HPLC示差折光分析法测定饮料中果糖_葡萄糖_蔗糖含量

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　HP LC 示差折光分析法测定饮料中

果糖、葡萄糖、蔗糖含量

田艳铃　王浩　刘艳琴　杨红梅　殷晓燕

(北京市海淀区产品质量监督检验所,北京　100083)

摘　要:本文利用高效液相示差折光分析法测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖含量。方法采用Agilent Car 2

bohydrate 柱,流动相为乙腈+水(75∶25),流速016mL /m in,检测器池温度:35℃,柱温25℃,进样量

15μL 。方法的检出限015%,加标回收率9210%11010%,相对标准偏差为4113%。该法具有样品预处理简

单,灵敏度高,分析时间短等优点,可用于饮料样品的直接测定。

关键词:高效液相色谱仪;饮料;果糖;葡萄糖;蔗糖

中图分类号:TS27　文献标识码:A 文章编号:1006-2513(2006)06-

De te r m i na ti o n of fruct o se,gl uco se,sucr o se ’components i n beve rage by HPLC w ith refracti ve i ndex de tect o r

T I AN Yan 2li n g W ANG Hao L I U Yan 2q i n YANG Hong 2m e i Y I N X i a o 2yan (Haidian D istrict I nstitute of Pr oducts Quality Supervisi on and I ns pecti on,Beijing 100083)

Abstract:This thesis devel oped a HP LC method f or deter m inati on of Fruct ose,Glucose,Sucr ose’C omponents in bev 2erage .

I n the method,the analysis colu mn is Carbohydrate colu mn of Agilent (5u m,4.6mm ×250mm i .

d ),the

mobile phase is acet onitrile -water (75∶25),the fl ow is 0.6mL /m in,the detect cell te mperature is 35℃,the col 2

u mn te mperature is 30℃,and the injecti on volu me is 15μL.The li m it of detecti on was 015%.Overall recoveries

were bet w een 9210and 11010%,and RS D (n =27)value was 4113%.This method is si m p le rap id,sensitive and cheap f or directly deter m ining Saccharide in beverage without any comp licated and ti m e -consu m ing separati on p r ocess .Key words:HP LC;beverage;Fruct ose;Glucose;Sucr ose

0　前言

饮料中的糖主要包括果糖、葡萄糖和蔗糖。

测定食品中的糖及其含量的方法很多,主要有基于氧化还原反应原理的化学法和准确快捷的高效液相色谱法。国内检验部门由于检验仪器设备所限,目前大多采用国标G B /T500917-2003及G B /T500918-2003规定的化学法,用高效液相

色谱法测定食品中各种糖的报道比较少[2]

。

本文采用高效液相色谱法对饮料中果糖等三种糖进行测定,获得较满意的结果。

1　材料与方法

111　实验仪器,试剂,样品11111　仪器

Agilent1100型液相色谱仪,配示差折光分析

检测器。

收稿日期:2006-08-09

作者简介:田艳玲(1966-),女,工程师,从事食品检验的实验工作。

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　11112　试剂

乙腈:色谱纯

水:高纯水

果糖、葡萄糖、蔗糖(含量≥9910%):北京拜尔迪生物公司11113　样品

饮料购自本地超市。112　色谱条件

色谱柱:Agilent Carbohydrate 柱:5

μm ,416mm ×250mm;流速:

016mL /m in;柱温:

25℃;检测器池温度:35℃;流动相:乙腈+水

(75:25);进样量:15μL 。113　样品处理

碳酸饮料、果汁饮料用水稀释一倍,充分混合后取5mL 至10mL 容量瓶中,用乙腈定容至体

积,混匀。用0145

μm 滤膜将样液过滤后,进样15uL 进行色谱分析。

准确吸取植物蛋白饮料25mL,用510mol/L 盐酸溶液调节其pH 值至1170左右,放置2m in 后,再用510mol/L 氢氧化钠溶液调节其pH 值至4150左右。将样品溶液转至50mL 容量瓶中,用

水定容至刻度后,倒入漏斗自然过滤。滤完后充分混合滤液,其它处理同上。114　定性定量方法

采用标准物质的保留时间对样品峰进行准确定性,采用外标法以峰面积计算定量,依次配制不同浓度的果糖等三种糖的标准溶液进样分析,以质量浓度(g/L )为横坐标,以峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

2　结果与讨论

211　色谱条件的优化

比较了几种流动相,分别为乙腈+水(90∶10)、乙腈+水(75∶25)、乙腈+水(50∶50),发现乙腈+水(75∶25)条件下果糖等三种糖能达到较好的基线分离;在01

2210m l/m in 范围内改变流动相流速,发现在流速为016mL /m in 时,标样出峰时间合适,峰形较好;实验中发

现,当进样量达到15

μL 时,峰形较好。综合以上色谱条件的测定结果令人满意。此条件下加标

碳酸饮料样品的色谱图见图1

。

图1　加标碳酸饮料样品的色谱图

212　标准曲线线性范围

将逐级稀释的标准工作液分别进样15

μL,测定结果经线性回归,结果如表1所示。

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　表1　回归方程、线性范围及线性相关系数结果

标样种类回归方程(y 为峰面积,x 为浓度,g/L )

线性范围(g/L )

线性相关系数(%)

果糖y =215099124x +20244137501

230991994葡萄糖y =228856186x +19159185401

230991994蔗糖

y =2101001362x +250441808

01

2

15

991885

213　方法检测限进空白样,以基线3倍噪声值在标准曲线查得结果计算,测得方法检出限:果糖、葡萄糖、

蔗糖为015%。

表2　回收率测定结果

样品编号

三种糖加标量(g/L )

果糖回收率(%)葡萄糖回收率(%)蔗糖回收

率(%)

碳酸饮料110981994129219碳酸饮料2209816971210414碳酸饮料3409815981410114植物蛋白饮料110102121031510915植物蛋白饮料220951099139716植物蛋白饮料3409313100119314果汁饮料110921493109215果汁饮料2209511961510910果汁饮料3

40

10217

10211

11010

214　方法的回收率和精密度

准确称取已知含量的同一样品3份,每份25mL,分别加入0125g 、0150g 、110g 果糖等三

种糖标准品,按供试品溶液制备方法制备后,进

行测定,结果见表2。从表中可看出,样品加标回收率大于9210%,平均加标回收率为9910%,平均相对标准偏差为4113%(n =27)。同时将一定浓度的标准样品重复测定5次并取平均值计算精密度,测得平均变异系数4186%(n =15)。

3　结论

本文利用高效液相示差折光分析法测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖的含量。该法样品预处理简单,分离度高,分析时间短,明显提高了检测效率,且其准确性和重复性好,是测定饮料中糖含量的理想方法。

参考文献

[1]黄立新,陈加明

.淀粉糖品的糖分组成及其检测方法标准的

制订.中国标准化,2001,(3):2122.

[2]张启华,聂梅

.高效液相色谱法与化学法测定蜂蜜中蔗糖、

葡萄糖含量差异的探讨.山东食品科技,2005,

(5):15

16.

第十一届中国国际食品添加剂和配料展览会

Food I ngredi ents Chi n a 2007

2007年3月28

30日

展出地点:上海光大会展中心和上海国际展览中心(娄山关路88号)

主办单位:中国食品添加剂生产应用工业协会,中国贸促会轻工行业分会

热线:010-********　82290624　68396468,68396330传真:010-********　82290789,68396422