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有机化学实验教案--6.柱色谱分离实验

重庆工业职业技术学院教案

有机化学实验教案--6.柱色谱分离实验

有机化学实验教案--6.柱色谱分离实验

由于甲基橙和亚甲基蓝的结构不同,极性不同,吸附剂对它们的吸附能力不同,洗脱剂对它们的解析速度也不同,极性小、吸附能力弱、解析速度快的亚甲基蓝先被洗脱下来,而极性大、吸附能力强、解析速度慢的甲基橙后被洗脱下来,从而使两种物质得以分离。本实验以硅胶为吸附剂,95%乙醇作为洗脱剂,先洗出亚甲基蓝,再用蒸馏水作洗脱剂把甲基橙洗脱下来。

有机化学实验教案--6.柱色谱分离实验

甲基橙结构式

有机化学实验教案--6.柱色谱分离实验

亚甲基蓝结构式

二、实验操作

1.仪器

锥形瓶、玻璃漏斗、色谱柱

2.试剂

柱层析硅胶、脱脂棉、乙醇(95%)甲基橙、亚甲基蓝。

H2O∶ 95 %乙醇 = 1∶ 1 (A 液)

0. 2mol· L -1HCl∶ 95 %乙醇 = 1∶ 1 (B 液)

3、装色谱柱:

(1)取一支色谱柱,在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花将色谱柱垂直固定在铁架台上。

(2) 关闭活塞,向柱中倒入蒸馏水(也是洗脱剂,至柱体积的1/2)(3)填吸附剂:称取10g 硅胶于小烧杯中 ,加入 15mL 蒸馏水 ,用玻璃棒调好通过漏斗慢慢装入玻璃柱, 使其逐渐沉入底部。用洗耳球敲打柱身使硅胶装填紧密,打开活塞,用小锥型瓶承接, 控制滴速为1 滴/秒,装完后在上面加一层脱脂棉(,操作时要注意吸附剂始终不能露出液面)。

4、加样:

当液面刚好流至脱脂棉平面相切时,立刻关闭活塞,加入 5mL左右的A 液 ,当硅胶面又将要露出时 ,关紧活塞 ,用量筒准确加入 0. 50mL 以 A 液做溶剂的混合液(含甲基橙和亚甲基蓝各为 0. 400 g· L -1)

5、洗脱:

待此混合液将要渗入柱内时 ,立即用 A 液洗脱 ,此时可以观察到有鲜明的黄、蓝两条色带形成。黄色的甲基橙色带随洗脱剂的加入不断下移 ,而其顶部蓝色带不移动 ,当黄色带到达柱底部时 ,更换接受器 ,全部收集此黄色

带 ,洗脱时间约 10 min。此后改用B 液做洗脱剂 ,这时可看到蓝色带开始下移 ,当亚甲基蓝色带到达底部时 ,更换接受器 ,全部收集此蓝色带 ,洗脱时间约 30 min。

完成实验报告

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