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光合细菌培养条件及其应用的研究

光合细菌培养条件及其应用的研究
光合细菌培养条件及其应用的研究

光合细菌培养条件及其应用的研究

摘要本文首先探讨了光强、沮度、pH和矿物质等因素对光合细菌生长的影响;并尝试制订

了其规模生产的培养配方.结果表明:在100oLx、30℃、pHg、添加犷物质等条件下光合细菌可良好生长,而用价康的农田、日用原料代替化学试荆做培养基是可行的,文章最后做了饲喂小白民的试脸。

关键词光合细菌;培养条件,饲养小白民效果

光合细菌是水圈微生物的一类,在光照条件下能利用硫化氢、硫代硫酸盐、分子氢和其它

还原剂,把二氧化碳还原成有机物决固定大气中的氮。正因为如此,自本世纪初叶,尤其是60 年代以后,国外(如日本,对光合细菌进行了广泛涂的研究,特别在处理高深度污水及用作农畜、鱼类饲料方面做了大量的工作,不过,国内此项工作开展较晚。朱章玉(1983年)首先在上海五四农场进行了处理农畜粪尿的试验,随后愈吉安(1987年)、史家梁(1987年)、程重霞(1990年)、王育锋(1990年)、魏丹金(1991年)等先后撰文,介绍光合细菌在淡水养殖及畜禽饲养的应用,但所有这些实验均较肤浅,本文作者以自己分离的细菌为原料进行了其培养条件及小鼠饮用条件试验,结果汇报于后。

1材料与方法

1.1材料测光仪:中国科学院物理所;酸度计:上海雷磁仪器厂;温度控制仪:上海电子仪器厂;玻璃缸:(中40emh:soem)5个;自制光照培养箱。

1、2实验动物:为2月的小鼠(40只5窝)

l

3培养基实验中细菌的分离培养采用VanNiel(1931)的配方,即NH;Cz.09;KH:PO‘

0·59;NaHCO35·09;NaSZO.l.09;NaCI.09;MgC12o.59;蒸馏水一oomL消毒备用.

2结果

在适当的光照及温度等条件下培养,光合细菌能很快增长,随细菌数的增加,培养液开始

呈现粉红色,以后逐渐变为紫红色。

2.1影响光合细菌生长的因素

2.1.1光照强度的影响:取按VanNiel法配制的细菌接着基适量,接种后分装于12个比色

管内(2管为一组),分别于1000冷00,800,700,600,和so0Lx的光强下培养(25℃),细菌生长表明,光合细菌在强光下生长较快(实验三次重复,实验结果见表1)。

收稿日期1993一10一23第7卷第2期王小君等:光合细菌培养条件及其应用的研究

2.1。2

件不变。

温度的影响:实验设计了15、20、25、30、35、4。℃等六种培养温度,光线900Lx,其它条

结果见表2。

虑虑彩鞍鞍2448729612014444

11100000一,+十十十+++

9990000一一++++++

8880000一一士++十十

7770000一一一士++++

6660000一一一一士十十

5550000一一一一一士士

,”一”为培养液无变化,“十”为培养液变为紫红色,士为培养液变为粉红色.

表2

15℃

20℃

25℃

30℃

35℃

40℃

由表2可知:30℃是培养本菌的最佳温度。

2.1.3pH的影响:按VanNiel法配制培养基,尔后用1.omol/LHCI或NaOH溶液调整

pH,使之为11.0,10.0,9.0,8.0,7.0,6.0,5.0,培养条件为25℃,900Lx(结果见表3)。

结结\\时间间2448729612014444

~~~护之发发发

555.000一一一士+十十

666.000一一士士+牛牛

777.000一一士十++++

888.000一一士士++++

999。00000

1110.00000

1111.00000

结果表明碱性对本实验中的细菌有利,而pHg.0为最适。

2.1.4其化添加剂的影响:为了寻找能促进此菌生长的因素,本实验在VanNiel培养基配方

的基础上,分别设定了添加0.05%矿物质、0.05%的酵母浸膏,麦夫浸汁,l%NaZSZO‘。细菌生长情况是:矿物质及酵母浸膏添加组的生长速度明显加快,达到紫色时培养液内的含量较高,信阳师范学院学报(自然科学版)1994年6月

而麦夫浸汁,Na:520.对光合细菌生长无助。根据计数,浅红色时细菌含量0.64上0.52亿/mL 紫红色时细菌含量为2.04士1.28亿/mL。

2.2批最生产时培养基的改变为了适于大规模生产,降低生产菌液的成本,我们在保持成

份不变的基础上,以农用碳钱,磷酸二氢钾及日用食盐,苏打取代化学纯,配制批量生产的培养基(配方:NH;HCO3o.169,KHZPO;0.059,食盐0.139,苏打0.429,NaZS·gHZO0.19,

MgC12o.039,蒸馏水100mL)lookg,分别倾入玻璃缸内,自然温度,光照下培养,观察记录生产

情况,通过4批培养观察可知,一般于第三天培养基转呈粉红色,6日变为紫色,同时出现沉淀,试验中还观察到,细菌生长是先向光面,尔后向背光面扩散。

待培养液全部变成紫红色,将其移至阴凉处,令细菌自然沉淀(需7~14天),尔后倾去上

清液,下部菌泥晒干称重,菌液的生产力为每升1.259干物质。

2.3饲养效果:随机将40只同龄小白鼠分作2组,一作实验组,一作对照组。实验组供给菌液(4.04亿/mL),对照组为自来水,两组饲料相同,饲养周期为25天,结果见表4。

表4

实验开始实验结果

实验组

对照组

16.06士2.352.31士1.85

16.13士2.6417.86士2.03

平均增重(g)

7.82士1.35

1.68士0.62

实验组的增长显著高于对照组。

3讨论

光合细菌是一类生存干水圈的自养菌,分布广、种类多,各自的培养条件也有很大差别,本

研究以我们自己分离的菌株为材料,观察了其适宜条件,实验结果表祠月此菌在25一35℃、1000Lx的光照下,生长良好。而碱性培养基,添加矿物质和酵母浸膏,可促进细菌繁殖,矿物质在许多前人的工作中,大多是分别加入,这样操作繁琐,工作量大,成本昂贵,本实验试以畜用添加剂代替,效果良好,但是能否为最佳方案有待进一步研究。

化学试剂是十分昂贵的,不适于大规模生产应用,本研究在力争保持前人培养基成分的基

础上,以农用、日用原料代替.重新设计配方,对细菌作了扩大培养,根据细菌生长的速度及产量两方面考核看,原料品质优劣与细菌生长似无关系,这样就为低收入,高效益的规模生产提供了可资尝试。

在许多研究中均未涉及到光合细菌的副作用问题,实验中,我们曾专设一组,同时供给含

菌液和自来水,结果10只小白鼠,24小时,共耗含菌液135mL,自来水仅smL,三次重复,结果

一致,说明含菌液适口性良好。小白鼠喂以含菌培养液,25天内未见异常现象,但2个月后则有部分小鼠表现精神沉郁,被毛竖立,若干生化指标均属正常,病理检查结果另文论述。

参礼文献

l朱章玉.光合细菌的研究及其应用.上海交通大学出版社,1991

程重霞.光合细菌在肉鸡饲养中的应用.上海畜牧兽医通讯,1990,9:n

王育锋.用光合细菌菌液池塘培养淡水鱼科的试验,水产学报,1990,4:348

PfenniyN.P,:oto划nzhezicBaezeria.AnnRevMierob,1967,21:285一324

王应全.光合细菌培养技术探讨.应用微生物,1989,5:9~n

SawadaH,etal.Ph以05,砚thezicBacz川ainWaszetreal~2.JFermentTeehnol,1977,55:326~336第7卷第2期王小君等:光合细菌培养条件及其应用的研究211 OnCultureRequisitionandUtilizationofPhotosynthetieBaeteria WangXiaoiunWangQingyi

(XinyangAgrieultureCollege,464000) AbstraetThispaperinvestigatedeffeetofillumination,temperature,pHandadditive onPhotosynthetiebaeteria,anddesignedthebaeteriamediumsuitabletomassiveeulture. Theresultshowedthebaeteriaeouldgrowqaieklyunder1000Lx,30℃,PHgandadditionof theminerals.Ontheotherhand,it15availabletoreplaeeehemiealreagentwithagrieulture andrawmatterial.Endly,anexPerimenttoraisemieewasdone. KeywordsPhotosynthetiebaeteria;Culturalrequisition;Effeettoraiserniee

·

补白·

参考文献注录格式

一标注和著录原则与方法

(l)、为了反映论文的科学依据和作者尊重他人研究成果的严肃态度以及向读者提供有关信息的出处,应在论文的正文

或致谢之后列出参考文献表.(2)、参考文献表中列出的应限于作者直接阅读过的、最主要的、发表在正式出版物上的文献.

(3)、私人通信和未发表的著作,一般不宜列入参考文献表,可紧跟在引用的内容之后注释或标

注在当页的地脚.(4)、参考文

献的著录可采用顺序编码制或著者一出版年制,并应执行GB7714的规定。(5)、我院学报采用顺序编码制,其著录要求为:

a、按论文中引用文献出现的先后用阿拉伯数字连续编序,将序号置于方括号内,并视具体情况把序号作为上角标,或作为语

句的组成部分.如:“··一张xx〔,〕、王xx川和李义x〔,,对这一现象作了研究,数学模型见文献〔4〕.、、参考文献表的著录

按文章中引用顺序排列,一般采用小于论文正文的字号编排.c、参考文献表中的每条文献著录项目应齐全,并且不用“同上”

或“ib记”表示。d、文献的作者不超3位时,全部列出,超过3位时,只列前3位,后面加“等”字或相应的外文;作者姓名之间不

“和”或“的 d.,而用“,”分开.中国人和外国人的姓名一律采用姓前名后著录法.外国人的名字部分可缩写,并省略“.”.

二连续出版物的著录格式:标引项顺序号作者.题名.刊名(外文刊名可缩写,缩写后的首字母应大定),出版年份,卷

号(期号):起始或起止页码示例:

1高景德,王祥布.交流电机的多回路理论.清华大学学报(自然科学版),1987,27(l):l~8

2NadkarniMA,NairCKK.PandeyVN,etat.Charaeterizationofalpha一galaetosidasefromeorynebaetor一um

nluriseptieumandmeehanismofi‘5indue:ion.JGenAppMierobiol,1992,38(l):23~34

三专著的著录格式:标引项顺序号作者.书名.版本(第1版不标注).出版地:出版者,出版年,起止页码示例:

8竺可祯.物理学.北京:科学出版社,1973.1~3

9霍夫斯塔主编.禽病学:下册.第7版.胡祥壁等译.北京:农业出版社,1981.798~799

10Timoshenko5P.TheoryofpIateandshells.2nded.NewYork:MeGraw一Hill,1959,17~36

四论文集的著录格式:标引项顺序号作者.题名.见(英文用In):主编.论文集名.出版地:出版者,出版年.起始或起

止页码示例:

3张全福.“百家争鸣”与理工科学报编辑工作.见:郑福寿主编.学擂编辑论丛:第2集.南京:河海大学出版社,1991.1

~4

五学位论文的著录格式:标引项顺序号作者.题名:〔学位论文〕.保存地点:保存单位,年份示例:

l张竹生.微分半动力系统的不变集:〔学位论文〕.北京:北京大学数学系,1983

2Ca,rnsRB.Infrareds沐erroseopieszud一esonsolidoxygen:〔dissertation〕.Berkeley:UnivofCalifonia,1965

六专利的著录格式:标引项顺序号专利申请者.题名.国别,专利文献种类,专利号.出版日期示例:

2姜锡洲一种温热外敷药制备方法.中国专利,881u56073.1,89一07一26

七技术标准的著录格式:标引项顺序号起草责任者.标准代号标准顺序号一发布年标准名称.出版地:出版者,出版

年示例:

5全国文献工作标准化技术委员会第六分委员会.GB6447一86文摘编写规则.北京:中国标准出版社,1986

光合细菌使用方法

一.使用方法: 1.水体喷洒。适合改良水质,防治鱼病和培养优良藻类时使用。选择晴天上午或下午,将扩繁好的光合细菌菌液用池水稀释后,全池均匀泼洒,一般用量:苗种池:150ml/L每5―10天用一次。成鱼池:第一次5ml/L以后2ml/L,或第一次5―8公斤/亩,以后3―5公斤/亩,每10―20天用一次。施光合细菌的次数最好根据水质情况具体研究,水质好可每隔15天施一次,水质较差、较肥,应每隔7―10天施一次。由于光合细菌形态微细,比重小,若采用直接泼洒养殖水体的方法,其活菌不易沉降到池塘底部,无法起到良好的改善底环境效果。因此建议全池泼洒时,尽量将其与沸石粉合剂合用这样既能将活菌迅速沉降到底部,同时沸石也可起到吸附氨的效果,或拌土洒入鱼池。 2.饲料添加。内服拌饵作为饲料添加剂使用时,将扩繁好的光合细菌菌液喷洒干饲料中拌匀,如用投饵机投喂的可拌菌后散开吹晒一段时间再喂,当天拌当天喂完。 二、注意事项: 1.不可与消毒杀菌剂混合使用,使用前后一周内不得使用消毒剂,否则杀死光合细菌影响使用效果。 2.使用前,将菌液光照10小时以上,使用效果好,晴天水温20℃以上时使用;阴雨天勿用。 3.水体呈碱性时施用效果好。用生石灰或烧碱调节PH值至中性或偏碱程度。 4.应灵活掌握用量和使用的连续性,因光合细菌在水体中只有形成优势群落后,才能发挥作用。 5.光合细菌菌液不能用金属器皿贮存。 6.培育鱼苗时,在苗种入池前7天全池泼洒,以利于浮游生物生长;光合细菌菌液与粪肥配合使用,效果明显,增产增效特别显著。 7.若要同时施用不同的净水制剂,应该注意制剂之间的共容性。例如:硝化细菌和光合细菌并不适合同时放养在同一水池中,因为它们净化水质的过程互有抑制作用,可能会降低其净化效果。

光合细菌(PSB)的应用研究进展

光合细菌(PSB)的应用研究进展 The progress in application research on photosynthetic bacteria 李福枝刘飞曾晓希李小龙张凤琴 LI Fu-zhi LIU Fei ZENG Xiao-xi LI Xiao-long ZHANG Feng-qin (湖南工业大学绿色包装与生物纳米技术应用省重点实验室,湖南株洲412008)(The Green Packing and Biology Nanometer Technology Application Laboratory,Hunan University of Technology,Zhuzhou,Hunan412008,China) 摘要:着重阐述光合细菌的分类、结构形态、菌体营养组成及在有机废水处理、光合产氢、生物制药、类胡萝卜素提取、辅酶Q提取、单细胞蛋白和水产、禽蓄养殖等方面的应用研究现状及前景。 关键词:光合细菌;废水处理;类胡萝卜素;光合产氢;单细胞蛋白;水产养殖 Abstract:The classification,morphological structure and triphic component of the photosynthetic bacteria were reviewed.And the current application of photosynthetic bacteria was reviewed in seven aspects of treatment of organic wastewater,hydrogen photo production,medicament biologic production,carotenoids extraction,coenzyme Q extraction,single cell protein(SCP)production,fishery culture and livestock culture. Keywords:Photosynthetic bacteria;Treatment of organic wastewater;Carotenoids; Hydrogen photo production;Single cell protein;Fishery culture —————————————— 基金项目:湖南省教育厅资助项目(项目编号:06C258) 作者简介:李福枝(1978-),女,湖南工业大学绿色包装与生物纳米技术应用省重点实验室讲师。 E-mail:li-fu-zhi@https://www.wendangku.net/doc/4b18014918.html, 通讯作者:刘飞 收稿日期:2007-09-28 光合细菌(Photosynthetic Bacteria,PSB)是自然界中重要的微生物类群,广泛存在于自然界的水田、湖泊、江河、海洋、活性污泥及土壤中,因其具有固氮、产氢、固碳、脱硫、可氧化分解硫化氢、胺类及多种毒物的能力,而且具有生命力极强、营养要求低、生长繁殖快、无毒害性、富含蛋白质、类胡萝卜素、维生素、能净化水质等特点,被广泛应用到水产养殖、禽蓄养殖、污水处理、生物产氢、生物制药、生物色素提取等方面,成为现代生物技

光合细菌

光合细菌(Photosynthetic bacteria,简称PSB)是具有原始光能合成体系的原核生物的总称,它广泛存在于自然界的水田、湖泊、江河、海洋、活性污泥及土壤内,是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。 第一节光合细菌的生物学和营养价值 一、光合细菌的生物学 光合细菌包括产氧光合细菌(蓝细菌)和不产氧光合细菌两大部分,在实际中应用的大部分是不产氧型光合细菌。不产氧光合细菌包括紫细菌、绿细菌和日光杆菌属、红色杆菌属等总共 27个属 66个种。不产氧光合细菌是代谢类型复杂、生理功能最为广泛的微生物类群。各种光合细菌获取能量和利用有机质的能力不同,它们的代谢途径随环境变化可以发生改变。光合细菌从营养类型看包括光能自养型、光能异养型及兼性营养类型;从呼吸类型看包括好氧、厌氧和兼性厌氧型。 光合细菌是革兰氏阴性菌,在10~45℃范围内均可生长繁殖,最佳温度在30~40℃。绝大多数光合细菌的最佳pH值范围在7~8.5之间。钠、钾、钙、钴、镁和铁等是光合细菌生理代谢中的必需元素。 二、光合细菌的营养价值 光合细菌的菌体无毒,营养丰富,蛋白质含量高达65%,而且氨基酸组成齐全,含有机体需要的8种必需氨基酸,各种氨基酸的比例也比较合理。PSB还含有丰富的B族维生素,尤其是B12、叶酸、生物素的含量相当高是啤酒酵母和小球藻的20到60多倍。PSB 菌体内含有较高浓度的类胡萝素,而且种类繁多,迄今已从光合细菌中分离出80种以上的类胡萝卜素。除此之外,细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚β一羟基丁酸、辅酶Q、抗病毒物质和生长促进因子,具有很高的营养价值。 光合细菌在虾、贝类的幼体培育中应用非常广泛,其一方面能净化水质,改善幼体的环境条件,另一方面作为饵料被幼体摄食(贝类幼体相对虾幼体的蚤状阶段都能直接摄食光合细菌),对促进幼体生长、变态和提高成活率有明显效果。 第二节光合细菌的培养方法 一、培养方式 光合细菌的大量培养通常采用全封闭式厌气光照培养和开放式微气光照培养两种方式。 (一)全封闭式厌气光照培养 全封闭式厌气光照培养是采用无色透明的玻璃容器或塑料薄膜袋,消毒后装入消毒好的培养液,接入20%~50%的菌种母液,使整个容器均被液体充满,加盖(或扎紧接口), 造成厌气的培养环境,置于有阳光的地方或用人工光源进行培养,定时搅动,在适宜的温度下,一般经过5~10天的培养,即可达到指数生长期高峰,此时可采收或进一步扩大培养。 (二)开放式微气光照培养 开放式微气光照培养一般采用容量为l00~200升的塑料桶为培养容器。在桶底部装一气石,培养时微充气、使桶内的光合细菌呈上下缓慢翻动。在桶的正上方距捅面30厘米左有装一有罩的白炽灯泡,使被面照度达2000 lx左右。培养前先把容器消毒,加入消毒好的培养液,接入20%~50%的菌种母液,照明,微充气培养。在适宜的温度下,一般经7~10天的培养,即可达到指数生长期高峰,此时,进行采收或近一步扩大培养。 两种培养方式相比,以厌气培养方式较为理想,微气培养方式虽然设备比较简单,易于大量培养,但杂菌污染程度大,培养达到的菌细胞密度低。 二、菌种分离、保藏 培养光合细菌首先要有菌种。目前,应用于水产养殖业的光合细菌,主要是红螺菌科即紫色非硫细菌中的一些种类。它们共同的特征是具鞭毛,能运动,不产生气泡,细胞内不积累硫磺。光合细菌分离成功的关键在于选择适宜的富集、分离培养基,和提供适于光合细菌生长需要的厌气环境及适宜的温度、光照条件。 (一)采样 红螺菌科细菌可用有机物作为光合作用的供氢体兼碳源,广泛分布在被有机物污染的地方,如河底、湖底、海底、水田、沟渠和污水塘的泥土以及豆制品厂、淀粉厂和食品工业 等废水排水沟处呈橙黄色或粉红色的泥土中。浅水处直接用杯舀取少量泥土作样品,深水处借用采水器和采泥器采样。 (二)富集培养 富集培养均采用液体培养基。将采回的样品(土壤或水)装入玻璃圆筒或大型试管或具塞的磨口玻璃瓶中,倒入配制好的培养液,充分搅拌。为造成厌气环境,在玻璃圆筒或大型

光合细菌培养基配方

光合细菌培养基配方 光合细菌是兼性厌氧的,不同的光合细菌用的培养基不一样我现在就在做关于光合细菌的问题,这几中细菌都是常见的细菌,培养基在许多微生物上后面都有,光合细菌的富集培养基是: NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO2 0.02g NaCl0.05-0.2g 三生长因子1ml 微量元素溶液1ml 蒸馏水97ml PH7.0 生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐等)及可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊 光合细菌富集纯化详见网易网盘 光合细菌培养基配方 氯化氨1克,磷酸氢二钾0.5克,氯化镁0.2克,氯化钠2克,酵母膏0.1克,水900毫升。 各成份溶解后15磅灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。用过滤的0.1N 磷酸调PH=7.0即可。 响应面设计法优化光合细菌培养基配方。培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培

养基配方为:醋酸钠1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液OD600可以达到0.5以上 光合细菌(含生产工艺) 优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样? 一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几点: 1、外观上看比较均匀,基本无上下分层。相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,包括我中心初期的产品也是这样,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深,最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。 而优秀的光合细菌菌种和产品,上下都是比较均匀的,没有较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目。(当然,除了培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外) 这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的。少数地方,由于水质的原因,可能会产生稍稍的差别。 2、没有粘壁现象。很多市场上的产品都有粘壁现象,即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层,就象是油漆一

光合细菌的功能及其在动物养殖中的应用

光合细菌的功能及其在动物 养殖中的应用 2003-09-25 摘要光合细菌是一类能进行光合作用 而不产氧的特殊生理类群原核生物的总称。它可 以利用光能,固氮合成有机物,也能通过多种方 式和途径转化不同类型的有机物和无机物质,而 且还具有独特的抗病、促生长以及提高畜禽生产 性能的作用,因而在畜禽以及水产动物养殖中具 有应用的潜力。 本文就光合细菌的功能及其在动物养殖中的应 用状况作一综述。 关键词光合细菌;生物学功能;畜禽;水产 养殖 中国分类号:S816.7 文献标识码: A 文 章编号:1004--0084(2003)07-0006-03 光合细菌(Photosynthetic bacteria,简称PSB) 是具有原始光能合成体系的原核生物的总称,它 广泛存在于自然界的水田、湖泊、江河、海洋、 活性污泥及土壤内,是一类以光作为能源、能在 厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有 机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合 作用的微生物。 PSB包括产氧光合细菌(蓝细菌)和不产氧光合 细菌两大部分,在实际中应用的大部分是不产氧 型光合细菌。不产氧光合细菌包括紫细菌 (Purple gacteria)、绿细菌(Green bacteria) 和日光杆菌属(Heliobacterium)、红色杆菌属 (Erythrobacter)等总共 27个属 66个种,近

几年来陆续还有一些新种报道。 1 光会细菌的生理特性及其功能 1.1亚光合细菌的生理特性 PSB是革兰氏阴性菌,菌体有球形、椭圆型、半环型,也有杆状和螺旋状。有些菌种的细胞形态还会随培养条件和生长阶段的不同而发生变化。光合细菌在10-45℃范围内均可生长繁殖,最佳温度在30-40℃。绝大多数光合细菌的最佳pH 值范围在7-8.5之间。钠、钾、钙、钴、镁和铁等是光合细菌生理代谢中的必需元素。 不产氧光合细菌是代谢类型复杂、生理功能最为广泛的微生物类群。各种光合细菌获取能量和利用有机质的能力不同,它们的代谢途径随环境变化可以发生改变。光合细菌从营养类型看包括光能自养型。光能异养型及兼性营养类型;从呼吸类型看包括好氧。厌氧和兼性厌氧型。 1.2光合细菌的生物学功能 l.2.l营养功能 有研究表明,PSB的菌体无毒,营养丰富,蛋白质含量高达64.15%-66.0%,而且氨基酸组成齐全,含有机体需要的8种必需氨基酸,各种氨基酸的比例也比较合理。PSB还含有丰富的B 族维生素,其含量见表1。PSB菌体内含有较高浓度的类胡萝素且种类繁多。迄今已从光合细菌中分离出80种以上的类胡萝卜素,并不断有新的报道。除此之外,细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚β一羟基丁酸、辅酶Q、抗病毒物质和生长促进因子,具有很高的饲料价值,在养殖业

光合细菌培养参数的研究审批稿

光合细菌培养参数的研 究 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】

光合细菌PS3培养参数的研究 摘要:为有效提高光合细菌邢3在工厂化生产中的生物量,对其主要培养参数进行了系统的研究。所涉及的培养参数包括:光源、光照度、溶解氧、培养基pH、盐度、接种浓度等。结果表明:PS3在厌氧条件下生长较好,而其最适接种浓度、光照度、光源、pH及盐度分别为10%、4以刃h(钨丝灯)、一、5。 关键词:光合细菌;培养参数 ThestudyoncultivatingParametersofPhotosyntheticbacteria PS3 光合细菌(photosyntheticbacteria)广泛分布提供质优价廉的产品,本实验对光合细菌PS3培养 于淡水、海水、极地或温泉(包括高热水体)以的主要参数进行了较系统的观察和研究,现将实验 及高盐、高有机质含量等不同的生态环境中,是一情况总结如下。 类行不产氧光合作用、具有复杂代谢功能的微生 花”上石草.:二二或二议一二二几二”公二二万二1材料与方法物,它能利用多种基质,可营异养、自养或兼性营一’,‘,’‘’‘’一 养;存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型[l]。光合菌株 细菌在维持自然界的生态平衡、废污水的处理等方试验菌株PS3由中国水产科学研究院南海水产 面有着重要作用,同时光合细菌作为单细胞生物可研究所饲料与健康养殖开发中心富集、分离。 以从中获得较丰富的单细胞蛋白,其广泛应用于农实验方法 牧渔业尤其在水产养殖中的应用更为广泛〔,一3〕。为本实验所采用的培养条件是不同光源和光照 生产更好的优质菌液,促进工厂化生产,为养殖业度、溶解氧、培养基pH值、盐度、接种浓度。试 收稿日期: 资助项目: 作者简介: 通讯作者: 2以」6切刀3;修回日期:2〕拓刀8一17 广东省重大科技兴渔项目(B200201A01);国家“十五”科技攻关计划专题(2004BA526BO202) 洪敏娜(1980一),女,技术员,从事水产微生态制剂的研究与开发。E一mail:hmnIgso@163.。。m 杨莺莺南方水产第2卷 -今-荧光灯(1500lx)fiuorescent 一.一钨丝灯(600lx)tungsten -查-钨丝灯(1500lx)tUngsten -片-钨丝灯Q700lx)tungsten -喂卜-钨丝灯(4000lx)tungsten 叫.-自然光(50000~70000lx)naturallighting

光合细菌研究进展

光合细菌研究进展 摘要: 光合细菌分布广泛,本身无毒,富含蛋白质、类胡萝卜素等多种营养物质,得到广泛应用。光合细菌的分子生物学研究已开展了 40 多年,在固碳和蛋白质表达系统研究方面取得了丰硕成果。阐述了光合细菌 cbb 操纵子固碳的分子机制和光合细菌作为新型蛋白质表达系统的研究进展,提出了未来的研究重点,为光合细菌的综合开发和利用提供了新思路。 关键词: 光合细菌; 固氮; CbbR 转录蛋白; 表达系统 光合细菌分布广泛,遍及江河、沼泽、湖泊和海洋 等,具有固氮、制氢、固碳、脱硫等作用 [1] 。光合细菌生 命力强,容易培养,生长繁殖速度快,本身无毒,富含蛋 白质、维他命、类胡萝卜素等 [1-2] 。光合细菌发现于 19 世纪 30 年代,直到 20 世纪 70 年代才进行了深入、广泛 的研究,极大地推动了光合细菌的研究 [3] 。目前,光合 细菌在固碳和蛋白质表达系统等方面的研究取得了丰 硕的研究成果。 1 光合细菌固碳研究 光合细菌生命力旺盛,能够以好氧、厌氧和光合异 养等多种方式生长,在其生长代谢过程中伴随固碳作 用。光合细菌对二氧化碳的固定是通过卡尔文( Calvin - Benson - Bassham,CBB ) 循环,即戊糖磷酸途径实 现 [1] 。光合细菌在自养生长条件下,CBB 循环中的关键 酶可以得到诱导表达,如核酮糖-1. 5 -二磷酸羧化酶/ 加氧酶和磷酸核酮糖激酶。在光合异养条件下,二氧化 碳的固定能力是不固定的,与电子受体的还原势能有 关 [4] 。电子受体如二甲亚砜 DMSO 能够抑制 CBB 循环 酶的生物合成,从而失去固定二氧化碳的能力 [5] 。同 时,光照强度能够增强光合细菌固碳的能力 [6] 。光合细 菌固碳对其生长和分泌有机酸以及捕光色素蛋白复合

生物饵料培养学习题及解析

填空题: 1.在所有卤虫品系的脂肪酸组成中几乎没有_DHA__,所以对卤虫必须进行营养强化。 2.微藻藻种保藏的基本条件是_低温和弱光__。 3.光合细菌培养基灭菌的方式有_常压蒸汽灭菌和过滤灭菌__和高压蒸汽灭菌。 4.“绿水育苗”是指在育苗过程中利用__微藻___的育苗方式。 5.微藻基因工程育种是引入__外源基因__在微藻内表达以改良微藻遗传品质的方法。 6._褶皱臂尾_轮虫在海水鱼虾蟹苗种培育过程中应用最为广泛。 7.在开放式培养螺旋藻时,施用__碳酸氢铵__可以杀死藻液中的轮虫和原生动物,还可以作为肥料。 名词解释: 1.营养强化:指针对生物饵料的营养缺陷,有意识地通过其摄食特定食物进行改善和补偿,达到营养平衡和满足鱼虾幼体发育的 需求。 2.诱变育种: 是指人为地利用物理的或化学的因素,诱发微藻产生遗传变异,通过对突变体的选择和鉴定,培育出有利用价值 的新品种或新的种质资源 3.单种培养: 指在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式 4.生物饵料:指经过筛选的优质饵料生物,进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活的饵料。 5.指数生长期: 指微藻细胞迅速地生长繁殖,细胞数目以几何级数增加的时期. 判断题: 1、所有卤虫卵都是在低盐度下有较高的孵化率。 X 2、小新月菱形藻的最佳培养生态条件和应用途径与三角褐指藻相似。√ 3、角毛藻在低盐度下比高盐度下生长好。√ 4、褶皱臂尾轮虫对低氧含量甚至短时间缺氧的耐受力很强,因此,在高密度培养时,不需要充氧。X 5、微藻对二氧化碳的需要量大,但给微藻培养液过量通入二氧化碳,会对微藻产生毒害作用。√ 6、实验室小型培养微藻,海水的消毒通常采用有效氯消毒。X 7、不同光合细菌体内的颜色在固定的培养条件下具有特征性,因此,每个菌种的颜色不会随着培养条件的变化而发生变化。X 8、刚产出的卤虫休眠卵就具有较高的孵化率。X 9、目前培养的桡足类主要是隶属于猛水蚤目和哲水蚤目的种类。√ 10、轮虫的营养价值与所摄食的饵料有关。√ 选择题: 1、标准的血球计数板盖上盖玻片后,一个大格所在区域的体积是__C_____。 A: 1mm3B: 10mm3C: 0.1mm3D: 0.1mL 2、敌害生物对微藻培养的危害作用主要有_D___。 A:掠食 B:通过分泌有害物质对微藻起抑制和毒害作用 C:竞争营养盐 D: A+B 3、土池培养浮游动物饵料时,采用施放___C______肥料培育浮游植物较佳。 A:无机肥B:有机肥C:无机肥+有机肥D:粪肥 4、红螺菌科光合细菌的获能方式有__D__。 A:光合磷酸化B:氧化磷酸化 C:呼吸作用D: A+B+C 5、用藻类二次强化培养轮虫所需的时间一般至少要在_A___以上。 A:6-12小时B:24-36小时 C:36-48小时D:1-3小时 6、分布于咸水中的枝角类是__A__。 A:蒙古裸腹溞 B:大型溞 C:多刺裸腹溞 D:鸟喙尖头溞 7、在轮虫培养过程中,若以酵母为饵料进行培养,则适宜的轮虫接种量是_C___。 A:0.1个/ml~0.5个/ml B:1个/ml C:14个/ml~70个/ml D:200个/ ml 8、采用酒精对皮肤和器皿表面进行消毒时,常采用的浓度是___C______。 A: 40-45‰B: 60-65‰C: 70-75‰D:80-85‰ 9、在下列藻类中,最佳培养条件为高温、强光和强碱性的是__A__。 A:极大螺旋藻 B:湛江等鞭金藻 C:中肋骨条藻 D:小球藻 10、生产上螺旋藻的培养方式是_A___。

光合细菌的培养操作教程

光合细菌的培养操作教程 1、配制光合细菌菌液: (1)配制比例: 光合细菌培养基、清水、菌种的配制比例为:0.5:80:20。 示例1:0.5公斤(500克)培养基+ 80升水+ 20升菌种(接种),配成100升的光合细菌菌液。 示例2(少量培养):0.05公斤(50克)培养基+ 8升水+ 2升菌种(接种),配成10升的光合细菌菌液。 (2)配制方法: 下面以配制100升光合细菌菌液为例来说明配制方法: ①溶化培养基:取培养基0.5公斤(500克),用少量水溶化(可以用50℃左右的热水,溶化培养基的速度会快些),搅拌均匀,然后倒入一个容量在100升以上的容器中; ②配制培养液:往容器中加水到80升,80升培养液配制完成; ③接种:再加入20升菌种,并搅匀,100升菌液配制完成;

④装瓶(袋):将配制好的菌液装入干净的透明容器(瓶、壶、塑料袋等),容器中留5%的空气在里面,密封待用。 菌液配制说明及注意事项: a. 以上各成分的数量是以配制100升菌液为例来说明配制方法的,如配制其他数量的光合细菌菌液,各成分数量按比例增减即可; b. 培养用水源的选择: 一般含杂菌较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水都可以,如井水、河水、自来水、蒸馏水和纯净水等,甚至干净的池塘水也行。 从经济、实用的角度考虑,地下水(如井水)含杂菌低,是最理想的培养水源; 清洁的地表水也可使用,如河水、池塘水等; 含氯量较高的自来水应敞口放置两天或调PH值至偏碱后使用; 蒸馏水及纯净水固然很好,但成本太高,可用于提纯菌种; c. 培养用容器的选择: 必须为透明容器并清洗干净,透明的容器可让光合细菌最大限度的吸收到充分的光线,少量培养如饮料瓶、食用油壶等,规模培养如透明塑料桶、透明塑料袋等。 d. 菌种的接种量: 一般接种量为20-50%,即培养液与菌种的比例为4:1(4升培养液加1升菌种)到1:1(1升培养液加1升菌种),接种量最低不能低于20%。 接种量越高,光合细菌菌种越容易形成优势菌群而抑制其他杂菌生长,培养速度快,且培养成熟的浓度更高。但产出效率也越低,光合细菌易老化。 接种量越低,培养产出效率越高,但如果低于20%的接种量,光合细菌不容易形成优势菌群,培养初期易染杂菌,培养的成功率低。 我们推荐的接种量为20%,如果用太阳光培养,推荐的接种量为25-40%。

光合细菌及其在农业中的应用

光合细菌及其在农业中的应用 光合细菌(Photosynthetic Bacteria,略作PSB)是一大类能进行光合作用的原核生物的总称。除蓝细菌外,都能在厌氧光照条件下,进行不产氧的光合作用。 根据“伯杰氏细菌鉴定手册”(第9版),不产氧型的光合细菌可分成以下6类,27属:●着色菌科(Chromatiaceae)(又称红色硫细菌、紫硫细菌),含9个属; ●外硫红螺菌科(Ectothiorhodospiraceae),含1属; ●红色非硫细菌(Purple nonsulfur bacteria),即原红螺菌科(Rhodospirillaceae),含6属; ●绿硫细菌(Green sulfur bacteria)即原绿菌科(Chlorobiaceae),含5个属; ●多细胞绿丝菌(Multicellular filamentous green bacteria),即原绿丝菌科 (Chloroflexaceae),含4属; ●盐杆菌(Heliobacterium),含2个属。 由于光合细菌在物质转化循环中的重要作用,以及菌体含有的丰富营养,使这类古老的微生物成为近二、三十年来人们开发利用的一大热点。大量的研究成果表明,光合细菌在农业、水产、污染治理与资源化等方面,有着巨大的实用价值,应用前景十分广阔。以下就光合细菌的主要性状、在农业等领域的应用、方法、作用原理等,作一简要介绍。 一、光合细菌的主要特征 1.光合细菌的形态学特征 ⑴PSB培养物的颜色 PSB因含有光合色素(细菌叶绿素、类胡萝卜素)而呈现一定颜色。除少数例外,一般说来,红螺菌科和着色菌科的菌呈红、粉红、橙黄、紫色或茶褐色;绿菌科和绿色丝状菌科的菌呈绿色。 红螺菌科和着色菌科的的培养物之所以呈现有黄色到紫色的各种鲜艳的颜色,这是由类胡萝卜素高浓度蓄积并掩盖了细菌叶绿素的色调而形成的。少数类胡萝卜素含量少的菌,或缺乏类胡萝卜素的变异株,便会显示细菌叶绿素的蓝绿色。 每个菌种各有自己的颜色,但由于培养条件的不同,其颜色会发生变化。例如,球形红菌(Rhodobacter sphaeroides)和荚膜红菌(Rhodobacter capsulatus)的厌氧液体培养物呈茶褐色,半好氧培养物呈红色。这是由于氧的存在使细胞内类胡萝卜素组成发生变化的缘故。 ⑵PSB细胞形状与大小 PSB菌体形态极其多样,有球状、卵状、杆状、弧状、螺旋状、环状、半环状、丝状,以及链状、锯齿状、格子状、网篮状等等。不仅不同的菌种有多种多样的形态,就是同一种类也往往由于培养条件和生长阶段等不同而使细胞形态发生变化。尽管如此,许多菌种在细胞形态上仍然是各具特征的。如球形红菌(Rhodobacter sphaeroides)的细胞为球状;红微菌属(Rhodomicrobium)细菌的细胞丝相连;绿突菌属(Prosthecochloris)的细胞为具突起之球菌等等。 细胞的大小因种类不同而变化很大。如Rhodocyclus gelatinosus在0.4~0.5*1~2微米,Chromatium okenii的细胞则大得多,大体在4.5~6.0*3~10微米。一般说来,红螺菌科细胞的大小为0.6~0.7*1~10微米;着色菌科细胞大小为1~3*2~15微米;绿菌科细胞大小为 0.7~1*1~2微米。 ⑶光合作用器官 PSB的细胞内存在着载色体(chromatopheres)或绿菌泡囊(chlorobium vesicles),光合色素是它们的基本组成部分。它们是光合细菌吸收光能并转变成化能,即进行光合磷酸化作用的所在部位。 载色体由细胞膜陷入细胞质内而形成,与细胞膜成连续的状态。在红螺菌科和着色菌科

光合细菌在农业生产上的应用分析研究进展

光合细菌在农业生产上的应用研究进展 摘要:光合细菌是一种优质的有机肥,在农业作物上施用具有独特的功效,与其他微生物肥料相比,更具综合效 应。概述了光合细菌的性质,同时对光合细菌在农业中的作用以及在不同作物上的应用效果进行了介绍和展望。 关键词:光合细菌;农业生产;应用 Recent Research on Application of Photosynthetic Bacteria on Agricultural Production Abstract: Photosynthetic bacteria is a kind of high-quality organic fertilizer in agricultural crops, with unique functions and hare higher comprehensive effects compared with other microbial fertilizer. The character of photosynthetic bacteria was summarized in this paper,meanwhile the functions of photosynthetic bacteria and the applied effects on agriculture were described and expected in this paper. Key words: Photosynthetic bacteria;Agricultural production;Application 由于农业上大量使用无机肥料与化学农药,造成土壤残 留农药的毒害,土壤盐化、板结严重,土壤肥力趋于衰竭;与 此同时,随着人们保健及环保意识的增强,人们对食品的要 求不仅局限于数量和品种,更注重质量。针对此种现状,开 发绿色食品是解决环境污染、保持农业可持续发展和提高城 乡人民生活质量的根本途径。生产绿色食品的关键是生产 过程无污染,应避免农药、肥料等造成的环境内部污染,应利 用生物技术防治。光合细菌因其本身特有的生理生化性质, 使其既具有理论意义又具有实用价值,成为现代生物技术研 究的热点之一。 1 光合细菌的性质 光合细菌

常用细菌培养基配方

常用抗生素 氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml) 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml) 溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml) 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素(streptomycin)(50mg/ml) 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml) 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素(tetracyyline)(10mg/ml) 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中: 蛋白胨10g 酵母提取物5g 氯化钠10g 如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。(实验室一般都不调PH) SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中: 蛋白胨20g 酵母提取物5g 氯化钠0.5g 1 mol/L 氯化钾2.5ml

光合细菌培养参数的研究

光合细菌PS3培养参数的研究 摘要:为有效提高光合细菌邢3在工厂化生产中的生物量,对其主要培养参数进行了系统的研究。所涉及的培养参数包括:光源、光照度、溶解氧、培养基pH、盐度、接种浓度等。结果表明:PS3在厌氧条件下生长较好,而其最适接种浓度、光照度、光源、pH及盐度分别为10%、4以刃h(钨丝灯)、6.5一7.0、5。 关键词:光合细菌;培养参数 ThestudyoncultivatingParametersofPhotosyntheticbacteria PS3 光合细菌(photosyntheticbacteria)广泛分布提供质优价廉的产品,本实验对光合细菌PS3培养 于淡水、海水、极地或温泉(包括高热水体)以的主要参数进行了较系统的观察和研究,现将实验 及高盐、高有机质含量等不同的生态环境中,是一情况总结如下。 类行不产氧光合作用、具有复杂代谢功能的微生 花”上石草.:二二或二议一二二几二”公二二万二1材料与方法物,它能利用多种基质,可营异养、自养或兼性营一’,‘,’‘’‘’一 养;存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型[l]。光合1.1菌株 细菌在维持自然界的生态平衡、废污水的处理等方试验菌株PS3由中国水产科学研究院南海水产 面有着重要作用,同时光合细菌作为单细胞生物可研究所饲料与健康养殖开发中心富集、分离。 以从中获得较丰富的单细胞蛋白,其广泛应用于农1.2实验方法 牧渔业尤其在水产养殖中的应用更为广泛〔,一3〕。为本实验所采用的培养条件是不同光源和光照 生产更好的优质菌液,促进工厂化生产,为养殖业度、溶解氧、培养基pH值、盐度、接种浓度。试 收稿日期: 资助项目: 作者简介: 通讯作者: 2以」6切刀3;修回日期:2〕拓刀8一17 广东省重大科技兴渔项目(B200201A01);国家“十五”科技攻关计划专题(2004BA526BO202) 洪敏娜(1980一),女,技术员,从事水产微生态制剂的研究与开发。E一mail:hmnIgso@163.。。m 杨莺莺,E~mail:”y402@https://www.wendangku.net/doc/4b18014918.html,南方水产第2卷 -今-荧光灯(1500lx)fiuorescent 一.一钨丝灯(600lx)tungsten -查-钨丝灯(1500lx)tUngsten -片-钨丝灯Q700lx)tungsten -喂卜-钨丝灯(4000lx)tungsten 叫.-自然光(50000~70000lx)naturallighting

光合细菌的培养及应用技术

光合细菌的培养及应用技术 1 引言 光合细菌(photosynthetic bacteria,简称PSB)是一群能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用有机物作供氧体兼碳源,进行不放氧光合作用的细菌,广泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥和土壤中,依据《伯杰细菌鉴定手册》(第九版)可分为6 个类群,27 个属。不产氧光合作用的红螺菌目分为紫细菌(purple bacteria)、绿细菌(Greenbacteria)和日光杆菌属(Heliobacteria)、红色杆菌属(Erybrobacter)。其中紫细菌中包含有红螺菌科(Rhodolspirillaceae)、着色菌科(Chromatiaceae)、外硫红螺菌科(Eceothiorhodospiraceae),包含16属49种。其中在生产上有意义的红螺菌科包括红螺菌属、红假单胞菌属和红微菌属[1]。PSB 均为革兰氏阴性细菌,一般为球型、卵形、杆形、弧形、螺旋形、环形、半环形丝形,也可随培养条件和生长阶段而改变,大部分单个存在。PSB的一般菌体组成及营养成分见表1[2].表1 光合细菌菌体的组成与小球藻等比较Tab. 1 Components comparison betweenphotosynthetic bacteria and ChlorellaP S B 含有较高的优良蛋白质,粗蛋白含量为 65.45%,含有17 种氨基酸而且消化率较高;粗脂肪约7%;可溶性糖类约20%;粗纤维约3%[1];维生素B12 含量是酵母的200 倍、小球藻的4 倍[2],生物素含量也比较丰富;菌体的脂类成份含有大量的叶绿素、类胡萝卜素和辅酶Q(泛醌),迄今已从PSB中分离出80 种以上的类胡萝卜素。叶绿素和类胡萝卜素对养殖生物的健康生长,增强对疾病的抵抗力有很大的益处。辅酶Q4 是与生命活动有重大关系的生理活性物质,PSB 中的含量特高,是酵母的13 倍。以上特点决定了PSB 可做为畜禽、鱼虾的饲料。但PSB 中缺乏ω3 系列20 碳以上的高度不饱和脂肪酸,单独作为仔鱼的初期饵料时,需与其它富含高度不饱和脂肪酸的饵料同时使用。 2 光合细菌的培养 水产养殖市场对PSB 活体菌种的需求缺口很大,为了满足水产养殖对PSB 活体菌种的需求,PSB的生产方法有很多,但是到目前为止,还没有进行产业化生产PSB的报道。冯云等[3]用50L的塑料桶来厌氧培养PSB,使培养密度达到2.1 × 109 个/ml;杨绍斌[4]在塑料大棚内建大小2000~5000L 的水池使其厌氧发酵富集扩大培养,培养液中含PSB 活菌数可达5 × 106 个/毫升;鄂春宇[5]用塑料薄膜袋培养PSB,培养密度达到2.5~3×105个/ml,12个月生产50 多吨,但是在PSB的密度检测时,很容易染菌。由中科院开发的PSB 大规模生产工艺,产品含菌量达到5 × 1010个/毫升,保质期3 个月以上,并可根据客户要求,设计和建设不同规模的生产线[6]。 2.1 菌种 菌种可从采集的池塘底泥或海水中重复富集、分离纯化获得.若用保存下来的菌种,在培养前必须提纯复壮,才能有效地进行扩大培养。光合细菌的生产需要采用优良菌种,要求菌种活性高,菌液中菌体分布均匀、无下沉现象,目前养殖中使用的PSB多为红螺菌科和一部分着色菌科的复合菌株[7]。 2.2 培养基及培养条件 PSB 培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外,还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素,将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基,基本配方为:CaCL2 0.3g,MgSO4·7H2O0.5g,酵母膏3g,蛋白胨3g,蒸馏水1000ml,pH: 6.8. 如需制固体培养基再加2%琼脂。培养温度:25℃~30℃最佳,光照强度:2000LX~5000LX,PH:7.5~8.5 最佳。

光合细菌不同属类的分离培养

光合细菌的分离培养 光合细菌(Photosynthetic Bacteria,略作PSB)是一大类能进行光合作用的原核生物的总称。除蓝细菌外,都能在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用。研究与应用的实践表明,光合细菌在高浓度有机废水处理与资源化、水产养殖的水质调控与促进健康生长、在农业生产中作为高效活性菌肥等方面,发挥着十分有益的和令人瞩目的作用。关于光合细菌的类群、形态与生理特征、在生态系统中的地位和作用等内容,请参考有关文献与专著。这里仅就光合细菌的分离、培养方法作一介绍。 1光合细菌的富集培养的一般方法 ①分离源 光合细菌四个科-红螺菌科(Rhodospirillaceae)、着色菌科(Chromatiaceae)、绿菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chloroflexaceae)的各种菌,广泛分布于地球生物圈的各处。作为光合细菌的分离源,一般可从富营养化的湖泊、池沼、海滩、以及水田、硫黄泉、灌水土壤、和污水厂活性污泥、畜牧场水沟等厌氧或缺氧环境采样。在较深的水体,可使用采水器采取厌氧层的水。在较浅的地方,可直接用吸管吸取带底泥的水。采样的同时记录水温、pH、有无H2S气味等项内容。将采集到的水样或泥样放在厌氧、低温条件下,带回实验室进行分离。 ②光合细菌富集培养基 用于光合细菌富集培养用的培养基有许多配方,这里仅介绍日本星野氏推荐的基本培养基I和基本培养基II。前者适合于红螺菌科的光合细菌,后者适用于着色菌科和绿菌科的菌。 基本培养基I: KH2PO4 0.5g K2HPO4 0.6g (NH4)2SO4 1.0g MgSO4·7H2O 0.2g NaCl 0.2g CaCl2·2H2O 0.05g酵母浸出汁 0.1g微量元素溶液(见后)1mL 生长因子溶液(见后)1mL蒸馏水1000ml以上配制成的培养基pH值约6.7 根据需要,可在上述培养基中添加一些成分,如富集的是缺少同化型硫酸还原系的菌种,则可在基本培养基I中加入0.01%硫代硫酸钠;如是海洋

光合细菌的分离、培养和鉴定

光合细菌的分离、培养和鉴定 摘要:从南湾水库大坝下层水域取水样获得一株光合细菌。采用多种培养基分离方法分离出纯培养物。进行了菌落形态学观察和亚显微观察。于不同条件下培养后分别测定光密度和生长曲线。实验证实分离到的菌种为沼泽红假单胞菌。 关键词:生长曲线;沼泽红假单胞菌;光合细菌 The separation and culture and identified of photosynthetic bacteria Abstract:A strain sample of photosynthetic bacteria was got from the lower water in South Bay Reservoir. using a variety of separation methods to get pure cultures. It was cultured with various medium to culture the pure strains. Transmission election micrographs and microscope were observed of the strain. The optical density (OD) and the growth curve were measured under different conditions. The results suggested that the strain was Rhodopseudomonas palustris. Keywords:Colony and cell; Growth curve; Rhodopseudomonas palustris; Photosynthetic bacteria 引言 光合细菌由于碳、氮代谢途径和光合作用机制的独特性和其生理类群的多样性, 而被大量关注。多年来, 光合细菌一直被作为研究光合作用以及生物固氮作用机理的重要材料。经过研究发现光合细菌在环保、农业、医药等方面均有较高的应用价值。下面就光合细菌目前的开发应用研究近况作一概述。 光合细菌细胞营养价值极高。首先,光合细菌细胞干物质中蛋白质含量高达60%以上, 比目前生产的单细胞蛋白酵母中蛋白质的含量还高。而且其蛋白质氨基酸组成齐全, 是一种优质蛋白源。其次,光合细菌细胞含有多种维生素, 特别是B族维生素, VB12、叶酸、泛酸、生物素的含量远远高于酵母菌。另外, 光合细菌细胞还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等活性物质。因此, 光合细菌具有很高的营养价值。在水产养殖中, 光合细菌可被用于饵料或饲料添加剂。光合细菌促进鱼虾的生长, 无论是成活率或是产量的提高均可达10%-40%以上。同时,光合细菌还具有防治鱼虾疾病,净化养殖场所水质等方面的功能。使用光合细菌喂养的家禽, 成活率可提高5%-7%, 料肉比降低33%左右,肉鸡增重15%-17%, 产蛋率提高12.7%。而且所产

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