柠檬酸的检测

柠檬酸的检测

2试验方法本试验所用水均为蒸馏水或离子交换水。

2.1鉴别试验

2.1.1试剂和溶液

2.1.1.1硫酸(GB625);

2.1.1.2硫酸汞:称取5g黄色氧化汞(HG3-1069),先加40ml水,然后缓缓加入20ml硫酸,边加边搅拌,再加40ml水搅拌使其溶解;

2.1.1.3高锰酸钾(GB643):0.1N溶液;

2.1.1.4氢氧化钠(GB629):4.3%(W/V)溶液;

2.1.1.5乙酸酐(GB677);

2.1.1.6吡啶(GB689);

2.1.1.7试样溶液:每毫升含柠檬酸5mg。

2.1.2试验步骤

2.1.2.1取少量试样,用直火炽灼,即缓缓分解,但不发生焦糖臭。

2.1.2.2取试样溶液2ml,用4.3%氢氧化钠溶液调至中性,加入1滴稀硫酸,加热至沸。加1滴0.1N 高锰酸钾溶液,振摇,紫色即消退。再加入1滴硫酸汞溶液,产生白色沉淀。

2.1.2.3取试样5mg,加入吡啶—醋酐(3:1)约5ml,即生成黄色到红色或紫红色的溶液。

2.2含量

2.2.1试剂和溶液

2.2.1.1氢氧化钠标准溶液(GB629):1N溶液,按GB601《标准溶液制备方法》配制和标定;

2.2.1.2酚酞(HGB3039):1%(W/V)溶液,按GB603《制剂及制品制备方法》配制。

2.2.2试验步骤称取1.5g试样(称准至0.0002g),加入50ml中性蒸馏水溶解,加3滴1%酚酞指示液,用1N氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点。

2.2.3计算

V·C×0.06404

X1＝————————×100 (1)

m(1-0.08566)

V·C×0.06404

X2＝———————-×100 (2)

m

式中:X1-一水柠檬酸含量(按无水计),%;

X2-无水柠檬酸含量,%;

V-滴定试样所耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;

C-氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L;

m-试样质量,g;

0.06404-与1ml氢氧化钠标准溶液[CNaOH=1.000mol/L]相当的以克表示的柠檬酸的质量;

0.08566—C6H8O7.H2O中的H2O的理论含量,即18/210.14=0.08566。

2.3澄清度

2.3.1试剂和溶液

2.3.1.1硝酸(GB628):2M溶液;

2.3.1.2硝酸银(GB670):新配制的5%(W/V)硝酸银水溶液;

2.3.1.3氯化钠(GB1266):0.2M溶液(氯化钠须经500～600℃灼烧至恒重);

2.3.1.4氯化物标准溶液Ⅰ:吸取1ml0.2M氯化钠溶液,加水稀释至100ml;

2.3.1.5氯化物标准溶液Ⅱ:吸取20ml氯化物标准溶液Ⅰ,加水稀释至100ml;

2.3.1.6氯化物标准溶液Ⅲ:吸取1ml氯化物标准溶液Ⅰ,加水稀释至100ml;

2.3.1.7参比液A1和B1:按下表配制(体积以毫升计),制备时不要猛烈摇动。

试剂名称参比液

A1B1

氯化物标准溶液Ⅲ0.52.5

氯化物标准溶液Ⅱ1050

2M硝酸溶液

水7.537.5

硝酸银溶液2010

2.3.2试验步骤称取试样2g,装入内径16mm的平底比色管中,加水配成10ml样液,5min后与等体积各新配制的参比液于黑色背景(管架下衬黑色底板)散射光线下,纵向观察比浊。样液透明度与试剂空白几乎相同时,称为澄清。样液乳白

度不深于参比液A1或B1时,称为极微乳白。

2.4水分

2.4.1仪器:微量水分测定器

2.4.2试剂和溶液

2.4.2.1无水甲醇:按GB606《水分测定法》配制;

2.4.2.2无水吡啶:按GB606《水分测定法》配制;

2.4.2.3碘(GB675):将升华碘于硫酸干燥器内干燥48h以上;

2.4.2.4亚硫酸钠(HG3-1078);

2.4.2.5硫酸(GB625);

2.4.2.6碘－二氧化硫溶液:称取110g碘置于干燥的1000ml烧瓶中,加入160ml无水吡啶,振摇。待碘全部溶解后,加入300ml无水甲醇,在冰浴中冷却。然后通入经过硫酸干燥的二氧化硫(二氧化硫由亚硫酸钠加硫酸制得),使增重达72g。再加无水甲醇,使体积为1000ml,放置暗处24h后可用。注:刚通入二氧化硫时会有红色沉淀析出,二氧化硫通足时沉淀即可溶解。

2.4.2.7水标准溶液:称取0.20～0.25g水(称准至0.0002g),用无水甲醇准确稀释至100ml。

2.4.3试验步骤

2.4.

3.1终点判定

a.目测法:取20ml无水甲醇,用碘－二氧化硫溶液滴定至浅黄色变为浅棕黄色。

b."死停"电位法:取20ml无水甲醇于微量水分测定器中,用碘－二氧化硫溶液滴定,调整测定器电路中电阻,使过量一滴溶液(约0.02ml)产生25～50微安的电流,滴定至指针偏转至某一位置不再发生倒转现象即为终点。

2.4.

3.2碘－二氧化硫溶液的标定

a.空白试验:吸取20ml无水甲醇于微量水分测定器中,在搅拌下用碘－二氧化硫溶液滴定至终点,不记录读数。另外吸取5.0ml无水甲醇于测定器中,继续滴定至终点,记录消耗碘－二氧化硫溶液

的毫升数(V2)。

b.标定:吸取20ml无水甲醇于微量水分测定器中,在搅拌下用碘－二氧化硫溶液滴定至终点,不记录读数。另外吸取 5.0ml水标准溶液,继续滴定至终点,记录消耗碘－二氧化硫溶液的毫升数(V1)。

c.计算

m

T＝———— (3)

V1－V2

式中:T-碘－二氧化硫溶液的滴定度;

V1-标定时消耗碘－二氧化硫溶液的体积,ml;

V2-空白试验消耗碘－二氧化硫溶液的体积,ml;

m-5ml水标准溶液中水的质量,g。

2.4.

3.3试样测定取2ml无水甲醇,在搅拌下用碘－二氧化硫溶液滴定至终点,不记录读数。然后迅速加入适量的试样(一水柠檬酸取0.1g,无水柠檬酸取1g),继续滴定至终点。

2.4.

3.4计算

V·T

X3＝—————×100 (4)

m

式中:X3-样品水分,%;

V-消耗碘－二氧化硫溶液的体积,ml;

T-碘－二氧化硫溶液对水的滴定度,g/ml;

m-试样质量,g。

2.5易炭化物

2.5.1试剂和溶液

2.5.1.1盐酸溶液(GB622):吸取25ml盐酸,加水稀释至1000ml;

2.5.1.2碘化钾(GB1272);

2.5.1.3硫酸(GB625):1M溶液;

2.5.1.4硫代硫酸钠(GB637):0.1M标准溶液;

2.5.1.5过氧化氢(HG3-1082):10%溶液,吸取10ml30

%过氧化氢,加水稀释至100ml;

2.5.1.6氢氧化钠(GB629):30%(W/V)溶液;

2.5.1.7淀粉(HGB3095):1%(W/V)溶液;

2.5.1.8三氯化铁(HGB-1085);

2.5.1.9二氯化钴(GB1270);

2.5.1.10黄色原液:溶解46g三氯化铁于约900ml盐酸溶液中,再用此盐酸溶液稀释至1000ml。标定,并用盐酸溶液调整此黄色原液,使其每毫升含45mgFeCL3·6H2O。溶液必须避光保存,现用现标定。标定:吸取10ml新配制的三氯化铁溶液,加入15ml水、4g碘化钾、5ml盐酸,立即塞上瓶盖避光静置15min。加入100ml水,析出的碘用0.1M硫代硫酸钠标准溶液滴定至浅黄色,加0.5ml1%淀粉溶液作指示液,继续滴定至终点。注:每毫升0.1M硫代硫酸钠标准溶液相当于27.03mgFeCL3·6H2O。

2.5.1.11红色原液:溶解60g二氯化钴于约900ml盐酸溶液中,再用此盐酸溶液稀释至1000ml。

标定,并用盐酸溶液调整此红色原液,使其每毫升含59.5mgCoCL2·6H2O。溶液必须避光保存,现用现标定。标定:吸取5.0ml新配制的二氯化钴溶液。加入5ml过氧化氢溶液和10ml30%氢氧化钠溶液,缓缓煮沸10min,冷却。再加2g碘化钾、60ml1M硫酸溶液,立即塞上瓶盖,轻轻摇动,使沉淀溶解。析出的碘,用0.1M硫代硫酸钠标准溶液滴定至浅黄色,加0.5ml1%淀粉溶液作指示液,继续滴定至溶液呈粉红色时为终点。注:每毫升0.1M硫代硫酸钠标准溶液相当于23.79gCoCL2·6H2O。

2.5.1.12色泽限度标准溶液:黄色原液和红色原液按9:1混合。

2.5.2试验步骤称取试样0.75g(称准至0.01g)于一支50ml带塞比色管中,加入10ml硫酸溶解(1级称取试样0.25g,加入5ml硫酸溶解),在90℃水浴中加热1min后振摇均匀,继续在90℃水浴中加热1h。取出,迅速冷却(天热时须用冰水冷却)。吸取10ml色泽限度标准溶液(2.5.1.12)于另一支50ml带塞比色管中,以白色为背景,进行目视比色,其样品管颜色不得深于标准管。

2.6硫酸灰分

2.6.1仪器

2.6.1.1坩埚:石英或铂坩埚;

2.6.1.2干燥器;

2.6.1.3天平:感量0.1mg。

2.6.2试剂硫酸(GB625)。

2.6.3试验步骤称取试样2g(称准至0.0002g)于石英或铂坩埚内,缓缓炽灼至完全炭化。放冷,加0.5～1.0ml硫酸使其湿润,于低温下加热至硫酸烟雾除尽后,放入700～800℃高温炉中炽灼至完全灰化。取出,置于干燥器内放冷,在天平上称重。再于700～800℃炽灼,直至恒重。

2.6.4计算

m1－m

X4＝————×100 (5)

m2－m

式中:X4-硫酸灰分,%;

m-坩埚的质量,g;

m1-炽灼后试样和坩埚的质量,g;

m2-炽灼前试样和坩埚的质量,g。

2.7氯化物

2.7.1试剂和溶液

2.7.1.1硝酸(GB626):2M溶液;

2.7.1.2硝酸银(GB670):0.1M溶液;

2.7.1.3氯化物标准溶液Ⅰ(含氯100ppm):按GB602《杂质标准溶液制备方法》配制;

2.7.1.4氯化物标准溶液Ⅱ(含氯10ppm):吸

取10ml氯化物标准溶液Ⅰ,加水稀释至100ml;

2.7.1.5氯化物标准溶液Ⅲ(含氯5ppm):吸取5ml氯化物标准溶液Ⅰ,加水稀释至100ml;

2.7.1.6氢氧化钠(GB629):2M溶液;

2.7.1.7柠檬酸试样溶液:称取试样5g(称准至0.1g),溶于39ml2M氢氧化钠溶液中,加水稀释至50ml;

2.7.2试验步骤吸取10ml柠檬酸试样溶液(2.7.1.7)于比色管中,加水溶解并稀释至15ml,加入1ml2M硝酸溶液后,立即加入1ml0.1M硝酸银溶液,避光静置2min,在黑色背景下与标准管同时

进行横向目视比浊,其乳白度不得超过按下述方法制备的标准管。标准管的制备-测定优级、1级、2级柠檬酸时,分别吸取氯化物标准溶液Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ10ml,加水稀释至15ml,与上述试样管同时作同样处理。

2.8硫酸盐

2.8.1试剂和溶液

2.8.1.1盐酸(GB622):24%(W/V)溶液;

2.8.1.2氯化钡(GB652):25%(W/V)溶液;

2.8.1.3硫酸盐标准溶液:按GB602《杂质标准溶液制备方法》配制。

2.8.2试验步骤称取试样1g(称准至0.01g),置于50ml带塞比色管中,加水溶解并稀释至25ml,加1ml24%盐酸溶液,在30～35℃水浴中保温10min,再加3ml25%氯化钡溶液,摇匀,放置10min,与按下述方法制备的标准管进行目视比色,样品管浊度不得深于标准管。标准管的制备-测定优级、1级、2级柠檬酸时,分别吸取硫酸盐标准溶液2、3、15ml,加水稀释至25ml,与上述试样管同时作同样处理。

2.9草酸盐

2.9.1试剂和溶液

2.9.1.1盐酸(GB622);

2.9.1.2盐酸苯肼(HG3-1112):1%(W/V)溶液;

2.9.1.3铁氰化钾(GB644):5%(W/V)溶液;

2.9.1.4锌粒(GB2304);

2.9.1.5草酸(HG3-988):0.005%(W／V)标准溶液。

2.9.2试验步骤称取试样0.40g(优级称2g,称准至0.01g),溶于4ml水中,加入3ml盐酸和1g锌粒,煮沸1min,放置2min。移入盛有0.25ml1%盐酸苯肼溶液的试管中,加热至沸,迅速冷却。倒入刻度纳氏比色管内,加入等体积的盐酸和0.25ml5%铁氰化钾溶液,摇匀,放置30min与按下述方法制备的标准管进行目视比色,样品管产生的粉红色不得深于标准管。标准管的制备-吸取4ml0.005%草酸溶液,与上述试样管同时作同样处理。

2.10钙

2.10.1试剂和溶液

2.10.1.1乙醇(GB679);

2.10.1.2乙醇(GB676):2M、6M溶液;

2.10.1.3草酸铵(HG3-975):4%(W/V)溶液;

2.10.1.4钙标准溶液Ⅰ(含钙1000PPm):称取2.5g于105～110℃烘干的碳酸钙,溶于12ml6M乙酸中,加水稀释至1000ml;

2.10.1.5钙标准溶液Ⅱ(含钙10ppm):吸取1ml钙标准溶液Ⅰ,加水稀释至100ml;

2.10.1.6钙的乙酸标准溶液(含钙100ppm):吸取10ml钙标准溶液Ⅰ,用95%乙醇稀释至100ml; 2.10.1.7试样液:吸取5ml柠檬酸试样溶液(2.7.1.7),加10ml水混合。

2.10.2试验步骤吸取0.20ml钙的乙醇标准溶液和1ml4%草酸铵溶液于带塞比色管中,1min后加入1ml2M乙酸和15ml试样液,摇匀,放置15min后与

按下述方法制备的标准管目视比浊,其乳白度不得深于标准管。标准管的制备-吸取1ml4%草酸铵溶液和10ml钙标准溶液Ⅱ,加入1ml2M乙酸溶液和5ml水,摇匀,15min 后进行比浊。

2.11钡

2.11.1试剂和溶液

2.11.1.1硫酸(GB625):1M溶液;

2.11.1.2柠檬酸试样溶液:同2.7.1.7。

2.11.2试验步骤吸取5ml柠檬酸试样溶液(2.7.1.7)于带塞比色管中,用1M硫酸溶液酸化至PH为2,放放置1h。与另一支只装有柠檬酸试样溶液的参比管进行目视比浊,其乳白度不得深于参比管。

2.12铁

2.12.1试剂和溶液

2.12.1.1盐酸(GB622):24%(W/V)溶液;

2.12.1.2过硫酸铵(GB655):1%(W/V)溶液;

2.12.1.3硫氰酸铵(GB660):8%(W/V)溶液;

2.12.1.4正丁酸(HG3-1012);

2.12.1.5铁标准溶液(含铁10ppm):按GB602《杂质标准溶液制备方法》配制每毫升含铁0.1mg 的标准溶液。使用时,准确稀释10倍。

2.12.2试验步骤称取试样1g(称准至0.001g),加35ml水溶解,再加入3ml124%盐酸溶液、3ml1%过硫酸铵和3ml8%硫氰酸铵溶液,然后加水稀释至50ml,摇匀,加入20ml正丁醇,振摇分层,与按下述方法制备的标准管进行目视比色,其样品管醇层颜色不得深于标准管。标准管的制备-吸取1ml

铁标准溶液,与试样管同时作同样处理。

2.13砷按GB5009.11《食品中总砷的测定方法》第二法测定。

2.14重金属

2.14.1试剂和溶液

2.14.1.1稀乙酸(GB676):吸取6ml冰乙酸,加水稀释至100ml;

2.14.1.2氨水(GB631);

2.14.1.3酚酞指示剂:同2.2.1.2;

2.14.1.4饱和硫化氢水:按GB603《制剂及制品制备方法》配制;

2.14.15铅标准溶液(含铅10ppm):按GB602《杂质标准溶液制备方法》配制。

2.14.2试验步骤称取试样4g(称准至0.0001g)于一支带塞比色管中,用适量水溶解,加2滴酚酞指示液,以氨水中和至微红色,加2ml稀乙酸,然后再加水稀释至25ml。此样品管和按下述方法制备的标准管同时加入10ml饱和硫化氢水,摇匀,在暗处放置10min,进行目视比色,其样品管颜色不得深于标准管。标准管的制备-吸取20ml铅标准溶液于一支带塞比色管中,加入2ml稀乙酸,加水稀释至25ml。

3验收规则

3.1柠檬酸产品应由生产厂的技术检验部门进行检验,生产厂应保证出厂的柠檬酸都符合本标准的要求,每批出厂的产品都应附有质量证明书。

3.2每批重量不超过生产厂每天的产量。

3.3取样方法从每批包装的10%中选取样品,小批时不得少于3包。从选出的包数中,用取样针等取样工具伸入每包3/4处,取出不少于100g的样品,每批的总样品量不得少于2kg。将选取的样品迅速混匀,用四分法缩分后,装入干燥、洁净的广口瓶中,贴上标签,送化验室进行分析3.4检验结果如有一项指标不符合本标准要求时,应重新自两倍量的包数中取样进行复验。重新复

验的结果如仍有一项不符合本标准的要求,则整批柠檬酸为不合格品。3.5当供需双方对产品质量发生异议时,由双方协商选定仲裁单位,按本标准进行复验。

4标志、包装、运输、贮存

4.1柠檬酸产品用内衬食品用聚乙烯袋及双层牛皮纸(或双层食品用聚乙烯袋),外套麻袋或编织袋包装。每袋净重25kg、50kg,允许误差为1%。

4.2每批出厂产品都应附有质量证明书,内容包括:生产厂名称、产品名称、批号、生产日期、净重、产品质量符合本标准的证明及标准编号、检验代号。

4.3产品的外包装上应注明:生产厂名称、产品规格名称、生产日期、批号、净重,必要时外加小心轻放、易碎字样。

4.4本品在运输途中应注意防雨、防潮、防晒、不得与有毒、异味、有色粉未或腐蚀性物质混装、混运。

4.5本品应贮存于阴凉、干燥库房中,不宜露天堆放。

柠檬酸生产工艺

柠檬酸及生产工艺 摘要：柠檬酸广泛应用于食品工业、医药工业和化学工业等方面。它可利用糖质原料如土豆、地瓜中的淀粉等，在多种霉菌及黑曲菌的作用下，控制较低的温度和pH值、较高的通气量和糖浓度，用发酵法制得。 关键词：柠檬酸化工产品发酵法 1 产品说明 柠檬酸又名枸橼酸，学名3-羟基-3-羧基戊二酸，分子式C6H8O7为无色、无臭、半透明结晶或白色粉未，易溶于水及酒精。加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。 柠檬酸主要应用于食品工业，因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造。柠檬酸在化学工业上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析试剂及生化试剂，用作络合剂，掩蔽剂，配制缓冲溶液。采用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速和沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性，使污垢和灰分散和悬浮，提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂。 2 生产原理 2.1 生产方法简介 中国现有柠檬酸生产厂近百家，总年产能力约80万吨，是全球最大的柠檬酸生产国和出口国。目前，柠檬酸生产方法有水果提取法，

化学合成法和生物发酵法三种。水果提取法是指柠檬酸从柠檬、橘子、苹果等柠檬酸含量较高的水果中提取，此法提取的成本较高，不利于工业化生产。化学合成法的原料是丙酮，二氯丙酮或乙烯酮，此法工艺复杂，成本高，安全性低。而发酵法发酵周期短，产率高，节省劳动力，占地面积小，便于实现仪表控制和连续化，现已成为柠檬酸生产的主要方法。 2.2 反应方程式 C12H22011 +H20+302→2C6H8O7+4H2O (蔗糖) （柠檬酸） 3 工艺过程及流程图 3.1工艺过程 3.1.1菌种培养 在4～6波美度的麦芽汁内加入25％至30％的琼脂，然后接入黑曲霉菌种（无茵操作），在30～32℃条件下培养4天左右。这种培养方法称为“斜面培养”。将麸皮和水以1：1的比例掺拌，再加入10％的碳酸钙、0．5％的硫酸铵，拌匀后装入容量为250毫升的三角瓶中，用1．5公斤压力灭菌60分钟。接人斜面培养法培养出的菌种，培养96～120小时后即可使用。 3.1.2原料处理 湿粉渣必须经过压榨脱水，使含水量在60%左右；干粉渣含水量低，应按60％的比例补足水分；结块的粉渣需粉碎成二至四毫米颗粒。然后加入2%碳酸钙、10％至11％的米糠，掺匀后，堆放2小时，

瘦肉精检测方法

目前，检测瘦肉精的方法主要有四种，即高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱一质谱法（GC －MS）、毛细管区带电泳法（CE）和免疫分析技术（IA）。而我国结合自己的实际情况，2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种：即高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱一质谱法（GC－MS）。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法，其最低检测限为0．05μg/kg，优点是检测精确度高，而且假阳性率低；缺点是检测过程烦琐、检测时间长，需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC－MS 法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低，已将GC－MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC－MS法的缺点同HPLC相似。 (1)试剂和材料以下所有试剂，除特别注明外，均为分析纯试剂；水为符合GB／T6682规定的二级水。 ①盐酸克伦特罗对照品：含盐酸克伦特罗不得少于98．5％ ②盐酸 ③无水甲醇 ④氢氧化钠 ⑤磷酸二氢钾 ⑥磷酸 ⑦盐酸溶液取盐酸4．2ml，加水至1000ml，即得。 ⑧o．5mol／L磷酸二氢钾溶液取磷酸二氢钾68g，加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3．O，用水稀释至1000ml，即得。 ⑨0．05mol几磷酸二氢钾溶液取磷酸二氢钾6．88，加水800ml溶解并用磷酸调pH 值至3．0，用水稀释至1000mi，即得。 a．氢氧化钠溶液取氢氧化钠48，加水使溶解成100mi，即得。 b．盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg／mi) 准确称取28．3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至25ml，一20~C以下保存，有效期1年。 ⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg／mi) 取lmg／mi储备液o．5ml到50mi量瓶中，加水至50mi，2～8~C保存，有效期1个月。 ⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng／m1) 取1(ug／m1工作液o．5ml到：50mi量瓶中水至50mi，2～8~C保存，有效期1个月。 ⑿盐酸克伦特罗检测试剂盒(2～8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C，s：100mglml含碳量≥17％ (2)仪器和设备 ①酶联免疫反应读数仪 ②分析天平精度0．00001g ③天平精度0．01g ④冷冻离心机 ⑤50mi具塞离心管 ⑥匀浆机 ⑦微型振荡器 ⑧回旋振荡器 ⑨微量移液器单道20uL，50ul，100uL；多道50～250uL， ⑩干热浓缩器

柠檬酸循环

1．糖的有氧氧化.：指在机体氧供充足时，葡萄糖彻底氧化成CO2和H2O ，并释放出能量的过程。是机体主要供能方式。 反应部位：胞浆及线粒体 糖的有氧氧化过程 第一阶段：酵解途径第二阶段：丙酮酸的氧化脱羧第三阶段：三羧酸循环第四阶段：氧化磷酸化2．糖的有氧氧化 第一阶段：葡萄糖循糖酵解途径分解为丙酮酸 此阶段与无氧分解的过程相似，不同的是3-磷酸甘油醛脱氢生成NADH+H+的去向不同。 无氧的情况下，NADH+H+在细胞浆中将丙酮酸还原生成乳酸； 在有氧的情况下，NADH+H+经穿梭作用进入线粒体，氧化成水和能量（3 or 5 ATP）。 第二阶段：丙酮酸进入线粒体氧化脱羧生成乙酰CoA 此阶段1分子Glu生成2分子NADH+H+ , 5分子ATP。 TPP 丙酮酸————————→乙酰CoA 丙酮酸脱氢酶系 丙酮酸脱氢酶系包括三种酶和六种辅助因子： 三种酶——E1-丙酮酸脱氢酶组分；E2-二氢硫辛酰转乙酰基酶；E3-二氢硫辛酸脱氢酶 六种辅助因子——TPP、硫辛酸、CoA-SH、FAD、NAD+、Mg2+ 多酶复合体位于线粒体内；原核细胞在胞液中 TPP的作用：脱羧酶辅酶，将底物移入（出）脱羧酶的活性中心。 此阶段反应特点： _ 反应速度快并且为不可逆反应。 _ 反应中生成的NADH+H+直接进入电子传递链进行氧化磷酸化生成水，产生2.5 ATP。 _ 生成的乙酰辅酶A进入三羧酸循环，CO2可由肺呼出或参与机体内代谢。 分步反应： ① O E1 CH3-C-COOH + TPP——→羟乙基TPP + CO2 ② E2 羟乙基TPP + 硫辛酸——→乙酰硫辛酸+ TPP ③ E2 乙酰硫辛酸+ HS～CoA ——→乙酰-CoA + HS-L-HS ④ E3 HS-L-HS + FAD ——→硫辛酸 + FADH 2 ⑤ E3 FADH2 + NAD+ ——→FAD + NADH+H+ 砷化物对硫辛酸的毒害作用，砷化物抑制丙酮酸脱氢酶复合体的机制也表现在对α-酮戊二酸脱氢酶复合体的抑制上。 丙酮酸脱氢酶复合体的调控： 产物控制：NADH、乙酰-CoA（竞争性抑制）；丙酮酸脱氢酶组分的磷酸化（失活）和去磷酸化（激活） E1的磷酸化和去磷酸化是使丙酮酸脱氢酶复合体激活或失活的重要方式。 由E2上的激酶和磷酸酶起作用 3．柠檬酸循环TAC 包括合成、加水、脱水、脱氢、脱羧 柠檬酸循环历程： （一）草酰乙酸与乙酰CoA缩合成柠檬酸

瘦肉精快速检测

瘦肉精快速检测

瘦肉精快速检测 2011年04月20日11:00 阅读次数：13 来源：食品安全快速检测网 [字号：大中小] 瘦肉精是一类药物，而不是一种特定的物质，是指能够促进瘦肉生长的饲料添加剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂（β-agonist）的药物，比如在中国造成中毒的克仑特罗（clenbuterol）和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺（Ractopamine）。 瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。而在台湾，由于从美国进口的猪肉里含有瘦肉精，几乎挑起一场政治争端。由于西方国家一般不消费动物内脏（猪肉一般不含瘦肉精，但内脏特别是肝脏则会残留瘦肉精），因而在美国、加拿大、新西兰等国，瘦肉精这类物质的使用是合法的。其它这样类似药物还有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林（erbutaline)等，同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大，因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用。 早在2002年，农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局就公告，明令禁止在饲料和动物饮用水中添加盐酸克伦特罗和莱克多巴胺等7种瘦肉精。而据有关专业人士透露，各地在进行瘦肉精检测中基本都只检测盐酸克伦特罗，莱克多巴胺只有个别地方有检测。而正因为如此，一些不法养殖户就选择回避盐酸克伦特罗，改用莱克多巴胺等其他品种的瘦肉精。 为了较彻底排查检测“瘦肉精”，最好检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇三种“瘦肉精”。 排查常用的方法是胶体金快速检测卡法，该方法操作方便、快捷，整个检测过程只需几分钟；检测灵敏度高;结果直观；胶体金本身为红色，不需加入发色剂，对人体无害；标记物稳定，携带、储存方便；成本低，无需仪器设备。非常适合于基层执法部门对“瘦肉精”的快速筛查。 胶体金速测卡原理： 胶体金速测卡的检测原理是竞争性免疫层析。将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移, Ag- Ab1 复合物被固相化在质控线处的抗Ab1 抗体(Ab2)所结合,形成Ab1- Ag- Ab2 复合物,使质控线显色。 食品安全快速检测技术研究中心根据此原理成功研发出盐酸克伦特罗速测卡、莱克多巴胺速测卡和沙丁胺醇速测卡，为基层执法部门对“瘦肉精”的快速筛查提供了简便、快捷、经济、适用的快速检测手段。 瘦肉精快速检测法-盐酸克仑特罗快速检测卡 2011年04月11日16:44 阅读次数：6 [字号：大中小] 盐酸克仑特罗（瘦肉精）速测卡使用说明书

综合实验1：柠檬酸发酵及产物提取

综合实验1：柠檬酸发酵及产物提取 （一）柠檬酸发酵 一、实验原理 柠檬酸发酵为典型的有机酸发酵，淀粉质原料经淀粉酶作用水解为葡萄糖，葡萄糖经EMP途径氧化为丙酮酸，丙酮酸进一步被氧化脱羧生成乙酰CoA，就一般能量代谢过程而言，生成的乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸后进入三羟酸循环，通过三羟酸循环进行有氧呼吸的能量代谢。但就柠檬酸产生菌而言，由于其顺乌头酸水合酶和异柠檬酸脱氢酶活性很低，而柠檬酸合成酶的活性很高，因而大量积累柠檬酸，草酰乙酸的提供则仍通过丙酮酸羧化而成，柠檬酸的生成途径如下式： 2 C6H12O6 + 3 O2→2 C6H8O7 + 4 H2O 国内目前柠檬酸发酵所采用的原料主要是山芋干及废糖蜜。 二、实验器材 （一）材料 1．菌种：黑曲霉2．蔗糖、硫酸铵等 （二）主要仪器设备 1．旋转式摇床、超净工作台、15L发酵罐等 三、操作步骤 1．种子培养基制备： 马铃薯培养基配方:(1000ml) 马铃薯（去皮）200g 葡萄糖（或蔗糖）20g 琼脂15~25g 水1000ml 自然pH 2．种子液培养：将已灭菌的种子培养基接入一环斜面孢子于35℃±1℃、250r.p.m条件下培养24~36h。 3．种子培养液质量要求：镜检菌丝生长健壮，结成菊花形小球，球直径不超过100μm，每毫升含菌球数在1~2万之间，无异味、无杂菌污染；pH2~2.5；酸度1.5~2.0%。 4．发酵培养基制备：蔗糖15%，硫酸铵0.4%，磷酸二氢钾0.1%，7水合硫酸镁0.025%。 5. 上罐灭菌（操作同实验一） 5．发酵：将培养好的种子液按发酵培养液体积的5%接入到已灭菌的发酵培养基中，于35℃±1℃、200r/min条件下发酵4天。 6.分别在0，24，48，72，96小时测定一下参数。 四、实验结果 1．对种子液进行镜检，画下菌丝形态，并测定菌球直径及粗略估算每ml种子液中的菌球数。 2．测定成熟发酵液的酸度，并就发酵结束后的菌体形态作出描述。 3．计算柠檬酸发酵的转化率，即每100克葡萄糖经转化所能生成的柠檬酸克数，柠檬酸酵的理论转化率按下列反应计算应为106.7%。 总反应式：2C6H12O6+3O2→2C6H8O7+4H2O 180 192 理论转化率=192/180=106.7%

柠檬酸的作用及功效

柠檬酸是有机酸中第一大酸，由于物理性能、化学性能、衍生物的性能，是广泛应用于食品、医药、日化等行业最重要的有机酸。下面对柠檬酸的用途具体分析一下。 1.用于食品工业 因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造。在所有有机酸的市场中，柠檬酸市场占有率70%以上，到目前还没有一种可以取代柠檬酸的酸味剂。一分子结晶水柠檬酸主要用作清凉饮料、果汁、果酱、水果糖和罐头等的酸性调味剂，也可用作食用油的抗氧化剂。同时改善食品的感官性状，增强食欲和促进体内钙、磷物质的消化吸收。 2.用于化工、制药和纺织业 柠檬酸在化学技术上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析试剂及生化试剂;用作络合剂，掩蔽剂;用以配制缓冲溶液。采用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性;使污垢和灰分散和悬浮;提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂;可用作测试建筑陶瓷瓷砖的耐酸性的试剂。 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液用于烟气脱硫。我国煤炭资源丰富，是构成能源的主要部分，然而一直缺乏有效的烟气脱硫工艺，导致大气SO2污染严重。目前，我国SO2年排放量已近4000万吨，研究有效的脱硫工艺，实为当务之急。柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液由于其蒸气压低、无毒、化学性质稳定、对SO2吸收率高等原因，是极具开发价值的脱硫吸收剂。 4.用于禽畜生产

在仔猪饲料中添加柠檬酸，可以提早断奶，提高饲料利用率5%～10%，增加母猪产仔量。在生长育肥猪日粮中添加1%～2%柠檬酸，可提高日增重，降低料肉比，提高蛋白质消化率，降低背脂厚度，改善肉质和胴体特性。柠檬酸稀土是一种新型高效饲料添加剂，适用于猪、鸡、鱼、虾、牛、羊、兔、蚕等各种动物，具有促进动物生长，改善产品品质，提高抗病能力及成活率，提高饲料转化率，缩短饲喂周期等特点。此时我们不得不承认，柠檬酸的用途实在是很广。 5.用于化妆品 柠檬酸属于果酸的一种，主要作用是加快角质更新，常用于乳液、乳霜、洗发精、美白用品、抗老化用品、青春痘用品等。角质的更新有助于皮肤的中黑色素的剥落，毛孔的收细，黑头的溶解等。例如碧欧泉活泉舒敏洁面摩丝，令皮肤柔软、舒适，肤色清新、纯净。 6.用于杀菌 柠檬酸与80℃温度联合作用具有良好杀灭细菌芽孢的作用，并可有效杀灭血液透析机管路中污染的细菌芽孢。享有“西餐之王”美誉的柠檬具有很强的杀菌作用，对食品卫生很有好处，再加上柠檬的清香气味，人们历来喜欢用其制作凉菜，不仅美味爽口，也能增进食欲。 7.用于医药 在凝血酶原激活物的形成及以后的凝血过程中，必须有钙离于参加。枸橼酸根离子与钙离子能形成一种难于解离的可溶性络合物，因而降低了血中钙离子浓度，使血液凝固受阻。本品在输血或化验室血样抗凝时，用作体外抗凝药。 除垢吧整理：https://www.wendangku.net/doc/4f2138463.html,

离子交换法提取柠檬酸概述

离子交换法提取柠檬酸概述 应富祥 (安徽省皖东化工厂,天长　239300) 柠檬酸生产工艺,目前均采用钙盐法,劳动强度大,所产生的硫酸钙废渣,污染环境,而且提取收率低,能耗大,往往由于水解和分离不彻底,使柠檬酸混杂于废渣中废弃,严重影响收率。离子交换法是提取柠檬酸的新工艺,值得推广。过去曾有人用离子交换膜、电渗析法生产柠檬酸,由于种种原因,没能成功,以后有人采用离子交换法,但因当时国产离子交换树脂品种少,价格高,物化性能也满足不了工艺要求,造成提取收率低,成本高,母液中残留其它有机杂酸和色素,结果仍需采用“钙盐法”进行净化,故无明显优势,没有得到发展。离子交换法新工艺,工艺简单,容易操作,连续化管道化生产,自动化操作,大大减轻劳动强度,不产生硫酸钙废渣,提取收率可由旧工艺的70%提高到90%以上。新工艺简单易行。将发酵液过滤后用颗粒活性炭脱色除杂,经特制的高强度高交换容量的弱碱性阴离子交换树脂交换吸附,饱和后用氢氧化钠或氢氧化铵进行洗脱,洗脱液再经特制的大孔强酸性阳离子交换树脂除杂,用氢离子交换使柠檬酸钠(铵)转化为柠檬酸,经浓缩结晶可获得质量优良的柠檬酸产品。结晶母液再经阴离子交换树脂除杂,再浓缩结晶,也获得合格产品。 离子交换法提取柠檬酸工艺流程如下 : 1　离子交换法提取柠檬酸交换洗脱原理 1.1　吸附 阴离子交换树脂以OH 型进行交换与吸 附 3R OH+C 6H 8O 7→R CHO+3H 2O 1.2　洗脱 采用氢氧化钠或氢氧化铵为洗脱剂 R 3C 6H 5O 7+3NaOH →Na 3C 6H 5O 7+3R OH 如用氨水洗脱: R 3C 6H 5O 7+3NH 3?H 2O →(NH 4)3C 6H 5O 7+3R OH 1.3　利用大孔阳离子交换树脂 以氢离子交换除阳离子,使柠檬酸盐成为柠檬酸,阳离子交换树脂经酸再生后仍成为氢型。 Na 3C 6H 5O 7+3RSO 3H →3RSO 3N a +C 6H 8O 7(NH 4)3C 6H 5O 7+3RSO 3H →3RSO 3(NH 4)3+C 6H 8O 7 再生: RSO 3Na +HCl →RSO 3H+NaCl RSO 3(NH 4)3+HCl →RSO 3H+NH 4Cl 注:R 为阳树脂骨架,R 为阴树脂骨架。 2　离子交换树脂型号的选择 2.1　专用阴树脂与一般的201×7比较其体积交换量m mol/ml 为2.7,而201×7为1.4,所用专用的阴树脂比较优越,体积几乎高出一倍。 2.2　专用的大孔强酸阳树脂与一般的001×7比较 其体积交换量(mmol/ml)为1.57,0.01×7为1.8,但大孔强酸树脂不易破碎寿命 24总第95期1998年第5期 安　徽　化　工

瘦肉精快速检测方法

????????????????????????????????????????????????????????????????????????既快速又精确 目前检测瘦肉精的方法有以下几种，胶体金快检卡是最快速简单的一种方法，适用于多种流通领域和各种实验室 ??一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精），是一种饲料添加剂，能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例，加速动物生长，但是它能够长期残留在动物体内，一般的烹饪加热不能将其消除。人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品，便会对人们的健康造成严重危害。目前已有的快速检测方法（试剂条等），均不能定量，而定量的检测手段，大都依赖于酶联免疫（ELLSA）和高效液相色谱（HPLC）等技术，这些方法有些步骤繁琐，非常耗时，有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员，并且都不能实时地监视动态反应过程等。 研制的HPSPR－6000表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测，有效地克服了现有方法的缺点，其优点有：（1）盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb，接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限（0.05～1.0ppb）；（2）

每个样品检测时间为?10min，与目前常规方法最低需要2～3h相比，检测时间缩短10倍以上；（?3）样品前处理简单、免标记；（?4）能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。 二．快检卡：猪肉方面，目前使用胶体金试纸，只需要取一些猪肉样品，放在离心管中，在水浴中煮10分钟，将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液，混匀，用于检测即可，几个ppb（μg/Kg，ng/g）的瘦肉精就能被测出。北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb，全程只需十几分钟。 ?盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法，在微孔条上预包被克仑特罗的单抗，克仑特罗的标准品（或样本中的残留物克仑特罗胺药物）与酶标记克仑特罗抗原竞争结合包被的莱克多巴胺抗体，酶标记物放大信号后，加入底物显色，终止液终止反应，酶标仪450nm测定其吸光值。样本的吸光值与其所含残留物克仑特罗药物的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应克仑特罗药物的含量。 ?“瘦肉精” 1ng/ml，检测

瘦肉精检测原理及操作步骤37条必备知识

瘦肉精检测原理及操作步骤37条必备知识 ?瘦肉精检测原理及操作步骤？ 0 个回复 - 71 次查看 一、测定原理 “瘦肉精”克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测 定的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体（第二抗体）。加入兔抗克仑特罗特异性抗体（第一抗体）与第二抗体 ... 2011-6-3 18:10 - 畜牧联盟010 - 兽药应用 ?广元市加强禽流感、瘦肉精等监测工作 0 个回复 - 75 次查看 全市畜牧系统按照食品质量安全执法年活动要求，在加强日常畜产品质量安全监管的同时，进一步加强了在节假日、庆典活动等重点时段畜产品的质量安全检测工作。近日，我市开展了禽流感、口蹄疫等重大动物疫病、瘦肉精、 ... 2011-6-3 18:03 - 畜牧联盟003 - 兽药应用 ?辽宁猪牛“瘦肉精”抽检全部合格 0 个回复 - 108 次查看 为切实加强元旦、春节期间畜产品质量安全监管，保障广大人民群众消费安全，辽宁省动物卫生监督管理局组织省、市畜产品质量检测机构，于2008年12月19日～29日在全省14个市开展了猪肉、牛肉中“瘦肉精”及其替代 ... 2011-6-3 18:00 - 畜牧联盟004 - 兽药应用 ?瘦肉精超标同批生猪要“连坐” 0 个回复 - 51 次查看 《广州市生猪屠宰检疫和违禁药物检测实施办法》下月20日正式施行本报讯(记者严慧芳)同批检验的生猪，经酶联免疫吸附测定法检测发现有不合格样品的，将判定此检验批的生猪不合格。昨日，记者从广 ...

2011-6-3 17:52 - 畜牧联盟004 - 兽药应用 ?瘦肉精 0 个回复 - 28 次查看 克伦特罗是一种β-兴奋剂，添加于饲料中能提高几种家畜包括猪的瘦肉率。克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它β-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。zimmer（19 ... 2011-6-3 17:45 - 畜牧联盟006 - 兽药应用 ?山东肉羊在河北被检出瘦肉精 198只羊被封存 0 个回复 - 182 次查看 198只羊被封存两名嫌疑人被控制 4日晚，山东省庆云县召开新闻通报会表示，在输冀肉羊发现“瘦肉精”以后，庆云县迅速侦破案件，将两名违法嫌疑人控制，同时对全县畜产品质量安全进行拉网检查。河北 ... 2011-6-3 12:56 - 畜牧联盟007 - 行业动态 ?瘦肉精使用向牛羊养殖扩散防范形势严峻 0 个回复 - 140 次查看 据中国之声《央广新闻》13时19分报道，元旦和春节将至，肉类食品需求旺盛，违法使用瘦肉精问题又有所抬头。为此，农业部要求以瘦肉精等违禁药物为重点，加大对生猪、肉牛养殖的监管力度，确保畜产品质量安全。据 ... 2011-6-3 12:35 - 畜牧联盟002 - 行业动态 ?山东流入河北省青县的“瘦肉精”肉羊已销毁 0 个回复 - 8 次查看 从河北省畜牧兽医局获悉，由山东流入我省的192只“瘦肉精”肉羊，目前已被全部扑杀并无害化处理。 3月31日晚，从山东省庆云县流入我省青县戴庄子村肉羊192只。根据群众举报，这批羊可能存在问题。4月1日凌 ... 2011-6-3 09:28 - 畜牧联盟004 - 饲养管理

瘦肉精的检测步骤(精)

瘦肉精快速检测卡操作步骤 一、【检测原理】 本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。试剂含有被预先固定于膜上检测带（T ）的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。检测限为3ng/ml（3ppb ）。 二、【样品制备】 肉：装入大约4克碎的肉样本（肉泥）于离心管中（酱猪牛肉加2ml 水或PBS ），盖紧管盖，在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟；吸取煮出的溶液到 1.5ml 的离心管中。如有明显黄色浑浊请离心（3000rpm,5min ），取上清检测。如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min，取上清检测。 三、【操作步骤】 1. 在进行测试前先仔细阅读使用说明书，使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。 2. 从原包装中取出试剂，打开后平放在桌面上，请在1小时内尽快使用。 3. 吸取待检样品溶液，缓慢滴加80~100μl(约2~3滴）于加样孔中，加样后开始计时。 4. 在5分钟内读取结果，超过5分钟的结果判读无效。 四、【结果判定】 阳性：位置C 显示出红色条带，位置T 无条带或颜色非常模糊时判为阳性。阴性：位置C 显示出红色条带，位置T 同时出现红色条带时，判为阴性。无效：

位置C 不显示出红色条带，则无论位置T 显示出红色条带与否，该试纸卡均判为无效。 【贮存及有效期】 冷藏，忌冷冻，有效期12个月。 【注意事项】 1. 请按照操作步骤进行测试，操作时请勿触摸试纸显示区。 2. 如购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请到购买处更换。 3. 本品为一次性产品，请勿重复使用。 4. 出现阳性结果，建议用本卡复查一次。 5. 自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。 6. 由于样品（尿和饲料）的差异，有的检测线可能偏淡或偏暗，但只要出现条带，就可判定为阴性结果。 7. 若需直接检测标准品，请用PBS 或阴性样品配制。

柠檬酸提取及鉴定实验方案

柠檬酸的提取及鉴定 实验目的 学习钙盐沉淀硫酸转溶提取柠檬酸的方法； 学习结晶精制柠檬酸的方法 实验材料 发酵液：黑曲霉玉米粉发酵培养基； 仪器：旋转薄膜蒸发仪、水浴锅； 其它材料：0.1mol/L NaOH、0.1M H2SO4溶液、固体碳酸钙粉末 实验原理钙盐沉淀法的原理 碳酸钙（或氢氧化钙）可与发酵液中的柠檬酸发生中和反应，生成难溶性的柠檬酸钙沉淀，柠檬酸钙在80～90度之间溶解度极低，通过过滤（或离心）的方法将其与糖、蛋白质、其他有机酸、无机离子等可溶性杂质分离开。 在柠檬酸钙沉淀物中加入稀硫酸在80～85度之间进行酸解反应，生成柠檬酸和硫酸钙沉淀，硫酸钙在80度左右溶解度极低，趁热过滤（或离心）可将其与柠檬酸分离，获得较纯净的柠檬酸酸解液。 后续工艺：柠檬酸酸解液再进行脱色、阳离子交换层析除去杂质，最后可以通过结晶法获得纯净的柠檬酸晶体。 结晶法的原理原理：通过冷却、挥发溶剂等方法使溶液达到过饱和状态时，具有一定形状和大小的固态粒子可从均匀的溶液中析出，称为结晶。 结晶过程：1、产生晶核；2、晶核成长过饱和度是这两个过程的推动力。 影响晶体质量的因素： 1、溶液中杂质少，产品纯度较高； 2、冷却结晶时，温度要缓慢降低，防止晶核大量形成，形成粒度不一的晶体； 3、控制搅拌速度，结晶初期可搅拌促使晶核产生，晶核成长时降低搅拌速度，防止将长成的晶体打碎。 实验步骤1、黑曲霉玉米粉发酵液八层纱布过滤除去菌体和残渣量筒测量清液体积V0； 2、量取5mL清液、5mL蒸馏水于锥形瓶中，再滴入2～3滴酚酞用0.1M NaOH 溶液滴定，滴定终点为淡红色，30s内不褪色，记下消耗的NaOH溶液 体积V1； M酸（g）＝V1(mL)×0.1(mol/L)×0.001×1/3×210×V0/5 M碳酸钙（g）＝M酸×（V0－5）/V0×1/210×3/2×100 3、钙盐沉淀： 称取一定质量的碳酸钙粉末，边搅拌边缓慢地加入到剩余的清液（止产生大量的泡沫使溶液溢出），85度反应10min（使柠檬酸钙沉淀下来），趁热抽滤，并用与沉淀体积相当的沸水涤沉淀物2次（除去残糖、蛋白质等可溶性杂质）； 4、酸解：VH2SO4（mL）＝M碳酸钙/100/0.1(mol/L)×1000

柠檬酸的作用

柠檬酸是一种重要的有机酸，又名枸橼酸，无色晶体，常含一分子结晶水，无臭，有很强的酸味，易溶于水。其钙盐在冷水中比热水中易溶解，此性质常用来鉴定和分离柠檬酸。结晶时控制适宜的温度可获得无水柠檬酸。在工业，食品业，化妆业等具有极多的用途。：Citric Acid溶解性:溶于水、乙醇、丙酮，不溶于乙醚、苯，微溶于氯仿。水溶液显酸性。 编辑本段物理性质 在室温下，柠檬酸为无色半透明晶体或白色颗粒或白色结晶性粉末，无臭、味极酸，在潮湿的空气中微有潮解性。它可以以无水合物或者一水合物的形式存在：柠檬酸从热水中结晶时，生成无水合物；在冷水中结晶则生成一水合物。加热到78 ℃时一水合物会分解得到无水合 物。在15摄氏度时，柠檬酸也可在无水乙醇中溶解。 柠檬酸结晶形态因结晶条件不同而不同，有无水柠檬酸C6H8O7也有含结晶水的柠檬酸2C6H8O7.H2O、C6H8O7.H2O或C6H8O7.2H2O。 编辑本段化学性质 从结构上讲柠檬酸是一种三羧酸类化合物，并因此而与其他羧酸有相似的物理和化学性质。加热至175 ℃时它会分解产生二氧化碳和水，剩余一些白色晶体。柠檬酸是一种较强的有机酸，有3个H+可以电离；加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。 柠檬酸是有机酸中第一大酸，由于物理性能、化学性能、衍生物的性能，是广泛应用于食品、医药、日化等行业最重要的有机酸。 1.用于食品工业；因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造。在所有有机酸的市场中，柠檬酸市场占有率70%以上，到目前还没有一种可以取代柠檬酸的酸味剂。一分子结晶水柠檬酸主要用作清凉饮料、果汁、果酱、水果糖和罐头等的酸性调味剂，也可用作食用油的抗氧化剂。同时改善食品的感官性状，增强食欲和促进体内钙、磷物质的消化吸收。无水柠檬酸大量用于固体饮料。柠檬酸的盐类如柠檬酸钙和柠檬酸铁是某些食品中需要添加钙离子和铁离子的强化剂。柠檬酸的酯类如柠檬酸三乙酯可作无毒增塑剂，制造食品包装用塑料薄膜，是饮料和食品行业的酸味剂，防腐剂。 2.用于化工和纺织业：柠檬酸在化学技术上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析 试剂及生化试剂；用作络合剂，掩蔽剂；用以配制缓冲溶液。采用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性；使污垢和灰分散和悬浮；提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂；可用作测试建筑陶瓷瓷砖的耐酸性的试剂。 服装的甲醛污染已是很敏感的问题，柠檬酸和改性柠檬酸可制成一种无甲醛防皱整理剂，用

瘦肉精检测方法有哪些【养生小知识】

瘦肉精检测方法有哪些 文章导读 瘦肉精最早原用于治疗支气管哮喘，但是它对人体产生的副作用太大，所以 在全球范围内早就被禁用了。但很多肉品商家将其用于饲料中以降低成本，若人类长期食 用有该残留物质的肉品，对心血管造成不良影响，从而诱发恶性肿瘤。 所以检测肉品中瘦肉精得从源头把控，目前检测方法有如下几种：气相色 谱-质谱法(GC-MS) GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的 定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、 定量分析，而且具更高的检测极限。Fente C. A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留，最 低检测限为5ng/g;Pteer Batioens应用气相色谱-串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织 中的CLB含量进行检测，最低检测限为2ng/g;刘琪等用GC-MS法(EI离子源)检测猪尿中 的CLB，检测限为0.5ng/mL;VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测 尿提取物中的CLB，衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描，会产生更高的灵敏度。 另外，GC-MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。因此，我国将GC-MS 法定为检测CLB的确证性方法(NY/T468~2001)。高效液相色谱法(HPLC) HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且， HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分 析过程的自动化。黄士新等(1995)应用紫外检测器，在λ=243nm，色谱柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速:1mL/min，柱温:室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB 残留，最低检测限可达2ng/g。国外有人应用HPLC (二极管阵列检测器)测定动物性食品 中CLB残留，测得最低检测限为1.26ng/g，回收率达98.9%。目前，我国已将HPLC法 作为检测CLB残留的半确证性方法，最低检测限范围为1~15ng/g，其优点是专属性好、 选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低;缺点是样品处理时间长，检测过程烦琐、难 于操作，需贵重仪器，在实际应用中受到一定的限制。酶联免疫吸 附法(ELISA ) 利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，通过化学方 法将植物辣根过氧化物酶(HRP)与克伦特罗(CL)结合，形成酶偶联克伦特罗。将固相载体 上已包被的抗体(羊抗兔IgG抗体)与特异性的抗克伦特罗抗体结合，然后加入待测克伦特 罗和酶偶联克伦特罗，它们竞争性与克伦特罗抗体结合，洗涤后加底物，根据有色物的变 化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多，则被结合的酶偶联克伦特罗少，有色物量就 少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量，比色的最佳波长为450 nm，参比波 长应大于600 nm。胶体金免疫层析法(Colloidal gold immunochromatography) 利用竞争法胶体金免疫层析技术，检测液中的Clen与金标垫上的金标抗体结合形成复合 物，若Clen在检测液中浓度低于灵敏度值，未结合的金标抗体流到T区时，被固定在膜 上的Clen-BSA偶联物结合，逐渐凝集成一条可见的T线;若Clen浓度高于灵敏度值，金 标抗体全部形成复合物，不会再与T线处Clen-BSA偶联物结合形成可见T线。未固定的

瘦肉精快速检测方法[参考提供]

既快速又精确 目前检测瘦肉精的方法有以下几种，胶体金快检卡是最快速简单的一种方法，适用于多种流通领域和各种实验室

一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合，因为样品数量巨大，如果均外部测试一是费用非常高，二是送样、检测、获得结果的周期长，效率低，无法满足实际应用的需求，所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的，对自己用检测出值得怀疑的样本再送检测机构检测。 一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精），是一种饲料添加剂，能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例，加速动物生长，但是它能够长期残留在动物体内，一般的烹饪加热不能将其消除。人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品，便会对人们的健康造成严重危害。目前已有的快速检测方法（试剂条等），均不能定量，而定量的检测手段，大都依赖于酶联免疫（ELLSA）和高效液相色谱（HPLC）等技术，这些方法有些步骤繁琐，非常耗时，有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员，并且都不能实时地监视动态反应过程等。 研制的HPSPR－6000 表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测，有效地克服了现有方法的缺点，其优点有：（1）盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb，接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限（0.05～1.0ppb）；（2）每个样品检测时间为10min，与目前常规方法最低需要2～3h 相比，检测时间缩短10 倍以上；（3）样品前处理简单、免标记；（4）能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。 二．快检卡：猪肉方面，目前使用胶体金试纸，只需要取一些猪肉样品，放在离心管中，在水浴中煮10分钟，将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液，混匀，用于检测即可，几个ppb（μg/Kg，ng/g）的瘦肉精就能被测出。北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb，全程只需十几分钟。 盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法，在微孔条上预包被克仑特罗的单抗，克仑特罗的标准品（或样本中的残留物克仑特罗胺药物）与酶标记克仑特罗抗原竞争结合包被的莱克多巴胺抗体，酶标记物放大信号后，加入底物显色，终止液终止反应，酶标仪450 nm测定其吸光值。样

柠檬酸及生产工艺

艺工及生产柠檬酸柠檬酸的简介.一 1. 柠檬酸的理化性质 柠檬酸（Citric acid），又称枸椽酸，是一种三元羧酸,其学名为3-羟基-3-羧基戊二酸，分子式C6H8O7(无水物)，在自然界中存在于柠檬、柑桔、梅、李子、梨、桃、无花果等水果中。柠檬酸具有无毒，无色，无臭特性，一般为半透明结晶或白色粉末，易溶于水、乙醇、乙腈、乙醚等[1]，不溶于苯，微溶于氯仿。相对密度cm3，熔点153℃(失水)。柠檬酸结晶形态因结晶条件不同而不同，有无水柠檬酸，也有含结晶水的柠檬酸。在干燥空气中微有风化性，在潮湿空气中有潮解性，175℃以上分解放出水及二氧化碳。柠檬酸是一种较强的有机酸，有3个H＋可以电离；水溶液呈酸性，加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。 2. 柠檬酸的用途 柠檬酸具有令人愉悦的酸味，入口爽快，无后酸味，安全无毒，被广泛用作食品和饮料的酸味剂；能与二价或三价的阳离子形成络合物，被用作金属加工的鳌合剂和洗净剂（起软化水作用的洗净力补充剂）；还能衍生形成许多衍生物，可用作有机化学工业的原料。因此被广泛用于食品饮料、医药化工、清洗与化装品、 有机材料等领域，是目前世界需求量最大的一种有机酸[2]，到目前还没有一种可以取代柠檬酸的酸味剂。 二.生产技术 柠檬酸的生产方法共可分为3 种: 水果提取法,化学合成法, 生物发酵法

三。发酵法又分为固体发酵法和液体深[18]，目前以发酵法生产柠檬酸为主[17]种 不适合大规模的生产应用。固态发酵能耗小但劳动力大，占地面积大，层发酵法。深层通风发酵法采用不锈钢罐体，机械搅拌通风，微生物在液体相中分布均匀，发酵时不生成孢子，全部菌体细胞用于代谢柠檬酸，发酵速度高，实现了机械化或自动化操作，利于大规模生产。 生物发酵法制取柠檬酸.三 本工艺选择的原料及生产方法1. 本次生产工艺设计以薯干为原料，采用直接粉碎、调浆、液化，进行好气液体深层发酵，钙盐法提取，最后结晶、干燥得到柠檬酸 工艺流程2. 接收糖浆后，根据糖浆组成作适当的处理或配制，配成发酵原料，进行连续杀菌并冷却后，进入发酵罐，加入菌种和净化压缩空气后进行发酵；发酵液经升中和处理；再经过过滤洗涤，得到柠檬酸钙固温、过滤处理后，进入中和罐，用酸解，并加入活性炭进行脱色；然后，通过带式过滤机体，送入酸解罐，再添加浓缩，酸解过滤液经离子交换处理后，及废炭；进行蒸发、过滤、酸解过滤，除去 再进行结晶；结晶后，用离心机进行固液分离，对得到的湿柠檬酸晶体进行干燥与筛选，最后得到成品柠檬酸。 淀粉筛配 酸

柠檬酸的提取过程

柠檬酸的提取过程 发酵醪液中含有大量的水、柠檬酸及其他有机酸、淀粉残渣和蛋白质等杂质，需要将柠檬酸从其中提取纯化。提取纯化工艺有直接提取法和钙盐法两种，应用较多的是钙盐法。 (l)过滤柠檬酸发酵液是固液混合物，固体是菌丝体和不溶于水的物质。一般采用加压过滤的方法实现固液分离。常用的是板框过滤和真空抽滤两种方式。 (2)中和在滤液中加入碳酸钙，使其与柠檬酸形成柠檬酸钙盐沉淀，达到与其他可溶性杂质分离的目的。 2C6H8O7.H20+3CaCO3-Ca3(C6H507)2·4H20+3CO2↑+H2O (3)酸解与脱色酸解是将浓硫酸与柠檬酸钙作用，除去硫酸钙及部分酸不溶性杂质，得到柠檬酸溶液的操作。 Ca3(C6H5O7)2.4H2O+3H2S04+4H2O-2(C6H8O7.H2O)+3(CaS04·2H20)脱色是用活性炭或脱色树脂除去有色的物质，常用的是活性炭脱色。 (4)离子交换利用强酸性的阳离子交换树脂，除去柠檬酸液中的各种阳离子。以钙离子为例： (5)浓缩经离子交换后的柠檬酸液，其含量仅为15%-20%。需进一步蒸发浓缩，使其结晶析出。借助加热，将酸中的水分蒸发，以提高酸的浓度。一般采用减压浓缩，以提高蒸发速度，避免柠檬酸的分解。 (6)结晶浓缩后的柠檬酸液自然降温，冷却水和冷冻盐水降温形成结晶，经离心机甩干，分出母液，滤饼进去干燥。 (7)干燥与包装离心后的柠檬酸晶体含有游离水，需要进一步干燥。干燥的方式有烘房干燥、沸腾干燥和振动干燥等，常用的是振动干燥。 2002年，天津轻工业学院开发研制出“吸交法”提取柠檬酸新工艺。该工艺将获得的柠檬酸清液经过“吸交”树脂吸附，使柠檬酸与发酵中的残糖、蛋白质、纤维等杂质分离，再用解脱剂洗脱从而获得较纯的柠檬酸液，再经精制、浓缩、结晶获得成品柠檬酸。该工艺摆脱了传统的“钙盐法”提取工艺，使提取率提高

柠檬酸主要用途

主要用途 用于食品工业 因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造。在所有有机酸的市场中，柠檬酸市场占有率70%以上，调味剂，也可用作食用油的抗氧化剂。同时改善食品的感官性状，增强食欲和促进体内钙、磷物质的消化吸收。无水柠檬酸大量用于固体饮料。柠檬酸的盐类如柠檬酸钙和柠檬酸铁是某些食品中需要添加钙离子和铁离子的强化剂。柠檬酸的酯类如柠檬酸三乙酯可作无毒增塑剂，制造食品包装用塑料薄膜，是饮料和食品行业的酸味剂，防腐剂。 用于化工和纺织业 柠檬酸在化学技术上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析试剂及生化试剂；用作络合剂，掩蔽剂；用以配制缓冲溶液。采用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性；使污垢和灰分散和悬浮；提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂；可用作测试建筑陶瓷瓷砖的耐酸性的试剂。

服装的甲醛污染已是很敏感的问题，柠檬酸和改性柠檬酸可制成一种无甲醛防皱整理剂，用于纯棉织物的防皱整理。不仅防皱效果好，而且成本低。 用于环保 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液用于烟气脱硫。中国煤炭资源丰富，是构成能源的主要部分，然而一直缺乏有效的烟气脱硫工艺，导致大气SO2污染严重。研究有效的脱硫工艺，实为当务之急。柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液由于其蒸气压低、无毒、化学性质稳定、对SO2吸收率高等原因，是极具开发价值的脱硫吸收剂。 用于禽畜生产 在仔猪饲料中添加柠檬酸，可以提早断奶，提高饲料利用率5%～10%，增加母猪产仔量。在生长育肥猪日粮中添加1%～2%柠檬酸，可提高日增重，降低料肉比，提高蛋白质消化率，降低背脂厚度，改善肉质和胴体特性。柠檬酸稀土是一种新型高效饲料添加剂，适用于猪、鸡、鱼、虾、牛、羊、兔、蚕等各种动物，具有促进动物生长，改善产品品质，提高抗病能力及成活率，提高饲料转化率，缩短饲喂周期等特点。 用于化妆品 柠檬酸属于果酸的一种，主要作用是加快角质更新，常用于乳液、乳霜、洗发精、美白用品、抗老化用品、青春痘用品等。角质的更新有助于皮肤的中黑色素的剥落，毛孔的收细，黑头的溶解等。 用于杀菌 柠檬酸与80℃温度联合作用具有良好杀灭细菌芽孢的作用，并可有效杀灭血液透析机管路中污染的细菌芽孢。享有“西餐之王”美誉的柠檬具有很强的杀菌作用，对食品卫生很有好处，再加上柠檬的清香气味，人们历来喜欢用其制作凉菜，不仅美味爽口，也能增进食欲。 用于医药 在凝血酶原激活物的形成及以后的凝血过程中，必须有钙离子参加。枸橼酸根离子与钙离子能形成一种难于解离的可溶性络合物，因而降低了血中钙离子浓度，使血液凝固受阻。该品在输血或化验室血样抗凝时，用作体外抗凝药。 柠檬酸的化学加工或深加工 柠檬酸另一个主要用途是深加工，这是一个丰富的产业链。 药用价值 ⑴柠檬酸具有防止和消除皮肤色素沉着的作用。中国中医认为，柠檬性温、味苦、无毒，具有止渴生津、祛暑安胎、疏滞、健胃、止痛等功能利尿，调剂血管通透性，适合浮肿虚胖的mm。吸烟者要多吃柠檬，因为他们需要的维生素C是不吸烟者的2倍。柠檬热量低，且具有很强的收缩性，因此有利于减少脂肪，是减肥良药。柠檬能防止心血管动脉硬化并减少血液粘稠度。热柠檬汁加蜂蜜对治疗支气管炎和鼻咽炎十分有效。甘地润肺、酸地消渴、开胃解酒毒、美白、润肤、降低胆固醇。冲泡剩余，可涂在面部治疗面斑，粉剌。 ⑵袪痰：更鲜为人知的，是柠檬也能袪痰，且袪痰功效比橙和柑还要强。将柠檬汁加暖水和盐，饮之可将喉咙积聚的浓痰顺利咳出，十分灵验。感冒初起时，不妨用柠檬加蜜糖冲水饮，可以纾缓喉痛、减少喉咙干涸不适。 高等生物体内转化