文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展
抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展

肿瘤转移是是恶性肿瘤的一个重要表现,是指肿瘤细胞从原发部位侵入血管、淋巴管或体腔,在新的部位由于血管生成而继续生长,从而形成与原发瘤相同类型肿瘤的过程。主要经淋巴管、血道转移,它的出现往往标志着预后不良,大多数的癌症患者死亡与肿瘤转移密切相关[1]。肿瘤转移是一个多阶段的复杂过程,大体归纳如下:即机体内原发部位的肿瘤细胞在生长过程中细胞内部的骨架发生重排、变形,从而脱落侵入细胞外基质(ECM),酶解ECM进入循环系统,在循环系统释放的血管生成因子与内皮细胞特异性受体结合后,生成新的血管,瘤细胞在血管构建的“骨架”上增殖,形成一个新的癌巢,再脱离出循环系统,在机体某个点定居下来,并逐渐增殖成长为一个新的肿瘤瘤块的一系列过程。如果肿瘤细胞反复转移,后果则相当的严重。这是目前肿瘤难治的一个主要原因,所以研究抗肿瘤药物抗肿瘤转移的机制,从而筛选、开发出新的能促进机体抗肿瘤转移的药物是非常重要的。

抗肿瘤转移机制的药理实验方法主要涉及到以下几个方面:

1. 建立肿瘤转移的动物模型

一般以大鼠、裸鼠为常用动物模型。将目标瘤细胞如SGC-7901胃癌细胞株、S180肝癌细胞株等置于含10%小牛血清的RPMI-1640培养基中,培养箱条件为37℃,5%CO2进行细胞培养,0.1%胰酶消化传代后制备细胞悬液,之后将细胞悬液以皮下注射或腹腔注射的方式,将肿瘤移植入动物体内。黄挺[2]等人采用皮下接种W256癌肉瘤的方法建立了Wistar大鼠的肝癌转移模型;魏锦来[3]通过腋下接种SGC-7901细胞悬液的方式建立了裸鼠的胃癌原位移植瘤动物模型。此外还有尾静脉注射、裸鼠脑部右尾状核注射人肿瘤组织制备的细胞悬液等方式接种。现阶段裸鼠的应用对于肿瘤方面的研究更有意义,因为裸鼠体表无毛,其先天性缺乏T淋巴细胞,免疫功能低于别的实验动物,更容易进行异种肿瘤的移植。而大鼠由于价格相对便宜而应用较为广泛。此外也可用C57BL/6小鼠等动物建立动物模型。均应在无菌条件下进行造模,以免细菌等微生物产生污染。

2. 观察转移情况

肿瘤转移的动物模型建立以后,需对动物进行分组实验研究。一般分为空白对照组、药物组、阳性药对照组等。薛晓红等人在进行乳宁冲剂及其拆方对裸鼠

移植瘤肺转移的抑制作用及机制时[4],将裸鼠分为6组,每组8只,7周后处死裸鼠,取出原发部位肿瘤和肺,分别称重、检测原发部位肿瘤体积和肺部肿瘤转移情况。观察转移情况的方法是:将组织块固定于含有甲醛的固定液中24小时,电子显微镜观察组织表面灰白色结节的数目,即可求出各组平均转移数和转移抑制率。肿瘤转移的好发部位通常是淋巴结、肺部、肝脏甚至脑部,通常需要重点观察这些部位,另外由于肿瘤转移会通过血管,因此还需检查血液的转移情况。一般要在动物建立肿瘤模型的7-10周后才可处死动物观察转移情况,时间过短可能还不能发生转移,时间过长则可能导致动物的死亡。

3. MMP、VEGF的检测

MMP是一种参与肿瘤转移的内源性蛋白酶,其全名是基质金属蛋白酶(matrix metallop roteinases,MMP),主要分为MMP-2、MMP-9等成分。人体的成纤维细胞、巨噬细胞甚至一部分肿瘤细胞都会分泌出这种酶,其在纤溶酶等外源性酶的作用下,被激活从而酶解细胞外基质(ECM),使肿瘤细胞越过由ECM构成的天然屏障,进入循环系统,MMP的含量增加能导致肿瘤转移的侵袭性更强。[5]此外它还会与血管生成因子(VEGF)结合诱导血管的生成,VEGF是由肿瘤细胞或巨噬细胞分泌的,其能促进内皮细胞分裂、毛细血管出芽、促进蛋白酶的生成、刺激内皮细胞游走,最终导致新生毛细血管的生成。[6]血管生成构成了肿瘤形成的物质基础,为肿瘤转移提供了优厚的条件。[7]研究抗肿瘤药物是否能抑制MMP、VEGF的表达,从而发挥抗肿瘤转移作用。一般采用免疫组化法(SP-ABC)检测蛋白表达水平。鲁荤[8]等人所采用的SP方法是:将对数生长期的细胞接种于6孔培养板,分为实验组和对照组,实验组加入一定浓度的药物后培养一段时间,再用PBS洗涤、乙醇固定;之后使用抗蛋白抗体进行SP染色;最后在显微镜下计算阳性细胞和阴性细胞的数目,比较出阳性染色和阴性染色。魏锦来采用免疫组织化学-SABC法检测MMP-9、VEGF的蛋白表达水平,通过Western 印迹法检测蛋白质含量,发现药物组的瘤块MMP-9、VEGF的表达水平较低,蛋白质含量下降,即药物下调了MMP-9、VEGF的表达,有一定的抗肿瘤转移作用。Arresten 一种新近发现的强效血管生成抑制因子, 其抑制血管生成的作用显著强于内皮素,很有希望被研制成新一代的抗肿瘤血管生成抑制剂。龙淼云等人9]通过在结肠癌细胞LoVo中导入arresten 基因, 并将其接种至裸鼠, 建立结肠癌肝转移模

型, 观察arresten 对肿瘤转移的作用。研究发现导入arresten 基因的LoVo 细胞形成的转移瘤的微血管密度(MVD)与肿瘤重量均显著低于未转染arresten 基因的LoVo细胞。且转移瘤内的结节数和肿瘤细胞的转移率明显低于未导入arresten 基因的LoVo。提示arresten 可能通过抑制肿瘤血管的生成进而抑制转移肿瘤的生长。

4.血清、腹水、转移瘤内癌胚抗原(CEA)的含量测定

癌胚抗原(CEA)是一种存在于胚胎和大部分原发和转移性结肠癌、乳腺癌等瘤组织中特异性表达的糖蛋白,具有粘附作用,可能对细胞的分化和肿瘤转移有促进作用。其在肿瘤患者的血液中大量存在,更有利于肿瘤的转移。CEA表达的高低可以作为癌症是否转移的一个重要指标[10]。孙华君[11]等人在建立了裸鼠肝转移瘤模型4周后处死裸鼠,采用双抗体放射免疫分析法检测裸鼠血清、腹水、转移瘤内CEA的含量。研究得知三氧化二砷药物组CEA含量明显低于对照组,而三氧化二砷是已用于临床的抗癌药物。由于其作用,使机体内癌胚抗原表达降低,抑制了肿瘤的转移。

5. 微血管密度(MVD)和MLD(微淋巴管密度)的测定

抗血管生成是目前研究抗肿瘤转移机制的最主要的一个部分。研究表明, 实体肿瘤生长至1mm3 以上时即需要新生血管形成,如果不能超过这个体积,肿瘤细胞就会停止生长, 处于休眠状态。肿瘤细胞不发生转移需要达到以下条件:瘤体维持在2~3 mm3, 细胞数在1×107个以内; 且肿瘤在原位保持不变的时间长达数月或数年 [12,13]。在没有新生血管生成的条件下,肿瘤侵袭转移的血行通道不存在, 肿瘤细胞就无法通过血道转移。血管生成为肿瘤转移到新的靶点,生成新的癌巢提供了必要的条件,因此检测瘤组织中微血管密度(MVD)和微淋巴管密度(MLD)的水平,是研究抗肿瘤转移机制的重要指标之一。方法:取淋巴部位的组织、血液、肿瘤组织进行切片后,先用低倍镜找到微血管和淋巴管的密集区,再调到200倍视野进行计数,计数3个视野再求平均值即分别求得。赵士彭[14]等人在研究塞来昔布对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制时所采用的MVD计数的方法类似于前者,但在高倍镜下“热点”处观察棕色的单个细胞和细胞丛,以此作为1个血管,是以5个高倍视野(400倍)血管的均数表示平均微血管密度(MVD)的。抗肿瘤药物能下调MVD和MLD的水平,有助于肿瘤转移的抑制。

6.动物移植瘤(转移灶瘤)内E-cadherin 、CD-24、CD-34、CD-44、CD-54的蛋白含量测定

肿瘤转移的整个过程离不开肿瘤细胞的粘附作用。机体原发部位的瘤细胞只有在脱落、粘附到细胞基底膜上后,才能酶解MMP,进行肿瘤转移的下一阶段的过程。粘附离不开粘附分子的参与。E-cadherin是肿瘤细胞间粘附分子[15],它能使细胞间结合紧密,阻止瘤细胞的脱落,威脉宁等药【16】能通过上调E-cadherin 的蛋白表达,发挥抗肿瘤转移作用。方法:采用Western印迹法测定动物移植瘤(转移灶瘤)内E-cadherin、的蛋白含量,即经过提取肿瘤组织的总蛋白、核蛋白、测定蛋白含量、凝胶电泳、转印蛋白质后,用抗E-cadherin抗体进行免疫反应,发光底物显迹后观察之,含有抗肿瘤药物的实验组E-cadherin的含量应该高于对照组。CD-24[17]、CD-34、CD-44、CD-54同样是机体细胞的粘附分子[18,19],参与肿瘤转移。检测方法同上。

7.转移瘤内细胞数量的检测

通过检测转移瘤内肿瘤细胞的数目,可以评价抗肿瘤药物的效果好坏。由于肿瘤通常是通过淋巴和血道转移。因此淋巴组织和血液通常是检测的主要目标。另外还有肝脏、脾胃、肺部组织也是重点检查对象。采用MTT法检测转移瘤内细胞的数量。MTT法是根据琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT(噻唑蓝,Thiazolyl blue)还原为蓝紫色结晶的原理发展而来的检测瘤细胞数量最为通用的方法。琥珀酸脱氢酶只存在于活细胞线粒体中,而死细胞则不含有。因此活细胞数量越多的,MTT的蓝紫色结晶就越多。大体方法是:在对肿瘤组织的细胞进行传代后制成一定浓度的细胞悬液,接种在96孔板中培养,分设对照组和实验组,每组加入的药物浓度以梯度增减,细胞培养后加入MTT继续培养,一般为4h,之后弃去上清液,加入二甲基亚砜,使MTT蓝紫色结晶溶解形成溶液,通过酶标仪测得溶液的光密度值,即可换算出药物对肿瘤细胞的抑制率。

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展肿瘤转移是是恶性肿瘤的一个重要表现,是指肿瘤细胞从原发部位侵入血管、淋巴管或体腔,在新的部位由于血管生成而继续生长,从而形成与原发瘤相同类型肿瘤的过程。主要经淋巴管、血道转移,它的出现往往标志着预后不良,大多数的癌症患者死亡与肿瘤转移密切相关[1]。肿瘤转移是一个多阶段的复杂过程,大体归纳如下:即机体内原发部位的肿瘤细胞在生长过程中细胞内部的骨架发生重排、变形,从而脱落侵入细胞外基质(ECM ),酶解ECM 进入循环系统,在循环系统释放的血管生成因子与内皮细胞特异性受体结合后,生成新的血管,瘤细胞在血管构建的“骨架”上增殖,形成一个新的癌巢,再脱离出循环系统,在机体某个点定居下来,并逐渐增殖成长为一个新的肿瘤瘤块的一系列过程。如果肿瘤细胞反复转移,后果则相当的严重。这是目前肿瘤难治的一个主要原因,所以研究抗肿瘤药物抗肿瘤转移的机制,从而筛选、开发出新的能促进机体抗肿瘤转移的药物是非常重要的。 抗肿瘤转移机制的药理实验方法主要涉及到以下几个方面: 1. 建立肿瘤转移的动物模型一般以大鼠、裸鼠为常用动物模型。将目标瘤细胞如SGC-7901 胃癌细胞株、S180肝癌细胞株等置于含10%小牛血清的RPMI-1640培养基中,培养箱条件为37 C, 5%CO2进行细胞培养,0.1%胰酶消化传代后制备细胞悬液,之后将细胞悬液以皮下注射或腹腔注射的方式,将肿瘤移植入动物体内。黄挺[2]等人采用皮 下接种W256 癌肉瘤的方法建立了Wistar 大鼠的肝癌转移模型;魏锦来[3]通过腋下接种SGC-7901 细胞悬液的方式建立了裸鼠的胃癌原位移植瘤动物模型。此外还有尾静脉注射、裸鼠脑部右尾状核注射人肿瘤组织制备的细胞悬液等方式接种。现阶段裸鼠的应用对于肿瘤方面的研究更有意义,因为裸鼠体表无毛,其先天性缺乏T 淋巴细胞,免疫功能低于别的实验动物,更容易进行异种肿瘤的移植。而大鼠由于价格相对便宜而应用较为广泛。此外也可用C57BL/6 小鼠等动物建立动物模型。均应在无菌条件下进行造模,以免细菌等微生物产生污染。 2. 观察转移情况 肿瘤转移的动物模型建立以后,需对动物进行分组实验研究。一般分为空白对照组、药物组、阳性药对照组等。薛晓红等人在进行乳宁冲剂及其拆方对裸鼠移植瘤肺转移的抑制作用及机制时[4],将裸鼠分为6组,每组8 只,7 周后处死裸鼠,取出原发部位肿瘤和肺,分别称重、检测原发部位肿瘤体积和肺部肿瘤转移情况。观察转移情况的方法是:将

肿瘤转移的分子机制研究进展

肿瘤转移是恶性肿瘤生物学特征之一!也是肿瘤临床治疗的难题"肿瘤转移是癌细胞与宿主细胞相互作用的连续复杂过程"首先’原发肿瘤细胞从原部位脱落’侵入细胞外基质()*+,与基底膜(-+,中大分子蛋白黏附"其次’激活细胞合成并分泌各种降解酶类’降解-+及)*+’穿过脉管壁进入循环系统’在循环中逃避免疫系统攻击’最后穿过脉管’外渗达继发部位形成克隆’增殖形成转移灶./0"现就其主要方面综述如下# /细胞运动机制与转移 肿瘤细胞的迁移由运动因子启动"运动因子与受体结合后通过信息传导而引发癌细胞的运动.!0"影响细胞运动及生长的因子有#!肝细胞生长因子1分散因子$234154%#目前的实验研究发现’234154在许多肿瘤尤其在侵袭和转移表型中均有较高水平的表达&例如’在多形性神经胶质母细胞瘤细胞中234154及编码其受体的基因+67表达水平高’尤以其侵袭边缘为明显’而在恶性程度较低的星形胶质瘤中234154表达则较低.&0&"自分泌运动因子$8+4%#8+4与细胞膜上的8+49结合可促使8+49磷酸化’从而激活一种百日咳毒素敏感的!蛋白’刺激肌醇代谢’促进癌细胞的运动&肿瘤细胞转移除了需要具备细胞运动能力外’还需要对基底膜进行降解&组织蛋白酶"是一种半胱氨酸蛋白酶’与基底膜的降解密切相关.#0& !细胞黏附机制与转移 !"#同质型黏附 同质型黏附:)#;<=>6?@A$;<76A@A复合体结构的完整性对黏附功能的发挥有重要的意义&)34和B34##通过)34受体可使)#;<=>6?@A和$#;<76A@A磷酸化导致复合体解体!影响 肿瘤转移的分子机制研究进展 佟玲’王文萍’邢玉庆(辽宁中医学院’辽宁沈阳$$%%&!, 摘要!肿瘤转移是临床肿瘤病人死亡的最主要原因之一&目前对其研究较多的是有关其分子机制方面’肿瘤转移是一个多阶段复杂的过程’其中包括肿瘤细胞的脱落’迁移’黏附’生长等’每一阶段都受着不同因素的影响和调控"全文介绍近年来此领域的研究进展" 关键词!肿瘤转移(运动(黏附(降解 中图分类号!9C&D&C文献标识码!8文章编号!/EC/D/C%F(!%%#,%&D%$GHD%& 96I6J?KL?6II KM+KN6;ON6P@A;<[6\66A@A[6I7@L<76=Z+676I@KA’L?K]7>67;Z^6U?K;6IIZ B>6?6I6 U?KL?6II@A7>@I M@6N=@I@A7?K=O;6=@A7>@I U6I@KA_=6L?<=<7@KA 收稿日期!!""#$!!$"%"修回日期!!"""$"#$!!

肿瘤学基础知识-1

肿瘤学基础知识-1 (总分:100.00,做题时间:90分钟) 一、A1型题(总题数:43,分数:100.00) 1.我国目前居恶性肿瘤死亡前四位的恶性肿瘤是 (分数:3.00) A.肺癌、肝癌、胃癌、食管癌√ B.胃癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌 C.肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌 D.肺癌、肝癌、鼻咽癌、乳腺癌 E.胃癌、肺癌、乳腺癌、宫颈癌 解析:[解析] 我国20世纪70年代恶性肿瘤死亡顺序为胃癌、食管癌、肝癌、肺癌和宫颈癌;20世纪90年代的死亡顺序为胃癌、肝癌、肺癌、食管癌和结直肠癌;2000年为肺癌、肝癌、胃癌、食管癌和结直肠癌。我国正处在由发展中国家高发癌谱向发达国家高发癌谱的过渡时期,已经形成两者共存的局面,加大了恶性肿瘤的防治难度。 2.肿瘤目前成为多发病、常见病的主要原因不包括 (分数:3.00) A.以往严重威胁人类健康的感染性疾病得到了控制 B.环境致癌物愈来愈多 C.人类平均寿命延长 D.肿瘤诊断率提高 E.世界经济一体化√ 解析: 3.八种常见恶性肿瘤不包括 (分数:3.00) A.肺癌 B.乳腺癌 C.大肠癌 D.胰腺癌√ E.食管癌 解析:[解析] 八种常见恶性肿瘤是肺癌、胃癌、乳腺癌、大肠癌、口腔癌、肝癌、宫颈癌、食管癌,胰腺癌相对发病率比较低。 4.恶性肿瘤占全球人口死亡原因的 (分数:3.00) A.第一位 B.第二位 C.第三位√ D.第四位 E.第五位 解析:[解析] 根据世界卫生组织2002年的统计,恶性肿瘤已经是全球第三大死因。心脏病、卒中、癌症为全球死亡原因的前三位。 5.目前全世界发病率最高的恶性肿瘤是 (分数:3.00) A.肺癌√ B.胃癌 C.乳腺癌 D.结直肠癌 E.肝癌

抗肿瘤转移药物研究进展

抗肿瘤转移药物研究进展 李劲(中国药房杂志社,重庆市 400042) 癌症是严重威胁人类生命健康的疾病之一,肿瘤转移则是癌症患者死亡的最主要原因〔1〕。某种程度上说,防止肿瘤转移即能控制肿瘤所致的死亡。虽然国内外抗肿瘤转移药物研究的时间、人力、物力投入较多,但还没有一个真正的抗肿瘤转移药物上市。相关研究领域尚缺乏系统、科学的评价手段和方法。鉴于近期在国内有抗肿瘤转移的中药申报临床研究,本文拟结合近年来肿瘤转移研究的进展,对国内抗肿瘤转移的研究情况作一简介,供同行参考。 1 抗肿瘤转移药物研究现状 肿瘤侵袭与转移是肿瘤细胞的恶性生物学行为,见于肿瘤发展的中后阶段。肿瘤侵袭也称为肿瘤直接扩散(direct spread)[1,2]。瘤细胞不连续性播散,并在远隔部位生长的过程为转移(metastasis)[3,4]。上述过程是一个复杂的、多步骤的过程,大致包括肿瘤细胞从原发肿瘤灶脱离;降解基底膜,向外浸润、迁移并粘附于血管内皮细胞;进入循环系统随着血流到达并停留于远处的血管壁;穿过血管侵入细胞外基质,最后在特定的组织或器官形成转移灶[7]这样一个过程〔2〕。 关于肿瘤转移机制,分别有“种子和土壤”学说、“机械和解剖”学说、“过滤”学说等〔3〕,但均没有很强的说服力。近年来随着分子生物学的发展,发现此过程分别受“转移相关基因”和“转移抑制相关基因”的调控,并且转移过程与各种细胞因子的功能失调密切相关〔4〕。由于转移过程的复杂性,肿瘤转移的分子和细胞机制尚未真正阐述清楚。 肿瘤转移过程牵涉到细胞脱落、浸润、迁移运行、着床、新生血管生成等〔5〕,理论上讲,只要能够阻止上述一个或多个过程,就能抑制肿瘤转移。目前抗肿瘤转移药物的研究也是针对肿瘤转移的各个环节,寻找具有不同药理作用的受试物。研究较多的有抑制癌细胞粘附、抑制蛋白水解酶对基底膜降解、抑制癌细胞运动、抑制肿瘤新生血管形成、抗血管内凝聚以及抗信息传递的制剂等〔6〕。其中细胞粘附分子、基质金属蛋白酶、新生血管生成因子等是抗肿瘤转移药物研究的热点。90年代国际上有多个基质金属蛋白酶抑制剂、整合蛋白抑制剂、及抗肿瘤新生血管生成抑制剂(TNP 470、酞咪哌啶酮等)进入临床试验〔7〕。但除抗肿瘤新生血管生成抑制剂研究进展较快外,其他方面研究由于没有取得预期的效果,多个临床试验并没有达到预期目的。 天然来源的抗肿瘤侵袭和转移[5]物的研究也方兴未艾,多酚类化合物如茶多酚[6]、姜黄素可抑制血管生成和肿瘤转移。单味中药材提取物,如刺五加皂苷、猪苓多糖、云芝多糖、金荞麦提取物、紫杉醇等表现出一定的诱导癌细胞凋亡、减少转移癌结节数目、抑制肿瘤细胞的侵袭和运动等作用〔8〕。补益、活血化瘀、清热解毒、化湿利水、软坚散结类的中药复方制剂也表现出减少肿瘤细胞转移的作用,初步研究结果提示,其作用机制与抗迁移机制、抑制细胞外基质的降解、抗粘附、阻断信息传递、抑制血管生成等有关〔9〕。中药为抗肿瘤侵袭和转移药物的研究提供了广阔的药物资源。目前中药抗肿瘤转移的研究仅仅是局限于实验性阶段,整体的研究水平也有待进一步提高和深入。鉴于中药物质基础的复杂性,在真正发现疗效确切的抗肿瘤转移中药制剂之前,还需要进行许多探索性的研究。 2 抗肿瘤转移药物的药效学评价[7~10] 2.1 非临床药效学评价 建立体内肿瘤转移模型是药效学研究的基础和前提。肿瘤转移模型大致多分为两大类,即自发性转移模型和实验性转移模型。自发性转移模型是一种移植瘤转移模型,其标准部位是腋部背侧皮下移植。凡是从血管或淋巴管直接接种瘤细胞后引起的转移,为实验性转移模型。 在模型建立方面开展的研究工作较多〔10〕,如1840年,Langenbeck将新鲜肿瘤材料接种到狗静脉内,引起了肺内肿瘤生长,是建立实验性转移模型的开端,此后又用啮齿类动物建立了该类模型,以及皮下移植的自发性转移模型。20世纪80年代初,Bogden将瘤组织移植于小鼠肾包膜下,建立了肾包膜下侵袭模型。人类恶性肿瘤裸鼠移植瘤是近十几年来发展比较迅速的研究领域,特别是原位移植技术的引进,开拓了在人体外整体实验研究人类恶性肿瘤的重要途径,使之更接近机体环境的特点。 淋巴道转移的实验研究起步较晚。20世纪50年代,有人用肿瘤细胞进行淋巴管内移植,以后又发展到用鼠类爪垫内侧皮下移植、骨髓腔内移植及阴茎部位皮下移植等建立淋巴道转移模型。为肿瘤转移的实验研究创立了有利条件〔11〕。 国内在20世纪80年代前后对建立肿瘤侵袭与转移模型进行了广泛的研究,建立的动物肿瘤转移模型有小鼠宫颈癌、小鼠胃癌、小鼠肺癌、小鼠肝癌等高转移模型。自1978年由国外引进裸小鼠后,建立了大量人类肿瘤在免疫缺陷动物体内的转移模型,如人肠黏液腺癌、

【9A文】肿瘤的转移机制综述

肿瘤转移的分子机制 陈露12级七临9班12170918 指导老师:马长艳 【摘要】恶性肿瘤是危害人类健康的全球公共卫生问题之一,为新世纪人类的第一杀手。转移是恶性肿瘤发生和演变过程中最危险的阶段,了解恶性肿瘤侵袭、转移发生机制,寻找相应阻断途径对遏制恶性肿瘤发展有重要作用。本文就恶性肿瘤细胞侵袭与转移机制的研究进展作一综述。 【关键词】恶性肿瘤、侵袭、转移机制 众所周知,转移是恶性肿瘤患者死亡的主要原因,大约90%的恶性肿瘤患者死于肿瘤转移[1]。肿瘤的转移过程包括从肿瘤的原发部位脱离,进入周围的基质,进入循环或淋巴系统,粘附在内皮细胞壁并向血管外迁移及在远处侵润,血管增生,形成新的转移灶等。从上个世纪StephenPaget提出肿瘤转移的种子-土壤学说到现在,人类对于肿瘤转移机制的研究已有一百多年历史。随着各种理论的不断完善,人们对于肿瘤转移这一极为复杂的病理过程有了更进一步的认识。肿瘤的转移主要与以下几个因素有关。 1.遗传异质性 实验证实,肿瘤细胞的同一转移性克隆中可以分离出不同恶性潜能的亚克隆,而高转移性克隆出现遗传学突变的频率要远远高于非转移性克隆,提示肿瘤转移是一个主动的过程,与基因组的不稳定性具有早期联系[2]。临床上与肿瘤转移相关的基因分为肿瘤转移促进基因及肿瘤转移抑制基因,如matal、H-ras、nm23、mts-1、WDNM、PGM21等,它们通过参与信号传导,诱导转移表型,调节细胞因子表达来诱导、促进、抑制肿瘤转移,如VaramballR等[3]研究发现EZH2在前列腺癌转移演进的过程中通过异位过表达和重建染色体等组成性抑制多种抑癌基因,并与肿瘤的转移和不良预后密切相关。肿瘤的遗传异质性是肿瘤细胞逃避免疫监视、产生化疗抗性、形成转移复发的根源,是抗转移治疗中不可忽视的重要环节。 2.上皮间充质转化EMT 2.1EMT概念 上皮间质转化(EMT)是指具有极性的上皮细胞转换成具有活动能力、能够在细胞基质间自由移动的间质细胞的过程,它以上皮细胞极性的丧失及间质特性的

肿瘤学(主治医学)基础知识部分及答案详解

基础知识 一、A型题 1.规范化癌症疼痛处理的目的 A.缓解疼痛,改善功能,延长生存时间 B.缓解疼痛,控制肿瘤生长,延长生存时间 C.缓解疼痛,改善功能,提高生活质量 D.缓解疼痛,规范医疗质量 E.延长生存时间,改善生活质量 正确答案:C 2.目前流行病学调查研究显示导致肺癌发生率增加的最主要因素是 A.大气污染 B.支气管炎 C.吸烟 D.哮喘 E.肺气肿 正确答案:C解题思路:世界上绝大多数国家承认85%的男性肺癌和46%的女性肺癌是由于吸烟引起的。很多发展中国家吸烟的人越来越多,肺癌患者也日益增多;发达国家由于宣传戒烟,肺癌的发生率已不再增高。目前研究显示大气污染与肺癌的发病也有一定相关性。 3.止痛药物治疗的基本原则不包括 A.按阶梯给药 B.口服给药 C.按时给药 D.个体化给药 E.不要随便调整剂量 正确答案:E 4.目前全世界发病率最高的恶性肿瘤是 A.肺癌 B.胃癌 C.乳腺癌 D.结直肠癌 E.肝癌 正确答案:A解题思路:目前,由于吸烟和工业化的发展,肺癌是全世界发病率最高的恶性肿瘤,其次为乳腺癌,第三为结直肠癌。 5.非复方吗啡口服剂量15mg q4h换算为非肠道用药的等效镇痛剂量为 A.5mg q4h B.4mg q6h C.10mg q4h D.12mg q8h E.2mg q8h 正确答案:A解题思路:全天吗啡口服药物总量的1/3为非肠道用药的剂量。 6.关于肿瘤综合治疗的定义正确的是 A.手术+放疗+化疗 B.手术+放疗+化疗+靶向治疗

C.手术+放疗+化疗+免疫治疗 D.手术+放疗+化疗+生物治疗 E.根据患者的具体情况,有计划地合理应用现有的治疗手段,以期更好地提高治愈率正确答案:E 7.下列药物中不属于麻醉药品的是 A.度冷丁 B.芬太尼 C.强痛定 D.吗啡 E.氢可酮 正确答案:C 8.环境致癌因素包括 A.生物致癌因素 B.物理致癌因素 C.化学致癌因素 D.以上均是 E.以上均不是 正确答案:D 9.关于遗传因素和肿瘤发生的关系,说法错误的是 A.有些肿瘤具有明显的家族聚集现象 B.环境因素是肿瘤发生的始动因素,而个人的遗传特征决定肿瘤的易感性 C.暴露于同一致癌物环境中的人群均会患癌 D.抑癌基因的变异或丢失可致癌 E.癌基因的激活可致癌 正确答案:C解题思路:肿瘤的发生和发展是十分复杂的,除了外界致癌因素的作用外,机体的内在因素也起着重要作用,即人的遗传特征决定肿瘤的易感性。所以即使处于相同的致癌物环境中,有些人患肿瘤,而另外一些人却能活过正常寿命期,提示个体因素如遗传特征在肿瘤的发生中也起重要作用。 10.恶性肿瘤占全球人口死亡原因的 A.第一位 B.第二位 C.第三位 D.第四位 E.第五位 正确答案:C解题思路:根据世界卫生组织2002年的统计,恶性肿瘤已经是全球第三大死因。心脏病、卒中、癌症为全球死亡原因的前三位。 11.阿片类药物最常见的不良反应是 A.呼吸抑制 B.嗜睡 C.便秘 D.眩晕 E.腹泻 正确答案:C解题思路:恶心呕吐、便秘、呼吸抑制、嗜睡、眩晕等都属于阿片类药物的不良反应,但最常见的是恶心呕吐和便秘。在给予阿片类药物控制疼痛时,要同时辅助给

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展

抗肿瘤转移机制的实验方法学研究进展 肿瘤转移是是恶性肿瘤的一个重要表现,是指肿瘤细胞从原发部位侵入血管、淋巴管或体腔,在新的部位由于血管生成而继续生长,从而形成与原发瘤相同类型肿瘤的过程。主要经淋巴管、血道转移,它的出现往往标志着预后不良,大多数的癌症患者死亡与肿瘤转移密切相关[1]。肿瘤转移是一个多阶段的复杂过程,大体归纳如下:即机体内原发部位的肿瘤细胞在生长过程中细胞内部的骨架发生重排、变形,从而脱落侵入细胞外基质(ECM),酶解ECM进入循环系统,在循环系统释放的血管生成因子与内皮细胞特异性受体结合后,生成新的血管,瘤细胞在血管构建的“骨架”上增殖,形成一个新的癌巢,再脱离出循环系统,在机体某个点定居下来,并逐渐增殖成长为一个新的肿瘤瘤块的一系列过程。如果肿瘤细胞反复转移,后果则相当的严重。这是目前肿瘤难治的一个主要原因,所以研究抗肿瘤药物抗肿瘤转移的机制,从而筛选、开发出新的能促进机体抗肿瘤转移的药物是非常重要的。 抗肿瘤转移机制的药理实验方法主要涉及到以下几个方面: 1. 建立肿瘤转移的动物模型 一般以大鼠、裸鼠为常用动物模型。将目标瘤细胞如SGC-7901胃癌细胞株、S180肝癌细胞株等置于含10%小牛血清的RPMI-1640培养基中,培养箱条件为37℃,5%CO2进行细胞培养,0.1%胰酶消化传代后制备细胞悬液,之后将细胞悬液以皮下注射或腹腔注射的方式,将肿瘤移植入动物体内。黄挺[2]等人采用皮下接种W256癌肉瘤的方法建立了Wistar大鼠的肝癌转移模型;魏锦来[3]通过腋下接种SGC-7901细胞悬液的方式建立了裸鼠的胃癌原位移植瘤动物模型。此外还有尾静脉注射、裸鼠脑部右尾状核注射人肿瘤组织制备的细胞悬液等方式接种。现阶段裸鼠的应用对于肿瘤方面的研究更有意义,因为裸鼠体表无毛,其先天性缺乏T淋巴细胞,免疫功能低于别的实验动物,更容易进行异种肿瘤的移植。而大鼠由于价格相对便宜而应用较为广泛。此外也可用C57BL/6小鼠等动物建立动物模型。均应在无菌条件下进行造模,以免细菌等微生物产生污染。 2. 观察转移情况 肿瘤转移的动物模型建立以后,需对动物进行分组实验研究。一般分为空白对照组、药物组、阳性药对照组等。薛晓红等人在进行乳宁冲剂及其拆方对裸鼠

肿瘤侵袭和转移的恶性生物行为及分子干预

项目名称:肿瘤侵袭和转移的恶性生物行为及分子 干预 首席科学家:詹启敏中国医学科学院肿瘤医院肿瘤 研究所 起止年限:2009.1至2013.8 依托部门:教育部

一、研究内容1.细胞周期调控异常与肿瘤恶性增殖、侵袭相关分子机理 肿瘤是一种“细胞转导通路异常”性疾病,我们将通过分子生物学、细胞生物学、和动物模型相结合的研究技术,重点研究抑癌基因p53、BRCA1、Gadd45介导的信号通路与细胞周期蛋白Aurora-A、Cyclin B1、Plk1的相互作用,以及在细胞周期调控和肿瘤恶性表型形成中的生物学功能和分子机制。从而揭示细胞增殖失调与肿瘤侵袭转移的内在联系。 2.细胞凋亡和分化异常与肿瘤侵袭性生长的关系 细胞凋亡调控机制的异常与侵袭特性生长密切相关。促进细胞死亡的机制失活和抑制凋亡的分子的大量表达使癌症细胞存活延长,使基因突变的积累和癌变机会的增加,同时凋亡机制的异常导致肿瘤细胞具有抗药性。通过对细胞死亡新机制、肿瘤干细胞凋亡相关研究、细胞信号转导与凋亡调控等研究,深入探讨侵袭性生长的机制。 3.肿瘤干细胞和肿瘤微环境与肿瘤转移的内在关系 以恶性肿瘤干细胞特异性表型为突破口,从白血病干细胞延伸至实体瘤干细胞,研究其自我更新和分化的特性,探讨肿瘤转移的起始因素和关键分子生物学性质,认别恶性肿瘤干细胞与微环境或肿瘤“基质”间的相互作用机制,从而为特异性打击肿瘤干细胞作为彻底消除肿瘤转移潜能的一种新策略提供重要的理论基础。 4. 肿瘤血管和淋巴管新生介导的肿瘤转移机制 已鉴定肿瘤组织中血管表达Tim-3和淋巴管表达Sema4c等是沉默抗肿瘤免疫的重要活性分子,能通过与淋巴细胞的对话,诱导机体对肿瘤的免疫耐受,是

结直肠癌转移机制研究进展

33 Journal of China Prescription Drug Vol.17 No.1·综述· 结直肠癌是临床上较为常见的一类实体恶性肿瘤,近年来的流行病学研究显示,结直肠癌的发病有年轻化趋势[1],且由于缺乏早期诊断与高效的筛查方法,大多数患者确诊时已发展至晚期或局部晚期,预后较差。随着各种医疗技术的不断发展以及化疗药物、靶向药物的研制,对结直肠癌患者的临床治疗效果有了较大的改善,但从远期生存率来看,大多数患者的生存率并没有得到提高[2]。导致这种情况的原因主要是结直肠癌患者在实施根治性手术前病灶就已经发生了微转移[3]。因此结直肠癌防治的关键在于控制肿瘤的转移。现阶段临床上对于结直肠癌转移的机制了解比较少,使得防治肿瘤侵袭以及转移的相关措施受到限制。因此本次研究主要对结直肠癌转移的机制进行一简要综述,以期为临床结直肠癌的诊疗工作提供一定的参考。 1 分析结直肠癌转移的相关分子研究 现阶段临床上对于结直肠癌转移的相关分子研究结果比较多,有报道称,目前已经有数百种基因和结直肠癌转移的调控过程有关,而且参与的基因数目还在不断的升高[4-5]。科学技术的不断发展,基因芯片、蛋白质组学技术等技术的更新,全基因(蛋白质)组水平表达谱的变化可以根据基因(蛋白)进行研究。通过强有力的筛选,发现疾病的发生原因和许多新的基因也息息相关,同时对已知基因的未知功能有了新的注释[6-7]。而且还对基因(蛋白)表达和肿瘤转移的关系有了新的认识。相关学者的研究资料显示[8],多次对肝转移灶内肠癌肿瘤细胞进行原代培养,建立了高转移潜能的细胞亚系M5,将其和亲本细胞比较,这种细胞的成瘤能力以及自发转移、腹膜种植转移能力都显著的增强,成为了结直肠癌转移研究的理想状态。临床上筛选肿瘤转移相关蛋白的比较强有力的工具就是蛋白质组学策略,结直肠癌发生的不同阶段,蛋白质表达谱可以全面的对疾病的进展情况提供有利的线索。而且近年来临床上的大量研究证实发现,乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌等都会受到蛋白质表达谱的调控。 2 结直肠癌转移和微RNAs的关系 微RNAs属于一组长度19-22核苷酸的非编码序列RNAs,和细胞分化、细胞的周期调节、应激过程、凋亡等许多重要的程序表达调控都有关系。微RNAs调控和整个生物生命活动的各种生物学过程都有联系,同时还影响了恶性肿瘤的发生、转移、进展[9]。单个的微RNAs可以对数百个基因的表达进行调节,同时还可以利用碱基的不完全配对与特定目标mRNA进行结合,转录后水平对靶mRNA的降解以及抑制翻译过程的发挥负调控基因表达过程具有促进作用,使得生物学的功能充分的发挥。所以由于调节靶点的差异,微RNAs存在于不同肿瘤的整个过程的特异性都比较强大。而且有大量的研究证实结直肠癌转移的关键在于微RNAs。 miR-133a对结直肠癌细胞的侵袭性表型具有抑制作用,导致了丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的信号通路发生失活的现象,降低了体内成瘤的能力以及转移能力,在靶点处直接发生作用,使得结直肠癌转移的相关蛋白LASP1、靶向LASP1mRNA的3,UTR区域的LASP1表达发生抑制的现象[10-11]。一般情况下,癌变过程中表观遗传学改变就会发生,DNA甲基化机制会使miR-133a的表达出现下调的现象,同时甲基化和结直肠癌的演变过程息息相关,从而使得LASP1的表达发生失调的现象,使得结直肠癌发生了转移。有研究资料显示,结直肠癌中出现了miR-212杂合性丢失的现象,而且高甲基化状态对其表达水平产生了抑制,对于侵袭性以及预后效果不佳的患者中进行下调的效果比较显著。MiR-212对细胞的侵袭、迁移能力以及体内肝、肺的转移能力具有抑制作用。同时还会对癌基因进行调控,肿瘤转移过程中的关键环节是抑癌基因的直接调控。 3 结直肠癌转移和EMT的关系 EMT(上皮细胞-间充质转化)临床上的主要特征就是上皮表型缺失以及间质表型获得,生物学家将其用于胚胎发育过程中某些特定部位的上皮细胞所发生的形态学改变的描述中[12-13]。同时胚胎的形成、发育、肿瘤的侵袭转移都和基本的生理病理现象有关,而且细胞的表皮不仅发生变化,也影响了细胞标志物。芯片筛选出的结直肠癌转移的相关基因就是FMNL2,在结直肠癌中的表达能力比较强,同时也和淋巴结转移息息相关。FMNL2对直肠癌细胞体外增殖具有促进作用,并且促进了运动、侵袭能力,这种情况的主要相关机制比较复杂,其中包括[14]:①FMNL2和LPA诱导活化RhoA/ROCK信号通络都有参与,同时还对下游效应分子例如P-MLC、p-LIM1以及p-cofilin也发生活化作用,对肌动蛋白丝的装配以及稳定肌动蛋白丝的结构具有调控作用,反过来FMNL2本身就可以活化RhoA的下游效应分子,和RhoA之间形成正反馈通络,增强和扩大了信号调控细胞效应例如肿瘤细胞的运动和侵袭;②FMNL2的表达和EMT的标志物息息相关,将FMNL2敲除会使得细胞向上的皮样发生形态转化,同时E-cadherin、α-catenin等的表达会不断的上调,并且vimentin、snail、slug的表达会出现下调的现象,使得转化生长因子-β的诱导对EMT以及细胞癌的侵袭能力发生抑制,这种过程的实施主要是借助MAPK/MEK信号通路进行介导的。因此结直肠癌细胞才发生了侵袭和转移的现象。 4 肿瘤微环境以及结直肠癌转移的关系 肿瘤的微环境主要是指肿瘤细胞产生以及生活的内部环境,不仅有肿瘤本身,还和周围的成纤维细胞、免疫、炎症细胞等有关,并且其中还包括附近区域内的细胞间质、微血管、浸润在其中的生物分子等。一般情况下肿瘤代谢的旺盛、生长速度的加快、繁殖能力增强等都是能量需求的表现,肿瘤本身体积的不断增大,肿瘤的组织供血就会欠缺,使得微环境发生缺氧的现象。临床上大多数恶性肿瘤都存在这种现象,由于缺氧的区域经常会出现坏死的现象,使得肿瘤扩散和转移的现象更加容易发生。现阶段临床上公认的一种缺氧诱导因子(HIF-1α)在肿 结直肠癌转移机制研究进展 赵国刚 (天津市第五中心医院普外科,天津 300450) 【摘要】结直肠癌在我国的发病率比较高,在全球各种恶性肿瘤的发病率中位居第三位,而导致患者发生死亡的主要原因就是癌变发生侵袭和转移。肿瘤转移的步骤比较多,而且也是多阶段性的,牵扯的基因也比较多,其过程比较复杂,例如肿瘤在原发部位发生了脱离,和周围的基质相互融合,肿瘤细胞进入循环系统以及淋巴系统,在内皮细胞壁处粘附,逐渐的外延至血管或者更大的面积,发生了血管增生的现象,最终导致了新的转移灶的形成。因此本次研究针对结直肠癌转移的相关基因、微RNAs、上皮-间质转化、肿瘤干细胞、肿瘤的微循环等问题进行一简要综述。 【关键词】结直肠癌;转移;相关机制;研究进展

-年 中南大学博士 肿瘤学基础试题及答案

2013年中南大学博士肿瘤学基础 一、简答题 1. 简述肿瘤浸润的机制 2. 简述肿瘤的遗传易感性 3. 简述细胞凋亡的生物学意义 4. 何谓癌基因、原癌基因与抑癌基因 5. 何谓肿瘤的基因治疗 基因治疗是以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗,是将人的正常基因或有治疗 作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞,直接针对疾病的根源——异常的基因本身而发 挥治疗作用,从而达到治疗疾病的目的。 基因疗法综合应用分子生物学、分子遗传学、分子病毒学、细胞生物学等学科的最新 研究成果 基因疗法就是基因治疗产品进入细胞后再产生目的蛋白质或多肽,从而发挥特异的生 物治疗作用。临床实验证明,基因治疗的疗效高于单纯放、化疗疗效约 3 倍;治疗非小细胞癌,60% 的患者肿瘤完全消退或部分消退;对乳腺癌的疗效达到90% 。 基因治疗药物作为一种基因工程改造的病毒颗粒,对机体神经系统、内分泌系统和免 疫系统具有刺激作用,可综合调控机体的神经—内分泌—免疫网络,产生一系列的神经因子、激素及细胞因子,增强病人的免疫系统功能,有效促进NK 细胞、CTL 细胞对肿瘤细胞的杀灭;并能有效改善和增强病人各相关器官系统的生理功能,肿瘤病人(尤其是晚 期病人)全身情况很快好转,如精神状况好转、食欲增强等。其作用原理是:通过转录调 控多种功能不同的分子的表达,对肿瘤细胞的生存与增殖信号途径、血管生成及物质能量 代谢途径、放化疗抗性、浸润转移等多个方面的活性进行抑制,达到“此消彼长”的效果,协同正面攻势,一举导致细胞凋亡。 基因疗法是通过口服或注射基因药物来抑制肿瘤源发和扩散,使癌细胞主动性凋亡, 以达到延长生命的效果。与传统的手术及放、化疗方法相比,基因治疗基本无副作用,对 正常细胞无损伤、没用痛苦,不会像放化疗那样对人体有很多附加的损害和不良的反应。 特别对那些晚期的放、化疗都没有效果的肿瘤患者尤为有效。 把基因治疗与放疗、化疗、手术、中医中药等传统治疗方法相结合,为肿瘤治疗注入 新血液。 6. 生物反应调节剂的作用机制是什么 生物反应调节剂(biological response modifiers,BRM)又名生物调节剂,是免疫治疗剂的新术语。凡某一类物质主要通过免疫系统直接或间接增强机体的抗肿瘤效应,并对肿 瘤有治疗效果的药剂或方法,都可称为生物反应调节剂。 Michell对生物反应调节剂提出的定义: (1)直接增强宿主抗肿瘤反应,如细胞因子等;(2)减少抑制性机制,间接增强宿 主抗肿瘤反应;(3)增强宿主对细胞毒性物质的耐受能力;(4)改变肿瘤细胞膜结构增 强其免疫原性,或使肿瘤细胞对自身免疫或抗肿瘤药物更敏感;(5)预防或逆转细胞转化。 这些物质包括对机体免疫功能有增强作用、调节作用及能恢复、重建免疫功能的药物,多种细胞因子如淋巴因子、单核因子、肿瘤生长抑制因子和胸腺因子等;免疫活性细胞如 细胞毒性T淋巴细胞、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞),细胞因子激活的肿瘤浸润 淋巴细胞(TIL细胞)等;单克隆抗体、某些非特异性刺激物质如预防结核的卡介苗、短 小棒状杆菌等;还有化学合成类药物如左旋咪唑等。此外,某些中药、多糖类(如香菇多

恶性肿瘤的转移机制与治疗策略

中国肿瘤生物治疗杂志 http ://https://www.wendangku.net/doc/511944978.html, Chin J Cancer Biother ,Aug.2008,Vol.15,No.4 DOI :10.3872/j.issn.1007?385X ·2008·04·002 ·专家论坛· 恶性肿瘤的转移机制与治疗策略 王杰军,应明真(第二军医大学长征医院肿瘤科,上海 200070) [作者简介] 王杰军,医学博士,教授,博士生导师,毕业于第二军医大学,现任长征医院肿瘤科主任。社会兼职:中华医学会上海分会肿瘤专科委员会主任委员,中国生命关怀协会舒缓治疗专业委员会主任委员,上海癌症康复与姑息治疗专业委员会主任委员,中国癌症康复与姑息治疗专业委员会副主任委员,上海市防癌抗癌事业发展基金会副理事长,中国临床肿瘤协作中心(CSCO )常务委员,中华医学会疼痛学分会常务委员,国家药品监督管理局药物审评委员会委员,上海市综合性医院肿瘤专题组组长,上海市疾病预防控制中心专家委员会委员。主要从事肿瘤转移的基础与临床、姑息治疗、胃癌的预防和综合治疗等方面研究。先后承担国家自然科学基金、国家“863”计划、国家科技支撑计划、上海市优秀学科带头人计划、上海市自然科学基金等11项研究项目,科研经费600余万元。主编参编 专著5部,发表科研论文60余篇(其中SCI 收录3篇);获得军队科技进步一等奖1项,军队医疗成果二等奖、三等奖各1项。E?mail :jiejunw@https://www.wendangku.net/doc/511944978.html, [摘 要] 近年来,尽管恶性肿瘤的检测和治疗手段取得了长足进步,但肿瘤转移仍然是恶性肿瘤治疗失败和患者死亡的最主要原因。系统生物学和功能基因组学的发展使我们从分子水平对转移本质有了深入认识,在对肿瘤遗传异质性(tumor heterogeneity ) 、转移前生境(pre?metastatic niche )、上皮间充质转化(epithelial?mesenchymal transition ,EMT )、失巢凋亡抗性(anoikis resistant )、血管与淋巴管生成(angiogenesis and lymphangiogenesis )等恶性肿瘤转移相关机制形成共识的基础上,提出了加强分子靶向治疗、针对肿瘤干细胞治疗、充分利用小干扰RNA 技术等临床抗肿瘤转移的治疗策略。[关键词] 肿瘤转移;分子靶向治疗;肿瘤干细胞;小干扰RNA [中图分类号] R730 [文献标志码] A [文章编号] 1007?385X (2008)04?0305?06 Recent progress in metastasis mechanism of malignant tumors and their treatment strategies WANG Jie?jun ,YING Ming?zhen (Department of Oncology ,Changzheng Hospital ,Second Military Medical University ,Shanghai 200070,China ) [Abstract ] Although great achievement has been made on the diagnosis and treatment of malignant tumors ,metastasis of tumor remains to be the major reason for treatment failure and death of their victims.The development of systematic bi?ology and functional genomics give us a deeper understanding of the nature of metastasis at the molecular level.Based on the consensus reached on the metastasis mechanisms of cancer ,including the genetic heterogeneity of cancer ,pre?meta?static niche ,epithelial?mesenchymal transition ,anoikis resistance ,angiogenesis and lymphangiogenesis ,藻贼糟,the targeted therapy at molecular level should be emphasized ,the treatment should target the tumor stem cells ,and RNAi technique and other techniques should be used in clinical anti?metastatic therapy. [Key words ] neoplasms metastasis ;molecular targeted therapy ;tumor stem cell ;small interfering RNA [Chin J Cancer Biother ,2008,15(4):305?310] [基金项目] 卫生部国家科技支撑计划项目(No.2006BAI02A00).Surpported by the Science and Technology Foundation of Public Health of China (No.2006BAI02A00) 恶性肿瘤细胞脱离原发肿瘤,经血循环、淋巴道、体腔等到达继发组织器官形成相同性质肿瘤的过程称为转移。转移是恶性肿瘤的基本生物学特征,也是临床绝大多数肿瘤患者治疗失败和死亡的主要原因,防治转移是改善肿瘤预后的关键。恶性肿瘤的转移过程复杂多变,突破基底膜的侵袭被认 为是转移的早期事件和主要特征。但不同类型的细 胞转移特性各不相同,某些类型的肿瘤极富侵袭性, · 503·

大蒜素抗肿瘤机制研究进展

大蒜素抗肿瘤机制研究进展 摘要:大蒜素(Allicin)是大蒜中主要生物活性成分的总称,化学名为二烯丙基三硫化物(DADS),具有抗肿瘤、降胆固醇、抗血小板聚集、护肝、降血压等生理学作用。近年来大蒜素抗肿瘤作用的相关报道很多,可通过不同途径、多种机制实现抗肿瘤作用,本文对大蒜素抗肿瘤机制相关研究进展予以综述。 关键词:大蒜素;肿瘤;机制;研究进展 大蒜素又名大蒜新素,化学名为二烯丙基三硫化物,是大蒜中蒜氨在蒜酶的作用下生成不稳定的大蒜辣素分解而来。有学者通过光谱分析法对比大蒜素核酸结合特性,指出大蒜素具有抗肿瘤潜力[1]。研究发现,大蒜素对胃癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌、白血病、胶质瘤等多种肿瘤均有明显抑制作用,作用机制与抗氧化、抑制血管生成、破坏细胞骨架、直接杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞的转移和侵袭、对机体免疫功能的影响、增强抗癌药物的敏感性等有关。 大蒜素抗肿瘤作用 抗氧化 在肿瘤的发生、发展中细胞内的氧化水平起重要作用,当各种致癌物导致细胞产生过多的活性氧簇时,这些氧化物质造成细胞内的DNA 发生氧化性损伤成了癌变的始发因素[2]。已有研究表明:大蒜素的琉基和亲电子基团能清除氧自由基,可以对抗毒物对机体的氧化性损伤[3-4]。杨军领等[5]发现大蒜素可显著减轻6-羟多巴胺所致的PC12细胞损伤,这种保护作用可能是通过激活BK通道,增加内源性抗氧化酶活性,进而抑制细胞凋亡而实现的。研究肝癌证实大蒜素可以增加谷胱甘肽的合成,其作用可能是通过诱导肝癌细胞中谷胱甘肽S转移酶的表达实现的[6-7]。 抑制血管生成 近来对肿瘤生长的不断深入研究,发现血管生成对肿瘤的生长起着至关重要的作用。研究证实,大蒜素提取物可以抑制人脐静脉内皮细胞的生长、转移和管腔样小管的形成[8]。大蒜素抗血管作用与抑制血管内皮生长因子的分泌及其VEGF受体蛋白的下调和丝氨酸/苏氨酸激酶的失活相关[9]。穆颖等[10]对大蒜素作用的相关机制进行研究发现,大蒜素可明显降低MMP-9的活力,并且能有效抑制肿瘤细胞迁移过程中的调控因子VEGF的蛋白表达水平。 破坏细胞骨架 微管是由众多微管蛋白的单体分子以非共价键结合在一起构成的蛋白多聚体,主要功能是为细胞运输营养物质和参与形成纺缍体进行有丝分裂和染色体形成。由于微管在有丝分裂及细胞分裂过程中扮演重要角色,使其成为抗肿瘤药物的作用靶点。Hosono等[11]利用脂溶性的大蒜素DATS处理人类结肠癌HCT-15 和DLD-1细胞,发现DATS不但可以抑制微管的聚合和形成,而且可以引起微管解聚破裂。 直接杀伤肿瘤细胞 解云涛等[12]透射电镜观察,大蒜素抑制小鼠S180的生长,发现肿瘤细胞膜和核膜皱缩,断裂,线粒体肿胀及空泡样改变,证实大蒜素直接杀伤肿瘤细胞。俞超芹等[13]发现高浓度大蒜素( 50~100 mg/L) 对HO8910( 卵巢癌细胞株) 细胞呈直接杀伤作用。 抑制肿瘤细胞增殖细 对细胞周期的影响 细胞周期是指一个母细胞分裂结束后形成细胞至其下一次再分裂结束形成两个子细胞的这段时期,包括G1,S,G2,M四期,细胞在正常状态下沿着上述时相的演进,发生相应的形态学

整合素在肿瘤转移中的作用机制研究进展

网络出版时间:2011-10-2512:16:00 网络出版地址:http ://https://www.wendangku.net/doc/511944978.html, /kcms /detail /34.1086.R.20111025.1216.012.html 整合素在肿瘤转移中的作用机制研究进展 阮君山1,3,严令耕1,张 蕾1,陶 丽1,郑仕中1,陆 茵1, 2 (1.南京中医药大学药学院,2.江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京 210046; 3.福建医科大学省立临床学院福建福州 350001) doi :10.3969/j.issn.1001-1978.2011.11.002 文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2011)11-1484-03中国图书分类号:R?05;R329.2;R73?37;R730.2 摘要:机体重要的黏附分子整合素(Integrins )在细胞与细胞外基质间及细胞与细胞间的黏附作用已为人共知。以往的研究证实整合素与肿瘤转移有着密切关系,文献分析表明,这一研究领域一直是肿瘤转移方面的研究热点,该文着重概述近5年国际上关于整合素在肿瘤转移的作用机制方面的研究进展,表明整合素介导了大量的非配体依赖的信号转导通路促进了肿瘤转移。这使得整合素在肿瘤转移中的作用机制更加明确和深入,也为整合素抑制剂的开发带来了光明的前景。 关键词:整合素;肿瘤转移;表皮生长因子;血管内皮生长因子;上皮间质转化;信号转导 收稿日期:2011-06-20,修回日期:2011-08-31 基金项目:国家自然科学基金项目资助项目(No 30371727, 30772766);江苏省自然科学基金资助项目(No BK2007239);江苏省教育厅重大专项资助项目(No 09KJA360002);江苏省六大人才高峰课题资助项目(No 06?B?023,08?A?012);江苏高校优势学科建设工程资助项目;江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(2010?469、2010?471) 作者简介:阮君山(1976-),男,博士生,主管药师,E?mail :ruanjun? shan@https://www.wendangku.net/doc/511944978.html, ; 陆 茵(1963-),女,博士,教授,博士生导师,研究方向: 中药干预肿瘤转移分子机制,通讯作者,Tel :025?86798154,E?mail :luyingreen@https://www.wendangku.net/doc/511944978.html, 机体重要的黏附分子整合素(Integrins )在细胞与细胞 外基质间及细胞与细胞间的黏附作用以为人共知[1] 。2005年唐雪莲,李璘等[2-3]综述了整合素与肿瘤转移方面的进 展,从肿瘤细胞侵袭转移的过程出发,阐述了整合素与肿瘤转移的密切关系。根据Gopubmed 对Pubmed 上有关整合素和肿瘤转移的文献分析,近6年来对整合素的在肿瘤转移方面的文献逐年增加2005年收录了150篇文献,2009年收录了228篇文献,截至2010年平均每年收录这方面研究的国 际文献达200余篇[4] ,提示这一研究领域一直是肿瘤转移方 面的热点,对这些文献进行分析我们可以看到,近年来对整合素在肿瘤转移方面的作用新进展主要集中在整合素在肿瘤转移中的作用机制方面,研究发现整合素介导了大量的非 配体的信号转导通路促进了肿瘤转移。本文着重概述近5年国际上关于整合素在肿瘤转移研究中的重要进展,旨在对肿瘤研究工作者及制药企业研发提供重要的参考。1 机体重要的黏附分子?整合素的生物学特性 整合素是广泛存在于动植物细胞表面的一类细胞跨膜蛋白,由α和β两个亚单位经非共价键连接组成的异源二聚体。α、β链共同组成识别配体的结合点。迄今已发现约 18种α亚单位和8种β亚单位。它们按不同的组合构成20 余种整合素[5] 。 正常组织或细胞中整合素的主要生物学功能表现在介导细胞与ECM 以及细胞与细胞之间的黏附。迥异于正常组织和细胞,在肿瘤细胞中整合素往往出现异常的高表达,或 出现新的整合素表达[6] ,这些异常表达的整合素通过内外信 号转导通路,一方面影响了肿瘤细胞与基质的黏附从而使得细胞更具有侵袭性,另一方面整合素与其配体结合后向细胞内传递信号介导FAK /Ras /MAPK 、FAK /PI3K 、FAK /STAT 等多条通路信号转导,最后影响肿瘤细胞ERK 、AKT 等基因的表达,进而影响肿瘤细胞的增殖、基因转导、凋亡等生物学行 为。整合素的异常表达与肿瘤转移密切相关[7]。 2 整合素的异常表达在肿瘤转移中的作用 肿瘤转移是一个多步骤、连续的主动过程,这一过程中 多种生长因子及细胞因子起到了重要的作用[8] ,针对这些信 号通路的作用临床上采取了诸如TKI 、抗血管生成等治疗,但这些治疗并未取得理想的效果,主要原因在于治疗过程中出现了耐药。近年来的研究表明在这些耐药机制的产生方面整合素起到了重要的作用。研究表明整合素可以接受多种细胞信号因子的刺激激活如表皮生长因子、血管生成因子 等的胞内信号通路从而发挥促进肿瘤转移的作用[1]。 2.1 异常增高的整合素表达可以激活EGF 信号通路促进原发灶癌组织中肿瘤细胞的增殖与转移 肿瘤原发位肿瘤 细胞的增殖是肿瘤转移的起始因素, Kaur 等[9] 研究表明整合素的表达和卵巢癌的转移和发展密切相关,整合素的表达 上调可以明显的促进卵巢癌的转移。而Mitchell 等[10] 在乳 腺癌的研究中发现降低整合素α3v β1的表达可以降低肿瘤 细胞的原发位增生。Yu 等[11]的研究也证实了microRNA30 可以通过降低整合素的表达从而减少了乳腺癌细胞的原发 位增殖。Rebhun 等[12]在研究中发现在鼠黑色素瘤中α4整 合素的表达不仅可以促进原发位的肿瘤增生,还可以促进淋 巴转移而促进肿瘤转移。在肝癌和前列腺癌的研究中也观察到了整合素的表达与原发位的增殖密切相关。早先的研 · 4841·中国药理学通报 Chinese Pharmacological Bulletin 2011Nov ;27(11):1484耀6 万方数据

相关文档