal tissues from PGT121-treated tissues on day 1following SHIV-SF162P3challenge.Gene expression is represented by stand-ardized expression

(Z -score)with P <0.05.Red and blue corre-spond to up-regulated and down-regulated genes,respectively.P values represent the significance of the two clusters using Fisher ’s exact tests.From two monkeys (BD66and BE34),29samples are represented;they reflect 10viral RNA –positive samples and 19viral RNA –negative samples.(B )Linear regression analysis of viral RNA as a continu-ous variable and gene expression (Linear Models for Microarray Data t test

with P <0.05)in viral

RNA –positive tissues from PGT121-treated animals reveals a tran-scriptomic signature that correlates with levels of viral RNA.Heat map represents the top positively correlated genes that were part of the full regression signature.From four monkeys,26samples were included in this analysis,reflecting

10samples from day 1,2samples from day 3,and 14samples from day 7.(C )Network of genes that positively

correlated with levels of viral RNA in tissues from PGT121-treated animals.Nodes represent genes and purple lines represent coexpression between genes.

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animals were infectious,we adoptively transfer-red 30million cells from the following animals and tissues into na?ve hosts by the intravenous route:BD66(genital-pelvic lymph node;day 1),CP20(ileocecal lymph node;day 3),and 6345(spleen;day 7).Tissues from BD66and 6345were positive for both viral RNA and viral DNA,whereas tissues from CP20were negative for viral RNA but positive for viral DNA.Adoptive transfer of cells from BD66and 6345into na?ve hosts efficiently transferred infection,resulting in 5.8to 7.1log RNA copies/ml of replicating virus by day 7after adoptive transfer (Fig.4)and demonstrating that the viral RNA and viral DNA detected in these samples included replication-competent infectious virus when removed from the host milieu of antibody and innate factors.Cells from CP20did not detectably transfer in-fection;this suggests that the amount of virus in this sample was too low or that the viral DNA in this sample was defective and noninfectious.In summary,we detected low levels of viral RNA and/or viral DNA in at least one tissue distal to the female reproductive tract in 87.5%(seven of eight)of monkeys on days 1,3,and 7following intravaginal SHIV-SF162P3challenge,despite receiving a fully protective dose of PGT121(fig.S12).Virus in distal tissues triggered tran-scriptomic responses involving activation of in-nate immunity and antiviral pathways,and a subset of these samples proved infectious after adoptive transfer into na?ve hosts.These data demonstrate that PGT121did not completely block the challenge virus at the mucosal portal of entry.Instead,some virions appeared to

tran-

sit to distal tissues,where they were progressively cleared over a period of ~7days and potentially involved Fc effector mechanisms,such as antibody-dependent cellular cytotoxicity.The viral RNA to viral DNA ratio at distal sites (Fig.2D),the presence of viral RNA and viral DNA in purified CD4+T lymphocytes (Fig.2E),and the transcrip-tomics signatures (fig.S11)suggested a limited degree of new virus replication at distal sites.Although our studies were limited to PGT121,it is likely that other bNAbs,as well as vaccine-elicited antibodies (9),also involve viral clearance in distal tissues rather than complete blockade of virus at the mucosal surface.These data empha-size the potential importance of antibodies to clear virally infected cells in tissues to block the establishment of chronic infection (9,23–25).These data are also consistent with previous find-ings from our laboratory and others that the virus can disseminate rapidly and trigger inflamma-tory responses in host tissues following mucosal challenge (11,26–28).Moreover,our findings are consistent with the observation that bNAbs may be able to abort initial infection in infant rhesus monkeys when administered therapeutically after SHIV challenge (29).The possibility that PGT121may have actually facilitated virus trans-location across the mucosal barrier,potentially via immune complexes captured on Fc receptor –bearing cells,warrants further investigation.

Our findings have important implications for the development of vaccines,passively transfer-red antibodies,and other interventions to block HIV-1infection.In particular,our data suggest that a systemic component of an antiviral inter-vention may be necessary for optimal efficacy to clear early foci of disseminated virus in distal tissues.It is noteworthy that high concentrations of topically applied bNAbs are required to pro-tect against mucosal SHIV challenge,whereas much lower serum concentrations of intravenous-ly administered bNAbs are required for protection (30,31).Our data also show that the initial virus that is seeded in distal tissues may still be vul-nerable to immune-mediated elimination before the establishment of a permanent viral reservoir.Further exploitation of this vulnerability may lead to improved HIV-1eradication strategies,as well as improved HIV-1prevention strategies.

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R.S.Veazey et al .,Nat.Med.9,343–346(2003).

ACKNOWLEDGMENTS

We thank A.Schultz,Q.Dang,M.Pensiero,M.Ferguson,F.Stephens,J.Nkolola,K.Smith,J.Smith,S.Blackmore,L.Parenteau,S.Mathew,S.Levin,C.Shaver,and Z.Pippin for generous advice,assistance,and reagents.The SIVmac239peptides were obtained from the NIH AIDS Research and

Reference Reagent Program.The data presented in this paper are tabulated in the main paper and in the supplementary

materials.The authors declare no competing financial interests.Correspondence and requests for materials should be addressed to D.H.B.(dbarouch@https://www.wendangku.net/doc/4115040724.html,).We acknowledge support from the National Institutes of Health (AI060354,AI095985,AI096040,AI100645,AI100663,AI124377,

HHSN261200800001E)and the Ragon Institute of Massachusetts General Hospital,Massachusetts Institute of Technology,and Harvard.Transcriptomics data can be accessed at GEO (GSE83702)and the National Center for Biotechnology Information,NIH (17948367).

SUPPLEMENTARY MATERIALS

https://www.wendangku.net/doc/4115040724.html,/content/353/6303/1045/suppl/DC1Materials and Methods Supplementary Text Figs.S1to S12References

4May 2016;accepted 10August 2016Published online 18August 201610.1126/science.aag0491

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Fig.4.Adoptive transfer studies.Adoptive transfer of 30million cells into na?ve hosts by the intravenous route from tissues from BD66(genital-pelvic lymph node from day 1),CP20(ileocecal lymph node from day 3),and 6345(spleen from day 7).Plasma viral RNA copies/ml are shown following adoptive transfer.

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originally published online August 18, 2016

(6303), 1045-1049. [doi: 10.1126/science.aag0491]353Science Dennis R. Burton and Dan H. Barouch (August 18, 2016)

Mark G. Lewis, Wenjun Li, Rafick-Pierre Sekaly, Jeffrey D. Lifson,Colantonio, Courtney Gittens, Chantelle Baker, Wendeline Wagner, Patricia Giglio, Abishek Chandrashekar, Peter Abbink, Arnaud

Mayuri Shetty, Jessica Jimenez, Jade Mondesir, Benjamin Lee, Borducchi, Crystal Cabral, Lauren Peter, Amanda Brinkman,Li, Elizabeth Chipriano, Brian Berkemeier, Kelli Oswald, Erica Jinyan Liu, Khader Ghneim, Devin Sok, William J. Bosche, Yuan systemic clearance of distal virus

Antibody-mediated protection against SHIV challenge includes Editor's Summary

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LPS模拟肽疫苗诱导保护性免疫应答的研究

LPS模拟肽疫苗诱导保护性免疫应答的研究脂多糖(lipopolysacchride,LPS)是引起多种感染性疾病的革兰氏阴性(G~-)菌重要的共同致病物质,可导致败血性休克等严重病理变化。鉴于G~-菌内毒素血症的高发病率和严重危害,针对LPS的治疗与预防的研究始终是人们极为关注的课题。目前尚无LPS或类脂A拮抗剂用于临床或进入临床观察;而在预防方面,预存抗LPS抗体与败血症的发生、大样本住院肿瘤患者、烧伤、外科手术等因感染死亡例数呈负相关的现象早已被证实,即对LPS诱发的病理进程有明确的保护作用,但这种保护力只限于对接种菌或特定血清型的LPS;而被动输入抗体则有时相限制,即感染前1小时内应用有效,这显然只适于动物实验。理想的LPS疫苗应能诱导再次免疫应答,所产生的抗体应是具广谱预防与保护作用。目前LPS疫苗研制所面临的主要困难包括:①LPS为TI-I(非胸腺依赖抗原-I)型抗原,自然诱导产生的抗体亲和力低、调理杀菌力弱,且无再次抗体应答,亦不能诱导特异性细胞免疫;②源于不同种属、不同株乃至不同血清型的LPS可具不同的抗原性,只能诱导产生与接种菌或LPS结合的抗体。因而至今尚无批准进入临床实验的具广谱保护作用的LPS疫苗。针对上述存在的问题,本课题的主要研究思路是:利用噬菌体肽库筛选获得的短肽模拟LPS的保守性结构表位,将其抗原表位的化学性质由脂多糖改变为短肽,由此使TI抗原改变为TD抗原,进而诱导机体内产生有效的再次抗体应答和交叉保护性免疫。本课题组在前期的工作中,从噬菌体肽库中筛选了数十个模拟位克隆,选择三个模拟鼠伤寒杆菌LPS表位的序列合成短肽,并证明用这三种模拟短肽免疫动物后,可诱发机体产生针对鼠伤寒杆菌LPS的抗体应答,但

自身免疫性疾病概述

自身免疫性疾病 Autoimmunity Diseases 一概述（一）自身免疫性疾病的概念：自身免疫性疾病——是免疫系统对宿主自身抗原发生正性应答、造成其组织或器官的病理性损伤、影响其生理功能、并最终导致各种临床症状的状态。（二）自身免疫性疾病的基本特征： 1．多数自身免疫病是自发或特发性的，感染、药物等外因可能有一定的影响；2．患者血清中有高水平的γ-球蛋白； 3．患者血液中有高效价的自身抗体或出现与自身抗原反应的致敏淋巴细胞；4．病损部位有变性的免疫球蛋白沉积，呈现以大量淋巴细胞和浆细胞浸润为主的慢性炎症； 5．病程一般较长，发作与缓解交替出现，仅有少数为自限性； 6．女性多于男性，老年多于青少年； 7．有遗传倾向； 8．应用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂有效； 9．常有其它自身免疫病同时存在； 10．可复制出相似的动物疾病模型。（三）确认自身免疫性疾病的条件： 1.证实自身抗体或自身反应性T细胞的存在； 2.找到自身抗原； 3.用该自身抗原免疫动物能够诱发同样的自身免疫病； 4.通过被动转移实验证实抗体或者T细胞的致病能力。（四）自身免疫性疾病的分类： 1. 器官特异性自身免疫病：局限某特定器官，器官特异性抗原引起的免疫应答导致自身免疫病。 2. 非器官特异性自身免疫病：病变见于多种器官及结缔组织；又称结缔组织病或胶原病。二、自身免疫性疾病发病的相关因素

（一）自身抗原的出现：1. 隐蔽抗原的释放。2. 自身抗原改变。 3. 分子模拟。 4. 决定基扩展。（二）免疫系统异常 1. 淋巴细胞多克隆的非特异性活化：（1）内因：淋巴细胞生长控制机制紊乱，如MRL-lpr小鼠为SLE的动物模型，其FAS基因突变，FAS蛋白胞浆区无信号转导作用，不能诱导T细胞调亡。（2）外因：各种淋巴细胞的活化物质，如IL-2等细胞因子的应用及LPS和超抗原的作用。 2.辅助刺激因子表达异常: APC辅助刺激因子表达异常，刺激自身反应性T细胞，引发自身免疫病。T-B 细胞之间的旁路活化。原因（1）病毒感染B细胞。（2）来自细菌或病毒的超抗原。（3）B细胞表面的MHC-II分子被修饰。（三）免疫调节网络失调：Th1和Th2细胞功能紊乱：Th1细胞功能亢进促进器官特异性自身免疫病的发展，如 IDDM等。Th2细胞功能亢进促进抗体介导的全身性自身免疫病发展，如SLE等。（四）病源微生物感染。三. 自身免疫性疾病免疫损伤机制 1.发病机制主要为：Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型超敏反应。 2.特点：1. 靶分子的多样性；2. 反应细胞的多样性 ; 3. 自身免疫应答包括初次应答和再次应答。 3. 自身抗体引起的细胞破坏: 抗体与细胞结合激活补体、调理吞噬、介导ADCC破坏细胞。如自身免疫性溶血性贫血、药物过敏性血细胞减少症。 4. 抗受体抗体与受体结合：刺激或阻断细胞的功能。如Graves 病、重症肌无力。 5. 抗细胞外成分自身抗体与相应的物质结合: 激活补体、调理吞噬作用杀伤破坏自身细胞。如肺出血肾炎综合征。 6. 自身抗体与自身抗原形成IC沉积局部: 活化补体引起组织、细胞损伤。如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎。

乙肝核心抗体阳性是什么意思

乙肝核心抗体阳性是什么意思乙肝核心抗体阳性是什么意思?许多人并不是很了解，当看到乙肝核心抗体阳性时，就会误以为得了乙肝。通过国家的宣传和乙肝携带者自身的努力，乙肝歧视现在有着改观，完全没有歧视的心理或者恐慌的心理需要一段时间，当经常接触的人在乙肝五项检查中有问题时，对乙肝知识缺乏深入的了解和学习，心理还是有所担心和犹豫。乙肝核心抗体呈阳性的临床意义： 1）无症状乙肝表面抗原携带者滴度太低不能检测出来，而乙肝核心抗体可以。 2）在恢复期时，当乙肝表面抗原已减少止不能测出，而乙肝表面抗原尚未转为乙肝表面抗体之际，可以测乙肝核心抗体。 3）乙肝核心抗体比乙肝表面抗体持续的时间长。 4）乙肝核心抗体阳性表示曾经感染过乙肝病毒，现处于急性感染恢复期，或处于急、慢性感染。核心抗体是什么？核心抗体的作用：由于乙肝核心抗原在血中很快被裂解，所以在血清中查不出来，但是它具有抗原性，能刺激身体的免疫系统产生特性抗体，即乙肝核心抗体，所以检测乙肝核心抗体可以了解人体是否有过核心抗原的刺激，即是否有过乙肝病毒的感染。所以说乙肝核心抗体是一项病毒感染的标志。HBcAb是乙肝核心抗体的英文缩写，它是病毒刺激肝细胞产生的一种免疫球蛋白，也叫抗-HBc，其中有IgG、IgM、IgA和IgE型，临床上常规检测的有IgM和IgG型。它和HBcAg是一对相对应的抗原抗体系统。HBcAb阳性的出现表明肝内乙肝病毒复制活跃,肝细胞受损较重，并且传染性较强。

在急性HBV感染中，HBcAb的产生通常在HBsAg出现后3~5周。此时，HBsAg 已经消失，HBsAb尚未阳转。HBcAb的检出反映乙肝病毒在复制，无保护作用，不能中和乙肝核心抗原。 HbcAb阳性并不能说明任何问题如果乙肝表面抗体和乙肝核心抗体表现阳性，单独后者是阴或者是阳都说明不了任何问题，因为它是感染病毒后最早呈阳性，也是最晚转阴性的一项，而且有些人一辈子都是阳性，前者是阳性说明你曾经感染过乙肝病毒，现在已经对病毒有了免疫。 HBcAb弱阳性的出现可以有以下几种情况 1、HBcAb弱阳性说明以前感染过乙肝病毒，目前已经康复，但没有产生保护性抗体乙肝表面抗体。或者乙肝表面抗体已经消失，但乙肝核心抗体依然存在。这是因为乙肝核心抗体比乙肝表面抗体的存在时间要长很多，有些人感染乙肝病毒康复后，HBcAb可终身阳性或者弱阳性。此时HBcAb弱阳性只是说明曾经感染过乙肝病毒。 2、HBcAb弱阳性也可能是隐性乙肝病毒感染后的一种表现。 3、乙肝患者经过治疗，其他各项指标已经转阴，只剩下少量乙肝核心抗体也可出现HBcAb弱阳性。有必要检查抗-HBc IgM和抗-HBc IgG 1、抗-HBc IgM是HBV感染出现较早的抗体，90%出现在发病的第一周，在血清中可持续2~134周。IgM的高滴度出现，是诊断HBV急性感染的重要指标。抗-HBc IgM的表达，在一定程度上反映了肝组织的炎症活动状态。抗-HBc IgM与HBV 复制的标志物(HBeAg、HBV DNA)有相关性，但不是HBV复制的敏感指标。因此，抗-HBc IgM即是HBV的感染性指标，也被认为是传染性指标。

免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义

免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义发表时间：2017-06-14T11:42:37.927Z 来源：《医师在线》2017年4月下第8期作者：胡丽丽 [导读] 综上所述， EMAB、AOAb、AZP的临床检测对女性不孕不育患者的诊断具有重要意义，值得临床应用与推广。（山东省济宁市第一人民医院生殖医学科；山东济宁272000） [摘要] 目的探究免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义。方法选取2015年1月至2016年6月于我院门诊就诊的原发性不孕不育女性患者128例为观察组，另选取继发性不孕患者136例为对照组。应用酶联免疫吸附测定法对患者血清进行检测。比较两组患者EMAB、 AOAb、AZP的阳性率。结果观察组EMAB、AOAb、AZP阳性率均比对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 EMAB、AOAb、AZP的临床检测对女性不孕不育患者的诊断具有重要意义。 [关键词] 免疫性抗体；女性不孕不育；检测 Clinical significance of detection of immune antibody in female infertility [Abstract] Objective: To investigate the clinical significance of immune antibody in the detection of female infertility. Methods: from January 2015 to June 2016 in our hospital, 128 patients with primary infertility were selected as the observation group, and the other patients with secondary infertility were selected as control group (n = 136). Enzyme linked immunosorbent assay was used to detect the serum of the patients. The positive rates of EMAB, AOAb and AZP were compared between the two groups. Results: the positive rates of EMAB, AOAb and AZP in the observation group were higher than those in the control group, and the difference was statistically significant (P < 0.05). Conclusion: the clinical detection of EMAB, AOAb and AZP is of great significance in the diagnosis of female infertility. [keywords]Immune antibody; female infertility; detection 目前，女性不孕不育已经成为各研究学者及生殖学研究的热点问题，女性不孕不育率发生率也呈逐年上涨趋势，严重影响女性的健康生活。根据相关研究表明，不孕不育患者中，与免疫性抗体有关因素占了30%，如抗子宫内膜抗体，故通过有效的检测方法，及时发现不孕不育并及时进行治疗尤为重要[1]。办研究将进一步探究免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义。现报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料选取2015年1月至2016年6月于我院门诊就诊的原发性不孕不育女性患者128例为观察组，另选取继发性不孕患者136例为对照组。观察组年龄21-43岁，平均年龄（31.24±7.25）岁；不孕不育病程2-17年，平均病程（7.93±1.26）年。对照组年龄22-45岁，平均年龄（3 2.13±7.16）岁；不孕不孕病程3-15年，平均病程（6.53±1.35）年。两组患者一般资料比较差异有统计学意义（P＞0.05），可对比。 1.2 方法应用酶联免疫吸附测定法对患者血清进行检测，主要检测子宫内膜（endometrial，EMAB），抗卵巢抗体（Antibodies against ovarian，AVOAb）和抗透明带抗体（Anti zona pellucida antibodies，AZP）。抽取患者肘静血脉3-5ml，不抗凝，进行离心分离血清，将其置于-20℃冰箱保温或者立即进行测定，如冰箱保温后测定，需将血清解冻至室温，然后严格遵照检测仪器使用说明进行检测操作。 1.3 观察指标比较两组患者EMAB、AVOAb、AZP的阳性率。 1.4 统计学方法采用SPSS 18.0软件进行数据处理，计量资料以(?χ±S)表示，采用t检验；计数资料用百分比表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。 2 结果观察组EMAB、AVOAb、AZP阳性率均比对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。表1 两组EMAB、AOAb、AZP阳性率检测结果对比n(％) 3 讨论随着生活水平的提高，人们的生活压力不断增加，近年来有研究数据显示，在我国女性不孕不育发生率越来越高，不仅影响女性正常生活，也给患者的心理及生理上带来极大的负面影响，危害女性健康，故临床及早实施有诊断及治疗有一定的必要性[2]。本研究结果显示，观察组EMAB、AOAb、AZP阳性率均比对照组高，表明女性患者在诸多至不孕不育因素中，EMAB、AVOAb、AZP 均具有密切因素，其中EMAB是因子宫内膜为靶抗原引起的乙烯类免疫反应的自身抗体，其产生原因为子宫内膜刺激系统，导致机体内免疫系统失常及自身的免疫缺陷；AVOAb在感染、创伤、反复穿刺取卵或使用促排卵类药物状况下，使卵巢组织的抗原成分刺激机体合成对应抗体，致使患者自身出现免疫性卵巢炎，从而影响患者体内卵泡发育、成熟及排出，使孕激素分泌量减少，严重会引起卵泡发生闭锁、退化，更严重会导致患者卵巢功能闭经及早衰；AZP能够阻碍卵子与精子的结合，并破坏卵细胞，干扰受精细胞着床，导致女性生育能力下降。AZP是一种附于卵母细胞和着床前受精卵外的一层基质，其主要由糖蛋白组成，其在正常受精过程中和孕卵早期发育发挥着重要作用。另一方面，透明带抗原可诱发异种和同种免疫反应，产生AZP抗体，阻止精子穿过透明带与卵子结合，从而干扰着床，导致不孕。因此EMAB、AVOAb、AZP可作为检测女性不孕不育症及卵巢早衰的有效辅助诊断指标[3]。综上所述， EMAB、AOAb、AZP的临床检测对女性不孕不育患者的诊断具有重要意义，值得临床应用与推广。参考文献

肠道病毒71型灭活疫苗2年保护效力、免疫原性和安全性评价

肠道病毒71型灭活疫苗2年保护效力、免疫原性和安全性评价[研究背景]手足口病(HFMD)是由多种肠道病毒引起的一种常见传染病,是我国法定报告的丙类传染病,其中肠道病毒71型(EV71)是导致HFMD重症病例和死亡病例的优势病原。近年来,EV71所致重症HFMD及EV71所致疾病的流行,严重危害我国婴幼儿及儿童生命健康。目前,多个国家和地区开展了 EV71疫苗的研发,其中我国3家企业或研究所已完了Ⅲ期临床且均已注册上市。然而,EV71灭活疫苗临床试验中观察的疫苗保护效力和血清抗体水平仅局限于第一年,该疫苗的长期保护效力、保护性抗体持久性尚有待研究。 [研究目的]1.评价EV71灭活疫苗针对EV71所致HFMD/疾病的2年总体保护效力。2.评价EV71灭活疫苗诱导保护性抗体的持久性。 3.评价EV71灭活疫苗2年期间的严重不良事件发生率。[研究方法]2012年,EV71灭活疫苗Ⅲ期临床试验,通过采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照设计,招募中国6-35月龄健康婴幼儿受试者按1:1设计随机分配中按照0,28天免疫程序接种EV71疫苗(5120名)或安慰剂(5125名)。在完成EV71灭活疫苗第1年效力评估后,又进行了延续随访研究直至第2年。由于前期的临床研究在第1年随访结束时已揭盲,所以在第2年延续随访期间EV71所致HFMD的监测是开放性的;然而,实验室中抗体检测人员和病原鉴定人员对于疫苗或安慰剂分配均保持盲态。基于前期研究建立的肠道病毒监测系统,对第13个月至第26个月期间参与随访的受试者进行病例监测,确定第2年期间EV71所致HFMD/疾病。此外,在第26个月进行一次采血并进行EV71中和抗体水平检测。

免疫性不孕抗体

免疫性不孕抗体免疫性不孕不育是指不孕夫妇性生活正常，男方精液常规及女方生殖道功能均在正常范围，除免疫外无致病因素可寻，占不育夫妇的10％—30％。那么，免疫性不孕抗体有哪些呢？抗子宫内膜抗体子宫内膜是胚胎着床和生长发育之地，但在病理状态下，如子宫内膜炎、子宫内膜异位症及子宫腺肌症等，可转化成抗原或半抗原，刺激机体自身产生相应的抗体。此外，人工流产刮宫时，胚囊也可能作为抗原刺激机体产生抗体。一旦女性体内有抗子宫内膜抗体存在，便会导致不孕、停孕或发生流产。不少女性因在初次妊娠时作了人流，而不再怀孕，这种继发不孕症患者多数是因为体内产生了抗子宫内膜抗体。抗子宫内膜抗体就属于自身抗体，在正常育龄妇女中也可以检测到，但在不孕症人群中，特别是患有子宫内膜异位症的妇女中更多见。抗卵巢抗体在六、七十年代已发现卵巢存在特殊抗原，近年来报道抗卵巢自身免疫可影响卵巢的正常发育和功能，可导致卵巢衰竭或卵泡成熟前闭锁而导致不孕。抗卵巢抗体测定(AoAb)是一种靶抗原在卵巢颗粒细胞、卵母细胞、黄体细胞和间质细胞内的自身抗体。有卵巢抗体的女性卵泡发育不正常：卵泡长不到受孕的优势，或者长到受孕优势却不能自然排出，甚至出现卵巢早衰现象，使很多育龄妇女终生难以发育出成熟的卵泡，而导致原发性不孕和继发性不孕。抗人绒毛膜促性腺激素抗体人绒毛膜促性腺激素是维持早期妊娠的主要激素。对于有自然流产史、人工流产史及生化妊娠史的女性，在流产过程中，绒毛组织中的hCG可能作为抗原刺激母体产生抗体。另外，曾接受过hcG注射，以促进排卵的女性，体内的抗hCG抗体也有可能为阳性。此类患者可能在临床上表现为不孕或习惯性流产等。抗滋养细胞膜抗体对孕妈而言，胎儿是一个半非己的同种异体移植物。对胎儿而言，它具有来自父方和母方的基因，胎儿之所以不被排斥，主要依赖于母体对胎儿特殊的免疫调节，这种调节可以制止或改变对胚胎不利的免疫因素，以达到新的免疫平衡，如若平衡失调即可导致流产。胚胎的外层即合体滋养层是直接与母体循环相接触的部分，免疫组化证实合体滋养层不表达任何HLA或ABO抗原，这点被认为是确保胎儿成活的保护性机制之一，但是合体滋养层浆膜上却明显存在有抗原系统，并且可被母体识别。至于这些抗原的性质尚无统一定论，但它们却不容置疑地影响着孕妈与胎儿之间的免疫平衡。免疫性不孕不育是指由于生殖系统抗原的自身免疫或同种免疫而引起的不孕症，大约占不孕不育症的10%-20%。近年来研究认为免疫性不孕不育主要由存在血清、宫颈黏液及卵泡液等处的抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体、抗心磷脂抗体、抗透明带抗体、抗人绒毛膜促性腺激素抗体和抗滋养细胞膜抗体这七种抗体造成。

高度暴露医护人员体内抗结核保护性免疫反应研究

高度暴露医护人员体内抗结核保护性免疫反应研究结核病是目前世界上致死率最高的传染病,据世界卫生组织(WHO)报道,2015年全球由于结核病死亡的人数为140万人,同时结核病新发病例数为1040万人。目前世界上唯一注册的结核病疫苗是卡介苗(BCG),但BCG不能有效预防成人结核病的发生,而且保护效率并不稳定,因此世界急需开发一种更加有效的疫苗。在本项研究中,我们推测有一部分医护人员由于长期暴露于存在结核分枝杆菌的环境中而没有发生活动性结核病可能是由于体内存在对抗结核分枝杆菌的免疫保护作用。通过与一家结核病专科医院合作,我们收集了24位潜伏性感染医护人员、24位长期暴露未感染医护人员以及12位活动性结核患者的血液标本并提取全免疫球蛋白。我们发现从48位医护人员中有7位体内分离的全免疫球蛋白在小鼠气溶胶感染模型中显示有对抗结核菌的免疫保护作用。通过结核分枝杆菌裸鼠感染模型,我们发现抗体发挥免疫保护作用需要功能性T细胞的帮助。通过体外全血杀菌实验,我们发现所分离的抗体的保护作用是剂量依赖型的而且保护性抗体所识别的抗原位于结核分枝杆菌的表面。同时我们发现全血中CD4+T细胞的剥离可以阻止抗体介导的免疫保护作用,当MHC II分子被封闭抗体失去了免疫保护作用。在本项研究中,当同时封闭FcγRIII(CD16)和FcγRII(CD32)两种受体时,抗体的保护作用消失,这表明免疫复合物在抗体介导的结核病免疫保护中的重要作用。同时我们发现在小鼠体内观察到的保护作用同体外的全血杀菌实验中抗体的保护作用是一致的。另外,我们使用深度测序对三组志愿者的T细胞受体库进行了测定并发现了

一些可能在结核分枝杆菌感染过程中发挥保护作用的T细胞克隆。我们的研究解决了抗体是否在结核分枝杆菌的感染过程中对宿主起保护作用重要的争论。同时我们确定了CD4+T细胞以及免疫复合物在抗结核免疫保护中的作用。总之,在我们的研究中通过对机体对抗结核分枝杆菌感染的免疫保护的具体机制的研究可以为我们开发更有效的结核病预防疫苗以及治疗方法提供合理的思路。

免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义

免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义摘要目的探讨免疫性抗体对女性不孕不育检测的临床意义。方法选取50例不孕不育患者设为观察组，随机抽取50例生育正常女性作为对照组，进行免疫性抗体检测并对比。结果观察组抗精子抗体总阳性率（40%）高于对照组（6%），观察组抗心磷脂抗体总阳性率（30%）高于对照组（4%），两组阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论血清免疫性抗体出现异常现象，将导致女性患者胚胎组织的异常，排斥甚至杀死精子、受精卵。所以进行免疫性抗体检测对于女性不孕不育检测具有非常重要的意义。关键词免疫性抗体；不孕不育；抗精子抗体；临床意义在临床生殖医学领域中，不孕不育一直是一项较难攻克的重要的研究课题[1]。而近年不孕不育人数逐渐上升，如何检验检查，能否找到相关解决方法成为了重中之重，而本文结合各种临床研究实例，通过检测抗精子抗体、测抗心磷脂抗体、抗子宫内膜抗体等，探讨免疫性抗体是否对不孕不育的检测有着临床诊断的价值与意义。现报告如下。 1 资料与方法 1. 1 一般资料选取2013年1月～2015年12月内的不孕不育患者50例设为观察组，随机抽取50例生育正常女性作为对照组。通过酶联免疫吸附法对两组患者抗精子抗体和抗心磷脂抗体在血清中的情况进行逐一排查。 1. 2 方法在实验过程中，需要考虑很多的因素，患者及家属的心态或者情绪，均可能会影响实验结果。实验组患者在常规治疗的基础上，要不断加强、加深对患者的免疫性抗体分析，如体内免疫性抗体的种类等。除此之外，还要分析患者体中免疫性抗体的种类，对患者是否有更不良的影响等。这都要求检测更加准确，并且主治医生需要进一步对这些特殊的不孕不育患者加以诊断和医治。作为临床医师，要注重临床分析的全面性。要对患者的血液、血样分析等各类复杂的常规指标进行反复的检测。女性不孕不育患者加强免疫性抗体的观测，包括以下具体内容：①使患者提供检测样本，对接受治疗的患者进行心理辅导，女性患者普遍心理压力比较大，更需要医护工作者进行无微不至的关照。 ②通过相关的检测，如吸附性监测等，对女性不孕不育患者体内的免疫性抗体进行专业的检测，并逐一排查，这需要患者配合医院进行采血等工作[2]。对被检测患者体内的免疫性抗体进行分析，包括其是否含有抗体、抗体是否一样、抗体种类等。然后对全部不孕不育的女性患者所提供的血液进行分析，并与对照组比较。而在检测两组不同的患者采集的血液样本之后，医护工作者需要对检测过程中的患者血液里的所包含的生命各项指标是否稳定加以论证，进而对不孕不育患者的免疫性抗体进行论断，细分到种类。而在不断的观测中

病理学理论指导：移植排斥反应病理

在临床上，肾移植，肝移植，心脏移植等器官移植的外科技术已经成熟，但让外来的移植器官在受者体内永久存活是医学免疫学一大难题，这是由于同种异体组织或器官移植时，受者的免疫系统常对被移植物产生排斥反应。移植排斥反应是一个非常复杂的免疫学现象，除单卵双生外，两个个体具有完全相同的HLA系统的组织配型几乎是不可能的，因此选择供者和受者配型尽可能接近是异体组织器官移值成功的关键。移植排斥反应按发病机制和病理变化不同，可分为超急性排斥反应，急性排斥反应和慢性排斥反应，受体在移植后数分钟至24小时对移植物发生迅速而剧烈的排斥反应称为超急性排斥反应，急性排斥反应可发生在移植后数天，也可发生于数月后，慢性排斥反应可发生在数年内。一、排斥反应的机理同种异体组织器官移植时，供体和受体间的HLA抗原差异大小，决定着排斥反应严重程度。排斥反应中，细胞介导的免疫反应及抗体介导的免疫反应均起重要作用。二、排斥反应的病变依据排斥反应的形态变化及发病机制，分为超急性排斥反应，急性排斥反应和慢性排斥反应。 1．超急性排斥反应发生在移植后的几分钟或几小时，其发生与受者已有供者特异性HCA抗体存在，或供者与受者的ABO血型不符有关。移植器官迅速转变为暗红色，并伴有出血坏死，呈花斑状，体积肿大，质地柔软，组织学检查广泛的小血管炎伴血栓形成，血管壁纤维素样坏死和中性粒细胞浸润，并有IgG、IgM和补体存在。 2．急性排斥反应较常见，未经免疫抑制治疗时，可在数天内发生，经免疫抑制治疗时，可在数月甚至数年后发生，可分为细胞型排斥反应和血管型排斥反应。细胞型排斥反应：表现为移植器官内，大量淋巴细胞，单核细胞浸润，淋巴多为CD4＋或CD8＋T细胞。细胞型急性肾移植排斥反应血管型排斥反应：主要表现为细小动脉的坏死性血管炎。细小动脉的坏死性血管炎3．慢性排斥反应常是反复急性排斥反应的积累，突出病变是血管内膜纤维化，伴有移植器官的实质细胞萎缩及间质纤维化慢性炎细胞浸润。

常见的自身免疫性疾病

一、自身免疫性溶血性贫血（AIHA）：机体免疫功能异常，或服用某些药物后，红细胞表面抗原性发生变化，产生抗红细胞膜表面抗原的自身抗体。自身抗体与自身抗原结合，激活补体，破坏红细胞，导致贫血。特点：（1）体内出现抗红细胞自身抗体。（2）抗人球蛋白试验（Coombstest）阳性。（3）红细胞寿命缩短。（4）AIHA多见于中年女性。（5）继发性者多继发于淋巴系统恶性病、结缔组织病、感染和药物应用后。（6）引起AIHA的药物有青霉素、奎尼丁、异烟肼、对氨基水杨酸、磺胺类、甲基多巴等。抗红细胞抗体可分为三类：①温抗体，为IgG型，37°C可与RBC结合，不聚集RBC.②冷凝集素，为IgG 型，低温时与RBC结合使其凝集，引起冷凝集素综合征。③DonathLaidsteiner抗体，为IgG 型，低温时与两种补体成分结合，温度升高至37°C时，激活补体链，导致溶血，引起陈发性冷性血红蛋白尿症（PCH）。PCH继发于梅毒或病毒感染后。病毒感染后引起的多见于儿童或年轻患者。二、免疫性血小板减少性紫癜（ITP）：主要表现为皮肤黏膜紫癜，血小板↓，骨髓中巨核细胞可增多，女性多发，发病率1／lOO00，患者有抗血小板抗体，其使血小板寿命缩短。三、重症肌无力（MG）：患者体内存在神经肌肉接头乙酰胆碱受体的自身抗体，该抗体结合到横纹肌细胞的乙酰胆碱受体上，使之内化并降解，使肌细胞对运动神经元释放的乙酰胆碱的反应性降低。引起骨骼肌运动无力。四、肺出血肾炎综合征（Goodpasture综合征）：患者体内可检到抗肾小球基底膜Ⅳ型胶原抗体，由于肺泡基底膜与肾小球基底膜有共同抗原，故肺、肾同时发病。青年男性多见，反复咯血、血尿、蛋白尿，最后发展为肾衰。五、系统性红斑狼疮（SLE）：是一种累及多器官、多系统的炎症性结缔组织病，多发于青年女性。其临床症状比较复杂，可出现发热、皮疹、关节痛、肾损害、心血管病变（包括心包炎、心肌炎和脉管炎）、胸膜炎、精神症状、胃肠症状、贫血等；疾病常呈渐进性，较难缓解。免疫学检查可见IgG、IgA和IgM增高，尤以IgG显著；血清中出现多种自身抗体（主要是抗核抗体系列）和免疫复合物，活动期补体水平下降。抗dsDNA和抗Sm抗体是本病的特征性标志。SLE的实验诊断：（1）抗核抗体1）免疫荧光法检测抗核抗体：该法以小鼠肝细胞、Hep-2细胞（人喉癌上皮细胞株）、Hela细胞（官颈癌细胞株）或小鼠腹水癌细胞等作为抗原片，以Hep-2细胞抗原片敏感性较高。2）抗DNA 抗体：分为天然（双链）DNA（ds-DNA）和变性（单链）DNA（ss-DNA）抗体。Ds-DNA抗体的测定方法有间接免疫荧光法（以短膜虫或马疫锥虫为抗原）、间接酶标抗体法（以短膜虫为抗原）、补体结合抗体法（以短膜虫为抗原，以抗人C3荧光抗体为第二抗体）、酶联免疫吸附试验（ELISA，以DNA为抗原）和放射免疫分析法（即Farr法）等多种方法。前四种方法检测到的都是低亲和力的抗dsDNA抗体，或敏感性低，或检测结果不稳定、重复性差。Farr 法检测dsDNA抗体的特异性最高，结果可靠，重复性好，因此是目前国际上公认的检测抗ds-DNA抗体的标准方法。当抗ds-DNA抗体结合率>20％时对诊断SLE有意义。3）抗可提取性核抗原（ENA）抗体：目前抗ENA抗体的检测方法有双向免疫扩散或对流免疫电泳和免疫印迹法。近年来随着分子生物学技术的发展，可以以重组抗原为底物，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测特异性抗体。4）抗增殖细胞核抗原抗体。（2）抗组蛋白抗体。（3）抗核糖体抗体。（4）抗Ku抗体。（5）皮肤狼疮带试验。与SLE病情判断有关的免疫学检测包括：1）血沉和C反应蛋白（CRP），SLE活动时血沉增快，CRP改变不明显。2）血清蛋白，包括白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原、冷球蛋白冷凝集素等。3）血清补体，包括总补体（CH50）和Cl、C3、C4、C2及C9. 4）循环免疫复合物（CIC）聚乙二醇（PEG）沉淀法。5）类风湿因子。6）细胞免疫功能。六、类风湿性关节炎（RA）：一种以关节病变为主的全身性结缔组织炎症，多发于青壮年，女性多于男性。本病的特征是关节及周围组织呈对称性、多发性损害，部分病例可有心、肺及血管受累。免疫学检查可见血清及滑膜液中出现类风湿因子，血清IgG、IgA和IgM水平升高。其他自身抗体也可出现：例如，抗角蛋白抗体；抗RA33抗体；抗环瓜氨酸抗体（抗CCP抗体）；抗核周因子

保护性杀菌剂有哪些

保护性杀菌剂有哪些许多病毒当注射到动物体内时，具有高度的致免没性，如此获得的特异性抗病毒抗体，可用于鉴定病毒(通过某种血清学试验。例如沉淀反应，补体结合，胶扩散等)，那应该如何防治植物病害呢？消灭病原物或抑制其发生与蔓延;提高寄生植物的抗病能力;控制或改造环境条件，使之有利于寄主植物而不利于病原物，从而抑制病害的发生和发展。一般以预防为主，因时因地根据作物病害的发生、发展规律，采取具体的综合治理措施。每项措施要充分发挥农业生态体系中的有利因素，避免不利因素，特别是避免造成公害和人畜中毒，使病害压低到经济允许水平之下，以求达到最大的经济效益，那么保护性杀菌剂有哪些呢？一、波尔多液是一种良好的保护性杀菌剂，由硫酸铜、生石灰和水配制而成，根据硫酸铜和生石灰用量不同可分为等量式（1：1），半量式（1：0.5），多量式（1：3）和倍量式（1：2）等数种。配制时，先各用一半的水化开硫酸铜和生石灰，然后将硫酸铜倒入生石灰溶液中，并用棍棒搅拌均匀即可。配成的波尔多液呈天蓝色的胶体悬浮液，呈碱性，粘着力强，能在植物表面形成一层薄膜，有效期可维持半个月左右。波尔

多液不耐贮存，必须现配现用，不能与忌碱农药混用。可防治黑斑病、锈病，霜霉病，灰斑病等多种病害。二、石硫合剂也是一种保护性杀菌剂，以生石灰，硫磺粉和水按1：2：10的比例经过熬制而成，原液为深红褐色透明液体，有臭鸡蛋味，呈碱性。配制时，先将水放锅中煮开，倒入1份生石灰，等石灰溶解后，再加入先用少量水调成糊状的2份硫磺粉，边加边搅拌，加毕用大火烧沸1小时左右，等药液呈红褐色时停火，冷却后，滤去沉渣，即为石硫合剂原液，其波美充度一般为20-24。原液在使用前必须稀释，休眠期喷洒可用波美3-5度，生长期只能用波美度0.3-0.5的稀释液。能防治白粉病，锈病，霜霉病，穿孔病，叶斑病等多种病害，还可防治粉虱，叶螨，介壳虫等害虫。三、代森铵

抗体分类及特性和功能

抗体分类及特性和功能按照不同的分类方式，抗体可以分成许多类型： (1)按作用对象，可将其分为抗毒素、抗菌抗体、抗病毒抗体和亲细胞抗体(能与细胞结合的免疫球蛋白，如1型变态反应中的lgE反应素抗体，能吸附在靶细胞膜上)。 (2)按理化性质和生物学功能，可将其分为IgG、IgA、IgM、IgE、IgD五类。 (3)按与抗原结合后是否出现可见反应，可将其分为：在介质参与下出现可见结合反应的完全抗体，即通常所说的抗体，以及不出现可见反应，但能阻抑抗原与其相应的完全抗体结合的不完全抗体。 (4)按抗体的来源，可将其分为天然抗体和免疫抗体。一、同种型（isotype）同一种属每个个体都具有的免疫球蛋白的抗原特异性，其抗原决定簇主要存在于Ig的C区。类和亚类（根据H链的抗原性不同）五类： IgG --- γ(gamma) IgA --- α(alpha) IgM --- μ(mu) IgD --- δ(delta) IgE ---ε(epsilon) 亚类： IgG： IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 IgA：IgA1, IgA2 IgM: IgM1, IgM2

型和亚型(根据轻链C区抗原特异性不同分型)： κ(kappa)型、λ(lambda)型亚型(λ链)： OZ(+) (或λ1) ：第190位(亮氨酸) OZ(-) (或λ2) ：第190位(精氨酸) Kern(+)(或λ3) ：第154位(甘氨酸) Kern(-)(或λ4) ：第154位(丝氨酸) 同种异型（allotype）同一种属不同个体之间免疫球蛋白也具有的差异性，主要反映在分子的CH和CL上的一个或数个氨基酸的差异 (genetic markers---遗传标志) 。 Gm因子：Gm1～30 Am因子：A2m1，A2m2 Km因子：Km1，Km2，Km3 二、独特型（idiotype）在同一个体内，不同B细胞克隆所产生的免疫球蛋白分子V区以及T、B细胞表面抗原受体V区所具有的抗原特异性不同。各类抗体的特性和功能 IgG 一般特性：单体分子；四个亚类；血清中含量最高(75%Ig)；半衰期最长(21～23天)； 3～5岁达成人水平(8.0～17 mg/ml)；可与SPA结合。

抗药抗体免疫原性分析方法学验证指导原则中文版定稿版

抗药抗体免疫原性分析方法学验证指导原则中文版 HUA system office room 【HUA16H-TTMS2A-HUAS8Q8-HUAH1688】

抗药抗体免疫原性分析方法学验证指导原则摘要：几乎所有的生物制药产品都会引起一定的抗药抗体（anti-drug antibody，ADA）反应，抗药抗体反应可能会降低药物疗效或导致严重的不良反应。在人体内，抗药抗体通常不会引起明显的临床反应。但是对于某些治疗性蛋白质，抗药抗体反应能引起各种临床的不良反应，包括温和事件及严重不良事件。临床前研究表明，抗药抗体能对药物暴露、药物毒性作用、药物代谢动力学、药物效应动力学等造成影响。因此治疗性蛋白质的免疫原性引起了临床医生、药企及监管机构的注意。为了评估生物药物分子的免疫原性，以及将实验结果与临床事件联系起来，在临床前研究和临床研究中，很有必要开发可靠的能够有效评估抗药抗体反应的实验方法。这里方法学验证显得尤为重要，并且方法学验证是药物上市申请必不可少的。现行的监管文件对于免疫分析方法的验证的指导相当有限，特别是缺乏有关免疫原性分析方法的验证的指导。因此，本文对抗药抗体免疫分析方法的验证提供科学的建议。在现有的关于生物分析的规范性文件的基础上加入独特的性能验证。笔者建议采用实验和统计学的方法进行免疫分析的方法学验证。这些建议被视为最佳的例子，旨在促进整个医药行业形成一个更加统一的抗体检测方法。 1．简介：生物制药产品包括氨基酸聚合物、碳水化合物或核酸，一般通过人细胞系、哺乳动物细胞或细菌进行表达，比常规的小分子药物更大（一般大于1~3KD）。由于以上特性，生物制药产品引起免疫反应的潜力更大。生物制药的免疫原性与产品的内在因素（种属特异性表位、外源性、糖基化程度、聚合或变性程度、杂质和制剂）、外在因素（给药途径、

抗体相关基本知识

抗体相关基本知识抗体(antibody)是生物体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白(Ig)。按抗体的来源，可将其分为天然抗体和人工制备的抗体，是通过对特定生物体免疫接种特定抗原物质后而获得。人工免疫动物制备的抗体应用甚为广泛，既可以用于科学研究，也可以用于疾病的预防、诊断和治疗。体一、抗体的基本结构的基本结构经x线晶体衍射结构分析发现，抗体Ig由四条多肽链组成，各肽链之间由数量不等的链间二硫键连接。Ig可形成“Y”字型结构，称为I g 单体，是构成抗体的基本单位。（一）重链和轻链天然Ig分子含有四条异源性多肽链，其中，分子量较大的两条链称为重链(heavy chain,H)，而分子量较小的两条链称为轻链(Light chain,L)。同一Ig分子中的两条H链和两条L链的氨基酸组成完全相同。 1.重链分子量为50000～75000，由450～550个氨基酸残基组成。重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不同，其抗原性也不同。据此，可将抗体Ig分为5类(class)，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链，商品化的抗体绝大部分都是IgG。不同类的Ig具有不同的特征，如链内和链间二硫键的数量和位置、结构域的数量及铰链区的长度等均不完全相同。即使是同一类的Ig，其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数量、位置也不同，据此又可将同类Ig分为不同的亚类(subclass)。 IgG的亚类利用不同种属动物制备的IgG存在不同的亚类，常见的不同种属IgG亚类如下： ?兔:IgG（无亚类）

(完整版)抗药抗体免疫原性分析方法学验证指导原则(中文版)

乙肝核心抗体

乙肝核心抗体【导读】乙肝是现代生活中大家比较熟悉的高传染疾病，如果人体内有保护性抗体则不会被传染。那么，乙肝核心抗体是什么？乙肝核心抗体(抗-HBC)是阳性表明什么？乙肝核心抗体阳性正常吗？乙肝核心抗体阳性怎么办？乙肝核心抗体（HBcAb）是乙肝病毒核心抗原的对应抗体，它不是保护性抗体，它的存在反而是受到乙肝病毒侵害的指标之一。它包括IgM、IgA、IgG三种类型。IgM型是判定急性乙肝的重要指标，是机体感染乙肝病毒后在血液中最早出现的特异性抗体，一般持续3-6个月。假如HBcAb-IgM持续高滴度，表明乙肝有慢性化倾向。如果在慢性活动性乙肝患者中，HBcAb-IgM滴度高，说明乙肝病毒正在体内复制活跃，是传染性强的指标之一。HBcAb-IgG 出现较晚，不是保护性抗体，检测HBcAb-IgG具有流行病学调查意义。乙肝核心抗体阳性是什么乙肝核心抗体阳性表示曾经感染过HBV，这是一个永远的标志，即只要曾经感染过乙肝病毒就会存在。但在实际检测中，由于不同时段，核心抗体在体内的水平不同，或者在不同医院检查，仪器和试剂之间的误差，有时呈“阴性”。但从医学理论上讲，核心抗体是一个标志性抗体。乙肝核心抗体阳性要和表面抗原、E抗原在一起分析才有临床意义，单独核心抗体阳性，只能说感染过HBV，但没特别的临床症状。临床上，大三阳，小三阳，都不一定有症状，主要看肝功能，肝功能有问题才可能会出现临床症状，如黄疸，消化不良等。乙肝核心抗体阳性正常吗乙肝核心抗体阳性，也就是乙肝两对半检查中第五项指标阳性，乙肝核心抗体阳性可能出现在以下三种情况下： 1、乙肝核心抗体阳性说明以前感染过乙肝病毒，目前已经康复，但没有产生保护性抗体乙肝表面抗体。或者乙肝表面抗体已经消失，但乙肝核心抗体依然存在。这是因为乙肝核心抗体比乙肝表面抗体的存在时间要长很多，有些人感染乙肝病毒康复后，乙肝核心抗体可终身阳性或者弱阳性。此时乙肝核心抗体阳性只是说明曾经感染过乙肝病毒。 2、乙肝核心抗体阳性也可能是隐性乙肝病毒感染后的一种表现。 3、乙肝患者经过治疗，其他各项指标已经转阴，只剩下少量乙肝核心抗体。如果您怀疑是隐性乙肝病毒感染，建议您可以结合乙肝病毒DNA的定量和定性值由专业的医生来判断病情。乙肝核心抗体阳性怎么办乙肝核心抗体阳性表示曾经感染过乙肝病毒，这是一个永远的标志，即只要曾经感染过乙肝病毒就会持续存在，一般要结合两对半结果综合分析才有临床意义。单纯的核心抗体阳性，可能是以下几种情况: 1、由于试剂盒方法的局限性导致的假阳性，遇到这种情况建议还家医院或换个方法再查，如果确定是阴性，可以接种乙肝疫苗。 2、急性乙肝感染的“窗口期”，指乙肝表面抗原已被人体自身的抵抗力清除，或在血液中消失，由于乙肝核心抗体出现比乙肝表面抗体早，所以仅能检测到乙肝核心抗体阳性。 3、既往乙肝病毒感染者，由于乙肝核心抗体比乙肝表面抗体在体内存在的时间长，因此乙肝表面抗体已消失或在可检测水平以下时，乙肝核心抗体仍存在。 4、还不能排除隐匿性乙肝病毒感染，乙肝表面抗原及乙肝e抗原阴性或乙肝表面抗体与抗-HBc阳性，血清中可检测到低水平HBV DNA或肝组织检测出表面抗原或乙肝核心抗原称