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一、立项依据与研究内容

（一）项目的立项依据

DNA错配修复(mismatch repair, MMR)系统广泛存在于生物体中，它是细胞复制后的一种修复机制[1-3]。其功能是在含有错配碱基的DNA分子中切除配对错误的片段，然后通过DNA聚合酶和DNA连接酶等的作用，重新合成配对正确的片段，使DNA恢复正常的核苷酸序列。因此，它起着增强DNA复制保真度、修复DNA错配、降低基因变异和维持基因组稳定性的作用[4-5]。近来，MMR系统的研究越来越受重视，对MMR作用机制及该系统的组成结构与功能分析方面的研究正不断深入[6-8]。由于在越来越多的肿瘤(如卵巢癌、肠癌、肾癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、胰腺癌、胆囊癌、甲状腺肿瘤等)细胞中找到DNA MMR基因突变或缺陷的痕迹[9-11]。MMR系统与肿瘤的发生与恶化的关系成为近十年来的研究热点，MMR基因也成为继癌基因与抑癌基因之后被确认的第三类肿瘤相关基因[4]。

外源性的持续刺激是细胞复制出现DNA错配的重要原因之一，而日益严重的化学污染又使生物受到的外源毒素刺激与日俱增，生物细胞内DNA损伤与错配几率因而也急剧增加[12-15]。错配的DNA序列如果不能得到修复，将导致突变频率增加，基因突变事件放大，最终会引起肿瘤等相关疾病的发生发展。事实上，人类MMR系统不仅能识别多种需要进行核苷酸切除与重新合成的DNA错配，还能参与如O6-甲基鸟嘌呤和UV诱导的光产物等造成的DNA损伤的修复[16-19]。这说明MMR系统极可能参与了暴毒后DNA损伤的修复。另有研究显示，毒物暴露不但会使DNA错配概率显著提高而增加MMR系统的负荷，而且有些致癌物可能会直接损害MMR基因，使MMR活性降低甚至丧失。其中，Feitsma等

通过使用强致癌物乙基亚硝基脲来诱变获得MSH2、MLH1、MSH6和PMS2等MMR基因缺陷型斑马鱼就是一个重要的例证[20-26]。因此，日益严重的环境污染对生物及人类构成的健康风险之一可能就是阻断或干扰细胞的DNA MMR活性。然而，目前将DNA MMR活性分析与环境毒理学相结合的研究在国际上仍为空白，这与当前DNA MMR活性分析方法较为繁琐及环境毒理研究对所需的异源核酸分子的质与量要求很高有关。

除了本课题拟开展的活细胞DNA MMR活性分析技术以外，生物体MMR 功能的主要分析方法还有两种。第一种是以噬菌体M13mp2及其衍生株为材料[27-30]，该法利用噬菌体M13mp2及其一种衍生株作为材料，各自提供一条正链ssDNA和一条负链ssDNA，这两条ssDNA退火杂交后可形成一个带预设错配位点的环状异源dsDNA。将这种含错配碱基的异源dsDNA转入自身错配修复功能缺失的宿主菌(NR9160)，在培养平板上就会出现混合噬斑。若将这种异源dsDNA 与样本细胞提取物在体外作用后再次转化NR9162，样本细胞的MMR系统对错配位点的修复情况可通过指示板上的混合噬斑比率的变化来指示，进而分析样本的DNA MMR活性。第二种以寡聚核苷酸为材料[31]，该法采用人工合成的寡聚核苷酸来制备含有错配碱基的异源dsDNA，在错配碱基处预设特异性限制性内酶切位点．如果待测样本的MMR功能完整，其提取物在体外与这种异源dsDNA 作用后，在错配碱基得到修后异源dsDNA即变为同源dsDNA,预设的酶切位点也就同步恢复。通过电泳检测修复后的dsDNA的限制性酶切产物的有无和多少来对样本MMR功能做定性或初步的定量分析。

这两种方法自建立后，在一定程度上促进了对DNA MMR功能活性研究的发展，但也都存较大的局限性。首先，这三种方法均为体外法，不能准确反应生

物体内的真实状况。其次，分析过程复杂，需要多个步骤，而且指标参数的灵敏度和准确度都较低。由于这些方法仅限于特定生物体MMR活性的体外分析，很难在实际研究中广泛推广，这在一定程度上导致了国内在该研究领域力量比较薄弱的局面。但是，复旦大学的王怡等[32]曾运用上述第一个方法建立了一个类似的DNA MMR活性体外分析模型，用以对淋巴瘤细胞的DNA MMR活性进行分析。

为了克服突破这些限制，美国得州大学孙鲁浙教授领衔的研究团队于2004年提出了一种利用绿色荧光蛋白

(enhanced green fluorescent

protein，EGFP)基因作为报告基因

直接对活细胞DNA MMR活性进

行定量分析的模型[33]。该模型的原

理是构建一对EGFP基因真核表达

双链核酸分子，其中一个为碱基序

列正确的同源双链核酸分子，可以

在细胞中正常地表达EGFP；另一

个为带一个错配碱基的异源双链

核酸分子，这个错配碱基设计在EGFP基因的起始密码子处。将异源双链核酸分子导入活细胞，如果错配没有修复，细胞就不能表达EGFP。因此，把这对EGFP 双链核酸分子平行地导入细胞中，并检测其组间的EGFP表达率与表达强度，就可以评估该细胞株DNA MMR活性的强弱。绿色荧光蛋白的发明及其在生物学研究中的应用获得2008年度诺贝尔奖，将其用于DNA MMR活性的定量检测具

有显著的创新意念。但在随后的应用中，人们发现该模型的异源双链核酸分子存在一定的EGFP本底表达(即错配未修复也有一定量的绿色荧光蛋白表达)，原因是细胞内基因的表达并不完全依赖于起始密码子。此外，如何大量得到高纯度核酸分子也是制约该技术应用的一个瓶颈。近来，本课题组通过与孙教授的合作而引入此项技术。目前，本课题组已在此项技术的应用上获得了两项突破：(1)采取无义突变策略(在EGFP基因合适位置引入终止密码子)，建立了一种新的突变型EGFP表达质粒p189，运用质粒p111和p189所获得的异源双链核酸分子彻底消除了该模型EGFP的本底值问题[34]，达到了能精确区分MMR活性缺失的细胞株和正常的细胞株(见插图)；(2)开发出了一种为该模型大量制备高纯度ssDNA 的技术[详见前期基础]，为此项技术在毒理学及其它领域的推广应用提供了技术保障。

本项目拟在前期研究的基础上，为该EGFP双链核酸模型再引入一个红色荧光蛋白(red fluorescent protein, RFP)基因作为报告基因，构建一个全新的双荧光蛋白基因双链核酸分子(含有同时可表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的基因)。该模型的技术改进特点是：⑴让双链核酸分子自身多带了一个RFP报告基因，可直接定量指示转染效率，而当前技术需要采用与RFP表达质粒共转染的方法；

⑵只需要制备一种带错配的异源核酸底物，无需再制备一种无错配的同源核酸底物；⑶检测过程只需将异源核酸底物导入活细胞中，无需再设空白对照组和同源核酸底物组。由此可见，新模型的思路是将所有参数在一组细胞中同时获得，而原方法的不同参数需要在不同的细胞组中获得。因此，新模型由于所有参数完全同步而具更的精确度与灵敏度，而且还可起到简化分析和提高效率的作用。但是，

经过优化的检测模型在细胞毒理学研究方面的前景如何？这就需要进行科学与系统的验证与评估。

因此，本课题拟先用已知的强致癌化学污染物乙基亚硝基脲来验证该模型应用于细胞毒性研究的适用性，再用几种已知的具有DNA突变和致癌毒性的化学污染物(如铬(Cr)、镉(Cd)、砷（As）、多氯联苯(PCBs)、多环芳烃(PAHs)和DDT 等)及几种毒性较弱的新型持久性有机污染物(如全氟辛烷磺酸(PFOS)、多溴二苯醚(PBDE)和双酚A(BPA)等)来评估该模型应用于细胞毒性研究的优越性。如果活细胞MMR功能活性分析模型可以应用于环境毒理学研究中，我们不仅可为环境污染物的致突变毒性、遗传毒性与致癌毒性的定量评价增加一个强有力的选项，更可以在微观上发掘环境污染物生物毒性的分子机制。

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34. Zhou, B, Huang C, Yang J, Lu J, Dong Q,Sun L. Preparation of heteroduplex EGFP plasmid for in vivo mismatch repair activity assay. Anal Biochem, 2009, Available on line in February 26, 二)项目的研究内容、研究目标，以及拟解决的关键科学问题

1．研究内容

(1) 双色荧光蛋白表达质粒的构建：采用双顺反子克隆技术将p111和p189改造

成EGFP(绿色荧光蛋白)和RFP(红色荧光蛋白)基因顺反子表达质粒pEGFP-IRES-DsRed和pmtEGFP-IRES-DsRed，使EGFP和RFP处在同一条mRNA上同步翻译，得到的质粒pEGFP-IRES-DsRed可同时表达EGFP和RFP，而质粒pmtEGFP-IRES-DsRed由于EGFP基因上带有无义突变，只表达RFP。

(2) 活细胞DNA MMR活性双色荧光核酸表达分析模型的建立：用

pEGFP-IRES-DsRed获取ssDNA，与线性化的pmtEGFP-IRES-DsRed退火制备带缺刻的双荧光蛋白基因异源核酸分子，得到的双荧光蛋白基因异源核酸分子在EGFP基因上带有一个T/G错配。用上述所建立的双荧光蛋白基因异源核酸分子转染活细胞，每一个成功转染的细胞都会表达RFP。若该细胞具有错配修复能力，将T/G错配修复后，它就会同时表达EGFP。通过流式细胞仪检测EGFP和RFP表达情况，即可分析活细胞内的DNA MMR活性。

(3) 新模型应用于细胞毒理学研究的适用性研究：先用已知的强致癌化学污染物

乙基亚硝基脲(具有MMR基因突变毒性)来验证上述建立的活细胞DNA MMR活性检测新模型是否可以应用于细胞毒理学的研究。然后，再用已知

的具有DNA突变和致癌毒性的化学污染物(如Cd、As、PCBs、PAHs、DDT 等)以及毒性较低且致癌效应不明的新型污染物(如PFOS、PBDE、BPA等)来评估该模型应用于细胞毒理学研究的优越性。

2．研究目标：通过以上研究内容的实施，本课题将在建立活细胞DNA MMR活性分析新模型的基础上，验证与评估该项技术应用于细胞毒理学研究的前景与优越性。这不仅可为化学污染物的致突变毒性、遗传毒性和致癌毒性的定量评价提供一种新方法，而且还具有推广到癌症发病机制研究等领域的前景，以及在微观上发掘环境污染物生物毒性的分子机制。

3．拟解决的关键问题

(1) 本项目拟构建的双色荧光蛋白表达质粒在表达EGFP基因与RFP基因时，两

者必须同步，但又相对独立，一方的表达不会抑制或增强另一方的表达，即两个基因在表达时相互间不会出现拮抗或协同效应。因此，成功构建符合上述要求的双色荧光蛋白表达质粒是本项目的一个关键所在。

(2) 如果确认本项目建立的活细胞DNA MMR活性分析新模型在细胞毒理学研

究中具有应用前景，这必将为环境毒物致癌与致突变毒性的定量评价开辟一条新途径。此外，由于DNA MMR活性是许多肿瘤疾病发生与发展的诱因，该模型的建立与应用必然可以促进环境污染与疾病发生内在关联研究的进步。

(三)拟采取的研究方案及可行性分析

1．研究方案

(1) 双色荧光蛋白表达质粒的构建：

①实验材料：EGFP正常表达型质粒p111、无义突变型EGFP质粒p189、双

顺反子表达载体pIRES2-DsRed(clontech)、Pfu高保真DNA聚合酶、T4 DNA连接酶、DpnI内切酶、dNTPs(脱氧核糖核苷酸)和引物等。

②以pIRES2－DsRed载体为摸板，设计引物，扩增出含IRES表达元件的RFP

基因片段IRES-DsRed，对IRES-DsRed片段进行双酶切与纯化。

③对质粒p111和p189分别进行双酶切，回收大片段。然后，分别放到两个

无菌的EP管中，按照1：3的摩尔比例加入双酶切并纯化后的IRES-DsRed

基因片段，再加入T4 DNA连接酶，16℃过夜温育进行连接反应。

④从两管连接产物中各取10ng分别转染JM109感受态细菌，涂布LB上选

择平板，37℃过夜培养，筛选长出的单菌落。

⑤将单菌落分别接种于LB液体培养基中，37℃下震荡培养12小时，提取质

粒。酶切电泳鉴定后，再测序鉴定，并转染细胞验证。

⑥最终获得两种双荧光蛋白表达质粒，即由p111衍生而来的

pEGFP-IRES-DsRed(带有野生型的EGFP基因和RFP基因，能在细胞中

同时表达产生红绿两种荧光)和由p189衍生而来的

pmtEGFP-IRES-DsRed(带有无义突变型的EGFP基因和野生型RFP基因，在细胞内只能表达产生红色荧光)。

(2) 活细胞DNA MMR活性双色荧光核酸表达分析模型的建立：

①实验材料：步骤(1)中构建的双荧光质粒pEGFP-IRES-DsRed和

pmtEGFP-IRES-DsRed、缺刻酶、限制性内切酶BstXI、外切核酸酶

ExonucleaseⅢ、质粒安全性酶PSAD(Epicentre公司产品)等生化试剂。

②以质粒pEGFP-IRES-DsRed为底物，用缺刻酶充分酶切，使其模板链(“－”

链)上出现若干缺刻，紧接着用外切核酸酶ExonucleaseⅢ完全消化，使其模板链(“－”链)完全水解，纯化回收后得到单链环状的pEGFP-IRES-DsRed编码股(“＋”链)DNA。

③以质粒pmtEGFP-IRES-DsRed为底物，用限制性内切酶BstXI充分酶切，

使其完全变成线性化分子，浓缩回收。

④将上述②中得到的单链环状的pEGFP-IRES-DsRed编码股(“＋”链)DNA分

子与③中得到的双链线性的pmtEGFP-IRES-DsRed分子按照:1摩尔比混合置于PCR管中，在PCR仪中95℃高温变性5分钟。取出反应管，室温下自然冷却。冷却反应管中将产生单链环状的pEGFP-IRES-DsRed编码股(“＋”链)DNA分子与双链线性的pmtEGFP-IRES-DsRed分子中的模板链(“－”链)退火杂交形成的带一个缺刻的环状异源双链核酸分子。

⑤于反应管中加入PSAD酶，降解去除多余单链分子和双链线性分子，纯化

回收后得到高纯度的含双荧光蛋白表达基因的缺刻环状异源双链核酸分子，该核酸分子上的EGFP基因上将存在一个引入的T/G错配。

⑥将⑤中得到的核酸分子分别转染MMR活性正常细胞株(如Hela)和MMR活

性缺失细胞株(如Rko或HCT116)。用流式细胞仪分析产生红色和绿色荧光的细胞数量及荧光强度，即可用下列公式来定量各株细胞的DNA MMR 活性：

A = G × G m/R × R m

式中A为细胞株DNA MMR活性，G为能表达绿色荧光蛋白的细胞数，

G m为细胞表达绿色荧光蛋白的平均强度，R为能表达红色荧光蛋白的细

胞数，R m为细胞表达红色荧光蛋白的平均强度。这是因为MMR活性正

常或缺失的细胞株均会表达红色荧光蛋白，因而红色荧光蛋白的表达率与

表达强度即可代表转染较率，但只有具错配修复能力的细胞可表达绿色荧

光。因此，绿色荧光蛋白表达值与红色荧光蛋白表达值的比值可用于表达

细胞的DNA MMR活性。

(3) 新模型应用于细胞毒理学研究的适用性研究：

①细胞系：DNA MMR活性正常的细胞Hela、SW480和MDA-MB-231。

②化学污染物：乙基亚硝基脲、Cd、PCBs、DDT、PBDE、PFOS等。

③毒物工作液配置：溶于DMSO和去离子超纯水中，配成10 mM的工作母

液，-20℃下保存。使用时，将母液用细胞培养液稀释成各种浓度（浓度范围视毒物的毒性而定）的工作液，并用DMSO调整工作液中的DMSO浓度，使其含量均为％，DMSO对照液的DMSO浓度也为％。

③细胞培养与暴毒：细胞复苏后用DMEM培养基加10%胎牛血清培养1~2

周，传代。将不同浓度的毒物工作液、DMSO对照液和空白对照液分别添加至细胞培养基中，持续暴毒传代至第三或第四代。

④转染：采用脂质体介导法将双荧光蛋白异源核酸分子分别导入各组细胞，

培养24小时。

⑤检测：在荧光显微镜下观察红色与绿色荧光的表达情况，拍照记录。然后，

将细胞用胰酶消化，制成细胞悬液后，取样进流式细胞仪检测(每组进样30000个细胞)，获得红色与绿色荧光表达的细胞数和荧光平均强度等参数。

⑥按照上述公式[A = G × G m/R × R m]计算暴毒组、DMSO对照组和空白对照

组的DNA MMR活性，即可分析所测化学污染物是否具DNA MMR功能干扰效应。

2．技术路线

3．可行性分析

(1) 在前期基础方面，活细胞DNA MMR活性检测技术是本项目组主要成员孙鲁

浙教授及其所属研究团队创建的( 见参考文献34)。近来，申请者带领项目组建立一个新质粒p189，彻底消除了原模型EGFP本底值过高的问题( 见参

考文献35)，而且也在高纯度核酸分子大量制备技术上取得了突破性的进展。

此外，以细胞和斑马鱼作为模式生物的环境毒理学研究是本团队近期的研究重点。这些均为完成本项目的研究内容打下了坚实的基础。

(2) 在技术上，拟采用近年来发展起来的双顺反子克隆技术来构建双色荧光蛋白

表达质粒，即将EGFP基因和RFP基因通过IRES（内部核糖体进入位点）表达元件连接起来，置于一个共同的启动子下，使EGFP基因和RFP基因在同一条mRNA上转录出来，以解决两个基因的表达需要同步且相对独立的难题。

(3) 在工作量上，本研究团队在分子克隆、细胞培养、毒性评价等方面均积累了

比较丰富的经验，可在前期摸索等环节节省许多时间。一般来说，用一年多一点的时间来构建与验证新模型应该是足够的，因为我们已在运用分子克隆技术构建质粒和制备异源双链核酸分子上积累了经验。在新模型的适用性与优越性评价上，一种毒物的细胞暴毒过程（3~4代）只需2周左右，加上转染与流式细胞仪检测，整个过程不会超过3周。考虑到一些必要的工作准备和实验重复，一个人用2个月时间应该能用新模型完成一种毒物的DNA MMR活性负面效应的评价工作。因此，用三年时间来完成本项目的研究内容和达到相应的目标应该是合理的。

(4) 在仪器设备上，本项目申请单位拥有先进的BD FACSAria流式细胞仪、

Olympus Foluview FV-1000激光共聚焦显微镜、实时定量PCR仪、各种不同容量的冷冻高速离心机、二氧化碳培养箱及其它相关的分子生物学与细胞毒理学研究仪器与设备，完全可以满足本项目的研究所需。

(5) 在科学意义上，研究环境污染物对DNA MMR活性的影响，不仅可以定量评

价对象污染物的致突变、致癌与遗传毒性，还有助于从分子及细胞水平上阐述毒物的作用机制，可为环境污染物的生态安全与人群健康风险评估提供重要的科学依据。

(四)本项目的特色与创新之处

1．目前，已知的生物体细胞DNA MMR功能活性分析技术模型非常有限。其中，活细胞DNA MMR活性分析技术在这一领域具有非常高的新颖性。通过本团队的前期优化与技术攻关，该项技术已具备了推广应用的前景。通过双色荧光蛋白表达策略的进一步优化，该项技术有望在精确性、灵敏性、可操作性、经济性等方面大幅的提升，从而在生物体DNA MMR功能分析领域达到世界先进水平。

2．将活细胞DNA MMR活性分析技术应用于环境污染物的细胞毒理研究，旨在建立起以DNA MMR活性作为新的分子标志物的环境毒理研究新方法。目前尚无将生物体DNA MMR功能活性分析技术应用于毒理学的报道，因而其成果必将具有较高的分创新性和学术价值。

3．DNA MMR微观上是生物细胞内的一种分子机制，但宏观上却与许多肿瘤等病变的发生发展密切相关。将活细胞DNA MMR功能活性分析技术应用到环境毒理研究中，不仅有望建立环境污染物致癌毒性与遗传毒性的定量评价方法，更可以在微观上发掘环境污染物生物毒性的分子机制。

(五)年度研究计划及预期研究结果

1．年度研究计划

2010 2011 2012 科目

1-3 4-6 7-9 10-12 1-3 4-6 7-9 10-121-3 4-6 7-9 10-12

研究方案的设计与研究

√

工作的前期准备

双荧光蛋白表达质粒的

√√√√√

构建与鉴定

双荧光蛋白基因异源双

√√√√√√

链核酸分子的制备

环境污染物DNA MMR

√√√√√√√√

干扰效应的分析与评估

论文撰写与结题报告等√√√√√√√√2．预期研究成果

(1)建立活细胞DNA MMR活性双色荧光蛋白表达分析新模型，并使其在精确

度、灵敏度、可操作性和经济性等方面比原模型有大幅的提高。

(2)发表论文SCI收录论文4篇以上，总影响因子大于。

(3) 培养青年科研骨干2人以上，培养硕士4人以上。

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一、立项依据与研究内容 （一）项目的立项依据 DNA错配修复(mismatch repair, MMR)系统广泛存在于生物体中，它是细胞复制后的一种修复机制[1-3]。其功能是在含有错配碱基的DNA分子中切除配对错误的片段，然后通过DNA聚合酶和DNA连接酶等的作用，重新合成配对正确的片段，使DNA恢复正常的核苷酸序列。因此，它起着增强DNA复制保真度、修复DNA错配、降低基因变异和维持基因组稳定性的作用[4-5]。近来，MMR系统的研究越来越受重视，对MMR作用机制及该系统的组成结构与功能分析方面的研究正不断深入[6-8]。由于在越来越多的肿瘤(如卵巢癌、肠癌、肾癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、胰腺癌、胆囊癌、甲状腺肿瘤等)细胞中找到DNA MMR基因突变或缺陷的痕迹[9-11]。MMR系统与肿瘤的发生与恶化的关系成为近十年来的研究热点，MMR基因也成为继癌基因与抑癌基因之后被确认的第三类肿瘤相关基因[4]。 外源性的持续刺激是细胞复制出现DNA错配的重要原因之一，而日益严重的化学污染又使生物受到的外源毒素刺激与日俱增，生物细胞内DNA损伤与错配几率因而也急剧增加[12-15]。错配的DNA序列如果不能得到修复，将导致突变频率增加，基因突变事件放大，最终会引起肿瘤等相关疾病的发生发展。事实上，人类MMR系统不仅能识别多种需要进行核苷酸切除与重新合成的DNA错配，还能参与如O6-甲基鸟嘌呤和UV诱导的光产物等造成的DNA损伤的修复[16-19]。这说明MMR系统极可能参与了暴毒后DNA损伤的修复。另有研究显示，毒物暴露不但会使DNA错配概率显著提高而增加MMR系统的负荷，而且有些致癌物可能会直接损害MMR基因，使MMR活性降低甚至丧失。其中，Feitsma等

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申请书正文： 1项目名称 ****机理研究 3. 本项目研究目标，及其与申请者研究工作长期目标的关系 3.1总体目标 本项目旨在研究欠固结土中密集群桩的土拱效应及其对群桩负摩擦力的影响，通过解析、数值模拟、模型试验方法研究欠固结饱和软土地基中的群桩土拱产生机制，研究土拱的几何和力学特征，分析土拱对群桩负摩擦力的影响，从而揭示群桩负摩阻力的内在机理，为滩海围垦软土地基中群桩的设计与使用提供理论指导。 3.2具体目标 (1)掌握群桩的土拱产生机制和力学分析方法，为欠固结土中群桩的土拱效应存在及其作用机理提供理论依据。 (2)掌握群桩的土拱效应数值分析方法，实现欠固结软土地基中群桩土拱效应及其对群桩负摩擦力的影响的数值模拟。 (3)掌握土拱存在的试验证据及群桩负摩阻力的分布，为欠固结软土地基中群桩土拱效应分析和负摩阻力计算提供试验验证资料。 3.3与申请者研究工作长期目标的关系 本项目申请人长期从事桩土相互作用的理论与应用研究，研究工作的长期目标是研究 和发展适于滩海工程的桩基及相应的计算理论，而本项目的研究重点一群桩土拱效应与负 摩阻力机理研究是滩涂围垦区欠固结地基中桩土相互作用理论中基础规律研究的重要内容之一，与本项目组长期目标有着密切的联系。

4. 项目研究内容、研究方案和进度安排 4.1项目研究内容 本项目主要研究欠固结软土地基中群桩土拱效应机理及其对群桩负摩阻力的影响，研究内容包括欠固结土中群桩的土拱产生机制、群桩的土拱效应数值模拟及其对群桩负摩阻力遮拦效应的影响、欠固结土中群桩土拱效应与负摩阻力模型试验研究三部分，详述如下： (1)欠固结土中群桩的土拱产生机制及其形成条件研究。由于桩土间存在相对位移， 当土层沉降大于桩的沉降时，表现出负摩阻力特征，土体调动自身抗剪强度抵抗这一不均匀沉降，桩土界面构成摩擦拱脚，形成土拱。通过分析欠固结土中土拱的成拱机制，采用弹性理论结合极限平衡法建立土拱的力学模型，确定土拱的拱脚随欠固结土固结沉降发展而产生的位置变化关系，进而确定土拱的拱形和拱体参数，并分析群桩的桩间距、桩径、桩土摩擦角、粘聚力、中性点变化等对于土拱的影响。 (2)群桩的土拱效应数值模拟及其对群桩负摩阻力遮拦效应的影响。采用Abaqus有限 元分析软件建立3X3群桩的三维有限元计算模型，桩为弹性体，土体为饱和多孔介质，上下端面排水，本构关系服从摩尔库仑准则，考虑桩土的滑移作用，界面采用库仑摩擦模型，计算群桩的负摩阻力分布、应力场和位移场，分析土拱效应的产生条件及相关参数对土拱效应的影响，并对群桩的负摩擦力遮拦效应进行相关分析，揭示土拱效应对群桩负摩擦力 的影响，分析土层固结对负摩擦力的时间效应。 (3)欠固结土中群桩土拱效应与负摩阻力模型试验研究。欠固结土中群桩模型试验采 用3X3群桩试验，通过桩身应变、桩顶位移、土层位移、桩端压力、土层内部压力和孔压测试，总结桩侧阻力和桩端阻力的荷载传递特性，分析不同位置桩(角桩、边桩和中心桩) 的负摩擦力及其时间效应，验证群桩的土拱效应和遮拦效应。 4.2研究方案

科研项目申请书范例

科研项目申请书范例 【篇一：科研立项申请书范本】 计划编号： 华中师范大学科研基金项目 申请书 项目名称：中学生常规解题能力男女生差异的调查研究项目负责人：程佩所在学院：数学与统计学学院申请日期： 2011 年 5月 01日 类别：（√）自然科学类学术论文 （）科技发明制作 （）社会调查报告和社科类学术论文 中国共产党华中师范大学委员会 2011年制 大学生科研基金项目 大学生科研基金项目 大学生科研基金项目 .3. 大学生科研基金项目 【篇二：科研项目申请书示范.】 申请编号: 武警医学院科研项目申请书 (2004年度) 课题名称: 武警某部新兵心理健康促进模式研究 申请课题类别 （ a.总部 b.院级 c.青年 d.大学生） 协作单位: 武警天津总队六支队、青岛支队 研究期限: 2005年3月至 2006年12月 研究类别:（a.基础医学 b.临床医学 c.军事医学 d.预防医学 e.其它) 填表日期: 2004年11月10日 武警医学院 2003年11月制

一、摘要(限1页) 二、立项依据 【篇三：科研项目申请书范文精华版】 科研项目申请书范文(学校内部及省级课题均可以此 为模版） 学项目申请书 a：专著 b：编著 c：教材 d：工具书 e：参考书 f：古籍整理 g：论文h：研究报告 i：调查报告 j：新产品 k：新技术、新工艺 l： 其他字号：小四号，字体：仿宋_gb2312。 一、简表 二、立论依据保护性耕作是对农田实行免耕、少耕及其它措施，尽 可能减少土壤耕作，并用作物秸秆、残茬覆盖地表，减少土壤风蚀、水蚀，提高土壤肥力和抗旱能力的一项先进农业耕作方法。目前主 要应用于干旱、半干旱地区农作物生产及牧草的种植。在棉花生产 过程中与保护性耕作技术内容相结合，即能达到保土保水的目的， 又能符合当地农艺的要求。棉花保护性耕作模式以保墒、增温和除草，防止土壤板结、流失，减少沙尘产生量，提高水分利用率及养 分利用效率为主要目标，综合实施保护性耕作的深松、地膜覆盖播 种等多项技术措施。保护性耕作起源于美国。十九世纪末，美国实 施西部大开发，大量干旱半干旱草原被开垦成农田，虽然获得了几 十年不错的粮食产量，但是由于植被破坏、土地大量翻耕，土壤退化，２０世纪３０年代，干旱、贫瘠、细碎的裸露农田难以抵挡大 风的袭击，成千上万吨表土被刮走，沙尘遮天蔽日，酿成了震惊世 界的“黑风暴”（强沙尘暴天气）。“黑风暴”推动了人们对传统耕作 方法的反思和对保土保水新方法的探索。经过多年的研究，美国科 学家确认是铧式犁翻耕破坏了土壤结构和地表植被，使得土壤缺乏 抵抗干旱和大风天气的能力。由此，逐步创立了以秸秆、残茬覆盖 和免耕播种为核心的保护性耕作，并发展成为美国主流的耕作制度。２０世纪８０年代以后，保护性耕作逐步推广应用到７０多个国家，据ＦＡＯ统计，目前，全世界保护性耕作应用面积达到１．６９亿 公顷，占世界总耕 等, 着重研究农艺技术本身及其对土壤养分、土壤温度、土壤生物群 落结构、土壤水分动态和产量的影响及生态经济效益的评价等方面。在少免耕、等高耕作、沟垄耕作等保护性土壤耕作, 留茬覆盖和秸秆 覆盖等覆盖耕作及间套混、轮作、复种和休闲填茬等方面有了长足

大学生科研基金申请书

附件1 编号： 信阳师范学院 大学生科研基金项目申请书 项目类别：（划√）项目层次：（划√） 1.人文社会科学研究 1.一般项目 2.自然科学研究√ 2.重点项目 3.科技发明与科技制作 所属学科：地理学 项目名称：基于城市污水中有机磷形态分布特征及其影响因素 的研究 申请者：袁冯 所学专业：自然地理与资源环境 学院名称：城市与环境科学学院 申请日期：2015年5月 信阳师范学院制

论证报告 填写及打印说明： 1.按以下顺序填写，总字数不超过3000字，填写内容较多纸面不够时可另行附页。 2.文学艺术类项目申报人可自行设计报告格式。 3.《申请书》排印规格为297mm×210mm(A4纸)，除签章、盖章之外，其余内容一律宋体5号字打印。《申请书》和相关支撑材料于左侧装订成册。 一、本项目研究本项目的实际意义和理论意义 1.实际意义 随着人口的日益增长，工业化水平的日益提高，用水量也在不断增加。同时由于人们的生产和生活，导致水体污染日趋严重，有机磷释放量也不断上升。因此，检测水体中有机磷含量对水质标准的检测具有重要意义，通过此项研究，能更清楚的认识到有机磷分布特征及其影响因素，以减少其污染程度，保护水资源，呵护人类饮水健康。 2.理论意义 水体有机磷主要来源于有机磷农药的过度使用，其在农业上的广泛使用对生态环境造成污染，并通过环境迁移和食物链向动物传递，对人类健康造成威胁。目前对有机磷的检测主要集中与人们常接触的农药残留，蔬菜水果等，而对其在污水中的分步和影响因素等却少有研究。 课题小组将通过系列实验，对污水中中有机磷形态分布特征及其影响因素进行研究，使人们更清楚的认识到有机磷的污染程度，并积极采取防御措施，呵护人类健康。 二、本项目的研究内容、特色和创新之处，预计突破哪些难题 1.研究内容 通过对城市污水体进行取样，运用气相色谱法，采用氮磷检测器，对有机磷含量进行检测。在此基础上，主要研究污水中有机磷形态分步特征及其影响因素，ph和溶解氧对污水中磷释放的影响。 2.特色和创新之处 采用气象色谱法（Gus Chromatography, GC）,利用经提取、纯化后的水样注入气象色谱柱，程序升温气化后，不同的的有机磷在固定相中分离，经不同的检测器检测口扫描绘出气相色谱图，通过保留时间来定性，通过峰高或峰面积与标准曲线对照来定量。 3.预计突破哪些难题 （1）制定监测方案，并设置监测断面和采样点，同时确定好采样时间和采样频率； （2）利用气相色谱法检测过程中，检测器在测量气流不同组分及其含量时较为敏感，是气象

科研项目课题基金申请书(标书)的撰写

科研项目课题基金申请书的撰写（标书）

科研项目课题基金申请书（标书）的撰 写 科研经费拨款制度改革以后，国家、有关部门和单位都列入竞争的体制，推行课题招标合同制，故将《科研项目课题基金申请书》，统称为标书（bid sheets ，research protocol ）。在进行招标时，都要确定重点研究的课题，医药卫生科技人员，根据招标部门所规定的范围、内容和要求，结合自己科研工作的优势，选择课题（可以是分解的子课题），书写标书，进行投标。除国家重点课题外，还有一部分自选课题，完全由科技人员根据自己工作特长及实力和本单位的需要自行选定，而后投标竞争。为提高中标的概率，在投标之前，一定要对投标情况作一个详细的了解。 一、制定课题基金申请书的步骤 （一）论证课题 1. 国家重点科技攻关项目计划这是由国家计划部门和国家科委等根据国民经济发展的需要，在各部门科技发展规则的基础上，经过调查研究，收集资料，包括在情报部门、科技主管部门、同类研究单位，以及向专家的调研，综合分析，组织论证，并进行综合研究和平衡后，而编制的攻关项目计划。这是作为国民经济和社会发展计划的一个组成部分，由国务院批准后，提交人大通过而下达实施，这类课题，如“八五”、“九五”国家重点科技攻关课题 此外，各部门的课题仍然需要调查研究、综合分析、组织论证方式，确定各部门的重点课题，便于有关单位投标竞争。 2. 个人选题在临床医疗工作中，常会遇到一些疑难问题，就应该提 出问题，捕捉联想，形成一种意念；随之查阅文献，建立假说，选择科学手段来证实假说。这样在有了科学的假说、证实假说的手段、合理的构思，再用确切的文字表达主体来确定课题，这就是个人选题、立题的基本过程。在确定选题以后，准备申报标书之前，为了增加获准的机会，应该初步写一份意向书，在本科室有关人员之间进行讨论，论证本课题的科学性以及证实假说的手段是否恰当，这样有利于标书的科学性和完整性。但是，有一些临床科技工作者，自选课题后，查阅资料闭门造车埋头书写标书，既不想找上级讨论，更不愿在科室集体讨论，自以为标书一定合格。这类的标书上报，很多是不合格的，甚至连院部的评审都不能过关，当然更不可能得到资助，这样的标书上报，很多是不合格的，甚至连院部的评审都不能过关，当然更不可

2018年国家自然科学基金申请书模板

报告正文 参照以下提纲撰写，要求内容翔实、清晰，层次分明，标题突出。请勿删除或改动下述提纲标题及括号中的文字。 （一）立项依据与研究内容（建议8000字以下）： 1．项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景。附主要参考文献目录）； 2．项目的研究内容、研究目标，以及拟解决的关键科学问题（此部分为重点阐述内容）； 3．拟采取的研究方案及可行性分析（包括研究方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明）； 4．本项目的特色与创新之处； 5．年度研究计划及预期研究结果（包括拟组织的重要学术交流活动、国际合作与交流计划等）。 （二）研究基础与工作条件 1．研究基础（与本项目相关的研究工作积累和已取得的研究工作成绩）； 2．工作条件（包括已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径，包括利用国家实验室、国家重点实验室和部门重点实验室等研究基地的计划与落实情况）； 3．正在承担的与本项目相关的科研项目情况（申请人和项目组主要参与者正在承担的与本项目相关的科研项目情况，包括国家自然

科学基金的项目和国家其他科技计划项目，要注明项目的名称和编号、经费来源、起止年月、与本项目的关系及负责的内容等）； 4．完成国家自然科学基金项目情况（对申请人负责的前一个已结题科学基金项目（项目名称及批准号）完成情况、后续研究进展及与本申请项目的关系加以详细说明。另附该已结题项目研究工作总结摘要（限500字）和相关成果的详细目录）。 （三）其他需要说明的问题 1. 申请人同年申请不同类型的国家自然科学基金项目情况（列明同年申请的其他项目的项目类型、项目名称信息，并说明与本项目之间的区别与联系。 2. 具有高级专业技术职务（职称）的申请人或者主要参与者是否存在同年申请或者参与申请国家自然科学基金项目的单位不一致的情况；如存在上述情况，列明所涉及人员的姓名，申请或参与申请的其他项目的项目类型、项目名称、单位名称、上述人员在该项目中是申请人还是参与者，并说明单位不一致原因。 3. 具有高级专业技术职务（职称）的申请人或者主要参与者是否存在与正在承担的国家自然科学基金项目的单位不一致的情况；如存在上述情况，列明所涉及人员的姓名，正在承担项目的批准号、项目类型、项目名称、单位名称、起止年月，并说明单位不一致原因。 4. 其他。

自然基金申请书模板

自然基金申请书模板 篇一：最新国家自然科学基金申请书模板 国家自然科学基金 申请书 20XX 资助类别： 亚类说明：附注说明 项目名称：申请者：电话：依托单位：通讯地址：邮政编码：单位电话：电子邮件： 申报日期： 国家自然科学基金委员会 基本信息 项目组主要参与者（注: 项目组主要参与者不包括项目申请人） 说明: 高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请人负责填报（含申请人），总人数由各分项自动加和产生。 经费申请表（金额单位：万元） 报告正文 （一）立项）依据与研究内容（4000-8000 字）： 1. 项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发

展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景。附主要参考文献目录） 2. 项目的研究内容、研究目标,以及拟解决的关键科学问题。（此部分为重点阐述内容） 篇二：国家自然基金项目申请书模板 国家自然科学基金 申请书 年月日 国家自然科学基金委员会 申报日期： 200 国家自然科学基金申请书 第 2 页共 7 页 国家自然科学基金申请书 说明: 1. 高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请者负责填报，总人数自动生成。 2. 第一人必须是申请者，信息从前面自动读入。 第 3 页共 7 页 第 4 页共 7 页 报告正文 （一）立项依据与研究内容（4000-8000字）： 1、项目的立项依据（附主要的参考文献目录）。 2、项目的研

究内容、研究目标,以及拟解决的关键问题。 3、拟采取的研究方案及可行性分析。 4、本项目的特色与创新之处。 5、年度研究计划及预期研究结果。 （二）研究基础与工作条件 1、工作基础 2、工作条件 3、申请人简历 4、承担科研项目情况 第 5 页共 7 页 篇三：国家自然科学基金申请书格式模板范文 资助类别：亚类说明：附注说明： 项目名称：申请者：依托单位：通讯地址：邮政编码：电子邮件： 申报日期： 国家自然科学基金 申请书 20XX 电话：单位电话： 国家自然科学基金委员会 基本信息 项目组主要参与者（注: 项目组主要参与者不包括项目申请人） 说明: 高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请人负责填报（含申请人），总人数由各分项自动加和产生。

2018国家社科基金申请书模板填写指南

-- 注意：1.请下载2017年12月修订的《申请书》填写。 2.勿改变《申请书》现有字体。打印时如出现字体参差，请添加华文中宋字体。 3.封面横线填写文字居中排列。课题较长如需换行，请注意合理拆分词组。 4.《申请书》中共8表，排版分页请确保表格的完整性；表提示文字请勿删除。 社会科学基金项目 申请书 学科分类填一级学科名称(交叉学科填主要涉及学科) 项目类别五选一：重点项目、一般项目、青年项目、 一般自选项目、青年自选项目 课题名称准确、简明反映研究容，一般不加副标题 不超过40字 申请人姓名本人姓名，中间不空格 申请人所在单位xx大学 填表日期统一填写：2018年2月28日 全国哲学社会科学规划办公室制 2017年12月

课题负责人承诺： 我承诺对本申请书填写的各项容的真实性负责，保证没有知识产权争议。如获准立项，我承诺以本申请书为有法律约束力的立项协议，遵守全国哲学社会科学规划办公室的相关规定，按计划认真开展研究工作，取得预期研究成果。全国哲学社会科学规划办公室有使用本申请书所有数据和资料的权利。若填报失实、违反规定，本人将承担全部责任。 课题负责人（签章）(每份都要本人手 写签名) 2018年2月28日 填写说明 一、《申请书》请用计算机填写，所用代码请查阅《社会科学基金项目申报数据代码表》，所有表格均可加行加页，排版清晰。 二、封面上方两个代码框申请人不填，其他栏目请用中文填写，其中“学科分类”填写一级学科名称，“课题名称”一般不加副标题。 三、《数据表》的填写和录入请参阅《填写数据表注意事项》，相关问题可咨询当地哲学社会科学规划办公室。 四、《课题论证》活页与《申请书》中“表二.课题设计论证”容略有不同，请参阅表具体说明。 五、《申请书》报送一式5份，统一用A3纸双面印制、中缝装订，《课题论证》活页夹在申请书。各省（区、市）报送当地哲学社会科学规划办公室，新疆生产建设兵团报送兵团哲学社会科学规划办公室，在京中央机关及其直属单位报送中央党校科研部，在京部属高等院校报送教育部社科司，中国社

国家自然科学基金申请书范本

项目类别申报学科代码1 科学部编号 C C03030310 国家自然科学基金 申请书 项目名称：MSC对先天性巨结肠症肠道神经组织重建的实验研究 申请者： 所在单位： 邮政编码：410016 通讯地址：重庆市渝中区医学院路１号 电话： 4 传真： 6 申请日期：2000年12月 国家自然科学基金委员会 一九九七年制

填报说明 一、填写申请书前，请先查阅国家自然科学基金有关项目申请办法及规定。申请书各项内容，要实事求是，逐条认真填写。表达要明确、严谨，字迹要清晰易辨。外来语要同时用原文和中文表达。第一次出现的缩写词，须注出全称。 二、申请书为十六开本，复印时用B5复印纸，于左侧装订成册。第三页起各栏空格不够时，请自行加页。一式六份（至少一份为原件），由所在单位审查签署意见后，按申报学科投送国家自然科学基金委员会对口科学部。地区科学基金项目，申请书另报送省（自治区）科委一份原件。 三、封面右上角“科学部编号”由对口科学部填写，项目类别和申报学科代码1由申请者填写。 四、下列人员不得作为申请项目的负责人提出申请，但可作为项目组成员参加研究： —在读（含在职）研究生 —已离退休的科研人员 —申请单位的兼职科研人员 五、申请者和项目组中具有高级专业技术职务的主要成员申请（含参加）的项目数，连同在研的国家自然科学基金项目数（不含重点项目、重大项目），不得超过两项。 六、同一项目组研究内容相近的项目，只允许报送一个学科。 七、申请者可因同类项目竞争等原因，提出不宜评议本项目的专家名单（姓名与单位，3人以内），密封于信封中，钉在申请书原件封面，或另专函相关学科，供科学部选择同行评议人时参考。科学部将对此信息保密。 八、国家自然科学基金委员会通讯地址：北京市海淀区花园北路35号东门 邮政编码：100083

如何写国家自然基金申请书研究方案部分

如何写国家自然基金申请书研究方案部分 1、研究目标要明确要精，提法要准确、恰当；内容要详细但文字不宜过多，且一定不能写得太具体。关键的问题要突出，一定要准确，且要有一定难度，但不必写的太具体，否则有时会出现mission impossible。 2、可行性分析是你说服评委的第二次机会，可按成熟的理论基础（理论上可行）、研究目标在现有技术条件下的可实现性（技术上可行）、本单位现有技术设备实验材料的完备（设备材料可行）、课题组成员完成课题能力（知识技能上可行）等几方面分层论述。可以找一家比自己单位强的合作伙伴，把他们的软硬件条件也加进去。 3、创新点要切合实际，又要有所发挥了，但语气要肯定，指出国际国内研究的先进性和创新性，点明理论和现实意义。 4、研究内容要集中，与研究目标紧密一致，只作支撑课题最关键最必要的内容。不可为多作实验显示劳动量或增加预算而使研究内容过泛 5、实验方案和技术路线合理、可靠、可行，没漏洞是最重要的。思路好，材料独特，方法独特新颖，会增加获得资助的机会。技术当然是越新越好，但未必需要采用最时髦的研究手段，不能为了技术而研究。 6、研究内容及方案切忌复杂，步骤最好有一流程图。研究方法、技术路线、实验方案不能太具体化，容易出漏洞。但你必须让评委认为你十分了解实验技术的整个过程，可以尽可能多的应用技术术语和技术缩写，写出主要实验材料和实验过程。 7、技术方法一定是本实验是已经建立的，至少是有相关实验基础，或虚拟的基础。所有关键技术要有文献出处，最好是自己实验室发表的，有文献就等于没有疑问。如果本单位力量弱，可挂靠较强的研究机构，从而使评审相信你能完成课题。关键实验材料必须已经具备，或可以获得。这些问题应该附有相应的证据（如MTA）。

省自然科学基金项目申请书格式

申请书正文（请勿删除“申请书正文”五字）

一、一般项目申请书正文撰写提纲 1．项目名称 2．研究工作的科学意义（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景）

3．本项目研究目标，及其与申请者研究工作长期目标的关系 4．项目研究内容、研究方案和进度安排（包括有关方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明，年度研究计划） 5．项目创新之处 6．工作基础与工作条件（与本项目相关的研究工作积累，已具备的研究支撑条件） 7．预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路（阐述研究结果的形式，如何充分利用可能得到的研究结果，拟通过何种资助渠道继续开展研究工作，预期发表的主要相关论文应与简表填写内容一致） 二、青年基金项目申请书正文撰写提纲 1．项目名称 2．研究工作的科学意义（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景） 3．本项目研究目标，及其与申请者研究工作长期目标的关系 4．项目研究内容、研究方案和进度安排（包括有关方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明，年度研究计划） 5．项目创新之处 6．工作基础与工作条件（与本项目相关的研究工作积累，已具备的研究

支撑条件） 7．预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路（阐述研究结果的形式，如何充分利用可能得到的研究结果，拟通过何种资助渠道继续开展研究工作，预期发表的主要相关论文应与简表填写内容一致） 三、重点项目申请书正文撰写提纲 1．项目名称 2．研究工作的科学意义（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景） 3．本项目研究目标，以及与申请者研究工作长期目标的关系 4．项目研究内容，研究方案和进度安排（包括有关方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明，年度研究计划） 5．项目创新之处 6．工作基础与工作条件（工作基础：与本项目相关的研究工作积累和已取得的研究工作成绩；工作条件：已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径，包括利用国家、省部级重点实验室和部门重点实验室等研究基地及依托重点与优势学科的情况） 7．预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路（阐述研究结果的形式，如何充分利用可能得到的研究结果，拟通过何种资助渠道继续开展研究工作，预期发表的主要相关论文应与简表填写内容一致）

爱心基金申请书

爱心基金申请书 申请书是个人或集体向组织、机关、企事业单位或社会团体表述愿望、提出请求时使用的一种文书。下面是本人为您带来的是爱心基金申请书相关内容，希望对您有所帮助。 尊敬的校领导： 您好！ 我是一名学生，家里现有四口人。家里只靠父母亲种地来维持生活。现在我已经成为一名的学生了，在校的这两年里，我收获了许多。班级就如同一个小家，在这个家庭里，我找到了一些与我志同道合的朋友，结交了一位认真负责的导师，并从中获取了大量的专业知识，这些无疑是我以后走向社会的财富。对于身在其中的我来说，为这个小家付出是我义不容辞的责任。在大一学年，我积极进取，竞选班委，曾经担任过宣 传委员、文艺委员。我想借着每期黑板报来表达我对这个班级的热爱，借着每次的活动来体现我积极为班级服务的心情。我曾先后主办过以“教师节”、“感恩”、“地平线教育”“圣诞节”为主题的黑板报，同时它们也给了爱好画画写字的我一个展示自己的舞台。我还积极参与了班级和系里举办的大小活动，像拔河比赛、定向越野赛、系里的辩论赛、话剧比赛、还有运动会等。其中在辩论赛和话剧比赛中我班

均取得了第二名的好成绩。在班级活动里我也积极参与，包饺子活动、班级组织去金沙滩、组织去爬崂山等一系列有意思的活动。在班级举 办的晚会中我还担任过主持人，其中第一学期末的元旦晚会和教师节晚会让我记忆深刻。以上这些活动中我都努力的为这个班集体奉献着自己的力量，觉得自己过的很充实并获得了许多意想不到的收获。也下决心在本学年更加积极的参与到各种班级和学院的活动中去。在参加活动的同时我也努力的学习，上学年期末成绩我仅有一科为中，其他均为优良。现在有助学金这个机会，我紧紧把握和珍惜，希望能获得这次助学金，在本学年我会更加的努力，响应老师和学院的领导，艰苦奋斗、积极进取，不会向困难屈服。 我希望我可以得到这次的国家助学金，那样可以减少一些学费带来的家庭负担，生活得到一些补助，我很需要这笔钱，真诚希望领导和老师能给我这次机会，使我能够全身心的投入到学习中，再也不用为生活费去发愁，我也会继续努力学习，以及积极参加各种活动，争取将来可以为国家和社会贡献出自己的一份力量。我会努力发展自己争取能够成为一名全面发展的大学生。积极奉献自己的力量，日后自己一有能力，就马上回报社会，回报学校给我的帮助！并且去帮助所有需要帮助的人。真心的感谢学校领导和老师能给我这次申请的机会，并希望领导老师能够批准我的申请。谢谢！

科研项目申请书范文精华版

【 科研项目申请书范文(学校内部及省级课题均可以此 为模版） 学科分类申报学科代码项目编号密级农 0903 ×××大学校长基金自然科 学项目申请书 ×××大学校长基金自然科学项目申请书项目名称：保护性耕作下棉花对微量元素吸收的动态规律研究申请人：蓝色多瑙河 单位：植物科技学院联系方 式：E-mail: 申请时间： 2007年12月5日×××大学科技处二○○六年制填报说明 1、填写申请书前，请先查阅学校有关项目申请办法及规定。申请书各项内容，要实事求是，逐条认真填写。表达要明确、严谨，字迹要清晰易辨。外来语要同时用原文和中文表达。第一次出现的缩写词，须要注出全称。 2、申请书为A3纸骑马装订。可自行加页。一式七份（至少一份为原件），由所在单位审查签署具体意见后，报送到学校科技处。 3、封面右上角项目编号由科技处填写，学科分类(填写一级学科)和申报学科代码由申请者填写。 4、简表内容必须逐项认真填写，一律用仿宋小四填写，凡出现“点击此处”是可供选择项，单击此处后选择所要填写内容。 5、部分栏目填写要求：项目名称——应确切反映研究内容和范围，最多不超过25个汉字 (包括标点符号)。基础研究——指以认识自然现象、探索自然规律为目的，不直接考虑应用目标的研究活动。应用基础研究——指有广泛应用前景，但以获取新原理、新技术、新方法为主要目的的研究。申请金额——以万元为单位，用阿拉伯数字表示，注意小数点。起止年月——起始时间从申请的次年1月算起。终止时间为完成年度的12月。依托实验室——系指研究项目将利用的实验室，仅填写校内重点实验室、院试验站或外部场站等。参加单位数——指研究项目组主要成员所在单位数，包括主持单位和合作单位(合作者所在单位)，以阿拉伯数字表示。项目组主要成员——指在项目组内对学术思想、技术路线的制订与理论分析及对项目的完成起重要作用的人员。研

大学生创新科研基金课题申请表

项目编号: 安徽科技学院大学生创新科研基金课题 申请书 课题名称__________________________________________ 课题类别__________________________________________ 课题申请人________________________________________ 所在院（部）______________________________________ 专业班级_________________________________________ 联系电话__________________________________________ 研究起止时间_________ 年____ 月至________ 年 ___ 月 课题指导教师________________ 职称_________________ 填表日期_________________________________________ 安徽科技学院 二OO九年十二月制

填报说明 一、填写申请书之前，请先咨询指导教师，并查阅《安徽科技学院大学生创新课题管理办法（暂行）》及相关文件。 二、请实事求是、逐条、认真地填写申请书的各项内容。表达应明确、严谨、简洁。 三、格式要求：申报书中各项内容以Word 文档格式填写，表格中的字体为四号宋体，1.5 倍行距；表格空间不足的，可以扩展；均用A4 纸双面打印，于左侧装订成册。 四、正式申请时需提交一式二份申请书（要求一律用打印稿件，并且至少一份为原件），需指导教师和所在学院审查、签署意见并加盖印章。 五、页面右上角项目编号由科研处统一填写。 六、凡格式不符合要求的申请书，不予接收。

国家社科基金申请书模板

注意：1.请下载2016年12月修订的《申请书》填写。 2.勿改变《申请书》现有字体。打印时如出现字体参差，请添加华文中宋字体。 3.封面横线填写文字居中排列。课题较长如需换行，请注意合理拆分词组。 4.《申请书》中共8张表，排版分页请确保表格的完整性；表内提示文字请勿删除。 国家社会科学基金项目 申请书 学科分类填一级学科名称 (交叉学科填主要涉及学科) 项目类别五选一：重点项目、一般项目、青年项目、 一般自选项目、青年自选项目 课题名称准确、简明反映研究内容，一般不加副标题 不超过40字 申请人姓名本人姓名，中间不空格 申请人所在单位xx大学 填表日期统一填写：2017年2月28日 全国哲学社会科学规划办公室制 2016年12月

课题负责人承诺： 我承诺对本申请书填写的各项内容的真实性负责，保证没有知识产权争议。如获准立项，我承诺以本申请书为有法律约束力的立项协议，遵守全国哲学社会科学规划办公室的相关规定，按计划认真开展研究工作，取得预期研究成果。全国哲学社会科学规划办公室有使用本申请书所有数据和资料的权利。若填报失实、违反规定，本人将承担全部责任。 课题负责人（签章）(每份都要本人手 写签名) 2017年2月28日 填写说明 一、《申请书》请用计算机填写，所用代码请查阅《国家社会科学基金项目申报数据代码表》，所有表格均可加行加页，排版清晰。 二、封面上方两个代码框申请人不填，其他栏目请用中文填写，其中“学科分类”填写一级学科名称，“课题名称”一般不加副标题。 三、《数据表》的填写和录入请参阅《填写数据表注意事项》，相关问题可咨询当地哲学社会科学规划办公室。 四、《课题论证》活页与《申请书》中“表二.课题设计论证”内容略有不同，请参阅表内具体说明。 五、《申请书》报送一式5份，统一用A3纸双面印制、中缝装订，《课题论证》活页夹在申请书内。各省（区、市）报送当地哲学社会科学规划办公室，新疆生产建设兵团报送兵团哲学社会科学规划办公室，在京中央国家机关及其直属单位报送中央党校科研部，在京部属高等院校报送教育部社科司，中国社会科学院报送本院科研局，军队系统（含地方军队院校）报送全军哲学社会科学规划办公室。

北京市自然科学基金申请书(面上项目)模板

北京市自然科学基金申请书 （面上项目） 项目名称： 申 请 者： 办公电话： 手 机： 电子邮箱： 依托单位： 邮政编码： 通信地址： 联系电话： 填写日期： 北京市自然科学基金委员会办公室制 二○一四年

填表说明 一、填报申请书前，请登陆北京市自然科学基金网站（），查阅市自然科学基金的有关 管理规定。请认真填写申请书各项内容，填写时须注意科学严谨、实事求是、表达明确。外来语应用中文和英文同时表达，第一次出现的缩写词，须注出全称。 二、申请书为A4纸版面，申请书正文要求宋体5号字，双面打印，于左侧装订成册，一 式三份（至少一份为原件），报送北京市自然科学基金委员会办公室。 三、简表说明 1、简表内容：采用国家公布的标准简化字填写。 2、项目名称：要确切反映研究内容，字数最多不超过30字（60字符）。 3、单位代码是申请单位在北京市自然科学基金委员会办公室注册并经确认的代码；项 目指南代码见项目指南；其余代码使用北京市自然科学基金委员会办公室公布的国家自然科学基金委员会的学科分类目录及代码。 4、依托单位：须按单位公章填写全称。 5、依托实验室：系指研究项目将利用的实验室，仅填写国家重点实验室或部、委、北 京市批准的部门开放实验室。 6、申请金额：用阿拉伯数字表示，以万元为单位，小数点后取两位。 7、起止年月：起始时间为申请的次年1月，项目执行期限最长不超过3年。 8、参加单位数：指研究项目组成员所在单位数，包括主持单位和合作单位（合作者所 在单位），以阿拉伯数字表示。合作单位系指项目进行过程中，在研究内容、方法及目标等方面，进行科技互补和实质性合作的单位，不包括一般的技术性协作单位。 9、项目组主要成员：指在项目组内对学术思想、研究方案的制订、理论分析及项目的 完成起重要作用的研究人员。申请者和参加项目组成员每人须在申请书上亲自签名。

科研项目申请书范文精华版

科研项目申请书范文(学校内部及省级课题均可以此 为模版） 学科分类申报学科代码项目编号密级农 0903 ×××大学校长基金自然科 学项目申请书 ×××大学校长基金自然科学项目申请书项目名称：保护性耕作下棉花对微量元素吸收的动态规律研究申请人：蓝色多瑙河单位：植物科技学院联系方 式：E-mail: zjhzky@https://www.wendangku.net/doc/572256141.html, jhz2008@https://www.wendangku.net/doc/572256141.html, 申请时间： 2007年12月5日×××大学科技处二○○六年制填报说明 1、填写申请书前，请先查阅学校有关项目申请办法及规定。申请书各项内容，要实事求是，逐条认真填写。表达要明确、严谨，字迹要清晰易辨。外来语要同时用原文和中文表达。第一次出现的缩写词，须要注出全称。 2、申请书为A3纸骑马装订。可自行加页。一式七份（至少一份为原件），由所在单位审查签署具体意见后，报送到学校科技处。 3、封面右上角项目编号由科技处填写，学科分类(填写一级学科)和申报学科代码由申请者填写。 4、简表内容必须逐项认真填写，一律用仿宋小四填写，凡出现“点击此处”是可供选择项，单击此处后选择所要填写内容。 5、部分栏目填写要求：项目名称——应确切反映研究内容和范围，最多不超过25个汉字 (包括标点符号)。基础研究——指以认识自然现象、探索自然规律为目的，不直接考虑应用目标的研究活动。应用基础研究——指有广泛应用前景，但以获取新原理、新技术、新方法为主要目的的研究。申请金额——以万元为单位，用阿拉伯数字表示，注意小数点。起止年月——起始时间从申请的次年1月算起。终止时间为完成年度的12月。依托实验室——系指研究项目将利用的实验室，仅填写校内重点实验室、院试验站或外部场站等。参加单位数——指研究项目组主要成员所在单位数，包括主持单位和合作单位(合作者所在单位)，以阿拉伯数字表示。项目组主要成员——指在项目组内对学术思想、技术路线的制订与理论分析及对项目的完成起重要作用的人员。研究内容和意义——摘要与主题词应认真填写。成果形式按下列内容填写：

基金申请书范文.doc

基金申请书范文(精选多篇) 第一篇：基金申请书 宗旨、使命和愿景的理解 1）美特好的使命是我们美特好生存和经营管理的目的定位。也是我们每个美特好人应该努力和奋斗的方向和目标，无论是企业还是员工都应该对企业的使命了然于胸。首先我明白我们美特好是重视每位员工身心健康和幸福的，同时，通过努力提高员工各方面素质和能力来提高员工的收入，这是对员工“授之以渔”的馈赠，提高了员工自身价值，从而提高了员工的自信心。使我更加死心塌地的为我们美特努力工作，从而提高我们企业的效益，同时也增加自己的收入。这是“以人为本”的人性化管理模式的最佳体现。当每位员工都矜矜业业的为我们美特好认真努力的工作，事事为我们美特好考虑，对顾客的服务质量自然就会提高，另外，城信对待我们的厂商，让大家都有利可图，这样我们才能很好的合作，得到低价格高质量的商品，力争使顾客买到又便宜又好的商品，这样顾客才会更满意我们美特好的服务，从而更愿意来我们美特好消费，我们的经营成效自然会提高。这样才能使我们企业进行良性的运转。我们只有天天有进步，我们的企业才会蓬勃发展、蒸蒸日上，我们美特好员工的生活水平也将不断的提高，日子才会过得越来越好。 强有力的愿景是我们美特好的灵魂，没有愿景，我们美特好就没有未来，没有成功的愿景，我们美特好就不会有持久的、旺盛的生命力。它是我们美特好的文化的主体，这不只是口号、概念，它更是贯穿于我们美特好每个角落、每个环节的主题精神。影响着我们美特好的每位员工的风尚、活力甚至影响到管理、经营的成效。我们的愿景会敦促我们企业善待每位员工，从而使每位员工死心塌地的为我们企业奉献，敦促我们企业上下朝着这个目标奋斗拼搏，努力寻找高质量的供货商，从而为顾客提供种类齐全，价格便宜，高质量、新鲜、绿色和舒适的商品，提供热情周到的服务，从而提高顾客对我们美特好的满意度，使我们的效益不断提高，规模逐渐扩大，力争成为顾客满意，员工热爱。供应商追捧的销售过千亿的晋陕蒙店数最多的零售连锁企业

申请书-国家自然基金申请人模板

国家自然基金申请人模板 作为本项目申请人和主持人，负责本项目的论证与实施、组织与安排、经费管理、项目总结，还要学会写申请书。以下是小编整理的国家自然基金申请人模板，欢迎阅读！+++ 简历 +++++++++研究所，副研究员 教育经历（按时间倒排序）： 工作经历（科研与学术工作经历，按时间倒序排序）：曾使用证件信息（限3个） 格式：证件类型，证件号 例如： 军官证，××××××××× 主持或参加科研项目及人才计划项目情况（按时间倒序排序）：项目类别、批准号、名称、研究起止年月、获资助金额、项目状态（已结题或在研等）、主持或参加。 例如： 1、国家自然科学基金面上项目，20873999、×××××××××、20xx/01-201x/1 2、30万元、已结题、主持。 2、长江学者（特聘教授）,201x年，环境科学。 XX简历(申请者/参加者) 目前所在机构，部门，职称

教育经历（从大学本科开始，按时间倒排序）： 格式：开始年月-结束年月，机构名，院系，学历，导师 例如： 1991/09 –1995/06，北京大学，医学院生物化学系，博士，导师：××× 工作经历（科研与学术工作经历，按时间倒排序）：格式：开始年月-结束年月，机构，部门，职称 例如： 20xx/7-至今，中山大学，高分子化学系，副教授 曾使用证件信息（限3个） 格式：证件类型，证件号 例如： 军官证，××××××××× 主持或参加科研项目及人才计划项目情况（按时间倒排序）：项目类别、批准号、名称、研究起止年月、获资助金额、项目状态（已结题或在研等）、主持或参加。 例如： 1、国家自然科学基金面上项目，20873999、×××××××××、20xx/01-201x/1 2、30万元、已结题、主持。 2、长江学者（特聘教授）,201x年，环境科学。 (function(){

科研项目申请书模板

科研项目申请书模板 【篇一：科研立项申请书范本】 计划编号： 华中师范大学科研基金项目 申请书 项目名称：中学生常规解题能力男女生差异的调查研究项目负责人：程佩所在学院：数学与统计学学院申请日期： 2011 年 5月 01日 类别：（√）自然科学类学术论文 （）科技发明制作 （）社会调查报告和社科类学术论文 中国共产党华中师范大学委员会 2011年制 大学生科研基金项目 大学生科研基金项目 大学生科研基金项目 .3. 大学生科研基金项目 【篇二：科技项目申请书样本】 编号： 项目名称：项目类别：负责人：所在系：申请金额：联系电话：电子信箱：申报时间： 大学生科研课题 项目申报书 以宝鸡市高新区李家堡城中村改造为例看宝鸡市未来城中村改造发展趋势 ?哲学社会科学类 b 自然科学类 c 科技发明制作类李某某地理与环境学院年10月14日 宝鸡文理学院团委制表 527628527@https://www.wendangku.net/doc/572256141.html, 2012 填表须知 一、《宝鸡文理学院大学生科研课题项目申报书》要按顺序逐项填写，内容要实事求是，表达要明确、严谨。空缺项要填“无”。要求一律用a4纸双面打印，于左侧装订成册。

二、《宝鸡文理学院大学生科研课题项目申报书》由项目负责人所 在系初审，签署意见后，报送团委办公室。联系电话：3566033。 一、项目负责人和项目组情况 二、目的、意义及国内外发展状况 1、项目的目的意义 此项目研究是采用实际考察、录像采集、问卷调查等方式，以高新 区李家堡城中村改造为典例，进而分析、寻求适合于宝鸡地区城中 村改造、新农村建设的新模式。将李家堡城中村改造的优秀成果、 成熟经验，相适合于此类型的村情进行推广，促进宝鸡市更多农村 的改造，推动宝鸡市城市化进程发展，提高农民生活水平和幸福指数。且目前对于城中村改造发展模式的研究较少，本次重点在于对 宝鸡城中村改造未来的发展模式的探讨。 2、项目技术成熟程度 目前在宝鸡市政府的领导下、在渭滨区、金台区已出现相关城中村 改造示范村。联盟一队、二队、五队正在逐步进行改造，东岭村、 李家崖、姜城堡、东呈村、旭光村已成为示范村。而李家堡城中村 改造迈出了高新区城中村改造第一步。 3、国内外现状与发展趋势 在我国城中村发展过程中形成了很多成熟的发展模式。 （1）北京模式―政府规范，市场运作，因地制宜。北京模式的特点是：在政府政策规范引导下，在有发 展社区商业的可行性和必要性，位于居民区或人口稠密区的城中村，运用社会资本等手段，引入便利店，连锁店等新型商业业态，对旧 房屋和设施进行改造。 1政府为开发商提供拆一免二或拆一免三的优惠政（2）珠海模式― 政府主导，市场运作，同步实施。特点:○ 2开发商进行城中村景观改造。○3政府让利，政府开发，村民共赢。○4人口，土地，景观，与社策。○ 区景观彻底城市化。 （3）广州模式―政府引导,机制先行,分步实施. （4）深圳模式―政 府主导，规划控制，协调发展。 4、预期成果形式和技术水平 预期成果形式将以学术论文和报告的形式出现。依据城市政体理论、最经济原理、可持续发展原理以及有关《房屋拆迁管理办法》等法