ELISA Assay protocol

Protocol for ELISA Assay

Day 1: Coat plates (Corning/Costar EIA/RIA 96-well Plate, #9018)

1. Dilute the capture antibody

Dilute a tube of stock capture antibody with 5.5ml Bicarbonate Buffer(pH9.6) for each plate. Mix thoroughly.

For example: 31ul/tube of 144ug/ml anti-mTNFa capture antibody + 5.5ml Bicarbonate buffer →a working concentration of 0.8ug/ml

2. Add 50ul of Ab dilution to each well. Gently tap the plate to ensure thorough coating.

3. Seal the plate with parafilm and incubate at 4o C for overnight or more.

Day 2: Standards and Samples

1. Wash plate twice with Washing Buffer(0.01%Tween20-PBS)

Fill each well with Washing Buffer, gently tap the edge of the plate for 100 times(50 times each direction), then pour off all buffer.

After the last wash, remove any remaining buffer by firmly tapping plate upside down on absorbent paper.

All subsequent washes should be performed similarly.

2. Add 100ul of Blocking Buffer(2%BSA-PBS) per well to block non-specific binding and reduce background.

3. Incubate at room temperature for a minimum of 2 hours.

4. While plate is being blocked, prepare standard dilutions and appropriate sample dilutions (if necessary) with Assay Buffer(0.05%Tween20-0.2%BSA-PBS).

A.

Prepare 280ul of top standard at 5000pg/ml from stock solution(e.g. 5ul of 280ng/ml rmTNFa +275ul Assay Buffer→280ul of 5000pg/ml).

Perform six three-fold serial dilutions of the 5000pg/ml top standard with Assay Buffer in separate tubes.(i.e. 100ul of 5000pg/ml + 200ul Assay Buffer, and so on)

After diluting, the standard concentrations are 5000pg/ml, 1666.67pg/ml, 555.56pg/ml, 185.19pg/ml, 61.73pg/ml, 20.58pg/ml, 6.86pg/ml, respectively.

Assay Buffer serves as the Blank.

B.

Prepare 280ul of top standard at 2000pg/ml from stock solution(e.g. 2ul of 280ng/ml rmTNFa +278ul Assay Buffer 280ul of 2000pg/ml).

Perform six two-fold serial dilutions of the 2000pg/ml top standard with Assay Buffer in separate tubes.(i.e. 140ul of 2000pg/ml + 140ul Assay Buffer, and so on)

After diluting, the standard concentrations are 2000pg/ml, 1000pg/ml, 500pg/ml, 250pg/ml, 125pg/ml, 62.5pg/ml, 31.25pg/ml, respectively.

Assay Buffer serves as the Blank.

5. Wash plate 3 times with Washing Buffer.

6. Add 50ul per well of standard dilutions and samples to appropriate wells. A standard curve must be run with each assay.

7. Seal the plate again and incubate at 4o C for overnight or more.

Day 3: Detection antibody, HRP and substrates

1. Dilute the Detection antibody

Dilute a tube of stock detection antibody with 5.5ml Assay Buffer for each plate. Mix thoroughly.

For example: 31ul/tube of 36ug/ml anti-mTNFa detection antibody + 5.5ml Assay buffer

→a working concentration of 0.2ug/ml

2. Wash plate 4 times with Washing Buffer.

3. Add 50ul of Ab dilution to each well. Incubate at room temperature for 1 hour exactly.

4. Dilute Streptavidin-HRP with Assay buffer

26ul of HRP + 5.2ml Assay buffer → 1:200 dilution

4. Wash plate 4 times with Washing Buffer.

5. Add 50ul of HRP dilution to each well. Incubate at room temperature for 30min exactly. Avoid placing the plate in direct light.

6. Wash plate 5 times with Washing Buffer.

7. Add 50ul of TMB substrate solution (Thermo 1-Step Ultra TMB, Cat#34028) to each well, incubate for 10-15min or until the desired color develops.

8. Stop reaction by adding 50ul of 2M H2SO4 to each well. Gently tap the plate to ensure thorough mixing.

9. Read absorbance at 450 nm within 30 minutes.

10. Calculation of results

Plot the standard curve on linear-log axis graph paper with cytokine concentration on the x-axis(log) and absorbance on the y-axis(linear). Draw a best fit line through the standard points. To determine the unknown cytokine concentrations in the samples, find the absorbance value of the unknown on the y-axis and draw a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the x-axis and read the corresponding cytokine concentration. If the samples were diluted, multiply by the appropriate dilution factor. The data is best calculated with computer-based curve-fitting software using a 5- or 4-parameter logistics curve-fitting algorithm.

Solutions required:

1. 1×PBS (10 L)

A.

80g NaCl, 2g KCl, 36.3g Na2HPO4?12H2O and 2.4g KH2PO4 dissolved in ddH2O, adjust pH to 7.4, add ddH2O to 10L

B.

80g NaCl, 2g KCl, 29.3g Na2HPO4?12H2O and 2g KH2PO4 dissolved in ddH2O, adjust pH to 7.4, add ddH2O to 10L

2. Bicarbonate buffer (200ml)

1.68g NaHCO3 and 0.712g Na2CO3 dissolved in 200ml ddH2O, adjust pH to 9.6

3. Blocking buffer (200ml)

4g BSA dissolved in 200ml of 1×PBS

4. Assay buffer (200ml)

20ml of Blocking buffer + 180ml of 1×PBS + 100ul of Tween-20

5. Washing buffer (1000ml)

1000ml of 1×PBS + 100ul of Tween-20

6. Stop solution (500ml)

54.5ml of 98% H2SO4 + 445.5ml of ddH2O

植物病毒检测技术研究进展汇总

植物病毒检测技术研究进展 刘茂炎 摘要：随着现代技术的发展特别是分子技术的发展，鉴定和检测病毒的方法越来越多，也越来越精确快速。以PCR为基础的基因工程技术已经广泛应用于病毒核酸分子的鉴定，其高灵敏度和高特异性是与PCR扩增反应的特异性引物相关联的；于此同时传统的鉴定检测技术依然有其发展优势。不论怎样的方法技术，都是以病毒的理化性质以及侵染性为基础的。在此基础上，甚至出现了某些边缘技术在病毒鉴定检测方面的应用。本文主要综述的是对植物病毒鉴定检测技术的研究进展。 关键词：植物病毒；检测技术；PCR 病毒在生物学上特征（如病毒的理化性质，包括病毒粒子的形态、大小、对理化因子的耐受性等）以及在寄主上的反应（如寄主范围、症状表现、传播方式等）是对病毒最直观的认识。常规的对植物病毒的鉴定检测方法有：生物学测定方法、血清学技术、电子显微镜技术、分子生物学技术等。生物学测定依据病毒的侵染性，观察寄主植株或其它生物的症状表现；血清学技术以病毒外壳蛋白(CP)为基础；电子显微镜技术依据病毒的形状大小的不同；分子生物学鉴定则以病毒核酸为基础。 1.生物学鉴定 最直接的方法是目测法，直接观察病毒对植物的病害症状。如烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV），病害症状为叶上出现花叶症状，生长陷于不良状态，叶常呈畸形；玉米鼠耳病的诊断主要依据田间症状表现[1]。目测法因观察的主观性和症状的不确定性的影响而不精准。1929年美国病毒学家霍姆斯（Holmes）用感病的植物叶片粗提液接种指示植物，2~3天后接种叶片出现圆形枯斑，枯斑数与侵染性病毒的浓度成正比，能测出病毒的相对侵染力，对病毒的定性有着重要的意义，这种人工接种鉴定的方法就是枯斑和指示植物检测法。国内报道的水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf fijivirus，RBSDV)可侵染28属57种禾本科植物，该病毒的主要传毒介体是灰飞虱(Laodelphax striatella)，

流感防治培训测试试题及答案

流行性感冒防治知识培训测试试题 姓名：分数： 一、多选题（每小题3分，共15分） 1.关于流感的叙述下列正确的是（ABCDE） A.患者、隐性感染者为主要传染源 B.病初2~3天传染性最强 C.某一时期的流行多由单一血清型引起 D.少数重症病例病情进展快，可因急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和/或多 脏器衰竭而死亡 E.咳嗽明显，食欲减退，可有鼻塞、流涕、胸骨后不适等 2.下列哪些是典型流感的主要临床表现（ABCD） A.突起畏寒、寒战和高热 B.全身酸痛明显，尤以背部和腿部最为明显 C.部分以呕吐、腹痛、腹泻为特点，常见于感染乙型流感的儿童 D.可有咽喉刺痛、胸骨下烧灼感、干咳 E.头疼及中毒症状明显 3.关于流感患者的肺炎，下列描述正确的是（ABCE） A.流感病毒本身可引起病毒性肺炎 B.病程中若持续或反复发热，呼吸道症状加重，提示可能并发细菌性肺 炎 C.并存慢性心、肺疾病和免疫功能低下者，容易迅速致死 D.都必须尽早应用抗生素 E.护理上应密切观察患者的体征

4.流感需与下列疾病鉴别（ABCDE） A.伤寒、麻疹 B.肺炎支原体肺炎 C.钩端螺旋体病 D.急性细菌性扁桃体炎 E.肺炎球菌性肺炎和流脑的早期 5.出现以下情况之一者为危重病例（ABCDE） A.呼吸衰竭； B.急性坏死性脑病； C.脓毒性休克； D.多脏器功能不全； E.出现其他需进行监护治疗的严重临床情况 二、单选题（每小题2分，共20分） 1.关于流行性感冒下列哪项是错误的( D ) A甲型流感易发生变异 B由流行性感冒病毒引起 C临床表现以上呼吸道症状较重 D全身中毒症状较重 2.关于流行性感冒病毒下列哪项是正确的( B ) A流行性感冒病毒属副粘液病毒 B甲、乙、丙、丁四型 C甲型不变异

基因芯片及其在植物病原物检测中的应用

基因芯片及其在植物病原物检测中的应用 摘要:基因芯片是近年来发展起来的一项新兴技术，是把大量DNA探针或基因片段按特定的排列方式固定在硅片、玻璃、塑料或尼龙膜等载体上，形成致密、有序的DNA分子点阵，在基因定位、DNA测序、突变检测、基因筛选、基因诊断和发现新基因等方面起着重要的作用。基因芯片技术已广泛应用于病原物检测，在植物病害预测和防治中起着重要的作用。 关键词:基因芯片; 病原物检测 1996年，美国Affvmetrix生物公司制造出世界上第一块商业化的基因芯片(Gene chips)，由此掀起了基因芯片研究热潮。基因芯片被迅速而广泛地应用于生命科学与医学的各领域，被誉为继大规模集成电路后又一次意义深远的科技革命[1]。随着基因芯片技术的不断发展，其在生命科学和医学中的研究领域中的应用几乎是全方位的，包括基因定位、DNA测序、突变检测、基因筛选、基因诊断和发现新基因等［2］。本文仅叙述基因芯片原理已经基因芯片在植物病原物检测中的作用。 基因芯片的基本原理 基因芯片，又称DNA芯片(DNA chips)，属于生物芯片(bio-chip)中的一种，是综合微电子学、物理学、化学及生物学等高新技术，把大量DNA探针或基因片段按特定的排列方式固定在硅片、玻璃、塑料或尼龙膜等载体上，形成的致密、有序的DNA分子点阵，因固相载体常用硅玻片或硅芯片，故称之为基因芯片［3］。基因芯片技术的基本原理是分子生物学中的核酸分子原位杂交技术:将短链核酸分子固定在固相载体上作为探针，待分析样品经过标记后与固定在芯片上的探针杂交。其技术流程主要包括芯片的制备、待测样本的制备和标记、杂交反应、结果检测和数据处理分析等。与传统的核酸印迹杂交技术相比，基因芯片具有可信度高、信息量大、操作简单、重复性强以及可以反复利用等诸多优点［4］。

植物病毒分子检测方法概述

植物病毒分子检测方法概述 邵碧英 (福建出入境检验检疫局　福州　350001) 植物病毒粒体主要由核酸和蛋白外壳构成,蛋白外壳由许多外壳蛋白(CP)组成。 CP和核酸因病毒的不同而异,是检测、鉴定植物病毒的主要依据。广义的植物病毒分子检测方法包括蛋白质检测(或血清学试验)和核酸检测方法,本文分别介绍。 1　以病毒外壳蛋白为基础的检测方法 植物病毒的CP具有抗原性,很多病毒可以被提纯并制备成高效价的抗血清,根据特异性的抗原抗体反应可检测植物病毒的存在。血清学方法有很多,应用较广泛的是酶联免疫吸附反应,在此基础上加以改进也发展了一些新的检测方法。 111　酶联免疫吸附反应(EL ISA) EL ISA是一种采用固相(主要为聚苯乙烯酶联板)吸附,将免疫反应和酶的高效催化反应有机结合的方法。酶标抗体(或抗抗体)与相应抗原反应时形成酶标记的免疫复合物,酶遇到相应的底物时产生颜色反应,颜色深浅与抗原量正相关。该方法已被用于各种植物病毒检测。 后来发展的用酶标A蛋白取代酶标抗抗体的EL ISA被称为A蛋白酶联吸附法(SPA-EL ISA)。几种植物病毒的SPA-EL ISA诊断试剂盒已被研制成功[1]。 EL ISA方法简单,灵敏度高,特异性强,适于大量样品的检测。 112　斑点免疫吸附法 20世纪80年代发展的以硝酸纤维素膜(NCM)为固相载体的酶联免疫吸附试验—斑点免疫吸附法,检测原理类似于EL ISA,但酶与底物反应产生不溶性产物,在NCM 上形成有色斑点,斑点颜色深浅与抗原的量成正比。也已用于各种病毒检测。 斑点法简便,反应时间短,反应结果可长期保存,不需任何特殊设备,也适合于大量样品的测定。 113　直接组织斑免疫测定法(IDD TB)与EL ISA相比,斑点法更为简便,但仍然需要提取病毒的粗提液或提纯制剂,试验过程较繁琐。改进后的直接组织斑免疫测定是直接把植物组织切块固定于膜上,然后利用抗原抗体特异反应来检测植物病毒。 鞠振林等[2]以IDD TB检测病组织中的马铃薯X病毒Potato virus X等多种病毒获得较好结果。徐明全等[3]采用IDD TB法从兰花叶片中检测到建兰花叶病毒Cymbidium mosaic virus。把石斛兰叶片从叶尖至叶尾每0.5cm切割1次并压印在膜上,检测结果可直接显示出感染病毒的具体部位。 组织印迹法明显比EL ISA和DIBA的试验程序简单、快速。但病毒在植物的不同部位分布不均匀,同一样品要重复多次,以提高检测的准确性。 114　电印迹免疫分析(EBLA) 电印迹免疫分析方法首先用SDS2PA GE 分离病毒CP,把蛋白带转移到膜上,再进行抗原杭体反应,根据CP分子量和吸附特异性抗血清的特殊带来判断该病毒的存在与否。 EBLA和EL ISA、DIBA相比具有明显的优点,通过电泳将植物病毒的CP和植物组织中的其它蛋白分离开来,排除了杂蛋白的干扰,可检测低浓度的植物病毒。此方法 — 7 7 3 —

植物病毒病检测方法

植物病毒病检测方法 植物病毒病是农业生产上一种重要病害，严重影响农作物的产量和质量, 目前还没有1种治疗效果较理想的药剂，对发病植株做到早期诊断及提前检测就显得尤为重要。植物病毒学历经近百年的发展，植物病毒的检测方法与手段也在不断发展与改进。常用的方法有侵染力测定法、血清学方法、电子显微镜计数和分子生物学法等。 1.4.1侵染力测定法 侵染力测定法是将病毒样本接种在植物上，根据侵染力的大小定量。它的灵敏度在所有定量法中是比较高的，而且是其他定量法的基础。设计一种新的定量法，如果不经过侵染力的验证，将无法判断测定的是病毒或者是具有侵染力的病毒。侵染力测定法包括局部枯斑法、淀粉－碘斑法、系统感染率的测定法等。侵染力测定多用粗汁液来接种，为了避免抑制物质的作用和使半叶枯斑数目控制在一定范围，须用缓冲液稀释接种物。 局部枯斑法1929年F.O.Holmes发现TMV在心叶烟（Nicotiana glutinosa）接种叶片上引起局部坏死斑点，在一定的病毒浓度范围内，所产生的斑点数目与病毒浓度成正比例。这一发现成为病毒侵染性定量测定的基础（田波，1987）。所有机械传染的病毒都有可能应用局部斑点法，但实际上只有少数病毒具有可用于定量测定的局部斑寄主。一个待测样品所形成的斑点数目除取决于接种物中病毒浓度外，还受试验植物种类、环境条件和接种物中是否含有病毒抑制物质的影响。 淀粉－碘斑法当所研究的病毒没有过敏性枯斑寄主时，采用此法。Holmes（1931）发现TMV接种的烟叶上有时形成明显的黄化斑块，但不能用于计数。将这种接种叶用95％乙醇加热到80℃固定，然后用I2和KI混合液（10克I2，30克KI，1500毫升H2O）染色时，则侵染点处出现淀粉－碘的蓝色反应。当下午采摘叶片，褪色过夜，然后用碘液染色，则侵染点较周围组织着色浅；当采摘叶片前，植株先在黑暗中放几个小时，再用碘液染色，则侵染点组织着色深。这是由于病毒侵染既降低光合组织中碳水化合物的形成，也降低碳水化合物从光合组织中的运出。淀粉－碘染色的强弱受环境条件的影响较大，不如局部枯斑法可靠，但在标准化条件下仍可用于侵染性的定量测定。 侵染性滴度法当上述方法都不适用时，可采用侵染性滴度法。即把欲测定样品用缓冲液稀释，可用十倍稀释、成倍稀释、半倍稀释或更低稀释。这种方法的缺点是需用大量实验

甲型流行性感冒病毒抗原检测试剂盒

甲型流行性感冒病毒抗原检测试剂盒(胶体金法) 使用说明书 通用名:甲型流行性感冒病毒抗原检测试剂盒(胶体金法) 英文名:Influenza type A Colloid gold Rapid Diagnostic Kit 汉语拼音:JIAXING LIUXINGXING GANMAOBINGDU KANGYUAN JIANCE SHIJIHE (JIAOTIJIN FA) 【生产企业】广州健仑生物科技有限公司 【产品规格】22份/盒 【使用目的】用于鼻腔抽吸液、鼻腔擦拭液和咽喉擦拭液标本中甲型流感病毒抗原的定性测定。 【试验原理】 流行性感冒是指由流感病毒引起的具有传染力的疾病，可引发肺炎或更严重的并发症。流感病毒的结构主要包括内部的核心和外部的病毒囊膜。流感病毒核心是由核蛋白卷曲包绕螺旋形核糖核酸(RNA)组成，核蛋白的抗原稳定，很少发生变异，具有型特异性。根据核蛋白抗原性的不同，可把感染人的流感病毒分为甲、乙、丙三型。本产品是利用能够特异性识别甲型流感病毒核蛋白的单克隆抗体，以免疫色谱法检测流感病毒核蛋白的试剂盒，本试剂盒仅对样品中的甲型流感病毒有反应，对乙型及丙型流感病毒均不反应，而且不能用于区分病毒感染的亚型。 本品是由样品滴下部、试剂部和展开部三部分组成的检测板，内藏长方块状的载体。其中，试剂部包含胶体金标记抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)(以下将简称为胶体金标记抗体A)；展开部包含固定化的抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)(以下简称为抗流感A抗体)及抗鼠免疫球蛋白多克隆抗体(兔)(以下简称为抗鼠免疫球蛋白抗体)。 检测板各部分的名称 样品从检测板的样品滴下部滴下后，胶体金标记抗体A被溶解，与样品中的甲型流感病毒抗原形成免疫复合体。免疫复合体因展开部的毛细管现象而移动，被判定部〔T〕中固定化的抗流感A抗体捕捉，于是在判定部[T]因胶体金的作用形成紫红色的条带。本试剂盒的这个紫红色条带可以肉眼确定，以判断样品中是否存在甲型流感病毒。 另一方面，无论样品中是否有甲型流感病毒存在，剩余的胶体金标志抗体A继续在展开部移动，在判定部[C]被固定化的抗鼠免疫球蛋白抗体捕捉，因胶体金而形成紫红色条带。这显示了胶体金标志抗体的正常移动。【主要组成成份】 1.检测板:20个，每个检测板在试剂部包被有胶体金标记抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)，在展开部包被有抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)及抗鼠免疫球蛋白多克隆抗体(兔)。 2.样本抽提液:2瓶，11ml/瓶，为含有表面活性剂的TRIS缓冲液并添加有防腐剂，可直接使用，贮存在2～30℃可稳定至有效期。 3.灭菌棉棒20支。 4.抽提用管子20支。 5.滴头21个。 6.立架1个。 【适用仪器】 无需其他仪器，产品开封后直接使用。 【样本要求】 1)鼻腔抽吸液的采集方法 抽吸器一侧的管子连接在抽吸泵上，另一侧的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。 2)鼻腔擦拭液的采集方法 将灭菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲数次，采集粘膜表皮。 3)咽喉擦拭液的采集方法 将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。采

实验 15 植物病毒病害抗性鉴定

实验15 植物病毒病害抗性鉴定 植物病毒是导致粮、菜、果、花卉产量下降、品质变劣的重要原因之一。自1892年俄国Iwanowsky发现烟草花叶病毒以来，己被正式命名的植物的病毒789种，并明确病毒只含有一种类型的核酸，即核糖核酸（RNA）或脱氧核糖核酸（DNA）， 70年代后发现了只含有小分子量 RNA、不含蛋白质、侵染活性很高的类病毒25种，80年代后发现了含有线状病毒基因组RNA和与类病毒相似的环状RNA的拟病毒40种。 植物病毒种类多，繁殖速率快，传播途径广，并且缺少有效防治药剂和措施。因此，植物病毒病一旦流行，危害之重，己超过真菌、细菌病害。因此，加强植物病毒研究，减轻植物病毒危害，对国民经济的发展具有重要意义。 本实验重点学习目前普遍采用的几种植物病毒病害检测及抗性鉴定的方法及步骤。 一、试材及用具 1．试材发病的植物组织及家兔等。 2．仪器及试剂高速冰冻离心机，离心管以及分子量为6000的聚乙二醇（PEG6000）、氯仿等。 二、方法步骤 （一）病毒检测 可用于植物病毒检测的方法主要有生物学测定、血清学检测、电镜检测、免疫电镜以及酶联免疫吸附反应（ELISA）、免疫PCR等分子生物学方法，其中血清学检测是快速、准确、 图5－1 病毒抗原的分离与纯化

灵敏度高、成本低的病毒检测方法，可用于实际检验检测工作中去。本实验重点介绍，其它方法可查阅有关文献资料。 利用血清学技术进行病毒检测，主要依据血清学反应（免疫学反应），即抗原与抗体之间发生的各种作用。抗原指的是能诱导产生抗体的一类物质，它可以是病毒、细菌、真菌、植物菌原体等微生物，也可以是酶类、DNA、RNA、类脂、多糖等有机化合物，甚至还可以是叶片、枝条等各类组织。抗体是指由抗原注射到动物体内诱导产生的、并能与抗原在体外进行特异性反应的一类物质，庄要是一些免疫球蛋白。含有抗体的血清通常称为抗血清。抗原能与由其诱导产生的抗体发生凝集、沉淀等反应，利用病原物中特异性强的抗原与相应的抗体反应，就能实现对病原物（病毒）的检测、鉴定。目前国际上己制备出 200余种重要植物病毒抗血清。我国农业部植检所为满足植物病毒检疫的研究和需要，先后制备出 30余种植物病毒抗血清。因此，利用血清学技术检测病毒，主要包括如下三个环节：1．病毒抗原的分离与纯化利用高速冰冻离心机等设备以及聚乙二醇（PEG）、氯仿等化学药品，从冰冻的病组织中分离、纯化病毒抗原。其操作步骤如图5－1所示。 2．病毒抗血清的制备病毒抗血清的制备主要包括试验动物选择、抗原注射、血样采集以及抗血清的收集与保存等过程，可用图5－2表示： 图5－2 病毒抗血清的制备与保存 3．血清学反应将抗血清及抗原进行一系列稀释后，采用试管沉淀、小试管环状沉淀、玻片凝集、免疫双扩散、免疫电泳及荧光抗体等反应方法进行血清学反应，从而实现对病毒的检测与鉴定。 （二）病毒病抗性鉴定 病毒检测的对象是病原物（病毒），是对病毒定性（病毒的有无及其种类）与定量的分析鉴定，而抗性鉴定的对象是寄主，即植物品种或种质对特定病毒的抵抗能力。目前植物病毒病抗性鉴定所采用的方法，大都为大田病圃法。例如，刘琴等（2002）对110个小麦引进品种在自然病圃区进行了对小麦黄花叶病的抗性鉴定。主要做法是，每个品种分别播种，设置对照与重复，于病害发生期调查发病率。所采用的病情分级标准是： 1级 抗（R）：发病率0%～9.9%；

甲型流感病毒抗原检测试剂使用说明(胶体金)-Alere BinaxNOW

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用说明书 【产品名称】 通用名称：甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法） 英文名称：Alere BinaxNOW? Influenza A＆B Card 【包装规格】 22人份/盒。 【预期用途】 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）是一种体外免疫层析试验，用于定性检测鼻咽拭子样本中的甲、乙型流感病毒核蛋白抗原，可快速地对甲、乙型流感病毒感染做出辅助鉴别诊断。 试验简介 流感是发生在呼吸道的具有高度传染性的急性病毒感染，它属于传染病范畴，可通过咳嗽或打喷嚏时排出的带有活病毒的气溶胶而在人与人之间传播。每年的秋季和冬季都可爆发流感1.甲型流感病毒的流行性比乙型流感病毒流行性要强，造成的病情也更严重，并且大多数严重的流感也都是由它引起的，而乙型流感则相对比较缓和。 针对甲、乙型流感的快速诊断试验对获取有效的抗病毒治疗是很有意义的。对流感做出快速诊断不但可减少病人住院的天数，减少抗菌素的使用，而且可减少病人的住院费用1。 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）提供了一种用鼻咽拭子标本对甲型和乙型流感进行简便快速诊断的方法，使用方便，结果快速，在急诊检验中提供的信息可帮助医生选择治疗方案并做出是否需要收住院的决定。 甲型流感病毒有许多亚型，有些亚型可在鸟类中发现3。1997年首次报道人类甲型禽流感（H5N1，主要发生于鸟类的一种流感病毒亚型），此后，在人群中出现了H5N1病例，使人们对H5N1关注起来，H5N1的变异使得它更易在人群间传播4，由于备案的禽流感感染病人比例很低，快速试验在该类病人治疗中利用度尚不得知。 【检验原理】 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用的是薄膜免疫层析技术，它利用具有高度敏感性的单克隆抗体来检测鼻咽拭子标本中的甲型和乙型流感病毒的核蛋白抗原这些单克隆抗体连同一种对照抗体分别被固定到膜支持物上，形成三条独特的线。膜支持物跟其他试剂/垫结合在一起构成检测条。检测条位于一个称作检测卡的书型铰链状的纸板中。 拭子标本需要进行预处理：用洗脱液、盐水或转移介质等将标本从拭子中洗脱出来，将标本加到检测条顶端，闭合检测卡，15分钟时根据是否出现紫红色样品线来报告结果。在有效试验中，蓝色对照线变为粉红色。 【主要组成成分】 提供的材料

2016年最新流行性感冒诊断及治疗标准流程

流行性感冒（2016年版） 一、流行性感冒标准住院流程 （一）适用对象。 第一诊断为流行性感冒患者（ICD－10：J11-101）。 （二）诊断依据。 根据《流行性感冒诊疗方案》（卫生部，2000.10.13）及根据卫生部“十二五”规划教材、全国高等学校教材《传染病学》（人民卫生出版社，2013，第8版，李兰娟、任红主编）。 1.发病前7天内与传染期流感确诊病例有密切接触，并出现流感样临床表现。或发病前7天内曾到过流感流行的地区，出现流感样临床表现。 2.出现高热、头痛、周身酸痛等临床表现，同时有以下一种或几种实验室检测结果： （1）流感病毒核酸检测阳性（可采用real-time RT-PCR 和RT-PCR方法）； （2）分离到流感病毒； （3）双份血清流感病毒的特异性抗体水平呈4倍或4倍以上升高。

（三）治疗方案的选择。 根据《流行性感冒诊疗方案》（卫生部，2000.10.13）及根据卫生部“十二五”规划教材、全国高等学校教材《传染病学》（人民卫生出版社，2013）。 1.呼吸道传染病隔离。 2.一般治疗：适当休息，清淡饮食，多饮水。 3.对高热、头痛者给予解热止痛等对症治疗。 4.抗病毒治疗：奥司他韦。 （四）标准住院日为7-10天。 （五）进入路径标准。 1.第一诊断必须符合流行性感冒ICD－10：J11-101诊断编码。 2.当患者同时具有其他疾病诊断时，但在住院期间不需要特殊处理也不影响第一诊断的临床路径流程实施时，可以进入路径。 （六）住院期间的检查项目。 1.必需的检查项目： （1）血常规、尿常规、大便常规； （2）血生化：包括电解质，肝肾功能、心肌酶谱； （3）流感病毒抗原检查、流感病毒核酸检测； （4）胸片、心电图。

植物的病毒检测技术

植物的病毒检测技术 植物病毒病害是一类重要病害,几乎在各类作物上都有发生,严重影响农作物的产量和质量,用一般的方法难以防治,是生产上的一大难题。种植无病毒种子、苗木是一种非常有效的防治措施。因而如何对种子、苗木等无性繁殖材料以及在发病早期对植株进行快速准确地检测诊断就显得尤为重要。最初植物病毒检测主要依靠生物学性状,但生物学方法费时费力,检测周期长,而且易受环境条件的影响,反应不稳定、重复性差。目前植物病毒检测主要是血清学检测(以病毒外壳蛋白为基础)和核酸检测,前者主要包括ELISA、快速免疫滤纸测定、免疫胶体金技术、免疫毛细管区带电泳、免疫PCR 等;后者主要有PCR、分子信标、实时RT-PCR和核酸杂交等。 1 血清学检测方法 1．1 酶联免疫吸附测定(ELISA) 酶联免疫吸附测定是一种采用固相(主要为聚苯乙烯酶联板) 吸附,将免疫反应和酶的高效催化反应有机结合的方法,其基本原理是以酶催化的颜色反应指示抗原抗体的结合。该方法首先将同源特异抗体吸附在反应器皿底部，加入欲测试的含病毒的样品，病毒与抗体结合，病毒颗粒被固定，再加入标记的特异抗体和酶的底物，酶与底物反应后会出现有颜色的溶液其强度与病毒浓度成正比，用此方法可测定出病毒的浓度。ELISA方法简单,灵敏度高,特异性强,适于大量样品的检测,目前该方法已被广泛用于植物病毒检测。在此基础上加以改进又发展了一些新的检测方法,如A 蛋白酶联吸附(SPA-ELISA)、斑点免疫吸附(DIBA)、直接组织斑免疫测定( IDDTB) 、伏安酶联免疫分析[1]、快速ELISA 等。 1．2 快速免疫滤纸测定法(Rapid immuno-filter paper assay , RIPA) 快速免疫滤纸测定类似乳胶凝集反应,其原理是把待测病毒的抗体吸附在乳胶颗粒上,通过大颗粒乳胶间接反应小颗粒病毒的存在。所不同的是RIPA使用了一种红色乳胶,从而使检测更加简单和直观。RIPA[2]目测检测提纯TMV 的灵敏度分别可达 5ng/ml～50ng/ml 。 1.3 免疫胶体金技术( Immunogold2label as2say) 免疫胶体金技术最早起源于电镜方面的研究,由于金在生物学上是惰性的,且有良好的电荷分布,可以和蛋白质(如抗体、A 蛋白等)紧密结合,因此广泛应用于生物学和微生物学的各个领域。其原理是用柠蒙酸钠将氯金酸金离子还原为胶体金。胶体金颗粒在适当的条件下,以静电、非共价键方式吸附抗体IgG(或A蛋白)分子,从而形成稳定的IgG(或A蛋白) - 胶体金复合物。通过抗原抗体特异性结合,抗体(或A蛋白)胶体金复合物就可以结合在抗原上。金颗粒吸附在病毒粒体周围,从而得到明显的鉴别性和可见度[3] 。 随着技术的发展,1971年Taylor 等报道了免疫金染色技术( Immunogold staining) ,1981年Danscher又创建了免疫金- 银染色技术( Immunogold-silver staining) 。自1983年首次成功使用胶体金标记的抗体检测植物病毒以来,该技术逐渐被应用于植物病毒的检测。20 世纪80年代发展起来的斑点免疫金渗滤试验(Dot immunogold fitration assay) 是一种快速免疫胶体金诊断技术,该技术以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用,使抗体抗原反应和洗涤在一特殊的渗滤装置中迅速完成,从而大大缩短了检测时间。在此基础上,又建立了更为简

呼吸道病原体抗原七项的检测及临床意义

“呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义 一、呼吸道病毒简介 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。常见的呼吸道病毒包括：A型流感病毒（甲型流感病毒）、B型流感病毒（乙型流感病毒）、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。 流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒 图1 各种病毒在电子显微镜下的形态 二、呼吸道病毒临床诊断 现有的主要方法：1、抗原检测；2、抗体检测；3、病毒分离培养；4、分子生物学方法等。现将上述检测方法的优劣小结于表1。目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。 表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较 检测方法优点缺点 病毒分离培养特异性高，金标准培养条件要求高、灵敏度低，标本中病原体量少时，易致假阴性。 抗原检测 酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应 间接免疫荧光法简便、快速 有非特异性反应需要使用荧光显微镜 直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高 且可用于疾病的早期诊断 需要使用荧光显微镜 抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助 分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐，价格昂贵 三、呼吸道病原体抗原的优越性 1、从理论上讲，只要有病毒感染，通过抗原检测都能鉴定出，而抗体检测却要在人体产

生免疫应答以后才能进行鉴定。 2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间，而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童，特别是3岁以下的小孩，其产生抗体往往需要更久，且抗体产生的水平也较低。若检测的是IgG，则不能很好地区分既往感染和急性感染。 因此，抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势（详见表2）。 表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较 病原体抗体IgM检测病原体抗原检测 检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出 临床意义 回顾性诊断，适用于疾病后期的诊断， 多用于循证医学可用于疾病早期诊断 对患者的治疗有重要指导意义 检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒 将多种抗体进行组合，能更好地应对变异 的病毒 检测方法 一般使用酶联免疫（ELISA）或者间接免疫 荧光法，有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法，几乎没有非特异性反应 四、为什么要早期全面检测？ 1、病毒治疗针对性强 2、病毒治疗有时效性 3、避免抗生素的滥用 五、项目开展的价值和社会效益分析 本项目可用于呼吸道病原学的研究；提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平；还可用于呼吸道传染病流行的监控等。 六、呼吸道病原体检测 我们检验中心/遗传所于3月20日正式开展了“呼吸道病原体抗原7项”。该检验组合包含了甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型7种抗原的检测。收费标准：326.0元/次，不接受单项申请。 临床意义：主要用于呼吸道感染病原体的早期诊断和鉴定诊断。 标本采集和报告时间：鼻咽拭子或下呼吸道分泌物。暂定于每周五4:30pm发出检验报告。 欢迎各临床保健科室踊跃开单，我们将竭诚地为临床服务。咨询电话：临床免疫学检验室，2313065（外线）；3065（内线）。 撰稿：罗桂香，编辑：周玉球

甲型和乙型流感病毒抗原快速检测结果分析

浙江临床医学2019年5月第21卷第5期·689· 【摘要】目的?探讨本地区甲/乙型流感病毒在不同流行季节的变化趋势，分析流感病毒阳性患者外周血细胞中白细胞（WBC）、中性粒细胞（Neu）、淋巴细胞（Lym）、嗜酸性细胞（Eos）、血小板（PLT）和C反应蛋白（CRP）等感染性指标的变化。了解季节因素对流感病毒传播的影响，为流感病毒的临床治疗及疾病预防提供流行病学依据。方法利用胶体金标记免疫层析技术进行流感抗原的检测，对2017年3月至2018年2月检测的1648份流感病毒抗原筛查结果进行统计学分析，分析其流行病学特征，包括季节、年龄段分布特点。同时分析流感病毒阳性病例的相应血常规和CRP等感染性指标的变化。结果?与正常对照组比较，流感组CRP明显升高，WBC、Eos、Lym、PLT则明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。2017-2018年度，本地区流感高峰期在2018年1~2月，且以乙型流感为主，其余月份为散发低流行。年度甲型流感和乙型流感病毒检出率比较，差异有统计学意义（χ2=20.615，P<0.05）。不同年龄组的流感病毒抗原检出率比较差异有统计学意义（χ2=27.174，P<0.05）。结论?流感病毒的流行与季节有着密切的关系，本地区流感的类型在不同的流行季节存在着一定的变化趋势。甲型/乙型流感病毒抗原胶体金法具有快速、简单准确和无污染等优点，适合基层医院广泛筛查使用。 【关键词】胶体金免疫层析法?白细胞?C反应蛋白?甲型、乙型流感病毒抗原?季节性流行病? 【Abstract】Objective To?discuss?the?trend?about?influenza?antigen?in?different?seasonal?in?Shaoxing?area，meanwhile?to?detect?and?analyze?the?variety?about?WBC，NEU，LYM，EOS，PLT?and?CRP?in?patients?which?infected?by?influenza.?To?master?and?understand?the?influence?about?seasonal?factor?to?influenza?virus?transmission，and?in?order?to?provide?the?epidemic?foundation?for?clinical?treatment?and?disease?prevention.?Methods?The?immunochromatogragphic?assay?was?used?to?detect?the?1648?patient's?influenza?virus?antigen?from?March?2017?to?February?2018?which?were?diagnosed?and?detected?in?our?hospital.?The?data?were?analysis?using?SPSS，the?epidemiological?characteristic?and?the?factor?such?as?seasonal?and?age?were?also?analyzed.?Results Compared?with?the?normal?group，the?CRP?in?the?influenza?group?were?higher?than?the?normal?group，and?WBC，EOS，LYM，PLT?were?significantly?decrease（P<0.05）.From?2017?to?2018，the?peak?period?of?influenza?was?in?January?and?February?in?2018，and?the?mainly?type?was?influenza?B，the?other?months?were?low?epidemic?period.?Compared?with?the?influenza?virus?type?A?and?B?in?the?total?year，there?was?statistical?significance?between?them（χ2=20.615，P<0.05）.?The?influenza?virus?antigen?prevalence?in?different?age?group?were?also?showed?statistical?difference （χ2=27.174，P<0.05）.?Conclusions?The?epidemic?of?influenza?virus?is?closely?related?to?the?season.?The?types?of?influenza?in?this?region?have?a?certain?change?trend?in?different?epidemic?seasons.?Colloidal?gold?assay?for?influenza?A/B?virus?antigen?has?the?advantages?of?rapidity，simplicity，accuracy?and?non-pollution.?It?is?suitable?for?extensive?screening?in?grass-roots?hospitals. 【Key words】Immunochromatogragphic?assay?White?blood?cell?C-reactive?protein?Influenza?virus?A&?B?antigen?Seasonal?epidemics? 流行性感冒病毒（Flu）是引起全球性流行性感冒的病原体，病毒为正粘病毒科，单负股RNA病毒，通过飞沫传播［1］。人类流感病毒主要分为甲、乙、丙三种类型。对于甲型和乙型流感病毒检测具有较大临床意义，而丙型流感病毒主要侵袭婴幼儿，且以散发出现，一般不引起流行［2］。为了解近期本地区流感病毒随不同季节的流行情况，作者对1648例疑似患者进行流感病毒抗原的筛查检测，现报道如下。 1?资料与方法 1.1?临床资料?2017年3月至2018年2月本院发热 甲型和乙型流感病毒抗原快速检测结果分析 钱亚琼茅利明章海峻张利群 作者单位：312030?浙江省绍兴市中心医院 and?malignant?adnexal?masses.?J?Ovarian?Res,?2016,9(1):43. ［2］ N agy?B?Jr,?Krasznai?ZT,?Balla?H,?et?al.?Elevated?human?epididymis?protein?4?concentrations?in?chronic?kidney?disease.?Ann?Clin? Biochem,2012,49(Pt4):377-380.? ［3］ S tevens?PE,?Levin?A,?Kidney?Disease:?Improving?Global?Outcomes?Chronic?Kidney?Disease?Guideline?Development?Work?Group? Members.?Evaluation?and?management?of?chronic?kidney?disease:? synopsis?of?the?kidney?disease:?improving?global?outcomes?2012? clinical?practice?guideline.Ann?Intern?Med,2013,158(11):825-30.［4］ Gündüz?UR,?Gunaldi?M,?Isiksacan?N,?et?al.?A?new?marker?for?breast?cancer?diagnosis,?human?epididymis?protein?4:?A?preliminary? study.?Mol?Clin?Oncol,2016,5:?355-360.?［5］ F an?Q,?Luo?G,?Yi?T,?et?al.?Diagnostic?value?of?urinary?to-serum?human?epididymis?protein?4?ratio?in?ovarian?cancer.?Biomed? Rep,2017,7(1):67-72. ［6］ L evey?AS,?Stevens?LA,?Schmid?CH,?et?al.?CKD-EPI(Chronic?Kidney?Disease?Epidemiology?Collaboration):?A?new?equation? to?estimate?glomerular?filtration?rate.?Ann?Intern?Med,2009,150:? 604-612. ［7］ L v?YW,?Yang?L,?Zhang?M,?et?al.?Increased?human?epididymis?protein?4?in?benign?gynecological?diseases?complicated?with?chronic? renal?insufficiency?patients.?Genet?Mol?Res,2015,14:?2156-2161.［8］ L armour?KE,Maxwell?AP,Courtney?AE.?Improving?early?detection?of?chronic?kidney?disease.?Practitioner,2015,259(1779):?19-23,2-3. ·流行病学调查·

《流行性感冒病毒抗原检测试剂注册申报资料技术指导原则》(报批稿)

附件2： 流行性感冒病毒抗原检测试剂注册申报资料 技术审评指导原则 一、前言 本指导原则旨在指导注册申请人对流行性感冒病毒（以下简称流感病毒）抗原检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本指导原则是对流感病毒抗原检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。 二、适用范围 流感病毒抗原检测试剂是指利用胶体金法、酶联免疫法

等基于抗原抗体反应原理，以特定的流感病毒抗原为检测目标，直接对人咽拭子、呼吸道洗液、抽吸液或其他呼吸道分泌物样本中的流感病毒进行体外定性检测的试剂。 本指导原则适用于进行首次注册申报和相关许可事项变更的产品。 三、注册申报资料要求 （一）综述资料 流感病毒包括甲、乙、丙三型，甲型最容易引起流行，乙型次之，丙型极少引起流行。依据病毒颗粒外膜血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）蛋白抗原性的不同，甲型流感病毒目前可分为16个H亚型（H1-H16）和9个N亚型（N1-N9）。在甲型流感病毒中，目前已有H1、H2、H3、H5、H7和H9等亚型有人感染的报道。由于编码HA和（或）NA的核苷酸序列容易发生突变，致使HA和（或）NA的抗原表位发生改变，这种抗原性的转变使人群原有的特异性免疫力失效，故甲型流感病毒常引起较大规模甚至世界性的流感流行。按照流行特点，造成人间流感流行的流感病毒可区分为季节性流感病毒和新型甲型流感病毒。季节性流感病毒通常在年度间发生小范围的基因变异，这种基因变异会导致微小的抗原性改变，称为抗原漂移（antigenic drift），因此，季节性流感病毒虽具有年度特异性且抗原性的改变使感染者不易获得持久免疫力，但传播范围通常局限于较小的人群范围，一般

甲型流感病毒抗原检测试剂使用说明-Alere

【产品名称】 通用名称：甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法） 英文名称：Alere BinaxNOW? Influenza A＆B Card 【包装规格】 22人份/盒。 【预期用途】 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）是一种体外免疫层析试验，用于定性检测鼻咽拭子样本中的甲、乙型流感病毒核蛋白抗原，可快速地对甲、乙型流感病毒感染做出辅助鉴别诊断。 试验简介 流感是发生在呼吸道的具有高度传染性的急性病毒感染，它属于传染病范畴，可通过咳嗽或打喷嚏时排出的带有活病毒的气溶胶而在人与人之间传播。每年的秋季和冬季都可爆发流感1.甲型流感病毒的流行性比乙型流感病毒流行性要强，造成的病情也更严重，并且大多数严重的流感也都是由它引起的，而乙型流感则相对比较缓和。 针对甲、乙型流感的快速诊断试验对获取有效的抗病毒治疗是很有意义的。对流感做出快速诊断不但可减少病人住院的天数，减少抗菌素的使用，而且可减少病人的住院费用1。 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）提供了一种用鼻咽拭子标本对甲型和乙型流感进行简便快速诊断的方法，使用方便，结果快速，在急诊检验中提供的信息可帮助医生选择治疗方案并做出是否需要收住院的决定。 甲型流感病毒有许多亚型，有些亚型可在鸟类中发现3。1997年首次报道人类甲型禽流感（H5N1，主要发生于鸟类的一种流感病毒亚型），此后，在人群中出现了H5N1病例，使人们对H5N1关注起来，H5N1的变异使得它更易在人群间传播4，由于备案的禽流感感染病人比例很低，快速试验在该类病人治疗中利用度尚不得知。 【检验原理】 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用的是薄膜免疫层析技术，它利用具有高度敏感性的单克隆抗体来检测鼻咽拭子标本中的甲型和乙型流感病毒的核蛋白抗原这些单克隆抗体连同一种对照抗体分别被固定到膜支持物上，形成三条独特的线。膜支持物跟其他试剂/垫结合在一起构成检测条。检测条位于一个称作检测卡的书型铰链状的纸板中。 拭子标本需要进行预处理：用洗脱液、盐水或转移介质等将标本从拭子中洗脱出来，将标本加到检测条顶端，闭合检测卡，15分钟时根据是否出现紫红色样品线来报告结果。在有效试验中，蓝色对照线变为粉红色。 【主要组成成分】 提供的材料 1.检测卡：22人份。包含对甲型流感病毒核蛋白抗原具有高度特异性的单克隆抗体、结合