Elisa常见类型及实验标准操作方法与常见问题

Elisa常见类型及实验标准操作方法与常见问题

酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种实验室常用的检测方法，广泛应用于测量溶液中的分析物（抗体或抗原）的浓度。与其他基于抗体的检测方法不同的是，酶联免疫吸附试验或酶免疫测定（EIA）通过与固相支持物的结合和系列洗涤步骤，实现特异性和非特异性相互作用的分离，并可通过最终有色产物的形成，定量分析原始样品中分析物的含量。

ELISA 实验通常以细胞培养上清液、血清、血浆以及组织裂解物等为样品。该实验必备三种试剂：固相的抗原或抗体；酶标记的抗原或抗体；酶作用的底物。根据样品的性质、检测的实验条件、试剂的来源，可设计出不同类型的ELISA 检测方法。

该实验可迅速分析大量平行样品，在基础研究和临床诊断实践中广泛使用。

一、直接ELISA

原理：将抗原与固相载体连接，洗涤除去未结合的抗原及杂质。加酶标抗体进行孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。加底物反应。直接法主要用于测定抗原。

优点：操作流程简短，实验步骤少；无需使用二抗，避免了交叉反应；实验步骤少，操作不易出错。

缺点：实验中的一抗需要直接用酶标记，成本相对较高。

二、间接法ELISA

原理：将抗原与固相载体相连结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入特异性一抗与固相抗原相结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，加酶标二抗。固相免疫复合物中的抗体与酶标二抗结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，加底物显色。

优点：酶标二抗可加强信号，提高灵敏度；灵活性更大，同一酶标二抗可应用于多种不同的一抗；不直标一抗，可保留更多的免疫反应性；成本更低，使用标记抗体更少。

缺点：交叉反应几率升高。

三、双抗夹心法ELISA

原理：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子，但不适用于小分子抗原。将特异性抗体（捕获抗体）与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品，保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体（检测抗体）保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。

双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似，用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。

优点：高特异性，使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的；适用于复杂样品，抗原不需要进行纯化即可用于检测；灵活性更大，灵敏度更高，可采用直接法也可采用间接法。

缺点：检测物需要拥有两个以上不同的抗原表位或多个相同的重复表位；不适用于检测小分子物质。

四、竞争法ELISA

原理：竞争法ELISA最为复杂，通常用于检测小分子如半抗原、激素、药物等。样品中待检游离抗原与固定于固相载体上的抗原一起竞争相同的有限量抗体，当样品中的游离抗原越多，就可结合越多的抗体，而固相抗原只能结合较少的抗体。反之亦然。经洗涤去除样品中的抗原与抗体的结合物，只留下固相抗原与抗体的结合物。显示经计算可得样品中抗原的含量。竞争法可根据实验设置直接法、间接法或夹心法形式。

常见问题：

Elisa 实验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。

下面一步步分析Elisa试验操作中可能影响结果因素。

Step1: 标本的选择与准备

用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆)，有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面：

(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。

(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

(3)血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。

(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。

(5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。

Step2: 试剂的准备

在临床实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置30-60分钟，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。

Step3: 加样

（1）标本为血清：最好将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟;若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。

（2）加样后及时放入孵箱。

（3）加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

（4）如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。（5）标本较多时，请分批操作。

（6）血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。

Step4: 孵育

（1）温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。按照操作说明严格控制孵育时间；

（2）孵育时贴封片或加盖，避免标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁。

Step5：洗板

保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;反应板过多时，合理安排，或多用几台洗板机，避免等待时间过长。

Step6: 显色

显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 加样时保持显色剂不外流。

Step7: 终止

在加终止液时应避免产生气泡，而导致假阳性结果。

Step8: 读板

整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。

在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。

临床现考中常见的问题

现考中的常见问题 一、现场考察的目的 1、评估是否遵循法规，指导原则及SOP进行Ⅱ、Ⅲ期临床试验。（四期不涉及现考） 2、确定受试者权益和安全性是否获得保障。 3、确定临床试验资料的真实性。 4、促进临床试验更加规范。 二、现场检查的类型 按检查方式分类 1、定期、常规检查 定期进行基地复核、机构复核 2、有因检查 在以下情况发生后进行的检查称为有因检查： 被人举报违规、严重违背GCP、同期承担过多项目或多个相同项目、入组率过高或过快、安全性或有效性结果异常、既往不良行为。 现场检查类型 1.按检查方式分类 a）、飞行检查： 当研究者涉嫌有违规操作时可进行的突击检查，且不需要提前通知 b)、跟踪检查： 在整个实验进行中或实验结束后针对整个实验操作各方面的规范性进行的检查 2、按检查对象分类 a)、机构/专业检查 基地核查、机构核查 b)、研究项目/专项检查 在药物报生产之后进行的检查 三、检查要点

1、实验条件 a)、承担临床试验机构及相关专业应具备相应资格。 b)、具有《药物临床试验批件》及伦理委员会批件。 c)、具有并遵循所制定的临床试验管理制度。 d)、试验人员承担的相应工作，研究时间应与原始记录和申报资料记载一致。 e)、仪器、设备应与试验项目适应，其型号、性能、使用记录等应与申报资料一致。 2、实验记录 知情同意书应由受试者或其法定代理人签署，必要时可电话核实。 3、试验用药的接收和使用 a)、质检报告、临床试验方案与总结报告，以及申请资料中试验用药批号应一致。 b)、试验用药的接收，使用和回收应有记录及相关人员签名，接收，使用及剩余数量间的关系应对应一致。 c)、试验用药的用法用量及使用总量应与用药原始记录及临床试验报告对应一致。 4、数据溯源 a)、CRF与原始资料（需核查原始病历，实验室检查，影像，ECG，Holter，胃肠镜等检查的原始记录，。。。。。。）以及申报资料须对应一致。 b)、原始资料中各种临床检查数据须能溯源，必要时应对临床检查部门（检验科、影像室、各种检查室等）进行核查。 现考中先考人员可抽取一些病例与原始数据核对，查看是否真是。 c)、临床试验总结报告中完成病例数与实际临床试验病例数对应一致。 在此过程中，可能存在以下问题，总结报告中各个中心的的病例数与分中心小结中的病例数不一致，是因为分中心小结中的病例是包括了这个中心的所有病例，而总结报告中的病例数不包括剔除的病例 d)、统计报告与临床试验总结报告须对应一致。 e) 、药动学与生物等效性试验的原始图谱溯源。 1）纸质图谱是否信息完整，并与数据库中电子图谱一致。 2）原始图谱及数据是否与总结报告对应一致。

GF常见问题与操作方法

常见问题与操作方法 1.广发证券V6版网上委托软件设计的一些解释 分笔成交中的"B","S"标记 "B" 表示是主动性买单(Buy) "S" 表示是主动性卖单(Sell) 无BS标记的表示是不明单,系统根据当时的叫买叫卖价无法得知是主动性买单还是卖单 分笔成交明细中的最右边的灰色数字表示的是什么？ 交易所发布的行情中,每一个分笔并不是只有一笔成交,可能是几笔合成,深交所发布的数据有笔数信息,灰色数字就是该分笔数据中实际上包含多少笔成交 分笔成交明细和行情信息中有的成交量为紫色，是什么意思？ 表示是大单，缺省500手以上为大单，此值可以通过“系统设置”->“参数1”->现量高亮成交量来调整。 F2分价表中的竞买率是什么含义 竞买率表示在此价位上成交的量中，主动性买量占的比率。 广发证券V6版网上委托软件分时图成交量柱状线颜色的含义？ 当在系统设置中打开"分时图中成交量区间颜色显示"时,分时图中的成交量不再是单一的成交量颜色,而是有三种颜色：红色表示成交量是价格上涨过程中成交的；绿色表示成交量是价格下跌过程中成交的；白色表示是价格不变过程中成交的量 右上角行情信息区的证券名称前有G，L标识是什么意思？ G表示此股有股改信息，点击之可以看详细的对价和承诺信息。 L表示此股存在关联品种，比如有B股，可转债，H股或权证等等，点击之可以切换到相关的品种。 关于量比 量比是一个衡量相对成交量的指标，它是开市后每分钟的平均成交量与过去5 个交易日每分钟平均成交量之比。量比数值大于1，说明当日每分钟的平均成交量大于过去5个交易日的平均数值，成交放大；量比数值小于1，表明现在的成交比不上过去5日的平均水平，成交萎缩。

PCR实验室报批细节、注意事项、常见问题问答

报批细节 1、技术档案： 技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果（课题）、技术文章、获奖证书等的复印件 2、仪器档案： 实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等 实验室所有仪器维护校正记录如：加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件（可每种只校正一套作为标准）。 扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告，和校正后的参数。 加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。 5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值 3、其他细节: 垃圾处理：按生物污染性制品，交医院统一处理。 仪器简单操作流程 标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。 仪器的申请、采购、使用、验证程序 样本采集（针对临床医护人员）、运输、收集程序 样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本 标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本（原则上至少保留一周）应有专人负责。 检测结果的保存、备份记录、质控记录保存，除电脑记录外应有相应的手抄记录（类似于基因日检测统计表类型的）。 抱怨记录—应有时间、事件（项目）、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认

注意事项 1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致."写你所做的,做你所写的". 2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如"消毒时间一到两小时"不能这样写,多少就是多少. 3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外. 4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程. 5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用. 6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为) 7、所有仪器、设备都要有档案卡. 8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪，每天都要清洁，做完的反应管决对不能留在样品槽内。 9、各区的拖把、抹布不得混用,标记清楚. 10、生物防护意识要强,手套要随时更换.生物防护安全的保证要从三个方面:制 度、硬件、意识。 11、爆管如何处理:立即停止实验,水浴里的水要倒掉,冲洗.所有可能污染的地方 要用消毒液擦洗,紫外照射,通风排风. 12、各区应有日常工作核查表,做为每天工作记录的补充. 13、各区要有泡有消毒液的生物污物桶,用来处理生物垃圾. 14、验收组带来的标本要按平时对待临床标本一样处理,要有接收记录,结果登记 等. 15、拒绝电话或代领等非正常方式发放报告单. 16、存放标本的冰箱要上锁,钥匙及电脑资料的密码要由本科室人员专人保管. 17、报告单上要注明试剂的检测下限,不能写成参考范围.除了有操作者,还要有 核校者,且两者姓名除了电子打印还要用手签.定量结果不能有阴阳性提示,

系统管理操作过程中的常见问题

一、系统管理操作过程中的常见问题 问题1：初次登录系统管理，账套选项为空，提示无法登录。 原因：用户的计算机名与数据服务器名不一致。 解决方法：点击【开始】→【程序】→【用友ERP】→【系统服务】→【应用服务器配置】，将数据库服务器改为本台计算机名，重新登录即可。 问题2：建立账套时，账套号错误（如将400，录成了300） 解决方法：先在“系统管理”里输出账套，生成两个备份文件UFDATA.BAK和UfErpAct.Lst。用记事本方式打开文件UfErpAct.Lst，屏幕第三行显示的是账套信息“CACC_Id=300”，将300修改为400单击保存后，重新引入账套即可。 问题3：修改按钮为灰色。 原因分析：混淆了系统管理员与账套主管的权限，系统管理员的工作是建账、引入、输出、设置用户、角色、权限等。而账套的修改、账套的日常业务处理由账套主管完成。 解决方法：重注册，以账套主管的身份注册。 二、企业应用平台操作过程中的常见问题 问题1：在基础设置时，点击具体内容，如【客商信息】，系统无反应。 原因分析：建账时，未进行【系统启用】。 解决方法：进入【基础设置】→【基础信息】→【系统启用】进行设置，勾选需要启用的系统名称并设置启用时间。 问题2：无法增加客户或供应商分类。 原因分析：建账时忘了选择客户或供应商分类。 解决方法：以账套主管的身份进入系统管理，点击【账套】→【修改】→【基础信息】，在客户或供应商是否分类前的方框内打勾即可。 三、总账系统操作过程中的常见问题 （一）总账初始化 问题1：在录入【其他应收款】辅助账时，系统提示“个人非法”。 原因分析：【人员档案】的内容操作中，没有选中“是否业务员”复选框。 解决方法：进入【设置】→【基础档案】→【机构人员】→【人员档案】，选定“是否业务员”的复选框即可。 问题2：跨月发现总账的期初余额录入有误。 解决方法：对已经记账的凭证进行反记账（在对账界面，按CTRL+H键，弹出恢复记账前状态功能已被激活后进行反记账），使期初处于可修改状态。 （二）总账系统日常业务处理 问题1：保存凭证时出现“ 不满足借方必有条件”的提示。 原因分析：学生在制单时没有选择正确的凭证类别，如本应编制转账凭证的却选择了收款或付款凭证。 解决方法：选择正确的凭证类别保存即可。 问题2：出纳签字的时候，提示“没有符合条件的记录” 原因分析：（1）未给出纳人员赋予“出纳签字”的权限。 （2）没有把库存现金和银行存款科目设置为“日记账”。 （3）没有指定科目。 解决方法：（1）选择【系统管理】→【权限】→【权限】，给用户赋予“出纳签字”的权限。 （3）在会计科目设置窗口，进入“编辑――指定科目”，将现金科目指定为现金总账科目，银行存款科目指定为银行总账科目。 问题3：在制单时遇到应收（应付）账款科目时，系统提示“不能使用应收（或应付）系统的受控科目”。 原因分析：对会计科目进行维护的过程中，应收账款科目被定义为客户往来核算时，将其设置成应收款管理系统的受控科目，应付账款科目被定义为供应商往来核算时，将其设置成应付款管理系统的受控科目。 解决方法：进入会计科目修改窗口，将应收账款（或应付账款）系统修改为空即可。

实验室出现的日常问题及其解决办法

一文汇总实验室出现的日常问题及其解决办法 实验室出现的诸多小问题解决技巧汇总： 在酸性或碱性条件下做的反应，如果可能的话，产品后处理的时候，尽量中和一下。否则，产品放久之后可能会分解。 我们这儿用完重氮甲烷后，总会加点酸去破坏剩余的重氮甲烷。有位哥们胆子大直接用浓盐酸（应该用稀的盐酸或醋酸），结果和残余的碱剧烈放热，重氮甲烷的乙醚溶液呀~~~~就这样把他征服~~爆炸了！还有一位老师就是分液漏斗的塞子上没涂真空脂，一摩擦就把乙醚给烧起来了好恐怖呀。 大家用重氮甲烷时一定要千万注意，第一次最好有个有经验的人在旁指导，不要自己随便做，量也不要太大，亚硝基甲基脲最多25 克别贪多，要是需要量大就分几批去做。 夏天用乙醚的时候一定要注意。我今年8 月用乙醚萃取，只在分液漏斗里轻摇了一下，正要准备放气，炸了，还好没伤到我。我的产品阿！！！ 有一次我做分液萃取，先是用50ml HCl 洗涤有机相（含产品），然后再用50ml 5% NaHCO3 洗涤产品，结果振摇的时候，塞子被冲开了，产品全部喷出来了。原因是没有放气。 大家洗涤产品的时候一定要小心，如果洗涤会生成气体的话，一定要注意放气。 在有机所的五年，耳闻目睹了很多安全事故，深感多一份细心，多一份保障。现将我所知道的实验室里面的潜在危险总结如下：欢迎大家就自己知道的进行补充： 一、溶剂处理方面的潜在危险： A、溶剂无水处理前，一定要预处理 对于低沸点的溶剂，如乙醚，正戊烷等一定要先用干燥剂预先干燥，然后再加入钠丝进行回流，并且加热不能过快过高。因为，一旦溶剂里面的含水量过大，那么生成氢气很剧烈的话，溶剂极易冲出体系，然后遇见明火或正在加热的电阻丝，发生爆炸。这一点在有机所是有先例的，当时的惨状是，爆炸的冲击波从三楼冲到顶楼，把通风装置炸的粉碎。包括对面实验室的整扇窗都被推倒。 对于醚类溶剂，如果生产时间较长，或者久置不用的话，一定不要震动，同时要加入还原剂，除掉生成的过氧化合物。也是一个博士生，在处理久置不用的处理THF 的装置的时候，刚一拔磨口活塞，就发生爆炸，满脸血肉模糊。 用钠处理的溶剂和卤代烷溶剂处理装置不能公用一个与大气相连的装置。有些同学为省事或节约空间，把所有溶剂处理装置中保证与大气相通的装置相连，这样做的危险是很可能如果卤代烷，特别是二氯甲烷，加热的时候温度较高，无法冷凝下来，这样，有可能密度较大的卤代烷就会顺着相同的管道，进入用钠丝干燥的溶剂的体系。一旦出现这样的事情，肯定是爆炸。大家知道，卤代烷在金属钠的作用下的偶联反应非常剧烈。 B、废溶剂的处理，绝对不要发生酸性液体和碱性液体，氧化性液体和还原性液体的混装，这样非常危险。在有机所，废液桶爆炸不是一次两次。对于SOCl2, PCl5, PCl3 绝对不能未经处理就放入废液桶，后果也很危险。 二、实验操作方面的潜在危险： 1、对于加热、生成气体的反应，一定要小心不要成了封闭体系。 2、应该小心滴加、冷却的反应，一定要严格遵守，不要图省事。 3、反应前，一定要检查仪器有无裂痕。对于反应体系气压变化大的反应，大家一般都会注意。但是，有些问题就是在你想不到的时候出现。我在一次萃取的时候，量在2 升左右，发现分液漏斗有一个裂痕，以为没有问题。结果，在手中

实验操作中常见问题分析

由于ELISA(酶联免疫试验)具有灵敏度较高、特异性好的特点，已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个，但作为专业的洗板机生产厂家，我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意，就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象（就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常，而标本孔的OD值却明显偏高）是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下，以期给大家带来一些启发，以改善洗板机的安装调试水平，提高临床检测质量。 1 标本及采集、贮运因素 严重溶血，以HRP 为标记的ELISA 测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性；混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净；如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应；标本凝固不全，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染；塑料试管能吸附抗原物质，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。 血清标本宜在新鲜时检测，严重溶血标本禁用。一般说来，在5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需－20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存；最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管；并使用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关；EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性；血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。 2、试剂的影响 ELISA 诊断试剂经历了从合成肽向基因工程抗原的过渡。由于历史的原因，人们往往以反应本底的好坏来衡量ELISA 反应试剂盒，因此有些厂家为了保持较好的本底采用了单片段基因工程抗原及合成肽包被，该类试剂盒的流行病学敏感度不够，稳定性也成问题。也有厂家坚持试剂盒高的流行病学敏感度，科学地对待反应结果。基因工程抗原较合成肽抗原有无可比拟的优越性，就HCV-ELISA 试剂盒来讲，第一代产品为合成肽抗原，主要是HCV 特异性抗原决定簇的肽片段；第二代产品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽，只是当时的基因工程抗原不全，仅包括了HCV 的核心区片段；第三代产品基本上采用了基因工程抗原，而且这些抗原包括更多、更稳定、纯度更高的HCV 特异性抗原。第三代试剂的敏感度大大提高了。基因工程抗原与合成肽抗原的区别如下： 基因工程抗原是抗原基因在质粒载体中原核或真核表达的蛋白质抗原，多以大肠杆菌或酵母菌为表达系统。该类抗原与合成肽相比具有以下特点： a.分子量大。合成肽采用化学方法制备，由于工艺的局限，合成数量有限，只能达到数百个氨基酸；而利用基因工程制备的抗原，分子量更大。 b.稳定性好。包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证，早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只有3-4 个月，采用基因工程抗原后效期大大延长了。

股票常见问题与操作方法

通达信软件设计地一些解释 分笔成交中地"",""标记 "" 表示是主动性买单() "" 表示是主动性卖单() 无标记地表示是不明单,系统根据当时地叫买叫卖价无法得知是主动性买单还是卖单 分笔成交明细中地最右边地灰色数字表示地是什么？ 交易所发布地行情中,每一个分笔并不是只有一笔成交,可能是几笔合成,深交所发布地数据有笔数信息,灰色数字就是该分笔数据中实际上包含多少笔成交 分笔成交明细和行情信息中有地成交量为紫色，是什么意思？ 表示是大单，缺省手以上为大单，此值可以通过“系统设置”>“参数”>现量高亮成交量来调整. 分价表中地竞买率是什么含义 竞买率表示在此价位上成交地量中，主动性买量占地比率. 通达信分时图成交量柱状线颜色地含义? 当在系统设置中打开"分时图中成交量区间颜色显示"时,分时图中地成交量不再是单一地成交量颜色,而是有三种颜色：红色表示成交量是价格上涨过程中成交地；绿色表示成交量是价格下跌过程中成交地；白色表示是价格不变过程中成交地量

右上角行情信息区地证券名称前有，标识是什么意思？ 表示此股有股改信息，点击之可以看详细地对价和承诺信息. 表示此股存在关联品种，比如有股，可转债，股或权证等等，点击之可以切换到相关地品种. 关于量比 量比是一个衡量相对成交量地指标，它是开市后每分钟地平均成交量与过去个交易日每分钟平均成交量之比.量比数值大于，说明当日每分钟地平均成交量大于过去个交易日地平均数值，成交放大；量比数值小于，表明现在地成交比不上过去日地平均水平，成交萎缩. 在分时图中，按*键出现地量比图地含义： 若是突然出现放量，量比指标图会有一个向上突破，越陡说明放量越大；若出现缩量，量比指标会向下走. 通达信多空红绿军地解释: 在状态栏上有两个方格条,左边为沪市地多空条,右边为深市地多空条. 多空条分两部分: 向左是涨地股票比例(为红色,如果为深红,表示涨停部分), 向右是跌地股票比例(为绿色,如果为深绿,表示跌停部分) 方格条下面有种不同地符号在滚动: 红色向上地箭头:表示整个市场涨势在增加 红色向下地箭头:表示整个市场涨势在减弱

实验室常见岗位职责大全

实验室常见岗位职责大全 检测实验室有哪些岗位？这些岗位又有什么职责呢？13种实验室常见的岗位职责，但每个实验室情况不一样，此职责不必生搬硬套，仅参照使用。 1实验室主任 1.1 实验室主任为本公司最高管理组，负责贯彻执行国家有关的方针政策和贯彻执行CNAS-CL01（即《检测和校准实验室能力认可准则》）、《检验检测机构资质认定评审准则》及相关要求和持续改进管理体系有效性； 1.2 确立质量方针、质量目标，领导建立管理体系，为体系建立和运行提供资源保障，并确保管理体系在策划和实施变更时的完整性； 1.3 审批《质量手册》、《程序文件》等管理体系重要文件； 1.4 确定实验室的组织结构与人员配备，明确岗位职能分工，任命技术负责人和质量负责人，聘任专业技术人员和部门负责人，任命关键岗位人员，指定关键管理岗位的代理人； 1.5 规定岗位任职资格条件，确定人员技能发展目标； 1.6 在实验室内部建立适宜的沟通机制，并就确保与管理体系有效性的事宜进行沟通，充分发挥各职能部门的作用，协调各部门的工作； 1.7 负责设备配置，确保满足检测工作需要； 1.8 审批管理评审计划，主持管理评审会议； 1.9 最高管理者应将满足客户要求和法定要求的重要性传达到组织。

2.1 全面负责本公司技术工作管理，贯彻执行CNAS-CL01（即《检测和校准实验室能力认可准则》）、《检验检测机构资质认定评审准则》及相关要求和持续改进管理体系有效性； 2.2 负责本公司技术作业指导文件、技术记录表格、第三层文件的批准及相关体系文件的审核； 2.3 负责新开展项目的提出、论证审批工作； 2.4 组织有关人员解决检测活动中的技术问题，并保证资源的提供； 2.5 制定本公司员工年度培训、考核计划； 2.6 审批年度质量监控计划、参加能力验证计划与实验室间比对计划； 2.7 审批期间核查计划、方案、作业指导书及不确定度报告； 2.8 制订技术改造的措施和方案，并负责规划措施的论证和审定工作； 2.9 负责检验人员技术能力和水平及其资格的确认； 2.10 负责环境设施的配置、改造或维修报告的审批； 2.11 批准允许偏离的申请，批准仪器设备量值溯源计划，批准标准物质报废申请； 2.12 主持选择合格的分包方，审批分包方评审结论和合格分包方名册； 2.13 审核供应品和服务采购申请中的技术内容； 2.14 主持不符合工作的评价； 2.15 审批仪器设备周期检定、校准计划，确保量值溯源。

浅谈试验操作中的常见问题

浅谈试验操作中的常见问题 中交一局海外公司亚的斯公司（张君） 摘要：试验检测技术已经作为一门新的学科出现在现代工程建设中。不仅作为工程施工质量过程控制的技术手段，还作为对工程运营过程的使用性能的监测依据。通过分析试验监测技术中的常见问题，提高试验检测的技术水平。 关键词：试验检测；仪器设备；常见问题；影响 一、引言： 试验检测任务在工程建设项目中，始终贯穿于整个项目过程。包括项目前期的原材料的料源确定，品种规格的取舍，混合材料的配合比设计；项目实施过程中的质量检验控制，原材料的定期检验调校；项目后期的产品质量验收与评定。在整个试验过程中，对试验真值的取舍一直是困扰试验检测人员的关键问题。样品的不均匀性、不同试验设备的差异性、不同试验操作人员的主观操作性等，以及结果计算过程中，数位、数字的取舍与进位等。都是影响施工质量与进度的关键问题。 在以往的关于试验检测的教材中，大多对样品的不均匀性和结果计算过程中数字修约的问题着重的介绍与讲解。这里我就不再过多的探讨。在试验操作讲解中主要介绍一些相关的使用设备和大致的试验步骤。相对于刚刚接触试验检测工作的新人来讲，这样的介绍，只是在他们的头脑中形成了一个系统的、抽象的、模糊的概念。在实际的操作过程中，由于试验设备与教材中的差异，试验环境的改变，试验样品的多样化等不同的因素。常常会使年轻的试验检测员们遇到很多细小甚微的细节问题。困扰着新人对试验操作的标准化、规范化、合理化的认识。从而影响了试验结果的真实性和有效性。根据在以往的试验过程中遇到的细小问题，通过具体的实例反应出在今后的试验过程中试验检测人员应该注意的细节。 二、常见问题实例 2.1熟悉和掌握设备的性能及操作 作为一名合格的试验检测人员，进入试验室后首先要对今后工作的试验仪器有所了解。包括其性能，工作额定电压，试验量程等基本参数。在进行试验检测操作之前，要对试验设备进行简单的检查和开机试运行。当确认试验设备运转正常之后再进行正式的试验操作。 2.2天平的正确使用习惯 常规试验中最长应用的设备应属天平。在现代试验室中大多数天平都采用了电子天平。其使用简单，读数便捷快速，大大地提升了试验检测的效率。电子天平的方便快捷给试验检测的技术进步提供了长足的发展，但是往往在其使用过程中，出现纰漏，误操作或是野蛮操作的问题。降低了一起设备的使用寿命，也对试验数据的真实有效性产生了影响。早期的电子天平大多为三角螺旋调节天平的水平，外置圆水准泡。新近出产的电子天平多为四角螺旋，更有利于天平的调节。在天平的使用过程中，往往使用者经常忽略水准螺旋的调节，也不愿意检查水准气泡是否居中。拿来样品就直接放在天平上称量，对于精度要求不高的试验项目，这样的称量方法对结果的影响不会产生很大的影响，但相对于称量精度高的试验

临床试验中经常遇到的100个问题

中国创新药咨询与服务先锋CRO 临床试验中经常遇到的100个问题

目录 1、什么是 GCP？ (1) 2、为什么会有 GCP？GCP 是如何发展的？ (1) 3、什么是 ICH？目的是什么？ (1) 4、ICH GCP 是如何定义的？ (2) 5、中国是否有 GCP？包括哪些内容？ (2) 6、实施 GCP 的利弊有哪些？ (2) 7、哪些人应了解 GCP？ (3) 8、什么是“赫尔辛基宣言”？ (3) 9、什么是伦理委员会？它是如何组成及运作的？ (3) 10、需要呈送伦理委员会的文件有哪些？ (4) 11、什么是临床试验方案？其目的是什么？ (4) 12、什么是研究者手册？研究者手册包括哪些内容？ (4) 13、谁是合格的研究者？ (5) 14、为什么研究者要保证用于临床试验的时间？ (5) 15、试验中心的人员及设备符合试验要求吗？ (5) 16、申办者是否要为参加试验的受试者上保险或在发生试验用药品相关的损害时给予赔偿？ (5) 17、GCP 对参加试验的研究者有哪些要求？ (5) 18、什么是受试者知情同意？如何获得受试者知情同意书？ (6) 19、是否允许先做常规校查，再获知情同意？ (6) 20、试验组以外的人员是否可以参加本应由该试验组实施的临床试验？ (6) 21、什么是受试者入组/筛选表？ (6) 22、什么是病例报告表？如何填写病例报告表？如何更正病例报告表中的错误？ (6) 23、什么是不良事件？ (7) 24、什么是严重不良事件？ (7) 25、如何收集不良事件？ (7) 26、如何报告严重不良事件？ (8) 27、试验中对试验用药品应如何管理？(何时才允许将试验用药品发送至医院？) (8) 28、对试验用药品的标签有何规定？ (8) 29、什么是盲法试验？ (8) 30、什么是紧急破盲表？破盲表应如何保存？在什么情况下允许破盲？ (9) 31、谁应负责试验的统计分析？ (9) 32、谁应负责撰写试验总结报告？ (9) 33、什么是稽查？稽查员的职责是什么 (9) 34、常见的稽查对象是谁？ (9) 35、什么是视察？ (9) 36、什么是 SOP？ (10) 37、在临床试验中如何尊重受试者的隐私权？ (10) 38、在临床试验中如何保护受试者？ (10) 39、如果不能找到合格的受试者应该怎么办？ (11) 40、谁负责获得受试者知情同意书？ (11) 41、可否在试验过程中更改知情同意书的内容？ (11) 42、如何对试验用药品计数？ (11) 43、为什么回收使用过的试验用药品包装非常重要？ (12) 44、研究者从何处可以获得有关试验用药品的信息？ (12) 45、试验方案的目的是什么？ (12)

ACCUMARK常见操作问题与解决方法

ACCUMARK 常见问题与解决方法

目录 一资源管理器 1-1ACCUMARK资源管理器打不开，但是其他的模块都能打开。（P2） 1-2ACCUMARK资源管理器里的储存区出错，不能打开和保存排版图或样片。（P2） 1-3 ACCUMARK资源管理器中储存区被上锁，不能打开。（P3） 1-4 ACCUMARK资源管理器中的工具栏无法显示出来。（P3） 二读图板 2-1 读图板的图标丢失（P4） 2-2 读图完成后，读图板文件夹中没有样片。（P4） 2-3 在资源管理器中的读图板中有一些资料无法删除，也无法核对。（P5） 2-4读图板的图标丢失（P6） 2-5读图途中出现游标器没法响应或读图完成后，读图板文件夹中没有样片（P6） 三绘图 3-1绘制排版图或者样片时，提交错误。绘图机不能绘图，不能连接。（P7） 3-2在打开INFINITY型号绘图机时，在INFINITY绘图机屏幕上出现以下错误：“013 FAILED ATTEMPT TO CLOSE ESTCP LOOK。”（P8） 3-3如何设置网络绘图机。（P8） 3-4发生绘图机列序中的工作无法删除。（P10） 四资料的转换 4-1如何打开后缀名为TMP的文件。（GERBER生成的ZIP文件解压后的文件后缀名是TMP格式）（P11） 4-2如何打开AAMA格式的DXF文件。（P13） 4-3如何打开AUTOCAD格式的DXF文件。（P14） 4-4如何打开TIIP格式的DXF文件（P15） 4-5如何打开HPGL文件。（P15） 4-6如何绘制HPGL文件。（P16） 4-7在转换力克软件导出的DXF文件时，出现放缩规则大于9999的错误提示。（P17）4-8如何打开后缀名为MDL的文件，（MDL文件是力克CAD的款式文件）（P18） 4-9如何将排版图导出成HPGL绘图文件。（P19） 4-10经样片转换向导转换出来的样片大小不对（P21） 4-11如何打开力克的PLX文件（P22） 五排版 5-1排版系统中无法显示排版图资料栏（P24） 六样片 6-1样片设计中图象单的字体大小设置（P26）

实验室认可常见问题

实验室认可常见问题 一、关于认可规则 1. 某实验室工作人员以CNAS-RL01第10.1.1条“变更通知”中“c）认可范围内的检测/校准依据……工作范围……发生重大改变；”为依据，认为校准能力的扩大属于变更，而不是扩项。为种说法是否正确？应如何解释？ 【答】这种说法不正确。CNAS-RL01第10.1.1条所述变更，是指认可范围内的变化，校准能力扩大，扩大部分不在认可范围内，所以不能按变更处理，应按扩大认可范围（简称扩项）处理。 二、关于CNAS-CL10 1．CL10中规定的技术管理者不具备，是否此领域不予认可？ 【答】是，化学领域不予认可。 2．CNAS-CL10中的“注”与正文是否有等同作用？ 【答】CL10中的“注”是对正文的解释，或举例。 3．CL10在定期使用中间点的校准标样检查校准曲线会造成误导实验室以为制作一条校准曲线只要满足上述要求可长期使用，不正确使用方法！不符合分析化学基本要求！如何处理？ 【答】CNAS认可的实验室，有境内实验室，也有境外实验室，CL10规定的是最低要求，也是采用国际上的通用规则。如果相应国家标准中有明确规定的，实验室应执行国家标准。 4．申请的化学领域的授权签字人如都达不到CL10要求怎么办？是否可以推荐了其化学技术能力，但没有推荐化学领域的授权签字人？ 【答】如果实验室某个领域没有符合要求的授权签字人，则该领域的能力不予认可。 5．CNAS-CL10:2012 5.2.1条款要求实验室从事化学检测的人员具有化学或相关专业专科以上的学历，或者具有10年以上化学检测工作经历,该条款在某些实验室的化学检测人员的工作年限会达不到，能否有个比例，使没有相关专业专科以上学历而从事化学检测的人员，通过学习、培训取得上岗证，在工作中学习积累工作经验和工作年限。如评审中出现该不符合项，实验室除招有资质的人员难于整改。如招不到符合条件的人员，该不符合项关闭不了，评审组难于限制化学检测能力。 【答】此条款是强制性要求，比例是100%。对于人员不能满足要求，或相关不符合项不能在规定时间内完成整改的，则相应项目不予认可。此类不符合项的整改验收，应安排现场跟踪验证，包括安排现场试验。

实验中可能出现的常见问题与解决办法

实验中可能出现的常见问题与解决办法 一．污染 污染是指由于微生物的侵染，在组织培养容器中滋生大量菌斑，使组培材料不能正常生长和发育的现象，主要有以下5方面的原因： 1.器具灭菌：实验的所有器具都要在121°C消毒25min，若灭菌温度不够 或者时间不足，都会导致污染。灭菌时要求冷空气完全排除，否则会达不到指定温度。其次，要做好灭菌登记，杜绝出现人为失误造成的污染。此外，在接种过程中，每用一次都要在火焰上彻底灼烧，特别在接触到污染物时极易引起器具污染。 2.外植体：很多材料在灭菌后其实还是带菌的，不过量比较少，短期应该 观察不到被感染的现象。 3.接种操作：首先，接种人员的手，手腕要用酒精棉球好好擦拭。其次， 对于放置在外的培养物（灭菌好的培养基）其瓶子外壁上有灰尘与微生物，放入超净台前可以用酒精消毒一下。再者，很容易出现瓶口的污染，所以接种人员的技术要娴熟，干练。 4.环境条件：加强环境的灭菌消毒。若有污染的材料不可以就地清洗，必 须高压杀菌后再清洗，否则会导致大量孢子弥漫。此外，要及时打扫卫生，定期蒸熏消毒。保证环境的干净。 5.超净工作台：要定期对初过滤器进行清洗和更换。此外，每次使用前要 提前20min打开机器预处理，并对台面进行酒精喷雾消毒。 二．材料死亡 实验过程中，很可能出现材料死亡，主要有以下几个方面： 1.外植体灭菌过度：一旦材料太小或灭菌时间太长，剂量太大，就会导致 材料死亡，所以要严格控制时间。 2.污染：大量污染会造成材料死亡。 3.培养基配置出现问题：在激素配置或营养成分配置出现问题时，材料易 死亡，常常发生在无生长点的材料和愈伤组织中。 4.培养环境的恶化：温度过高，透气不好，培养过于密集，久不转移，有

临床研究中的常见问题

课题负责人主要临床研究者地职责 准备研究方案 确定和需要记录问题地设计 提出统计分析要求 定期访问个参加试验地分中心，监督研究进展 对研究过程中遇到地问题作出决断 对治疗过程中出现地严重不良反应作出评估和处理 负责撰写研究总结 统计专业人员地职责 完成研究方案中地统计设计：试验地类型；对象例数计算；随机化方法 参与准备研究方案 负责参与设计和问题表、准备填写说明，参与讨论判断数据有效性地说明和定义撰写统计分析计划 写出统计分析报告 参与撰写临床总结和论文（数据部分为主） 三、程序分析员地职责 参与地设计 设计数据管理计算机系统 编制以及与数据管理、数据检查有关地计算机程序 根据统计人员要求编制数据分析地计算机程序 试验结束后将上述管理系统整理归档 四、数据管理助理地职责 负责与各分中心地联系 参与设计 数据地收集和目视检查 设计并填写对象登记表 准备数据批供录入人员输入计算机 准备研究进展报告 数据检查和清理 为研究人员会议准备材料 五、数据录码员地职责 将上地数据输入计算机 核对数据输入无误：第二次输入 及时将输入过程中发现地问题通报数据管理助理和程序分析员 六、临床试验中地质量管理环节 中央实验室 数据地获取和报告 [远程]数据输入() 病例记录表系统 临床数据管理 不良事件报告 临床供给系统 统计分析系统 七、病例记录表（）地组成

封页 主要研究人员对数据认可签字表 筛选表 接纳表 随访表：每次随访一次 伴随用药记录 不良事件记录表 终止表 研究后表（安全性评价） 临床研究中地常见问题 临床研究资料保存不完整 原始资料不原始或没有原始数据（如何保存） 没有监查和稽查记录 不能严格执行，或者没有 不能严格执行知情同意 药品管理不规范 不采用中心实验室（中心实验室质控达不到要求） 资料保存（一） 每一项临床试验都要有完整地记录，并按一定顺序排列.其中包括： 新药临床研究批件； 药检验报告（试验药物和对照药物）；注意：临床研究用药应是在符合要求地条件下生产，应由申办方提供有关证明资料个人收集整理，勿做商业用途 临床研究合同 伦理批件 资料保存（二） 研究者手册 研究者分工表 试验方案（应有研究者和申办方签字确认，版本号）； 受试者知情同意书（一份应交给受试者自己保留）；注意：在今后地临床研究中，最好建立一有受试者签名地领走知情同意书副本地记录.资料个人收集整理，勿做商业用途 病例观察表（包括有不良事件记录、合用药记录等）； 总结报告 原始数据 没有原始数据 原始数据丢失 修改在原始数据上找不到依据 接受检查时“补充”原始数据 监查和稽查 无稽查 有监查无记录 有记录不保存 从别处抄来地 对没有系统培训

工地试验室常见问题

工地试验室检查中常见的78个问题 2016-01-08陈海东 作者陈海东本站原创，禁止转载 陈海东，监理检测网试验检测公益讲师。男1969年4月出生；江苏盐城人。盐城路桥建设工程有限公司中心试验室主任。 我们公路工程施工，目前第三方检测还没全面普及，特别是施工方、监理方，中标后成立试验室，这个工地试验室的性质隶属于中标单位自己。所有的检测是自检，自己建的试验室在很大的程度上要为各自己的利益说话了。当然业主现在一般是第三方检测了。加强工地试验室的管理就显得非常必要。 总结了两个方面78点，欢迎大家到监理检测网论坛中交流。 内业资料 1、工地试验室是由母体试验室授权的。工地试验室主任是由母体试验室任命的。 2、工地试验室有没有经过省厅、市局的质监部的备案。备案有没有过期 3、现场的试验人员与备案上的人员有没有变化，变化率为多大，有没有经过审批。 4、工地上的试验人员是否是母体公司注册人员。很多试验人员的证书不注册，就放在自己身上。江苏已在治理这些事。 5、作为母体的试验室，有没有对工地试验室进行监管检查，检查的记录如何。 6、试验室的仪器设备与投标书是否相符，能否达到工程检测的要求。 7、工地试验室不能检测的试验，外委什么单位做，有没有相关单位的资质、合同。监理检测网 8、上墙的制度要加盖受控章。 9、高速公路的持证试验人员，一个亿要有5~6个，二个亿要有9~10个。挂证也算啊。师证要全啊，路材桥全要。不然根本完不成大量的试验检测任务。相当还要辅助人员。 10、挂证人员的签字和资料的上签字核对一下笔迹就能发现问题。 11、台帐和试验记录要一致。 12、一个试验人员，同一天不可能做很多事，不能到处签字。 13、同一次的几个试验数理雷同太厉害。

实验记录常见问题汇总1

实验记录常见问题 1、实验室记录分为哪两大类？ 质量控制记录、技术记录。 2、记录可以是哪些格式？ 记录可以是文字、表格、图片、视频、音频等格式。必须保存纸质原始记录和电子记录。 3、您实验室的记录由谁保管？该岗位人员是否需要授权？ 1、根据实验室内部规定，无强制规定。 2、未强制规定授权，实验室可自行决定是否授权。 4、记录保管员应接受哪些培训？ 1.实验室体系文件培训（重点强调保密性、记录保存和借阅相关内容）； 2.岗位职责和权利； 3.安全相关内容，包括灭火器的选择和实际操作； 4.相关记录的填写。 5、是否需要设置专门的资料室存放记录？ 没有文件规定必须要有资料室。可设置专门的资料室，也可共用。但是都要满足存放条件。建议实验室设置专门的房间存放文件和记录。 6、记录的存放环境有哪些要求？ 存放环境应防火、防水、防盗、防鼠、防震、防日晒、防虫蛀、防霉、防磁； 1.防火：应远离火源，配备干粉或二氧化碳灭火器； 2.防水：资料存放柜附近不应有水，楼上不应该是容易漏水的房间；

3.防盗：资料柜应有锁，钥匙专人保管； 4.防鼠：文件柜应能承受鼠类啃咬，必要时放置灭鼠装置； 7、记录更改有哪些注意事项？ 1.禁止涂改，修改后能可识别修改前的内容； 2.应可识别修改的人员，注明修改日期； 3.必要时注明修改的原因； 4.仅记录人和授权人员可更改记录，未经授权不可改别人的记录； 5.电子记录的修改应满足以上要求； 6.若记录不具备划改的条件，可换一张记录表写明，保留原来的记录； 7.报告若有错误，不可划改，应重新编辑、打印（报告没发出去，审核时发现错误，就从新打印，旧报告无需保存。如果是已经发出去的报告，需要更改，那就得保存原报告，注明新报告是对原报告的替代，原报告作废）。 8、电子记录有哪些注意事项？ 1.加密，加权限； 2.定期备份，备份的记录应存放在不同位置/服务器； 3.定期检查； 4.尽量使用图片或PDF，避免使用word、excel、txt等易修改的格式； 5.电子记录的修改应满足记录修改相关所有的要求。 9、如何确保记录在满足保密性的前提下易于获得？您实验室是怎么做的？ 纸质记录：专人保管，批准查阅； 电子记录：设置权限，实时更新权限。

学籍系统常见问题整理与操作方法

1．学生信息维护只看到学校名称看不到班级怎么办？ 学籍权限设置，进行权限委派，角色委派,选择学籍老师，勾选帐号，保存， 2．批量调班怎么办？ 日常管理，调班分班 学生导入分班，把模板下载下来，然后填写，注意在班级填写时，最好采用这种方法，进入信息设置——年级班级设置，选择要填写的班级点击进入后，复制班级名称 如图： 3．学生信息要修改怎么办？ 学校端： 分两种情况： 第一种学生管理，学生信息维护：除姓名、身份证号等关键字段之外的信息，可以通过这里修改，直接点到某班、某人，进行修改，保存即可。 第二种：学生管理，学生修改申请：修改姓名、身份证号等关键字段，需要通过：学生管理---》学生修改申请，学校操作完了，要提交教育局审核，审核完毕，自动更新。 教育局端： 学生信息修改，直接通过：学生业务---》学生信息维护，修改保存即可。 4．家庭信息要修改怎么办？ 学生管理，学生信息维护，选择一个学生，然后点击家庭信息

如图： 5．异动申请对方不同意怎么办？ 日常管理，异动管理，异动申请，审核未通过中的学生，删除，重新操作异动 6．操作异动时提示异动中怎么办？ 查看异动申请审核中，该生是否操作了异动，操作过异动的学生本次异动流程未完成是不能进行再次异动的 查看异动申请审核未通过中，是否有该生异动。 7．部份学校学生照片采集时，相框不显示，怎么办？ 打开ie进入internet选项，安全，受信任的站点，站点，先去掉https验证，再添加http://222.177.23.154保存，选择默认级别，把级别降到最低。点击自定义级别，把所有的activex控件开启保存，关闭ie重新打开，登陆系统 区县 8．异动错误如何处理（即异动纠错功能）？ 异动业务，异动审核，审核结果中可删除异动记录 在"审核结果"中增加"删除"功能，区县教委具有删除选定异动记录的功能（以防止误操作异动后，可以经过反向操作回学生，同时可以删除误操作的异动记录）。 如操作降级，再操作跳级，再操作删除异动记录 9．异动后结果在哪里找？ 异动业务，异动审核，审核结果 本区县内异动，教委审核后直接进入相应的学生。 非本区县内异动，审核后先进入审核通过中，可查看到进度 10．异动后的统计结果在哪里看？导出异动的花名册在哪里导

Elisa常见类型及实验标准操作方法与常见问题

Elisa常见类型及实验标准操作方法与常见问题 酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种实验室常用的检测方法，广泛应用于测量溶液中的分析物（抗体或抗原）的浓度。与其他基于抗体的检测方法不同的是，酶联免疫吸附试验或酶免疫测定（EIA）通过与固相支持物的结合和系列洗涤步骤，实现特异性和非特异性相互作用的分离，并可通过最终有色产物的形成，定量分析原始样品中分析物的含量。 ELISA 实验通常以细胞培养上清液、血清、血浆以及组织裂解物等为样品。该实验必备三种试剂：固相的抗原或抗体；酶标记的抗原或抗体；酶作用的底物。根据样品的性质、检测的实验条件、试剂的来源，可设计出不同类型的ELISA 检测方法。 该实验可迅速分析大量平行样品，在基础研究和临床诊断实践中广泛使用。 一、直接ELISA 原理：将抗原与固相载体连接，洗涤除去未结合的抗原及杂质。加酶标抗体进行孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。加底物反应。直接法主要用于测定抗原。 优点：操作流程简短，实验步骤少；无需使用二抗，避免了交叉反应；实验步骤少，操作不易出错。 缺点：实验中的一抗需要直接用酶标记，成本相对较高。 二、间接法ELISA

原理：将抗原与固相载体相连结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入特异性一抗与固相抗原相结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，加酶标二抗。固相免疫复合物中的抗体与酶标二抗结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，加底物显色。 优点：酶标二抗可加强信号，提高灵敏度；灵活性更大，同一酶标二抗可应用于多种不同的一抗；不直标一抗，可保留更多的免疫反应性；成本更低，使用标记抗体更少。 缺点：交叉反应几率升高。 三、双抗夹心法ELISA 原理：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子，但不适用于小分子抗原。将特异性抗体（捕获抗体）与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品，保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体（检测抗体）保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。 双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似，用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。