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植物(Plant)过氧化氢(H2O2)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断

植物(Plant)过氧化氢(H2O2)ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被过氧化氢(H2O2)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。

3.植物萃取液或其它相关样本:请1000x g离心20分钟,取上清即可检测。

4.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

名称96孔配置48孔配置备注

微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无

标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无

样本稀释液6mL3mL无

检测抗体-HRP10mL5mL无

20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无

底物B6mL3mL无

终止液6mL3mL无

封板膜2张2张无

说明书1份1份无

自封袋1个1个无

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、5、10、20、40、80μmol/L

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2.灵敏度:最低检测浓度小于1.0μmol/L。

3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.有效期:6个月

免责声明

1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

FOR RESEARCH USE ONLY.

NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.

Plant hydrogen peroxide(H2O2)ELISA Kit

instruction

Intended use

This H2O2ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of H2O2in the sample, this H2O2ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus H2O2concentration.The concentration of H2O2in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.

Sample collection and storages

1.Can’t detect the samples which contain NaN3,because NaN3inhibits HRP

activity of the horseradish peroxidase.

2.Extract as soon as possible after Specimen collection,Extracted according to the relevant literature.

Cell culture supernates and plant exact fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20°C or

-80°C.Avoid repeated freeze-thaw.

Materials required but not supplied

1.Standard microplate reader(450nm)

2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.

3.37℃incubator

Precautions

1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and

microplates are matched for optimal https://www.wendangku.net/doc/554351041.html,e only the reagents supplied by

manufacturer.

2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips

should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.

3.Mix all reagents before using.

Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature

(20-25°C)

Materials supplied

Name96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4strips

Standard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubes

Sample Diluent 6.0ml 3.0ml

HRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml

20X Wash solution25ml15ml

Chromogen Solution A 6.0ml 3.0ml

Chromogen Solution B 6.0ml 3.0ml

Stop Solution 6.0ml 3.0ml

Closure plate membrane22

User manual11

Sealed bags11

Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,5,10,20,40,80μmol/L Reagent preparation

20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.

Assay procedure

1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.

2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.

3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.

4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.

5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or https://www.wendangku.net/doc/554351041.html,plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.

6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.

7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.

8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.

Calculation of results

1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.

The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.

values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result

interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical

software.

3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on the

Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of

intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding

concentration.

4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time or

temperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain

their own standard curve.

5.The sensitivity by this assay is1.0μmol/L

6.Standard curve

Storage:2-8℃.

validity:six months.

FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR

DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGH

ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!

汽化过氧化氢验证方案

C-0303 ZW-HP020型汽化过氧化氢灭菌传递窗验证报告 第二条验证目的与验证范围 2.1验证目的 通过DQ、IQ、QQ、PQ确认证明经汽化过氧化氢灭菌传递窗灭菌原料桶后的原料桶符合生产工艺及GMP(2010修订版)要求。 设计确认DQ:检查并确认设备设计与制造工艺符合产品标准,满足用户需求(URS)和GMP要求。 安装确认IQ:检查并确认该设备的安装符合设计要求,资料和文件符合GMP要求。 运行确认OQ;检查并确认该设备的运行符合设计技术参数的要求。 性能确认PQ:检查并确认该设备的运行符合生产工艺要求,其对原料桶灭菌应符合无菌生产工艺要求。 2.2验证范围 本报告适用于粉针车间生产线的汽化过氧化氢灭菌传递窗灭菌验证。 第三条验证性质 本次确认的主要内容是设计确认、安装确认、运行确认、性能确认等,本次验证为首次验证。 第四条设备概况 4.1设备概况 4.1.1传递窗是一种洁净室的辅助设备,主要用于洁净区与洁净区之间,洁净区与非洁净区之间物料的传递,以减少洁净室的开门次数,使洁净室的污染降低到最低程度。 4.1.2汽化过氧化氢灭菌,是利用过氧化氢在常温下气体状态比液体状态更具杀孢子能力的优点,经生成游离的氢氧基,用于进攻细胞成分,包括脂类、蛋白质和DNA组织,达到完全灭菌的要求。 汽化过氧化氢灭菌器(VHPS)是将浓度为30%或50%的H 2O 2 溶液(双氧水)通过汽化器 汽化成过氧化氢蒸汽,并通过管道输入到密闭空间内(灭菌柜)进行消毒灭菌的设备,其主要技术特点是: ·低温灭菌过程,可在4~80℃范围内进行灭菌; ·残留物最少,过氧化氢最终分解产物为水蒸气与氧气,没有毒副产品,是一种环保型灭菌技术,且不需要清洗; ·快速的灭菌循环过程,运行成本低,也容易验证;

(完整版)实验40植物组织中过氧化氢含量及过氧化氢酶活性测定

实验40 植物组织中过氧化氢含量及过氧化氢酶活性测定 植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除H2O2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。本实验用分光光度法测定过氧化氢含量,利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。 一、过氧化氢含量的测定 【原理】 H2O2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀,可被H2SO4溶解后,在415nm波长下比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。 【仪器和用具】 研钵;移液管0.2ml×2支,5ml×1支;容量瓶10ml×7个,离心管5ml×8支;离心机;分光光度计。 【试剂】 100μmol/L H2O2丙酮试剂:取30%分析纯H2O257μl,溶于100ml,再稀释100倍;2mol/L硫酸;5%(W/V)硫酸钛;丙酮;浓氨水。 【方法】 1.制作标准曲线:取10ml离心管7支,顺序编号,并按表40-1加入试剂。 待沉淀完全溶解后,将其小心转入10ml容量瓶中,并用蒸馏水少量多次冲洗离心管,将洗涤液合并后定容至10ml刻度,415nm波长下比色。 2.样品提取和测定:(1)称取新鲜植物组织2~5g(视H2O2含量多少而定),按材料与提取剂1∶1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后,转入离心管3000 r/min 下离心10min,弃去残渣,上清液即为样品提取液。(2)用移液管吸取样品提取液1ml,按表35-1加入5%硫酸钛和浓氨水,待沉淀形成后3000rpm/min离心10min,弃去上清液。沉淀用丙酮反复洗涤3~5次,直到去除植物色素。(3)向洗涤后的沉淀中加入2mol硫酸5ml,待完全溶解后,与标准曲线同样的方法定容并比色。 3.结果计算:

植物组织过氧化氢含量的测定

植物组织过氧化氢含量 的测定 Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】

配制100ml 、100umol/L 的过氧化氢溶液需要多少30%的过氧化氢原液请写出计算过程。答:首先计算其摩尔浓度: 若30%为其质量百分数 双氧水30%浓度的试剂(上海国药集团出品),室温时实测密度为:1,122g/L,所以,1L 30%含量的双氧水中过氧化氢含量为:1122g/L ×1L×30%=337g 又H2O2的分子量为,那么1L 30%含量的双氧水中过氧化氢浓度为:337/= mol/L. 100ml×10-3×100umol/L×10-6=mol/L×V V=10-6L=1 ul 若30%为体积分数 100% H2O2密度是1,440 g/L, 30 ml H2O2的质量为1440 g/L ×30 ml×10-3=,30%含量的双氧水中过氧化氢浓度为:= mol/L. 100ml×10-3×100umol/L×10-6=mol/L×V V=×10-7L= ul 植物组织中过氧化氢含量测定 植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除H2O2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。本实验用分光光度法测定过氧化氢含量,利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。 【原理】 H2O2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀,可被H2SO4溶解后,在415nm波长下比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180 ng/ml,90 ng/ml,45 ng/ml,22.5 ng/ml,11.25 ng/ml, 5.63 ng/ml,2.82 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml。 4. 检测稀释液A:1×10ml。 5. 检测稀释液B:1×10ml。 6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张 12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管 3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

VHP气化过氧化氢灭菌系统

VHP气化过氧化氢灭菌系统 ? 名称:气化过氧化氢灭菌机 低温灭菌工艺(4-80°C) 蒸熏完成,残留物很少(不需再次清洁) 蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) 对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) 环保(健康& 安全) 对高效过滤器穿透性好(玻璃纤维) 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好灭菌所需时间短,节约成本(停机时间短) ?详细介绍 VHP Concept 概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢(H2O2) 俗称双氧水 过氧化氢常态为液态 经过加热变成气态 VHP 历史沿革 ?1980年代末,美国Sterilse Co 首先发现气体过氧

化氢相对于液态过氧化氢,仅需较低浓度即可达到同样灭菌效果 ?1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核准,作为灭菌剂,并很快在各个工业领域运用。 VHP 灭菌原理 ? 过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好 ? 过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基,破坏细胞膜。 VHP 液态和气态比较

?达到同样杀菌效果,液态的浓度是气态的300倍 ??芽孢耐热 ??在疏水性和亲水性表面的作用 VHP 技术特点 ? 低温灭菌工艺(4-80°C) ? 在蒸熏程序完成,残留物很少(不需再次清洁) ? 蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) ?对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) ? VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) ? 环保(健康& 安全) ? 对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) ? 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生 物灭菌效果很好 ? 灭菌所需时间短 ? 节约成本(停机时间短) VHP 各类型灭菌方式比较

过氧化氢含量的测定_实验报告

实验一过氧化氢含量的测定(高锰酸钾法) 一、实验目的 (1)掌握高锰酸钾法测定过氧化氢含量的原理、滴定条件和操作步骤; (2)掌握移液管及容量瓶的正确使用方法,熟悉液体样品的取样和稀释操作。 二、实验原理 (1)由于在酸性溶液中,KMnO 4的氧化性比H 2 O 2 的氧化性强,所以,测定H 2 O 2 的 含量时,常采用在稀硫酸溶液中,室温条件下用高锰酸钾法测定。其反应为: 5H 2O 2 +2MnO 4 -+6H+=2Mn2++8H 2 O+5O 2 % 100 01701 .0 % 2 2 ? ? ? = M V C O H 实验室用Na 2C 2 O 4 标定KMnO 4 溶液, KMnO4溶液在热得酸性溶液中进行,反应如下: 2KMnO 4?+5H 2 C 2 O 4 +6H+=2Mn2++10CO 2 +8H2O C(KMnO 4)=2m(Na 2 C 2 O 4 )/5M(KMnO 4 )V(KMnO 4 ) 开始反应缓慢,第1滴溶液滴入后不易褪色,待产生Mn2+后,由于Mn2+的催化作用,加快了反应速率,故滴定速度也应加快,直至溶液呈微红色且半分钟内不退色,即为终点。根据高锰酸钾浓度和滴定中消耗KMnO 4 的体积,按下式计算过氧化氢的含量: 式中p(H 2O 2 )——稀释后的H 2 O 2 质量浓度,g/L。 三、仪器与试剂 仪器:移液管(25ml),吸量管(10ml),洗耳球,容量瓶(250ml),酸式滴定管(50ml). 试剂:工业H 2O 2 样品,KMnO 4 L)标准溶液,H 2 SO 4 (3mol/L)溶液。 四、实验步骤 的KMnO 4 标准溶液的配置及标定 (1)LKMnO 4 标准溶液的配制 ~固体,置于500ml烧杯中,加入400ml蒸馏水→表面皿,煮沸20~30min→→冷却后倒入棕色瓶,加水稀释至500ml,摇匀,静置7~10d→→→上清液砂芯漏斗过滤→洗净试剂瓶,滤液倒进试剂瓶,贴上标签,待标定 KMnO 4 标准溶液的标定 (2)准确称取~基准物Na 2C 2 O 4, 置于250ml锥形瓶中→→→→ 40ml蒸馏水,15ml H 2SO 4 (3mol/L),水浴至蒸汽冒出→ 趁热标定,开始速度慢点,随后可适当加快但不能使溶液连续流下,紫红色快褪 去时速度再次减慢→→ 最后加半滴KMnO 4 标准溶液,在摇匀后30s内保持红色不退去,表明到达终点。记 下KMnO 4 标准溶液的体积。 平行滴定三次 2.H 2O 2 的含量测定 用吸量管吸取10mlH 2O 2 样品(约为3%),置于250ml容量瓶中,加水稀释至标 线,混合物均匀。用移液管准确移取过氧化氢稀释液三份,分别置于三个250ml 锥形瓶中,各加5mlH 2SO 4 (3mol/L),用高锰酸钾标准溶液滴定。开始反应缓慢, 待第一滴高锰酸钾溶液完全褪色后,再加入第二滴,随着反应速度的加快,可逐渐增加滴定速度,直到溶液呈为微红色且半分钟内不退色,即为终点。计算未经稀释样品中的含量。 五、实验记录与处理

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被瘦素(LEP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

汽化过氧化氢与过氧化氢干雾对比

A Head-to-Head Comparison of Hydrogen Peroxide Vapor and Aerosol Room Decontamination Systems 汽化过氧化氢与干雾灭菌系统比较 T. Holmdahl, MD,1 P. Lanbeck, MD, PhD,1 M. Wullt, MD, PhD,1 and M. H. Walder, MD, PhD2 1. Infectious Diseases Unit, Department of Clinical Sciences, Lund University, Malm?, Sweden 瑞典伦德大学临床科学系传染疾病组 2. Medical Microbiology, Department of Laboratory Medicine, Lund University, Sk?ne University Hospital SUS, Malm?, Sweden 瑞典伦德大学医学检验系微生物医学组,瑞典马尔默斯堪大学医院 Address correspondence to M. H. Walder, MD, PhD, Klinisk Mikrobiologi Malm?, Laboratoriemedicin Sk?ne, SE-20502 Malm?, Sweden (mats.walder@med.lu.se). New technologies have emerged in recent years for the disinfection of hospital rooms and equipment that may not be disinfected adequately using conventional methods. There are several hydrogen peroxide–based area decontamination technologies on the market, but no head-to-head studies have been performed.Objective. 研究目的:最近几年,一些新兴技术被用来对医院的房间和传统灭菌方法无法充分灭菌的设备进行灭菌。市场上有几种基于过氧化的区域灭菌技术,但尚没有任何研究来对这些技术进行一一对比。 We conducted a head-to-head in vitro comparison of a hydrogen peroxide vapor (HYDROGEN PEROXIDE VAPOUR) system and an aerosolized hydrogen peroxide (aHP) system. 研究设计:因此,我们对汽化过氧化氢技术(HYDROGEN PEROXIDE VAPOUR)和过氧化氢干雾扩散技术(aHP)进行了一一对比. The tests were conducted in a purpose-built 136-m3 test room. 场地:特意建造一个136立方米试验间进行试验 One HYDROGEN PEROXIDE VAPOUR generator and 2 aHP machines were used, following recommendations of the manufacturers. Three repeated tests were performed for each system. The microbiological efficacy of the 2 systems was tested using 6-log Tyvek-pouched Methods. Geobacillus stearothermophilus biological indicators (BIs). The indicators were placed at 20 locations in the first test and 14 locations in the subsequent 2 tests for each system. 测试方法:根据厂商建议,试验中使用一台过氧化氢发生器和2台过氧化氢干雾扩散器。每种技术重复实验三次。用特卫强包装的6-log 嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂来检验对于微生物的效力。第一轮测试中,生物指示剂(BIs)放置在20个位置;随后的两轮测试均放置于14个位置。

VHP气化过氧化氢灭菌系统

?VHP气化过氧化氢灭菌系统 名称:气化过氧化氢灭菌机 低温灭菌工艺(4-80°C) 蒸熏完成,残留物很少(不需再次清洁) 蒸熏后无有毒副产品 (健康 & 安全) 对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) VHP 工艺十分容易验证 (符合法规要求, 工艺控制) 环保 (健康 & 安全) 对高效过滤器穿透性好 (玻璃纤维) 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好灭菌所需时间短 ,节约成本 (停机时间短) 详细介绍

VHP Concept 概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢(H2O2) 俗称双氧水 过氧化氢常态为液态 经过加热变成气态 VHP 历史沿革 ?1980年代末,美国Sterilse Co 首先发现气体过氧化氢相对于液态过氧化氢,仅需较低浓度即可达到同样灭菌效果 ?1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核准,作 为灭菌剂,并很快在各个工业领域运用。 VHP 灭菌原理 ?过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好 ?过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基,破坏细胞膜。

VHP 液态和气态比较 ?达到同样杀菌效果,液态的浓度是气态的300倍?芽孢耐热 ?在疏水性和亲水性表面的作用 VHP 技术特点

?低温灭菌工艺(4-80°C) ?在蒸熏程序完成,残留物很少(不需再次清洁) ?蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) ?对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等)? VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) ?环保(健康& 安全) ?对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) ?在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好 ?灭菌所需时间短 ?节约成本(停机时间短) VHP 各类型灭菌方式比较 VHP 各类型灭菌方式比较-甲醛使用现状Formaldehyde Issues and concerns 关于甲醛的争论和忧虑

(完整word版)过氧化氢的测定

Fenton体系下过氧化氢的测定 一、反应体系中双氧水测定方法的建立 体系中双氧水的测定主要采用高锰酸钾法和碘量法,碘量法检出限较高、操作繁琐,高锰酸钾法是较常规的分析方法,操作简单且准确性高,但在Fenton氧化体系中,由于可被高锰酸钾氧化的亚铁离子和有机物的存在,测定结果往往偏高。因此,本实验采用了已有报道的钛盐光度法测定Fenton体系氧化过程中的过氧化氢含量。 钛盐光度法测定过氧化氢的原理是过氧化氢与钛离子在酸性溶液中形成稳定橙色络合物—过钛酸(pertitanic acid),此络合物颜色的深浅与样品中过氧化氢的含量成正比。姜成春等在蒸馏水体系、含有机物体系及Fenton高级氧化体系中,对高锰酸钾法、碘量法和钛盐光度法测定过氧化氢的结果进行对比分析,得出可见钛盐光度法测定过氧化氢具有较高的灵敏度,而且检测限较低,有利于低浓度过氧化氢的测定,避免了氧化还原法测定低浓度过氧化氢通过终点颜色判断所带来的误差。 二、钛盐光度法测定过氧化氢方法的建立: 仪器及实验药品: 1、DR2800;哈希管; 2、药品:100mg/l过氧化氢;3mol/l硫酸溶液;0.05mol/l 草酸钛钾溶液; 三、测定波长为400nm 四、标准曲线的测定:

分别取已配置好的双氧水标准溶液(100mg/L)已用高锰酸钾法标定,取0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2ml于哈希管中,分别加入0.5ml 的3.0mol/l硫酸溶液和0.05mol/l草酸钛钾溶液,再加入适量纯水至5ml。放置10min,在400nm波长下,以试剂空白作参比,测定其吸光度。 Fenton氧化体系中双氧水的测定:将反应结束后的一定量的待测溶液加入哈希管中,分别加入0.5ml的3.0mol/L硫酸溶液和0.05mol /L草酸钛钾溶液,定量至5ml并摇匀后放置10min,在400nm波长下,以试剂空白作参比,测定其吸光度。根据所测吸光度于标准曲线上查的双氧水的含量。 五、条件的确定 在做标线之前分别考虑了硫酸和草酸钛钾用量的影响,通过做的结果发现,在过氧化氢量一定的条件下,3mol/l硫酸和0.05mol/l草酸钛钾用量都在0.5ml时测定吸光度最大,用量低于0.5ml和高于0.5ml,其吸光度都相对降低,在0.5ml时,其吸光度是最大的。所以对于本实验硫酸和草酸钛钾用量都是0.5ml。 六、过氧化氢100mg/l的标线如下: 过氧化氢浓度(mg/l) 4 8 12 16 20 24 吸光度0.154 0.31 0.456 0.61 0.776 0.927

植物过氧化氢(H2O2)说明书

植物过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞上清及相关液体样本中过氧化氢(H2O2)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢(H2O2)水平。用纯化的植物过氧化氢(H2O2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢(H2O2),再与HRP标记的过氧化氢(H2O2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢(H2O2)浓度。 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤: 1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标 准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为30 ng/L,20 ng/L,10 ng/L,5 ng/L, 2.5 ng/L)。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

VHP气化过氧化氢灭菌系统方案

VHP气化过氧化氢灭菌系统 名称:气化过氧化氢灭菌机 低温灭菌工艺(4-80°C) 蒸熏完成,残留物很少(不需再次清洁) 蒸熏后无有毒副产品 (健康 & 安全) 对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) VHP 工艺十分容易验证 (符合法规要求, 工艺控制) 环保 (健康 & 安全) 对高效过滤器穿透性好 (玻璃纤维) 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好灭菌所需时间短 ,节约成本 (停机时间短) 详细介绍 VHP Concept 概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢(H2O2) 俗称双氧水 过氧化氢常态为液态 经过加热变成气态 VHP 历史沿革 ?1980年代末,美国Sterilse Co 首先发现气体过氧 化氢相对于液态过氧化氢,仅需较低浓度即可达到 同样灭菌效果 ?1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核准,作

为灭菌剂,并很快在各个工业领域运用。 VHP 灭菌原理 ?过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好 ?过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基,破坏细胞膜。 VHP 液态和气态比较 ?达到同样杀菌效果,液态的浓度是气态的300倍

?芽孢耐热 ?在疏水性和亲水性表面的作用 VHP 技术特点 ?低温灭菌工艺(4-80°C) ?在蒸熏程序完成,残留物很少(不需再次清洁) ?蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) ?对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等)? VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) ?环保(健康& 安全) ?对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) ?在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好 ?灭菌所需时间短 ?节约成本(停机时间短) VHP 各类型灭菌方式比较 VHP 各类型灭菌方式比较-甲醛使用现状 Formaldehyde Issues and concerns 关于甲醛的争论和忧虑 ?气体是由甲醛溶液或福马林加热形成 ?作用慢,需要长蒸熏时间 ?结晶状残留物 ?未有出版物证明灭菌前后的效果有效 ?十分难验证灭菌程序 ?蒸熏时人员必须撤离(停机时间长) ?剧毒且被归类为‘Class A’ 致癌和导致细

过氧化氢的检测方法(适用范围、分析步骤)

化妆品中过氧化氢的检测方法 1、适用范围 本方法规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中过氧化氢(CAS:7722-84-1)含量的方法。 本方法适用于染发剂、膏状面膜中过氧化氢含量的测定。 2、方法提要 试样采用水浸提,部分上清液与三苯基膦衍生反应,衍生溶液经滤膜过滤,用液相色谱分离,紫外检测器检测,峰面积定量,以标准曲线法计算含量,得到样品中过氧化氢的含量。本方法对过氧化氢的检出限为0.0012μg,定量下限为0.004μg。若取0.2g样品,过氧化氢的最低检出浓度为60μg/g,最低定量浓度为200μg/g。 3、试剂和溶液 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为一级实验用水。 3.1乙腈,色谱纯。 3.2三苯基膦溶液,称取三苯基膦1.3g,用乙腈(3.1)溶解,定容至25mL,浓度为0.2mol/L,现用现配。 3.3氧化三苯基膦溶液,称取氧化三苯基膦0.0003g,用乙腈(3.1)溶解,定容至100mL,浓度为0.00001mol/L。 3.4过氧化氢,浓度为3%,使用前需要进行标定,标定方法见附录。 3.5过氧化氢标准储备液:称取标定过的过氧化氢对照品(3.4)1.5g,精确到0.0001g,置于25mL棕色容量瓶中,用水定容,摇匀,配制成质量浓度为1.8mg/mL的标准储备溶液。 3.6过氧化氢标准工作液:配制浓度分别为3.6mg/L、9.0mg/L、18mg/L、36mg/L、54mg/L、90mg/L、180mg/L的标准工作液。 4、仪器和设备 4.1高效液相色谱仪:具有二极管阵列检测器。 4.2涡旋振荡器。 4.3分析天平:感量0.0001g。 4.4分析天平:感量0.001g。 5、分析步骤 5.1样液的制备 5.1.1样品前处理 称取样品约0.05g~0.2g(精确至0.001g),含过氧化氢3%以下称取0.2g,含过氧化氢3%~6%称取0.1g,含过氧化氢6%~12%称取0.05g,置于100mL容量瓶中,加入约50mL 水,振摇至样品完全溶解,用水定容,摇匀备用。面膜等半固体样品可以称取样品于50mL 烧杯,加入约20mL,用玻璃棒将样品搅碎,用水转移至100mL容量瓶中,定容,摇匀备用。 5.1.2衍生化反应 分别移取过氧化氢标准工作液(3.6)和样液(5.1.1)各1mL于10mL棕色容量瓶中,加入1mL三苯基膦乙腈溶液(3.2),振摇,继续加入5mL乙腈(3.1),振摇,用水定容,摇匀。置于暗处室温反应30min。 5.2测定

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)-ELISA试剂盒说明书

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号:E-EL-M0314 (本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!) 声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Col I浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 *: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)

检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Col I抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Col I会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Col I抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Col I抗体与结合在包被抗体上的小鼠Col I结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Col I浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Col I的浓度。 标本收集: 1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂标本。 3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。 4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5.其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 (具体处理方法可参考:https://www.wendangku.net/doc/554351041.html,/news2.asp?tid=477 ) 6.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 7.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融, 1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做 预实验,以确定稀释倍数)。 试验所需自备物品: 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 3.37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.吸水纸

汽化过氧化氢(VHP)灭菌技术

汽化过氧化氢(VHP)灭菌技术 汽化过氧化氢(VHP )灭菌技术: Vaporized Hydrogen Peroxide (VHP) 即汽化过氧化氢。20世纪80年代末期,美国思泰瑞(STERIS)集团研究发现过氧化氢在低浓度的气体状态下比在液体状态下具有更高的杀孢子能力,主要原理是生成游离的氢氧基,用于进攻细胞成分,包括脂类,蛋白质和DNA.。实验证明汽化状态的双氧水,750 ~2000ppm 浓度的汽化双氧水灭菌效果等同于300000ppm浓度的液态双氧水,低浓度灭菌也相应降低了接触表面材质的要求。 技术优点: ?对微生物有广谱杀菌作用,适用于真菌、细菌、病毒和芽孢的消毒; ?低温操作,一般室温即可; ?在灭菌过程结束后,汽化双氧水极易被还原成水和氧气,与其他灭菌方式相比无危害性的残留物,对操作人员及环境没有危害; ?过氧化氢气体具有极好的物料兼容性(装置,电子元件,和建筑材料), ?灭菌工艺自动化控制;已经验证,灭菌工艺重复性好。 ?有专门的化学指示剂和生物指示剂验证VHP气体分布均匀情况和无菌保证水平。 应用: ?VHP技术在生物技术和制药行业得到广泛的认可,其中可使用到很多方面: ?隔离器 ?传递间和传递窗 ?洁净室 ?鸡蛋外表面 ?容器表面

?等等 产品型号: 1.移动型过氧化氢发生器: 移动型VHP发生器是一种密闭的回路系统,一种35% H2O2(过氧化氢灭菌剂)的水溶液经过蒸发后,与加热的空气一起被注入密闭空间,通过一个还原转化器,降解VHP抗菌剂成为氧气和水蒸汽。 适用于无菌隔离器、传递间和传递窗以及设备表面的灭菌,整个循环包括:除湿、调节、灭菌和排风四个阶段。 2.整合VHP技术的传递室: 此传递室设计用于生产中需要传递的各种清洁和干燥物品的硬表面例如:仪器、包装材料外包、原料药品包装外表面、机器零件等表面进行汽化过氧化氢低温灭菌处理。 工作原理: 灭菌器为传递室提供低温的VHP灭菌方法,一种35% H2O2(过氧化氢灭菌剂)的水溶液经过蒸发后,与加热的空气一起被注入传递室,通过一个还原转化器,降解VHP抗菌剂成为氧气和水蒸汽。灭菌过程完成后,传递室中残留的过氧化氢气体经过处理达到1PPM的安全浓度后取出物品。 主要配置: 整个系统包括灭菌器系统、传递室和西门子PLC控制系统组成。传递室的大小可以根据客户的要求进行定制,并包括以下标准配置: ?腔体由316L不锈钢制成,内部抛光、焊接和圆角处理符合GMP的要求。 ?装载端和卸载端都配有彩色触摸屏。 ?腔体内设计带有挡板用于协助VHP气体分布均匀。

双氧水中过氧化氢含量的测定_高锰酸钾法

双氧水中过氧化氢含量的测定_高锰酸钾法实验十四过氧化氢含量的测定—高锰酸钾法 【目的要求】 1.掌握高锰酸钾标准溶液的配制和标定方法。 2.学习高锰酸钾法测定过氧化氢含量的方法。 【实验原理】 HO是医药、卫生行业上广泛使用的消毒剂,它在酸性溶液中能被KMnO定量氧化而224生成氧气和水,其反应如下: +2+-5HO+2MnO+6H=2Mn+8HO+5O22422 滴定在酸性溶液中进行,反应时锰的氧化数由+7变到+2。开始时反应速度慢,滴入的2+2+KMnO溶液褪色缓慢,待Mn生成后,由于Mn的催化作用加快了反应速度。 4 生物化学中,也常利用此法间接测定过氧化氢酶的活性。在血液中加入一定量的HO,22由于过氧化氢酶能使过氧化氢分解,作用完后,在酸性条件下用标准KMnO溶液滴定剩余4的HO,就可以了解酶的活性。 22 【仪器试剂】 3台秤(0.1g)、天平(0.1mg),试剂瓶(棕色),酸式滴定管(棕色,50cm),锥形瓶333-3(250cm),移液管(10cm、25cm);HSO(3 mol?dm), KMnO(s), NaCO(s,AR.),244224双氧水样品(工业)。 【实验步骤】 -31. KMnO溶液(0.02 mol?dm)的配制 43称取1.7g 左右的KMnO放入烧杯中,加水500cm,使其溶解后,转入棕色试剂瓶中。4 放置7-10天后,用玻璃砂芯漏斗过滤。残渣和沉淀则倒掉。把试剂瓶洗净,将滤液倒回瓶内,待标定。

2. KMnO溶液的标定 43精确称取0.15~0.20g预先干燥过的NaCO三份,分别置于250cm锥形瓶中,各加入22433-340cm蒸馏水和10cm3 mol?dm HSO,水浴上加热直约75-85?。趁热用待标定的KMnO244溶液进行滴定,开始时,滴定速度宜慢,在第一滴KMnO溶液滴入后,不断摇动溶液,当42+紫红色退去后再滴入第二滴。溶液中有Mn产生后,滴定速度可适当加快,近终点时,紫红色褪去很慢,应减慢滴定速度,同时充分摇动溶液。当溶液呈现微红色并在半分钟不褪色,即为终点。计算KMnO溶液的浓度。滴定过程要保持温度不低于60?。 4 3. HO含量的测定: 2233用移液管吸取5.00cm 双氧水样品(HO含量约5%),置于250cm容量瓶中,加水稀22 释至标线,混合均匀。 333-3吸取25cm上述稀释液三份,分别置于三个 250cm锥形瓶中,各加入5cm3 mol?dm HSO,用KMnO标准溶液滴定之。计算样品中HO的含量。 24422 四、实验记录与数据处理 KMnO标准溶液浓度(mol/L) 4 混合液体积(ml) 2.00 2.00 2.00 滴定初始读数(ml) 第一终点读数(ml) V(ml) 平均V(ml) C(g/L) H2O2 【思考题】 1. 用KMnO滴定法测定双氧水中HO的含量,为什么要在酸性条件下进行?能否用HNO4223或HCl代替HSO调节溶液的酸度? 24 2. 用KMnO溶液滴定双氧水时,溶液能否加热?为什么? 4

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