微生物药敏专家分析

微生物药敏专家分析规则

1 沙门菌属和志贺菌属只报告氨苄西林、喹诺酮、复方新诺明，其他药物均不报告。

3 从肠道以外分离到的沙门菌属应报告氯霉素和一个三代头孢药物。

4 沙门菌属、志贺菌属不应该报告一、二代头孢，结果均改为耐药。

5 氨苄西林代表氨苄西林和阿莫西林。

6 筛选试验提示可能是ESBL，应做确认试验。

10 枸橼酸杆菌、肠杆菌、沙雷氏菌在三代头孢长期治疗时易引起耐药，药物治疗3~4天以、

后需检测耐药性的发展。

11 头孢氨苄代表头孢噻吩、头孢匹林、头孢拉定、头孢氨苄、头孢克洛、头孢羟氨苄。

13 脑脊液中分离的细菌应报告头孢噻肟、头孢曲松的结果。

17 沙门菌属、志贺菌属不应报告氨基糖甙类药物，结果已改为不敏。

18 四环素代表四环素、米诺环素、强力霉素。

20 尿中的细菌不报告氯霉素。

24 除大肠埃希氏菌、屎肠球菌外的细菌不报告磷霉素。

25 SMZ代表磺胺类药物。

27 铜绿假单胞菌在抗生素治疗时易产生耐药性，抗生素治疗3~4天后应进行耐药性的检测。

28 从粒细胞减少和其他严重感染中分离到的铜绿假单胞菌要求使用大剂量的羧基青霉素、

脲基青霉素、头孢他啶和氨基糖甙类药物连用。

29 不动杆菌对其他药物耐药时应报告氨苄西林/舒巴坦的结果。

30 嗜麦芽窄食单胞菌、不动杆菌或其他非发酵菌(包括铜绿假单胞菌)应报告替卡西林/克拉

维酸，四环素，复方新诺明，氯霉素。

32 耐苯唑西林的葡萄球菌(MRS)对头孢菌素、β-内酰胺酶抑制剂复合物、亚胺培南均应报

告不敏，结果已改为耐药。

33 对青霉素G的解释可以运用到其他青霉素、β-内酰胺酶抑制剂复合物、头孢菌素、碳

青霉烯类。

34 葡萄球菌中检出β-内酰胺酶，对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、替卡西林/克拉维酸、

美洛西林、哌拉西林等结果应改为耐药。结果已改为耐药。

35 葡萄球菌MIC在0.06~0.13ug/ml，应进行β-内酰胺酶的筛选，用户应根据青霉素的敏感

性决定其他青霉素的敏感性。

36 葡萄球菌对青霉素耐药，苯唑西林敏感，对不耐酶的青霉素应报告耐药。对其他耐酶青

霉素、β-内酰胺酶抑制剂复合物、头孢菌素、碳青霉烯类敏感。

37 当葡萄球菌对头孢菌素、碳青霉烯类、氨基糖甙类、大环内酯类、克林霉素、四环素等

多重耐药，应进行MRS的检测。

38 葡萄球菌对万古霉素耐药还没发现，如万古霉素MIC≥4，且结果进行了进一步确认，

菌株送标准实验室。

41 尿液分离的葡萄球菌不报告阿齐霉素、克拉霉素、红霉素、克林霉素。

42 葡萄球菌属在喹诺酮长期治疗时易产生耐药，药物治疗3~4天后应检测起耐药性。

143FDA规定依诺沙星只用于腐生葡萄球菌，表皮葡萄球菌。

144利福平不能单独用于化疗。

145肠球菌不应报告头孢菌素、氨基糖甙类、克林霉素、复方新诺明。结果已改为耐药。146如果肠球菌对青霉素、氨苄西林、万古霉素敏感或中介，应对高浓度庆大霉素、链霉素进行检测，以确定能否协同作用。

147肠球菌万古霉素中介或耐药时应报告氯霉素、红霉素、四环素、利福平的结果，并请感染科医师会诊。

148β-内酰胺酶阴性的肠球菌如果对氨苄西林敏感，可以代表氨苄西林/克拉维酸和阿莫西林/克拉维酸。

149β-内酰胺酶阴性的肠球菌对青霉素敏感可以代表氨苄西林、阿莫西林、氨苄西林/舒

巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦。

150非心内膜炎的肠球菌对青霉素或氨苄西林敏感时应使用大剂量治疗。心内膜炎的肠球菌对青霉素和氨苄西林敏感时应使用大剂量的青霉素G、氨苄西林、万古霉素、替考拉宁和庆大霉素、链霉素联用。

151从血、CSF中分离的肠球菌对青霉素、氨苄西林敏感或中介时，建议检测β-内酰胺酶(直接用头孢硝噻吩)，由于β-内酰胺酶引起的青霉素、氨苄西林耐药用常规的纸片扩散法和稀释法结果不可信。

153 肠球菌检测出β-内酰胺酶时，对青霉素、羧基青霉素、氨基青霉素、脲基青霉素应报告耐药。结果已改为耐药。

155当肠球菌的万古霉素MICs为8-16ug/ml，建议做动力等区分实验，区分VanA,VanB,VanC.

157 从尿中来的肠球菌不报告红霉素。

160 从血、CSF等严重感染中分离的流感嗜血杆菌只报告氨苄西林、三代头孢、氯霉素、美洛培南。

161 对流感嗜血杆菌检测阿莫西林/克拉维酸、阿齐霉素、克拉霉素、头孢克洛、头孢呋辛、头孢狄尼等对病人无意义，但对流行病学有意义。

163 流感嗜血杆菌β-内酰胺酶阴性，但耐氨苄西林(BLNAR株)，氨苄西林/舒巴坦，头孢克洛、阿莫西林/克拉维酸、头孢孟多、头孢呋辛等应报告耐药。

175 从严重感染病人的血和脑脊液中分离的肺炎链球菌应报告万古霉素的结果。

177 从严重感染病人的血和脑脊液中分离的肺炎链球菌应报告青霉素，头孢噻肟，头孢曲松，美洛培南，万古霉素的结果。

178 青霉素的敏感性可代表氨苄西林，阿莫西林，氨苄西林/克拉维酸，阿莫西林/克拉维酸，氨苄西林/舒巴坦，头孢克洛，头孢狄尼，头孢吡肟，头孢噻肟，头孢丙烯，头孢唑肟，亚胺培南，氯碳头孢等。

179 对青霉素中介或耐药的肺炎链球菌，检测氨苄西林，氨苄西林/舒巴坦，头孢克洛，头孢丙烯等无意义，因为现在还没有解释标准。

182对青霉素中介或耐药的肺炎链球菌应报告头孢噻肟，头孢曲松，美洛培南。

183 从脑脊液以外分离的肺炎链球菌对青霉素中介应用标准剂量治疗。

185 从脑膜炎病人分离的肺炎链球菌对头孢噻肟或头孢曲松中介时应采用大剂量治疗。187 肺炎链球菌还没有对万古霉素耐药株，应进一步确认和反复药敏试验，如确认，送标准实验室。

188 红霉素代表阿齐霉素，克拉霉素，地红霉素。

190 尿中肠球菌不报告：阿齐霉素，克拉霉素，红霉素，地红霉素，克林霉素。

191 氧氟沙星的结果代表左氧沙星。

193 同178

194 青霉素敏感可代表头孢布烯。

196 除肺炎链球菌外的链球菌对氨苄西林或青霉素G中介要求和氨基糖甙类药物合用。201 从肺炎链球菌性肺炎病人分离的肺炎链球菌如对青霉素中介，需静脉高剂量青霉素治疗，（如200万/4小时）氨苄西林（2g/6小时）。

203 从肺炎链球菌性肺炎病人分离的肺炎链球菌对头孢吡肟中介应使用标准剂量治疗。205 从肺炎链球菌性肺炎病人分离的肺炎链球菌对头孢噻肟或头孢曲松中介，应使用标准剂量治疗。

208 流感嗜血杆菌引起的脑膜炎合并菌血症，应报告美洛培南。

212 同118

214 同125

215 铜绿假单胞菌的药敏可用纸片扩散法，标准琼脂稀释法，微量肉汤稀释法检测，从胆囊纤维化病人分离到的菌株需孵育到24小时才能抱结果。

219 腐生葡萄球菌不推荐做苯唑西林，因为用于凝固酶阴性葡萄球菌的解释标准对其多为耐

药，但此时mecA基因是阴性的。

224 分离株对高浓度庆大霉素（HLGR）耐药，无法和作用细胞壁的药物合用。

225 分离株对高浓度庆大霉素（HLGR）敏感，可以和作用细胞壁的药物合用。

226 此分离株对高浓度庆大霉素（HLGR）耐药，需对其进行准确的鉴定。

227 分离株对高浓度链霉素（HLSR）耐药，无法和作用细胞壁的药物合用。

228分离株对高浓度链霉素（HLSR）敏感，可以和作用细胞壁的药物合用。

229 此分离株对高浓度链霉素耐药，需对其进行准确的鉴定。

230 尿中腐生葡萄球菌不报告药敏，在尿液中能达到一定浓度的药物（磺胺类，氟喹诺酮类）可用于治疗急性的，不复杂的尿道感染。

402 科氏葡萄球菌天然耐林可霉素和新生霉素，结果已改为耐药。

403 木糖葡萄球菌天然耐林可霉素和新生霉素，结果已改为耐药。

405 链球菌包括肺炎链球菌对天然耐低水平氨基糖甙、培氟沙星，结果已被改为耐药。406 肠球菌天然耐苯唑西林，头孢菌素，低浓度氨基糖甙、培氟沙星，磷霉素，磺胺类，结果已改为耐药。

407 粪肠球菌天然内林可霉素，结果已改为耐药。

430 气单胞菌属除尺骨气单胞菌外对氨基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。

431 气单胞菌属除维罗纳气单胞菌，对一代和二代头孢菌素天然耐药，结果已改为耐药。432 克雷伯菌属天然耐氨基青霉素和羧基青霉素。结果已改为耐药。

434 弗劳地枸橼酸杆菌对头孢替坦和头孢西丁固有耐药。

435 阴沟肠杆菌对头孢替坦和头孢西丁固有耐药。结果被改为耐药。

436 产气肠杆菌对头孢替坦和头孢西丁固有耐药，结果已被改为耐药。

437 粘质沙雷氏菌对头孢孟多，头孢呋辛，克里斯汀，多粘菌素B和呋喃妥因固有耐药，结果已被改为耐药。

438 奇异变形杆菌对四环素，克里斯汀，多粘菌素B和呋喃妥因固有耐药，结果已被改为耐药。

439 普通变形杆菌对克里斯汀，多粘菌素B和呋喃妥因固有耐药，结果已被改为耐药。440 摩根摩根菌对头孢呋辛，克里斯汀，多粘菌素B，呋喃妥因固有耐药，结果已被改为耐药。

441 斯氏普罗威登菌天然耐庆大霉素，克里斯汀，多粘菌素B，结果已被改为耐药。

442 小肠结肠炎耶尔森氏菌天然耐氨基青霉素，阿莫西林/克拉维酸，羧基青霉素，一代头孢菌素，头孢西丁，头孢孟多，头孢呋辛。结果已改为耐药。

443 铜绿假单胞菌天然耐：青霉素，氨基青霉素，苯唑西林，一、二代头孢菌素，头孢噻肟，头孢曲松，头孢唑肟，卡那霉素，四环素，氯霉素，甲氧苄啶夫西地酸，万古霉素，替考拉宁。结果已被改为耐药。

444 鲍曼/醋酸钙不动杆菌复合体，天然耐青霉素，氨基青霉素，苯唑西林，一、二代头孢菌素，磷霉素，甲氧苄啶夫西地酸，万古霉素，替考拉宁。结果已被改为耐药。

447 嗜麦芽窄食单胞菌对羧基青霉素，哌拉西林，头孢噻肟，亚胺培南，甲氧苄啶，磷霉素固有耐药，结果已被改为耐药。

448 洋葱伯克霍得菌对羧基青霉素，替卡西林/克拉维酸，亚胺培南，喹诺酮，氯霉素，甲氧苄啶，磷霉素，克里斯汀，多粘菌素B固有耐药，结果已被改为耐药。

449

450 脑膜脓毒性金黄杆菌属对羧基青霉素，替卡西林/克拉维酸，哌拉西林，头孢噻肟，头孢他啶，亚胺培南，喹诺酮，克里斯汀，多粘菌素B固有耐药，结果已被改为耐药。451 人苍白杆菌对羧基青霉素，替卡西林/克拉维酸，哌拉西林，头孢噻肟，头孢他啶固有耐药，结果已被改为耐药。

453 当葡萄球菌检测出β-内酰胺酶时，青霉素，氨苄西林，阿莫西林，羧苄西林，替卡西林，美洛西林，哌拉西林应改为耐药。

457 氨苄西林代表氨苄西林，巴氨西林，匹氨西林。

458 葡萄球菌检测出耐苯唑西林（MRS），对β-内酰胺酶抑制剂复合物，头孢菌素，碳青霉烯类均应改为耐药。

459 对于从尿液分离株，头孢噻吩代表头孢羟氨苄，头孢氨苄，头孢克洛等。

460 肠球菌和链球菌对高浓度链霉素耐药，不能用青霉素合用。

462 肠球菌和链球菌对高浓度庆大霉素耐药，不能用青霉素和庆大霉素，卡那霉素，妥布霉素，阿米卡星，异帕沙星等。

464 卡那霉素代表卡那霉素，新霉素等。

465 卡那霉素代表卡那霉素，新霉素，阿米卡星，异帕沙星，

466 庆大霉素代表庆大霉素和萘替米星。

467 红霉素代表红霉素，阿齐霉素，地红霉素，克拉霉素，罗红霉素。

470 克里斯汀代表克里斯汀和多粘菌素B。

471 萘啶酸，吡哌酸等可以做为一代喹诺酮的代表。

472 对葡萄球菌属，培氟沙星，氧氟沙星，左氧沙星，环丙沙星可用来代表其他全身性氟喹诺酮。

473 对培氟沙星的敏感性可代表其他全身性喹诺酮。

478 四环素代表四环素，土霉素和强力霉素。

480 氟喹诺酮类不同分子见有交叉耐药，但表达水平有所不同，应同时检测环丙沙星和培氟沙星或氧氟沙星。

481 林可霉素代表林可霉素和克林霉素。

483 氨苄西林代表氨苄西林，青霉素G，阿莫西林，美洛西林，哌拉西林和亚胺培南。484 革兰氏阳性球菌天然耐美西林，氨曲南，喹诺酮，克里斯汀，多粘菌素B，结果已改为耐药。

486 卡他莫拉菌（布兰汉）天然耐林可霉素，甲氧苄啶，结果已改为耐药。

487 肠杆菌科天然耐青霉素，苯唑西林，大环内酯类，林可霉素，链霉素，夫西地酸，万古霉素，替考拉宁，结果已改为耐药。

488 肺炎克雷伯菌肺炎亚种，产酸克雷伯菌，异型枸橼酸杆菌，赫尔曼埃希氏菌对氨基青霉素，羧基青霉素，脲基青霉素的敏感性应改为中介，因为他们为天然低耐。

489 阴沟肠杆菌，产气肠杆菌，弗劳地枸橼酸杆菌，粘质沙雷氏菌，摩根摩根菌，斯氏普罗威登菌，雷氏普罗威登菌，蜂房哈夫尼亚对氨基青霉素，一代头孢菌素，阿莫西林/克拉维酸，氨苄西林/舒巴坦结果应改为中介，因为他们为天然低耐。

490 普通变形杆菌，潘氏变形杆菌对氨基青霉素或一代头孢菌素应改为中介，因为他们天然低耐。

491 奇异变形杆菌对氨基青霉素耐药，羧基青霉素和脲基青霉素应改为耐药。

492 肠杆菌科对羧基青霉素中介或耐药，脲基青霉素也应该改为中介。

493 当肠杆菌科对头孢噻肟，头孢曲松，头孢他啶，头孢唑肟，头孢吡肟，头孢匹罗中介或耐药，说明有诱导酶产生，头孢噻肟，头孢曲松，头孢他啶，氨曲南的结果被改为耐药。497 当ESBL被检测出来，头孢噻肟，头孢曲松，头孢唑肟，头孢他啶，头孢吡肟，头孢匹罗，头孢克肟，氨曲南结果改为中介，并与感染科医生会诊。

498 当变形杆菌，普罗威登菌，摩根菌属出现妥布霉素，萘替米星，阿米卡星耐药但对庆大霉素敏感，建议检测ESBL。

502 肠杆菌科对庆大霉素敏感，对妥布霉素，萘替米星中介和耐药，说明产生AAC，阿米卡星，异帕米星改为中介。

506 普罗威登菌属天然耐庆大霉素，妥布霉素，萘替米星，结果改为中介。

507 肠杆菌科通常对庆大霉素和萘替米星同时敏感，注意细菌的分纯，鉴定，药敏试验。508 复方新诺明代表TMP-磺胺复合类药物。

509 如分离株对通过尿液的喹诺酮中介或不敏，应单独检测诺氟沙星，罗美沙星，依诺沙星。510 分离株对全身性氟喹诺酮中介或耐药，应对氧氟沙星，环丙沙星，格里沙星，曲氟沙星，左氧沙星单独进行检测。

511 如分离株对培氟沙星中介或耐药，应对其他全身性氟喹诺酮进行单独检测。

512 铜绿假单胞菌对培氟沙星，氧氟沙星耐药，环丙沙星也改为耐药。

513 阿洛西林和美洛培南在法国未上市。

515 不动杆菌：舒巴坦和头孢他啶、头孢吡肟、头孢匹罗可协同作用。

516 葡萄球菌对青霉素中介或耐药，对苯唑西林敏感，对酶抑制剂复合物，头孢菌素，碳青霉烯类敏感。

518 严重感染的病人的肠球菌对氨苄西林中介或敏感，要求用大剂量的青霉素和庆大霉素和链霉素协同用药。

520 如分离株对高浓度的链霉素敏感，可用青霉素和链霉素，卡那霉素或庆大霉素协同。521 青霉素G代表青霉素G和苯甲氧基青霉素。

523 对氨苄西林的轻微耐药可用来判断一代头孢菌素和亚胺培南。

524 不要对流感嗜血杆菌报告三代头孢菌素。临床相对应的耐药性还没有论证。

525 对流感嗜血杆菌不报告大环内酯类，林可霉素，链霉素类。

546 磷霉素的结果只对静脉治疗有意义。

548 肠杆菌科通常对妥布霉素和萘替米星同时敏感，注意该菌的分纯，鉴定，药敏。

549 肠杆菌科通常对阿米卡星和萘替米星同时敏感，注意该菌的分纯，鉴定，药敏。

550肠杆菌科通常对阿米卡星和妥布霉素同时敏感，注意该菌的分纯，鉴定，药敏。

555 此分离株对高浓度的链霉素耐药，链霉素无法和β-内酰胺药物协同。

556此分离株对高浓度的卡那霉素耐药，卡那霉素，阿米卡星，异帕沙星无法和β-内酰胺药物协同。

557此分离株对高浓度的庆大霉素耐药，氨基糖甙类无法和β-内酰胺药物协同。

558此分离株对高浓度的链霉素敏感，链霉素，卡那霉素，庆大霉素可以和β-内酰胺药物协同。

559此分离株对高浓度的卡那霉素敏感，链霉素，卡那霉素，庆大霉素可以和青霉素协同。560此分离株对高浓度的卡那霉素敏感，链霉素，卡那霉素，庆大霉素可以和β-内酰胺药物协同。

561此分离株对高浓度的庆大霉素敏感，链霉素，卡那霉素，庆大霉素可以和青霉素协同。562此分离株对高浓度的庆大霉素敏感，链霉素，卡那霉素，庆大霉素可以和β-内酰胺药物协同。

563 β-内酰胺酶阴性的葡萄球菌对青霉素耐药，青霉素，氨苄西林，阿莫西林，羧苄西林，替卡西林，美洛西林，哌拉西林的结果应改为耐药。

564 同497

565 同564，497

711 耐青霉素的葡萄球菌对苯唑西林的敏感性可运用到β-内酰胺酶复合物的解释。

712 苯唑西林的敏感性可代表苯唑西林，双氯西林，氟氯西林。

713 氨苄西林的敏感性可代表氨苄西林，阿莫西林。

714 阿洛西林的敏感性可代表阿洛西林，哌拉西林。

715 头孢唑林的敏感性可代表头孢唑林，头孢替安，头孢孟多，头孢呋辛，头孢西丁。717 四环素的敏感性可代表四环素，米诺环素，强力霉素。

718 庆大霉素的敏感性可代表庆大霉素，妥布霉素，萘替米星。

719 氧氟沙星的敏感性可代表氧氟沙星，环丙沙星，依诺沙星，诺氟沙星，司氟沙星，氟罗沙星。

720 青霉素的耐药性可代表氨苄西林，阿莫西林，替卡西林，阿洛西林，哌拉西林，美洛西林，结果已改为耐药。

721 当葡萄球菌耐苯唑西林（MRS），头孢菌素的敏感性菌改为耐药，同感染科医生会诊。722 头孢他啶的敏感性可代表头孢他啶，头孢噻肟，头孢甲肟，头孢唑肟，头孢地嗪，头孢哌酮，头孢曲松，头孢吡肟，头孢替坦。

723 红霉素的敏感性可代表红霉素，阿齐霉素。

724 美洛培南的敏感性代表美洛培南，亚胺培南。

725 青霉素G的敏感性代表青霉素G，青霉素V。

728 分离株对阿洛西林中介或耐药，应该单独检测哌拉西林的敏感性。

729 分离株对头孢唑林中介或耐药，应该单独检测头孢替安，头孢孟多，头孢呋辛，头孢西丁。

730 分离株对四环素中介或耐药，应该单独检测强力霉素或米诺环素。

731 分离株对庆大霉素中介或耐药，应该单独检测妥布霉素或萘替米星。

732 分离株对氧氟沙星中介或耐药，应该单独检测环丙沙星，依诺沙星，诺氟沙星，司氟沙星，氟罗沙星。

733青霉素的敏感性可代表氨苄西林，阿莫西林，替卡西林，阿洛西林，哌拉西林，美洛西林。

734 分离株对头孢他啶中介或耐药，应该单独检测头孢噻肟，头孢甲肟，头孢唑肟，头孢地嗪，头孢哌酮，头孢曲松，头孢吡肟，头孢替坦。

735 分离株对红霉素中介或耐药，应该单独检测阿齐霉素。

736 分离株对美洛培南中介或耐药，应该单独检测亚胺培南。

1001 屎肠球菌天然耐氨基糖甙类，氨基青霉素（氨苄西林）和大环内酯类，结果已改为耐药。

1002 粪肠球菌天然耐大环内酯类和林可霉素类，结果已改为耐药。

1003 粪肠球菌通常对可水解青霉素敏感。注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1004 粪肠球菌通常对碳青霉烯类和氟喹诺酮敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。1005 肺炎链球菌通常对万古霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1006 化脓性链球菌通常对可水解青霉素，一代头孢菌素，万古霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1007 无乳链球菌通常对可水解青霉素，一代头孢，万古霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1009 金黄色葡萄球菌通常对氯霉素和糖肽类抗生素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。1010 表皮葡萄球菌通常对糖肽类抗生素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1011 腐生葡萄球菌通常对糖肽类抗生素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1012 流感嗜血杆菌通常对三代头孢，阿莫西林/克拉维酸，氟喹诺酮敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1013 淋病奈瑟氏菌通常对三代头孢敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1014 卡他莫拉氏菌（布兰汉）通常对二代头孢（头孢呋辛，头孢孟多），羧基青霉素，氯霉素，氨基青霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1015 产单核细胞李斯特菌通常对阿莫西林/克拉维酸，四环素红霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1016 肠杆菌科通常对碳青霉烯类敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1017 志贺氏菌属通常对羧基青霉素和氯霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。1018 沙门氏菌属通常对萘啶酸和依诺沙星敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1019 鼠伤寒沙门氏菌通常对复方新诺明敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1020 伤寒沙门氏菌通常对氨基青霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1021 弗劳地枸橼酸杆菌对氨基青霉素，萘啶酸，依诺沙星天然耐药，结果已改为耐药。1022 弗劳地枸橼酸杆菌对一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1023 异型枸橼酸杆菌对氨基青霉素，萘啶酸，依诺沙星天然耐药，结果已改为耐药。1024 异型枸橼酸杆菌通常对二代头孢敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1025 无丙枸橼酸杆菌对氨基青霉素，羧基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。

1026 产气肠杆菌对氨基青霉素，一代头孢，氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物天然耐药，结果已改为耐药。

1027 产气肠杆菌通常对氨基糖甙类敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1028 阴沟肠杆菌通常对氨基青霉素，一代头孢，氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物天然耐药，结果已改为耐药。

1030 阴沟肠杆菌通常对氨基糖甙类敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1031 蜂房哈夫尼菌对氨基青霉素和氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物天然耐药，结果已改为耐药。

1032 蜂房哈夫尼菌对一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1033 蜂房哈夫尼菌通常对氯霉素，萘啶酸，依诺沙星，复方新诺明敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1034 聚团肠杆菌对氨基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。

1035 肺炎克雷伯菌属肺炎亚种对氨基青霉素，羧基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。1036 肺炎克雷伯菌属肺炎亚种通常氨基糖甙类敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。1037 产酸克雷伯菌对氨基青霉素，羧基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。

1038 产酸克雷伯菌通常对氨基糖甙类敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1039 粘质沙雷氏菌对氨基青霉素，氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物，一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1040 粘质沙雷氏菌对多粘菌素B天然耐药，结果已改为耐药。

1041 液化沙雷氏菌对氨基青霉素，氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物，一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1042 摩根摩根菌对氨基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。

1043 摩根摩根菌对呋喃妥因和多粘菌素B天然耐药，结果已改为耐药。

1044 摩根摩根菌通常对羧基青霉素，氨基青霉素敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。1045 普通变形杆菌对氨基青霉素，氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物，一代头孢，二代头孢，四环素耐药，结果已改为耐药。

1046 普通变形杆菌对呋喃妥因天然耐药，结果已改为耐药。

1047 普通变形杆菌对多粘菌素B天然耐药，结果已改为耐药。

1048 奇异变形杆菌通常对二代头孢敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1049 奇异变形杆菌对多粘菌素B天然耐药，结果已改为耐药。

1050 奇异变形杆菌对呋喃妥因天然耐药，结果已改为耐药。

1051 普罗威登菌属对氨基青霉素天然耐药，结果已改为耐药。

1052 斯氏普罗威登菌对氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物，四环素天然耐药，结果已改为耐药。

1053 斯氏普罗威登菌对呋喃妥因天然耐药，结果已改为耐药。

1054 斯氏普罗威登菌对多粘菌素B天然耐药，结果改为耐药。

1055 雷氏普罗威登菌对四环素天然耐药，结果已改为耐药。

1056 雷氏普罗威登菌对一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1057 小肠结肠炎耶尔森氏菌对一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1058 鲍曼不动杆菌对一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1059 铜绿假单胞菌对氨基青霉素，氨基青霉素/β-内酰胺酶复合物，一代头孢，四环素，氯霉素，萘啶酸，依诺沙星，复方新诺明天然耐药，结果已改为耐药。

1060 洋葱伯克霍得菌对氨基青霉素，一代头孢，碳青霉烯类，萘啶酸，依诺沙星天然耐药，结果已改为耐药。

1061 洋葱伯克霍得菌对阿莫西林/克拉维酸，氨苄西林/舒巴坦天然耐药，结果已改为耐药。1062 嗜麦芽窄食单胞菌对氨基糖甙类，氨基青霉素，碳青霉烯类，二代头孢，萘啶酸，依诺沙星天然耐药，结果已改为耐药。

1063 嗜水气单胞菌对一代头孢天然耐药，结果已改为耐药。

1064 嗜水气单胞菌通常对二代头孢，萘啶酸，依诺沙星敏感，注意该菌株的分纯，鉴定，药敏。

1065 奇异变形杆菌对美西林天然耐药，结果已改为耐药。

1402 这株细菌表现为ESBL，对碳青霉烯类敏感，对脲基青霉素，头孢曲松，头孢噻肟，头孢他啶，头孢浦肟，氨曲南耐药，请和感染科医生会诊。

1045这株细菌表现为ESBL，请和感染科医生会诊。

1414 当葡萄球菌对青霉素MIC为0.0.~0.13ug/ml，请做β-内酰胺酶筛选试验，检测是否有诱导酶产生。并根据结果修改可水解青霉素的SIR值。

1422 这株细菌的ESBL检测未得出结论，请对其进行检测，如果阳性，除碳青霉烯类外的β-内酰胺药物都改成耐药。

1429 当沙门氏菌属，志贺氏菌属，奇异变形杆菌检测出ESBL，除碳青霉烯类外的β-内酰胺药物都改成耐药，结果已改为耐药。

1430 这株菌产ESBL，临床再用这些β-内酰胺药物治疗将无效。请和感染科医生会诊。1431 当枸橼酸杆菌，肠杆菌，沙雷氏菌，普罗威登菌属，摩根菌属，变形杆菌属（除奇异变形杆菌）检测出ESBL，除碳青霉烯类和四代头孢菌素外的β-内酰胺药物都改成耐药。结果已改为耐药。

1502 这株肠杆菌科细菌为ESBL阳性，对碳青霉烯类敏感，对脲基青霉素，头孢曲松，头孢噻肟，头孢他啶，头孢浦肟，氨曲南耐药，请和感染科医生会诊。

1503 如果产酸克雷伯菌检测出K1型高产表型，β-内酰胺药物的敏感性除碳青霉烯类，四代头孢菌素，头孢他啶外均改为耐药，结果已改为耐药。

1505这株肠杆菌科细菌为ESBL阳性，请和感染科医生会诊。

1506 分离株确认为β-内酰胺酶阳性（以头孢硝噻吩为底物）

1507 分离株确认为VRE（VanA,VanB）请和感染科医生会诊。

1508 如果卡氏黄色肠球菌或鸡肠球菌对万古霉素中介或耐药，说明其为中介水平耐万古霉素（VanC）

1509 该分离株耐万古霉素，请将其分离到种。

1510 MRS不应该报告头孢菌素，β-内酰胺酶复合物，亚胺培南，结果以改为耐药。

1511 同224

1512 同227

1513 肠杆菌科细菌很少耐碳青霉烯类，请仔细做药敏实验，如果确认是，将所有的β-内酰胺类药物均改为耐药。

1518 同1506

1522 同1422

1523 如果葡萄球菌检测出β-内酰胺酶，青霉素，氨苄西林，阿莫西林，羧苄西林，替卡西林，美洛西林，哌拉西林的结果均改为耐药，结果以该。

1524 这株细菌对K1型高产β-内酰胺酶未做出结论，头孢曲松和头孢噻肟的结果被删除，氨曲南必须用产酸克雷伯菌在PHONEX上确认，以得出关于耐药机理的解释。1525 细菌对所以药物都耐药很少见，请重新鉴定和药敏。

1526 该细菌对万古霉素中介或耐药，请重新分纯，鉴定，药敏。

1527 这株细菌对MRS未做出结论，所以β-内酰胺类结果被删除，请检测其MRS的状态，如果是，将所有β-内酰胺类药物结果均改为耐药。

1528 这株细菌对青霉素耐药未做出结论，可水解青霉素结果被删除，请检测其青霉素的耐药性，如果阳性，将所以可水解青霉素的结果改为耐药。

1529 当大肠埃希氏菌，产酸克雷伯菌，肺炎克雷伯菌肺炎亚种检测出ESBL，除碳青霉烯类外的β-内酰胺类药物均改为耐药。结果已改为耐药。请同感染科医生会诊。1530 这株细菌确认为MRS，请同感染科医生会诊。

临床微生物学检验之药敏

临床微生物学检验 一、纸片扩散法 又称Kirby-Bauer(K-B)法，由于其在抗菌药物的选择上具有灵活性，且花费低廉，被WHO 推荐为定性药敏试验的基本方法，已在临床广泛使用。 （一）实验原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。 （二）培养基和抗菌药物纸片 1、抗菌药物纸片选择直径为6.35mm，吸水量为20μl的专用药敏纸片，用逐片加样或 侵泡方法使每片含药量达规定所示。含药纸片密封贮存2~8℃或-20℃无霜冷冻箱内保存，β-内酰胺类药敏纸片应冷冻贮存，且不超过一周。使用前将贮存容器移至室温平衡1~2小时，避免开启贮存容器时产生冷凝水。 2、培养基水解酪蛋白（Mueller-Hinton,M-H）培养基是CLSI采用的兼性厌氧菌和需氧 菌药敏试验标准培养基，pH为7.2~7.4，对那些营养要求高的细菌如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、链球菌等需加入补充物质。琼脂厚度为4mm。配置琼脂平板当天使用或置塑料密封袋中4℃保存，使用前应将平板置35℃温箱孵育15分钟，使其表面干燥。（三）实验方法 实验菌株和标准菌株接种采用直接菌落法或细菌液体生长法、用0.5麦氏比浊管标准的菌液浓度，校正浓度后的菌液应在15分钟内接种完毕。操作步骤如下： 1、接种用无菌棉拭子蘸取菌液，在管内壁将多余菌液旋转挤去后，在琼脂表面均匀涂抹 接种3次，每次旋转平板60度，最后沿平板內缘涂抹一周。 2、贴抗菌药物纸片平板置室温下干燥3~5分钟，用纸片分配器或无菌镊子将含药纸片紧 贴于琼脂表面，各纸片中心相距》24mm，纸片距平板內缘》15mm，纸片贴上后不可再移动，因为抗菌药物会自动扩散到培养基内。 3、孵育置35℃孵育箱16~18小时后阅读结果，对苯唑西林和万古霉素敏感等应孵育24 小时。 （四）结果判断和报告 用游标卡尺或直尺量取抑菌圈直径（抑菌圈的边缘应是无明显细菌生长的区域），先量取质控菌株的抑菌环直径，以判断质控是否合格；然后量取试验菌株的抑菌环直径。根据CLSI 标准，对量取的抑菌圈直径作出“敏感”、“耐药”、“中介”的判断。 （五）质量控制 对于肠杆菌科细菌，M-H琼脂，生长法或直接菌落悬液法，相当于0.5麦氏标准的细菌浓度，35℃+-2℃，空气，16~18小时观察结果，质控菌株推荐为大肠埃希菌A TCC25922，大肠埃希菌A TCC35218（为监控β-内酰胺酶/β-内酰胺抑制剂纸片用）；对于铜绿假单胞菌A TCC35218；对于葡萄球菌属细菌，16~18小时观察结果，测苯唑西林、甲氧西林、萘夫西林和万古霉素需24小时，试验温度超过35℃不能检测甲氧西林耐药葡萄球菌，推荐质控菌株为金黄色葡萄球菌A TCC25923，大肠埃希菌A TCC35218，纸片扩散法检测葡萄球菌对万古霉素的敏感性不可靠；对于肠球菌属细菌，16~18小时观察结果，测万古霉素需24小时，推荐质控菌株为粪肠球菌A TCC29212;对于流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌，推荐质控菌株为流感嗜血杆菌A TCC49247，流感嗜血杆菌A TCC49766，大肠埃希菌A TCC35218（测试阿莫西林/克拉维酸时）；对于肺炎链球菌和肺炎链球菌之外其他链球菌，培养基为M-H琼脂+5%羊血，35℃+-2℃，5%CO2,20~24小时观察结果，推荐质控菌株为肺炎链球菌A TCC49619.

微生物实验报告

一、实验目的 1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的种类，掌握培养基制备的原则和一般方法； 2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法； 3.了解实验室和医院空气的有菌环境，加强消毒灭菌的观念；掌握医院病房空气的细菌检测方法；掌握空气的卫生细菌学监测指标及意义； 4.了解人体体表的有菌环境，加强消毒灭菌的观念； 5.掌握油镜的使用方法，掌握细菌涂片标本的制备及革兰氏染色法的原理及操作，熟悉细菌的基本形态 6.掌握几种常用的生化反应的名称、原理、方法、结果讨论及用途； 7.掌握血浆凝固酶的原理、方法、结果观察及判断； 8.掌握抗菌素敏感性试验的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法； 9.掌握玻片凝集反应试验的原理、方法、结果观察及判断。

二、实验器材 1.培养基的制备：试管架、移液管、棉塞、牛皮纸、手套、石棉网、橡皮筋、蒸馏水、天平、称量器皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、干粉培养基。 2.细菌的分离培养：接种环，酒精灯，打火机，浓汁标本1支，粪便标本1支；碘酒棉球1瓶，酒精棉球1瓶，眼科镊子2把；伊红美蓝平板2个，营养琼脂平板5个。 3.细菌的纯培养：接种环，酒精灯，打火机，中性笔，斜面4支，细菌分离培养物（上次实验平板） 4.细菌的形态学检查：接种环，酒精灯，打火机，中性笔，斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1本，载玻片4张，显微镜，革兰氏染色试剂6组，染色架8个。 5.细菌的生化试验等：接种环，接种针，酒精灯，打火机，中性笔，斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，镊子2把，兔血浆，生理盐水。 6.细菌的血清学试验、结果分析：接种环，酒精灯，打火机，玻片、志贺菌诊断血清，半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。

微生物抗菌素敏感试验

抗菌素敏感试验 一、实验目的 1、掌握药敏试验（K-B纸片琼脂扩散法）方法、原理及结果判读 2、掌握抗酸染色方法及结果判定 二、实验原理 1、抗菌药物分类： （1）β-内酰胺类：青霉素类和头孢菌素类（硫酶素类、单内酰环类、β-内酰酶抑制剂、甲氧青霉素类) （2）氨基糖甙类：链霉素、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素、小诺霉素、阿奇霉素 （3）大环内脂类：红霉素、白霉素、乙酰螺旋霉素、麦迪霉素、交沙霉素 （4）四环素类：四环素、土霉素、金霉素、强力霉素 （5）氯霉素类：氯霉素、甲砜霉素 （6）作用于G+细菌的其它抗生素：林可霉素、氯林可霉素、万古霉素、杆菌肽 （7）作用于G-菌的其它抗生素：多粘菌素、磷霉素、、环丝氨酸、利福平、抗真菌抗生素、灰黄霉素 （8）抗肿瘤抗生素：丝裂霉素、放线菌素D、博莱霉素、阿霉素 （9）具有免疫抑制作用的抗生素：环孢霉素 2、抗菌药物敏感试验(antimicrobial susceptibility testing in vitro ) 1）抑菌试验：体外测定抗菌药物抑制细菌生长能力的试验 （1）纸片扩散法（disc diffusion test） K-B纸片琼脂扩散法原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关。（2）稀释法（dilusion test） a.将被检菌株接种于一组含有不同稀释度抗菌药物的培养基内 b.37℃18-24小时后，抗菌药物能抑制被检菌肉眼可见生长的最低浓度（MIC）即该菌 对该抗菌药物的敏感度 c.MIC50 MIC90 d.根据MIC和常用剂量时该药所能达到的血药浓度来划定细菌对各种药物的敏感度或 耐药的界限（break point,折点) （3）E试验法（E test） 2）杀菌实验 3）联合药敏试验 4）检测细菌所产生的抗生素灭活酶试验 3、药物敏感性分级 1）敏感（S）

药敏试验实验报告

药敏试验： 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test 法），和自动化仪器等。 简介： 体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。 根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A 组抗生素）或临床使用的主要抗生素（B组抗生素）进行药敏试验。 抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。 随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参

考，并提高疗效。农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 实验步骤： 实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备） 细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。

梅里埃微生物药敏鉴定分析仪操作规程

梅里埃ATB微生物药敏鉴定分析仪操作规程1 主要技术指标 梅里埃ATB微生物鉴定／药敏分析系统融合了自动化、电脑化及微 生物微量生化反应测试方法，可同时进行微生物分析鉴定（ID）与 药敏（MIC）检测，使细菌鉴定／药敏分析规范化、标准化、现代化。 1.1完善的分析系统： 微生物鉴定分析系统，微生物药敏分析系统 统计分析／院内感染监测专家系统 联网功能 1.2药物种类： 呋喃类，磺胺类，喹诺酮类，青霉素类 大环内酯类，氨基糖甙类，头孢菌素类 1.2鉴定范围： 肠杆菌科，非发酵菌，葡萄球菌属，真菌， 微球菌属，链球菌属，肠球菌属，弧菌属 1.3院内感染检测 环境空气，物体表面，医疗用品， 消毒剂及保存液，血液透析 2 适用范围 梅里埃ATB微生物分析系统(包括微生物鉴定和药敏分析两大功能)；是对己分离培养出来的细菌、真菌等微生物进行种、属鉴定，并同时测定该菌对各种抗菌药物敏感/耐药程度的专用设备。

3 工作原理 自1880年郭霍(Koch)发明固体培养基，对细菌的研究技术有了重大的 突破之后，一个多世纪以来，人类对细菌的研究和认识已经得到了极大 的成就，对细菌分类的理论根据和方法已趋成熟，命名已经统一，对繁 浩的各种细菌众多的生物学、物理学特性己基本明确，从20世纪初 开始，形成了利用各种细菌之间生物学、物理学特性的差异或不同，来 区别和鉴定细菌种类的方法，不断丰富发展，沿用至今，成为细菌鉴定 的常规方法。 但由于细菌种类繁多，生物学性状错综复杂，实验操作繁琐、费时，不仅初学者不易掌握，有经验者也常感困惑。20世纪70年代，由于 电子计算机的发展，有人首先利用信息编码来签定细菌，将复杂的各种细菌的生物学性状建立数据库，被检菌的各种生物性状测出后，输入电脑与贮存信息相比较即刻可判断未知菌的种属。八十年代初己设计出各种多项生物学试验的套装组合，与电脑贮存的项目内容相对应，即细菌的编码鉴定法，很快在全球得到了重视，迅速推广应用。随后，在上述编码鉴定的基础上，又开发研究了各种类型的半自动和全自动的细菌鉴定药敏分析仪器。 梅里埃ATB微生物鉴定 /药敏分析系统，与国际上的其他同类仪器一样，都是按照上述的原则和技术基础而设计和投产的，设计时，细菌的分类、命名、各种细菌的生物学特性和鉴定依据，各项鉴定试验，特别是“关键性试验”的方法和标准，抗生素药物与浓度的选择和敏感度判断标准等，全部按卫生部印发的《全国临床检验操作规程第二版》、《NCCLS药敏试验法规 (2001)》等权威性文献执行，这些文献己与国际接轨，因此，它和国外同类产品的性质和功能基本上是一致的。 4 操作步骤与功能特点 梅里埃ATB微生物自动鉴定／药敏分析系统分为“半自动”和 “自动”两种，半自动系统由电脑软件和测试板两部分组成：自动系统 是在半自动的基础上再加自动判断装置。使用半自动系统时，先将被测

细菌药物敏感试验实验报告

细菌药物敏感试验实验报告 药物敏感性试验的基本原则 1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2药敏试验测试的前提条件： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。 错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3测试结果应准确： 实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理

体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 具体的专业要求 1标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。实际工作中需重点考虑的标本如下。 1．脑脊髓液： 正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。

临床微生物检验报告单的解读

首先，准确鉴定病原菌、报告药敏试验结果，给临床选择用药提供科学的参考依据，是我们微生物实验室不可推卸的责任，但在药物的选择和实际应用过程中多了解一些微生物及药理方面的知识，可能会对临床治疗起到事半功倍的效果。特别是在痰及咽拭子的培养鉴定中，由于多种条件致病菌的存在，是否引起感染、是否需要抗菌治疗，都需要临床医生综合分析后判断，以下几点是临床工作中可能会遇到的问题： 1、有些临床常用药物药敏试验中没有 例：头孢哌酮/舒巴坦为广谱抗菌药物，主要用于治疗革兰氏阴性杆菌，如大肠埃希菌等。CLSI 规定其对肠杆菌科细菌的判定折点为≤15 耐药，≥21 敏感，所以我们将其加入到肠杆菌科细菌药敏谱中，但由于头孢哌酮/舒巴坦对葡萄球菌等革兰氏阳性球菌CLSI 没有判定折点，所以无法判定其对于葡萄球菌敏感或是耐药，也不应该加入葡萄球菌药敏试验中。 2、有些新药没有列入药敏谱 首先，新药由于刚刚推广，还没有列入CLSI 的监测范畴，没有依据加以判断。其次，药敏谱中各类各代抗生素都具有一定代表性，不能面面俱到，如喹诺酮类二代抗菌药物环丙沙星在药敏试验中敏感，那么对于三代超光谱抗生素左氧氟沙星、司帕沙星等临床医生可根据需要加以选择。 3、细菌的天然耐药有些菌属或菌种对某些抗菌药物天然耐药或固有耐药，该耐药性具有种属特异性。 ⑴肠球菌：对除青霉素、氨苄西林以外的所有青霉素类、头孢菌素类抗生素天然耐药。 ⑵嗜麦芽窄食单胞菌：对亚胺培南（泰能）、美罗培南天然耐药。 ⑶肺炎链球菌：对氨基糖苷类抗生素天然耐药。 ⑷产气肠杆菌和阴沟肠杆菌：对头孢西丁天然耐药。 ⑸克柔念珠菌：对氟康唑天然耐药。 ⑹肺炎克雷伯菌：对氨苄西林天然耐药。 ⑺铜绿假单胞菌：对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/棒酸、复方新诺明、头孢 1 代、头孢2 代天然耐药。 更为特殊的是，铜绿假单胞菌对三代的头孢噻肟和头孢曲松即使药敏试验敏感，在实际临床治疗中也需要超大剂量才会取得疗效，但人体对超大剂量的三代头孢不具有长时间的耐药性。铜绿假单胞菌有对很多药物的诱导耐药性，在初期可能没有表现出来，一旦接触某种抗生素，沉睡的基因被激活，耐药性表现出来，这种特性在β-内酰胺类抗生素中尤为明显，可能在体外试验敏感，在实际治疗中却无效，所以采用头孢噻肟和头孢曲松进行治疗时就要冒险，这在临床上是首先要规避的。 充分了解抗菌药物体内疗效与体外药敏试验的差异和药敏试验的局限性，意在找到一定的原因和规律性，在使用广谱抗菌药物之前，应先采集标本送检，再根据药敏试验结果和临床疗效调整给药方案，使临床应用抗菌药物趋向合理，减少用药的盲目性和随意性，提高疑难危重病人的救治成功率。 合理使用抗菌药物需要综合考虑多方面因素，绝不是一份药敏试验报告所能完全概括的，其中的临床思维和临床操作都十分复杂，要想使我们的抗生素应用更加科学、合理、有效，这需要微生物实验室和临床科室的共同努力，我们也将不断学习、更新微生物检测、试验及药理方面的知识，力争为临床科室提供更有价值的参考依据。

微生物鉴定与药敏试验流程 (1)

微生物鉴定与药敏试验流程 1、实验原理 （1）微生物鉴定原理 微生物鉴定卡中含有几十种生化反应培养基，当微生物在培养基中代谢基质时导致pH值的改变而使指示剂发生变化；同时微生物生长产生各种酶，可与相应的荧光标记底物发生反应，使荧光强度发生改变。通过检测这些变化得到待检微生物的生化特征，自动与数据库内几千种菌株的生化参数进行比对分析，并自动计算得出鉴定结果。 （2）药敏分析系统工作原理 药敏分析系统使用药敏测试板（卡）进行测试。将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入或在仪器中直接孵育，仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。得出待检菌在各药物浓度的生长斜率，经回归分析得到最低抑菌浓度MIC值。 2、实验步骤 （1）取洁净菌液管，加3mL %的无菌盐水，将纯培养的待检菌配制成浓度为~麦氏单位的菌悬液，将菌液管放入带芯片的专用架，在紧挨待检菌液管的位置放入一空的菌液管（供药敏试验用）。 （2）打开检验信息录入工作站电源，仪器自检完毕后按F2键，仪器进入操作程序。将架放入工作站，芯片中的数据自动清零。 （3）手工输入待检菌样品编号，扫描输入鉴定卡和药敏卡的ID号，将鉴定卡和药敏卡放入相应的槽位，进样管插入相应的菌液管中。取下架，关闭工作站电源。 （4）打开鉴定仪，仪器自检完毕后自动进入检测程序，按要求设定好参数。 （5）进样指示灯为绿色长亮时，打开进样盖，将架放到传送船上，关好进样盖。仪器自动检测并读取样品信息，自动完成稀释、进样、封口程序，并将卡片送入孵育监测单元。传送船回到进样口，指示灯闪烁时，取出试管架。 （6）由计算机控制的读数器定时对卡片进行扫描并读数，动态记录反应变化。一旦卡内的终点指示孔达到临界值，则表示整个实验已完成。

南方医科大学微生物实验报告

2016年南方医科大学医学微生物学实验报告 日期 2016年5月22号 一、实验目的 1、掌握培养基制备的原则和一般方法。 2、掌握病原菌的分离与培养方法。 3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法，熟悉细菌基本形态。 4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。 5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。 6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法。 7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。 二、实验器材 1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml 刻 度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯 2、脓汁标本1支，粪便标本1支；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个，伊红美蓝 平板2个，接种环，酒精灯 3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板） 题目 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 成绩 实验者 作者：马浩楠 3140020007 参与者名字：马浩楠 丁超 王尧鑫 桂文茁 年级专业 2014级医学影像专业 指导老师 罗军

4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1 本，载玻片4张，染色瓶，染色架 5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4 个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把 6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。 三、方法与步骤 1、培养基的制备： 培养基称量干粉培 养基(g) 水量(ml) 煮沸(次）分装(ml) 备注 营养琼脂11.4 300 3瓶，500ml 瓶，平板 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支×3，中试管，斜面 营养肉汤 1.3 60 1 3 20支×2，小试管，肉汤 半固体琼脂 1.7 60 3 4 14支×3，小试管，高层 （1）营养琼脂培养基的制备：称量11.4g琼脂，置于三角烧瓶中，加入300ml蒸馏水，分2瓶装，用于倒平板。 （2）营养琼脂培养基的制备（用于制作斜面）：称量2.9g琼脂，置于三角烧瓶中，加入75ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管5ml。 （3）肉汤培养基的制备（用于制作液体培养基）：称量1.1g琼脂，置于三角烧瓶中，加入50ml蒸馏水，放在电炉上，煮沸1次，分15支小试管装，每支试管5ml。 （4）半固体琼脂培养基的制备：称量1.7g琼脂，置于三角烧瓶中，加入60ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管4ml。 2、细菌的分离培养 平板划线分离法

微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程

微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程1．目的 规范药物敏感性试验标准操作规程，确保药敏结果准确。 2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质 控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不 失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日做1次，寻找失控的原因

并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5.操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5ml M-H肉汤（0.5麦氏单位）中，经35℃培养6～8h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周缘一圈。 5.4 涂布菌液的平板于室温中干燥3～5分钟后，用纸片分配器或无菌镊子取药敏纸片，贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，直径90mm的平板宜贴6张药敏纸片。 5.5 将贴好纸片的平板置35℃孵育18～24小时后，用卡尺量取抑菌圈直径。个别菌孵育温度，时间及条件应按照CLSI规定。 6.结果判断 7.根据CLSI M100最新标准将所测抑菌圈的大小，报告为敏感（S）、中介/中敏（I）或耐药（R）。

实验11-抗生素的抑菌试验

实验十一抗生素的抑菌试验 一目的要求 1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法 2、了解抗生素的抗菌谱 二实验原理 抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。 由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。 三实验器材 1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。 2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。 3、试剂青霉素、链霉素。 四方法步骤 1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。 2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。 3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。 4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。 5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。 6、培养与观察将平板放于33℃左右的温度培养，每24h测量一次透明抑菌圈直径，共测量3次。

微生物培养及药敏结果解读内容

微生物培养及药敏结果解 读内容 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

微生物培养、药敏试验的流程及意义 一、微生物培养及药敏试验的总述 微生物培养就是使用体外试验的方法检测可能导致感染的病原菌，并给以药敏结果，为临床医生针对某一特定的临床感染提供依据。而药敏试验则是承接微生物培养的一项工作，即对于培养得到的病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物的耐药性，来预测抗菌药物的临床治疗效果，从而为临床医生提供选用抗菌药物的依据来治疗感染。 对于检测到的可能的致病菌进行药敏试验时选择的药物是参照美国的CLSI推荐的标准制定的。尤其，使用全自动微生物分析仪进行药敏试验时有固定的药敏组合，不是人为可以随意添加或减少的。 （一）微生物的培养和药敏试验的流程基本为： ①将标本进行处理（不是所有的标本都需要处理）； ②将标本接种于不同的培养皿中在不同条件的培养箱中进行培养（不同的标本所含菌的种类不同，不同菌的生长条件不同，因此需要接种于不同的培养皿中）； ③24h后观察培养皿中细菌的生长情况： a.此时若无细菌培养，继续放回培养箱中培养24h，若仍然无细菌生长则判定为阴性结果，因此阴性结果出具的时间为48h以后。 b.若有细菌生长，要根据形态和气味等对细菌进行初步的判定，若能判定出细菌的种类，则进行相应的药敏试验。贴有药敏片的培养皿在培养箱中培养24h后进行药敏结果的解读，然后报告结果，这种微生物培养及药敏结果报告出具的时间就是48h以后。

由于不同的细菌的生长的速度不同，有些细菌在培养24h后不能完全判定结果甚者24h培养后无法观察到明显的细菌生长的则需要继续培养24h，即连续培养48h后同样根据菌落的形态、气味等来观察判定细菌的种类然后进行药敏试验。这种微生物培养和药敏试验结果出具需要72h以后。 而血液、骨髓等标本则是利用不同于上述培养方式的方法进行培养。它有专门的培养瓶和仪器。这种仪器会自动监测培养瓶中的变化来判定有无细菌生长，若有细菌生长仪器会发出警报。在培养5天内任何时间发出警报的培养瓶都要抽取瓶中的物质在培养皿中进行接种培养，同样在菌种鉴定后进行药敏试验；若在培养5天内不发出警报的培养瓶则视为阴性结果。因此血培养出具结果的时间为5～7天。 菌落的鉴定需要有雄厚的工作经验和熟练的相关基础知识。常规鉴定的方法有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征；理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应。在微生物室学习时发现，很多时候在不太确定细菌的种类时，检验人员也会结合理化特性来判定细菌种类。 （二）革兰氏染色、应用及意义 由于微生物的生长有时间限定，因此微生物培养和药敏试验没有急查的说法。最快的结果也只能是通过涂片来判定有无细菌生长和细菌染色后的颜色和形态，来给临床医生的用药提供依据。 革兰氏阳性菌和阴性菌因为细胞壁的结构不同，在革兰氏染色时染成不同的颜色。革兰氏阳性菌显示紫色、革兰氏阴性菌显红色或粉色。由于细胞壁的结构不同，导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物的敏感性等方面均有较大差异。一般情况下，大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们差生内毒素，靠内毒素使人致病。

常见细菌药物敏感性试验报告规范

常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识 微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。 一、药物敏感性试验的意义和基本原则 (一)意义 药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。 (二)基本原则 1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献[3,4]。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2．药敏试验测试的前提条件[5]： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3．测试结果应准确： 实验室应遵照C L S I文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 二、具体的专业要求 (一)标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。

微生物实验报告2012054015杨小静

脓汁和粪便标本中病原菌的分离培养与检测 专业：中西医临床医学七年制学号：2012054015 姓名：杨小静 实验目的：本次脓汁粪便标本中病原微生物的检测实验，旨在通过培养基制备，病原菌的分离与培养，以及细菌鉴别实验如革兰氏染色法，血浆凝固酶试验，药敏试验，半固体接种法实验，从而对医学微生物学主要的研究方法和手段有一定程度的了解，初步掌握微生物试验的基本技能和原理，也有助于无菌观念的树立。 1.实验器材： 接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、普通冰箱、冷藏室、隔水式电热恒温培养箱、生物显微镜、电炉、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子 2.实验方法与步骤：①培养基的制备②细菌的分离培养③细菌的纯培养④细菌的形态学检查⑤细菌的生化试验等⑥细菌的血清学试验、结果 第一次实验 2.1培养基的制备、消毒和灭菌 如下图表格内容要求所示制备培养基。 表一 组号培养基称量 (g) 水量 (ml) 煮沸 (次) 分装 (ml) 备注（40人份） 1 营养琼脂11.4 300 4瓶，500ml瓶，平板 2～4 营养琼脂 2.9 75 3 5 15支×3，中试管，斜面5～7 营养肉汤 1.1 50 1 3 15支×3，小试管，液体8～10 半固体 1.9 50 3 3 15支×3，小试管，高层 第二次实验 2.1手指和空气的细菌学检查 实验步骤：1空气的细菌学检查：每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、卫生间或任选地点），将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边，平板暴露于空气中15分钟，然后平板倒扣盖上，作标记。37℃温箱培养24小时，观察结果。（※CFU/m3 ＝50000N÷AT≈86N(直径7cm平板）。N：平板上的菌落数。A：平板面积(平方厘米)。T：采样时间(分钟)。 CFU /m3 ＝50,000N÷AT ≈8333 2手指皮肤的细菌学检查： 上:甲、丙→常规洗手甲和乙、丙和丁共用1个平板

微生物实验报告

脓汁和粪便标本中病原菌的检测 专业：学号：姓名： 一、实验目的 探究检测其病原菌的类型并通过一系列的观察与鉴定从而确定其病原菌的名称和性质。在实践中学习培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定等技巧。从而掌握微生物实验的各种操作方法，培养对微生物实验的兴趣。 二、实验材料 器材 打火机、油性笔、酒精灯、接种环、接种针、污物盘、普通冰柜、隔水式电热恒温培养箱、奥林巴斯CX21型生物显微镜、电炉、试管（带棉塞）、称量纸、药勺、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、尺子、锥形瓶、高压蒸汽灭菌器、镊子、玻片、吸水纸、拭镜纸 试剂药品 普通营养琼脂培养基、蒸馏水、脓汁标本、粪便标本、石蜡油、生理盐水、结晶紫、卢戈碘液、95%乙醇、稀释复红、葡萄糖微量发酵管（2支）、乳糖微量发酵管（2支）、青霉素抗菌素纸片、链霉素抗菌素纸片、庆大霉素抗菌素纸片、血浆、福氏志贺菌诊断血清 三、方法与步骤 1、培养基制备 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌→（1）平板培养基：倾注平板10ml→琼脂完全凝固后，平板倒放→4℃冰箱保存备用。（2）斜面培养基：培养基趁热斜放→琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。

→贴上标签后灭菌使用。 2、空气与人体体表细菌学检查 ①空气的细菌学检查 每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、卫生间或任选地点）→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15min→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24h→观察结果。 ②人体体表的细菌学检查 甲乙常规洗手，丙丁标准洗手。甲和乙、丙和丁共用1个平板 按规定在普通平板上接种手指上的细菌。第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。 3、细菌的分离培养 接种环烧灼灭菌→分别取脓汁标本与粪便标本点在普通平板和依红美蓝平板上，各做两份，→烧掉接种环上多余的标本→冷却后，应用分区划线分离法，将脓汁标本接种于营养琼脂平板（2份），粪便标本接种于伊红美蓝平板（2份）→接种环烧灼灭菌→将平板倒置37℃培养18～24h→观察结果。 4、细菌的群体生长特性观察和纯化培养 接种环烧灼灭菌→挑选平板上典型的四种单菌落（白色、黄色、紫黑色、粉红色）进行斜面接种纯培养→做好标记→接种环烧灼灭菌→斜面培养基置于37℃培养过夜→保存备用 5、细菌的个体形态特征的观察 ①革兰氏染色： 取洁净载玻片→用灭菌操作后的接种环取生理盐水1-2环于玻片上→挑取细菌培养物少许与盐水轻轻抹匀→待涂片干燥后在酒精灯火焰外侧快速来回2-3回合→结晶紫初染1min→水洗→卢戈碘液媒染1min→水洗→95％乙醇脱色约20s→水洗→稀释品红→复染1min→水洗→吸干,镜检。 ②肉汤接种法: 接种环烧灼灭菌→分别在斜面培养物中挑取菌苔少许→立即移入肉汤培养基管中→在接近液面的管壁上轻轻研磨→沾取少量肉汤调和→混匀→试管口通过火焰2-3次灭菌→塞好棉塞→35℃培养4~6h 6、药敏试验 接种环烧灼灭菌→分别取之前实验中得到的四种菌液在普通平板密集涂布→接种环烧灼灭菌→标记:青、链、庆→镊子火焰消毒→贴青霉素、链霉素、庆大霉素纸片→按压→镊子消毒→倒置37℃培养18～24h→观察结果

微生物培养及药敏结果解读内容

微生物培养、药敏试验的流程及意义 一、微生物培养及药敏试验的总述 微生物培养就是使用体外试验的方法检测可能导致感染的病原菌，并给以药敏结果，为临床医生针对某一特定的临床感染提供依据。而药敏试验则是承接微生物培养的一项工作，即对于培养得到的病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物的耐药性，来预测抗菌药物的临床治疗效果，从而为临床医生提供选用抗菌药物的依据来治疗感染。 对于检测到的可能的致病菌进行药敏试验时选择的药物是参照美国的CLSI推荐的标准制定的。尤其，使用全自动微生物分析仪进行药敏试验时有固定的药敏组合，不是人为可以随意添加或减少的。 （一）微生物的培养和药敏试验的流程基本为： ①将标本进行处理（不是所有的标本都需要处理）； ②将标本接种于不同的培养皿中在不同条件的培养箱中进行培养（不同的标本所含菌的种类不同，不同菌的生长条件不同，因此需要接种于不同的培养皿中）； ③24h后观察培养皿中细菌的生长情况： a.此时若无细菌培养，继续放回培养箱中培养24h，若仍然无细菌生长则判定为阴性结果，因此阴性结果出具的时间为48h以后。 b.若有细菌生长，要根据形态和气味等对细菌进行初步的判定，若能判定出细菌的种类，则进行相应的药敏试验。贴有药敏片的培养皿在培养箱中培养24h后进行药敏结果的解读，然后报告结果，这种微生物培养及药敏结果报告出具的时间就是48h以后。 由于不同的细菌的生长的速度不同，有些细菌在培养24h后不能完全判定结果甚者24h 培养后无法观察到明显的细菌生长的则需要继续培养24h，即连续培养48h后同样根据菌落的形态、气味等来观察判定细菌的种类然后进行药敏试验。这种微生物培养和药敏试验结果出具需要72h以后。 而血液、骨髓等标本则是利用不同于上述培养方式的方法进行培养。它有专门的培养瓶和仪器。这种仪器会自动监测培养瓶中的变化来判定有无细菌生长，若有细菌生长仪器会发出警报。在培养5天内任何时间发出警报的培养瓶都要抽取瓶中的物质在培养皿中进行接种培养，同样在菌种鉴定后进行药敏试验；若在培养5天内不发出警报的培养瓶则视为阴性结果。因此血培养出具结果的时间为5～7天。 菌落的鉴定需要有雄厚的工作经验和熟练的相关基础知识。常规鉴定的方法有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征；理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应。在微生物室学习时发现，很多时候在不太确定细菌的种类时，检验人员也会结合理化特性来判定细菌种类。 （二）革兰氏染色、应用及意义 由于微生物的生长有时间限定，因此微生物培养和药敏试验没有急查的说法。最快的结果也只能是通过涂片来判定有无细菌生长和细菌染色后的颜色和形态，来给临床医生的用药提供依据。 革兰氏阳性菌和阴性菌因为细胞壁的结构不同，在革兰氏染色时染成不同的颜色。革兰氏阳性菌显示紫色、革兰氏阴性菌显红色或粉色。由于细胞壁的结构不同，导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物的敏感性等方面均有较大差异。一般情况下，大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们差生内毒素，靠内毒素使人致病。 在治疗上，大多数革兰氏阳性菌对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感），革兰氏阴性菌对青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中德流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感），

药敏试验实验报告

药敏试验实验报告 体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。 根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A 组抗生素）或临床使用的主要抗生素（B组抗生素）进行药敏试验。 抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。 随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效。农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 分类 纸片扩散法

该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，而抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。 稀释法 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读