hiv1病毒载量测定及质量保证指南

病毒载量测定及质量保证指南

（版）

中国疾病预防控制中心

年月

前言

随着病毒载量检测在艾滋病临床辅助诊断、抗病毒治疗监测及相关科研工作中的广泛应用，我国开展该项检测工作的实验室日益增多。自年艾滋病实验室首次引进病毒载量检测技术以来，截至年底全国已经配备台病毒载量检测仪，覆盖疾控、医院、检疫、军队等系统，艾滋病流行重点地区及少数县级实验室均已配备病毒载量检测仪，每年检测量已达万人份以上。由于病毒载量检测质量对艾滋病的早期诊断及治疗有重要影响，因此急需加强该领域的培训和质量控制，规范实验室操作，以保证检测结果的准确性和可靠性。

自年开始实施《病毒载量测定及质量保证指南》（试行，以下简称《指南》）以来，参与病毒载量能力验证工作的实验室从年的家增加到年的家，占已开展工作实验室的百分之九十以上。通过综合分析近几年能力验证发现的问题与检测技术发展的实际情况，考虑各种试剂的检测要求，结合专家意见和一线实验室工作人员的经验与需求，对本指南进行了适当修改、调整和补充，主要修改内容包括：（）增加“人员要求”章节；（）修改“常用病毒载量检测方法”；（）修改“病毒载量检测能力验证（）”；（）补充常见问题分析和处理等内容。

修订后的《指南》共分八章，包括：总则，人员要求，实验室环境与设施，样品的采集、处理保存运输，常用检测方法简介，室内质量控制，实验室检测能力验证（），实验室生物安全，以及四个附表。

本指南在修改过程中，接纳了国内专家、同行的意见和建议，经过多次修改编写成《指南》（）版。本指南由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心艾滋病参比实验室组织有关专家撰写，由中国疾病预防控制中心批准执行，并在病毒载量检测实验室网络内发布实施。

由于国内各实验室条件不同，不能采纳所有实验室的建议，因此本指南主要提出一些原则上的参考建议，其中定有不妥之处，希望广大同仁提出意见，以便不断完善。

本指南在年颁布的《指南》（试行）的基础上修订，在此对编写试行版过程中给予帮助的国际组织和专家表示感谢。对本次修订过程中提出建议的全国病毒载量检测实验室基层工作人员表示衷心的感谢。

本指南的解释权属于中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心。

本指南编写主持人：蒋岩

本指南编写人员：潘品良蒋岩李敬云钟平尚红李太生李繁

本指南审核咨询专家及技术人员：邵一鸣汪宁王佑春郭志宏肖瑶邱茂

锋邢文革姚均朱红秦光明徐建青本指南编写联系人：潘品良

本指南适用于全国病毒载量检测实验室

本指南编写单位：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心

本指南自发布之日实施，同时终止年颁布的《病毒载量测定及质量保证指南》（试行）。

病毒载量测定及质量保证指南

目录

第一章总则

第二章人员要求

第三章实验室环境与设施

第四章样品的采集、处理、保存、运输

第五章常用检测方法简介

第六章室内质量控制

第七章实验室检测能力验证（）

第八章实验室生物安全

附表常见问题分析和处理

附表病毒载量检测样品送检及接收单

附表病毒载量检测能力验证样品接收专用单

附表病毒载量检测报告单

参考文献

缩略语

第一章总则

意义

病毒载量是指每毫升血浆中病毒颗粒的数量，是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标。病毒载量检测主要用于抗病毒治疗监测，包括治疗时机判定、治疗效果评估、耐药预警；还可用于感染的辅助诊断，包括窗口期、病程晚期、婴儿感染、疑难样本等的诊断；也可用于血液筛查。为了保证检测结果的准确性和可靠性，必须对开展病毒载量检测的实验室进行规范化管理和质量控制。

目的

指导病毒载量检测工作，规范实验室质量控制与管理。

适用范围

适用于我国开展病毒载量检测工作的所有实验室。

第二章人员要求

病毒载量检测人员分为检验人、复核人、签发人。

培训

实验室在使用新方法前，须对技术人员进行上岗培训，获得资格后方可开展相应工作。上岗培训内容至少应包括：检测相关基础知识，病毒载量检测技术及管理要求，实验操作，质量保证与质量控制，生物安全。

检验人

进行病毒载量检测的人员须具有艾滋病检测实验室的上岗资格，接受过省级以上的实验操作技术及艾滋病实验室生物安全培训及厂家的技术操作培训。所有相关检验人员需经公司工程师操作培训，能独立熟练地操作，并经考核合格，持证上岗。

复核人、签发人

应具备对检测过程进行分析、解决问题的能力。复核人负责对原始数据查阅、结果核对，签发人核实结果正确后对外签发报告。

第三章实验室环境与设施

除了病毒载量检测仪器，合理地、充分地配备实验室环境、设施、辅助设备是保证病毒载量检测质量的重要方面。

实验室环境

病毒载量实验室应符合分子生物学实验室基本要求，包括试剂准备区、样品处理区、扩增产物分析区。实验室设置总体原则为各区独立、控制风向、因地制宜、方便工作。具体要求：

各区必须是相互独立的，有条件各区内可分别设置缓冲间，以保证不同区之间完全分隔开。

各区的仪器设备与各种物品必须为专用，避免交叉污染。

试剂准备区和样品处理区内须保持低度正压（或常压）状态，使空气流向始终由室内向外，以避免扩增污染物进入此区域。

扩增产物分析区内须保持低度负压状态，使空气流向始终由室外向内，以防止扩增产物通过气溶胶流出，造成与其他区域的交叉污染。实验室可安装排风扇或其他排风装置。

扩增产物分析区可以设在远离其他各区的地方。

工作时必须遵循单一工作流向，即只能从试剂准备区开始，到样品处理区，然后到扩增产物分析区。

实验室设施

各种病毒载量检测方法除病毒载量检测仪外，还需要配备相应的辅助设备才能完成检测。病毒载量检测实验室设备分布示意图提供为病毒载量检测实验室不同区内必备的辅助设备及耗材。辅助设备应根据不同检测方法作相应变化。样品处理区：

生物安全柜：二级

离心机（，适合离心管）

冰箱：℃，℃，℃以下

水浴箱：误差范围小于℃

加样器套（μ、μ、μ）

带滤芯的一次性吸头（无和酶），离心管（无和酶）及相应试管架

计时器

旋涡振荡器：震动频率可调

一次性工作服、帽、口罩、无粉手套和鞋套

试剂准备区：

超净工作台（或密闭工作台）

加样器套（μ、μ、μ）

离心机（，适合离心管）

冰箱：℃，℃

计时器

旋涡振荡器，震动频率可调

带滤芯的一次性吸头（无、酶）

离心管（无和酶）及相应试管架

一次性工作服、帽、口罩、无粉手套、鞋套扩增产物分析区：

病毒载量检测仪

加样器套（μ、μ、μ）

冰箱：℃，℃

旋涡振荡器，震动频率可调

一次性工作服、帽、口罩、无粉手套和鞋套带滤芯的一次性吸头（无、酶）

第四章样品的采集、处理、保存和运输

样品的采集、处理、保存和运输要求保证满足不同病毒载量检测方法对样品性质的，并保证生物安全。因此需按照所使用检测方法的要求严格执行抗凝、分样时间、运输包装、保存温度、冻融记录。用于病毒载量检测的样品须采用抗凝血浆。

样品的采集

4.1.1采样器材：一次性抗凝真空采血管、持针器、蝶形针等。

4.1.2抗凝剂：通常采用（乙二胺四乙酸）或（枸橼酸钠），须符合不同检测方法对样品的要求。

4.1.3样品标识：在采血管上贴唯一性样品编号。

4.1.4样品采集量：通常采集全血, 采集的样品量应与定量采血管的刻度要求一致，避免血液凝固或稀释。

4.1.5样品混匀：采集血液后，立即轻轻上下颠倒抗凝管次，使血液与抗凝剂充分混匀。

4.1.6其它信息：病毒载量检测样品送检及接收单（附表）的备注栏内需注明采集对象的基本信息和流行病学资料、抗病毒药物使用情况、最近一次的实验室病毒载量检测结果。

样品的处理

要求在采血后小时内离心样品，室温下使用离心力为（）离心分钟后，吸出血浆,分装到无菌的聚丙烯螺口冻存管中，并注明分装时间，冻存管应提前贴上耐冻的样品编号标签。

血浆样品不能灭活。

做好样品处理记录，包括冰箱温度变化、样品存取。

样品的保存

保存条件：根据血浆检测时间而定，天内可在℃暂时保存，个月内应冻存于℃以下，个月以上应置于℃以下。不能使用自动除霜冰箱。

血浆样品冻融不应超过次。

监控并记录保存温度以及样品状态的变化。

防止样品变质、泄漏及污染。

样品的运输

根据《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求运输，并严格控制运输的冷冻状态，避免样品融化。

样品的发送和接收

发送样品时,需详细填写样品病毒载量检测样品送检及接收单（附表）。

接收样品时，按病毒载量检测样品送检及接收单（附表）核对样品数量，检查样品状况。

样品管破损造成样品溢出、出现明显溶血、凝血的样品，不宜作病毒载量检测；如果样品已经融化，可以℃保存并尽快检测，记录冻融一次。

第五章常用检测方法简介

病毒载量检测根据方法的原理不同，分为不同系列仪器，目前常用的病毒载量的测定方法有：核酸序列依赖性扩增() 技术，代表产品为实时荧光技术仪；分枝信号放大系统（）技术，代表产品为分析仪；实时荧光定量扩增技术（），包括检测系统、检测仪与国产试剂盒均属此类技术。

．核酸序列依赖性扩增()技术

最早产品为定量测定方法，已经被新一代实时分子信标定量扩增所取代。所采用的技术是一种等温扩增系统，其扩增基础在于系统内的混合酶系统，此系统内含有逆转录酶和多聚酶在体外模拟逆转录病毒体内复制过程。

结合技术、核酸提纯技术与分子信标探针技术（）检测血浆中的水平。这种结合方法使用实时扩增分析（），提高对诊断质量的要求。此方法可分为三个步骤：核酸提取、扩增和等温检测。的检测是利用靶特异的分子信标进行，分子信标的寡核苷酸片段包含一段可特异结合靶的序列。当互补链不存在时，分子信标维持内部发夹结构，使猝灭基团处于非常接近荧光素的位置，荧光信号被猝灭。当分子信标与互补靶序列结合，发夹打开释放荧光信号，报告靶序列的存在。使用两个不同的分子信标，一个是针对野毒株的扩增子，另一个针对内标物()的扩增子，各使用不同荧光染料(野毒株使用，内标物使用)，从而实现靶序列和内标物两个扩增过程的各自跟踪。荧光信号的动力学分析可以显示野毒株和内标物的转录速率，因此可以计算出原样本中含量。

．分枝（）技术

分枝测定技术基于其独特的信号放大系统，即分枝信号放大系统，为一个人工合成的分枝，分枝的分枝可结合多个酶标记物，从而将病毒的信号放大，以便进行检测。此检测系统不涉及核酸扩增反应。方法定量系统中没有内标记物，每次实验设置一系列外部标记，通过实验样品反应强度与外部标记样品强度的比较确定待检样品的病毒拷贝数。

检测通常包括以下步骤：（）将患者血清或血浆连同含有特异的合成寡聚核苷酸靶探针的裂解液加到微孔中；（）孵育，释放病毒核酸，降解酶或使变性, 然后靶探针结合到靶或并固定在固相板上；（）冷却洗板；（）加信号放大探针()到各孔内；（）孵育，使杂交到靶探针的相应部位；（）冷却洗板；（）加标记探

针到各孔内；（）孵育，使酶标记的探针杂交到上；（）冷却洗板；（）加化学发光底物到各孔中；（）孵育，酶和底物相互作用，产生化学发光信号。发射的光强以相对光量值()表示。产生的光强直接与各样品中病毒或的拷贝数成正比。各样品中病毒核酸的含量由与样品一同处理的标准所制作的标准曲线计算获得。

病毒载量检测仪较在孵育、冲洗和加样步骤由手动操作转变为自动化，减少污染，更便于操作节省实验时间。

．实时（）荧光定量扩增

实时荧光定量技术，是指在反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代表值）。因此，只要获得未知样品的值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

实时荧光定量扩增的实验检测过程可分为：（）样品制备,抽提和浓缩目标分子，并除去可能存在的抑制因子。（），检测的产物使用荧光标记的寡核苷酸探针。检测的原理基于荧光信号增长曲线与循环数相关。（）反应，病毒利用逆转录酶将逆转录为，然后通过聚合酶对特定片段进行扩增。（）扩增产物的检测，基于检测阈值的设定，当病毒载量高时，低循环数即能检测到荧光信号，当病毒载量低时，高循环数时才能检测到荧光。循环数与样品病毒载量成线性关系。利用标准品制作循环数与病毒载量的标准曲线就能对样品病毒载量进行定量检测。

目前此原理已为多种病毒载量检测的的主要方法，包括检测系统、检测仪和国内产品凯杰、达安以及正研制的定量检测试剂均属于该技术。检测系统是全自动化的实时荧光定量病毒载量平台, 具有样品进结果出(, ) 的特点。此方法的检测过程为：装待测样品、放试剂和耗材、核酸提取、反应体系制备、实时荧光定量。荧光定量技术是以荧光探针为基础，荧光探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个荧光发射基团和一个荧光淬灭基团。探针完整时，发射基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；扩增时，酶的’－’外切酶活性将探针酶切降解，使荧光发射基团和荧光淬灭基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与产物形成完全

同步，从而实现定量。

利用法，在开始制备样本时，对每个样本加入与目标序列无关的序列。这种不相关的序列通过被同时扩增，从而充当内部质控品（）。在仪器上，每个扩增循环中存在的目标序列总量通过含荧光标记的寡核苷酸探针测定。系统通过样品制备、试剂制备和反应板装置、扩增、检测四个步骤，检测到荧光信号的扩增循环与初始样本中存在的浓度对数成比例。

国内产品匹基、达安试剂盒的原理步骤与上述类似，为开放式试剂，可以使用多款实时荧光定量检测仪。

．不同方法检测结果间相互关系

病毒载量的检测单位有拷贝数()和国际单位()，且同一样本不同方法的病毒载量检测结果不同，另外，不同方法间检测结果并无固定的转换关系，与病毒亚型、试剂不同版本有关，因此评估同一病人的治疗效果需用同一种方法检测，并且考虑试剂版本的更新情况。

第六章室内质量控制

内部质量控制是在良好实验室整体环境支持下，从样品接收到发出报告整个过程每个环节的管理过程，包括：（）人员；（）实验室分区和环境；（）仪器；（）检测过程（试剂、操作过程、质控品使用）；（）数据报告。

人员

病毒载量检测人员分为检验人、复核人、签发人。

所有相关检验人员需经操作培训，能独立熟练地操作，并经考核合格，持证上岗。

复核人、签发人应具备对检测过程进行分析、解决问题的能力。

实验室分区和环境

实验室分区的功能

病毒载量检测实验室原则上应分为三个独立工作区：试剂准备区、样品处理区、扩增产物分析区，并设在不同房间。不同检测方法的分区功能和要求可有所不同。

试剂准备区：扩增试剂的配制、分装和保存；

样品处理区：样品登记、分装，核酸提取、保存和加样；

扩增产物分析区：产物扩增的测定、结果分析、登记及报告。

严格要求三区的单一空气流向：从试剂准备区到样品处理区，然后到扩增产物分析区，不能逆向流动。实验室的设置及辅助设备的具体要求参见第三章。

实验室环境的要求

实验室有足够的空间；

采光好，应避免阳光直射设备；

室温控制在℃；

室内相对湿度控制在；

电源稳定，病毒载量检测仪应配备稳压电源；

室内保持干净整洁，无灰尘；

实验前后，用乙醇或次氯酸钠及时处理操作台面。

仪器设备质控

加样器、温湿度计须经计量部门校准，每年一次，每半年期间核查一次。

病毒载量检测仪及其配套仪器可以委托公司校准，每年一次。

离心机可以委托计量部门或公司校准，每年一次。

冰箱、水浴箱用校准合格的温度计测量温度，每次做好记录。

检测过程质控

试剂质控

使用经国家食品药品监督管理局注册的试剂。

所有试剂盒须严格按要求条件保存。

试剂盒拆封时，要记录拆封时间，所有试剂严格控制在有效期内使用。

实验用水：要求使用无和酶的去离子水。

操作过程质控

按照试剂盒要求与实验室的条件及时更新标准操作程序（），并严格执行，不得擅自修改。

质控品的使用

每次实验按照试剂盒说明书的要求使用试剂盒提供的质控品，并满足质控要求。同时使用外部质控品（病毒载量值为拷贝毫升质控品），如果试剂盒没有阴性质控品，需加一个阴性质控品。

外部质控品的制备、定值及使用

（）制备

对用于制备质控品的大样本血浆样品，要求用抗凝剂抗凝，新鲜抗凝血离心分离，得到透亮血浆。然后用孔径为微米的滤膜过滤除菌，充分混匀。按各自方法对样品量的需求，用无菌冻存管定量分装，标记，封口，冻存于℃以下非自动除霜冰箱内，避免反复冻融。按实际使用量的要求配制足够量外部质控品（推荐每次配置量可使用两年）。

（）定值

从制备好的外部质控品中随机选出管，严格按照实验室的各自方法标准操作程序进行病毒载量检测，将测得结果的拷贝值或值换算成值，计算其算术平均值（）和标准偏差（）。

（）质控图的绘制和使用

根据测得值，在坐标图上画出平均值、±、±线图，作质控图使用。每次检测都应带一个外部对照，将得到的外部质控品值标在上述质控图上。每次质控品测得值在平均值±内方为有效。

使用新批次的外部对照质控品时，必须重新绘制质控图。

（）质控品不宜使用稀释方法制备。

数据分析、结果报告

在试剂盒及外部质控品结果满足要求的前提下，对样品进行分析。

外部质控品不合格，样品需要重新检测。

结果超过检测上限的样品应稀释以后重新检测。

复核人对检测结果进行仔细复核并对结果提出结论、签字。

签发人对结果的结论进行审核、分析、总结、签字。

按不同方法的要求，以拷贝毫升或国际单位毫升为单位报告样品的病毒载量值。

第七章实验室检测能力验证（）

病毒载量检测的外部质量控制可以通过参加外部质量评价，提高实验结果的可比性，发现系统误差，改进实验室工作，提高检测质量。病毒载量检测实验室须参加艾滋病丙肝参比实验室或有资质的国内外机构组织的病毒载量检测能力验证来实施外部质量控制。

组织

艾滋病丙肝参比实验室为病毒载量检测能力验证（）的组织者，负责制定国内病毒载量检测能力验证的计划并组织实施。

国内所有从事病毒载量检测的实验室须参加该项目，在规定时间内使用有效试剂与实验样品一起检测，填写病毒载量检测报告单（附表），上报艾滋病丙肝参比实验室。

鼓励有条件的实验室参加有资质的国内外机构组织的活动。

实施

样品组成：每次份。包括阴性、不同拷贝数的阳性样品。可以根据实验室的考核目的制备考核盘。

频率：一年次。

样品的接收与保存：要求参加的实验室收到考核样品后，立即进行核对、检查，填写病毒载量检测能力验证样品接收专用单(附表)，天内传回艾滋病丙肝参比实验室。如发现考核样品缺失、量不足、空管等情况，及时书面回报，艾滋

病丙肝参比实验室负责补寄或更换。收到样品后应及时检测或在度以下保存。

样品的检测：要求将考核样品同实验室常规样品一起检测，由常规检测人员进行。

结果的报告和处理：参加的实验室必须在规定的时间内，用电子邮件或书面报告实验结果，并将病毒载量实验结果报告单和打印的仪器原始记录一起上报给艾滋病丙肝参比实验室，艾滋病丙肝参比实验室将负责结果录入和处理。有任何原因不能按时上报者，需有单位盖章的书面申请。

评分原则

将参与实验室反馈结果换算成对数值（），再按同一种方法与同一个考核品的的所有实验室结果进行统计，算出平均值（）和标准偏差（）。

成绩判定：

根据每个参与考核实验室一年两次所有考核品的结果进行综合评分（每一个考核品的评判标准依照与条款），判定标准为：

①优秀：所有考核品没有问题；

②良好：有一个考核品满足中的条款；

③合格：两个考核品满足中的条款

④不合格：至少有三个考核品满足中的条款或至少一个考核品出现中的条款。

样品结果在～内；样品结果在～内；考核结果报告没及时上报；没按要求上报原始记录。

样品结果超过>；样品结果<；假阳性；假阴性；无效结果。

评估结果反馈：艾滋病丙肝参比实验室根据各实验室的两次考核结果，及时反馈每次评估结果。每年反馈最后的评估结果，并发证书。

抱怨和申诉：参评实验室如对评估结果或其它方面存有异议，可以在收到结果后天内向艾滋病丙肝参比实验室提出异议，后者在核实情况后予以答复。

现场督导：根据考核情况的需要，艾滋病丙肝参比实验室组成技术专家组对不合格实验室进行现场检查。检查内容包括：实验原始数据、实验室布局、仪器运行状况、辅助设备校准状况、实验耗材质量、样品保存、试剂盒使用状态、人员培训状况、质量保证和质量控制等。给实验室反馈督导报告，现场实验室按

相关建议作出整顿。

第八章实验室生物安全

相关依据

《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样品运输管理规定》、《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法》和《全国艾滋病检测技术规范》。

安全细则

进入实验室应穿工作服、戴口罩、戴一次性乳胶手套。严禁在实验室内进食、饮水和吸烟以及使用化妆品。

所有样品包括试剂盒中的人源性成份（如阴、阳性对照）都应在生物安全柜内进行处理。

样品应盛装在有螺旋盖的离心管中，以防样品溅出或产生交叉污染。当具有潜在传染性的物质溢出时，立即用次氯酸钠溶液或其它消毒剂处理污染区及器材；接触过标本的耗材应置有专用消毒剂的容器，与一次性物品一起在丢弃前进行高压灭菌处理。

避免试剂盒中各种有毒有害化学成分（如叠氮钠、二甲基亚砜、异硫氰酸胍）对人体或环境可能造成的危害。

生物安全培训

所有涉及病毒载量检测的人员都应经过严格的安全培训，要掌握生物安全保障的原则、措施。每个人的安全教育均应记录在实验室和人事档案中。

省级及以上疾控中心艾滋病实验室负责检测生物安全培训及病毒载量检测培训。

检测相关人员应主动接受实验室生物安全员以及安全负责人的监督。所有实验室意外事件均应进行记录和报告。

所有人员要保护自身和环境的安全。

参照实验室安全指南和标准操作程序的有关规定执行具体操作。

职业暴露处理

实验室应建立完善的艾滋病职业暴露后的预防机制。

发生职业暴露后，首先进行应急处理，然后根据暴露级别和暴露源头严重

程度，评估风险级别，并决定是否进行预防性用药和用药程序，如需要时，尽早开始服用抗病毒药物。

按规定进行职业暴露登记、检测和报告，注意做好保密工作。

HIV-1病毒载量试剂1技术参数

HIV-1病毒载量试剂1技术参数 1.名称：人类免疫缺陷病毒（1型）核酸检测试剂盒（PCR-荧光法）。 2.用途：用于定量检测人血浆中人类免疫缺陷病毒（1型）。 3.原理：应用实时荧光定量聚合酶链式反应原理。 4.检测项目：HIV-1RNA定量检测。 5.检测亚型：HIV-1M、O组。 6.检测方法：全自动核酸分离纯化，全自动核酸扩增和实时荧光PCR方法。 7.适用样品种类：非肝素抗凝血浆。 8.定量方式：内部标准品定量。 9.质控品：提供阴性、弱阳性、强阳性对照质控品。 10.技术要求： a.检测灵敏度：≤20copies/ml,置信度≥95%。 b.检测范围：20-1×107copies/ml。 c.检测特异性：100%。 d.重复性：CV值≤0.3log。 e.规格:48T/盒。 f.即开即用型液体试剂。 11.试剂储存条件：2-8℃保存。 12.试剂组份：包括核酸提取、纯化、扩增和检测的全部试剂。 13.抗污染方案：采用UNG酶防止PCR产物污染。 14.样品处理能力：可以同时进行检测1-72个样品 15.备件：含完整实验过程中所需的相关耗材及洗液。 16.适用设备：适用于CobasAmpliprepCobasTaqman全自动病毒载量检测系统。 17.认证文件：中国医疗器械进口注册证等文件。 18.供货计划：按用户要求数量准时分批供货，试剂到货时有效期大于10个 月。

HIV-1病毒载量试剂2技术参数 1．名称：人类免疫缺陷病毒（HIV-1）核酸（RNA）提取及检测试剂盒 2．用途：用于定量检测人血浆中人类免疫缺陷病毒（1型）。3．检测方法：应用RT-PCR和Real-time实时荧光定量检测技术HIV-1型各组病毒载量。 4．检测项目：HIV-1RNA定量检测。 5.检测亚型：HIV-1型M组(A-H)、O组、N组。 6.适用设备：m2000sp自动核酸提取仪，m2000rt实时荧光定量PCR仪; 7．定量方式：外部标准品定量 8．技术要求 8.1检测灵敏度:≤40copies/mL（0.6mL、1.0mL样本体系） 8.2特异性：100%(95%CI99.28-100%) 8.3检测范围:40-107copies/mL 8.4适用样本种类:血浆(ACD-A或EDTA抗凝) 8.5检测样本体积:可选0.2mL、0.5mL、0.6mL和1.0mL 8.6检测方式:96孔PCR反应板 8.7检测批量：一次检测批量可选24，48，72和96 8.8内测标准差(SD):≤0.25log copies/mL 8.9内参要求：与样本一起提取和扩增，质控整个实验过程; 9.认证文件：中国医疗器械进口注册证等文件。 10.供货计划：按用户要求数量准时分批供货，到货时试剂有效期大于10个月。

HIV-1病毒载量检测及质量保证指南

本指南由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心艾滋病参比实验室组织有关专家撰写，由中国疾病预防控制中心批准执行。 编写主持人：蒋岩 编写人员：潘品良蒋岩李敬云钟平尚红李太生 审核咨询专家及技术人员：邵一鸣康来仪朱效科王佑春汪宁朱红郭志宏季阳 刘海林肖瑶邱茂锋马春涛 编写单位：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心 参编单位：中国人民解放军军事医学科学院 上海市疾病预防控制中心 中国医科大学 北京协和医院 技术顾问：Mike Ussery, Hao Zhang 美国国立卫生研究院过敏及传染病研究所 James W. Bremer 美国Rush 大学医学中心VQA实验室 Trever Peter 克林顿基金中国艾滋病防治项目实验室专家 Donald J. Brambilla 美国华盛顿大学新英格兰研究所 Francis F. Mandy 加拿大公共卫生局疾病预防控制中心国家免疫学实验室

前言 随着HIV-1病毒载量检测在艾滋病临床辅助诊断和抗病毒治疗监测以及艾滋病科研工作中的广泛应用，我国开展该项检测工作的实验室日益增多。自1997年艾滋病实验室首次引进HIV-1病毒载量检测技术，截至2007年底，全国已经配备了近120台HIV-1病毒载量检测仪，覆盖了疾控、医院、检疫、军队等系统。目前，虽然许多实验室已经将病毒载量检测纳入艾滋病相关辅助诊断和治疗监测工作，但大多数实验室开展工作的时间较短，经验不足，因此，急需加强该领域的培训和质量控制工作，以保证检测结果的准确性和可靠性。 为了加强质控和保证检测质量，并得到国际上的认可，艾滋病参比实验室2004年开始参加美国NIH组织的HIV-1病毒载量检测能力验证工作。在通过考核和积累经验的基础上，2005年启动了国内HIV-1病毒载量检测能力验证工作。在积极组织实验室能力验证的同时，艾滋病参比实验室也对实验室技术人员进行培训，积极开展室内质控。这些工作对提高HIV-1病毒载量的检测技术，保证质量起到了重要作用。为了进一步规范艾滋病实验室HIV-1病毒载量检测，建立标准化质量控制程序，准确开展各项检测及质量控制工作，特制定本指南。 本指南是根据各种HIV-1病毒载量检测方法的技术要求，结合现行的国内外相关技术规范而制定。本指南针对HIV-1病毒载量检测的实验室设置、样品管理、检测技术、质量控制、生物安全等方面提出指导。 本指南自2006年初正式开始编写，性病艾滋病预防控制中心多次组织了有国内外专家参加的指南编写专项技术咨询会，与会专家对指南提出了很多建设性意见和建议，美国NIH 病毒载量检测质量保证实验室专家多次对指南进行认真的审阅和具体指导。指南编写过程中，也认真听取了实验室一线检测人员的具体需求和建议，并补充了大量的实验数据，包括HIV-1病毒载量检测值的稳定性、冻融影响实验与不同检测方法之间比较的实验数据等。在此基础上，经过多次修订、补充和审定，于2007年11月完成《HIV-1病毒载量检测及质量保证指南》的最后定稿。 由于国内外还没有可作为参考的HIV-1病毒载量检测及质量控制的相关指南，因此本指南主要提出一些原则上的参考建议，其中定有不妥之处，希望广大同仁提出意见，以便不断完善。 致谢 在本指南的编写过程中，世界卫生组织、克林顿基金中国艾滋病防治项目和美国NIH 等国际组织与机构给予了大力支持，全国HIV-1病毒载量检测实验室一线操作人员提出了许多建设性的意见和具体需求，艾滋病参比实验室工作人员毛玮、陶晓霞进行了大量的补充实验和文字编辑工作，才保证本指南的编写顺利完成，在此一并向他们表示真诚的感谢。 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心主任吴尊友研究员在本指南编写过程中提出了重要的修改意见，在此特别致谢。

hiv1病毒载量测定及质量保证指南

病毒载量测定及质量保证指南 （版） 中国疾病预防控制中心 年月 前言 随着病毒载量检测在艾滋病临床辅助诊断、抗病毒治疗监测及相关科研工作中的广泛应用，我国开展该项检测工作的实验室日益增多。自年艾滋病实验室首次引进病毒载量检测技术以来，截至年底全国已经配备台病毒载量检测仪，覆盖疾控、医院、检疫、军队等系统，艾滋病流行重点地区及少数县级实验室均已配备病毒载量检测仪，每年检测量已达万人份以上。由于病毒载量检测质量对艾滋病的早期诊断及治疗有重要影响，因此急需加强该领域的培训和质量控制，规范实验室操作，以保证检测结果的准确性和可靠性。 自年开始实施《病毒载量测定及质量保证指南》（试行，以下简称《指南》）以来，参与病毒载量能力验证工作的实验室从年的家增加到年的家，占已开展工作实验室的百分之九十以上。通过综合分析近几年能力验证发现的问题与检测技术发展的实际情况，考虑各种试剂的检测要求，结合专家意见和一线实验室工作人员的经验与需求，对本指南进行了适当修改、调整和补充，主要修改内容包括：（）增加“人员要求”章节；（）修改“常用病毒载量检测方法”；（）修改“病毒载量检测能力验证（）”；（）补充常见问题分析和处理等内容。 修订后的《指南》共分八章，包括：总则，人员要求，实验室环境与设施，样品的采集、处理保存运输，常用检测方法简介，室内质量控制，实验室检测能力验证（），实验室生物安全，以及四个附表。 本指南在修改过程中，接纳了国内专家、同行的意见和建议，经过多次修改编写成《指南》（）版。本指南由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心艾滋病参比实验室组织有关专家撰写，由中国疾病预防控制中心批准执行，并在病毒载量检测实验室网络内发布实施。 由于国内各实验室条件不同，不能采纳所有实验室的建议，因此本指南主要提出一些原则上的参考建议，其中定有不妥之处，希望广大同仁提出意见，以便不断完善。

CD4细胞、病毒载量标本采集、运输及接收

CD4+T淋巴细胞、病毒载量 样本采集、保存、运送及验收 1 样本采集 1.1 CD4+T淋巴细胞：采集静脉全血，EDTA-K2或K3抗凝，采血量根据试管标注量采集，一般用标注有2ml抗凝管采集血液。抽血后立即轻轻颠倒混匀6—8次。 1.2 病毒载量：采集静脉全血，EDTA-K2或K3抗凝，采血量10ml，抽血后立即轻轻颠倒混匀6—8次。 2 样本标签 必须在试管上用圆珠笔或记号笔标明：患者姓名、个人编号、采血日期、时间、采血者姓名。 3样本处理及保存 3.1 CD4+T淋巴细胞样本处理及保存：抽血后立即轻轻颠倒混匀6—8次，室温保存（20--250C最好）。必须在48小时内送到检测实验室。 3.2 病毒载量样本处理及保存：抽血后立即轻轻颠倒混匀6—8次，并于6小时内以3000r/min离心10分钟分离血浆，分成4份血浆（每份1.1-1.3ml），2份淋巴细胞富积液（每份0.5-1.0ml），每支小试管做好患者姓名、个人编号、采血日期、时间、采血者姓名。-40C可保存3天，-700C可保存12个月。 4样本的运输 4.1 CD4+T淋巴细胞样本：运输温度应保持在20—250C，严禁冷冻或冷藏，避免过冷过热，采取防漏、隔热，采用吸水性材料包裹容器防止溅出。 4.2 病毒载量样本：尽量在低温条件下运输，采取防漏、冰袋或其他冷冻包装，采用吸水性材料包裹容器防止溅出。. 5样本的接收 所有样本标签上的记录要详细，全面。名称，编号，日期，采集时间，采集者。所有样本都要有送检申请单，申请单内容包括：患者姓名，样本采集日期时间、接收样本日期时间，送检者及接收者，患者出生日期，年龄和性别，样品情况

艾滋病患者延伸护理对患者生活质量及病毒载量的影响分析

艾滋病患者延伸护理对患者生活质量及病毒载量的影响分析 发表时间：2018-11-22T11:21:37.757Z 来源：《中国蒙医药》2018年第10期作者：王素平 [导读] 研究艾滋病患者实施延伸护理对患者生活质量及病毒载量的影响 郴州市第二人民医院湖南郴州 423000 【摘要】目的：研究艾滋病患者实施延伸护理对患者生活质量及病毒载量的影响。方法：我院2014年6月到2017年9月期间收治的艾滋病患者100例，随机分为对照组和试验组各50例。对照组实施常规护理，试验组实施延伸护理。比较两组患者治疗前后生活质量评分，并对两组患者治疗前后的全血病毒载量进行比较。结果：干预前两组生活质量评分和全血病毒载量无显著差异，干预后两组指标均得到改善，但试验组干预后的指标优于对照组，数据对比P＜0.05。结论：艾滋病患者治疗过程中延伸护理的应用能有效促使其生活质量的提升，降低其全血病毒载量，具有较高临床价值。 【关键词】艾滋病；延伸护理；生活质量；病毒载量 艾滋病由艾滋病毒感染引起的疾病，其是一种危害极大的传染病。艾滋病病毒是一种能攻击人体免疫系统的病毒，其中主要以CD4T 细胞为攻击目标，免疫细胞被破坏后患者将丧失免疫功能，导致其感染各种疾病的几率上升，并且可发生恶性肿瘤，具有很高的死亡率[1]。本研究对延伸护理在艾滋病患者中的应用对其生活质量及病毒载量的影响进行分析，报道如下。 1.资料与方法 1.1一般资料 2014年6月到2017年9月期间我院收治的艾滋病患者100例，随机分为对照组和试验组各50例。对照组男32例，女18例，年龄25～76岁，平均（48.15±6.94）岁。试验组男35例，女15例，年龄23～77岁，平均（48.39±6.85）岁。两组基本资料比较P＞0.05，有可比性。 1.2方法 对照组实施常规护理，患者治疗期间实施常规护理，主要是指导患者遵医嘱用药，并让患者定期到医院进行复诊等。试验组在对照组基础上实施延伸护理，具体如下。 1.2.1治疗护理 在患者确诊后及时为其建立病历档案，对患者的各项生命体征、家庭成员、婚姻状况、学历和联系方式等各方面信息经全面了解。为患者讲解基础治疗的目的与必要性，并在患者治疗过程中密切监测其各项生命体征的变化情况，出现异常变化时及时给予其有效的干预措施等。 1.2.2健康教育 在患者治疗过程中应给予其全面的健康教育，其中首先应为其讲解艾滋病的病理知识，让其对艾滋病的发病原因、病理机制和发病后的病情进展等有更加深入的了解。同时，为患者讲解艾滋病的治疗方法以控制病情发展为主，告知患者在坚持服药的情况下一般能让其病情得到有效控制。患者治疗过程中责护为其讲解积极心态对治疗效果提升的重要性，为患者讲解常见的情绪调节方法，帮助其更好地消除不良情绪。另外，护理人员还要对患者治疗过程中的注意事项进行讲解，让患者能更好地完成治疗。 1.2.3成立病友会 艾滋病是一种特殊的传染性疾病，患者在发病后容易被孤立，这样很容易导致其产生各种不良情绪，影响其治疗依从性。因此，在患者治疗过程中可以为其建立病友会，定期组织病友会成员开展相关活动。同时，可通过病友会让患者进行疾病治疗经验的交流，促使其更好地完成治疗。另外，还可以通过病友会活动的开展让患者的社会归属感得到提升，避免其在社会中被孤立而产生各种不良情绪。 1.2.4随访 在患者治疗过程中还要对其进行定期的随访，主要以电话随访和上门随访为主。其中电话随访由专科护士完成，主要是通过电话随访了解患者的身体状况和生活情况，给予其必要的治疗指导，并给予其关怀和鼓励等。上门随访由医护人员共同完成，在随访时对患者的家庭状况及经济条件等进行全面了解，指导患者积极面对疾病，并让患者家属给予患者更多关怀和鼓励，帮助其更好地完成疾病的治疗。 1.3评价指标 对两组生活质量进行评分，并对两组全血病毒载量进行测定。生活质量评分用SF-36量表完成，主要是对患者的心理功能、社会功能和躯体功能三项进行评分，满分均为100分，分值越高代表生活质量越好。 1.4统计学方法 SPSS22.0软件处理数据，百分率和（x±s）表示计数资料与计量资料，X2检验和t检验数据差异，P＜0.05为有统计学意义。 2.结果 2.1两组生活质量评分 根据表1数据，干预前两组生活质量评分无显著差异，干预后两组评分均得到改善，但试验组干预后评分优于对照组，数据对比P＜0.05。

什么是病毒载量

什么是病毒载量？其意义是什么？ 人类免疫缺陷病毒（HIV）感染机体后，主要侵害CD4 T淋巴细胞，并且以CD4 T淋巴细胞为宿主细胞，大量复制繁殖新的HIV，而后, 新的HIV又去感染未被感染的CD4 T 细胞，进入病毒复制的又一循环。这样反复循环，体内就产生了大量的HIV，产生的病毒大部分都是以游离的形式存在于血液中，一部分则藏匿于静止细胞或淋巴结中，而停止复制增生，但它们也随时会再次“出击”，去感染新的细胞。我们在了解HIV/AIDS的相关知识中，经常会看到或听到“病毒载量”这个词，所谓病毒载量即是定量机体内游离病毒的含量。它是一个计数单位, 表示每毫升血浆中含多少拷贝数的HIV-RNA。可以通过此项检测了解机体内血浆中游离病毒的水平。 有三种方法检测病毒载量HIV RNA： 1, 分支DNA检测（bDNA 拜耳公司） 2, 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR, 罗氏公司） 3, 核酸序列扩增检测（NASBA, 阿克苏公司）。

它们之间的基本原理是不同的，对于核酸水平的检测，PCR的技术是基于探针的放大而bDNA的方法是采用信号 放大。由于它们的方法学不同，显示血浆病毒载量的计数单位,也就有所不同，因此在对同一患者进行疾病进展观察及疗效随访监测时，应该采用同样的检测方法，便于对患者检测结果的比较，和分析具有统一的标准。 自90年代初，直接检测血浆病毒RNA 以更敏感，更快速和更方便的途径在血浆中可以定量病毒浓度, 利用病毒载量检测: a. 急性HIV-1感染，病人急性HIV感染期间，处于空窗期时即可检测出高水平的病毒RNA含量。急性期病毒复制高峰期RNA量每毫升可达到9×10 7拷贝。随着抗体的产生，RNA逐步下降与p24抗原的降低相一致。但直到一年或一年之后，仍可发现每毫升血浆中可含有2-4×10 4拷贝的水平，而p24抗原则在1-3个月后即不能测得。提示bDNA方法远较p24抗原检测法敏感。 b. 判定病人疾病的进程和进展，血浆中HIV RNA的定量分析，可表现出病毒复制动力学，也反应血浆中游离病毒的浓度，是病毒增殖和免疫清除机制共同作用的结果，CD4+T细胞越少的病人显示RNA含量越高。在同一病人的系列标本检测中可以看到bDNA值与CD4+T细胞数呈明显的负相关。因而在判定疾病进程和判定临床治疗效果上具有极大的价

HIV病毒载量

病毒载量 病毒载量简单的说就是通过测量从而显示每毫升血液里病毒的数量。病毒载量测定是通过一种叫聚合酶链锁反应（PCR)的技术，来测定血液中HIV RNA的量。病毒载量以拷贝（copies)数为单位，计算每一毫升(ml)有多少病毒量，如copies/ml。若病毒量在100000 copies/ml以下是“低"，100000copies/ml以上“高”。 病毒载量检测是通过一种叫聚合酶链锁反应（PCR）的技术完成的，英文缩写为HIV RNA，检测结果在“测不到”到一个具体的庞大数字不等。 如何阅读病毒量的高和低呢 与CD4检测一样，病毒载量检测同样有一定的标准来衡量。艾滋病病毒载量测量是以拷贝（copies）为单位，计算每一毫升（milliliter）有多少病毒量，如copies/ ml。若病毒量在10000 copies/ ml以下是“低”，100000 copies/ ml以上是“高”。 何谓艾滋病毒“测不到” 每一种测验方法都有无法测出艾滋病毒数最低值的限制。目前的仪器检测血液中艾滋病毒的数量其最低值是50 copies/ml。任何血液样本，若低于这门坎表示病毒量低于可测量的限度，报告中一般显示低于测量值，就是说“测不到”。这并不表示你的血液中没有病毒，而是病毒量在0与50 copies/ml之间，因数量太低，仪器无法测出。但是，血液“测不到”的病毒还是会广泛存在于精液、阴道分泌物、骨髓、内脏中，你还是有可能经由非安全性行为或共享针头传染给别人，病毒也会趁恰当的时机继续大量复制。 病毒载量对CD4细胞的影响 研究中发现，CD4细胞数量相同的人，病毒量高者比低者病情恶化更快速。对于尚未服用抗HIV药的感染者，将病毒载量、CD4数量以及症状结合起来，可以帮助预测未来症状的发展，以帮助感染者决定是否开始服药。对于正在服药的感染者来说，病毒量检测可以帮助了解药物疗效，也可提供调整治疗方案和存在耐药的依据。抗HIV的药物若产生效果，感染者体内的病毒量就会下降。 对于感染者来说，除了做免疫系统的CD4细胞检测以外，关心病毒在自身体内的复制情况也是必要的。因此，在有条件的情况下，应定期进行病毒载量检测。 https://www.wendangku.net/doc/4e18094924.html,/view/6077967.htm

病毒载量检测有助于排除人免疫缺陷 病毒抗体可疑结果中 …

空望塑堕医望盈查！！塑垩ｌ爿星盟鲞箜ｌ坦些ｉ！』旦旦丛型，』些！型！Ｑ竖：！业！：。—盟吐 病毒载量检测有助于排除人免疫缺陷 病毒抗体可疑结果中的非感染者 黑发欣张启云孙伟东张琴叶景荣刘海林卢红艳 【摘要】目的研究病毒载量检测是否能够辅助排除人免疫缺陷病毒（ｈｕｍａｎ?一ｕｎｏｄ胡ｃｉｅｎｃｙｖ血ｓ，ＨＩＶ）抗体可疑样本中的非感染者。方法选择在筛查实验中两种酶联试剂检测结果不一致 （一阴一阳、样本ｓ／ｃＯ比值＜６）、且确认实验检测结果为“ＨＩＶ抗体可疑”的样本】９份测定病毒载量。对这些个体的感染状况进行跟踪随访，观察６个月后抗体进展情况。结果１９份筛查实验结果不一致的抗体可疑样本的病毒载量检测均为阴性，随访复查条带无进展，均排除感染ⅢＶ的可能。结论在抗体筛查实验和确认实验反应均很弱的条件下，病毒载量检测阴性有助于排除非ⅢＶ感染原因造成的抗体检测中的可疑结果。 【关键词】ＨＩＶ；病毒载量；诊断，鉴别 ｖｉｒａｌｌ∞ｄｔ既ｔ咖ｄｕｄｖｅｔ０既ｃｌｕｄｉｌＩｇ珊ｇ础ｖｅｓｕｂｊｅｃｔｓｆｒｏｍ ｓ１１ｓｐ忧ｔｓｉｎＨⅣａ曲ｂｏｄｙ ｄ咖ｃ廿。璐 疗肼砌一ｚ汛，ｚ删，ｖＧＱ扛ｍ，ｓ删眈ｉ一南增，删ⅣＧＱ讯，硒胁哥，ｏ增，ⅡＥ，舶川ｎ，工ｕ舶增?弦ｍ删＃蝌Ｃｅ眦ｅｒ如ｒＤ如ｅ础ｅｃｏｎ拍￡ｄ础Ｐ俐ｅ“幽ｎ．＆￡“蝌加００１３，ＣＭ魁 ｃ邮℃５即”击昭Ⅱｕ如０７：舾，Ｆｈ一西ｚ，蜘ｆ：ｋ缸＠扣如ｏｗ 【ＡｂｇｈＨｃｔ】Ｏｂｊｅ删ｖｅＴ０ｓｔｕｄｙｗｈｅｔｈｅｒｐ１聃眦ｖｉ耐１０ａｄｔｅＢｔｉ“ｇｉｓｈｅｌｐｆｕｌｔｏｅｘｃｌｕｄｅ帆ｅｓｆｒｅｅｆ舢Ｈｕｍａｎｉｍｍ枷ｏｄ胡ｃｉｅ唧ｖｉｒｌｌｓ（ＨＩＶ）ｉｒ血ｃｔｉｏｌｌｓ如ｍｇｕｓｐｅｃｔｓｉｎＨＩＶａ１１曲ｏｄｖｄｅｔｅｃｔｉｏｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １９ＳｐｅｃｉｍｅＩｌｓ．ｗｈｉｃｈｓｈｏｗｅｄｄｉｓｃｏｎｃｏｒｄ眦ｔｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｌＩｅ¨ｏＨⅣＥＩＡｔｅ出ｎｇ（ｓ／ＣＯ＜６）ａｎｄｉｎｄｄｅ皿ｉｍｔｅｄ瑚１】ｌ缸０ｆｗｅ８ｔｅｍｂ１０ｔ（ｗＢ）ｔｅ８ｔ．ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄＩＶ１ｒａｌ１０ａｄ０ｆｔｈｅｓ口ｅｃｉｍｅｎｓｗ料ｅｄｅｔｅｃｔｅｄＡｓｉｘ—ｍｏｎ山ｆｏⅡ０ｗｕｐｓｕｎ∞ｙｉｎｄｅｔｅｃｔｉｎｇＨⅣａｍｉｂｏｄｖｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｉｎ山ｅｓｅｓｌｌｂｌｅｃｔｓ．Ｒ怖ｌｌＩｔｓＮ０ｎｅ０ｆｔｈｅｓｅ１９ｃ船ｅｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｔｏｂｅｐｏｓｉｔｉｖｅＨＩＶｖｉｒ丑ｌｌｏａｄｓａｎｄｔｈｅｒｅｗａｓｎｏａｎｖｐｒｏｇ，℃ｓｓｉｎＷＢｂ蚰ｄ吕ｄｅｖｃｌ叩ｍｎｔｄｕ五ｎｇｔｈｅｆｏｌ】删一ｕｐｐｅ五ｄｎｅｐｏｓｓｉｂｄｉ竹ｏｆＨＩＶｌｍｃｎｏｎｃ砌ｄｂｅｅｘｃＩｕｄｅｄＣｏｎｃ№ｉ帅ｗｈｅｎｔｈｅｓｐｅｃｉｍｅｎｓｒｅａｃｔ埘血ｖｅ珂ｌ州ｉｍｅｎｓ时ｉｎｂｏ山ＥＩＡａｎｄＷＢ．ｎｅｇａｔｉｖｅｖｉ脚Ｉｏａｄｒｅｓｕｈｉｓｃｏｒｌｄｕｃｉｖｅｔｏｅ∽ｌｕｄｅｎｅｇａｔｉｖｅｓｕｂｉｅｃｔｓｆ南ｍｓｕ８ｐｅｃｔｓｉｎＨⅣａｎｔｉｂｏｄｖｄｅｔｅｃｔｉｏｎｓ 【№ｙｗｏｒｄｓ】ＨＩＶ；Ｖｉ“ｌｏ础Ｄｉａ舯８ｉ８，ｄｉ雎ｒｅｎｄａｌ 艾滋病的诊断依赖于人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）抗 体检测，程序为：先筛查实验［一般为酶联免疫吸附 实验（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｍａｓｓａｙ，ＥｕｓＡ）］， 后确认实验［免疫印迹实验（ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ，ｗＢ）］。 目前国内ＨＩＶ抗体的确认实验依赖于ｗＢ一种方 法，而ｗＢ实验结果有３种：ＨＩＶ抗体阳性、ＨＩＶ抗 体阴性、ＨＩＶ抗体可疑。 造成抗体可疑样本检出数量和检出率逐年上升 有多种原因，从方法学、试剂及检测人群来看：（１） ｗＢ方法中硝酸纤维膜上的ＨＩＶ抗原（共有１０种抗 原）与人体血液中的某砦成分是共同抗原，发生交 叉免疫反应而出现ｗＢ条带（对应１０条带）。有研 究证明：由于ｗＢ实验固有的敏感性，即使在无高危 作者单位：１０００１３北京市疾病预防控制小心性病艾滋病防治所 通信作者：黑发欣，ＥＩＤａⅡ：ｈｄ＆＠ｂｊ州＆ｏ蜡论著． 行为的普通人群中，也可以有ｌＯ％～３２％的个体表现为ｗＢ可疑。（２）ＧｅｎｅｈｂＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ８ＨＩＶ—ｌ及ＨＩｖ＿２检测试剂盒的敏感性在不断提高，更容易出现ｗＢ条带。（３）随着国家艾滋病防治政策的深入，艾滋病抗体检测人群在不断扩展，从高危人群向普通人群延伸。因为医疗行为和血源筛查”。等原因而检测艾滋病抗体的情况越来越多，这部分人群更容易出现ｗＢ条带。 从检测者自身免疫状况及临床角度分析，抗体可疑结果常见的原因有：（１）ＨＩＶ感染急性期；（２）晚期艾滋病（ＡＩＤｓ）病人；（３）ＨＩＶ疫苗接种；（４）自身免疫病；（５）肾衰竭和血液透析；（６）遗传性胰腺囊肿；（７）多次怀孕或输血；（８）肝病；（９）注射用药；（１０）乙肝、狂犬等疫苗注射，等等“…。其中原因，ＨＩＶ疫苗接种目前局限于参加疫苗实验者；ＨＩＶ