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EDF和HDF的合成

对荧光素进行衍生

2．1 中间产物异硫氰酸荧光素乙二胺fluoresceinthiocarbamyl ethylenediamine(EDF)的合成反应式见图：

图. EDF合成过程

Figure. The synthesis of EDF

具体步骤：

（1）配制甲醇三乙胺溶液，三乙胺浓度为10mL/L。

（2）将70ul乙二胺和35.1gFITC，分别溶于15mL甲醇三乙胺溶液和3mL甲醇三乙胺溶液中。

（3）将FITC溶液逐滴(约每20秒一滴)加到三乙胺溶液中，40度油浴避光搅拌反应，刚投料后TLC监控一次（用稀FITC溶液作对照，以后每次都是），随后每隔30 min TLC 监测一次，直至FITC点消失,将反应液继续反应过夜后TLC监控一次。

（4）旋转蒸发浓缩反应液（旋干！！），用展开剂乙酸乙酯:甲醇＝3:1展开，观察有新物质产生。

（5）装一个短而粗的层析柱，用乙酸乙酯:甲醇＝3:1冲洗，待下边黄色FITC带下来后，将色谱柱最上层红黄色带刮下来，放入离心管用甲醇震荡冲洗，离心收集上清，反复冲洗离心3-5次，合并上清。

（6）将上清液旋转蒸干，即得到粉末状纯化后的EDF

2．2 中间产物异硫氰酸荧光素己二胺fluoresceinthiocarbamyl hexylenediamine (HDF)的合成反应式见图：

图. HDF合成过程

Figure. The synthesis of HDF

具体步骤：

（1）配制甲醇三乙胺溶液，三乙胺浓度为10mL/L。

（2）将13.56mg己二胺和35.1mgFITC，分别溶于15 mL和3 mL上述甲醇三乙胺溶液中。（7）将FITC溶液逐滴(约每20秒一滴)加到己二胺的三乙胺溶液中，40度水浴或油浴)避光搅拌反应，刚投料后TLC监控一次，展开剂乙酸乙酯:甲醇＝3:1展开（用稀FITC溶液作对照，以后每次都是），随后每隔30 min TLC监测一次，直至FITC点消失。将反应液继续反应过夜后TLC监控一次。

（8）旋转蒸发浓缩反应液（旋干！！），用展开剂乙酸乙酯:甲醇＝3:1展开，观察有无新物质产生，是否还有FITC存在；若无，则不用进行下步。

（9）若仍有FITC存在，则装一个短而粗的层析柱，用乙酸乙酯:甲醇＝3:1冲洗，待下边黄色FITC带下来后，将最上层红黄色带刮下来，放入离心管用甲醇震荡冲洗，离心收集上清，反复冲洗离心3-5次，合并上清。

（10）将上清液旋转蒸干，即得到粉末状纯化后的HDF

实验过程照片

此处F 为直接用FITC 粉末用甲醇溶解，F ×为有三乙胺的FITC 溶液

入甲醇溶解后点样。

此图为过夜后监控，其中中间的点为Array EDF，两边的点均为HDF

下图为EDF柱层析过程图片：

CNKI系列数据库应用指南.doc

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万方数据库使用指南万方数据资源系统由科技信息子系统、数字化期刊子系统以及商务信息子系统构成。科技信息子系统科技信息子系统是中国唯一完整的科技信息群。汇集科技文献、科研机构、科技成果、科技名人、中外标准、政策法规等数百种数据库，信息总量达1100多万条，每年数据更新60万条以上，为科技工作者、高校师生提供最丰富、最权威的科技信息。主要包括：《中国科技成果库》、《中国学位论文库》、《中国学术会议论文库》、《中国国家标准》、《中国科技文献库》等。数字化期刊子系统数字化期刊目前已集纳了理、工、农、医、人文等5大类的2000多种科技期刊，实现了全文上网，主要有：中华医学会系列杂志、大学学报、中国科学系列杂志、科学普及期刊等。商务信息子系统商务信息子系统包括工商咨询、经贸信息、成果专利、咨询服务等服务内容，其主要产品《中国企业、公司及产品库》至今已收录96个行业近20万家企业的详尽信息，成为中国最具权威性的企业综合信息库。内容主要包括中国企业公司及产品数据库、经贸信息。科大图书馆已经建立《万方数据资源系统》镜像站点，数据月更新，校内任何一台网络计算机都可通过校园网，免费检索数据库、浏览数字化期刊全文。建议用户使用IE4.0以上的网络浏览器。显示、下载全文，需先安装“Acrbat全文浏览器”。一、进入检索界面由图书馆主页的“电子资源”栏目下链接万方数据库或输入镜像站点网址http:/210.45.210.3:85/ ，进入《万方数据》镜像主页，再根据需要选择相应的子系统进入即可。二、科技信息子系统及商务信息子系统检索方法： 1．选择数据库：进入相应栏目资源总览区直接点击选取数据库，如选择学术会议数据库； 2．确定第一个关键字的检索方式：在数据库检索提问表单的第一个字段选择列表框中按下拉箭头选择；比如选择“标题”； 3．输入第一个检索关键词（字）：在数据库检索提问表单的第一个查询关键字框中输入关键词（字），比如“电机” 4．确定词间关系：在逻辑运算选择列表框中选择“与”、“或”、“非”，比如选择“与”； 5．确定第二个关键字的检索方式：在第二个检索字段列表框中做出选择，比如选择“全文”； 6．输入第二个检索关键词（字）：在数据库检索提问表单的第二个查询关键字框中输入关键词（字），比

数据库用户使用手册

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3.1 安装准备 (3) 3.2 硬件安装 (3) 4. 软件安装 (3) 5. 使用指南 (4) 5.1 概述 (4) 5.2 处理过程 (4) 5.2.1 XXXX.. 4 5.2.2 XXXX.. 4 5.3 出错处理 (4) 6. 附录 (5)

1. 目的 [说明本用户手册的编写目的。] [示例：“《用户手册》将向用户介绍TOP ABC 软件，并帮助用户迅速安装和运行该软件。通过本手册，您将学会如何使用视觉控制等崭新功能，并为您提供软件使用中遇到的问题的解决办法以及获得资源与帮助的渠道。” ] 1.1 阅读对象 [说明本手册的预期阅读对象。] [示例：“本手册的编写对象为期望通过Intranet 或Internet 进行动态数据操作的用户。手册中也为不太熟悉Internet 的用户提供了基本的教程。” ] 1.2 如何使用本手册 [说明本手册的阅读方法，要求针对不同类型的用户提供相应的使用指导。] [示例：“您既可按顺序阅读每一章，也可根据索引中的词条直接获得所需的信息。下表可以指导您使用本手册。] 1.3 相关文档 [说明与本手册使用相关的其他文档，包括名称、版本、与本手册的关系等。] [示例：“×××软件提供了纸制印刷文档（本手册）与多种在线格式的用户手册。在线用户手册内容更为完整和即时，如果本手册与在线用户手册有区别，您应按在线用户手册的说明进行操作。您可经常访问Web 站点： 1.4 约定 [说明有关本手册使用的一些约定，包括对用户了解相关知识的约定；本手册文字格式、图表含义的约定；有关本软件使用的惯用语法约定等。]

全文数据库简介及使用指南

CNKI全文数据库简介及使用指南目录一、CNKI数据库简介二、CNKI操作指南 1、初次使用 2、单库检索 3、跨库检索 4、初级检索 5、高级检索 6、专业检索 7、文章下载三、常见问题解答一、CNKI数据库简介中国知识基础设施工程，China National Knowledge Infrastructure，简称CNKI工程，是以实现全社会知识信息资源共享为目标的国家信息化重点工程，被国家科技部等五部委确定为“国家级重点新产品重中之重”项目。 CNKI工程于1995年正式立项。内容涵盖了我国自然科学、工程技术、人文与社会科学期刊、博硕士论文、报纸、图书、会议论文等公共知识信息资源；用户遍及全国和欧美、东南亚、澳洲等各个国家和地区，实现了我国知识信息资源在互联网条件下的社会化共享与国际化传播，使我国各级各类教育、科研、政府、企业、医院等各

行各业获取与交流知识信息的能力达到了国际先进水平。 CNKI全文数据库现已在我院建立本地镜像站点，该镜像站点内含《中国学术期刊全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国重要会议论文集全文数据库》、《中国工具书》四个子库。其中；《中国学术期刊全文数据库》子库，是目前世界上最大的连续动态更新的中国期刊全文数据库，收录国内1979年至今约7000多种核心期刊与专业特色期刊的全文，所有文献按类分为理工A、理工B、理工C、农业、医药卫生、文史哲、经济政治与法律、教育与社会科学、电子技术与信息科等九大专辑，数据月更新。《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》子库：收录全国300家博士培养单位的优秀博/硕士学位论文，是目前国内相关资源最完备、高质量、连续动态更新的中国博硕士学位论文全文数据库，目前我馆已镜像有文史哲、政经法等社科专辑和图书馆专题的全文数据。《中国重要会议论文集全文数据库》子库：收录我国1999年以来国家二级以上学会、协会、高等院校、科研院所、学术机构等单位的论文集。《中国工具数据库》，镜像有常用的工具书109本。进入CNKI全文数据库的方式：从学校的主页(https://www.wendangku.net/doc/5c8180696.html,)进入，点击“图书资源”，进入图书馆主页，选择主页中的“中文电子期刊”下的“中国期刊网”（查询期刊全文）或“中外文电子图书”下的“中国优秀博硕士学位论文”（查询博硕士学位论文）进入。

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