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微生物碳氮磷测定

土壤微生物量碳氮磷测定方法

一、试剂配制

微生物量碳试剂:

1 硫酸钾溶液[c(K2SO4)=0.5mol·L-1]:称取硫酸钾(K2SO4,化学纯)87.10g,先溶于

300ml去离子水中,加热,转移溶液至容器中,再加少量去离子水溶解余下的部分,转移溶液至同一容器中,如此反复多次。最后定容至1L;(需大量配制)

2 生物量C氧化剂:1.2800g在130℃下烘干两个小时的K2Cr2O7与400mlH2O,2L的优级纯浓硫酸混合,配成2.4L的混合氧化剂溶液,在室温,棕色瓶中保存;

3 葡萄糖标准储备液(100mg/L):准确称取0.2502g的无水葡萄糖溶于1000mL的容量瓶中,存放在4℃冰箱,使用时稀释为所需标准溶液;

微生物量氮试剂:

4 醋酸锂溶液:称取氢氧化锂(LiOH·H2O)168g,加入冰乙酸(优级纯)279mL,,加水稀释到1000mL,用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH 至5.2;

5 茚三酮试剂:23g分析纯水合茚三酮溶解于750ml二甲基亚砜,加入250ml醋酸锂缓冲液,混合30min,使氧气和氮气排出;(注意此试剂在使用前一天配置,室温下密封保存)

6 氢氧化钠溶液(10mol/L):400g分析纯氢氧化钠溶于去离子水,稀释至1L;

7 柠檬酸缓冲液:42.0g分析纯柠檬酸和16.0g氢氧化钠,溶于900ml去离子水,用10mol/L

氢氧化钠调节Ph至5.0,再用水稀释至1L;

8 乙醇溶液:95%分析纯乙醇与去离子水按体积比1:1比例混合;

9 1mg/ml的硫酸铵标准储存液:称取4.7167g分析纯硫酸铵(称前105℃烘2h)溶于0.5moL/L硫酸钾溶液中,并用硫酸钾溶液定容至1000mL,摇匀,于4℃冰箱中保存。

10 0.1mg/ml的硫酸铵[(NH4)2SO4]标准液:吸取10mL1mol/L的硫酸铵标准储存液于100mL容量瓶中,用0.5mol/L硫酸钾溶液定容至100mL.摇匀。此溶液最好现配现用。

11 工作曲线的制备:分别吸取0.00mL、0 .50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、

5.00mL 0.1mg/ml的硫酸铵标准液于1000mL容量瓶中,用0.5moL/L硫酸钾溶液定容至

100mL,摇匀。然后取1.5ml,按照样液的步骤进行显色和比色。

微生物量磷试剂:

12 1mol L-1 HCl溶液:用8.33 mL的浓盐酸用蒸馏水定容至100 mL。

13 碳酸氢钠浸提液[c(NaHCO3)= 0.5mol L-1,pH 8.5]:42.0g分析纯碳酸氢钠溶于800ml 蒸馏水,用1mol L-1 NaOH溶液缓慢调节pH至8.5,再用蒸馏水定容至1L。注意该浸提液放置时期过长时,因CO2释放使溶液pH升高。

微生物碳氮磷测定

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