实验16-消毒灭菌
实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制
一、抗生素对微生物生长的控制
（一）目的要求
掌握滤纸片的抑菌试验方法。
理解抗生素的抑菌谱。
（二）基本原理
抗生素是微生物产生的一类具很高活性的次生代谢产物，敏感微生物以低浓度的抗生素处理后，其生长、繁殖就会受到抑制或死亡。微生物对不同抗生素的敏感性差异极大，对有的抗生素极敏感，而对别的抗生素没有任何反应。一种抗生素能够作用的微生物种类的范围也是有限的，抗生素能作用的微生物种类称为该抗生素的抗菌谱。对多种微生物有作用的抗生素称为广谱抗生素，对种类数量少的抗生素称为窄谱抗生素。
抗生素接触或进入微生物细胞内能使微生物死亡的最低剂量，称为致死剂量。敏感微生物若在琼脂培养基平板培养过程中接触或进入微生物细胞内的抗生素达到或超过致死剂量的区域内，因微生物不能生长平板呈透明状态，否则因微生物生长平板表面不透明，并在表面形成菌苔。在敏感微生物细胞或孢子制成的平板上，放置滤纸园片、再在纸片上滴加抗生素溶液后，抗生系将呈园形向外扩散，而且抗生素在培养基内形成浓度梯度，纸片处抗生素的浓度，纸片以外抗生素的浓度逐渐减小。因而，在恒温培养中的过程中，将在纸片附近出现透明的抗菌圈。抑菌圈的大小与抗生素的浓度、滴加的体积、抗生系的扩散性、微生物的敏感度、微生物细胞的浓度等有关。
（三）器材
1、培养基肉汤蛋白胨平板。
2、器材培养箱、移液品、打孔器、滤纸、镊子、无菌试管、无菌吸管、无菌水、洗尔球等。
3、菌种大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌
4、抗生素青霉素
（四）操作步骤
l、滤纸片准备用打孔器打取滤纸片.放入培养皿内灭菌后备用。
2、抗生素溶液配制称取注射用青霉素粉，以无菌水配成溶液。
3、带菌平板制作将牛肉膏--蛋白胨—琼脂培养基沸水浴溶化后，于45℃恒温水浴保温。以无菌水将斜面菌种细胞洗下制成悬浮液，以血球计数板测孢子浓度，再加入无菌水将悬浮液浓度调为108-9个细菌/ml。
4、抑菌试验取菌悬浮液1ml加入90mm无菌培养皿内，倒入45℃培养基20ml，转动培养皿使培养基与细胞充分混匀，静置冷凝。取无菌滤纸片4片叠放于平板的适宜位置，立即取50μl抗生素溶液滴加于滤纸片上。每平板同成正方形放4处。
5、培养观察将平板放于35℃培养箱内培养，每隔24h测量一次抑菌圈直径。（五）实验报告
1、抑效果记载，将观察结果填入下表
青霉素平板抑菌的抑菌圈直径(mm)
2、分析抗生素滤纸片抑菌效果比较试验应注意的环节。
实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制二、干热灭菌
（一）目的要求
1．了解干热灭菌的原理和应用范围。
2．学习干热灭菌的操作技术。
（二）基本原理
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白蛋凝固就越快，反之含水量越少，凝固越慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（160～170℃），时间要长（1～2h），但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。干热灭菌使用的电烘箱的结构如图2-1。
电烘箱的外观和结构
A.外观
B.结构
1.温度计;
2.排气阀;
3.箱体;
4.控温器旋钮;
5.箱门;
6.指示灯;
7.加热开关;
8.温度控制阀; 9.控制室; 10.侧门; 11.工作室; 12. 保温室; 13.电热器;
14. 散热板; 15.搁板
（三）器材
培养皿.试管.吸管.电烘箱等。
（四）操作步骤
1、装入待灭菌物品
将包好的待灭菌物品（培养皿.试管，吸管等）放入电烘箱内，关好箱门。
物品不要摆得太挤，以免妨碍空气流通，灭菌物品不要接触电烘箱内壁的铁板，以防包装纸烤焦起火。
2、升温
接通电源，拨动开关，打开电烘箱排气孔，旋动恒温调节器至绿灯亮，让温度逐渐上升。当温度升至100℃时，关闭排气孔。在升温过程中，如果红灯熄灭，绿灯亮，表示箱内停止加温，此时如果还未达到所需的160—170℃温度，则需转动调节器使红灯再亮，如此反复调节，直至达到所需温度。
3、恒温
当温度升达到160～170℃时，恒温调节器会自动控制调节温度，保持此温度2h。
干热火菌过程。严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。
4、降温
切断电源.自然降温。
5、开箱取物
待电烘箱内温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。
电烘箱内温度末降到70℃，切勿自行打开箱门以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。
（五）实验报告
思考题
l、在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题，为什么?
2、为什么干热火菌比湿热灭菌所需要的温度要高，时间要长?请设计干热灭菌和湿热灭菌效果比较实验方案。
三、高压蒸气灭菌
（一）目的要求
1、了解高压蒸气灭菌的基本原理及应用范围。
2、学习高压蒸气灭菌的操作方法。
（二）基本原理
高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大。其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低（表2—1），二是湿热的穿透力比干热大（表2—2），三是湿热的蒸气有潜热存在。1g水在100℃时，由气态变为液态时可放出 2.26kJ(千焦)的热量。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力。
表2—1 蛋白质含水量与凝固所需温度的关系
在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸
实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时，压力与温度的关系见（表2—3）
表2-2 干热温热穿透力及灭菌效果比较
表2—3 灭菌锅留有不同分量空气时，压力与温度的关系
现在法定压力单位己不用磅和kg/cm2表示，而是用Pa或bar表示，其换算关系为：1kg/cm2=98066.5Pa；1Ib/in2=6894.76Pa.
一般培养基用0.1Mpa（相当于1.05kg/cm2），121.5℃,15～30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等具体情况而有所改变。例如含糖培养基用0.06Mpa(8Ib/in2或0.59kg/cm2)112.6℃灭菌，然后以无菌操作加入灭菌的糖溶液。又如盛于试管内的培养基以0.1Mpa,121.5℃灭菌20min即可，而盛于大瓶内的培养基最好以0.1Mpa，122℃灭菌30min。
实验中常用的非自动高压蒸气灭菌锅有卧式、立式和手提式三种，其结构和工作原理相同。另外，现也有关自控高压蒸气灭菌锅(autoclave)，其使用安全方便。
卧式灭菌锅手提式灭菌锅
1. 安全阀;
2.压力表;
3.放气阀;
4.软管;
5.紧固螺栓;
6.灭菌桶;
7. 筛架;
8.水
（三）器材
牛肉膏蛋白胨培养基，培养皿(6套一包)，手提式高压蒸气灭菌锅等。
（四）操作步骤
1、首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
切勿忘记加水，同时水量不可过少，以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故。
2、放回内层锅，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸气流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与锅壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3、加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
4、用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸气压力增加到逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用0.1Mpa，121.5℃，20min灭菌。
灭菌的主要因素是温度而不是压力。因此锅内冷空气必须完全排尽后，才能关上排气阀，维持所需压力。
5、灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
压力一定要降到“0”时，才能打开排气阀，开盖取物。否则就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染，甚至灼伤操作者。
6、将取出的灭菌培养基，需摆斜面的则摆成斜面，然后放入37℃温箱培养24h，经检查若无杂菌生长，即可待用。
（五）实验报告
思考题
（1）高压蒸气灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后，为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀，开盖取物？
（2）在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，怎样杜绝一切不安全的因素?
（3）灭菌在微生物实验操作中有何重要意义?
四、紫外线灭菌
（一）目的要求
了解紫外线灭菌的原理和方法
（二）基本原理
紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为200~300nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌力最强。在波长一定的条件下，紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。紫外线杀菌机理主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联，从而抑制了DNA的复制。另一方面，由于辐射能使空气中的氧电离成[O]，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成过氧化氢（H2O2）。O3和H2O2均有杀菌作用。紫外线穿透力不大，所以，只适用于无菌室，接种箱，手术室内的空气及物体表面的灭菌。紫外线灯距照射物以不超过1.2m为宜。
实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制此外，为了加强紫外线灭菌效果，在打开紫外灯以前；可在无菌室内(或接种箱内)喷洒3%～5%石炭酸溶液，一方面使空气中附着有微生物的尘埃降落，另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室内的桌面.凳子可用2%～3%的来苏尔擦洗，然后再开紫外灯照射，即可增强杀菌效果，达到灭菌目的。
（三）器材
1、培养基牛肉膏蛋白胨平板。
2、溶液或试剂3%~5%石炭酸或2%~3%来苏尔溶液。
3、仪器或其他用具紫外线灯。
（四）操作步骤
l、单用紫外线照射
（1）在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关，照射30min，将开关关闭。
（2）将牛肉膏蛋白胨平板盖打开15min，然后盖上皿盖。置37℃培养24h。共做三套。
（3）检查每个平板上生长的菌落数。如果不超过4个，说明灭菌效果良好，否则，需延长照射时间或同时加强其他措施。
2、化学消毒剂与紫外线照射结合使用
（1）在无菌室内，先喷洒3%～5%的石炭酸溶液，再用紫外线灯照射15imn。
（2）无菌室内的桌面，凳子用2%～3%来苏尔擦洗，再打开紫外线灯照射15min。
（3）检查灭菌效果[方法同“单用紫外线照射”(3)]。
因紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用，对皮肤有刺激作用，故不能直接在紫外线灯光下工作。
（五）实验报告
思考题：
（1）细菌营养体细胞和细菌芽孢对紫外线和的抵抗力会一样吗，为什么？
（2）在紫外灯下观察实验结果时，为什么要隔一块普通玻璃？
五、微孔滤膜过滤除菌
（一）目的要求
1．了解过滤除菌的原理。
2．掌握微孔滤膜过滤除菌的方法。
（二）基本原理
过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器和滤板材料。微孔滤膜过滤器是由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盖盒组成，出口处可连接针头，人口处可连接针筒，使用时将滤膜装入两塑料盖盒之间，旋紧盖盒，当溶液从针筒注入滤器时，此滤器将各种微生物阻留在微孔滤膜上面，从而达到除菌的目的。根据待除菌溶液量的多少，可选用不同大小的滤器。此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分，但由于滤量有限，所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌。
（三）器材
1、培养基2%的葡萄糖溶液，肉汤蛋白胨平板。
2、仪器或其他用具注射器，微孔滤膜过滤器，0.22μm滤膜，无菌试管，镊子，玻璃刮棒。
（四）操作步骤
l、组装.灭菌
将0.22μm孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中，旋紧压平，包装灭菌后待用(0.lMPa，121.5℃灭菌20min)。
2、连接
将灭菌滤器的入口在无菌条件下，以无菌操作方式连接于装有待滤溶液（2%葡萄糖溶液）的注射器上，将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中。见图。
3、压滤
将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中，滤毕，将针头拨出。
压滤时，用力要适当，不可太猛太快，以免细菌被挤压通过淀胶．
4、无菌检查
无菌操作吸取除菌滤液0.1ml于肉汤蛋白胨平板上，涂布均匀，置37℃温室中培养24h，检查是否有菌生长。
5、清洗
弃去塑料滤器上的微孔滤膜，将塑料滤器清洗干净，并换上一张新的微孔滤膜，组装包扎，再经无菌后使用。
整个过程应在无菌条件下严格无菌操作，以防污染，过滤时应避免各连接处出现渗漏现象。
（五）实验报告
思考题
(1) 如果你需要配制一种含有某抗生素的牛肉膏蛋白胨培养基，其抗生素的终浓度(或工作浓度)为50μg/ml，你将如何操作?
(2) 过滤除菌应注意哪些问题?
高中生物 图解16个高考生物实验原理
高中生物图解16个高考生物实验原理，你不知道的记笔记秘籍 1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1、可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖） 与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉 淀。反应方程式：葡萄糖+ Cu(OH)2 葡萄糖酸 + Cu2O↓（砖红色）+ H2O，即Cu (OH) 2被 还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸； 2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被 苏丹Ⅳ染液染成红色）；淀粉遇碘变蓝色； 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色 反应（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作 用，产生紫色反应）。 2、观察DNA、RNA在细胞中的分布 1、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和 RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现 绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基 绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以 显示DNA和RNA在细胞中的分布； 2、盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染 色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA和 蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 3、用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体 1、叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色 的，呈扁平的椭圆球形或球形； 2、线粒体辨认依据：线粒体的形态多 样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形 等； 3、健那绿染液是专一性染线粒体的活细 胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿 色。
4、观察植物细胞的吸水和失水 1、质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界 溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失 水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶 液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的 收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当 细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分 离； 2、质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于 外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。 5、比较过氧化氢在不同条件下的分解 鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都 能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的 FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴 FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化 氢酶分子数的25万倍。 6、影响酶活性的条件 淀粉遇碘后，形 成紫蓝色的复合物； 淀粉酶可以使淀粉逐 步水解成麦芽糖和葡 萄糖，麦芽糖和葡萄 糖遇碘后不显色。
高中生物必修一实验知识点梳理
生物必修一实验知识点 一、检测生物组织中的糖类、蛋白质、脂肪 ①实验原理： 糖类中的还原糖（所有的单糖、绝大多数二糖（除蔗糖））与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀。{化学选修五已讲原理可自行了解} 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。 淀粉遇碘变蓝。 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。 ②材料用具： 还原糖的检测：还原糖含量高、细胞颜色较浅或近于白色的材料。 脂肪的检测：富含脂肪的材料。 蛋白质的检测：富含蛋白质的材料。 ③试剂： 斐林试剂：甲液：质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ml 的硫酸铜溶液。 双缩脲试剂：A液：质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液，B液：质量浓度为0.01g/ml 的硫酸铜溶液。 体积分数为50％的酒精溶液 碘液、苏丹Ⅲ/Ⅳ染液 ④检测方法步骤： 还原糖的检测：甲乙液等量混合均匀、现配现用；50-56℃水浴加热。 脂肪的检测：从花生子叶的横断面上切下薄片，先染色（Ⅲ 3min / Ⅳ 1min），再用酒精洗去浮色，用低倍镜找到物像、用高倍镜观察。 蛋白质的检测：先加A液1ml，再加B液4滴。 ⑤现象： 还原糖：溶液先变蓝（斐林试剂颜色），再变棕（红蓝混合），最后砖红色沉淀。 蛋白质：溶液呈紫色。 脂肪：Ⅲ：橘黄色的脂肪颗粒/ Ⅳ：红色的脂肪颗粒 二、观察DNA和RNA在细胞中的分布 ①实验原理： {教材原话感觉都比较重点——}DNA主要分布在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。甲基绿吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 ②材料用具： 质量分数为0.9％的氯化钠溶液，质量分数为8％的盐酸，吡罗红甲基绿染色剂{虽然书上说了一大堆成分以及配制方法，但凭我多年的做题经验来看没考过} ③方法步骤： 制片：1、在纯净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9％的氯化钠溶液。（维持细胞形
高中生物实验汇总
高中生物实验汇总 1. 观察DNA、RNA在细胞中的分布 2.检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 3.用显微镜观察多种多样的细胞 4.观察线粒体和叶绿体 5.通过模拟实验探究膜的透性 6.观察植物细胞的质壁分离及复原 7.探究影响酶活性的因素 8.叶绿体色素的提取和分离 9.探究酵母菌的呼吸方式 10.观察细胞的有丝分裂 11.模拟探究细胞表面积与体积的关系 12.观察细胞的减数分裂 13.低温诱导染色体加倍 14.调查常见人类遗传病 15.探究植物生长调节剂和扦插枝条生根的作用 16.模拟尿糖的检测 17.探究培养液中酵母菌数量的动态变化 18.土壤中动物类群丰富度的研究 19.探究水族箱（或鱼缸）种群落的演替 生物实验总结 实验一：观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA 绿色，RNA 红色 分布：真核生物DNA 主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验二：物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹III 橘黄色 脂肪 + 苏丹IV 红色 蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）
★模拟尿糖的检测 （1）取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 （2）检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 （3）结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 （4）分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤： 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） 制作装片（滴1～2 3、蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B 液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色) 考点提示： （1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。（2 )还原性糖植物组织取材条件？ 含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。（3)研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。 （4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 （5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 浅蓝色棕色砖红色 （6）花生种子切片为何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 （7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片的厚薄不均匀。 （8）脂肪鉴定中乙醇作用？洗去浮色。 （9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。
高中生物实验重点知识点
高中生物实验重点知识点 必修一 使用高倍显微镜观察几种细胞 1.显微镜放大倍数是指，即和，而不是面积。 2.显微镜的使用步骤：置镜（装镜头）→→置片→调焦→观察。 3.高倍镜的转换：找到物像后，把要观察的物像移到，把低倍镜移走，换上高倍镜，只准用和把视野调整清晰，直到物像清楚为止。（顺序：移装片→转动转换器→调反光镜或光圈→调细准焦螺旋） 答案： 1.直径倍数、长度、宽度 2.对光 3.视野中央、细准焦螺旋、反光镜 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 2.实验原理： （1）可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）在加热条件下与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的沉淀。淀粉遇碘变蓝色，若检验有色组织或器官，如绿叶，则需酒精处理。（2）脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成（或被苏丹Ⅳ染液染成）。
（3）蛋白质与发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。） 3.做可溶性还原性糖鉴定实验，应选的植物组织（如苹果、梨），易于观察。 4.实验试剂： （1）斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为CuSO4溶液）、与双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为__ _____CuSO4溶液）的比较：①CuSO4溶液的浓度不同。②原理不同。斐林试剂的实质是新配制的溶液；双缩脲试剂实质是Cu2＋，能和肽键在碱性条件下反应生成络合物。③使用方法不同。斐林试剂是先将NaOH溶液与CuSO4溶液后再使用；双缩脲试剂是先加入溶液，再滴加溶液。 （2）脂肪鉴定中用体积分数为洗去浮色。 5.实验说明： （1）还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为 到棕色到。 （2）花生种子切片要，这样才能透光，有利于显微镜的观察。转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是切片的。 答案： 2.脱色、橘黄色、红色、双缩脲试剂、肽键
高中生物必修一实验大全共14个实验
高考备考“生物实验”易错点归纳 （1）、可溶性还原性糖的鉴定： 植物组织应该选择苹果、梨等应该选择白色或者近于白色的组织，而不能选择西瓜； 鉴定的糖类为可溶性还原糖，故不能选用甘蔗作为实验材料； 实验过程中需要水浴加热； 若鉴定材料中不含可溶性还原糖，则实验结果的现象应该为蓝色，而非无色，答题时切忌描述为“无色”； 斐林试剂的配制为“等量混合均匀后使用，且须现配现用”，注意与双缩脲试剂的先加A液，后加少量B液区分开来。鉴定结果为斐林试剂在水浴条件下可与可溶性还原糖发生反应产生砖红色沉淀。 （2）、脂肪的鉴定实验： 材料选取得是富含脂肪的花生子叶，鉴定过程中须用显微镜进行观察，故而需要制片操作，若切片厚薄不均，会导致显微镜视野明暗不一； 在染色后，显微镜观察前，须用50%酒精溶液洗去浮色，便于我们区分被苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ染色的脂肪颗粒 （3）蛋白质鉴定实验： 材料选择：豆浆或者鸡蛋清（鸡蛋清须稀释，以避免试验后鸡蛋清粘附于试管壁上，不易清洗） 试剂配制：先加1~2mL A液，再加1~2滴B液。 实验原理：Cu（OH）2在碱性条件下与肽键发生络合反应，生成紫色络合物。（故而加热导致蛋白质空间结构发生改变引发的蛋白质变性之后的物质，仍能够与双缩脲试剂发生紫色络合反应） 实验拓展：将蛋白质与蛋白酶混合使其充分反应过后，再加入双缩脲试剂进行鉴定，仍能够发生紫色络合反应；将蛋白质+蛋白酶+多肽酶混合反应后，加入双缩脲试剂，实验结果依旧为紫色。【原因？】 （4）观察细胞内的叶绿体： 材料：黑藻（它是真核细胞还是原核细胞？为什么？） （5）观察细胞内的线粒体： 材料：人的口腔上皮细胞（为什么不选择绿色植物细胞？） 试剂：健那绿试剂（染成蓝色） 细胞活性：实验过程中细胞始终保持活性，故而在制作装片的过程中，须滴加生理盐水（等渗溶液），而不能滴加蒸馏水；
高中生物教材实验知识点梳理 新人教版
第二部分高中生物教材实验知识点梳理 高中考纲规定教材的19个实验可分为： （1）显微镜观察类实验：一、三、四、六、十、十二； （2）探究性实验：七、九、十三、十五、十七、十九； （3）验证性实验：二、八； （4）模拟实验：五、十一、十六； （5）调查类实验：十四、十八。 实验一观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26） 1、原理、步骤、结论 2、实验注意事项 (1)选材：口腔上皮细胞或洋葱内表皮细胞（无色）【不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，防止颜色的干扰】 (2)缓水流冲洗目的：防止玻片上的细胞被冲走。 (3)几种试剂在实验中的作用 ①0.9%NaCl溶液(生理盐水)：保持口腔上皮细胞正常形态。 ②8%盐酸：a.改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；b.使染色体中DNA与蛋白质分开，有利于染色。 ③甲基绿吡罗红染液：混合使用且需现配现用。 实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质（必修一P18） 1、实验原理及步骤
2、实验注意事项 (1)还原糖鉴定实验材料要求：需为白色或浅色，且还原糖含量高。 【不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰；不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。】 (2)唯一需要加热：还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。 (3)非还原糖(如蔗糖)＋斐林试剂（水浴加热），现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。 (4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定，实验用50%酒精的作用——洗掉浮色。 (5)斐林试剂：需混合加入，且现配现用；双缩脲试剂：需分别加入(先加A液，后加B液)。 实验三用显微镜观察多种多样的细胞（必修一P7） 1、显微镜的使用 2、显微镜使用的注意事项： 先低后高：先低倍镜后高倍镜。 放大倍数：指的是“长度”的放大倍数。 镜头与放大倍数的关系：目镜越短，物镜越长，物镜距离玻片越近，放大倍数越大。 3 实验四观察线粒体和叶绿体（必修一P47） 1、实验原理 ①叶绿体呈绿色，不需染色，制片后直接观察。 ②线粒体需用健那绿（专一性线粒体的活细胞染料）染成蓝绿色后制片观察。 2、实验材料：①观察叶绿体用藓类或菠菜叶片；②观察线粒体用人的口腔上皮细胞。 3、注意问题 ①实验过程中的临时装片要始终保持有水状态。 ②选鲜类、黑藻类叶：因为叶子薄而小，叶绿体清楚，可取小叶直接制片； 实验五通过模拟实验探究膜的透性（必修一P60） 1．渗透系统的组成(如图)及条件 (1)半透膜：可以是具选择透过性膜的生物膜，也可以是物理性的过滤膜。 (2)膜两侧的溶液具浓度差：是指物质的量浓度，而非质量浓度。 2、注意事项 ①水分子的移动方向：可双向移动，但整体上水分子是从低浓度→高浓度。
最新实验室消毒规程
实验室消毒技术规范 一. 适用范围： 本规范适用于实验室器材、检验单、废弃标本及相关人员的消毒。检验科的工作场所分为清洁区、半污染区和污染区。清洁区包括办公室、会议室、休息室、储藏室、培养基室和试剂室；半污染区指卫生通道、更衣室、缓冲间；污染区包括标本收集、存放、处理室、检测室。 二. 消毒原则： 清洁区、半污染区和污染区应分别进行常规清洁、消毒处理。清洁区和污染区的消毒要求、方法和重点有所不同，若清洁区和污染区无明显界限，按污染区处理。 清洁区若无明显污染，应每天开窗通风换气数次，湿式清洁台面、地面1次；污染区在每天开始工作前及结束工作后，台面、地面应用含有效氯250mg/L的含氯消毒液各擦拭1次，空气选用循环风动态消毒法消毒处理，废弃标本应分类进行消毒处理后排放。半污染区环境消毒同污染区，工作衣、帽每周换洗2次，拖鞋每天用含有效溴或有效氯250mg/L的二溴海因或含氯消毒剂浸泡或擦拭1次。所以清洁消毒器材（抹布、拖把、容器）不得与污染区或半污染区共用。工作人员每次下班前应用肥皂流水洗手1min-2min。结核病专业检验室工作人员，每次连续佩戴口罩不得超过4h，工作衣若有明显致病菌污染或从事烈性菌标本检验后，应随时更换，及时进行消毒灭菌。 三. 检验单的消毒： 污染检验单送出前用便携式高强度紫外线消毒器距检验单面不高于 3.0cm缓慢移动，照射3s-5s，必须两面照射；也可用经卫生部批准的专用甲醛消毒器薰蒸消毒。 四. 空气的消毒： 对污染区内明显产生传染性气溶胶的操作（搅拌、研磨、离心等），特别是可通过呼吸道传播又含有高度传染性微生物（炭疽杆菌、分枝杆菌、球孢子菌、组织胞浆菌、军团菌、流行性感冒病毒等）的操作，应在生物安全柜（负压）内进行，使空气经细菌滤器或热力杀菌通道排出室外，柜内形成负压。要求严格无菌的操作如倾倒培养基、菌种转种和细胞转瓶等，应在生物安全柜内进行，
化学消毒灭菌法
护理专业知识备考材料：化学消毒灭菌法 在日常生活中，我们每天遵照“饭前、便后要洗手”等等关于如何讲卫生的好习惯，目的就是减少进入人体的病原微生物，从而降低感染发生率。同样的工作其实每天都在医院进行着，但是要求却更严格，使用范围也更广，包括操作方法、使用要求、所用制剂都极大不同，这也是医院内感染预防和控制的重点任务。这一内容也是考试中的重点和高频考点。所以小编今天就带领大家一起学习医院内化学消毒灭菌法的相关知识点。 首先在学习之前我们要明确关于清洁、消毒与灭菌的概念，只有这样才能更好的理解接下来的内容。 一、概念 1.清洁：是指用物理方法清除物体表面的污垢、尘埃和有机物，其目的是去除和减少微生物，并非杀灭微生物。 2.消毒：是指用物理、化学或生物的方法清除或杀灭环境中和媒介物上除细菌芽孢以外的所有病原微生物，使其达到无害化。 3.灭菌：是指用物理、化学方法消除或杀灭环境中和传播媒介物上的所有微生物，包括致病的和非致病的，也包括细菌的芽孢。 二、化学消毒灭菌法 1.化学消毒剂的种类 (1)灭菌剂：可杀灭一切微生物，包括细菌芽孢，使物品达到灭菌要求的制剂。如戊二醛、环氧乙烷等。 (2)高效消毒剂：可杀灭一切细菌繁殖体，对细菌芽孢有显著杀灭作用的制剂。如过氧化氢、过氧乙酸、部分含氯消毒剂等。 (3)中效消毒剂：仅可杀灭分枝杆菌、细菌繁殖体、真菌、病毒等微生物，达到消毒要求的制剂。如醇类(乙醇最适宜杀菌的浓度是70%～75%)、碘类、部分含氯消毒剂等。 (4)低效消毒剂：仅可杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒，达到消毒要求的制剂。如酚类、胍类、季铵盐类消毒剂等。 2.常用化学消毒剂
(1)2%戊二醛：浸泡精密仪器如纤维内镜，使用前加入0.5%亚硝酸钠，可防锈。 (2)环氧乙烷：医疗器械、书本、棉橡胶制品及一次性使用的医疗用品等。 (3)含氯消毒剂：①0.2%浸泡被乙肝病毒、结核杆菌污染的物品;②擦拭桌椅、墙壁、地面;③排泄物的消毒：排泄物5份加含氯消毒剂1份搅拌，放置2～6小时。 (4)过氧化氢：冲洗外科伤口、漱口。 (5)0.01%～0.1%氯己定：又名洗必泰，冲洗阴道、膀胱及伤口黏膜创面。 (6)苯扎溴铵：属于阳离子表面活性剂，可用于手、皮肤、黏膜、环境及物品消毒，常采用浸泡、擦拭、喷洒等方式。 3.化学消毒剂的使用原则 (1)合理使用，必须用时尽量少用，能采用物理方法消毒灭菌的，尽量不使用化学消毒灭菌法。 (2)根据物品的性能和各种微生物的特性选择合适的消毒剂。 (3)严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法。 (4)消毒剂要定期更换、定期检测，调整浓度，易挥发的要加盖。 (5)待消毒物品必须先洗净、擦干。 (6)消毒剂中不能放入纱布、棉花等物，以防降低消毒效力。 (7)消毒后的物品使用前必须先用无菌生理盐水冲净，以免消毒剂刺激人体组织。 (8)熟悉掌握消毒剂的毒副作用，工作人员做好防护。 4.化学消毒剂的常用方法 (1)浸泡法：注意浸泡前要打开物品的轴节或套盖，管腔内要灌满消毒液。不放置纱布、棉花等物，以免因吸附消毒剂而降低消毒效力。 (2)喷雾法：用于空气、地面、墙壁和物品表面的消毒。 (3)擦拭法：用于物品表面或皮肤、黏膜的消毒。 (4)熏蒸法：常用于室内空气消毒，如纯乳酸(每立方米0.12ml)。 好啦，我们知识点总结就到这里啦，大家一定要掌握上述内容，希望我们总结的知识点能够更好的帮助到大家，祝大家顺利通过考试。
高中生物实验设计方案专题 知识归纳
高中生物实验设计专题 一、高考生物实验考试大纲 （1）能独立完成所列生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。 （2）具备验证简单生物学事实的能力，并对实验现象和结果进行解释、分析和处理。 （3）具备对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。 （4）能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。 二、生物实验设计的科学性分析 实验能力是“教案大纲”要求学生掌握的一项基本能力。就是能使用恰当的方法验证简单的生物学事实，并对结果进行解释和分析。此能力要求包括两方面的内容：一是能够设计简单的实验，验证简单的生物学事实；二是能对实验现象、实验结果作出正确的解释和分析。 实验能力也是高考“考试说明”要求学生掌握的一项基本能力（设计和完成实验的能力）。此能力要求也包括两方面的内容：一是独立实验的能力（大纲规定学生实验和教师演示实验），即理解实验原理、目的、要求、材料、用具；掌握实验的步骤、控制实验条件、使用有关仪器、安全问题处理；观察现象、分析数据、得出结论；常规实验非常规做法。二是能根据要求灵活运用已学过的自然科学理论、实验方法和仪器，设计简单的实验方案并处理相关的实验问题。用理、化、生三科实验中所学的知识去解决实际问题。实验所占比分为30%（基本不变，也可能在25%左右）。 实验设计是较高的能力要求，除要具备一定的知识基础外，还需要具有一定的创造能力。所设计的实验是建立在科学的基础上的，还应具有一定的观察和发现问题的能力。要提高这方面的能力，必须改变过去“背实验”的方法，亲自动手做实验，熟悉实验的操作步骤，弄清实验的原理，能运用所学知识对实验现象进行分析，以此来验证或探究某一结论。只有这样，才能促进实验能力的提高，促进科学思维的形成和发展，才能真正对实验的知识、内容进行举一反三。 1．实验设计的基本内容 1.1 实验名称是关于一个什么内容的实验。 1.2 实验目的要探究或者验证的某一事实。 1.3 实验原理进行实验依据的科学道理。 1.4 实验对象进行实验的主要对象。 1.5 实验条件根据实验原理确定仪器和设备；要细心思考实验的全过程。 1.6 实验方法与步骤实验采用的方法及必需（最佳）操作程序。每一步骤都必须是科学的；能急时对仪器、步骤进行有效矫正。 1.7 实验测量与记录对实验过程及结果应有科学的测量手段与准确客观的记录。 1.8 实验结果预测及分析能够预测可能出现的实验结果并分析导致的原因。 1.9 实验结论对实验结果进行准确的描述并给出一个科学的结论。 2．实验设计的基本原则 2.1 科学性原则 所谓科学性，是指实验目的要明确，实验原理要正确，实验材料和实验手段的选择要恰当，整个设计思路和实验方法的确定都不能偏离生物学基本知识和基本原理以及其他学科领域的基
实验室灭菌指南
实验室灭菌指南 消毒灭菌方法 目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。 1干热灭菌法 是利用恒温干燥箱内120oC～150oC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。 主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。 酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。 2湿热灭菌法 压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。 适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1kg/cm2，维持20～30min即可达到灭菌效果。 3射线灭菌法 利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。 适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。灭菌时间为30min。用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。 4过滤除菌法 是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
基础护理 消毒灭菌法小结
消毒灭菌法小结一、物理法 （一）热力法 1、干热法 （1）燃烧法（简单、迅速、彻底） 【适用范围】无保留价值污染物；特殊感染敷料；金属搪瓷急用 【方法】焚烧炉、火焰、容器内 【注意事项】a 火焰：轴节打开、每个面燃烧、大于20秒、锐利 刀剪、精密仪器禁用 b 容器内：95%乙醇；燃烧过程中不可添加 c 注意安全 （2）干烤法 【适用范围】油剂、粉剂、玻璃器皿等 【方法】消毒：箱温120－140℃，时间10－20分钟 灭菌：箱温160℃，时间2小时；箱温170℃，时间 1小时；箱温180℃，时间30分钟 2、湿热法 （1）煮沸法 【适用范围】耐湿、耐高温，如金属、搪瓷、玻璃、橡胶类 【方法】洗净－包裹（玻璃、橡胶）－注水（空腔导管）－打 开（轴节、盖、注射器、重叠容器）－浸没【注意事项】a 计时：水沸后开始，5－10分钟消毒；中途加物从 再次水沸计 b 入锅时间：玻璃－冷水或温水；橡胶－水沸，3－5 分钟取出 c 碳酸氢钠（1~2%）：提高沸点105℃；增强杀菌； 去污防锈 d 海拔高：延长时间 e 尽量用软水 （2）压力蒸汽灭菌法 【适用范围】耐高温、耐高压、耐潮湿 【方法】下排式（手提、卧式）：103~137Kpa，121~126℃，20~30min 预真空：205Kpa，132℃，4~5min 【注意事项】a 灭菌前洗净擦干 b 灭菌包不宜过大过紧：下（<30*30*25）预 （<30*30*50）；包间有空隙；布类放在金属搪瓷类 上面 c 容器应有孔，灭菌时打开，使用时关闭 d 干燥后方可取出 e 定期监测：物理、化学（最常用）、生物（最可靠）（二）光照法 1、日光暴晒法：时间大于6小时；定时翻动 2、紫外线灯管消毒法（250~270nm杀菌最强） 【适用范围】空气、物品表面 【方法】空气：<2m，30~60min；物品表面：25~60cm，30min 【注意事项】a 计时：灯亮后5~7min，关后间隔3~4min再开 b 保持清洁：环境、灯管、物品表面 c 保护眼睛皮肤 d 20~40℃，40~60％ e 定期监测：>1000h；≤70uW/cm2 f 定期检测效果 3、臭氧灭菌灯消毒法：用于空气、医院污水、诊疗用水、物品表面消毒（三）电离辐射灭菌：冷灭菌 （四）微波消毒灭菌法：常用于食品、餐具处理，不能用于金属物品的消毒（五）过滤除菌：用于手术室、烧伤病房、器官移植病房
高中生物 个实验知识点总结
高中生物19个实验知识点总结 实验一：显微镜的正确使用 1、是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为什么？ 低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小；高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。 2、为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？ 如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。 3、用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行？ 不行。用高倍镜观察，只需转动细准焦螺旋即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。 4、使用高倍镜观察的步骤和要点是什么？ 答：（1）首先用低倍镜观察，找到要观察的物像，移到视野的中央。（2）转动转换器，用高倍镜观察，并轻轻转动细准焦螺旋，直到看清楚材料为止。 5、总结：四个比例关系 a.镜头长度与放大倍数：物镜镜头越长，放大倍数越大，而目镜正好与之相反。 b.物镜头放大倍数与玻片距离：倍数越大（镜头长）距离越近。
c.放大倍数与视野亮度：放大倍数越大，视野越暗。 d.放大倍数与视野范围：放大倍数越大，视野范围越小。 实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验原理 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1、可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。 葡萄糖+ Cu ( OH )2 --葡萄糖酸+ Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。） 二、实验材料 1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。） 2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。 3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 三、实验注意事项 1、可溶性糖的鉴定
物理消毒灭菌的方法
物理消毒灭菌法 （一）物理消毒灭菌法 1.热力消毒灭菌法：利用热力作用破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁、细胞膜，导致其死亡，可分为 干热法和湿热法。 （1）燃烧法：属于干热法，是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 1)用途：①无保留价值的污染物品②金属器械及搪瓷类物品急用，或无条件消毒时，锐利刀剪 除外，以免锋刃变钝。 2)方法：①金属器械可在火焰上烧20秒②搪瓷类容器可倒入少量95%乙醇 (2)干烤法：利用特制的烤箱，热力通过空气对流和介质传导进行灭菌，效果可靠。 （3）煮沸消毒法：属于湿热法，用于耐湿、耐高温的搪瓷、金属、玻璃，橡胶类物品，不能用于外科手术器械的灭菌。从水煮开始计时，5-10分钟可杀灭繁殖体，15分钟可将多数细菌芽胞杀灭，如破伤风杆菌芽胞需煮60分钟才可杀灭，在水中加入碳酸氢钠，配成浓度为1%-2%的溶液时，沸点可达105度，即可增强杀菌作用，又可去除防锈。 注意事项：①物品需全部侵入在水中，物品盖子打开，轴节打开，空腔导管预先灌水，各种大小及形状相同的容器不能重叠②玻璃类物品需用纱布包裹，并在冷水或温水中放入③橡胶类物品需用纱布包好，水沸后放入④如中途加入其它物品，需等再次水沸后开始计时⑤高原地区气压低，沸点低，需适当延长煮沸时间，一般海拔每增高300m，煮沸时间延长2分钟。 （4）压力蒸汽灭菌法：属于湿热法，是一种临床上应用最广泛，效果最为可靠的首选灭菌方法 2.光照消毒法（又称辐射消毒）主要是通过紫外线的杀菌作用，使菌体蛋白发生光解、变性，导致细菌死亡。 （1）日光暴晒法：利用日光的热、干燥、紫外线的作用来杀菌，将床垫、毛毯、书籍、衣服等放在阳光下直射，暴晒6小时可达到消毒效果，中间要定时翻动。 （2）紫外线灯管消毒法：紫外线属于电磁波辐射，常用于空气、物品表面的消毒，杀菌最强的波长范围250-270nm从灯亮5-7分钟开始计时。①空气消毒：有效距离不超过2m，照射时间20-30分钟②物品消毒：有效距离不超过25-60cm，照射时间20-30分钟。 3)注意事项：①保持室内清洁、干燥，室内温度20-40度，相对湿度40%-60%时，紫外线消毒最为宜 ②保持紫外线灯管清洁，一般每2周用无水乙醇擦拭1次，发现有污洉应随时擦拭③保护眼睛和皮肤：紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用，易引起眼炎、皮炎且臭氧对人体不利，因此一般不在有人的环境中使用，必须使用时应带防护镜，穿防护衣，或用被单遮盖肢体④紫外线穿透力较差，消毒时物品应摊开或挂起，且定时翻动及保证各表面均受到直接照射⑤如需再次开启，应间隔3-4分钟⑥定期检测紫外线灯管照射强度，一般每隔3-6个月1次，或建立登记卡，使用时间超过1000小时应予以更换⑦定期做空气培养检测消毒效果 (3)臭氧灭菌消毒法：利用臭氧强大的氧化作用进行杀菌。 1)用途：主要用于空气、医院污水、诊疗用水、物品表面的消毒。 2)方法:使用时应关闭门窗，人员离开房间，消毒结束后30分钟方可进入。 3．电离辐射灭菌法(又称冷灭菌)适用于不耐热的物品消毒，如橡胶、塑料、高分子聚合物(一次性注射器、输液输血器等)、紧密医疗仪器、生物医学制品、节育用具及金属等。 4．微波消毒灭菌法微波可杀灭细菌繁殖体、真菌、病毒、细菌芽胞、真菌孢子等各种微生物。常用于食品、餐具的处理，化验单据、票证的消毒，医疗药品、耐热非金属材料及器械的消毒灭菌。不能用于金属物品的消毒。 化学消毒灭菌法 化学消毒灭菌法是利用液体或气体的化学药物渗透到菌体内，使菌体蛋白凝固变性，细菌酶失去活性，导致微生物代谢障碍而死亡，或破坏细胞膜结构，改变其通透性，导致细胞膜破裂、溶解，以达到消毒灭菌的目的。
高中生物必考知识点整理(必修+选修+实验史上最全)
高中生物必考知识点汇总 必修+选修+实验总结 第一单元 细胞的分子组成与结构 1.蛋白质、核酸的结构和功能 （1）蛋白质主要由 C 、H 、O 、N 4 种元素组成，很多蛋白质还含有 P 、S 元素，有的也含有微 量的 Fe 、Cu 、Mn 、I 、Zn 等元素。 （2）氨基酸结构通式的表示方法（右图）： 结构特点是:每种氨基酸分子至少都含有一个氨基和一个羧基，并且都有一个氨基和一个 羧基连接再同一个碳原子上，这个碳原子还连接一个氢原子和一个侧链基团。 （3）连接两个氨基酸分子的化学键叫做肽键。化学式表示为—NH —CO — 拓展： ①失去水分子数＝肽键数＝氨基酸数—肽链数（对于环肽来说，肽键数＝氨基酸数） ②蛋白质相对分子质量＝氨基酸平均相对分子质量×氨基酸数量－失去水分子数×水的相对分子质量 ③一个肽链中至少有一个游离的氨基和一个游离的羧基，在肽链内部的 R 基中可能也有氨基和羧基。 （4）蛋白质结构多样性的原因是：组成不同蛋白质的氨基酸数量不同，氨基酸形成肽链时，不同种类氨基酸的排列顺序千变万化，肽链的盘曲、折叠方式及其形成的空间结构千差万别。蛋白质多样性的根本原因是基因中碱基排列顺序的多样性。 （5）有些蛋白质是构成细胞和生物体的结构成分，如结构蛋白；有些蛋白质具有催化作用，如胃蛋白酶；有些蛋白质具有运输载体的功能，如血红蛋白；有些蛋白质起信息传递作用，能够调节机体的生命活动，如胰岛素；有些蛋白质具有免疫功能，如抗体。 （6）核酸的元素组成有 C 、H 、O 、N 和P 。核酸是细胞内携带遗传信息的物质，在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有重要作用。 （7）核酸的基本单位是核苷酸，一个核苷酸是由一分子含氮的碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸组成的。 （8）DNA 中的五碳糖是脱氧核糖，RNA 中的五碳糖是核糖；DNA 中含有的碱基是腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶，而 RNA 中含有的碱基是腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶；DNA 中含有两条脱氧核苷酸链，而 RNA 中只含有一条核糖核苷酸链。 （9）生物的遗传物质是核酸。 拓展： ①因为绝大多数生物均以DNA 作为遗传物质，只有 RNA 病毒以 RNA 作为遗传物质，所以说DNA 是主要的遗传物质？ ②真核生物、原核生物的遗传物质都是DNA 。 ③DNA 病毒的遗传物质是 DNA ，RNA 病毒的遗传物质是 RNA 。 ④真核生物细胞中含有的 RNA 不是遗传物质，DNA 是遗传物质。 ⑤细胞质内的遗传物质是 DNA 。 2.糖类、脂质的种类和作用 （10）组成糖类的化学元素有C 、H 、O 。 （11）葡萄糖是细胞生命活动所需要的主要能源物质；核糖是核糖核苷酸的组成成分；脱氧核糖是脱氧核苷酸的组成成分。 （12）糖类的主要作用是主要的能源物质。 （13）植物细胞特有的单糖是果糖，特有的二糖是麦芽糖、蔗糖，特有的多糖是淀粉和纤维；动物细胞所特有的二糖是乳糖，特有的多糖是糖元。 （14）组成脂质的元素主要是C 、H 、O ，有些脂质还含有 P 和 N 。 （15）脂肪是细胞内良好的储能物质，此外还是一种很好的绝热体，分布在内脏器官周围的脂肪还具有缓冲和减压的作用，可以保护内脏器官。磷脂作用是构成细胞膜和多种细胞器膜的重要成分。 （16）固醇类包括胆固醇、性激素和维生素D 。 （17）组成细胞膜的脂质有磷脂和胆固醇。 （18）因为等量的脂肪氧化分解比糖类释放的能量多，所以说脂肪是动物细胞中良好的储能物 3.水和无机盐的作用 （19）细胞鲜重中含量最多的化合物是水，细胞干重中含量最多的化合物是蛋白质。 （20）结合水是细胞结构的重要组成成分。自由水是细胞内的良好溶剂；细胞内的许多生物化学反应需要水参与；多细胞生物体内的绝大多数细胞，必须浸润在以水为基础的液体环境中；水在生物体内的流动，可以运送营养物质和代谢废物。 （21）结合水/自由水的比值变小有利于适应代谢活动的增强。 拓展： ①种子成熟过程中结合水/自由水的比值变大，萌发过程中结合水/自由水的比值变小。 ②自由水和结合水的比值大小决定了细胞或生物体的代谢强度，比值越大代谢越强，反之代谢越弱，一般二者比值越大，抗性越差，比值越小，抗性越强。 （22）许多种无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动有重要作用；无机盐离子必须保持一定的量，对维持细胞的酸碱平衡非常重要。拓展：ATP 、核苷酸等物质的合成需要磷酸。 （23）组成细胞最基本元素是C ，基本元素是 C 、H 、O 、N ，主要元素是 C 、H 、O 、N 、P 、S ，大量元素有 C 、H 、O 、N 、P 、S 、K 、Ca 、Mg ，微量元素有 Fe 、Mn 、Zn 、Cu 、B 、Mo 。 （24）活细胞中的这些化合物，含量和比例处于不断变化之中，但又保持相对稳定，以保证细胞生 命活动的正常进行。 第二单元 细胞的结构和功能 1.细胞学说的建立过程 （1）细胞学说的创始人是施莱登和施旺。 （2）细胞学说的要点是：细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成；细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用；新细胞可从老细胞中产生。 （3）细胞学说的创立对生物的进化的重要意义是：它揭示了任何动植物均是由细胞构成的，从而说明动植物之间具有一定的亲缘关系，生物之间的亲缘关系对揭示生物进化具有重要价值。 2.多种多样的细胞 （4）自然界的生命系统包括的层次有：细胞、组织、器官、系统、个体、种群、群落、生态系统、生物圈。 （5）植物的生命系统层次中没有“系统”这个层次。 （6）原核细胞（如细菌、蓝藻等）与真核细胞（如酵母菌、动物细胞、植物细胞）的本质区别是有无以核膜为界限的细胞核。 拓展： ①原核细胞除核糖体外，无其他细胞器。原核生物如细菌的细胞壁主要成分是由糖类与蛋白质结合而成的化合物。 ②原核生物的遗传不符合孟德尔遗传规律；真核生物在有性生殖过程中，核基因的遗传符合孟德尔遗传规律。 ③自然条件下，原核生物的可遗传变异的类型只有基因突变；真核生物的可遗传变异的类型有基因突变、基因重组、染色体变异。 ④原核细胞如细菌主要以二分裂的方式进行分裂；真核细胞的分裂方式有有丝分裂、无丝分裂、减数分裂。 （7）病毒不能独立生活，病毒的代谢和繁殖过程只能在宿主的活细胞中进行。 拓展： ①病毒在生物分类上是既不属于原核生物，也不属于真核生物。 ②组成每种病毒核酸的基本单位是四种脱氧核苷酸，或是四种核糖核苷酸。 ③病毒的培养不能直接用培养基培养，因为病毒的繁殖必须在宿主的活细胞中进行。 3.细胞膜系统的结构和功能 （8）用哺乳动物成熟的红细胞做实验材料能分离得到纯净的细胞膜。把细胞放在清水里，水会进入细胞，把细胞涨破，细胞内的物质流出来，这样就可以得到纯净的细胞膜。 （9）细胞膜的主要由脂质和蛋白质组成，还有少量的糖类。 拓展： ①行使细胞膜控制物质进出功能的物质是载体。 ②细胞膜与其他生物膜的化学组成大致相同，但是在不同的生物膜中，化学物质的含量有差别，例如，细胞膜上糖类的含量相对与细胞器膜要多。 （10）细胞膜的结构特点是流动性，功能特性是选择透过性。 （11）在细胞膜的外表，有一层由细胞膜上的蛋白质与糖类结合而成的糖蛋白，叫做糖被。糖被与细胞表面的识别有密切关系。消化道和呼吸道上皮细胞表面的糖蛋白有保护和润滑作用。 （12）植物细胞壁的化学成分主要是纤维素和果胶。 拓展： ①细菌细胞壁的成分是糖类与蛋白质结合而成的化合物。 ②常用纤维素酶和果胶酶除去植物细胞壁。
试验室消毒措施
. 实验室消毒措施 一、工作人员进入工作区须穿工作服，戴工作帽，戴口罩、手套，严格实行实验室操作规程。 二、严格执行无菌技术操作规程，必须做到一人一管一针一巾一带，每接触一个病人前后做好手卫生工作（洗手或快速手消），止血带用后用用后送供应室消毒。 三、无菌物品与非无菌物品分开存放，灭菌包外有消毒指示胶带，注明灭菌日期、有效期、灭菌包名称、操作人员。无菌物品如棉球在有效期内使用，开启后不得超过24小时。 四、检验科工作场所的保洁和消毒 检验科的工作场所分清洁区、半污染区和污染区。清洁区包括办公室、会议室、休息室、和库房；半污染区指卫生通道、更衣室、缓冲间；污染区包括标本的收集、存放、处理室、检测室。清洁区、半污染区和污染区应分别进行常规清洁、1. 清洁区若无明显污染，应每天开窗通风换气数次，湿式清洁台面、地面1次；所有清洁消毒器材（抹布、拖把、容器）不得与污染区或半污染区共用。 2. 半污染区环境消毒同污染区，每天用有效氯2000mg/L含氯消毒液拖把拖地。 3. 污染区在每天开始工作前几结束工作后，台面、地面应用
有效氯2000mg/L含氯消毒剂擦拭1次。当受到明显污染时，先用吸湿材料去除可见的污染物，然后再消毒处理。 . . 五、空气的消毒 1. 标本开闭盖应在生物安全柜（负压）内进行，使空气经细菌滤器或热力杀菌通道排出室外，柜内形成负压。不允许标本开盖离心。 2. 生物安全柜必须保持清洁，每天清洁消毒2次。生物安全柜的紫外线灯每日消毒时间进行登记；紫外线灯管两周用95%酒精擦拭一次；紫外线灯管每半年监测有效强度一次，并按要求记录。 六、器材消毒 除已知无传染性器材外，凡直接接触或间接接触过临床检验标本的器材均视为有传染性，应进行消毒处理。 1. 金属器材 （1）小的金属器材如接种环，用酒精灯烧灼灭菌。当接种 环上有较多污染物时，应先在火焰上方，把接种环烤干后再缓慢伸入火焰烧灼，以免发生爆裂或溅泼而污染环境。 （2）较大的金属器材或锐利到刀剪受污染后不宜烧灼灭菌，可用2%碱性/中性戊二醛溶液浸泡2小时后，水冲洗、沥干，再用干热或压力蒸汽灭菌。