水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导

一、实验目的

1、掌握外植体的消毒方法和接种技术；

2、了解愈伤组织诱导的过程。

二、实验原理

以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。愈伤再经分化培养，通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。

外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用；对于多茸毛表面粗糙不平的材料，要加展著剂（吐温20）以增强消毒效果。

三、实验材料与用具

1、材料：水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）；

2、试剂：75%酒精，2% NaCLO，无菌水(每组1瓶400mL)；

3、培养基：诱导培养基：NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L（pH5.8）；

4、仪器设备：培养室、超净工作台、培养皿（￠9cm）2个、枪形镊、量筒（100mL）2个、三角瓶（50mL、无菌）2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。

四、实验步骤

1、接种室、培养基及用具表面消毒

用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子，将培养基及用具放工作台，打开紫外灯，照射20分钟以表面消毒。之后关紫外灯，打开工作台风机，通风30分钟后可进行无菌操作。

2、种子去壳

选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子，手工脱去谷壳（注意保持胚完整），每人准备30粒去壳种子，并按照分组放到三角瓶中。

3、操作者双手的清洗与消毒

在进入无菌室之前，各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干，然后进入无菌室，坐在超净台前位子上后，用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒，在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。（注意：酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上！）

4、超净台面的表面消毒（以下工作在超净工作台内进行）

用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球，仔细把整个超净台面擦试一遍，尽量降低超净台面的带菌量，并将废棉球丢到废液缸中，然后点亮超净台里面放置的酒精灯。

5、外植体消毒（分组操作，每组由一位代表操作完成外植体的消毒工作） 将脱谷壳米粒转到一50mL 无菌三角瓶→加适量无菌水洗一次（以没过种子为准，下同）→弃水，倒入75%酒精适量，摇动搅拌，放置30秒（过程中适当轻摇动混匀）→弃酒精→加适量无菌水洗一次→弃水→倒入适量2% NaCLO ，不时摇动搅拌，共处理30分钟→弃NaCLO →用无菌水洗3次，每次停留1分钟→倒去无菌水，将种子从三角瓶转到带无菌滤纸的无菌培养皿中吸干。

6、接种与观察

将吸干的消毒种子用无菌的镊子接入培养基并均匀放置，每皿接10粒，每人共接种2皿。接种完成后，将培养皿盖上并用保鲜膜封口，然后将接种有材料的培养皿移出超净台，贴上标签写明日期、接种人，按照班级统一放入一篮子，再将篮子放入培养室进行25℃暗培养。注意每隔2-3天前来观察一次实验现象，1周后调查计算污染率，14天后调查计算愈伤组织诱导率。

五、实验结果

本次实验我组未出现被污染的种子，污染率均为0 。说明实验过程中，我组成员操作规范，保证所接种的种子均不受到污染。

最后，我组的2个培养皿分别可以诱导出7和8株水稻苗，诱导率分别为70%

×100%

形成愈伤组织的种子数

污染率(%)= ×100% 污染的种子数 接种的总种子数

诱导率 (%)= 接种的总种子数

和80% 。

六、讨论与分析

1、本实验出现污染的原因分析。

1）外植体消毒不彻底，表面有较多微生物残留；

2）实验用具如镊子等消毒不彻底，在操作过程中把微生物带到种子上，污染种子；

3）实验前，超净工作台没有充分消毒，台内（主要是空气中）还残留有较多微生物；

4）培养皿密封措施做得不好，致使培养期间有微生物进入到培养皿中，并生长繁殖。

2、降低实验中的污染率的方法。

1）外植体、实验用具、超净工作台均需彻底消毒；

2）做好密封措施；

3）操作时勿离酒精灯太远；

4）尽量缩短操作时间；

5）定时更换消毒液（75%酒精、2% NaCLO）。

3、分析与愈伤组织诱导形成有关的因素。

1）外植体的状态（分化的程度）；

2）诱导培养的环境（光线、水分、温度等）；

3）植物激素的作用。

野外试验方案

野外试验方案-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN

试验方案 一、试验目的 近年来，有关利用合理的水稻种植模式，尤其是水稻品种间栽或混作来增加稻田的生物多样性，从而控制水稻病虫害的研究报道不断增多，这方面的研究已成为国内外的一个热点，本次实验就是为了探究增加稻田生物多样性对害虫飞虱的影响，通过观察稻田生物多样性对飞虱繁殖力、抗药性、致害型、天敌数量、对水稻病虫害的等影响，从而去研究其中的相关影响机制。以期能减少化学农药的施用，减少环境污染，更好地去发展生态农业。 二、试验材料 由广东田联种业有限公司提供水稻种子，选取以下两种： 植优523：感温型三系杂交稻组合。早造平均全生育期130～132天。科高～106.3厘米，株型中散，分蘖力中强，穗大粒多。中抗稻瘟病，全群抗性频率%～%，对中B群、中C群的抗性频率分别为%～75%和85%～%；中抗白叶枯病（IV型菌3级、V型菌7级）。丰产性较好，中抗稻瘟病和白叶枯病，耐寒性中弱。 特优816：感温型三系杂交稻组合。早造平均全生育期131～132天。科高～115.6厘米，植株较高，株型中集，分蘖力和抗倒力中弱，剑叶较宽、长，穗大粒多，后期熟色好。高抗稻瘟病，全群抗性频率%，对中C群、中B群的抗性频率分别为%和%，田间监测结果表现抗叶瘟、高抗穗瘟；感白叶枯病，对C4菌群、C5菌群分别表现感和中感。 田间均无抗飞虱抗性表现。 三、试验设计 试验设三个处理，分别为A：单作植优523、B：单作特优816、混作植优523和特优816，其比例A：B=5：1设三次重复，每小区面积200 m2，总面积大概3亩左右。如下图所示

水稻配方肥的应用 黄树庆

水稻配方肥的应用黄树庆 发表时间：2018-05-16T16:26:08.517Z 来源：《基层建设》2018年第2期作者：黄树庆[导读] 摘要：本文针对水稻传统施肥技术的不足，结合罗定市水稻配方肥的施用方法与应用效果，对水稻配方肥的施用技术与成效进行了分析。 罗定市土壤肥料站 527300 摘要：本文针对水稻传统施肥技术的不足，结合罗定市水稻配方肥的施用方法与应用效果，对水稻配方肥的施用技术与成效进行了分析。 关键词：水稻；配方肥；应用罗定市位于广东省西南部，分别与云浮市、阳春市、信宜市、广西岑溪市和郁南县交界，为广东省主要粮食产区，现有耕地68.70万亩，其中水旱田41.64万亩。2016年粮食播种面积64.1万亩，粮食总产量29.75万吨，其中水稻播种面积49.76万亩，稻谷产量22.9万吨。随着城镇建设和工业用地需求的增长，兼之种粮效益不高，耕种面积和稻作面积持续减小，尽管减小的幅度不大，但多年来累积减小的耕地 数量仍然是可观的。目前，提高粮食效益的主要做法是提高单产和科学用肥，但长期以来粮食种植中存在施肥过量、用肥不合理、增产效果不明显、农作物抗性差、因滥施肥污染环境等问题[1]。测土配方施肥在解决肥料利用率低、施肥成本高、粮食品质差等方面可以发挥重要的作用[2]。因此，本文结合罗定市水稻配方肥的应用对科学施肥技术进行了分析。 1水稻传统施肥技术的不足分析 1.1 配比失调，肥效较差 肥料是农作物的“粮食”，俗话说的好“庄稼一枝花，全靠肥当家”。种过地的人都知道肥料对于粮食增产的重要性，然而我国大多数稻区都存在施肥不合理的问题[3]，比较普遍的现象是偏施氮磷肥，而钾肥不足。一般农户氮肥（N）施用量可以达到10～12kg/亩，甚至高达15kg/亩；磷肥（P2O5）施用量达到3～6kg/亩，高者超过7kg/亩；钾肥（K2O）施用量一般不足5kg/亩，甚至0kg/亩。出现这种问题的主要原因是农户缺乏科学施肥的认识，由于氮肥增产效果显著，所以喜施氮肥，磷肥过量的原因是价格低廉，而钾肥价格偏贵，故少施或不施。偏施氮磷肥、欠缺钾肥，就会造成草多谷少、结实率低、产量下降等问题，同时肥料利用率低。 1.2 基肥过重，追肥不足 合理施肥方法是基肥占总施肥量的比例为：氮肥占30%～70%，磷肥占100%，钾肥占50%，其余比例应作追肥。但是农户在水稻种植中，往往基肥比例过高，例如氮肥占比超过80%，钾肥占比超过70%。由于大部分氮肥和钾肥在分蘖前就施完，造成前期肥料过剩，分蘖过多，消耗大量养分，以致到成熟期后出现早衰，而且氮、磷流失多，同样导致肥料利用率低。 1.3 选肥失当，针对性弱 稻农大多习惯使用尿素+通用型复合肥，而较少采用水稻专用配方肥。主要原因是农资经销商主推利润空间大、农户用惯的通用型复合肥，而配方肥应用范围相对窄小；另外也是基层土肥站专业力量薄弱，对农户的技术指导不足；还有假冒伪劣肥料出现，不仅扰乱了市场秩序，也损害了配方肥的声誉。 1.4 肥料浅施，利用率低 现在不少农户习惯浅施肥，即将肥料撒施在土壤表面，或略为翻整一下，水稻生长前期根系浅，对作物吸收影响还不算太大，中后期根系渗入土壤，浅施肥效较差，而且氮、钾肥易于流失，导致肥料利用率低，并污染环境。众多研究都表明，肥料深施有利于稳定肥效，提高肥料利用率，所以浅施肥是不合理的做法。 2 水稻配方肥施用方法与应用效果 2.1 土壤测试与水田分级 罗定市土肥站对全市所有耕地取样测试了土壤养分含量，并以土壤有机质含量为标准对水田进行了分级，其中一级肥力水田占比为7.07%，二级肥力水田占比为13.24%，三级肥力水田占比为54.08%，四级肥力水田占比为23.85%，五级肥力水田占比为1.87%，六级肥力水田占比为0.17%。可见，罗定市以二至四级肥力水田为主，三者合计占比达91.17%。 2.2 配方肥料试验设计 根据《测土配方施肥技术规范》（2011年修订版）推荐的试验设计方法，选用了“3414”实施方案。该方案选定氮、磷、钾3个因素，并设定不施肥、最佳施肥量分别为0水平和2水平，再分别插入最佳施肥量的0.5倍与1.5倍作为1水平（欠施肥量）和3水平（过施肥量）。根据回归最优设计原理，从全部64个处理中挑选出14个代表性的处理，所以称为“3414”试验方案。经与广州中加彩虹厂、广东欧米挪生态农业科技有限公司、茂名市新茂丰复合肥厂合作，并在大田上进行试验，最终确定了适合罗定市水田肥力特点的6个配方肥配方，如表1所示： 2.3 水稻配方肥推广方法

水稻起垄覆膜

镇沅县水稻覆膜抗旱节水栽培技术 【发稿时间：2010-4-29 16:15:43】【作者：镇沅县农业局推广中心】【主题词：】 【责任编辑：杨颖】【稿件来源：云南省普洱市镇沅县农业局推广中心】【审核发布：冯稚进】 ——普洱市水稻、玉米高产创建技术培训会交流材料 一、水稻覆膜抗旱节水栽培技术的作用及意义 水稻地膜覆盖栽培技术是应用矛盾论和系统论原理，从解决低产稻田低温冷害和干旱缺水两大主要矛盾入手，其核心是改长期以来水稻在自然状态下生长为保护状态下生长，改传统的水稻在稻田淹水条件下渡过全程为在湿润条件下完成一生。因此，优化了稻作土、肥、水、光、热、气等田间小气候环境条件，显示出巨大的增温早发、抗旱节水、改土保肥、隔氧除草、省工节本、病虫害减轻、增产增效的综合效益。该项技术是水稻生产技术的重大改革和稻作理论的新发展，是一条简便易行、群众欢迎、效益显著、潜力巨大的改造低产水田和发展节水农业的突破性措施。 镇沅位于横断山脉以南,属哀牢山与无量山中部，地形从东至西分成五谷五岭，山高谷深、坡陡，水资源严重不足，农业基础设施脆弱，常常只有栽秧水没有保苗水，沟渠建设未完善。全县稻田面积12.8万亩，其中二水田和雷响田4.1万亩，占32%，稻田受雨水来临早迟所制约，雨水来得早而栽的水稻就高产，雨水来得晚而栽的水稻单产不稳定，常靠小池小坝蓄关冬水为主。由于水源致使常年关冬水造成稻田次生潜育化，导致秧苗发黄僵死，严重制约作物正常生长发育。近几年虽采取了多种治理改良措施，如高稳产农田地建设的坡改梯、配方施肥、增施磷钾肥、水改旱等，这些措施对改造低产水田，提高单产起到了积极的作用，但由于低产田面积较大，山区和半山区，水稻产量低，单产徘徊在200kg左右，严重制约着粮食单产的提高，总产的增加。因此，改变种植方式实现水稻持续增产，是我们多年来探索的难题。水稻地膜

水稻需肥规律

水稻需肥规律 水稻是需肥较多的作物之一，一般每生产稻谷100公斤需氮(N)1.6～2.5公斤、磷 (P2O5)0.8～1.2公斤、钾(K2O)2.1～3.0 公斤，氮、磷、钾的需肥比例大约为2∶1∶3。水稻对氮素的吸收量在分蘖旺期和抽穗开花期达到高峰。施用氮肥能提高淀粉的产量，而淀粉的产量与水稻籽粒的大小、产量的高低、米质的优劣成正相关。如果抽穗前供氮不足，就会造成籽粒营养减少，灌浆不足，降低稻米品质。水稻对磷的吸收各生育期差异不大，吸收量最大的时期是分蘖至幼穗分化期。磷肥能促进根系发育和养分吸收，增强分蘖，增加淀粉合成，促进籽粒充实。水稻对钾的吸收，主要是穗分化至抽穗开花期，其次是分蘖至穗分化期。钾是淀粉、纤维素的合成和体内运输时必需的营养，能提高根的活力、延缓叶片衰老、增强抗御病虫害的能力。另外，硅和锌两种微肥对水稻的产量和品质影响较大。水稻茎叶中含有10%～20%的二氧化硅，施用硅肥能增强水稻对病虫害的抵抗能力和抗倒伏能力，起到增产的作用，并能提高稻米品质；锌肥能增加水稻有效穗数、穗粒数、千粒重等，降低空秕率，起到增产作用，在石灰性土壤上作用较明显。硅、锌肥施用在新改水田、酸性土壤、以及冷浸田中作用更为明显。 施肥技术 秧田施肥水稻育秧有水育秧、湿润育秧、旱育秧、塑料薄膜保温育秧以及两段育秧、塑料软盘育秧等多种形式。秧田基肥应重施优质有机肥，有机肥料肥效长，养分全，含有大量水稻生长所必需的营养元素。有机肥的粘结性、吸附性和代换量都很高，具有增加土壤团粒结构、提高土壤保水保肥能力的作用，是良好的土壤改良剂。一般每亩施用500～1000 公斤，同时每亩施用尿素3～5公斤、磷酸二铵8～15公斤、氯化钾7～8公斤或亩施复合肥20～30公斤，以达到供肥均匀的目的，促使苗壮苗齐。移栽前4～5天，每亩施用尿素6～7公斤或高氮复合肥8～10公斤作为送嫁肥，以利秧苗移栽后尽快返青，恢复生长。 施足大田基肥大田基肥也应重视有机肥的施用，一般亩施2000～3000公斤。同样不可忽视化肥的施用，水稻前期基本不吸收硝态氮，因此，氮肥以铵态氮为好，一般每亩施用尿素7～8公斤、过磷酸钙30～40公斤、氯化钾8～10公斤或亩施复合肥(15%-15%-15%)30～40公斤，另外每亩增施硅肥6～8公斤、硫酸锌1～1.5公斤。大田基肥应在插秧前结合耕耙稻田施用，要深施到12～20厘米的土壤中，使铵在少氧的环境中保持稳定，防止流失。 追肥 (1)早施分蘖肥。移栽返青后及早施用分蘖肥，以促进低节位分蘖的生长，起到增穗作用。分蘖肥一般分两次施用，第一次在返青后，亩施尿素或高氮复合肥 7～8公斤，配施适量硫酸钙、硫酸锌，起到促蘖作用；第二次在分蘖盛期亩施尿素或高氮复合肥7～8公斤，保证全田生长整齐，起到保蘖成穗作用。 (2)巧施穗肥。水稻倒二叶开始出叶，幼穗长约1厘米时，是穗形成和籽粒发育的基础时期，应控制无效分蘖。此时可每亩追施尿素8～12公斤或高氮复合肥10～15公斤，确保中期足够的养分转向生殖生长，增加颖花数量，防止颖花退化，促穗大粒重，同时具有养根、健叶、壮秆、防倒伏的作用。群体过小的地块可以提前到穗分化时期施用。 (3)补施粒肥。从抽穗到成熟期间，以提高结实率，确保完全成熟，增加千粒重为主。追肥要视水稻长势而定，宜少不宜多，一般每亩喷施0.2% ～0.3%的磷酸二氢钾溶液50～60

广西水稻品种试验实施方案

年广西水稻品种实验实施方案 广西区种子管理局 广西农科院水稻研究所 一、实验目的 为了鉴定评价新选育的水稻品种(组合，下同)在我区的丰产性、稳产性、适应性、抗逆性、品质及其它重要特征特性表现，为我区品种审定、推荐参加全国南方区试等提供科学依据，根据《广西壮族自治区农作物品种管理实施办法》有关规定，特制定年广西水稻品种区域实验、生产实验和预备实验实施方案。 二、参试品种 （一）区域实验和生产实验 年开展早稻桂中、桂北早熟组(以金优和株两优为对照)、中熟组(以优和五丰优为对照)、桂南迟熟组(以特优为对照)、常规优质稻组(以柳沙油占为对照)；晚稻设桂中、桂北中熟组(以优和五丰优为对照)、桂中中迟熟组(以天优华占为对照)、桂南感光组(以博优为对照)；高寒山区一季中稻组(以中浙优号为对照)； （二）预备(筛选)实验 开展早稻桂中、桂北早熟组(以株两优为对照)、中熟组(以五丰优为对照)、桂南迟熟组(以特优为对照)；晚稻设桂中、桂北中迟熟组(以天优华占为对照)、桂南感光组(以博优为对照)、常规优质稻组(以柳沙油占为对照)； 各熟组参试品种安排详见附件表～、表～。附件上没有参试品种安排的，请不要寄种子，否则当废种处理。 实验方案在“广西种业信息网()”上公布，不再印发。 三、供试种子要求 年所有参试品种(包括对照品种)在实验过程中实行实验编号管理，要求供种单位统一把参试品种的种子提供给广西农科院水稻所，进行编号后再分发到各承试点(包括抗性鉴定点)。分组编号情况报广西区种子管理局备案，对实验点和供种单位一概保密。各实验点不需再重新编号，以免发生错误。 (一)供种量 区域实验公斤个，生产实验早稻中熟组、晚稻中熟组和中迟熟组公斤个，其它熟组公斤个，预备(筛选)实验公斤个。

水稻配方施肥技术

水稻配方施肥技术 一、水稻为什么要配方施肥 配方施肥，也叫平衡施肥，搞好配方施肥，就要了解水稻需肥特点。 现已知道，水稻生长需要16种营养，主要有三大类。第一类叫大量元素，即碳、氢、氧、氮、磷、钾；第二类叫中量元素，是钙、镁、硫；第三类用量少，叫微量元素，包括铁、硼、锰、铜、锌、钼、氯七种。这三类营养，不管需要量大小，它们在作物生长发育中的功能和作用同等重要，缺一不可，这16种营养元素，碳、氢、氧由空气和水提供，其它由土壤和肥料提供。根据“最少养分律”原理，无论作物虽需要多少种养分，但决定作物产量的却是土壤中有效含量相对最小的养分，这种最小的养分限制了作物产量，若得不到补充，其它养分再多，产量也不会提高。配方施肥主要理论依据有养分归还学说，最小养分率、同等重要率、不可替代率、肥料报酬递减率等。水稻配方施肥，就是根据水稻需要和土壤供肥能力，提供给水稻最需要的营养元素。也就是说，水稻需要什么补什么，土壤缺什么补什么，这就是水稻配方施肥的核心。但长期以来传统习惯偏施氮肥，氮肥过量，水稻吸收过多的氮素，抗病、抗倒能力降低，品质低劣。同时多余的氮素以氨气或硝态氮形式挥发或随水渗到土壤深层，污染环境，且利用率降低，浪费严重，种田投资效益不佳。磷钾肥和微肥用量不足，导致土壤营养失去平衡水稻出现缺素症，同样影响产量和品质。盲目过量使用磷肥，过剩的磷酸根和锌、铁、铜、钙离子结合成难溶的磷酸盐，造成微肥缺乏症，影响产量。因此，根据水稻吸收肥料比例，科学配方施肥，保证水稻营养供给又不浪费，从而提高产量和品质，提高种田效益是十分必要的。

二、水稻营养障碍 病状：一、缺氮发黄症，水稻缺氮植株矮小，分蘖少，叶片小，呈黄绿色，成熟提早。一般先从老叶尖端开始向下均匀黄化，逐渐由基叶延及至上部叶片，最后全株叶色褪淡，变为黄绿色，下部老叶枯黄。发根慢，细根和根毛发育差，黄根较多。耕层浅瘦、基肥不足的稻田常发生。二、缺磷发红症，秧苗移栽后发红不返青，很少分蘖，或返青后出现僵苗现象；叶片细瘦且直立不披，有时叶片沿中脉稍呈卷曲折合状；叶色暗绿无光泽，严重时叶尖带紫色，远看稻苗暗绿中带灰紫色；稻株间不散开，稻丛成簇状，矮小细弱；根系短而细，新根很少；若有硫化氢中毒的并发症，则根系灰白，黑根多，白根少。三、缺钾赤枯症，水稻缺钾，移栽后2—3周开始显症。缺钾植株矮小，呈暗绿色，虽能发根返青，但叶片发黄呈褐色斑点，老叶尖端和叶缘发生红褐色小斑点，最后叶片自尖端向下逐渐变赤褐色枯死。以后每长出一片新叶，新增加一片老叶的病变，严重时全株只留下少数新叶保持绿色，远看似火烧状。病株的主根和分枝根均短而细弱，整个根系呈黄褐色至暗褐色，新根很少。四、缺锌丛生症，缺锌的稻苗，先在下叶中脉区出现褪绿黄化状，并产生红褐色斑点和不规则斑块，后逐渐扩大呈红褐色条状，自叶尖向下变红褐色干枯，一般自下叶向上叶依次出现。病株出叶速度缓慢，新叶短而窄，叶色褪淡，尤其是基部中脉附近褪成黄白色。重病株叶枕距离缩短或错位，明显矮化丛生，很少分蘖，田间生长参差不齐。根系老朽，呈褐色，迟熟，造成严重减产。五、缺硫，症状与缺氮相似。六、缺钙，叶尖变白，严重的生长点死亡，叶片仍保持绿色，根系伸长延迟，根尖变褐色。七、缺镁下部叶片脉间褪色。八、缺铁整个叶片失绿或发白。九、缺锰嫩叶脉间失绿，老叶保持近黄绿色，褪

水稻愈伤转化

水稻愈伤组织转化 一、实验目的 1.掌握植物组织培养的基本原理； 2.学习水稻愈伤组织的诱导方法； 3.学习农杆菌转化法的原理，掌握农杆菌转化水稻愈伤组织的方法； 4.学习转基因植株的各种鉴定方法（包括PCR检测、GUS染色、Southern-blot、Western-blot、FISH 等），同时能够操作PCR与GUS染色鉴定的方法。 二、实验原理 1.植物组织培养 植物组织培养（plant tissue culture）是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体和花药等，在人工控制的培养基上培养，使其生长、分化以及形成完整植株的技 术。自1902年Haberlandt 首先用紫鸭跖草( Tradescantia )的叶片栅栏组织进行培养来，植物组织培养已有100余年历史。用于离体培养的各种植物材料称为外植体（explant）。根据外植体的类 型，又可将组织培养分为：器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养以及原生质体培养等。（从这个角度讲，本学期的实验属于胚胎培养。）植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。 2.基因工程 基因工程技术是在离体条件下对不同生物的遗传物质(DNA)进行人为“加工”，并按照人们的意愿重新组合，以改变生物的性状和功能，然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞 内，并使其在生物体内或细胞中表达，从而获得新的生物机能。这种利用基因工程技术获得的植 物一般称为“基因工程植物”。自1983年首次获得转基因植物以来，转基因技术发展十分迅速， 成功进行转基因的植物已达60多种，在世界上批准进入田间试验的转基因植物已超过500例，有些转基因产品已进入市场。通过基因工程改良作物品种在未来的农业生产中日益显示出巨大潜力。 3.农杆菌转化法 转基因的方法有很多，对于植物而言，最常用的是农杆菌转化法和基因枪法。农杆菌转化法使用的是根癌农杆菌，其内含Ti质粒：

水稻生育期需肥特点及技术

水稻生育期需肥特点及技术 篇一：水稻生育期需肥特点与施肥技术 水稻生育期需肥特点与施肥技术 一、水稻的需肥特点 水稻属喜肥作物，仅仅依靠土壤的供给不能够满足水稻的生长发育，必须依据水稻不同生长发育的需肥特点进行相应元素肥料的施用，尤其是需在较大量的氮磷钾元素。 氮、磷、钾是水稻需要量较大而土壤又比较缺乏的营养元素，一般每生产稻谷100 kg，约需吸收氮1.6~1.9 kg，磷 0.8~1.3 kg，钾1.8~3.8 kg，三者的比例约为1：0.5：1.3。氮素以返青至分蘖期为最高，磷和钾以拔节期为最高。水稻对三要素的吸收量分别在分蘖盛期和幼穗分化后期形成两个吸肥高峰。因此水稻施肥必须根据水稻这些营养规律和吸肥特性，充分满足水稻吸肥高峰对各种营养元素的需要。 二、水稻施肥技术 1、秧田施肥技术一是配制营养土：肥沃的旱田土和腐熟的猪粪按7：3比例混合堆制；二是秧苗追肥：秧苗3叶期以后，若出现叶片普遍退绿发黄缺肥时，每亩苗床可用磷酸二氢钾或硫酸铵16~20 kg，兑水1200~1500 kg叶面喷洒，喷肥后要浇清水冲洗，防止烧苗；三是送嫁肥：在移栽前两天最好追施一次送嫁

肥，以保证插秧后返青的速度一般按每亩施硫酸铵10 kg或尿素5 kg为宜。 2、本田施肥技术本田施肥要做到有机肥与化肥结合，追肥 与叶面喷肥结合，施肥原则为减氮、增磷钾。结合秋整地或春整地， 可隔年施经充分腐熟的农家肥每亩2~3 t；再结合耙地施入优质水稻配方肥每公顷15~25kg；分蘖肥：分两次施入，第一次分蘖肥在返青后立即施用总量的50%，最晚不超过6叶期，促进分蘖早生快发，低位分蘖；当水稻7叶末到第8叶露尖时施入第二次蘖肥；穗肥：穗肥分两次施用。第一次在倒3叶刚刚露尖时施穗肥 总量的60%，促进穗、枝梗、颖花的分化，争取大穗；第二次在剑叶（倒1叶）露尖时施用，穗肥以氮肥为主，加入适量钾肥。 （胡汉龙）、 基肥：基肥非常重要，并且最适宜施用有机肥，增加土壤有 机质含量，改善土壤物理性状，满足水稻各生育期对各种肥料元 素的基本需要，使稻苗扎根后能及时吸到肥料，促进早发。一般 亩施有机肥2000~3000kg，同时还要增施化肥。由于水稻前期不吸收销态氮，因此，一般每亩施用尿素7~8kg、过磷酸钙30~40kg、氯化钾8~10kg，另外，硫酸锌1kg，每亩施用6~8kg硅肥。基肥 应在插秧前结合整地施用，施肥深度应在12~20cm。对缺锌敏感，易患“缩苗病”。硅对水稻有重要作用，可以增强水稻的抗逆性，改善作物品质，水稻是吸硅最多的作物。

有机水稻覆膜穴直播栽培技术

水稻覆膜直播栽培技术 1 选地整地 一是要具备一定的灌溉水源，要求每亩灌溉用水量在200立方米左右；二是要具备适宜的土质条件，即旱整地时土块容易细碎，土壤pH值在6.0～8之间。因此，以选用砂壤土、轻壤土和重壤土为宜，而沙土地和土质粘重的重盐碱地则不适用。 整地要做到“田平泥融”.即耕层土壤细碎，没有直径3cm以上的土块，田面子整。如果田面高差较大，可用水整地的方法平整。如果田面高差不大，则不必平整田面，只要根据田面情况做成宽度一定的小区，便于灌溉就行。 2覆膜方法 采用永亚农业科技创新（泰州）有限公司生产的JLY3-6A拖拉机悬挂式覆膜施肥联合播种机，该播种机行距从25到30 厘米可以调整，株距12厘米。播种量从2.5公斤到15公斤666平方米，全生物降解地膜，降解周期在100天上下，播种速度在50亩（666平方米）10小时，具体看地块的长短，地块越长播种的效率越高。

3 种子选择与处理 3.1品种选择 选择熟期适当，优质高产，抗病耐肥，分蘖力强和矮秆叶直立的品种。 3.2晒种、选种 将种子薄薄地摊开晒1～2天，晒时勤翻，使种子干燥度一致。晒种后，剔除混在种子中的草籽、杂质，秕粒、病粒等。再用食盐水选种，把种子放入配制成的液体之中进行漂选，除去上浮的秕粒、杂质等，然后用清水冲洗3遍。 3.2由于采用有机的种植方式，因而不采用农药浸种，可以采用2%的石灰水浸泡2小时，对种子进行杀毒处理。 3.3采用本设备播种，原则上不催芽，因为机械播种，可能对芽孢有损伤。 4 适期播种 播种期要根据种子发芽最低温度，原则上5天平均温度大于10度就可以播种 4.1确保种子干燥的条件，否则由于含水会堵塞播种机构， 4.2开始手动播种器，每次排种量在计算的要求范围左右，就可以试播，播种20米以后停机检查每穴的

水稻愈伤组织培养

水稻愈伤组织的诱导 李希 北京科技大学化学与生物工程学院生物科学与技术系，北京，100083 摘要：以水稻种子为外植体，研究了外植体的消毒方法和接种技术，了解了水稻愈伤组织诱导的过 程。结果表明水稻种子接种在诱导培养基上两天已产生愈伤组织发芽2mm，四天愈伤组织呈现浅黄色发芽5-10mm，6天愈伤组织颜色加深发芽1-2cm，8天愈伤组织为橙黄色发芽2-3cm，无杂菌污染。 关键词：水稻种子外植体诱导愈伤组织 引言 自Niizeki和Oono1968年首次获得水稻花粉植株以来，水稻组织培养取得了很大的进展，如各种水稻品种愈伤组织的诱导、继代、植株再生培养基的筛选，遗传特性，基因工程转化体系的建立等等。水稻种子愈伤组织的诱导是这些研究的基础，因此掌握外植体的消毒方法和接种技术，了解了水稻愈伤组织诱导的过程至关重要。以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用。本次试验使用的诱导剂为2,4-D，诱导率为100%。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1实验材料 水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）； 1.1.2仪器设备及用具 超净工作台培养室、培养皿：￠9cm×2 枪形镊量筒：100mL×2 三角瓶：50mL×2(无菌)；废液缸；保鲜膜；标签纸 1.1.3试剂及培养基 试剂：75%酒精，2% NaCLO，无菌水(每组1瓶400mL) 培养基：诱导培养基：MS+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L（pH5.8） 1.2 实验方法 1.2.1 MS固体培养基配制： 由于实验室中的MS培养基已含有蔗糖和琼脂，所以直接按照41.5g/L的浓度配置。实验中配置50ml培养基，需依次加入2.075gMS，0.1mg2,4-D； 用NaOH或HCl调节PH=5.8； 高压蒸汽锅121℃灭菌20min。 1.2.2接种室、培养基及用具表面消毒 用75%酒精棉球试擦超净工作、镊子，将培养基及用具放工作台，打开紫外灯，20分钟以表面消毒。之后关紫外灯，打开工作台风机，通风30分钟后可进行无菌操作。 1.2.3种子去壳 选取饱满、无霉变成熟水稻种子，用手工脱去谷壳（注意保持胚完整），准备20粒去壳种子，

水稻需肥规律与施肥技术

水稻需肥规律与施肥技术 水稻是需肥较多的作物之一，一般每生产稻谷100公斤需氮(N)1.6～2.5公斤、磷(P2O5)0.8～1.2公斤、钾(K2O)2.1～3.0 公斤，氮、磷、钾的需肥比例大约为2∶1∶3。水稻对氮素的吸收量在分蘖旺期和抽穗开花期达到高峰。施用氮肥能提高淀粉的产量，而淀粉的产量与水稻籽粒的大小、产量的高低、米质的优劣成正相关。如果抽穗前供氮不足，就会造成籽粒营养减少，灌浆不足，降低稻米品质。水稻对磷的吸收各生育期差异不大，吸收量最大的时期是分蘖至幼穗分化期。磷肥能促进根系发育和养分吸收，增强分蘖，增加淀粉合成，促进籽粒充实。水稻对钾的吸收，主要是穗分化至抽穗开花期，其次是分蘖至穗分化期。钾是淀粉、纤维素的合成和体内运输时必需的营养，能提高根的活力、延缓叶片衰老、增强抗御病虫害的能力。另外，硅和锌两种微肥对水稻的产量和品质影响较大。水稻茎叶中含有10%～20%的二氧化硅，施用硅肥能增强水稻对病虫害的抵抗能力和抗倒伏能力，起到增产的作用，并能提高稻米品质；锌肥能增加水稻有效穗数、穗粒数、千粒重等，降低空秕率，起到增产作用，在石灰性土壤上作用较明显。硅、锌肥施用在新改水田、酸性土壤、以及冷浸田中作用更为明显。 施肥技术 秧田施肥水稻育秧有水育秧、湿润育秧、旱育秧、塑料薄膜保温育秧以及两段育秧、塑料软盘育秧等多种形式。秧田基肥应重施优质有机肥，有机肥料肥效长，养分全，含有大量水稻生长所必需的营养元素。有机肥的粘结性、吸附性和代换量都很高，具有增加土壤团粒结构、提高土壤保水保肥能力的作用，是良好的土壤改良剂。一般每亩施用500～1000公斤，同时每亩施用尿素3～5公斤、磷酸二铵8～15公斤、氯化钾7～8公斤或亩施复合肥20～30公斤，以达到供肥均匀的目的，促使苗壮苗齐。移栽前4～5天，每亩施用尿素6～7公斤或高氮复合肥8～10公斤作为送嫁肥，以利秧苗移栽后尽快返青，恢复生长。 施足大田基肥大田基肥也应重视有机肥的施用，一般亩施2000～3000公斤。同样不可忽视化肥的施用，水稻前期基本不吸收硝态氮，因此，氮肥以铵态氮为好，一般每亩施用尿素7～8公斤、过磷酸钙30～40公斤、氯化钾8～10公斤或亩施复合肥(15%-15%-15%)30～40公斤，另外每亩增施硅肥6～8公斤、硫酸锌1～1.5公斤。大田基肥应在插秧前结合耕耙稻田施用，要深施到12～20厘米的土

实验室水稻种植方法

一个水培还有就是土培 水培就是放在水里让他们发芽的土培就是种在土里保持土层湿润就好了 种子播在准备好的秧田上，当苗龄为20～25天时移植到周围有堤的水深为5～10公分(2～4吋)的稻田内，在生长季节一直浸在水中。 耕种方式 稻米的种植技术，包括稻田和插秧，是在中国发明的。传说中是神农氏教导人们如何种稻。 目前稻的耕种除传统的人工耕种方式，亦有高度机械化的耕种方式。但仍不失下列步骤： 整地： 种稻之前，必须先将稻田的土壤翻过，使其松软，这个过程分为粗耕、细耕和盖平三个期间。过去使用兽力和犁具，主要是水牛来整地犁田，但现在多用机器整地了。 育苗： 农民先在某块田中培育秧苗，此田往往会被称为秧田，在撒下稻种后，农人多半会在土上洒一层稻壳灰；现代则多由专门的育苗中心使用育苗箱来使稻苗成长，好的稻苗是稻作成功的关键。在秧苗长高约八公分时，就可以进行插秧了。 插秧： 将秧苗仔细的插进稻田中，间格有序。传统的插秧法会使用秧绳、秧标或插秧轮，来在稻田中做记号。手工插秧时，会在左手的大拇指上戴分秧器，帮助农人将秧苗分出，并插进土里。插秧的气候相当重要，如大雨则会将秧苗打坏。现代多有插秧机插秧，但在土地起伏大，形状不是方型的稻田中，还是需要人工插秧。秧苗一般会呈南北走向。还有更为便利的抛秧。 除草除虫： 秧苗成长的时候，得时时照顾，并拔除杂草、有时也需用农药来除掉害虫（如福寿螺）。 施肥： 秧苗在抽高，长出第一节稻茎的时候称为分蘖期，这段期间往往需要施肥，让稻苗成长的健壮，并促进日后结穗米质的饱满和数量。 灌排水： 水稻比较倚赖这个程序，旱稻的话是旱田，灌排水的过程较不一样，但是一般都需在插秧后，幼穗形成时，还有抽穗开花期加强水份灌溉。 收成： 当稻穗垂下，金黄饱满时，就可以开始收成，过去是农民一束一束，用镰刀割下，再扎起，利用打谷机使稻穗分离，现代则有收割机，将稻穗卷入后，直接将稻穗与稻茎分离出来，一粒一粒的稻穗就成为稻谷。 干燥、删选： 收成的稻谷需要干燥，过去多在三合院的前院晒谷，需时时翻动，让稻谷干燥。删选则是将瘪谷等杂质删掉，用电动分谷机、风车或手工抖动分谷，利用风力将饱满有重量的稻谷自动筛选出来。

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导 一、实验目的 1、掌握外植体的消毒方法和接种技术； 2、了解愈伤组织诱导的过程。 二、实验原理 以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。愈伤再经分化培养，通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。 外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用；对于多茸毛表面粗糙不平的材料，要加展著剂（吐温20）以增强消毒效果。 三、实验材料与用具 1、材料：水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）； 2、试剂：75%酒精，2% NaCLO，无菌水(每组1瓶400mL)； 3、培养基：诱导培养基：NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L（pH5.8）； 4、仪器设备：培养室、超净工作台、培养皿（￠9cm）2个、枪形镊、量筒（100mL）2个、三角瓶（50mL、无菌）2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。 四、实验步骤 1、接种室、培养基及用具表面消毒 用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子，将培养基及用具放工作台，打开紫外灯，照射20分钟以表面消毒。之后关紫外灯，打开工作台风机，通风30分钟后可进行无菌操作。 2、种子去壳 选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子，手工脱去谷壳（注意保持胚完整），每人准备30粒去壳种子，并按照分组放到三角瓶中。 3、操作者双手的清洗与消毒

在进入无菌室之前，各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干，然后进入无菌室，坐在超净台前位子上后，用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒，在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。（注意：酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上！） 4、超净台面的表面消毒（以下工作在超净工作台内进行） 用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球，仔细把整个超净台面擦试一遍，尽量降低超净台面的带菌量，并将废棉球丢到废液缸中，然后点亮超净台里面放置的酒精灯。 5、外植体消毒（分组操作，每组由一位代表操作完成外植体的消毒工作） 将脱谷壳米粒转到一50mL 无菌三角瓶→加适量无菌水洗一次（以没过种子为准，下同）→弃水，倒入75%酒精适量，摇动搅拌，放置30秒（过程中适当轻摇动混匀）→弃酒精→加适量无菌水洗一次→弃水→倒入适量2% NaCLO ，不时摇动搅拌，共处理30分钟→弃NaCLO →用无菌水洗3次，每次停留1分钟→倒去无菌水，将种子从三角瓶转到带无菌滤纸的无菌培养皿中吸干。 6、接种与观察 将吸干的消毒种子用无菌的镊子接入培养基并均匀放置，每皿接10粒，每人共接种2皿。接种完成后，将培养皿盖上并用保鲜膜封口，然后将接种有材料的培养皿移出超净台，贴上标签写明日期、接种人，按照班级统一放入一篮子，再将篮子放入培养室进行25℃暗培养。注意每隔2-3天前来观察一次实验现象，1周后调查计算污染率，14天后调查计算愈伤组织诱导率。 五、实验结果 本次实验我组未出现被污染的种子，污染率均为0 。说明实验过程中，我组成员操作规范，保证所接种的种子均不受到污染。 最后，我组的2个培养皿分别可以诱导出7和8株水稻苗，诱导率分别为70% ×100% 形成愈伤组织的种子数 污染率(%)= ×100% 污染的种子数 接种的总种子数 诱导率 (%)= 接种的总种子数

2019年水稻生育期需肥特点及技术

2019年水稻生育期需肥特点及技术 篇一：水稻生育期需肥特点与施肥技术 水稻生育期需肥特点与施肥技术 一、水稻的需肥特点 水稻属喜肥作物，仅仅依靠土壤的供给不能够满足水稻的生长发育，必须依据水稻不同生长发育的需肥特点进行相应元素肥料的施用，尤其是需在较大量的氮磷钾元素。 氮、磷、钾是水稻需要量较大而土壤又比较缺乏的营养元素，一 般每生产稻谷100kg，约需吸收氮1.6~1.9kg，磷0.8~1.3kg，钾 1.8~3.8kg，三者的比例约为1：0.5：1.3。氮素以返青至分蘖期为 最高，磷和钾以拔节期为最高。水稻对三要素的吸收量分别在分蘖盛期和幼穗分化后期形成两个吸肥高峰。因此水稻施肥必须根据水稻这些营养规律和吸肥特性，充分满足水稻吸肥高峰对各种营养元素的需要。 二、水稻施肥技术

1、秧田施肥技术一是配制营养土：肥沃的旱田土和腐熟的猪粪按7：3比例混合堆制；二是秧苗追肥：秧苗3叶期以后，若出现叶片普遍退绿发黄缺肥时，每亩苗床可用磷酸二氢钾或硫酸铵16~20kg，兑水1200~1500kg叶面喷洒，喷肥后要浇清水冲洗，防止烧苗；三是送嫁肥：在移栽前两天最好追施一次送嫁肥，以保证插秧后返青的速度一般按每亩施硫酸铵10kg或尿素5kg为宜。 2、本田施肥技术本田施肥要做到有机肥与化肥结合，追肥与叶面喷肥结合，施肥原则为减氮、增磷钾。结合秋整地或春整地， 可隔年施经充分腐熟的农家肥每亩2~3t；再结合耙地施入优质水稻配方肥每公顷15~25kg；分蘖肥：分两次施入，第一次分蘖肥在返青后立即施用总量的50%，最晚不超过6叶期，促进分蘖早生快发，低位分蘖；当水稻7叶末到第8叶露尖时施入第二次蘖肥；穗肥：穗肥分两次施用。第一次在倒3叶刚刚露尖时施穗肥总量的60%，促进穗、枝梗、颖花的分化，争取大穗；第二次在剑叶（倒1叶）露尖时施用，穗肥以氮肥为主，加入适量钾肥。（胡汉龙）、 基肥：基肥非常重要，并且最适宜施用有机肥，增加土壤有机质含量，改善土壤物理性状，满足水稻各生育期对各种肥料元素的基本需要，使稻苗扎根后能及时吸到肥料，促进早发。一般亩施有机肥2000~3000kg，同时还要增施化肥。由于水稻前期不吸收销态氮，因

2019年鉴别水稻种子优劣的方法有何些

2019年鉴别水稻种子优劣的方法有何些篇一：水稻种子的正确选种方法 水稻种子的选种方法 种子质量是决定水稻质量的重要因素，关系到农业生产的安全。 在选种时，了解需要掌握的事项，能为水稻安全生产提供保障。 1.坚持品种选定原则 根据《中华人民共和国种子法》第十七条规定，未经审定的品种 任何单位和个人不得宣传、销售和推广。凡政府允许大面积推广的品种，必须是由国家或省级农作物品种审定委员会审定通过的水稻品种。不要购买未经审定而先行推广的品种，而且最好不要选择那些没有大面积普及的品种。谨慎购买新品种，遇到从来没有种植过的新品种，要向经营者询问该品种是否通过引种测试，其结果如何，最好不要盲目购买。 2.选择具有合法资格的种子供应商 不要在无证经营的门店、街头巷尾摆摊及走街串巷叫卖的种子商 贩手里购买种子，避免买到假冒、伪劣和陈年的种子。应该选择经营

证照齐全、具有合法资格的种子供应商。购种时注意要供应商开具有效发票（或种子质量信用卡），并妥善保管购种发票和种子包装袋，以备种子出问题时有据可查。 3.确保其品种特性和所种植区域自然条件相吻合 选择的品种要和自身的用种目的、栽培条件相匹配。不同品种的抗逆性、丰产性、成熟期、商品性等各不相同；不同使用者的用种目的、栽培条件、肥力条件、上下茬口安排、管理水平等也不尽相同。所以，在选种时，要根据自身条件和用种目的，结合品种的特征属性，有目的地选择品种。 4.善于分析种子的标签等信息 购种时要选择正规包装正规生产单位生产的原包装种子，包装物上印有醒目图案及文字说明，有的还有防伪标志。要注意查看稻种说明书或品种简介，内容包含适宜种植地域、特征特性、栽培措施等。还要注意查看包装是否规范，如所装数量、质量指标、生产商、经营许可证号码、产地及联系电话等明确标识。同时要注意查看种子包装袋上标注的种子生产日期，隔年生产的陈年种子不要买，没有注明生产日期的种子也不要买。诚邻粮食选用优质种子公司提供的高品质品种，比如稻花香2号选用的是稻花香之父“田永太”培育的种子，确

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导 、实验目的 1、掌握外植体的消毒方法和接种技术； 2、了解愈伤组织诱导的过程。 二、实验原理 以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。愈伤再经分化培养，通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。 外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用；对于多茸毛表面粗糙不平的材料，要加展着剂（吐温20）以增强消毒效果。 三、实验材料与用具 1、材料：水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）； 2、试剂：75%酉精，2% NaCLO无菌水（每组1瓶400mL）; 3、培养基：诱导培养基：NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+ 琼脂8g/L （pH5.8）; 4、仪器设备：培养室、超净工作台、培养皿（C 9cm）2个、枪形镊、量筒（100mL 2 个、三角瓶（50mL无菌）2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。 四、实验步骤

1、接种室、培养基及用具表面消毒 用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子，将培养基及用具放工作台，打开紫外灯，照 射20分钟以表面消毒。之后关紫外灯，打开工作台风机，通风30 分钟后可进行无菌操作。 2、种子去壳 选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子，手工脱去谷壳（注意保持胚完整），每人准备 30 粒去壳种子，并按照分组放到三角瓶中。 3、操作者双手的清洗与消毒 在进入无菌室之前，各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干，然后进入无菌室，坐在超净台前位子上后，用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒，在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。（注意：酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上！） 4、超净台面的表面消毒（以下工作在超净工作台内进行） 用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球，仔细把整个超净台面擦试一遍，尽量降低超净台面的带菌量，并将废棉球丢到废液缸中，然后点亮超净台里面放置的酒精灯。 5、外植体消毒（分组操作，每组由一位代表操作完成外植体的消毒工作） 将脱谷壳米粒转到一50mL无菌三角瓶一加适量无菌水洗一次（以没过种子为准，下同）一弃水，倒入75%酉精适量，摇动搅拌，放置30秒（过程中适当轻摇动混匀）一弃酒精f加适量无菌水洗一次f弃水f倒入适量2% NaCL O不时摇动搅拌，共处理30分钟一弃NaCL f用无菌水洗3次，每次停留1分钟f倒去无菌水，将种子从三角瓶转到带无 菌滤纸的无菌培养皿中吸干。 6、接种与观察

水稻需肥

作物生产受多种因素影响，施肥条件千变万化，了解作物的需肥特点和施肥原则就可以做到因地制宜，建议将施肥框定在合理的范围内。基本原则包括其他农业措施，是为了帮助农民朋友在分析和解决实际问题时能拓宽思维，对作物生产进行综合管理。本文拟就这一话题对我国主要作物进行系统讨论，下面先谈谈水稻。 水稻的生长发育可分为幼苗、分蘖、孕穗、抽穗、开花、成熟等不同时期，其需肥特点及施肥原则是： 需肥特点 有两个养分吸收高峰。水稻分蘖期和幼穗分化期是两个养分吸收高峰，但是单季稻与双季稻有所不同。单季稻生育期较长，两个吸肥高峰间隔分明，是追肥的关键；双季稻生育期较短，两个吸肥高峰趋于重叠，因此施肥重心较单季稻提前，但施肥量却相对较少。 对缺锌敏感，易患“缩苗病”。缺锌土壤多为石灰性水稻土、滨海盐土区水稻土和低洼沼泽区水稻土，其中尤以冬麦茬稻和早稻更易缺乏；过量施用磷肥也会诱导缺锌。增施有机肥、合理施用磷肥可以防止缺锌；锌肥作基肥土施或叶面喷施可以矫正缺锌。 是喜硅作物。水稻是吸收硅最多的作物。硅能促进水稻呼吸和根系生长，提高光合作用效率，健壮茎秆，增强抗倒、抗病能力，对高产水稻尤其要适当增施钾肥和硅肥。 根区土壤有特殊的氧化—还原层。水稻长期生长在淹水条件下，土层分为靠近水体的氧化层（耕作层上部几毫米到1厘米处）和下面的还原层。还原层缺氧，如果施用硝态氮肥，除了随水渗失外，还会在反硝化微生物的作用下变成气态氮逸失。因此要不用或慎用硝态氮肥。 营养诊断不宜采用硝态氮测试法。水稻生长在淹水条件下，吸收的氮在转化前，主要以铵态氮存在于体内，所以植株养分速测主要采用叶绿素比色法，而不是测定其硝酸盐含量；在淹水条件下，土壤有效氮也多以铵态氮存在，也不宜通过硝态氮速测进行营养诊断。 水田土壤养分的有效性与旱田不同。在淹水条件下，磷肥和铁、锰等养分的有效性高于旱田，有时甚至会因锰含量过高而产生毒害。因此旱田改为水田后磷肥可适当少施，铁、锰等缺乏也得到缓解；而水田改为旱田后需适当增加施磷量，并注意铁、锰等元素的缺乏问题。 对水分管控有特殊要求。水分是水稻植株的物质组成和光合作用的重要原料，通过水的蒸腾作用可调节植株体温、改善生长环境，防止低温冻害和抑制杂草生长。“灌水拔高儿，落干长根儿”生动说明了水分状况与作物生长的关系，对水稻水分管理具有重要的指导意义，应该结合具体情况灵活应用。 施肥原则 提高施肥技术。提倡结合整地，增施有机肥，进行秸秆还田或种植绿肥；控制氮肥总量，将氮肥重心后移，适当降低基肥和分蘖肥的氮肥比例，以减少前期无效分蘖和防止后期脱肥；适当增施钾肥，提倡基肥、追肥分施；倡导“以水带氮”施肥技术，以提高肥、水利用效率；

水稻杂交育种的实践与思考

摘要：分析了杂交育种在现阶段水稻育种中的地位，同时就现阶段如何认识和应用杂交育种的方法进行探讨，继续发挥杂交育种在作物改良中的重要作用。 关键词：水稻；杂交育种；实践 现代水稻育种中系统选育、杂交育种、理化诱变、远缘杂交、组织培养、基因工程、分子标记辅助育种等手段普遍用于育种实践，但乐于被育种家采用的育种方法主要还是杂交育种。纵观20年江苏省水稻育种历史，大部分水稻优良品种都是采用杂交育种方法选育成功的。因此，在过去、现在和将来，杂交育种仍是水稻新品种选育、品种改良的重要方法之一。 1 杂交育种方法的技术优势 1.1 杂交育种产生的后代遗传背景丰富 杂交育种通过单交、复交、回交、聚合杂交等多种手段，能扩大遗传背景，丰富变异类型，容易选育产量潜力高、稻米品质好、综合性状优的品种。如武育粳3号就是复合杂交选育的，两个单交母本选用了北方早粳中丹1号，父本79-51和扬粳1号都是曾经在苏南较大面积栽培的晚粳稻。该品种自推广后一直是江苏省及邻近省份的主栽品种之一，1998年成为我国年推广面积最大的常规稻品种，面积为426万hm2，武育粳3号无疑是江苏省粳稻育种的重大突破。 1.2 杂交育种通过基因重组、互作、互补、积累，在后代容易产生优良性状 杂交育种可以通过基因重组将不同亲本的优良基因集中于新品种中。同时，不同显性基因互作或互补也产生新性状，因为互作的基因在两亲本上，通过杂交可使互补基因相互结合而产生新性状。基因积累有时也能产生超亲性状，对数量性状来说，由分散在双亲中的微效多基因累积在后代中引起，也就是超亲育种[1]。 1.3 杂交育种方法灵活多变 组合配置、杂交方式、 水稻杂交育种的实践与思考 王俊仁 周凤明 吕宏飞 沈会生 滕志英 李建芹 扬国友 张安存（江苏省大华种业集团有限公司，南京210002） 的研究机构提纯生产，不能由棉花种子公司自行生产。棉花商品种子的扩繁，采用棉花商品种子质量认证制度，委托满足条件的师团进行，确保棉花生产种子质量。这种“育、繁、推、销”一体化的管理体系可以保证棉花推广品种少而精，更有助于实行单种、单收、单销，同时还可以防止棉花品种的混杂退化，延长棉种的使用寿命。 抓质量，创品牌 在市场经济运行机制下，种子产业化面临的竞争主要体现在品种质量和品牌等方面。首先要狠抓棉花种子质量。一是从决策管理者到生产经营者都要树立起这一意识，即质量就是生命，切实抓好每一关，各尽其责；二是要提高种子质量管理水平，棉花原（良）种场一定要严格按照棉花原种的生产技术操作规程，必须实行“一场一种”制，搞好隔离繁殖与提纯复壮等相关工作，在田间选择、棉种子收购与机械加工过程中做到全程质量监控；三是要提高育种的技术高度，充分利用科研所的技术优势，如生化技术和分子标记技术等高新科学技术的运用，势必为种子质量的提高提供坚实的保障。 其次要实施棉花种子品牌战略。具体做法包括种子基地的建设，特色棉花品种的打造；树立良好的公司形象，加强服务管理；加强宣传工作，通过各级师团连队的报栏、宣传栏，相关的平面媒体和新媒体的运用，专家咨询和田间示范等形式扩大棉花品牌宣传，扩大社会的认知度。 参考文献 [1] 陈淑君.种子管理工作中的问题及建议.中国种业，2005，9：32 [2] 龙艳.对《种子法》品种审定制度的修改建议.中国种业，2011，12：17-19 [3] 黄其振.国际种业的发展与中国种业战略对策：种子工程与农业发展. 北京：中国农业出版社，1997：168-197 [4] 周关印，郑文俊.我国棉种技术创新及产业化对策.中国农学通报，2002，18（3）：82-84，114 [5] 霍学喜，石爱虎.我国种业发展的理论框架与政策分析.经济问题，1997，5：30-33 [6] 洪明秀.中国种子产业化发展的主要对策：种子工程与农业发展.北京：中国农业出版社，1997：208-234 （收稿日期：2012-03-20 ）