酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介：
酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
酶标仪原理：
酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单.
微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.
光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。
随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。
检测单位
光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示，OD是optical density(光密度)的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD=log(1/trans)，其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度，Ιo 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算:
c为检测物的浓度b为检测物的厚度a为摩尔因子
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
检测值计算
仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为0%，没有检测物的透光值为100%。则实际检测中，检测物的透光值均在0%一100%之间。透光值
的计算如下:
T=(Meas-Min)/(Max-Min)
其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0%的情况下检测的二进位数值，Max为在100%的情况下检测的二进位数值，举例如下:
MaX=3600
Min=20
Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=log(1/T)=log(1/0.0028)=2.552
中心定位
仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
光源的参照通道
参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
用途和其它提示
用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。
质量控制
质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
空白校正
有一些试剂盒的说明书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的说明书要求进行。
检测结果的解释
由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会造成OD 值的不同，因此，只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行.
结构折叠
规格有24孔板，48孔板，96孔板等多种，不同的仪器选用不同规格的孔板，对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.
酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得，也可用分光光度计相同的单色器来得到.在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样，滤光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，聚光镜，光栏后到达反射镜，经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管.
从酶标仪工作框图和光路图上可看出，它和普通的光电比色计有以下几点差异:
(l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿，而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，故用它作为固相载体.
⑵由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的，光线只能垂直穿过，因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的，光束既可是从上到下，也可以是从下到上穿过比色液.
⑶酶标仪通常不仅用A，有时也使用光密度OD来表示吸光度.酶标仪可分为单通道和多通道2种类型，单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构，可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试，手动型则靠手工移动微孔板来进行测量.
在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪，此类酶标仪一般都是自动化型的.它没有多个光束和多个光电检测器，如12个通道的仪器设有12条光束或12个光源，12个检测器和12个放大器，在X方向的机械驱动装置的作用下，样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快，但其结构较复杂价格也较高.
用途折叠
可广泛应用于低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析(A260/A280)和蛋白定量
(A280/BCA/Braflod/Lowery)，酶活、酶动力学检测，酶联免疫测定(ELISAs)，细胞增殖与毒性分析，细胞凋亡检测(MTT)，报告基因检测及G蛋白偶联受体分析(GPCR)等。
应用范围折叠
分类项目名称简称
血液学检验血小板相关抗体的检验PAIgA、PAIgG、PAIgM D-二聚体的测定D-Dimer
血清纤维蛋白降解产物的测定FDP
三碘甲腺原氨酸、四碘甲腺原氨酸测定T3、T4
免疫学检验C反应蛋白的测定CRP
免疫球蛋白的测定IgD、IgE
循环免疫复合物的测定CIC
类风湿因子的测定IgG、IgA、IgM类RF
抗甲状腺球蛋白抗体、微粒体抗体的测定TG、TM
肿癌免疫学检测甲胎蛋白的测定AFP
癌胚抗原的测定CEA
前列腺特异抗原的测定PSA
胰癌、胆道癌、胃癌的测定CA19-9
卵巢癌的测定CA125
乳腺癌的测定CA15-3
宫颈鳞癌的测定SCC
多发性骨髓癌的测定
甲状腺癌的测定hTG
传染病免疫学检验甲肝血清学的检测抗HAV-IgM乙肝血清学的检测两对半
丙肝血清学的检测抗HAV-IgG、抗HCV-IgM
丁肝血清学的检测抗HDV-IgG、抗HDV-IgM
戊肝血清学的检测抗HEV-IgG
肾综合征出血热类抗体的检测HFRS-IgG
乙型脑炎病毒抗体的检测IgM
人类免疫缺陷病毒抗体(即艾滋病)的检测HⅣ β 2 M
优生优育功能检测弓形虫(体)病毒的检测TOXO
风疹病毒的检测RV
巨细胞病毒的检测CMV
单纯疱病毒的检测抗HSV(Ⅰ、Ⅱ)
其它本仪器还可做基因检验及兽残、农残检验项目等
选购指南折叠
酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。
目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如:乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5，通过目测无法判断标本孔的反应
颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、艾滋病、优生优育等)，判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。另外，住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。
诊断方法折叠
中国免疫诊断方法主要有如下三种:酶免(EIA)、放免(RIA)和发光，在市场上的情况如下:
方法所处市场周期
放免衰退期
酶免成长期
发光进入期
放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐渐被淘汰，而化学发光试剂和设备比较昂贵，使得其在国内的普及特别在计生系统普及需要较长时间，EIA技术稳定，试剂价格合理，供应充，酶免技术在中国市场处于成长期，因此购买酶标仪正合适宜。
工作环境折叠
酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。根据DINVDE0871条例，仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN45635-19条例:
仪器应放置在低于40分贝的环境下。
为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。
操作时环境温度应在15℃-40℃之间，环境湿度在15%-85%之间。
操作电压应保持稳定。
操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘。
保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。
规格性能
光学系统折叠
光栅光路系统，包括内建的参比检测通道，确保任何测量情况下获得一致的结果。
光路折叠
长寿命闪烁氙灯光源，光栅单色光发生器，200 ~1000 nm波长范围内全波长扫描，1nm步进
检测模式折叠
在微孔板检测模式和比色杯检测模式下均可进行全波长范围光谱扫描，对样品和空白同时扫描。
光谱扫描速度折叠
10s，200~1000nm，1nm步进
样品前处理折叠
无需衍生处理，即可直接测定DNA、RNA和蛋白的吸光值。
光程校准折叠
使用微孔板检测时可直接读出OD值和浓度，对于水相溶液可使用光程校正样品容器折叠
可使用96&384孔板，或标准杯/微量杯
带宽折叠
带宽2.4nm
读数范围折叠
0 ~ 4 OD
线性范围折叠
@450nm:0 ~ 2.5 Abs，±2%
检测准确度折叠
@450nm:1%+0.003 Abs(0~2.0Abs)，2%(2.0~2.5Abs)
检测精度折叠
@450nm <1.0% CV
检测速度:折叠
8s/96孔;13s/384孔
温控范围折叠
微孔板和比色杯模式均具温控功能，温控范围(室温+4)~ 65℃
振荡模式折叠
轨道，双轨道和线性三种调速振荡模式，动力学过程中可执行背景振荡模式
数据处理及分析折叠
通过PC端数据分析软件Gen5进行操作和设置
曲线拟合、定量分析、定性分析、动力学计算、自定义方程以、平行线分析(PLA，符合欧盟法规要求)及效价分析等。数据可一键导出到Excel，也可生成详尽的结果报告。
电源折叠
电源输入100 - 240 V (50/60 Hz)，最大功率消耗90W
体积折叠
外部尺寸(H x W x D) 216 x 216 x 406mm
重量折叠
11kg
配置折叠
全波长读数仪一套(含比色杯基座)(比色皿必须为立式)，标准96孔酶标板一包，电源线壹根，说明书一份，软件光盘一张。
操作事项
酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果，因此要得到准确结果，试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯，会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项:
使用加液器加液，加液头不能混用。
洗板要洗干净。如果条件允许，使用洗板机洗板，避免交叉污染。
严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。
在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手。
如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格按照试
剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。
如果仪器接触过污染性或传染性物品，请进行清洗和消毒。
不要在测量过程中关闭电源。
对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。
使用后盖好防尘罩。
出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。
技术参数折叠
常规
波长选择单色器
读板方法终点法，动力学法，光谱扫描法，孔域扫描法微孔板类型6-384孔板，Take3和Take3 Trio微量检测板其他实验室设备标准比色杯(EonC 型号)
温度控制环境以上+4°C 至65°C
震荡轨道，双轨道和线性
软件Gen5? 数据分析软件
自动化BioStack? 和第三方自动化设备兼容
吸光度
光源氙闪灯
波长范围200-999nm，1nm步进
带通 2.4 nm
动态范围0.0 - 4.0 OD
单色器波长准确性+2 nm
单色器波长可重复性+0.2 nm
0 - 2.0 OD + 1% + 0.010
OD 准确性
2.0 -
3.0 OD + 3% + 0.010
0 - 2.0 OD + 1% + 0.010
OD 线性
2.0 -
3.0 OD + 3% + 0.010
OD 可重复性0 - 2.0 OD + 1% + 0.0052.0 - 3.0 OD + 3% + 0.005
96 孔板: 8 秒
读板速度
384 孔板: 13 秒
物理特性
连续性的USB 和RS232串口进行PC连接
功率100 –240 Volts AC 50/60 Hz
16" 长x 8.5" 宽x 8.5" 高
尺寸
(40.6 cm x 21.6 cm x 21.6 cm)
重量<24 lbs (11 kg)
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常见故障
一、常见故障
1、打印机不工作
⑴酶标仪后部DIL开关设置不正确。DIL标准设置:左下下下下下下上下上上下下上下上上右(人站在仪器后部，面向仪器)。
⑵酶标仪内置打印机开关处于开的位置。应在总参数中设置内置打印机为关。
⑶打印机接口接错(接在了计算机接口上了)。应将打印机联系接在DIL开关正下方的打印机接口上，RS-232接口为计算机接口。
⑷打印机联线有问题:有些配备的新打印机联线仍有问题，请确保打印机联线无问题。
⑸打印机未联机，请确认打印机上的联机键已联机。
⑹打印机无纸或纸未装好，请装好打印纸。
⑺有些打印机有开机顺序，有的需先开打印机，后开仪器;有的需先开仪器，后开打印机。
2、调不出所编程序
必须在相应程序模块下调出。如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。
3、肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大
⒊1 滤光片设置不正确:请在"参数"中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。
⒊2 空白或阴性位置不正确。
二、仪器的检查测试
1、检测电源部分的输出电压
电源部分输出电压可以通过检测MUSCU板上X11元件得到，每个点的正确对地电压应该是(顺序为从左至右):5V、0V(地电压)、15V、24V、-15V、0V。
2、光源电压的测试和调节
测量光源电压，如果发现所测的结果不符合规定要求可以调节电源上的R39元件。其操作步骤如下:
⑴打开电源开关，使仪器处在工作状态。
⑵用电压表测量光源电压，正常电压应在6.7~6.9V之间。
⑶选择405nm波长的程序，按"开始"键，同时测量光源处电压，正常值应在7.5~8.1V之间。
⑷如果光源电压不正常，关闭电源开关。旋松测量部分上盖螺丝并移去上盖。
⑸旋松轨道部分的固定螺丝并移动轨道部分(要特别小心以防损伤轨道部分和主板及电源部分的连线!)，能看到轨道下面的电源即可。
⑹打开电源开关，调节电源上R39元件，再重复上面步骤2测量光源电压，一直到正确为止。
三、仪器的校正
1、调节显示屏幕的亮度
这可以通过调节MUSCU板上的R14元件来实现。
2、检查同步性
⑴转动断路器轮
把示波器的探针接在电路板MUSCU2的D29元件的第二个脚上测定信号的周期，正确的值应该介于5.1ms~5.4ms之间。如果超出这个范围，可以通过调节CHOPT电路板上R3元件来校正。检测活动结束后要用带有颜色的漆锁定它的正确位置。
⑵检查同步性
a) 按"计算模式"键，选择1"调整"，再按"输入"键选择9"连续测量"，再按"输入"键两次选择增益0，并按"输入"键。
b) 当在MACU2板D7元件的第14脚上测量信号的A/D转换时，测得的时段信号应该在信道的中间。如果不符，可以通过上下移动CHOPT板来调整。
3、调整时钟频率
⑴按"计算模式"选择1"调整"，再按"输入"选择10"时钟频率"，再按"输入"。
⑵用频率计数器在MUSCU板上的D28元件的第13脚处测定时钟频率，正确的值应该为fck=32768Hz。这可以通过调节该板上的电容器C4来校正。
⑶值得注意的是，在这个测定过程中不能用"停止"键中断这个过程。
4、存储机器的系列号
按"计算模式"选择2"测试"，按"输入"选择4"重复性20次"，按"输入"键两次。输入机器号(353……)，按"停止"两次。
四、仪器的检验
1、重复性:
在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度即可重复性，可用CV值来表示。在某一特定的滤光片下测定某一块酶标板20次，用统计学方法求出所有测量值的均值和标准差。公式如下:
所有测量值的标准差
CV %= ------------×100%
所有测量值的均值
2、精确性:
待测物的测定值与一可接受的参考值之间的差异。此项指标需用雷勃公司标准板(PVT)来测。
测量值- 参考值
精确性= ---------- ×100%
参考值
3、光路检测:
将一块酶标板正放测量一次，再将酶标板反放测量一次，查看同一孔吸光值是否相同，从而查看其所有光路8通道是否均一。
⑴查看光路上的透镜是否清洁。
⑵灯泡好否及亮度是否正常。
⑶滤光片是否清洁。
4、载轨运动:
开机后酶标仪能否自检，自检结束后揿"开始"，查看载轨运动是否正常及有无噪声。
5、按键膜的好坏:
开机后试用所有按键膜，查看其功能是否完好。
酶标仪软件操作步骤
酶标仪软件操作步骤 一、软件运行前得连接 酶标仪插上电源,与电脑连接好后，打开电脑与酶标仪开关,酶标仪至少稳定15miｎ后开始读数,效果比较好。注意，当酶标仪处于poweｒon 得状态时，不要手动打开酶标板室与比色皿室得门,以免紫外辐射得伤害或者仪器得损伤。二、软件得运行 １、打开桌面快捷方式SkanＩｔREｆor MSS ２.４.２运行软件,出现L ｏg on To SｋanIt sｏｆｔｗare得界面。 2、use name默认为“admｉn”,ｐasswoｒd为空 3、点OK进入ＳkaｎIｔsoｆtwaｒe ２.4.２界面,Nｅw ｓｅsｓiｏn-新建任务程序,Ｏpen sessiｏn-打开已有程序。 4、在界面上方得ｓｅtting中选择Ｉnsｔruｍｅｎt,出现Inｓｔrument setting 得界面,在Iｎｓｔｒumｅnt中选中Ｍulｔiskan specｔrum on Ⅰ,ＴhemｏＥｌectroｎ。点击右侧得setup，在serｉａｌnumbeｒ中输入150０-850,然后点击OK。再点击Deｆａuｌt instrument右边得ｃonnect,即可设定好连接。然后点击close关闭窗口。 三.Ｎew ｓeｓｓion操作 １.新建任务程序： →点击nｅw seｓｓion进入protocｏｌoｐtiｏｎs界面,在ｓessiｏn nam ｅ中输入新得程序名称 →点击nｅxt进入ｐlaｔe layout ｏpｔions界面，在seleｃt plate tempｌat ｅ中选择所需模板类型(一般96孔板选择ｕsｅdefaｕlt,比色皿选择cuvette,其她得可以选择相应得类型) →输入plaｔe lａyouｔｎamｅ(系统默认得与session name相同) →点击ｎexｔ进入Ｄｅfinitiｏn done界面,在ｓelect location中选择任务程序所要保存得目得文件夹(该界面可进行新建,重命名及删除文件夹操作) →点击fiｎish完成新建,进入SｋanＩｔsoftwarｅ 2.4.2程序操作主界面(主要有三大块: platｅlaｙｏuｔ用于模板区域选择,ｐroｔocｏl用于程序编辑,ｒesulｔs用于数据处理)。
多功能酶标仪SpectraMaxi3的操作规程
多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3 部门Department 签名/日期Signature/Date 起草人：Prepared by 樊小川，Xiaochuan Fan QC 审核人：Reviewed by 黄思佳，Sijia Huang QC 审核人：Reviewed by 褚夫兰，Fulan Chu QA 批准人：Approved by 张伯彦，Boyan Zhang 质量负责人 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。 2 适用范围
本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪：指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光（TRF)、化学发光（Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现"Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。 6.2.2 连接仪器 点击‘Choose a diffecient instrument’，打开‘Instrument Connection’对话框，在“Availible Instruments”菜单中选择仪器连接线与电脑所接的串口号(COM)。 选择所购买的酶标仪型号SpectraMax i3或添加模块卡盒型号。最后点击“OK”键连接。 6.2.3 仪器检测参数设定 点击图标后出现“Settings”对话框，对话框最上方出现Read Mode（读板模式）和Read Type（读板类型）两个选项，读板模式有ABS(光吸收)、FL(荧光强度)、LUM(化学发光)和TRF(时间分辨荧光)，读板类型有终点检测（Endpoint）、动力学（Kinetic）、单孔扫描（Well Scan）和光谱扫描（Spectrum）四种。使用者根据实验
酶标仪的检测原理
酶标仪的检测原理 光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光，400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 检测单位： 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用OD值表示，OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer 法则，OD值与光强度成下述关系： E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。 OD值由下述公式计算： E＝OD=C×D×E C为检测物的浓度 D为检测物的厚度 E为摩尔因子 在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 Anthos 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在0％一100％之间。透光值 的计算如下： T＝（Meas—Min）／（Max—Min） 其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0％的情况下检测的二进位数值，Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下： MaX=3600 Mn=20 Meas＝30 T=（30-20）/3600-20)＝0．0028 OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552 Anthos 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。 光源的参照通道 参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。 酶标仪的用途和其它提示 用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。
酶标仪使用方法
酶标仪使用方法 一、仪器准备 1．将MK3酶标仪后部的电源开关打开，仪器将显示自检，基础酶联，软件版本号。2．等待数秒后，荧屏显示“基础酶联，准备和时间”。表示仪器正常，处于等待状态。操作规程 1．工作人员心须详细阅读仪器操作使用说明书。 2．将被测样品板放入酶标盘中，同时打开与酶标仪相连的打印机开关。 3．按“测量模式”键：进入选择波长程序 荧屏显示：“基础酶联” “1.单波长检测” 按“↑”“↓”选择单波长.双波长检测. 4．按“输入”键：进入选择好的文件名状态。 若选择单波长检测, 荧屏显示：“1.单波长检测” “滤光片405” 再用数字键选择需要的波长. 若选择双波长检测, 荧屏显示：“2.双波长检测” “1.滤光片450” 再用数字键选择需要的第一检测波长.按”输入”键, 荧屏显示: “2双波长检测” “2.滤光片630” 再用数字键选择需要的第二检测波长.按”输入”键, 荧屏显示：“2双波长检测” “无试剂空白” 5．继续按”输入”键, 荧屏显示：“2双波长检测” “最终结果”(单波长无此步骤) 6．按”输入”键,返回到荧屏显示“基础酶联，准备和时间” 7．按”开始”键, 启动阅读功能，酶标仪对样品板开始进行测试。 8．读数完毕，被测孔子板复位，荧屏显示“正在传送数据”,等待数秒后,打印机开始打印测试结果。当打印完毕后，关闭打印机开关，荧屏回到主菜单状态。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
二、计算机控制 1．将MK3酶标仪后部的电源开关打开，仪器将显示自检，基础酶联，软件版本号2．等待数秒后，荧屏显示“基础酶联，准备和时间”。表示仪器正常，处于等待状态。3．在lab-35计算机的桌面上打开“思桥检验科管理系统”,输入用户名“system”及密码“system”. 4．进入系统后，选择“酶标仪”菜单。在下拉框中选择“酶标项目设置” （1）在面板当中进行单，双波长的设置，点击“仪器通迅设置”。 （2）在“仪器通迅设置”面板上，默认为单波长的方式，如要选择双波长，勾选双波长的选框。 （3）在主滤光片及副滤光片上选择相应的所需波长大小。 （4）选择完成后，点击“确认”键，系统显示“设置成功”，按“确定”退回。（5）点击“退出”键，系统显示“酶标仪器设置成功”，按“确定”键返回到“酶标项目设置”的面板上。 （6）在“酶标仪”的下拉框中选择“酶标仪操作”，在此面板中完成读板，数据存储及打印的工作。 5. （1）点击“连机”，在状态栏显示“连机成功”，表明计算机已与酶标仪连接成功。（2）点击“启动”，在状态栏显示“计算机远程控制成功”,表明计算机已远程控制酶标仪。如未显示此项，则读板功能不能完成，数据传输异常。 （3）顺利完成上面两项后，继续点击“读板”键，启动酶标仪读板功能。数秒后，酶标仪开始读板，完成读板后，在“状态”栏显示“结果数据分离成功”，并在面板的样品栏显示读板后的数据。（在此“酶标仪操作”面板未关闭之前，可连续读板，如关闭面板需重复“连机”，“启动“） （4）点击“入库”键，系统显示“入库完毕”，按“确定”返回。此项完成了数据的存储。 （5）点出“计算“键，系统显示“计算完毕”, 按“确定”返回。此项完成后才可以打印。 （6）点出“打印”键，完成打印到此波长选择设置成功，点击“关闭”键，退出“酶标项目设置” （7）当打印完毕后，关闭打印机开关。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
SPETROstarOmega全波长全自动多功能酶标仪
SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标仪 仪器介绍： SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标 仪是BMGLABTECH Omage 系列的一员， SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标 仪可以使用于固定波长或者连续波长检测，波长范 围220-1000nm,1nm 扫描递进，与单色器相似， 但是速度更快，分光计可以实现紫外/可见光测量 <1秒/孔，无需扫描。分光计的检测速度和操作简 易的软件让用户能更灵活地优化实验参数。 作为Omega 多功能酶标仪系列的一员， 同时带有振荡孵育，试剂进样功能。 SPECTROstar Omega 具备以下特性： SPECTROstar Omega ·即使在全波长扫描时，内置式的智能注射器仍然能够同时进行试剂的配给并启动动力学反应 ·精确的温度控制可达60oC ，多种振荡模式 ·模板管理器能够进行多种数据处理 ·多功能的动力学软件可用于终点法，long-term 和快速动力学检测 ·实时动力学检测 ·兼容384孔板 ·”QuickStart”模式允许用户只需点击3次鼠标键即可进行读数
·Stacker和机械臂兼容 ·可根据需要升级为FLUOstar Omega或POLARstar Omega。 控制和分析软件 BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。并完全符合FDA 21CFR Part 11。 控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤，功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数，以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。 数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。数据可以通过预设的模板进行处理，也可以对通过改变统计数据来进行处理。 该软件同样能够制作标准曲线，并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值： 线性回归拟合 4-参数拟合 点对点拟合 分段回归拟合 三次样条函数拟合 2nd和3nd多项式拟合 MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算，所以很容易得到如：S/N，Delta F%和Z’等重要参数。利用标准拟合等式即可快速的进行酶动力学数据分析，让MARS软件更为完善。 只需按一下鼠标，通用型的微孔板测读器软件包就能为用户提供快速、简单的实验结果，实验步骤设计，和用户自定义数据处理。
酶标仪的工作原理及基本结构
酶标仪的工作原理及基本 结构 Prepared on 22 November 2020
酶免测试的工作原理 吸光度测试的准确性对于酶免测试结果的重要性 酶标仪的组成部分和工作原理 第一节比色分析的基本理论 许多化学物质具有颜色，有些无色的化合物也可以和显色剂作用而生成有色物质。事实证明，当有色溶液的浓度改变时，颜色的深浅也随着改变。浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。如纳氏管比色法，它是按浓度由高到低，配好一系列标准浓度管，然后拿待测样品和标准管逐个比较，看和哪一个标准管的颜色最相近，便读取该标准管的浓度值为待测样品的浓度值，这就是（目视）比色法。这种方法虽然比较简便，但是系列标准管不易保存，误差较大。后来改用光电检测元件代替目视来测量被测溶液中物质的含量，这种方法叫光电比色法。利用这种方法制成的仪器叫光电比色计。 光电比色计属于吸收光谱仪器范围。 一、光的性质 从物理学中我们知道，光具有波动和微粒两种性质，通称光的波粒两象性。在一些场合，光的波动性比较明显；在另一些场合，光则主要表现为微粒性。 首先，光是一种电磁波。可以用描述电磁波的术语，如振动频率（υ）、波长（λ）、速度（c ）、周期（T ）来描述它。我们日常所见到的白光，便是波
长在400～760nm之间的电磁波，它是由红橙黄绿青蓝紫等色，按照一定比例混合而成的复合光。不同波长的光被人眼所感受到的颜色是不同的。在可见光之外是红外线和紫外线。各种色光及红外线、紫外线的近似波长范围如表1所示。 表1 各种色光及红外线、紫外线的近似近波范围单位：nm 除了波动性外，光还具有微粒性。在辐射能量时，光是以单个的、一份一份的能量（E＝hυ）的形式辐射的。式中υ是光的频率，h为普朗克常量。同样，光被吸收时，其能量一份一份地被吸收的。因此，我们可以说，光是由具有能量（hυ）的微粒所组成的，这种微粒被称为光子。由式中可知，不同波长的光子具有不同的能量。波长越短，即频率越高，能量越大。反之亦然。光子的存在可以从光电效应中得到充分的证明。 二、光的互补及有色物质的显色原理 若把某两种颜色的光按照一定的比例混合，能够得到白色光的话，则这两种颜色的光就叫做互补色。图1中处于直线关系的两种光为互补色。如绿光和紫光为互补色，黄光和蓝光为互补色等等。
MK3酶标仪使用手册
Multiscan MK3使用手册
一. 装机 1.打开包装箱，取出仪器，去掉泡沫架，塑料封套，干燥 剂。将仪器后部白色外盖左右二个固定螺丝打开。 2.安装滤光片轮（图中3号位，注意：滤光片轮有齿缘朝向 仪器后部）。 3.安装灯泡（图中1号位注意：灯泡边缘突起部向上）。
4.关上机盖,将盖左右二个固定螺丝固定好,连接仪器电源接口 (图中2位)和打印机接口(图中6位,电脑接口为4位),将仪器和 打印机电源打开.注意勿动仪器后部的二排(共16针)针式按钮(图中5和7位). 二. MULTISCAN MK3 技术性能 1.卓越的光学系统: 八通道光路检测系统,检测速度非常快,检测96孔酶标板仅需2秒 准确性好( 2%或0.007Abs),结果更可靠. 测量范围宽:0-3.5Abs,线性范围大:0-2.5Abs. 2.可线性振板,振板速度/时间可选. 3.内部软件有四种测量程序模块: 基础酶联(包括简单的定性和 定量),临界值(可输临界值公式),曲线定量(可作标准曲线),凝集
检测(供选装). 4. 内部软件功能强大,人机对话,便于操作,机器内存可储存64个测 试程序,可满足常规应用. 5.提供中文电脑软件,可满足临床检验科室打印综合报告和质控图. 三. 使用培训： （一）编制测量程序 ： 步骤：先进入测量程序模块（“转换＋输入”）→ 设置“测量模式和测量参数”→设置“计算模式和计算参数”→储存所编程序→ 使用时再调出程序。 1. 定性测量: 1).简单的定性测量(如固定单/双限值):可在“基础酶联”模式下设。 2). 定性测量(需输入临界值公式):可在“临界值”模式下设定。 ?编程:按上述“步骤”（先进入测量程序模块→“测量模式和测量参数”→“计算模式和计算参数”）依次设定参数。 ?储存：先按“储存”，再设置程序号。
酶标仪使用说明
酶标仪基本知识及其检测原理 酶标仪基本知识及其检测原理，文章简要介绍了酶标仪的原理和及应用。 光是电磁波，波长100nm-400nm称为紫外光，400nm-780nm 之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 检测单位： 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用OD值表示，OD是opticaldelnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，O D值与光强度成下述关系： E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度，Ⅰ0为在检测物之前的光强度，Ⅰ为从被检测物出来的光强度。 OD值由下述公式计算： E=OD=C×D×E 其中：C为检测物的浓度；D为检测物的厚度；E为摩尔子。
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095.仪器定义没有光源下的透光值为0%，没有检测物的透光值为100%。则实际检测中，检测物的透光值均在0%-100%之间。 透光值的计算如下： T=（Meas-Min）/（Max-Min） 其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0%的情况下检测的二进位数值，Max为在100%的情况下检测的二进位数值，举例如下： 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标
多功能酶标仪基本操作规程
多功能酶标仪基本操作规程 一、可见与紫外光原始吸光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶 标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定，一般情况 下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔，平底，透明板)。（注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。 9、在Measurements 栏内双击Absorbance ，出现Absorbance的对话框。 10、在Absorbance的对话框中： ⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值；Reference项,在需要扣除背景波长时选中并 输入背景波长值。一般情况不选. ⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选 ⑶在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10；Settle time（使平静时间）项对于96或384孔 板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长,以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。 ⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。 11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄色）， （注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。） 12、点击OK后，箭头变绿，点击绿色箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年- 自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。 13、测定结束后，点击File 选择print,直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel， 然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。 14、关机，退出当前界面，点击左下角Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑，关仪器电源和插板电 源。 二、荧光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶 标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。荧光酶标的测定，一般情况下 选xxxxx xx Flat black (x孔，平底，黑板。6孔板测定时没有黑板可选,可选择6孔,平底,透明板)。
酶标仪注册技术审查指导原则
附件1 酶标仪注册技术审查指导原则 本指导原则旨在指导和规范酶标仪产品的技术审评工作，帮助审评人员理解和掌握该类产品原理、机理、结构、性能、预期用途等内容，把握技术审评工作基本要求和尺度，对产品安全性、有效性做出系统评价。 本指导原则所确定的核心内容是在目前的科技认识水平和现有产品技术基础上形成的，因此，审评人员应注意其适宜性，密切关注适用标准及相关技术的最新进展，考虑产品的更新和变化。 本指导原则不作为法规强制执行，不包括行政审批要求；但审评人员需密切关注相关法规的变化，以确认申报产品是否符合法规要求。 一、适用范围 本指导原则适用于仅对ELISA实验结果进行比色，测量每一测试微孔吸光度值的普通酶标仪，根据《医疗器械分类目录》（国药监械〔2002〕302号）类代号为6840-3，品名举例为“酶免疫”、“半自动酶标仪”，管理类别为Ⅱ类。 本指导原则也适用于全自动酶联免疫分析仪的读数模块。 二、技术审查要点 （一）产品名称的要求 酶标仪的命名应与《医疗器械分类目录》（国药监械〔2002〕 —1 —
302号）或国家标准、行业标准中的通用名称一致。一般命名为“半自动酶标仪”、“半自动酶标分析仪”、“全自动酶标分析仪”、“酶标分析仪”或“酶标仪”、“酶联免疫分析仪”。 （二）产品的结构和组成 酶标仪主要由电源、光源系统、单色器系统、样品室、检测器、微机和操作软件等组成。光源发出的光经平行处理后，透过滤光片/光栅射入样品室，经过待测液后，透射光信号被检测器检测，放大及模拟/数字转换后由微机进行计算、处理，并由显示器、打印机显示并打印出最终测定结果。 根据通道数量划分，酶标仪有单通道和多通道两种类型。 根据测定模式划分，酶标仪目前主要有单波长、单波长/双波长、波长连续可调式三种。 酶标仪结构图如图1所示。 图1 酶标仪主要部件（举例说明） —2 —
多功能酶标仪Gen5软件使用方法_SynergyH4_201
Gen5简要操作说明 一：新建方案 双击桌面上Gen5软件图标，出现如下界面，新建实验可以用来编辑新实验或者选择已经编辑好的方案来读板，新建方案可以编辑新的读板方法。 点击新建方案按钮，并选择标准方案（默认设置），弹出如下界面 双击程序（步骤），弹出如下界面，在此我们可以编辑检测（Read）方法 点击检测，进入下面界面 根据自己的实验类型和检测模式，选择对应的选项： 吸收光： 点击终点法后，如下设置 若点击光谱扫描，如下设置： 点击区域扫描，如下设置： 荧光强度 点击终点法，选择滤光片或者光栅，如果滤光片，如下设置： Gain值设定，默认是35，可以收到根据信号调节或者采用自动校正，如下： 或者已知微孔板信号孔分布情况，可以根据信号孔来校正增益值 选择完成后点击OK即可完成设定； 如果选择光栅检测，设置如下： 编辑完成即可： 注：1）Gain值的设定是为了获得合适的检测信号值，并不会改变信号的趋势，可以在预实验中完成，以后的相同实验固定设置来检测 2）光谱扫描，区域扫描设置方法与吸收光设置类似。 编辑完成后点击OK，确认就可以。 发光 终点法，区域扫描选择滤光片，光谱扫描选择光栅 终点法设置如下： 选择终点法时： 完成后点击OK。
温度控制 需要注意的是，温控设定后需要加热一定时间才能达到目的温度，所以可以根据实际情况在打开仪器同时设定预加热。方法如下： 点击第二排最右边按钮（仪器图标，数字显示目前仪器内部的温度），点开后出现以下对话框： 点击预热， 实验完成后，记得关闭预加热。 震荡： 动力学检测： 接着设置检测步骤： 延迟： 方案编辑完成后取名字，保存。 编辑完成后，之间点击绿色三角按钮进行读板。 点击后，将板子放在载板台上，点击ok，即可进行读数，同时读数结束后可以保存在自己的文件夹下面。如不需要原始的实验数据，也可以点击取消不保存。 三：数据导出 读板过程结束，载板台会弹出，软件上出现读板结果，我们只需要点击Excel导出数据图标，就可以把数据导出到Excel表中，进行后续的数据处理。
酶标仪基本知识及其检测原理
酶标仪基本知识及检测原理 酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。 酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。 目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。 国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。另外，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。 酶标仪的使用方法 作为微孔板比色计的酶标仪，其基本功能不外乎一个比色测定，所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异，当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。在临床实验室实际工作中，实验人员在使用酶标仪进行
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介： 酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 酶标仪原理： 酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单. 微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液. 光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。 酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。 检测单位 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
酶标仪操作步骤
酶标仪操作步骤 集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#
酶标仪操作步骤： 一.打开酶标仪开关，仪器开始自检，； 二.打开电脑，点击桌面上的KCjunior软件，出现带This product is licensed to huashida gene 三.界面有5个选项－Read Plate, Open Results, New Protocol, Open Protocol, Modify Protocol； 5270201字幕的对话框，单击OK,进入软件界面； 四.如果初次检测，单击New Protocol建立方法；如果有建好的方法，单击Modify Protocol； 五.建立方法 1.单击New Protocol后进入Protocol Definition对话框，在General Information菜单下输入Protocol Name, Protocol Description中输入对此方法的描述，不需要此项可空； 2.在Read Method菜单下设置读板方法(有End Point, Multiwavelength, Dynamtic等)； 3.在Primary Wavelength中输入主波长，如有参比波长(Reference Wavelenth)也输入； 4.在Template菜单下的Well Type Selection中，根据多孔板的位置选择所设定的Blank 和待测的Sample； 5.在Shake Mode处，还可以选择震动模式和强度；建好方法后，点击确定。 六.读取数据 将多孔板放入酶标仪，其缺角与托架上的对应；单击Read Plate，在Result ID中随便输入信息或缺省，在Plate Number中输入板号后，多孔板进入仪器开始读取数据。 七.数据输出待酶标仪读取完数据后，多孔板托架自动弹出，选择Results菜单下的Exoport Date,即将所测数据导入至Excel表格；保存所测数据，关闭KCjunior软件，
酶标仪标准操作规程
酶标仪标准操作规程 一、目的 正确使用酶标仪测读酶联免疫吸附试验结果（吸光度）。 二、原理 通过选择滤光片获得特定波长的光线，透过待测溶液自动连续读取96孔板上各样品孔的吸光度。 三、主要操作规程 1.开启酶标仪电源，待酶标仪自检完成，仪器的液晶显示窗出现PLATE READING及闪动光标（若仪器提示不能通过自检或出现其他出错信息，请立即停止下列操作并将错误信息详细记录，报告专业人员维修）。 2.开启计算机。 3.打开酶标仪专用程序（此时在操作界面左下方显示Ready字样）。 4.打开“File”菜单，选择“New Reading”的“New Endpoint Protocol”项（此时酶标仪转为计算机控制模式）；在“Reading Parameters”处，设置各项参数： 单波长测定选择Single 双波长测定选择Dual 选择Measurement Filter项确定测量滤光片波长值 选择Reference Filter项确定参比滤光片波长值 本机目前配置的滤光片波长有四种： 1.405nm 2.450nm 3.540nm 4.630nm (另有490nm的滤光片可选用，需另行安装) 5.检查确认所设各参数无误，将酶标板放入仪器内（左上角为A1）关闭测量室的盖板（注意：不能将酶标板的盖子放入仪器内。） 6.点击Run键，仪器开始测定，测定完成后，显示出与酶 标板规格一致排列的各孔OD值。 7.可将数值用Copy命令复制后粘贴至Excel电子数据工作表上，或打开File菜单，运行Export 命令，选择相应的数据文件格式，按自己确定的路径和文件名进行保存。
8.取出酶标板，按关闭程序→关闭计算机→关闭酶标仪的顺序关机。 9.每次工作完毕，清洁工作台面，做好仪器使用记录。 四、关键词：酶标仪；操作 五、主要参考文献 酶标仪使用说明书:
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 Standard Operation of SpectraMax i3 部门签名/日期 Department Signature/Date 起草人: XX， Xiaochuan X Prepared by QC 审核人: XX， Sijia XX Reviewed by QC 审核人: XX， Fulan X Reviewed by QA 批准人: XX， Boyan XX Approved by 质量负责人 颁发部门执行日期质量保证部-QA Issued by Effective Date 替换文件复审日期 Version 00 Replaced For Review Date 分发部门 QA，QC Distributed to 1 of 7 编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪 检测时的操作。 2 适用范围
本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧 光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现 "Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。
酶标仪的工作原理及基本结构
酶标仪的工作原理及基 本结构 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
酶免测试的工作原理 吸光度测试的准确性对于酶免测试结果的重要性 酶标仪的组成部分和工作原理 第一节比色分析的基本理论 许多化学物质具有颜色，有些无色的化合物也可以和显色剂作用而生成有色物质。事实证明，当有色溶液的浓度改变时，颜色的深浅也随着改变。浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。如纳氏管比色法，它是按浓度由高到低，配好一系列标准浓度管，然后拿待测样品和标准管逐个比较，看和哪一个标准管的颜色最相近，便读取该标准管的浓度值为待测样品的浓度值，这就是（目视）比色法。这种方法虽然比较简便，但是系列标准管不易保存，误差较大。后来改用光电检测元件代替目视来测量被测溶液中物质的含量，这种方法叫光电比色法。利用这种方法制成的仪器叫光电比色计。 光电比色计属于吸收光谱仪器范围。 一、光的性质 从物理学中我们知道，光具有波动和微粒两种性质，通称光的波粒两象性。在一些场合，光的波动性比较明显；在另一些场合，光则主要表现为微粒性。 首先，光是一种电磁波。可以用描述电磁波的术语，如振动频率（υ）、波长（λ）、速度（c ）、周期（T ）来描述它。我们日常所见到的白光，便是波
长在400～760nm之间的电磁波，它是由红橙黄绿青蓝紫等色，按照一定比例混合而成的复合光。不同波长的光被人眼所感受到的颜色是不同的。在可见光之外是红外线和紫外线。各种色光及红外线、紫外线的近似波长范围如表1所示。 表1 各种色光及红外线、紫外线的近似近波范围单位：nm 除了波动性外，光还具有微粒性。在辐射能量时，光是以单个的、一份一份的能量（E＝hυ）的形式辐射的。式中υ是光的频率，h为普朗克常量。同样，光被吸收时，其能量一份一份地被吸收的。因此，我们可以说，光是由具有能量（hυ）的微粒所组成的，这种微粒被称为光子。由式中可知，不同波长的光子具有不同的能量。波长越短，即频率越高，能量越大。反之亦然。光子的存在可以从光电效应中得到充分的证明。 二、光的互补及有色物质的显色原理 若把某两种颜色的光按照一定的比例混合，能够得到白色光的话，则这两种颜色的光就叫做互补色。图1中处于直线关系的两种光为互补色。如绿光和紫光为互补色，黄光和蓝光为互补色等等。
酶标仪操作步骤
酶标仪操作步骤： 一.打开酶标仪开关，仪器开始自检，； 二.打开电脑，点击桌面上的KCjunior软件，出现带This product is licensed to huashida gene 三.界面有5个选项－Read Plate, Open Results, New Protocol, Open Protocol, Modify Protocol；5270201字幕的对话框，单击OK,进入软件界面； 四.如果初次检测，单击New Protocol建立方法；如果有建好的方法，单击Modify Protocol； 五.建立方法 1.单击New Protocol后进入Protocol Definition对话框，在General Information菜单下输入Protocol Name, Protocol Description中输入对此方法的描述，不需要此项可空； 2.在Read Method菜单下设置读板方法(有End Point, Multiwavelength, Dynamtic等)； 3.在Primary Wavelength中输入主波长，如有参比波长(Reference Wavelenth)也输入； 4.在Template菜单下的Well Type Selection中，根据多孔板的位置选择所设定的Blank和待测的Sample； 5.在Shake Mode处，还可以选择震动模式和强度；建好方法后，点击确定。 六.读取数据 将多孔板放入酶标仪，其缺角与托架上的对应；单击Read Plate，在Result ID中随便输入信息或缺省，在Plate Number中输入板号后，多孔板进入仪器开始读取数据。 七.数据输出待酶标仪读取完数据后，多孔板托架自动弹出，选择Results菜单下的Exoport Date,即将所测数据导入至Excel表格；保存所测数据，关闭KCjunior软件，此时也可将建立的方法进行保存。八.关闭仪器
取下多孔板，轻按酶标仪开关上方的小按钮，托架滑入仪器，这时关闭仪器开关，最后关闭电脑及显示器开关。