乳酸菌镜检方法及显微镜使用方法

乳酸菌精简方法及显微镜使用方法第一部分：乳酸菌镜检可以采用革兰氏染色方法。

第二部分：使用显微镜的油镜进行镜检，

下面是具体的染色方法和镜检方法，请参考。

第一部分：乳酸菌革兰氏染色方法

1目的

在乳酸菌发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的乳酸菌悬液或乳酸菌样品进行检测，观察乳酸菌乳酸菌在显微镜下的形态。

2原理

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

3 实验用品准备：

灭菌玻片、10-100ul移液器、10-100ul灭菌移液吸头、100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸头、接种环、酒精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸、计时器

4 操作：

1 涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，

用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。

2 干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水

分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。

3 固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回

通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为

宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。

4 初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

5 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

6 媒染：用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，

染色约1min。

7 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

8 脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30S，

随即水洗。

9 复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

10 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

11 干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目

的物后滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏

阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌。

5清场

实验结束后，将显微镜油镜上的残留的香柏油用擦镜纸轻轻擦去，将载物台移至最底处，将灯光调到最暗并将其关闭电源，拔下电源插头，罩上防尘罩

第二部分显微镜使用方法

以XSZ-3G型号的生物显微镜为例介绍显微镜操作规程及注意事项，乳酸菌形态观察要用油镜。

XSZ-3G生物显微镜操作规程及注意事项

1 操作规程

1.1安放

右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方，距离桌边3~4厘米处。

1.2 清洁

检查显微镜是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。

1.3 对光

镜筒升至距载物台1~2厘米处，低倍镜对准通光孔。调节光亮度的旋钮。

1.4 安装标本

将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定，转动平

台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。

1.5 调焦

调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。

1.6 观察

镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

低倍镜观察：观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。

高倍镜观察：从低倍镜转至高倍时，只需略微调动细调焦旋钮，即可使物像清晰。使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮，否则易压碎盖玻片并损伤镜头。

油镜的观察：先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。油镜观察前，应将显微镜亮度调整至最亮，光圈完全打开。

使用油镜时，先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后降低镜筒并从侧面仔细观察，直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本，然后用目镜观察，并用细调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。

香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。

1.7 结束操作

观察完毕，移去样品，扭转转换器，使镜头V字型偏于两旁，擦抹干净，将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯，并套上镜套。

2 注意事项

2.1 光强的调节：一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。

2.2 不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。

2.3 在进行高倍镜头的切换的时候,一定要从低倍到高倍顺序,否则容易打坏镜头,还会污染低倍物镜。

2.4 转换物镜时要用手转物镜转盘,不能直接扳动物镜。

2.5 显微镜的任何光学部件都不可以干擦，必须用好的擦镜纸或者棉签沾清洗液擦洗。特别注意擦之前一定要用吹气球先吹掉大的灰尘颗粒。

2.6 不要随意把目镜拿下来,这样容易污染目镜,严重的会因此而长霉。

Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明

Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明 操作步骤： 本显微镜的荧光光路与明视场（相差、DIC也属明视场）光路相对独立。当使用明视场时，无需打开荧光光源，进打开总电源即可。当使用荧光观察时，可同时打开总电源和荧光电源。 明视场观察： 1.开机：按动总电源开关“1”处接通电源，此时开关和指示灯点亮，打开显微镜底座左侧的透射照明器开关，从小到大调节照明器开关下方的亮度调节旋钮，使照明亮度适当。 2.首先将聚光器模板A放入光路，用10×物镜对样品进行对焦，调节目镜的屈光度调节环，然后换用40×物镜观察样品。 3.关机：将亮度调节旋钮旋至亮度最暗位置，关掉显微镜底座左侧的透射照明器开关，然后按动总电源开关“0”处关闭电源。 DIC微分干涉观察： 开机、关机等与明视场观察相同，区别是要使用聚光器相对应的DIC模板N1及起偏器、检偏器，将其放入光路后，再使用专用的银白色DIC物镜对焦观察。在观察过程中可旋转起偏器，达到最佳的观察效果。 相差观察： 开机、关机等与明视场观察相同，区别是要使用聚光器相对应的相差模板PH1。 荧光观察： 1.开机：先打开荧光灯电源开关，然后按住电源开关上方的荧光灯激发按钮3秒钟后松开，即可见荧光灯点亮。 2.打开荧光转盘上的荧光拨杆至“0”位置，此时荧光光路打开。旋转荧光转盘，转入所对应的滤光片位置即可进行荧光观察；在观察过程中可插入位于荧光灯源前方的减光片，以改变荧光强度，减弱对活细胞样品的损伤。 3.关机：直接关掉荧光灯电源开关即可。 注意事项： 1.短时间内频繁开关荧光灯电源，将极大的缩短荧光灯寿命。 2.荧光光源打开后即可使用，但必须使用20分钟才可以关闭；关闭30分钟以后才可以再次打开，否则会导致荧光灯损坏。 3.不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮，否则会导致显微镜损坏。 4.粗动调焦钮达到限定位置后，如果继续向同一方向旋转会引起显微镜故障。请不要旋转过度。 5.显微镜光源在工作时会产生高温，因此小心不要接触光源以防烫伤，也不要将易燃品如纸张、布、塑料和酒精等放置于光源附近。

光学显微镜的结构与使用方法

光学显微镜的结构与使用方法 【目的要求】 1、熟悉光学显微镜的主要构造及其性能。 2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法。 3、初步掌握油镜的使用方法。 4、了解光学显微镜的维护方法。 【实验原理】 光学显微镜(light microscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器，它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途，是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具。 光学显微镜简称光镜，是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。目前使用的光镜种类繁多，外形和结构差别较大，有些类型的光镜有其特殊的用途，如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜，倒置显微镜等，但其基本的构造和工作原理是相似的。一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成，而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。 光镜是如何使微小物体放大的呢？物镜和目镜的结构虽然比较复杂，但它们的作用都是相当于一个凸透镜，由于被检标本是放在物镜下方的1～2倍焦距之间的，上方形成一倒立的放大实相，该实相正好位于目镜的下焦点（焦平面）之内，目镜进一步将它放大成一个虚像，通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处，在视网膜上形成一个直立的实像。显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的，该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。 分辨力是光镜的主要性能指示。所谓分辨力(resolving power)也称为辨率或分辨本领，是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力，即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。据测定，人眼的分辨力约为100 μm。显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定，物镜的分辨力就是显微镜的分辨力，而目镜与显微镜的分辨力无关。光镜的分辨力（R）（R值越小，分辨率越高）可以下式计算： 这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率（空气为1、油为1.5）； 为标本对物镜镜口张角的半角，sin的最大值为1； 为照明光源的波长（白光约为0.5m）。放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数，一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 一、光学显微镜的基本构造及功能 （一）机械部分 1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。根据镜筒的数目，光镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的。镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角，在其镜筒中装有能使光线折转45度的棱镜。

一显微镜的构造及使用方法

实验一显微镜的构造及使用方法 一、目的要求 1.了解显微镜的构造、性能及成像原理。 2.掌握显微镜的正确适用及维护方法。 二、实验器材 1.显微镜、纱布、绸布 2.酵母菌示教标本 三、普通光学显微镜简介 微生物的最显著的特点就是个体微小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。 显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括：明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜，其它显微镜都是在此基础上发展而来的，基本结构相同，只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。 （一）显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。 图1-1 显微镜构造 1.目镜 2.镜筒 3. 转换器 4. 物镜 5. 载物台 6. 聚光器 7. 虹彩光圈 8. 聚光镜调节钮9.反光镜10. 底座11. 镜臂12. 标本片移动钮 13. 细调焦旋钮14. 粗调焦旋钮15.电源开关16.光亮调节钮17.光源 1.机械系统： （1）镜座Base：在显微镜的底部，呈马蹄形、长方形、三角形等。 （2）镜臂Arm：连接镜座和镜筒之间的部分，呈圆弧形，作为移动显微镜时的握持部分。 （3）镜筒Tube：位于镜臂上端的空心圆筒，是光线的通道。镜筒的上端可插入接目镜，下面可与转换器相连接。镜筒的长度一般为160mm。显微镜分为直筒式和斜筒式； 有单筒式的，也有双筒式的。 （4）旋转器Nosepiece：位于镜筒下端，是一个可以旋转的圆盘。有3~4个孔，用于安

显微镜的使用注意事项

注意事项 ■持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。 ■轻拿轻放，不可把显微镜放置在实验台的边缘，应放在距边缘10cm处，以免碰翻落地。 ■保持显微镜的清洁，光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。 ■水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台，如果沾污应立即用擦镜纸擦净。■放置玻片标本时要对准通光孔中央，且不能反放玻片，防止压坏玻片或碰坏物镜。 ■要养成两眼同时睁开观察的习惯，以左眼观察视野，右眼用以绘图。 ■不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要任意拆卸各种零件，以防损坏。 ■使用完毕后，必须复原才能放回镜箱内，其步骤是：取下标本片，转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜，下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，放回实验台柜内。最后填写使用登记表。 故障原因 一、检定方法把标准刻线尺放置在硬度计(或显微镜)的工作台上，检查时先调好焦距，使在目镜视野内或投影屏上能清晰地看到标准刻线尺的刻线，并调整到与目镜内的刻线重合，然后将读数显微镜的刻线与标准刻线尺的刻线进行比较，应至少在整个测量范围的5个间隔段进行测量，各间隔段比较3次，取3 次比较结果的平均值，其相对误差W按下式进行计算: W=(Li-L)/L×100% 式中:W——相对误差(mm)；Li——读数显微镜的比较段所测出的长度(mm)， (i=1～5)；L——标准刻线尺比较段的实际长度(mm)。 读数显微镜的刻度按上述方法逐段进行比较，其误差应不大于±0.5%。 二、故障原因与调修 1.显微镜混浊不清 主要原因:镜片不洁或发霉。 排除方法:当镜片上存有灰尘或污物时，应用毛刷、羽毛除去，继而用镜头纸或用脱脂棉蘸少许无水酒精或乙醚细心地沿环形轨迹擦拭，但不要让擦拭液体流失。 2.镜内不能清晰地看到压痕边缘 主要原因:部分镜片有松动现象。 排除方法:重新固紧镜片松动之处。 3.读数显微镜刻度值与标准尺刻度不重合 主要原因:物镜镜头松动或物镜镜头与镜筒连接处垫圈丢失，焦距变化所致。 排除方法:将物镜镜头紧固，若垫圈丢失，应经过反复调试其厚度，配上合适的垫圈，至刻度误差最小的位置为止。

显微镜使用方法步骤

显微镜使用方法步骤 (一)实验时要把显微镜放在桌面上，镜座应距桌沿6～7cm左右，打开底光源开关。 (二)转动转换器，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。然后用双眼注视目镜内，调整光源强度，把聚光镜上升，把虹彩光圈调至最大，使光线反射到镜简内，这时视野内呈明亮的状态。 (三)将所要观察的装片放在载物台上，使被观察的部分位于通光孔的正中央。 (四)先用低倍镜观察(物镜10×、目镜10×)。观察之前，先转动粗准焦螺旋，使载物台上升，使物镜逐渐接近切片。需要注意，不能使物镜触及玻片，以防镜头将玻片压碎。并转动粗准焦螺旋，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。 (五)如果在视野内看到的物像不符合实验要求(物像偏离视野)，可慢慢移动左右移动尺。移动时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物像移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以调节细准焦螺旋，直至物像清晰为止。6 (六)如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视野中的物像范围缩小了很多)。一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高信物镜应该可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动细准焦螺旋进行调节。7 (七)在转换高倍物镜并且看清物像之后，可以根据需要调节光圈或聚光器，使光线符合要求般将低倍物镜换成高倍物镜观察时，视野要稍变暗一些，所以需要调节光线强弱)。8 (八)观察完毕，应先将物镜镜头从通光孔处移开，然后将显微镜复原。并检查零件有无损伤(特别要注意检查物镜是否沾水，如沾了水要用镜头纸擦净)，检查处理完毕后即可放回原处。 注意事项 ? 1.必须熟练掌握并严格执行使用规程。 ? 2.取送显微镜时一定要一手握住镜臂，另一手托住底座。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。 ? 3.观察时，不能随便移动显微镜的位置。 ? 4.凡是显微镜的光学部分，只能用特殊的擦镜头纸擦拭，不能乱用他物擦拭，更不能用手指触摸透镜，以免汗液玷污透镜。 ? 5.保持显微镜的清洁，避免灰尘、水及化学试剂的玷污。 ? 6.转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，应转动转换器。 ?7.切勿随意转动粗准焦螺旋。使用细准焦螺旋时，用力要轻，转动要慢，转不动时不要硬转。 ?8.不得任意拆卸显微镜上的零件，严禁随意拆卸物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。 ?9.在使用高倍物镜时，不要用粗准焦螺旋调节焦距，以免移动距离过大，损伤物镜和玻片。 ?10.保持显微镜的干燥。 ?11.用毕后，必须检查物镜镜头上是否沾有水或试剂，如有则要擦拭干净，并且要把载物台擦拭干净，按规定放好。

提高显微镜分辨率的方法简述

目录 1 选题背景 (1) 2 方案论证及过程论述 (1) 2.1 像差 (1) 2.1.1 球面像差 (1) 2.1.2 慧形像差 (2) 2.1.3 色像差 (2) 2.2 照明对显微镜分辨率的影响 (2) 2.2.1 非相干光照明 (2) 2.2.2 相干光照明 (2) 2.2.3 部分相干光照明 (3) 2.2.4 临界照明 (3) 2.3 衍射 (3) 2.3.1 对两个发光点的分辨率 (3) 2.3.2 对不发光物体的分辨率 (4) 2.4 光噪声 (6) 3 结果分析 (6) 4 结论 (7) 4.1 提高光学显微镜与电子显微镜分辨率的方法 (7) 4.1.1 提高光学显微镜分辨率的方法 (7) 4.1.2 如何提高电子显微镜分辨率 (7) 参考文献 (9)

1 选题背景 显微镜是实验室最重要的设备之一，对观察微小物体细节的显微镜来说，评价光学显微镜及电子显微镜的重要指标之一是分辨本领。显微镜的分辨能力是指其分辨近距离物体细微结构的能力，它主要是显微镜的性能决定。通常是以显微镜的分辨率级即显微镜能分辨开两个物点的最小距离d来表示，d值越小，则显微镜的分辨能力越强。 人眼本身就是一台显微镜，在标准照明条件下，人眼在明视距离(国际公认为25cm)上的分辨率约等于1/10mm。对于观察两条直线来说，由于直线能刺激一系列神经细胞，眼睛的分辨率还能提高一些，这就是显微镜的分划板使用双线对准的原理所在。人眼的分辨率只有1/10mm，那么比1/10mm小的物体或比1/10mm近的两个微小物体的距离，人眼就无法分辨了。这时人们开始研制出放大镜和显微镜，显微镜的分辨率计算公式为：d=0.61入/NA；式中：d为分辨率(μm)；入为光源波长(μm)；NA为物镜的数值口径(也称镜口率)。 造成显微镜光学像欠缺的因素主要在物镜组，有像差、衍射和光噪声等，它们是影响显微镜分辨率的主要因素，其次照明对显微镜的分辨率也有一定的影响。 对于显微镜的使用者来讲，应该对造成显微镜分辨率下降的因素有比较清楚的认识，并知道克服和减少这些因素的方法。本文从几何像差、色像差、衍射、干涉和照明几个方面分析了对显微镜分辨率的影响,指出了孔径数的增加，从衍射角度看对显微镜分辨率的提高有好处，但从几何像差的角度看则会降低显微镜的分辨率;并指出了照明对显微镜分辨率的影响是不可忽略的等。 2 方案论证及过程论述 2.1 像差 像差可分为单色像差和色像差两大类。单色像差有五种：（1）球面像差；（2）彗形像差；（3）像散；（4）像场弯曲；（5）畴变。其中（1）和（2）是由大孔径引起的，（3）、（4）、（5）是由大视场引起的。显微镜需要大孔径，但不需要大视场，所以显微镜的单色像差主要是（1）和（2）。 2.1.1 球面像差 单球面公式只有在满足近轴光线的条件下才能成立。当孔径较大时，有许多远轴光线也进入了透镜，近轴光线和远轴光线经透镜折射后不能在同一点上会聚。换句话说，主轴上一物点经透镜成像后，像不是一个点，而是一个圆斑，这样就产生了球面像差。消除的方法有二：一是在透镜前加一光阑，用以限制远轴光线的进入。这样做，会使显微镜的孔径数降低，从而降低了显微镜的分辨率。二是用复合透镜法，显微镜物镜就是采用这种方法制作的。

显微镜的使用方法

显微镜的使用方法 1、实验时要把显微镜放在座前桌面上稍偏左的位置，镜座应距桌沿 6～7 cm左右。 2、打开光源开关，调节光强到合适大小。 3、转动物镜转换器，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。先把镜头调节至距载物台1～2cm左右处，然后用左眼注视目镜内，接着调节聚光器的高度，把孔径光阑调至最大，使光线通过聚光器入射到镜筒内，这时视野内呈明亮的状态。 4、将所要观察的玻片放在载物台上，使玻片中被观察的部分位于通光孔的正中央， 然后用标本夹夹好载玻片。 5、先用低倍镜观察（物镜10X、目镜10X）。观察之前，先转动粗动调焦手轮，使载物台上升，物镜逐渐接近玻片。需要注意，不能使物镜触及玻片，以防镜头将玻片压碎。然后，左眼注视目镜内，同时右眼不要闭合（要养成睁开双眼用显微镜进行观察的习惯，以便在观察的同时能用右眼看着绘图），并转动粗动调焦手轮，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。 6、如果在视野内看到的物像不符合实验要求（物像偏离视野），可慢慢调节载物台移动手柄。调节时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物像移动的方向正好相反。 如果物像不甚清晰，可以调节微动调焦手轮，直至物像清晰为止。 7、如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视野中央（将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视野中的物像范围缩小了很多）。一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高倍物镜应可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动微动 调焦手轮进行调节。 8、在转换高倍物镜并且看清物像之后，可以根据需要调节孔径光阑的大小或聚光器的高低，使光线符合要求（一般将低倍物镜换成高倍物镜观察时，视野要稍变暗一

显微镜的使用方法

显微镜的使用方法： 1、实验时要把显微镜放在座前桌面上稍偏左的位置，镜座应距桌沿 6～7 cm左右。 2、打开光源开关，调节光强到合适大小。 3、转动物镜转换器，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。先把镜头调节至距载物台1～2cm左右处，然后用左眼注视目镜内，接着调节聚光器的高度，把孔径光阑调至最大，使光线通过聚光器入射到镜筒内，这时视野内呈明亮的状态。 4、将所要观察的玻片放在载物台上，使玻片中被观察的部分位于通光孔的正中央，然后用标本夹夹好载玻片。 5、先用低倍镜观察（物镜10X、目镜10X）。观察之前，先转动粗动调焦手轮，使载物台上升，物镜逐渐接近玻片。需要注意，不能使物镜触及玻片，以防镜头将玻片压碎。然后，左眼注视目镜内，同时右眼不要闭合（要养成睁开双眼用显微镜进行观察的习惯，以便在观察的同时能用右眼看着绘图），并转动粗动调焦手轮，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。 6、如果在视野内看到的物像不符合实验要求（物像偏离视野），可慢慢调节载物台移动手柄。调节时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物像移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以调节微动调焦手轮，直至物像清晰为止。 7、如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视野中央（将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视野中的物像范围缩小了很多）。一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高倍物镜应可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动微动调焦手轮进行调节。 8、在转换高倍物镜并且看清物像之后，可以根据需要调节孔径光阑的大小或聚光器的高低，使光线符合要求（一般将低倍物镜换成高倍物镜观察时，视野要稍变暗一些，所以需要调节光线强弱）。 9、观察完毕应先将物镜镜头从通光孔处移开，然后将孔径光阑调至最大，再将载物台缓缓落下，并检查零件有无损伤，特别要注意检查物镜是否沾水沾油，如沾了水或油要用镜头纸擦净，检查处理完毕后即可铺上防尘布。 购买显微镜之前，首先先了解自己所要做的实验目的，针对选择合适的显微镜，因显微镜种类多。 普通光学显微镜的使用方法 使用方法：（一）显微镜的主要构造 普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。 1.机械部分 （1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。 （2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。 （3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。 （4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。 （5）物镜转换器(旋转器)：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。 （6）镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，

荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程

荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程 荧光显微镜是中的一种。 关键字： 荧光显微镜使用方法 荧光显微镜操作规程 荧光显微镜使用 使用方法和荧光显微镜操作规程 1. 用窗帘遮蔽光线，关闭房间内的灯光，除去显微镜的防尘罩，确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱，并转动灯箱卡圈上的拨杆，将灯箱与镜臂连接。 2. 将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座，再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。 3. 打开电源开关，电压表显示出电源电压，如电源电压波动不大于额定电压值的±5%，即可按下启动开关点燃汞灯，如因天气太冷或电压不稳定等原因，一次启动未点燃汞灯，可以多揿动几次。待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率，即可开始工作。 4. 灯泡的调中： （1）任选一块标本放在载物台上. （2）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路，转动滤色片组转换手轮，将紫光（Ｖ）或蓝光（Ｂ）或绿光（Ｇ）激发滤色片组转入光路，并将10×荧光物镜转入光路。

（3）调节粗微调手轮，将标本像调焦清晰。 （4）前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆，使视场光栏成像清晰，转动视场光栏拨杆将视场光栏收小，调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中，然后再将视场光栏开至最大。 （5）转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路，前后调节灯箱上的聚光镜拨杆，使汞灯的弧光在视场内成像清晰。 （6）调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使汞灯的弧光居中。 （7）调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使光源的反射像与汞灯的弧光分开。 （8）转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路，此时视场照明均匀。 5. 荧光观察： （1）将荧光染色标本放到载物台上。 （2）将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路，调节载物台纵横移动手轮，将标本移入光路。 （3）转动滤光片转换拨轮，将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。 滤光片选择正确与否，是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时，必须遵守斯托克斯定律：激发滤光片的透射波长＜双色束分离器的透射波长＜阻断滤光片的透射波长。 由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片，出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配，在观察和摄影时，只需选择滤光片组即可。 （4）调节粗调手轮，当看清荧光图像轮廓后，再用微调手轮调焦，直至看到清晰的荧光图像。 （5）当需要得到较强的荧光图像时，可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路，可获得较明亮的荧光图像。

显微镜的结构和使用教学案例

显微镜的结构和使用教学案例国培学员：黎小秀

目镜（无螺纹）长短 物镜（有螺纹）短长 看清物像时与镜头玻片的距离远（约1厘米）近（约3毫米）【设计意图】 （1）自主梳理：对照实物，形象直观地认识显微镜；加深对光、放片、低倍镜观察步骤的的认识。 （2）学生示，既提升了能力，更能增强其他学生规操作的信心。 （3）在规使用步骤的基础上，加强学生的自主训练，在训练中提高、总结、体会。环节八：知识：显微镜的发展史，让学生感悟科学，享受科技带来的成就。 （二）课堂小结 （三）【达标检测】 1.如果发现显微镜目镜上有污物，应用什么进行清除（） A.干净纱布 B.擦镜纸 C.吸水纸 D.以上物品都可以 2.显微镜的物镜是45×,要观察放大了675倍的物像,应选用的目镜是( ) A.8× B.10× C.12× D.15× 3.在使用光学显微镜时,下列有关"对光"的操作错误的是( ) A.遮光器较大的光圈对准通光孔 B.高倍物镜正对通光孔 C.反光镜对向光源 D.光线较暗时使用凹面反光镜 4.使用显微镜时，若我们选用物镜倍数为10×，目镜倍数为10×时，视野里看到洋葱表皮细胞数为16个，在改用物镜为40×时，视野里看到的细胞数为( ) A 16 B 8 C 4 D 无法确定 5.在观察同一材料的同一部位时,高倍镜和低倍镜相比( ) A.物像小,视野亮,看到的细胞数目多 B.物像小,视野暗,看到的细胞数目少 C.物像大,视野亮,看到的细胞数目多 D.物像大,视野暗,看到的细胞数目少 6.识图回答： （1）调节光线强弱的部件是［］＿＿＿＿＿和遮光器上的＿＿＿＿＿。 （2）使镜筒在较小围升降的部件是［］＿＿＿＿＿。 （3）安装物镜的部件是［］＿＿＿＿＿，用眼观察的镜头是［］＿＿。 (4)观察人血涂片时，若要观察到最多的红细胞，应选择哪个目镜和物镜的组合？ 【教师精讲点拨】 1、镜头的擦拭：①用专门的擦镜纸；②擦镜头时，先将擦镜纸折叠几次，然后朝 目镜 ①②③

正确使用显微镜的方法和步骤

正确使用金相显微镜的方法步骤 金相显微镜的使用相对来说比较复杂些，下面给大家介绍一下金相显微镜的一些简单使用，希望对大家有所帮助。 1.金相显微镜使用说明： (1)使用油浸系物镜前，将载物台升起，用一支光滑洁净小棒蘸上一滴杉木油，滴在物镜的前透镜上，这时要避免小棒碰压透镜及不宜滴上过多的油，否则会弄伤或弄脏透镜。 (2)使用低倍物镜观察调焦时，注意避免镜头与试样撞击,可从侧面注视接物镜,将载物台尽量下移，直至镜头几乎与试样接触(但切不可接触)，再从目镜中观察。此时应先用粗调节手轮调节至初见物像，再改用细调节手轮调节至物像十分清楚为止。切不可用力过猛，以免损坏镜头，影响物像观察。当使用高倍物镜观察，或使用油浸系物镜时，必须先注意极限标线，务必使支架上的标线保持在齿轮箱外面二标线的中间，使微动留有适当的升降余量。当转动粗动手轮时，要小心地将载物台缓缓下降，当目镜视野里刚出现了物像轮廓后，立即改用微动手轮作正确调焦至物像最清晰为止。 (3)观察前原则上要装上各个物镜。在装上或除下物镜时，须把载物台升起，以免碰触透镜。如选用某种放大倍率，可参照总倍率表来选择目镜和物镜。 (4)试样放上载物台时，使被观察表面复置在载物台当中，如果是小试样，可用弹簧压片把它压紧。 (5)将光源插头接上电源变压器，然后将变压器接上户内220V电源即可使用。照明系统在出厂前已经经过校正。 (6)每次更换灯泡时，必须将灯座反复调校。灯泡插上灯座后，在孔径光栏上面放上滤色玻璃，然后将灯座转动及前后调节，以使光源均匀明亮地照射于滤色玻璃上，这样，灯泡已调节正确，这时则将灯座的偏心环转动一个角度，以便将灯座紧固于底盘内。灯座及偏心环上有红点樗，如卸出时，只要将红点相对即可。 (7)为配合各种不同数值孔径的物镜，设置了大小可调的孔径光栏和视场光栏，其目的是为了获得良好的物像和显微摄影衬度。当使用某一数值孔径的物镜时，先对试样正确调焦，之后，可调节视场光栏，这时从目镜视场里看到了视野逐渐遮蔽，然后再缓缓调节使光栏孔张开，至遮蔽部分恰到视场出现时为止，它的作用是把试样的视野范围之外的光源遮去，以消除表面反射的漫射散光。为配合使用不同的物镜和适应不同类型试样的亮度要求设置了大小可调的孔径光栏。转动孔径光栏套圈，使物像达到清晰明亮，轮廓分明。在光栏上刻有分度，表示孔径尺寸。 2.金相显微镜使用注意事项： (1)切勿将显微镜的灯泡(6~8V)插头直接插在220V的电源插座上，应当插在变压器上，否则会立即烧坏灯泡。观察结束后应及时关闭电源。

显微镜操作步骤和注意事项

操作步骤和注意事项 （一）正置显微镜 1、安放 右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立.桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方.单筒的一般放在左侧,距离桌边3～4厘米处. 2、清洁 检查显微镜是否有毛病,是否清洁,镜身机械部分可用干净软布擦拭.透镜要用擦镜纸擦拭,如有胶或粘污,可用少量二甲苯清洁之. 3、对光 镜筒升至距载物台1～2厘米处,低倍镜对准通光孔.调节光圈和反光镜,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动. 若使用的为带有光源的显微镜,可省去次步骤,但需要调节光亮度的旋钮. 4、安装标本 将玻片放在载物台上,注意有盖玻片的一面一定朝上.用弹簧夹将玻片固定,转动平台移动器的旋钮,使要观察的材料对准通光孔中央. 5、调焦 调焦时,先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒,并从侧面仔细观察,直到物镜贴近玻片标本,然后左眼自目镜观察,左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本物像时停止,再用细调焦旋钮回调清晰. 操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时,应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值. 若使用双筒显微镜,如观察者双眼视度有差异,可靠视度调节圈调节.另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距. 6、观察 若使用单筒显微镜,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野.右手记录、绘图. 镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复. 光强的调节：一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强.除调节反光镜或光源灯以外,虹彩光圈的调节也十分重要. （1）低倍镜观察 观察任何标本时,都必须先使用低倍镜,因为其视野大,易发现目标和确定要观察的部位. （2）高倍镜观察 从低倍镜转至高倍时,只需略微调动细调焦旋钮,即可使物像清晰. 使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮,否则易压碎盖玻片并损伤镜头. 转动物镜转换器时,不可用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,转换器螺纹受力不均匀而破坏,最后导致转换器就会报废.

显微镜的结构和使用教学设计

第一节显微镜的结构和使用教学设计 连云港海头初级中学朱文娟 一、教学目标 1．通过学习显微镜各部件的名称、作用和方法，认识显微镜的结构。 2.学会正确规范使用显微镜的步骤、方法，发展实验能力。 3．通过对本节内容的学习，在科学态度、科学方法的熏陶中，树立初步的科学意识。 二、教学重难点 1. 重点：认识显微镜的结构，掌握显微镜的使用步骤。 2. 难点：规范使用显微镜，并能观察到清晰的物象。 三．学情分析 本次授课对象是刚接触生物实验的七年级学生,本节课内容学习显微镜的结构和使用。由于本节课内容涉及较深的动手能力，故在教学中，通过启发式教学，设置大量的问题情境，来激发学生的学习兴趣和进一步培养他们的实验能力和科学意识。 四、教学过程 1、导入新课 教师活动：地球上的生物虽然种类繁多，但是除病毒以外，生物体都是由细胞构成的。可是，细胞的体积很小，我们怎样才能观察到它呢？聪明的人类为了解决这个问题，而发明创造了显微镜这种专门用来观察细胞结构和功能的仪器。我们这节课就来认识一下显微镜及其使用方法。 2、讲授新课 活动一：显微镜的结构 通过挂图和实物相结合的方法对显微镜的结构进行细致的讲授。具体从机械部分、照明部分和光学部分三方面讲述各部分结构和功能。 活动二：显微镜的使用 通过具体实验来讲授显微镜的实验步骤，在讲述各步骤时以启发学生思考为主，强调个步骤中需要注意的事项。

a．取镜和放置：取出时，右手紧握镜臂，左手托住镜座，将显微镜放在左肩前方的位置。（学生思考原因） b．对光：用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动），使用低倍镜对准镜台的通光孔（听到碰扣声时以对准）。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼观察（右眼打开），同时调节反光镜方向，直到视野中光线均匀明亮为止。（学生思考为什么是先用低倍镜观察） c．放置装片：取装片于载物台上（切记是有盖玻片的一面朝上），用推片器弹簧夹住，然后旋转退片器螺旋，将索要观察的部分调到通光孔中央。 d．低倍镜观察：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着载物台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使载物台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动装片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，载物台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升载物台。 e．高倍镜观察：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。 转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞装片)，如高倍镜头碰到装片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。 调节焦距，转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!) 如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换装片标本时，必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使载物台下降，方可取下装片标本。想让像变大就要使物镜靠近物体,目镜远离物镜一些，像变小则反之…… f．收镜：下降载物台至最低，去下装片；转动螺旋器使物镜呈“八”字朝向学生；最后竖起反光镜以免停灰（学生思考原因）。

初中生物 第一节显微镜的结构和使用教学设计

第一节显微镜的结构和使用教学设计 第一节显微镜的结构和使用教学设计 ●一、教学目标 知识目标 1．通过学习显微镜各部件的名称、作用和方法，认识显微镜的结构。 2．学习显微镜的使用方法，掌握使用显微镜的基本步骤。 能力目标 学会正确规范使用显微镜的步骤、方法，发展实验能力。 情感目标 通过对本节内容的学习，在科学态度、科学方法的熏陶中，树立初步的科学意识。 ●二、教学重难点 教学重点 1．显微镜的使用方法。 2．学习独立操作能力的培养。 教学难点 规范使用显微镜，并观察到物像（要求学生用左眼注视目镜内图像的同时，右眼睁开）。 教学方法 谈话法、实验法。 ●三、教学过程 ［导入新课］ 教师活动：用谈话式教学方式让学生认识细胞，及其与生物的关系。具体活动如下： 科学研究证明，地球上的生物虽然种类繁多，但是从基本结构上说则大体上是一样的——除病毒以外，生物体都是由细胞构成的。生物体的一切活动，比如：生物的长大、繁殖等都是靠细胞来实现的。细胞是构成生物体结构和功能的基本单位。要想探索生物的奥秘，就必须要了解细胞。我们这一单元的内容就是专门来研究一下生物的各种生命活动与细胞的关系的。可是，细胞的体积很小，我们怎样才能观察到它呢？聪明的人类为了解决这个问题，而发明创造了显微镜这种专门用来观察细胞结构和功能的仪器。我们这节课就来认识一下显微镜及其使用方法。

［讲授新课］ 显微镜是生物科学研究中常用的观察工具。最早的显微镜是由一位荷兰眼镜商在16xx年前后制造的，它的结构简单，放大倍数不高，只有10～30倍，可以观察一些小昆虫，如跳蚤等，因而有人称它为“跳蚤镜”。这种显微镜是用光线照明的，属于光学显微镜。后来随着科学技术的不断发展，人们把显微镜的制造技术进行了不断的改进。到20世纪30年代诞生了电子显微镜。它是利用高速运动的电子来代替光线进行观察，放大倍数可以达到几十万倍。电子显微镜大大开阔了人们的视野，使人们看到了细胞更细微的结构。它的应用领域已经不止局限于生物学，在医学、物理学、化学等其他领域的应用也很广泛，已经成为了人们了解微观世界不可缺少的工具。下面，我们先来认识一下现在最常用、最普通的一种显微镜。 在学习以前，我们先来看一下如何进行取镜和安放。取镜和安放可概括为几步：右手握，左手托，略偏左，安目镜。右手握镜臂，左手托镜座，放在实验台略偏左的地方距边缘7厘米左右，安装好目镜和物镜。下面，大家就按照这一步骤先来练习一下。安放好以后请大家对照教材上的图，认识一下各结构名称。 学生活动：对照彩图认识各结构名称。教师作适当指导。 教师活动：认识了各结构以后，更重要的是会使用它来进行观察物像。现在每一小组都有四种观察玻片：写上“上”字的玻片，印有数字的透明纸，动植物玻片标本，写有数字的不透明纸。首先以号片为例观察。观察前要先对光，对好以后才能观察。（演示、对光、观察的步骤说明多媒体） 学生活动：观看多媒体、对照练习。 七年级生物教案 学生活动：观察其他玻片，讨论问题。 教师活动：这四种玻片都说明了什么问题呢？ 学生甲：物像是倒像，而且上下颠倒左右相反。 学生乙：光学显微镜只能观察能被光穿透的物体。 学生丙：放大倍数为目镜与物镜的放大倍数的乘积。 好，看来，大家对这些问题考虑比较全面，回答完全正确。下面我们针对③号片再做一次观察，但不同的是我们换一下目镜，看又会出现什么情况。 学生活动：换目镜、观察、讨论。 教师活动：发现有什么区别吗？ 学生：放大倍数越大，细胞越大，个体数越少，放大倍数越小，细胞越小，个体数越多。很好，看来大家都认真观察比较过了。这个道理其实很简单，不明白的同学再观察比较一次。

显微镜使用的一般步骤

一．显微镜使用的一般步骤： 1、取镜与安放：右手握镜臂，左手托镜座放在前方稍偏左。 2、对光：（1）转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。（2）选较大的光圈对准通光孔，左眼注视目镜，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内，通过目镜，可以看到白亮的视野。 3低倍镜观察：（1）标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。 （2）转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时实验者的眼睛应当看物镜头与标本之间，以免物镜与标本相撞）。（3）左眼看目镜内，同时反向转动粗准焦螺旋，使镜筒上升，直到看到物像为止，再稍稍转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 4.高倍镜观察：（1）移动装片，在低倍镜下使需要放大观察的部分移动至视野中央。（2）转动转换器，移走低倍物镜，换上高倍物镜。（3）调节细准焦螺旋，使物像清晰。（4）调节光圈和反光镜，使视野亮度适宜。 5、使用完毕后，取下装片，转动转换器，逆时针旋出物镜，旋进镜头盒；取出目镜，插进镜头盒，盖上。把显微镜放正。 二、显微镜使用的一些注意问题： a、等于目镜的放大倍数和物镜的放大倍数的乘积，该放大倍数指的是长度或宽度，而不是面积和体积。

b、物镜镜头长度与放大倍数成正比；目镜镜头长度与放大倍数成反比。高倍镜镜面较小，低倍镜镜面较大 c、视野：视野是指一次所能观察到的被检标本的范围。视野的大小与放大倍数成反比，放大倍数越小，视野范围越大，看到的细胞数目越多，工作距离越长；放大倍数越大，视野范围越小，看到的细胞数目越少，工作距离越短。 d、镜像亮度：镜像亮度是指视野里所看到的像的亮暗程度。它与放大倍数成反比，即在光源一定的情况下，放大倍数越大，视野越暗。在用高倍镜或物镜观察标本时，根椐实际情况可使凹面反光镜、大光圈来增强光源，以改善视野亮度而使物像明亮清晰。 e、视野中物像移动与标本移动的关系：视野中某观察对象位于左前方如要移到中央，应将装片或切片向左前方移动。也就是同向移动。原因是视野中物像移动的方向与装片或切片移动的方向相反。 f、显微镜使用时的异常现象与原因 （1）有气泡：制作装片不规范；材料厚薄不均匀；水太少（2）同一视野一部分清晰另一部分不清晰：材料厚薄不均匀 （3）视野太亮：光线太强；调节光圈和反光镜（4）视野一半亮，一半不亮，反光镜没有转到位 h、显微镜使用时异物的判断：目镜、物镜或装片上，通常通过移动玻片（是否在玻片上），转动转换器（是否在物镜上）来判断，剩下在目镜上。

荧光显微镜操作手册

荧光显微镜操作手册 Olympus BX51 物镜： 4 ×0.16 （无DIC） 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝 2. WIB 绿（长通） 3. WIBA 绿（带通） 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄 操作步骤：（注意：样品须在低倍镜下放置和取下） DIC观察：

1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 3.将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜应 与相应的物镜倍数相匹配 4.先选用低倍物镜（“10×”） 5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6.换到高倍镜头，观察样品 7.DIC观察时，光路选择拉杆拉到中间位置，既可观察，也可拍照 荧光观察： 1.打开明场电源开关 2.打开汞灯电源开关 3.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 4.检偏器、DIC棱镜在光路外 5.将荧光光路shutter打开（“○”为开，“●”为关），需保护样品时关闭shutter 6.光路选择拉杆推至最里边 7.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置 8.通过两组减光滤片调节激发光强度 9.从低倍镜开始观察，调焦，找到预观察视野， 10.依次换到高倍镜头，观察样品 11.拍照时光路选择拉杆完全拉出 普通明场观察： 1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 3.起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜拨到 明场（BF）位置 4.先选用低倍物镜（“4×”） 5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6.依次换到高倍镜头，观察样品 7.光路选择拉杆拉到中间位置既可观察，也可拍照 关机： 1.关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次 开启） 2.将透射光调到最小，关闭明场电源开关 3.将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头 4.确认数据已经保存，关闭软件 5.使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据） 6.关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况

显微镜使用方法及习题

高一生物练习题一：显微镜的使用及习题 1．一个细小物体被放大50倍，这里“被放大50倍”是指该细小物体的 ( ) A.体积 B 表面积 C 像的面积 D 长或宽 2．当目镜为10×，物镜为10×时，在视野内看到一行相连的8个细胞，若目镜不变，物镜换成40×时，可看到这行细胞中 ( ) A．2个 B 4个 C 16个 D 32个 3．下列关于显微镜操作叙述中正确的是 ( ) A．左手握镜臂，右手托镜座，拿出镜箱 B．显微镜对光时，转动转换器，使高倍镜头对准通光孔 C．拿出显微镜后，把显微镜放在自己稍偏左 D．调焦时，眼睛注视物镜镜头，直到物像清晰 4．在一台光学显微镜中，目镜和物镜均最短的一组应是下列哪一种镜头组合 ( ) A．目镜(15×)和物镜(45×) B目镜(15×)和物镜(10×) C．目镜(5×)和物镜(10×) D 目镜(5×)和物镜(45×) 5．在视野的右上方发现一细胞分裂后期的细胞，要将其移至视野正中央，以利于观察其情况，应将装片向 ( ) A．左上方 B 左下方 C 右上方 D 右下方 6．当下降镜筒时，操作显微镜的人的目光将注视的部位是 ( ) A．镜筒 B 目镜 C 物镜 D 物镜与装片的距离 7．在10×目镜和10×物镜下，观察透明胶片上的字母“b”，其图像为 ( ) A． p B d C q D b 8．在光线明亮的实验室里，用白色洋葱表皮细胞做质壁分离实验，在显微镜视野中能清楚看到细胞壁，但看不清楚细胞是否发生质壁分离，为便于判明，此时应 ( ) A．改用凹面反光镜，放大光圈 B 改用凹面反光镜，缩小光圈 C．改用平面反光镜，放大光圈 D 改用平面反光镜，缩小光圈 9．用高倍镜观察洋葱根尖的细胞比用低倍镜观察到的细胞的细胞数目、大小和视野的明暗情况依次是 ( ) A．多、大、亮 B 少、小、暗 C 多、小、暗 D 少、大、暗 8．在光线明亮的实验室里，用白色洋葱表皮细胞做质壁分离实验，在显微镜视野中能清楚看到细胞壁，但看不清楚细胞是否发生质壁分离，为便于判明，此时应 ( ) A．改用凹面反光镜，放大光圈 B 改用凹面反光镜，缩小光圈 C．改用平面反光镜，放大光圈 D 改用平面反光镜，缩小光圈 9．用高倍镜观察洋葱根尖的细胞比用低倍镜观察到的细胞的细胞数目、大小和视野的明暗情况依次是 ( ) A．多、大、亮 B 少、小、暗 C 多、小、暗 D 少、大、暗 11．如下图所示，1、2为物镜长度；3、4为目镜长度；5、6为观察时物镜与标本切片距离大小，欲获得最大放大倍数的观察效果，其正确组合是 ( ) A．1、3、5 B 2、4、6 C．2、3、5 D 2、4、5 12．某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞看得清楚，