宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究

吴伟民等：宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究

复２次，１周后统计污染率。

１．５单芽茎段离体培养芽萌发诱导培养基的筛选

基本培养基和激素组成分别为：（１）ＭＳ＋１

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；（２）Ｉ／２ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；（３）１／２

ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ１ＡＡ；（４）１／２ＭＳ＋１

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．１ｍｓ／ＬＩＡＡ；（５）１／２ＭＳ＋０．５

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ；（６）１／２ＭＳ＋２００

ｍｇ／ＬＫＣｌ＋０．５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ。所

有培养基均附加３０ｇ／Ｌ蔗糖和７ｇ／Ｌ琼脂，ｐＨ值５．８。接种培养２５ｄ后观察单芽茎段生长发育状况，统计芽萌发率，筛选适宜的芽萌发诱导培养基。１．６根诱导培养基的筛选

将在芽萌发诱导培养基上形成的无菌新梢切割成长度为０．３～０．５ｃｍ的单芽茎段，接种在根诱导培养基上进行继代培养，供试验的基本培养基和激素组成分别为：Ａ．ＭＳ＋１ｍｇ／ＬＩＢＡ；Ｂ．１／２ＭＳ＋１ｍｇ／ＬＩＢＡ：Ｃ．１／２ＭＳ＋２ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＩＡＡ：Ｄ．１／２ＭＳ＋１ｍｓ／ＬＩＢＡ＋０．０５ｎａｇ／ＬＩＡＡ：Ｅ．１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＩＡＡ。所有培养基均附加２０ｇ／Ｌ蔗糖和７ｇ／Ｌ琼脂，ｐＨ值５．８。接种培养２５ｄ后观察单芽茎段生长发育状况，统计生根率，筛选适宜的根诱导培养基。

１．７培养条件

培养室温度２５℃左右，光照强度２０００ｉｘ，光照时间１４ｈ／ｄ。

２结果与分析

２．１冬季体眠枝水培半本质化新梢的获得

双芽枝段扦插在添加１ｍｇ／ＬＮＡＡ的水溶液中培养１周后芽开始萌动；１０ｄ后生出绿叶，１５ｄ时形成新梢（图１），４５ｄ左右当新梢长至１５—２０ｃｍ时停止生长。经随机调查，６０个双芽枝段中有４５个萌发形成新梢，水培芽萌发率达７５％。所形成的新梢处于半木质化状态，可作为本试验材料。

２．２不同来源单芽茎段外植体接种后污染率的比较

虽然带芽茎段在葡萄组织培养中是理想的外植体，但消毒比较困难，在一定程度上制约了带芽茎段的利用ｏ“。本研究采用相同灭菌方法对冬季休眠枝水培新梢与夏季新梢去叶枝段表面消毒，接种１周后进行污染率比较，发现前者污染率较低（１４％），后者污染率较高（３２％），前者明显低于后者。这可能因为前者是用冬季体眠枝经自来水冲

囤１宿晓红葡萄休喉技水培冬芽萌发形成新梢

洗后再在相对比较清洁的室内环境中生长，带菌量少，而后者采集于外界环境适合杂菌滋生的生长季节，带菌量多。

２．３不同来源单芽茎段外植体和培养基组成对芽萌发诱导的影响

以ＭＳ、１／２ＭＳ和１／２ＭＳ＋２００ｎｌＩｇ／ＬＫＣｌ为基本培养基，以不同浓度的６一ＢＡ和ＩＡＡ进行激素组合，配置成６种培养基，分别对宿晓红葡萄冬季休眠枝水培新梢单芽茎段和夏季薪梢单芽茎段进行芽萌发诱导试验，结果表明：在６种培养基上，冬季休眠枝水培新梢单芽茎段和夏季新梢单芽茎段培养２５ｄ后，均有单芽茎段芽萌发（图２）。从表１可见，在

图２宿晓红葡萄扑植体在适宜的芽诱导培养基上葫发出芽

表１不同培养基对宿晓红葡萄两种来源

的单芽茎段外植体芽葫发率的影响

外植体

篙挚竺型塑苎型兰！翌夏季薪梢单芽茎段

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江苏农业科学２００７年第５期

同一释臻莽基土冬攀体眠棱承璐薪携单势纂段芽翡

萌发率高于夏季新梢。培养基中盐浓度对宿晓红葡

萄单芽豢段芽的萌发有影响．以低盐浓度、１／２ＭＳ

秀基本薅募墓效暴鞍驽。６一ＢＡ翻ＩＡＡ不嗣浓震

间的组龠效应表明，单独使用６一ＢＡ时．芽的萌发

率较低，加入ＩＡＡ对芽的萌发有促进作用，但较高

浓度６一ＢＡ对芽的蕊发寿轻徽挪裁佞弱，篌用０。５

ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ和０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ组合时，擎势茎段芽

的萌发率最高。因此，宿晓红葡萄单芽茎段离体培养芽夔发诱导的遣嶷培养基是１／２ＭＳ＋０，５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０。５ｍｓ／ＬＩＡＡ＋３０∥Ｌ蔗糖＋７∥Ｌ琼脂。２．４苇同培养基时无菌新捎单芽茎段生根的影响当硝种来源的荤芽茎段外植体在芽萌发初代培养基主诱导３０ｄ懿，游形成簿戈蓬精捂甥裁裁长度为０．３—０．５ｃｍ的单芽茎段，分别继代接种在根诱导培养然上进行生根培养，基率培养基为ＭＳ和１／２ＭＳ＋辫趣不弱浓寝翁ＩＢＡ秘ＩＡＡ，缝象轰骥，两种无菌新梢单芽鉴段在附加不同浓度酌ｔＢＡ、ＩＡＡ的ＭＳ溅Ｉ／２ＭＳ培养基上均谢单芽茎段生根（图３），并影成完整棱拣（巨４），且在同一种壤棼基上生擐率蠢明显差异。从表２可笕，ＭＳ和１／２ＭＳ均可作为根诱导的基本培养基。ＩＢＡ对于单芽蕊段生根有效，假］ＢＡ浓度以１ｍｇ／Ｌ为寂，附加ＩＡＡ可促进壤酶发生。敝ｔ／２ＭＳ基本培荐基秘１ｍｓ／ＬＩＢＡ、０．０５ｍｇ／Ｌ１ＡＡ的组合生根率最高，可作为宿晓红葡萄无随新梢单芽鉴段根两导的适宜培养挺。

国３宿嶙耋Ｉ葡萄外植体在适宜的根诱导

焙葬蒌上形或新撤

３讨论

在植物组织培养中，选择裔适的外梢体是组织楚葬或鞠与否瓣美壤。在蕺莓组织离体蝰棼静莛繁殖中使用较多且较理想的外横体材料是单芽茎段，但目前葡萄单芽茎段的来源主簧是大田葡萄树上夏季生长甥的半本质他耨梢，也蠢来源子室内艋栽的

固４宿跷红葡萄单芽茎段培养聪成完整植株

襄２罩同墙彝蕊对宿囊红藩蒋两种来豫魏

无菌新梢戢芽茎段生撤率的影响

冬季休眠棱水培新梢单芽茎段夏季新梢啭芽嫠段壤葬基——…——一编号接静数童擐数生擞率搂转鼗生攫数生壤率（个）Ｃ个）（％）（个）（个）（％）Ａ２０５２５２０６３０

Ｂ２０７３５２０１０５０

ｅ２０３１５嬲５２５

Ｄ２０｛２６０２０ｔ０５０

Ｅ２０５２５２０７３５

葡萄檀橡”ｊ，利甩葡薄冬季傣瞩技水培觏峭的较少。本掰究设叛宿稳红葡萄为试验晶静，蹴较了冬季休眠枝水培新梢的单芽茎段外植体与夏攀新梢的单芽茎段外植体离体培养的效果，结果表明前者在接静污染搴秘初栽培莽芽蔫轰率方簿蕊予翁者，可作为宿晓红葡萄离体培养较好的铷始外植体材料，同时可通过冷藏或沙藏冬季休眠枝的方法，打破外棱捧取专耋瓣季节缝毅髑。

参考文献

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报．２００ｌ＋１８（２）：１８８一１９２，

宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究

作者：吴伟民， 袁骥， 钱亚明， 赵密珍， 王壮伟

作者单位：江苏省农业科学院园艺研究所,江苏南京,210014

刊名：

江苏农业科学

英文刊名：JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES

年，卷(期)：2007，(5)

被引用次数：1次

参考文献(8条)

1.吴月燕;陶伟芳葡萄离体培养与快速繁殖[期刊论文]-浙江林学院学报 2001(02)

2.易丽鹃;曾幼玲;贺宾半无菌表面灭菌获得单芽茎段无菌材料的方法[期刊论文]-新疆农业科学 2005(zk)

3.卢塔山;彭宏祥;张瑛优良酿酒葡萄新品种NW196组培快繁研究[期刊论文]-西南农业学报 2004(04)

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5.曹孜义;杨德龙;梁庆丰内39号葡萄株系的离体快繁技术研究[期刊论文]-果树学报 2002(06)

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相似文献(2条)

1.期刊论文程向东.陈继远.周永红宿晓红葡萄的生物学特性及栽培特点-落叶果树2001,33(5)

宿晓红葡萄为江苏北部的一个古老酿酒品种,已有400多年的栽培历史.果实8月21日成熟,含可溶性固形物14%,含酸1.2%～1.5%,出汁率68%～70%.产区多采用2m高的自然大棚架栽培,主蔓3～4个,长3～4m,冬季中梢修剪,夏季摘心2次,采前喷1000mg/L的比久增加果实硬度,减少采前落粒,新梢10～15cm时喷2次500mg/L的吲@萘粉剂提高可溶性固形物含量.为生产优质果应将单位面积产量控制在900～1000kg/666.7m2.

2.学位论文黄非宿晓红葡萄的起源及栽培特性研究1990

引证文献(1条)

1.刘志红.李周岐接骨木茎段组织培养技术研究[期刊论文]-西北林学院学报 2008(6)

本文链接：https://www.wendangku.net/doc/50142285.html,/Periodical_jsnykx200705033.aspx

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部分性葡萄胎介绍

部分性葡萄胎介绍 部分性葡萄胎是什么 首先，我们来了解下什么是部分性葡萄胎。葡萄胎有称为水泡状胎。据专家介绍，葡萄胎来源于胚胎的滋养细胞。由于绒毛水肿增大后形成大小不等的水泡，相连成串，状似葡萄，因此称之为葡萄胎。 在多数葡萄胎中，胎盘绒毛组织基本上已全部变成葡萄胎组织，但也有少数葡萄胎只有部分胎盘绒毛组织变为葡萄胎。前者称为完全性葡萄胎，后者称为部分性葡萄胎。葡萄胎的发病原因暂时不明，研究发现葡萄胎的发生与营养状况，社会经济及年龄有关。根据病理特点，葡萄胎也有良性，恶性之分。 部分性葡萄胎的症状 得了部分性葡萄胎，临床上表现有闭经，多数在闭经二三个月时或个别更迟些时，出现阴道流血。血可多可少，呈间断性，多数情况下子宫大于停经月份也是可能的。 子宫达四五个月妊娠大小时，不仅孕妇感觉不到胎动，触不到胎块，也听不到胎心。仔细检查阴道流血中，如发现有水泡状胎块，则可确诊为葡萄胎，是否是部分性葡萄胎还需要进一步检查。 部分性葡萄胎是怎么形成的 处于生育期的女性都有可能得葡萄胎，常见于20-30岁的孕妇。这种病的确切病因现在尚不明了，一般认为与营养障碍（特别叶酸缺乏）、感染（尤其是病毒感染）、遗传和免疫机能障碍等因素有关。 研究发现，葡萄胎可以由流产或足月妊娠的残留细胞发生，但常见的是由一个受精卵变性异常增生发展而来。另外，也可能与使用口服避孕药及月经失调有关。在胎儿正常时，胎盘很少有异常。80％以上的葡萄胎都不是癌，有15％能浸润到周围组织（侵袭性葡萄胎），还有2％～3％是绒毛膜癌，可扩散到全身。 部分性葡萄胎的危害 部分性葡萄胎的危害有哪些？其实，80％以上的葡萄胎都不是癌，有15％能浸润到周围组织（侵袭性葡萄胎），还有2％～3％是绒毛膜癌，可扩散到全身。 一旦确诊是葡萄胎的病症的话，患者要及时的接受手术治疗，因为葡萄胎的话是不会在长大的，在子宫外面生长的话时间长了是会影响到怀孕者自己的生命的，手术迟点做都有可

月季组织培养技术研究

月季组织培养技术研究 摘要：以MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素（6-BA）和生长素(NAA)， 以及用不同外植体部位筛选出最适合月季腋芽萌发的培养基和最佳外植体部位。 实验结果表明：诱导侧芽萌发以MS+6-BA2.0mg/L培养基效果最好，外植体部位 以中部枝条发芽率最佳,为80%。 关键词：月季；组织培养；快速繁殖 Abstract: Use MS as basic medium ,with different concentration of cytokinin and auxin,a nd use different part of the stem as explant for tissue culture to select the suitable medium and best explants site for the induction of Rosa chinensis. The results showed that MS +6B A2.0mg / L is the suitable medium for bud germination, and the middle part of the stem ist he best explant. Keywords: Rosa chinensis, tissue culture, rapid propagation 月季（Rosa chinensis）是蔷薇科落叶或半长绿灌木，其花色艳丽、香味浓郁，是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。由于其分布极广、适应性良好、栽培容易等优点，加之月季四季常青、花期长、花色多等特点，使得在园林和路带绿化以及庭院居室的盆栽美化和切花等方面都得到广泛的应用。月季在观赏植物中具有很高的地位。月季花型大、美丽、幽雅、高贵，深爱各国人民喜爱，月季的销售额多年来稳居各类花木的前茅。被誉为“花中皇后”之美称，深受人们喜爱。 月季通常采用扦插和嫁接繁殖，一些名贵品种扦插不易生根，主要是靠芽接繁殖[1]。而芽接速度慢，因而造成优良品种苗木供不应求。应用组织培养技术可以大大缩短其增殖周期，达到快速繁殖优良品种的目的。近年来随着生物技术的不断发展与更新，用植物组织培养的方法快速繁殖各种花木技术得到了普遍重视和广泛应用，关于月季的离体培养、根诱导及移栽问题，以有了不少报道[1、2、8、9、10]。由于受基因影响，不同品种之间的组织培养特性表现出一定的差异[2]。因此讨论不同品种组培快繁的培养条件，特别是培养基中适宜的不同激素配比仍具有重要价值，另外选择适合接种的外植体不同部位也会影响其发芽率。本实验以月月红月季品种为材料进行了侧芽的诱导和筛选出适合月季组织培养最佳外植体部位的组织培养特性研究，试图找出适合月季品种的组培快繁的最佳激素配比的培养基和最适合培养的外植体部位。 1 材料与方法

宿晓红葡萄单芽茎段组织培养研究

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《葡萄》阅读练习阅读附答案

《葡萄》阅读练习阅读附答案 阅读下面的文字。完成8——11题。(12分) 葡萄 汪曾祺 四月，浇水。 葡萄喝起水来是惊人的。它真是在喝哎！葡萄藤的组织跟别的果树不一样，它里面是一根一根细小的导管。浇了水，不大一会，它就从根直吸到梢，简直是小孩嘬奶似的拼命往上嘬。浇过了水，你再回来看看吧：梢头切断过的破口，就嗒嗒地往下滴水了。 施了肥，浇了水，葡萄就使劲抽条、长叶子。真快！原来是几根根枯藤，几天功夫，就变成青枝绿叶的一大片。 五月，浇水，喷药，打梢，掐须。 葡萄一年不知道要喝多少水，别的果树都不这样。别的果树都是刨一个“树碗”，往里浇几担水就得了，没有像它这样的：“漫灌”，整池子地喝。 喷波尔多液。从抽条长叶，一直到坐果成熟，不知道要喷多少次。喷了波尔多液，太阳一晒，葡萄叶子就都变成蓝的了。葡萄抽条，丝毫不知节制，它简直是瞎长！几天功夫，就抽出好长的一节新条。这样长法还行呀，还结不结果呀？因此，过几天就得给它打一次条。拿起树剪，劈劈啦啦，把新抽出来的一截都给它铰了。 葡萄的卷须，在它还是野生的时候是有用的，好攀附在别的什么树木上。现在，已经有人给它好好地固定在架上了，就一点用也没有了。卷须这东西最耗养分，因此，长出来就给它掐了，长出来就给它掐了。 五月中下旬，葡萄开花了。有人说葡萄不开花，哪能呢！只是葡萄花很小，颜色淡黄微绿，不钻进葡萄架是看不出的。而且它开花期很短。很快，就结出了绿豆大的葡萄粒。 六月，浇水，喷药，打条，掐须。 葡萄粒长了一点了，一颗一颗，像绿玻璃料做的纽子。硬的。 葡萄不招虫。葡萄会生病，所以要经常喷波尔多液。 七月，葡萄“膨大”了。 掐须，打条，喷药，大大地浇一次水。追一次肥。追硫铵。在原来施粪肥的沟里撒上硫铵。然后，就把沟填平了，把硫铵封在里面。 八月，葡萄“着色”。 你别以为我这里是把画家的术语借用来了。不是的。这是果农的语言，他们就叫“着色”。 下过大雨，你来看看葡萄园吧，那叫好看！白的像白玛瑙，红的像红宝石，紫的像紫水晶，黑的像黑玉。一串一串，饱满、结实、挺括，璀璨琳琅。 可是你得快来！明天，对不起，你全看不到了。我们要喷波尔多液了。一喷波尔多液，它们的晶莹鲜艳全都没有了，它们蒙上一层蓝兮兮、白糊糊的东西，成了磨砂玻璃。我们不得不这样干。葡萄是吃的，不是看的。我们得保护它。 过不两天，就下葡萄了。一串一串剪下来，把病果、瘪果去掉，妥妥地放在果筐里。葡萄装上车，走了。

葡萄胎诊断及治疗标准流程

葡萄胎（2016年版） 一、葡萄胎临床标准住院流程 （一）适用对象。 第一诊断为葡萄胎，需要行葡萄胎清宫术。 （二）诊断依据。 根据《临床诊疗指南—妇产科学分册》（中华医学会编着，人民卫生出版社） 症状：停经史、不规则阴道流血； 体征：子宫常大于孕周，质软； 辅助检查：超声检查，血β-HCG。 （三）进入路径标准。 1.第一诊断符合ICD-10：葡萄胎的疾病编码； 2.当患者同时具有其他疾病诊断时，但在住院期间不需特殊处理也不影响第一诊断的临床路径实施时，可以进入路径。 （四）标准住院日。 ≤6天 （五）住院期间的检查项目。 1.必需的检查项目 （1）血常规、血型；

（2）尿常规； （3）大便常规 （4）生化检查（包括电解质、肝肾功能、血糖）； （5）凝血功能； （6）感染性疾病筛查(如乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒)； （7）心电图； （8）胸部X光片； （9）超声检查； （10）阴道清洁度检查； （11）血β-HCG定量。 2.根据患者病情进行的检查项目 胸部CT、头颅CT、腹部平片、腹部B超、甲状腺功能 （六）治疗方案的选择。 急诊或择期行葡萄胎清宫术。 （七）预防性抗菌药物选择与使用时机。 根据《抗菌药物临床应用指导原则（2015年版）》（国卫办医发〔2015〕43号）执行，并根据患者的病情决定抗菌药物的选择和使用时间。 （八）手术日。 1.麻醉方式：基础麻醉。 2.术中用药：缩宫素 3.术中输血：视术中情况定。

4.病理：术后石蜡病理检查，流式细胞倍体分析，免疫组化染色。 （九）术后恢复。 1.必须复查的项目：血常规、B超、β-HCG 2.术后用药：根据情况补液、补充电解质、护胃等治疗。 3.抗生素使用：根据《抗菌药物临床应用指导原则（2015年版）》（国卫办医发〔2015〕43号）执行，并根据患者的病情决定抗菌药物的选择和使用时间。 （十）出院标准。 1.患者一般情况良好，体温正常，完成复查项目。 超提示宫腔内无残留。 3.没有需要住院处理的并发症和/或合并症。 （十一）变异及原因分析。 因化验检验异常需要复查，导致术前及术后住院时间延长； 有影响手术的合并症，需要进行相关的诊断和治疗； 因手术并发症需要进一步治疗； 术后病理提示为恶性，需要转入相应的路径进行治疗。 二、葡萄胎临床表单 适用对象：第一诊断葡萄胎（ICD-10：）行葡萄胎清宫术。 患者姓名性别年龄门诊号住院号 住院日期年月日出院日期年月日标准住院日天

细胞培养技术原理及应用

细胞培养技术原理及应用研究进展 姓名：赵鹏学号：158033038 专业：流行病与卫生统计学 摘要：细胞培养是指将采集体内组织的细胞模拟体内生长环境，放置在无菌、一定营养条件、适宜的温度及酸碱度下，使其生长、繁殖，并维持其结构和功能的一种技术，已成为生物、医学研究及应用广泛采用的技术方法。文章对细胞培养技术的应用作一综述。 关键词：细胞培养；应用；研究进展 细胞是构成机体的基本单位，是生命活动的基本单位。一切有机体（除病毒）都是由细胞组成的。细胞具有独立的、有序的自控代谢体系。因此，对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、征服疾病的关键。细胞培养是指将采集体内组织的细胞模拟体内生长环境，放置在无菌、一定营养条件、适宜的温度及酸碱度下，使其生长、繁殖，并维持其结构和功能的一种技术。细胞培养技术的优点是可以直接观察活细胞的形态结构、生命活动及其变化；提供大量生物性状相似的试验对象，特别是研究大型动物（奶牛）时具有耗资少的优点。但模拟体内环境仍与实际有很大的差异，因此利用细胞培养技术的试验结果不可以轻易做出与体内等同的结论。 动物组织（细胞）培养开始于20世纪初，现已成为生物、医学研究及应用广泛采用的技术方法[1 ]。随着细胞培养技术的不断发展，现在也广泛应用于动物生产研究。20 世纪60 年代，该技术应用于水产动物的病毒分离和纯化，对于鱼类疾病的防治具有重要作用。近年来研究发现单一种子细胞难以完成构建复杂组织的需要，因此产生了联合培养细胞技术。联合培养下的细胞之间存在着精细的相互调控关系，因而更符合仿生学的原理且更有利于种子细胞的增殖与分化，为复杂的细胞诱导分化以及体外组织构建提供了新思路、新方法[2 ]。 1 细胞培养 细胞培养是将活体组织或细胞从试验动物体内取出，放在模拟体内生存环境的体外环境（无菌、适温、营养丰富）中，使高体细胞生长、发育的一种方法。按照培养的结构成分不同，将其分为组织培养、细胞培养及器官培养等。根据细胞是否在支持物上生长，将其分为贴壁型和悬浮型。一般来说，圆形细胞如淋巴细胞属于悬浮型，而胞体梭型（成纤维型细胞）、扁平不规则（上皮型细胞）等属于贴壁型，贴壁型细胞必需贴附在支持物表面生长。细胞培养开始于1906 年，Harrison 用蛙新鲜淋巴液培养蛙胚神经组织4 周，首次成功地利用体外培养液培养神经元，标志着组织细胞的体外培养模式的基本建立。随着细胞培养技术的不断发展和完善，20 世纪50 年代进入繁盛阶段，细胞培养逐渐被基础研究与应用领域所应用，特别是在医学领域得到迅速的发展。目前，细胞培养技术已经涉及到生物学、农业、环境保护等领域[ 3 ]。 目前，在细胞培养过程中，只能根据离体细胞的特点和培养条件，提供满足其生长和发育的一些基本生理条件。必须在无菌条件下进行，细胞感染微生物后，会因被夺营养物质而导致细胞生长缓慢或停滞，甚至死亡。需要提供适宜的温度和pH，一般哺乳动物细胞培养的温度控制在37 ℃，鱼类的温度要低一些。温度过高或过低时，均不利于细胞生长甚至会导致细胞死亡。动物细胞最适宜pH一般控制在7.2~7.4，在此范围细胞生长活跃，增殖速度快，如果过低或过高性，细胞会因为细胞膜受损而死亡。细胞离体培养技术的关键是细胞培养液的设计，理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物质、调节物质的全部需要。细胞培养液中需含有细胞增殖、生长所需要的各种营养物质。如提供能量的物质（N源、C源）、代谢调节控制的物质（无机盐、维生素、激素）。另外，在细胞培养过程中需要提供一定量的气体（O2和CO2）。CO2具有调节pH和缓冲的作用，一般提供5% CO2。

月季植物组织培养实验报告

月季植物组织培养实验报告 姓名：张恒玉 （天津师范大学10生乙10517085） 摘要：月季（Floribunda roses）为蔷薇科蔷薇属木本植物,其花姿优美，花 型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象，把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选，使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。 关键词：月季组织培养 Rose Plant Tissue Culture Lab Report Name: ZhangHengyu （Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences 300387） Abstract:Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors available, easy to trim the tree, planting small difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications. Keywords: Rose tissue culture 1 月季介绍

常见葡萄病害图谱

常见葡萄病害图谱 2011-01-07 11:52:24| 分类：葡萄*管理| 标签：|字号大中小订阅 葡萄是一种色艳昧美且富有营养的水果，葡萄适应性很强，我国广大地区均可种植。我国已报道的葡萄病害有40多种，其中霜霉病、黑痘病、白腐病、炭疽病、 灰霉病等是葡萄生产上的主要病害。 1.葡萄霜霉病 分布为害葡萄霜霉病在世界各葡萄产区均有发生。我国沿海、长江流域及黄河 流域，此病广泛漪行(图4-1)。 图4-1 葡萄霜霉病为害叶片情况 症状主要为害叶片，也为害新梢、叶柄、卷须、幼果、果梗及花序等幼嫩部分。叶片受害，初期在叶片正面产生半透明油渍状的淡黄色小斑点，边缘不明显；随后渐渐变成淡绿色至黄褐色的多角形大斑，后变黄枯死。在潮湿的条件下，叶片背面形成白色的霜霉状物(图4-2至图4-5)。新梢、叶柄及卷须受害产生水浸状、略凹陷的褐色病斑，潮湿时产生白色霜霉状物。幼果从果梗开始发病，受害幼果 呈灰色，果面布满白色霉层(图4-6)。 图4-2 葡萄霜霉病为害叶片初期症状

图4-3 葡萄霜霉病为害叶片中期症状 图4-4 葡萄霜霉病为害叶片后期症状 图4-5 葡萄霜霉病为害叶片末期症状 图4-6 葡萄霜霉病为害幼果症状 病原Plasmopara viticola称葡萄单轴霉，属鞭毛菌亚门真菌（图4-7）。菌丝管

状。孢子囊椭圆形，透明，着生在树枝状的孢囊梗上。孢囊梗一般4～6枝，呈束状，无色，单轴分枝3～6次，分枝处呈直角，分枝末有2～3个短的小梗，圆锥状，末端钝，孢子囊即着生在小梗上。每个孢子囊产生4～85"-游动孢子，有双鞭毛，能游动。游动孢子为单细胞，呈肾形。 发生规律病菌以卵孢子在病组织中越冬，或随病叶遗留在土壤中越冬。越冬后的卵孢子，降雨量达lOmm以上，土温15℃左右时即可萌发，产生芽孢囊，再由芽孢囊产生游动孢子，借风雨传播到寄主叶片上，通过气孔侵入。病菌侵入寄主后，经过一定的潜育期，即产生游动孢子囊，游动孢子囊萌发产生游动孢子，进行再侵染。在整个生长季节可以进行多次再侵染(图4—8)。 图4-7 葡萄霜霉病病菌 1．分生孢子梗和分生孢子2．分生孢子3．被害组织中卵孢子4．卵孢子萌发5． 游动孢子 图4-8葡萄霜霉病病害循环 1.病叶中的病原茵 2.卵孢子 3.萌发形成芽孢囊 4.释放游动孢子 5.雨水 6.幼嫩组织被侵染 7.形成子实体 8.形成孢子囊 9.游动孢子 10.灰霉果 11.果实腐烂 12．病叶脱落 在长江以南地区，全年有2～3次发病高峰，第一次在梅雨季节，第二次在8月

月季组织培养技术研究开题报告

一、选题依据 1、论文题目及研究领域 （1）论文题目：月季茎段组织培养技术研究 （2）研究领域：组织培养在月季繁殖上的应用 2、论文研究的理论意义和应用价值 月季在我国应用非常广泛，因此繁殖方法也非常多，但是常规繁殖技术很难对其品种进行更新。虽然自l875年人工杂交技术产生后，经过长期的杂交和选择，获得了许多理想品种，但月季育种目前存在着以下几个问题：（1)传统杂交方法具有局限性。表现在基因资源有限，染色体数目及倍性差异使远缘杂交难以成功；生长一致性、开花同时性等多基因控制性状难以改良等。此外月季作为多年生灌木，育种所需时间较长。（2）只注重对外观性状的改良，而忽视了对内在性状的改良。在过去的育种史中，育种家们只注意芽形、花形、花径、瓣数和茎长等外观性状的改良，并且选择的标准也趋于一致，造成资源流失，而内在性状，如生活力、瓶插寿命以及对病虫害的抵抗能力等未得到相应的提高。（3)遗传背景相对狭窄。据统计蔷薇属的100多个物种中只有8个种对现代月季做出过突出贡献，因此这种近亲杂交现象严重影响月季的生活力[1]。 90年代发展起来的以组织培养为基础的转基因技术无疑为月季育种提供了一条新途径。这种方法不但使品种在外源基因所控制的性状上发生改变，其性状保持相对稳定，还可利用来自其他生物类型的基因，创造更优良的品种。目前，月季的组织培养已有了较深入的研究，基因的分离、克隆以及载体构建等技术在重要的农作物及模式植物上已积累了较多的经验，皆可应用于月季的基因工程育种中[2]。运用这项技术不断培育出新品种以满足人们对月季求新求异的需求。 3、目前研究的概况和发展趋势 月季传统的栽培方法是用嫁接和扦插法进行繁殖，但繁殖速度较慢。自20世纪60年代组培技术在生产中应用以来，许多研究者在月季的组培方面做了大量的研究工作，在月季组培苗的利用方面也取得了很大的进展，对加速新品种的推广和运用起到了积极作用。我国的研究者从20世纪80年代以后便开始进行切花月季组培种苗的生产，在组培的各大领域取得了很好的成绩。 目前，植物组织培养已经向基因的分离、克隆以及载体构建方向发展。在当前再生体系不够完善仍然是制约月季转基因的主要因素，直接再生不定芽途径虽然再生高，需时短，适应范围广，但转化困难；胚性愈伤组织或次级体细胞胚易于转化，但体细胞胚再生体系的建立相对困难，需要在诱导出初级体细胞胚后经过长时间的继代和选择，目前具备该再生体系的品种还非常有限。植株再生是进行遗传转化的必要前提，只有具备了成熟的再生体系才能有效的进行基因转化。现在组织培养技术在很大程度上仍是已经验为基础的，广泛开展月季组培的研究仍是解决问题的最佳途径，在我国尤其如此。随着经验的累积，月季再生体系将不断完善，为转基因提供前提条件。此外，人们对环保的日益重视，对新奇花朵的需求日益增加，以组织培养为基础的技术必将在月季育种中发挥重要作用[3]。 二、论文研究的内容

组织培养

组织培养 复习提纲： 一．名词解释 植物组织培养：在无菌条件下，植物体的任何器官、组织或细胞，在人工预知的控制条件下，放 在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中，使其生长、分化形成完整植株的过程。 体细胞胚状体：在离体或活体条件下，体细胞经“原胚期-球形培期-心形培期-鱼雷培期-子叶期”等 阶段形成的胚。 细胞全能性：植物体任何一个细胞都携带着一套发育成完整植株的全部遗传信息。 人工种子：将植物离体培养产生的体细胞胚报埋在营养成分和保护功能的物质中，在适宜条件下 发芽出苗的颗粒体。 细胞质杂种：一方亲本的细胞核和细胞质及另一方亲本的全部细胞质融合，可使两种来源不同的 核外遗传与一个特定的核基因结合在一起，这种杂种称为细胞质杂种。 外植体：在组培中，从活植物体上取下以进行培养的部分。 茎段培养：带有腋芽（侧芽）或叶柄、长数厘米的茎段进行离体培养。 指示植物：可以呈现病毒在病的植物上出现的枯斑和某些病理症状来鉴别病毒的植物。 愈伤组织：在组培中，在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长、高度液泡化、呈无定形 态的薄壁细胞。 体细胞杂交：以原生质体培养技术为基础，借用动物细胞融合方法发展和完善的一门新型生物技术。 再分化：从愈伤组织再生出小植株的过程。 植物快速繁殖：应用组织培养技术,快速繁殖名优特新品种,使其在较短时间内繁衍较多的植株;快 速繁衍珍稀濒危植物,使物种得以保存。 衰退现象：长期继代培养的材料会逐渐衰退，丧失形态发生能力（生长不良，再生能力下降，增 值率下降）。 离体保存：将组织和细胞培养中的外植体或试管苗贮存在使其抑制生长\缓慢生长\无生长的条件下，达到长期保存的方法。 驯化现象：植物组织经长期继代培养，在其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长的想象。 原生质体融合：同体细胞杂交 脱分化：由高度分化的植物组织或器官产生愈伤组织的过程。细胞进入分裂状态。 细胞悬浮培养：用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行 培养的方法。 植物无糖培养技术：是指容器中的小植株在人工光照下，吸收CO2进行光合作用，以完全自养的方式进行生长繁殖 二．填空

葡萄胎的诊断与鉴别方法

葡萄胎的诊断与鉴别方法 葡萄胎的临床表现为闭经，多数在闭经二三个月时或个别更迟些时，出现阴道流血。血可多可少，呈间断性，大多情况下子宫大于停经月份也是可能的。子宫达四五个月妊娠大小时，不仅孕妇感觉不到胎动，触不到胎块，也听不到胎心。仔细检查阴道流血中，如发现有水泡状胎块，则可确诊。 一、诊断方法 临床表现有闭经，多数在闭经二三个月时或个别更迟些时，出现阴道流血，血可多可少，呈间断性，多数情况下子宫大于停经月份也是可能的，子宫达四五个月妊娠大小时，不仅孕妇感觉不到胎动，触不到胎块，也听不到胎心，仔细检查阴道流血中，如发现有水泡状胎块，则可确诊。 1、B超腹部扫描。 2、HCG测定。 3、目前很少用X线技术诊断葡萄胎。 二、鉴别方法 1、羊水过多症多发生在妊娠晚季期，急性羊水过多症或可发生在妊娠中季期，可出现呼吸困难，无阴道流血。而葡萄胎鲜有呼吸困难，但有反复阴道流血。B超检查可各自查出自己的特征，不难鉴别。 2、流产葡萄胎患者虽亦常表现流产现象，但其子宫往往大于同期的妊娠;且妊娠试验阳性，滴定度较高，故不难鉴别。但葡萄胎患者的子宫亦有不特别增大者或当其早期，则往往易与先兆流产混淆。先兆流产是指在妊娠早期出现的阴道少量出血，时下时止，伴有轻微下腹痛和腰酸的一种疾病。但阳性妊娠试验滴定度在葡萄胎终较高于先兆流产。B超检查即可分辨。 3、子宫体肌瘤合并妊娠子宫肌瘤在孕前查出者，不难鉴别。肌瘤合并妊娠较大肌壁间肌瘤合并妊娠时由于机械性阻碍或宫腔畸形也易流产。妊娠期子宫充血、组织水肿、平滑肌细胞肥大，肌瘤明显增大，分娩后逐渐缩小。妊娠期肌瘤迅速增大可发生红色变，出现剧烈腹痛伴恶心、呕吐、发热、白细胞计数升高。一般无阴道流血。双合诊时有可能查到肌瘤存在宫体某部分。B超检查可以鉴别。 4、双胎妊娠双胎妊娠一般早孕反应较重，容易发生缺铁性贫血，还容易并发妊高征、羊水过多，胎儿畸形和前置胎盘。并有羊水过多及先兆流产时与葡萄胎鉴别最为困难。不但临床表现二者极相似，妊娠试验滴定度亦高于正常，常导致误诊。双胎妊娠一般无阴道流血，而葡萄胎常有，超声检查可确诊。

组织细胞培养技术课程教学大纲

《组织细胞培养技术》课程教学大纲 课程编码：26990214 课程名称：组织细胞培养技术 英文名称：Cell and tissue culture technology 开课学期：第二学期 授课对象：统招硕士 开课院系：基础医学院 开课教研室：病理学与法医学教研室 学时：40 （其中理论学时：20 实验学时：20 ） 学分：0.5 课程类型：公共选修课（公共必修课/选修课/专业课） 选用教材：自编教材《组织细胞培养技术》 主要参考书：⑴鄂征主编. 组织培养和分子细胞学技术.北京：北京出版社，1994。⑵施新猷主编.实验动物学. 北京：人民军医出版社，2000。 大纲编写人员：张宏颖副教授 一、课程目的与任务 组织细胞培养技术是研究组织和细胞的技术方法，被培养的组织和细胞也是实验研究的对象。本课程是医学临床与基础专业硕士研究生的公共选修课程之一，在医学各专业高级人才培养中具有重要地位。本课程系统介绍了组织和细胞培养技术有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术，及其在医学研究和临床实践中的应用，该领域的研究历史和最新发展动态；转基因动物技术的概念、研究进展、技术方法、建立方法、应用及前景展望。旨在提升医学专业硕士研究生的知识结构，掌握现代生物技术中的基本实验技能，培养学生开拓创新的能力，适应未来学科发展对人才的需求。 二、教学基本要求 本课程系统地论述了组织细胞培养技术的理论和方法，简要介绍了转基因动物技术及应用。要求学生全面系统地掌握组织细胞培养的操作过程，了解各种操作的基本原理；有判定细胞生长好坏和是否发生污染的能力；熟悉体外培养细胞的生存条件、细胞的生物学性状和与此有关的基本理论知识，了解国内外细胞培养的最新动态和研究进展，了解转基因动物技术的概念、研究进展、技术方法、建立方法、应用，并能自行根据需要设计实验，运用所学技术解决科研中的实际问题，提高学生综合分析问题，系统利用专业知识的综合素质。 三、各章节内容及学时分配 第一章组织培养技术的基本理论知识（4.5学时） 目的与要求 1、掌握组织培养基本概念；了解对组织培养的评价；熟悉对组织培养工作者的要求和工作方法。 2、了解体内外细胞的差异与分化；掌握培养细胞形态分类及培养细胞的大体形态；熟悉组织培养 细胞的生长和增殖过程。 3、熟悉培养细胞生存环境和条件。

月季快繁技术的研究

月季快繁技术的研 究 摘要：组织培养繁殖植物的技术是一种特殊的营养繁殖方式,现在一般称为快速繁殖技术(Rapid propagation)或微繁殖技术(Micropropa-gation)。目前在国外已经有了标准化的采后技术,通过细心操作、良好的环境管理以及应用保鲜剂等措施使损失率大大降低。 关键词 月季 组织培养 快繁 月季Rosa chinensisJacq.为蔷薇科蔷薇属植物,是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之 一[1]。 月季除种类繁多，用途也很广，可供室内陈设，庭院美化，作切花，还可从月季中提取香料，花朵、花瓣用于腌制食品或药用，商品价值较高[2]。应用组织培养技术进行月季花卉的繁殖育种,可大大缩短其增殖周期,快速繁殖优良品种,并保留与母株相同的优良遗传特性和表型特性。 1 月季快繁无菌培养的起始 1.1 外植体的选取 从田间或盆栽的植株上,选取健壮的当年生枝条,无病虫害，用饱满而未萌发侧芽作为外植体。侧芽又以枝条中段的为好，摘除叶片和嫩刺。幼嫩的枝条有利于诱导植株的芽分化，植株过成熟会让后面的实验很难进行。 1.2 外植体消毒 植物材料表面要经过一系列冲洗、酒精升汞的消毒，使外植体无菌。消毒过程一定要注意规范操作，避免染菌。消毒后，用一定浓度的抗生素如庆大霉素、氨卞青霉素等处理外植体，可以减少接种后的污染。如果外植体带菌，杂菌就会感染植株，污染培养基，导致实验失败。

1.3 无菌体系建立 除了让外植体无菌外，培养基也要充分灭菌，还要做好操作环境的消毒灭菌，保持操作环境的无菌，才能让实验顺利进行。 2诱导外植体生长分化，增殖培养物 2.1 接种 于冰沁在外植体的接种中采用了垂直接种，斜向上45°接种，水平接种和反转接种4种方式，发现垂直接种和斜向上45°接种是最佳的接种方式，腋芽、再生芽数量多，且生长健壮，这可能与植物的生长极性有关[3]。 2.2诱导芽的分化 添加不同浓度的BA和NAA的MS培养基上进行起始培养，增加适量NAA有利离体侧芽分化,但浓度过高会仅诱导大量愈伤组织,不利于侧芽的直接分化和生长[4]。因此要选择适当的浓度比例进行培养，让芽更好的分化。 2.3继代增殖 将诱导培养基上已经萌发的嫩芽转入附加6-BA、NAA等激素的MS培养基中，进行增殖继代。在NAA浓度相同而BA浓度不同的培养基中，随BA浓度的升高，芽苗的增殖系数也相应提高。在BA浓度相同而NAA浓度不同的培养基中，随NAA浓度升高，小芽生长速度加快，继代所需时间对增殖系数也有一定的影响[3]。 3培养物的壮苗生根与试管苗移栽 诱导外植体获得的芽需要进一步培养增殖，才能发挥快速繁殖的

葡萄组培

葡萄组织培养及试管快繁技术 引言：葡萄(学名：Vitis vinifera)是多年生藤本浆果果树，果实美观艳丽，肉质柔软多汁、酸甜可口，营养价值极高，是人们喜食的鲜食水果。葡萄还可用于酿酒、制干、制汁等，是重要的食品加工原料。加之其适应性强、丰产果实，又是美化庭院楼阁、绿化荒山、碱滩的观赏和绿化树种。我国绝大多数省、市、自治区均能栽培葡萄，以及新疆、山东、河北、辽宁为多。2011年6月，宁夏玉泉营苗木繁育中心被自治区命名为宁夏葡萄苗木工程技术研究中心，建立了葡萄组织培养实验室。从2011年8月起，中心实验室技术人员克服种种困难开展了组培工作，经过三次无菌材料的采集、消毒和接种，于2011年10月20日成功培养出了11株葡萄试管苗，取得了无毒苗繁育的重大突破，填补了农垦及宁夏无毒葡萄苗自繁自育的空白。这些试管苗通过继代培养，目前已快速繁殖达到4600株(2400瓶)。葡萄组培苗接种的实验成功和快建繁殖为优质葡萄种苗的繁育和宁夏贺兰山东麓葡萄产业的发展起到了引领推动作用。 表1.MS培养基母液的配制

洗洁净等洗涤。洗净的器皿应不挂水珠，内外壁水膜均一，置于烘箱内烘干 .新购置的玻璃器皿或多或少含有游离的碱性物质。使用前先用1%的盐酸浸泡一夜，再用清水冲洗。蒸馏水冲洗一遍干后备用即可。已污染的玻璃器皿则必须在121℃高压蒸汽灭菌30分钟后，倒去残渣用毛刷刷去管壁上的培养液和菌斑后，再用清水冲洗干净，蒸馏水冲洗一遍晾干备用。切记不可直接用水冲洗，否则会完成环境污染。 2配制母液和激素。根据表1配制1到4号母液，将母液分装在4个溶液瓶中。配置好的母液分别贴上标签，注明母液名称，配置背书以及日期。储存时间不易过长，无机盐最好在一个月内用完，当母液中出现霉菌或沉淀时，母液不可使用。注意铁盐要单独配。将BA,IAA,IBA,NAA 用少量醇溶解再用水稀释至所需浓度。 3配制培养基。①将母液按比例取出相应体积后按顺序注入烧杯中。②加入蔗糖，蔗糖溶解后加水定容至1L。③使用酸度计调节 pH 值为 5.8。调节用试剂为1mol/L的盐酸和氢氧化钠。④加入琼脂，并加热溶解，边加热边搅拌，以免造成糊底。 4分装灭菌。配制好的培养基应尽快分装在编好号的锥形瓶中。分装的方法有虹吸试分注法和直接注入法等。分装时要掌握好培养基的量，一般占试管，锥形瓶等培养容器的1/4～1/3为宜。分装时注意不要将培养基沾到管口，以免引起培养基污染。加入不同浓度的激素溶液，尽快用封口膜封好口，以免水分蒸发。常用材料有棉花.硫酸纸.耐高温塑料薄膜等。封好口的培养基尽快用高压灭菌锅灭菌，灭菌不及时杂菌大量繁殖，使培养基失去效用。一般灭菌温度为121℃保持20 分钟。灭菌后，切断电源，使灭菌器内的压力缓慢降下来，接近0时，才可以打开放气阀，排出剩余蒸汽后，打开锅盖，取出培养基。若切断电源后，急于取出培养基而打开气阀 5外植体选择和消毒。剪取污染较少且健壮无病的葡萄嫩枝，除去幼叶，剪成一定长度带有芽的茎段，自来水冲洗2~3小时，置冰箱处理4小时，这样有利于材料的诱导再生。将处理后的材料用自来水反复浸泡冲洗，清晰材料表面的尘土和附着的微生物。在超净工作台上，将处理好的葡萄带芽的茎段，用70%酒精浸泡消毒15~20秒，因葡萄对酒精敏感，酒精消毒不宜超过20秒。再用0.1%升汞浸泡5~10分钟，无菌水冲洗4~5次，以彻底清除升汞。 6接种前准备及接种。将接种所用器具先消毒，操作人员和超净工作台用酒精消毒，晾干后进行接种操作。用消毒过的器械将外植体置于培养皿上，切取所需的外植体。将外植体接种于培养容器的培养基上，整个试验在超净工作台上进行，保持无菌。 7初代培养。消毒处理后的茎段放在灭过菌的培养皿内的滤纸上,水吸干后,再用剪刀剪去两端接触药剂的部分,并剪成长度为2~3厘米单芽茎段,插入初代培养基中(BA0.5~1.0mg/L+IAA0.1~0.3mg/L)。将接种好的培养瓶放置在暗处1天,然后再移到培养室内进行培养。培养温度为28士1℃,光照强度为2000~2400勒克斯,光照时间12~14小时/天。两周左右可看到有许多绿色的芽点和小的不定芽出现，再过一段时间就会长出丛生芽。 8继代培养。将愈伤组织重新转移到新鲜培养基上的过程称为继代。从初代培养基选取较大的不定芽，转接到继代培养基上(BA0.4~0.6mg/L)，三周左右，小芽即可长成4cm左右高的无根苗。葡萄在此培养基中生长繁殖很快，每4周可繁殖5倍左右。

月季的植物组织培养开题报告

月季的植物组织培养开题报告 一、实验目的意义 通过月季的植物组织培养实验，对植物组织培养技术进行初步了解，认识植物组织培养的重要性和发展潜能，并了解月季的特征及生长习性，锻炼自己独立做实验、独立思考的能力。 二、实验材料和方法 1.实验材料：月季（取材自天津师范大学主校区明理楼旁边） 2.实验步骤 ①称取6.5g～12g琼脂，先用蒸馏水置1000ml搪瓷杯浸泡2小时后充分洗去杂质。弃去浸 液用无离子水再洗1～2次，并加入500ml无离子水在电炉上溶化。边搅拌边溶化，直至完全溶化备用。 ②另取蔗糖30g于上述溶液中搅拌完全溶解备用。 ③另按MS培养基用量量取无机大量微量元素及有机成分的母液于一烧杯中，并完全倒入 ②液中搅拌溶解混匀备用。 ④按目的要求用取样器加入各种激素并搅拌混匀，加稀碱或稀释酸调pH值应比目的要求 的pH值稍高0.1～0.2。定溶1000ml。 ⑤趁热大于60℃分装于培养瓶中，应边搅拌边分装液体，根据要求的量分装。一般液体的 厚度掌握在1cm左右为宜。分装时不得将液体粘落至瓶口上。 ⑥将培养瓶封口塞棉塞、包牛皮纸系线绳。 ⑦另取Ф5cm的滤纸若干，置Ф9cm的培养皿中并用牛皮纸包好准备灭菌。 ⑧另取无离子水若干不得超过瓶内总体积的70%，加棉塞包牛皮纸，灭菌制备无菌水。另 取清毒瓶包好备用。 ⑵灭菌 ①检查有无漏电漏水现象，加无离子水的3升，将要灭菌的物品平稳地放置高压锅套桶 内。 ②盖上锅盖水平拧好螺栓，打开放气阀，接通电源加热，待放气阀处水汽充分溢出时盖 上放气阀，待压力升至0.05Mpa时打开放气阀放气至压力回到零位时盖上放气阀升压。 ③待压力达0.12～0.15Mpa时，开始计时，使调压器自220V回调170～180V左右维持 30分钟断电。 ④待压力回降至零位时，打开锅盖错开一缝隙使热蒸汽迅速溢出烘干包纸和瓶塞。 ⑤趁热取出被灭菌之物，将培养瓶置平稳处使培养瓶中的培养基凝固。23小时后查有无 细菌，48小时后查有无霉菌，如有杂菌应及时处理，无杂菌备用。 ⑶接种 ①取材：将采集的月季茎段冲洗干净，分装到烧杯中，放入超净工作台；先用70%酒精浸 没并轻摇15s进行欲消毒；倒出酒精，加入0.1%二氯化汞浸没；倒净二氯化汞。用无菌水冲洗3次，将废液倒弃备用。 ②解下培养瓶上包头纸的线绳，并将培养瓶整齐地排列在接种台的左侧，然后用70%的酒 精棉球从内向外擦接种台面。 ③在酒精灯下用用镊子在消毒瓶内取出材料置于培养皿内的无菌滤纸上吸干水分，右手持 镊子左手拿灭过菌的解剖刀迅速地将茎段切成剪成每段2～3cm至少有1个侧芽，用镊子将外植体迅速地在酒精上接入培养瓶内。 ④在酒精灯火焰上转动瓶口和棉塞进行灼热灭菌，迅速塞好棉塞、包好包头纸，系好线绳，

香蕉的组织培养与快速繁殖

香蕉的组织培养与快速繁殖 摘要 香蕉，芭蕉科芭蕉属植物，又指其果实。热带地区广泛栽培食用。香蕉味香、富于营养，终年可收获，在温带地区也很受重视。香蕉也是一种绿色开花植物，它如其他绿色开花植物一样，也会开花结籽儿。野生香蕉中有一粒粒很硬的种子，吃起来极为不便。因此，有人把野生香蕉树和四倍体的芭蕉杂交产生了三倍体的香蕉。也就是现在的香蕉。这样的香蕉中就没有种子了。香蕉的种子退化了，人们常通过香蕉地下的根蘖幼芽来繁殖它的后代，现在随植物细胞工程的发展，植物组织培养及快速繁殖更加高效进行香蕉繁殖，同时为其优良品种的保存扩大提供有利条件。 关键词：香蕉；植物组织培养；快速繁殖；转化 1.香蕉植物组织培养 长期以来,香蕉生产上主要采用吸芽繁殖,用这种常规方法繁殖,不但故量有限,而且挖取吸芽还会伤及母株的地下真茎及挖断母株的根群,从而影响当年产量。同时,挖取的种苗切口大,成活率低。为了提供发展香蕉生产所需的大量种苗,应用植物组织培养技术,繁殖大量香蕉苗是非常必要的。此外,通过组织培养还可加快优良品种的繁殖速度,以满足生产上品种更新的需要。 1.1香蕉组培苗的培育技术 1.1.1品种的选择 选用适宜当地栽培、高产、优质、抗逆性强的品种，选取剑状吸芽若干个进行脱毒。 1.1.2 原种吸芽苗的选择 选作吸芽的母株果梳应是果梳整齐、果大均匀、产量高、无病害症状、健壮的母株。用作外植体的剑叶吸芽必须按株系进行编号并建立株系档案，必要时拍照全株相片。 1.1.3香蕉吸芽外植体的消毒与接种 从田间取回来的吸芽用自来水冲洗干净后，用不锈钢刀将吸芽切去根和顶端，剥去外层包片并切成高2厘米×直径1.5厘米左右的圆锥体。在超净工作台上，用75%酒精消毒2分钟，倒掉酒精，再用0.1%升汞，另加2～3滴吐温80，消毒20～30分钟。消毒剂一定要浸过料，消毒过程中要经常摇动以便材料充分灭菌。用无菌水清洗 4 次，使药液彻底洗净。用解剖刀剥去外层叶鞘，留用5毫米左右的基座，并将此圆锥型外植体十字形切为4块，编号后，置入诱导培养基中培养，培养温度为27℃～31℃。开始培养时，可只用自然弱光，待长小芽后光照采用800～1000Lxs。 1.1.4.继代苗的培养 将已开始增殖的芽顶部叶片切除，切除的叶片可作为病毒检测的材料。将基部切成含有2～4个芽的小块，转接到继代培养基中培养。培养温度27℃～31℃，光照为800～1000Lxs，经检测不带生产上检定病毒的株系方可作为繁殖材料继代增殖。20～30天继代一次，继代培养次数不超过12代。 1.1.5生根苗的培育 将假茎生长至2厘米左右的无根继代苗转入生根培养基中培养，培养温度为27℃～31℃，光照2500～3000Lxs，每天光照的时间为10小时左右。 1.1.6组培苗的炼苗培养