江南大学97-07微生物考研题答案汇编.tmp

江南大学食品学院微生物学97-07年硕士研究生试题汇编及简答

作者：babybath

97硕士题

1．如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明；

见练习题第19 题,周德庆二版教材P144

考察知识点，代谢调控理论，周德庆二版上的内容；应用营养缺陷型菌株以解除正常的反馈调节；应用抗反馈调节菌株解除代谢调节

答：为了使大量积累中间代谢产物或终产物，必须破坏或解除原有的调控关系并建立新的调节机制，使它按照人们的意愿使目的产物大量生成和积累

（一）调节初生代谢途径

微生物细胞的代谢调节方式很多，例如可调节营养物质透过细胞膜而进入细胞的能力，通过酶的定位以限制它与相应底物的接近，以及调节代谢流等，其中以调节代谢流的方式最为重要，它包括调节酶的合成和调节现成酶分子的催化能力，两者密切配合，以达最佳效果。在发酵工程业中常通过三种调节初生代谢途径而提高发酵生产率

(1) 应用营养缺陷型菌株以解除正常的反馈调节

营养缺陷型菌株丧失了某种酶合成能力，只有在加有该酶的培养基中才能生长，在直线型的合成途径中，营养缺陷型突变株只能累积中间代谢物而不能累积最终代谢物，但在分支代谢途径中，通过解除某种反馈调节，就可以使某一分支途径的末端产物得到累积。

如高丝氨酸营养缺陷型菌株由于该菌株不能合成高丝氨酸脱氢酶因此不能生产高丝氨酸脱氢酶，也不能产苏氨酸和甲硫氨酸，在补给适量高丝氨酸（或苏氨酸和蛋氨酸）的条件下突变株可以在含高浓度糖和铵盐的培养基中产生出大量赖氨酸。

(2) 应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节

此菌株对反馈抑制不敏感，或对阻遏有抗性，或兼而有之的组成菌株。这类菌株其反馈抑制或阻碍已解除，故可分泌大量末端代谢产物。抗反馈调节的突变株可从结构类似物抗性突变菌株和营养缺陷型回复突变株中获得。结构类似物抗性突变株的末端产物合成酶系的结构基因发生了突变，故不再受末端产物的反馈抑制，于是末端产物就大量积累，利用结构类似物作筛子，可筛选其对应氨基酸的高产株以赖氨酸发酵为例,谷氨酸棒杆菌对赖氨酸的结构类似物S-(β氨乙酰基)胱氨酸(A EC)敏感,是赖氨酸毒性类似物。它能抑制合成途径中的天冬氨酸激酶,但不能参与蛋白质的合成。当细胞在含有A EC 的培养基中培养时,野生型菌株由于得不到赖氨酸营养而遭淘汰,抗A EC 突变型则因编码天冬氨酸酶结构基因发生了突变,变构酶调节部位不再能与代谢拮抗类似物相结合,而其活性中心却不变,这种突变型在正常代谢时,最

终产物与代谢类似物结构相似,故也不与结构发生改变的变构酶相结合,这样,这种抗反馈调节突变型对产物

抑制脱敏,仍有正常的催化功能,从而过量生产赖氨酸。

（3）控制细胞膜的渗透性

改变细胞膜的透性，使细胞内的代谢产物迅速渗透到细胞外，以解除末端产物反馈抑制作用，

a. 通过生理学手段控制细胞膜的渗透性

例如在谷氨酸发酵生产中,在谷氨酸生产菌的细胞生长期加入添加适量青霉素\，可抑制细菌细胞壁肽聚糖

合成中的肽链交联，造成细胞壁的缺损，有利于代谢产物生物素外泄，降低了谷氨酸的反馈抑制提高谷氨酸产量

b. 通过细胞膜缺损突变控制其渗透性

应用谷氨酸生产菌的油酸缺陷型菌株，在限量添加油酸的培养基中也因能细胞膜发生渗漏而提高谷氨酸产量。原因是油酸是一种含有双键的不饱和脂肪酸是细菌细胞膜磷脂中的重要脂肪酸，其油酸缺陷型突变株因其不能合成油酸而使细胞膜缺损。

（二）控制发酵条件

（1）控制培养基营养成分的组成，浓度配比和PH

实质上是利用M 本身固有的代谢调节系统来改变其代谢方向，使之朝着人们希望的方向进行，如酿酒酵母在中心和酸性条件下将葡萄糖发酵产生乙醇和CO2，而在碱性条件下，产物就会主要变成甘油，而培

养基中的C/N 比很重要，N 源过多，使微生物生长过于旺盛，而不利于产物的累积，N 源不足，限制了微生物的生长速度和生长量，也不利于产物的合成

（2）控制发酵温度

温度不仅会影响微生物生长和产物合成的水平，也会影响微生物代谢的途径和方向，如灰色链霉菌嗜

冷突变株在利用烷烃发酵生产抗生素，即使其他发酵条件相同，但发酵温度不同也会使产生的产物完全不同。

（3）添加诱导物

在培养基中加入适当的诱导物（多为底物或结构类似物）可以增加酶的产量，如木霉发酵生产纤维素

酶时，添加槐糖可以诱导纤维素酶的产生

（4）添加生物合成前体

在色氨酸的合成代谢中，其最终产物的色氨酸对代谢途径中的第一个酶有很强的反馈抑制作用，使色

氨酸的合成受阻，而邻氨基苯甲酸作为前体仅参与色氨酸最后阶段的合成，不受色氨酸反馈抑制的影响，

在培养基中加入邻氨基苯甲酸，虽然色氨酸的反馈抑制还在，但不影响前体的转化，可大幅度提高发酵产量，在许多次级代谢产物的发酵中，加入前体也可以促进产物的合成，或使之形成特定的产物。

（5）去除代谢产物

反馈抑制是代谢末端产物达到一定量之后会反馈抑制代谢途径中第一个酶的活力，或阻遏第一个酶的

合成从而降低产物生成的能力。因此在发酵中不断去除末端代谢产物，降低其在发酵系统中的浓度，可以

减少反馈抑制，增加产物的产量，可以在发酵过程中采用限量添加这类物质，或改用难以被水解的底物的

办法减少阻遏作用的发生，提高产酶量

2．如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？Why？

练习题第32 题，本题的知识点系食品微生物范围。

答：食品原料的PH 值几乎都在7 以下，

酸性食品：PH＜4.5（水果）

低酸性食品：PH＞4.5(蔬菜，鱼，肉，乳)

在酸性食品中，细菌因在过低的PH 值环境中已受抑制，能生长的仅为乳酸菌，酵母菌和霉菌，因为酵母

菌的最适生长PH 值为 3.8-6.0.霉菌为 4.0-5.8,芽孢菌不能生长，且霉菌和酵母菌在常压，高温条件下即可杀死，因此采用高温煮沸的方法即可达到长期保养的目的。

低酸性食品中所有微生物均能生长，细菌生长繁殖的可能性最大，而且能够良好的生长，因为绝大多数细

菌的生长适应的PH 为7，当PH＜5.5 时腐败细菌已基本被抑制，但有少数细菌仍可生长。且细菌中的芽孢菌耐高温，因此需要在高温下（大于100℃）下持续一段时间以杀死细菌的芽孢。一般121℃，20min

杀菌温度：

低酸性食品：高温高压121℃。因所有微生物均能生长，芽孢的耐热温度是120℃

高酸性食品：沸水90-100℃，酸性中酵母菌、霉菌的孢子在95℃以上均可以杀死。

3．设计一种从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的试验方案，并解释主要步骤的基本原理；筛选xx菌的题目，万能公式

(1)高温（中温）淀粉酶产生菌的实验方案

(2)果胶酶产生菌的实验方案

(3)酸性蛋白酶

(4)筛选低温乳糖酶产生菌

(5)纤维素酶

答:（1）从高温堆肥中采集菌样（中温淀粉酶从粮食加工厂或者饭店附近的土壤中采样）----用含淀粉液体培养基增殖（温度50-60℃，PH 中性，中温淀粉酶培养温度则为37℃左右）----淀粉平板上划线分离或者涂布（注意点：平板表面不可有水膜或水滴，接种环要光滑，无菌操作）----依据透明圈的大小挑选菌种（注意点2,其为淀粉水解圈，越大越好，因为越大则该菌产淀粉酶越多）----再划平板划线分离----模拟工业发酵进行摇瓶发酵----筛选菌株（初筛，复筛，注意点3：初筛以量为主，复筛要测定数据的精确度，以质为主）----测定酶活----鉴定菌株----获得高产菌株

原理，采用淀粉培养基原因：一般细菌不能直接利用淀粉为碳源，而产淀粉酶的菌株可以淀粉酶糖化淀粉作为 C 源，高温可以杀死一般细菌，只有耐高温的细菌可以存活。

（2）果胶酶：

果园土壤中采集菌样----液体果胶培养基中增值（37℃）----果胶平板划线分离或涂布（平板表面不可有水膜或水滴，接种环要光滑，无菌操作）----依据透明圈大小挑选菌株（果胶水解圈越大越好，越大说明菌株产酶量大）----再划线纯化----模拟工业发酵条件进行摇瓶培养发酵----以后同前面

如果考果胶酶的合成是操纵子的阻遏机制，如何利用这一机理设计有效的筛选方法？

回答如下:

由于果胶酶受阻遏型操纵子的编码调控，则末端产物的反馈阻遏了酶的进一步合成，我们可以应用抗反馈调节的突变株来解除反馈调节

具体操作:可以把菌样培养在含果胶的结构类似物的培养基上，该结构类似物能抑制该菌的正常生长时采用经诱变以后（如x 射线，亚硝基胍）长出的抗结构类似物的突变株进行发酵就能分泌较多的果胶酶，

由于该突变株的某些酶的结构基因发生了改变，不再受果胶酶的反馈抑制，于是就有大量的果胶酶产生

如果考果胶酶作为一种食品工业用酶，则必须考虑其安全性，从那几个方面着手来保证该酶的安全性？，回答如下：

安全性检测：菌种用动物实验测安全性，酶安全性实验，生产过程要符合GMP 操作，包装原辅料符合生产安全，

毒性试验:

a．来自动植物可食部位及传统上作为食品成分或传统上用于食品的菌株所生产的酶，如符合适当的化学

和微生物学要求，即可视为食品，而不必进行毒性试验

b．由非致病性的一般食品污染微生物所生产的酶要求做短期毒性试验

c．由非常见微生物所产生的酶要做广泛的毒性实验

（3）酸性蛋白酶

在肉类加工厂，饭店排水沟中的污泥污水中采集菌样-----酸性条件下用牛奶作为碳源和氮源----牛奶平板划线分离----后面与其余相同

原理一般产蛋白酶的细菌不能在酸性条件下生长，酸性条件下可以抑制大量细菌生长，只有产酸性蛋白酶的细菌可以在酸性条件下利用蛋白质为碳源生长

（4）低温乳糖酶

来源：乳制品厂周围的土壤采集菌样----低温条件下用乳糖作为唯一碳源（15℃）----乳糖平板划线分离---- 后同

耐低温菌株常采用一次性筛选法，将处理过得菌悬液在一定低温下处理一段时间后再分离，对温度敏感的细胞被大量杀死，残存的细胞则对低温有较好的耐变性。通过平板分离即可得到纯的抗性变异株。

本题中指示剂用溴甲酚绿，其在酸性条件下呈黄色，碱性环境中呈蓝色，在分离培养基PH6.8 中加入溴甲酚绿指示剂后呈蓝绿色，当细菌在该培养基中生长并分解乳糖产生乳酸之后使菌落呈黄色，菌落周围的培养基也变为黄色。

（5）纤维素酶：(已知纤维素酶的合成是操纵子的阻遏机制，如何利用这一机理设计有效的筛选方法？)

在堆肥，朽木中采集菌样----纤维素液体培养基----纤维素平板划线分离----后面同前

由于纤维素酶受阻遏型操纵子的编码调控，则末端产物的反馈阻遏了酶的进一步合成，我们可以应用

抗反馈调节的突变株来解除反馈调节来提高代谢产物的产量，可用2-脱氧葡萄糖作为降解产物阻碍物，诱

变处理，定向选育能继续产生葡萄糖的高产菌株，如果发现葡萄糖可继续合成，则已经突破了葡萄糖的反

馈抑制

本题型万能套路：

（1）先查资料看有无相关报道富集经验

（2）采样，以采集土壤为主（根据分离目的，选择适合该微生物生产的环境进行采集）

（3）富集培养（通过选择性培养基（营养成分，抑制剂添加），通过选择一定的培养条件（培养温度，

PH 值）来控制，具体可利用微生物利用 C 源的特点，选定待分离微生物的特定碳源，淘汰掉杂菌。

（4）培养分离：采取稀释分离法或平板划线分离法分离单个菌落

（5）筛选：通过菌落形态观察，选出所需菌落，取一半并作鉴定，对于符合目的菌特性的菌落，可移至

试管斜面纯培养，然后采取与生产相近的培养基和条件通过三角瓶小型发酵实验以求的适于工业生产的菌

种

（6）毒性试验，均需通过两年以上的毒性试验

a．来自动植物可食部位及传统上作为食品成分或传统上用于食品的菌株所生产的酶，如符合适当的

化学和微生物学要求，即可视为食品，而不必进行毒性试验

b．由非致病性的一般食品污染微生物所生产的酶要求做短期毒性试验

c．由非常见微生物所产生的酶要做广泛的毒性实验

（7）鉴定通过形态，生理生化指数，16sRNA 等手段鉴定菌株

4．下列食品如变质，主要是有什么类型的微生物所引起？Why？1〉市售面包2〉充CO2的果汁；

变质微生物题，题目属食品微生物内容，补充一下练习题第33，39 题，各种食品列举如下：

1）添加有山梨酸钾防腐剂的面包出现中心发粘变质的情况。

原因：山梨酸钾是在PH＜4.5 条件下抑制酵母菌和霉菌的防腐剂，而面包PH≥4.5,所以山梨酸钾抑菌

能力差。面包主要成分是淀粉，酵母菌只能利用单糖或二糖，不能利用多糖（淀粉），高温焙烤，霉菌也

被杀死。但面包中心温度较表面温度低，会有耐热的芽孢杆菌和细菌芽胞存在，在适宜的条件下就会生长

繁殖，中心发粘是有荚膜的细菌造成的。

防止措施：提高焙烤温度，使焙烤充分

2) 市售面包，月饼表面出现丝状生长物

可能是霉菌，来自机会：所有制作糕点的原料，特别是糖，坚果和香料，也可在加工过程中和由空气

中进入，高湿度环境有利于霉菌在糕点表面生长。

防止措施，控制生产的卫生条件，加工工艺，加入适当防腐剂（如丙酸盐）和注意产品的包装及贮存

条件

3）经高温高压杀菌的低酸性罐头出现变质，检测发现其中有大量的革兰氏阴性杆菌。

若G-是死的则说明原料已经变质，防止措施对原料进行控制，保证原料的新鲜度，可通过检测细菌总

数来确定

若G-是活的，说明是在罐头生产过程中造成的

原因：G-杆菌不耐热，高温杀菌后仍检出，则说明只可能是漏罐，密封不严，在加工过程中由于冷却

水的渗漏污染，进入G-杆菌。

防止：密封过程中应严格把关，使用的冷却水应先经过x 射线或r 射线消毒

4）巴氏消毒牛奶：

主要是细菌

原因：巴氏消毒法无法彻底杀灭牛奶中的芽胞，残留大约1%左右，加热之后，室温下芽胞可以萌发

生长，而霉菌和酵母菌都被杀死了，牛奶营养丰富，利于细菌生长。

5）真空包装的蜜饯产品：

主要是酵母菌

原因：真空包装的蜜饯是含糖量高，无氧的食品，因此需氧菌和霉菌生长均会受到抑制，在此条件下，

仅有酵母菌（耐高渗）, Aw＜0.85, 可以生长，在无氧条件下兼性厌氧的酵母菌可以发酵糖类产酸

6）面粉（米粉）：

主要是干性霉菌

原因：面粉（米粉）的主要成分为淀粉和蛋白质，酵母菌只能利用单糖或二糖，不能利用多糖（淀粉），大多数酵母菌分解蛋白质的能力极弱，又因为面粉水分活度较低，不能达到细菌生长所需水分活度，而霉

菌具有分解淀粉和蛋白质的能力，霉菌生长所需的Aw 最低为0.8，在0.65 时还有干性霉菌生长，因此主

要为干性霉菌。

7）充CO2的碳酸饮料：

可能是酵母菌或乳酸菌，原因，充CO2的果汁是一种酸性的含糖低氧含量的食品，而细菌生长的合适

PH 值为7.0~8.0，很难生长，霉菌生长PH 值为 4.0~5.8，酵母菌生长PH 为 3.8~6.0，可在酸性条件下生长，但霉菌对CO2敏感，因为其为好氧型微生物, CO2抑制了霉菌的生长,而酵母菌属于兼性厌氧微生物，在无

氧条件下可以发酵糖类产能，乳酸菌亦可在此条件下生长。

8) 杀菌不足的肉类罐头

可能是某些耐热的兼性厌氧或厌氧菌

原因：1.杀菌不足是指灭菌时间不够，但已达到杀菌温度121℃，在此温度下，酵母菌和霉菌已被杀死，

又因为罐头加工过程抽真空，霉菌生长也会受到抑制，所以只可能存在厌氧性和兼性厌氧菌

2.经杀菌后，密封性不好，重要污染源是冷却水

肉类罐头主要是低酸性食品和中酸性食品，在其中的菌类主要是嗜热性细菌，产芽孢的中温性厌氧细菌（肉

毒梭菌），本题与第三小题很接近，需要注意

9）瓶装果汁饮料（果奶）产品发生变质

果汁（果奶）中含有不等量的酸，因此PH 值较低，一般在 2.4~4.2 之间，并且还含有一定糖分，适合

这种条件生长的微生物主要是酵母菌，霉菌和某些细菌（主要是乳酸菌）

发生变质的主要原因：

（1）若产品中检出酵母菌和霉菌，则可能是巴氏消毒不充分，有霉菌存在还有可能是瓶子封口不严，有氧气进入（霉菌是好氧菌，生长需要氧气），一般的巴氏消毒可以杀死酵母和霉菌

（2）若产品中有细菌，则可能果汁酸度不够或杀菌不充分

防止措施：充入CO2，或进行超高温瞬时灭菌

10）变酸的果酒

变酸的果酒主要是由醋酸菌和乳酸菌引起，原因：果酒酒度低，酒精含量不了管理起到有效的抑菌效

果，并且还含有糖分，由于果酒通常是采用添加SO2灭菌，而添加SO2灭菌对醋酸菌的抑制作用不明显，

所以消毒不好的果酒易酸败。

防止措施：为达到果酒的生物稳定, 果实榨汁后要马上添加SO2 以抑菌, 或榨汁后进行巴氏杀菌, 同

时还可起到灭酶的作用。发酵完的酒液要马上进行离心分离除去酵母，最后灌装前采用微孔膜超滤技术去

除有害菌体。

11）把酿酒酵母接入煮过的糯米中室温发酵，无法制得酒酿。（这个不是变质题，只是列举出来）原因：酵母菌发酵单糖，而不能发酵糯米中的淀粉，故不能制得酒酿。

方法：加入淀粉酶，使淀粉分解为糖类，酵母菌分解糖类，产生酒酿。

分析变质题可从以下六个方面考虑

（1）食品物料

所有细菌和许多霉菌都有利用蛋白质的能力，酵母菌基本不能利用蛋白质，，霉菌有利用淀粉的能力，绝大多数的酵母和细菌基本不能利用淀粉(酵母菌只能利用单糖或二糖，不能利用多糖(淀粉))，分解脂肪的

主要是霉菌和细菌，酵母菌分解脂肪的很少。

（2）氧气

霉菌是需氧微生物，酵母菌一般兼性厌氧。细菌都有

故无氧时主要是厌氧的梭状芽胞杆菌和兼性厌氧的酵母菌和细菌（厌氧乳酸菌）

（3）水分活度

细菌要求最高，一般在0.90~0.99之间，霉菌最低，最低为0.80，但在0.65时尚有干性霉菌可以生长，酵母介于两者间

（4）渗透压

高渗时：酵母菌和霉菌的可能性比较大

耐高渗：霉菌＞酵母菌＞细菌

（5）PH值

PH＜4.5 ,酸性食品，酵母菌、霉菌和乳酸菌

PH＞4.5 ,各种微生物都可以生长

（6）温度

抗热性：芽胞＞G+＞G—＞霉菌＞酵母菌，一般100℃灭菌，霉菌和酵母菌被杀死，但耐热细菌尤其

是芽胞能存活，需要121℃，10min以上，故巴氏消毒只能杀死霉菌和酵母，不能杀死细菌芽胞

防腐剂：

苯甲酸钠：抑制霉菌、酵母菌生长，对酵母菌影响大于霉菌，而对细菌效力较弱，使用范围：高酸性食品（果汁、饮料…）

山梨酸钾：抑制霉菌、酵母菌、细菌，对厌氧性微生物和嗜酸乳杆菌几乎无效，防腐效果较苯甲酸广，ph 5~6 下使用适宜，效果随PH 增高而减弱，PH 为 3 使用效果最好

使用范围：奶酪、焙烤制品、果汁、….食品中允许使用最大量：0.2%

丙酸盐：霉菌抑制剂，酸性范围内使用，ＰＨ５以下对霉菌的抑制作用最佳；ＰＨ６时抑菌能力明显降低。丙酸钙对霉菌和能引起面包产生粘丝物质的好气性芽孢杆菌有抑制作用，对酵母无抑制作用

使用范围：面包、蛋糕

5.菌种保藏主要利用什么手段？原理？举例说明；

练习题第36题

菌种保藏原理：根据微生物生理、生化特点，选用优良的菌株，最好是他们的休眠体，人工的创造适合休眠的环境条件，即干燥、低温、缺乏氧气和养料等使其代谢活动处于最低状态，但又不至于死亡，从而达到保藏的目的。

手段：冰箱保藏法（斜面），冰箱保藏法（半固体），石蜡油封保藏法，甘油悬浮液保藏法，砂土保藏法，冷冻干燥保藏法，液氮保藏法

举例：

冷冻干燥保藏法：1、准备安瓿管2、准备菌种3、制各菌悬液及分离4、冷冻：迅速降温至-40 ~-70 摄氏度5、抽真空：完成时有干燥块6、抽真空，封口7、冰箱保藏

冷冻干燥保藏法原理：通过洗涤液体的所有对细胞生长有害的物质，脱脂牛奶或糖、甘油等可以与大分子形成氢键的物质做保护剂，防止细胞损伤；在-20 摄氏度以下快速冻结，形成的冰晶小，细胞质浓缩

现象减少，防止细胞损伤；在0 摄氏度保证不解冻的条件下，高度的冷冻干燥，低温、封口，使保藏时间延长。

1如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明；

见97.1

2如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？Why？

见97.2

3菌种保藏主要利用什么手段？原理？简述冷冻干燥法的过程与原理；

见97.5

4什么是大肠菌群，测检食品中大肠菌群的意义是什么？常用什么培养基？该培养基中各种成分的主要作用是什么？这是一类什么性质的培养基？

答：大肠菌群：任何37℃24h 可以发酵乳糖产酸产气的Ｇ-杆状无芽胞，兼性厌氧的肠道细菌。典型代表 E. Coli，产气肠杆菌，柠檬酸杆菌属。

大肠正常菌群对宿主有很多有益作用，包括排阻，抑制外来致病菌，提供维生素等营养，产生淀粉酶、蛋白酶等有助消化的酶类，分解有毒或致癌物质，产生有机酸，降低肠道PH 和促进他的蠕动，刺激机体

的免疫系统并提高其免疫力，以及存在一定程度的固氮作用等。

检测食品中大肠菌群的意义：

（1）作为食品被粪便污染的指示菌（食品不卫生/工厂卫生条件差）

（2）作为食品被肠道致病菌污染的指示菌(说明可能有肠道致病菌存在)，因为大肠菌群与肠道致病菌来源相同，在外界环境中生存时间，繁殖速度以及对不良环境的抵抗力与主要致病菌类似

常用麦康开培养基（属于选择性，鉴别性培养基，半组合液体培养基）

原因如下：由于是培养液且蛋白胨等为天然有机物，而NaCl 等为化学试剂，所以为半组合培养基，又因

为其能抑制G+生长，加了指示剂中性红，用于肠道细菌的培养，因此属于选择性和鉴别性培养基

功能

蛋白胨

乳糖NaCl

牛胆酸盐1%中性红发酵管PH7.4 氮源，碳源碳源

无机盐

G+抑制剂

产酸指示剂判断是否产气适宜菌生长

灭菌条件：中性，115℃，30min，高压蒸汽灭菌，可去除细菌芽胞，温度过高会使乳糖分解导致变色

5试设计一种快速检测致病性大肠杆菌的方法，并说明原理；

快速检测题，见99 6

6下列食品如变质，主要是由什么类型的微生物所引起？Why？1〉市售面包2〉充CO2的果汁；

见97.4

1如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？为什么？

见97.2

2试设计一种从自然界中筛选果胶酶产生菌的试验方案，并解释原理；如果果胶酶作为一种食品工业用酶，则必须考虑其安全性，从那几个方面着手来保证该酶的安全性？

见97.3

3试述微生物菌种保藏的原理和常用方法，你认为对于Escherichia coli和Aspergillus niger 分别采用什么保藏方法为好？请说明理由；

接975，此类题一般都是考查一种细菌的和一种霉菌的保存，即细菌采用冷冻干燥保藏法，霉菌除了可以

用冷冻干燥保藏法之外还可以利用其产生孢子的特性采用沙土保藏法保藏。其保藏期可达1~10 年。沙土

保藏法（干燥—载体保藏法）的成本更低廉。

具体步骤：是将菌种接种于适当的载体上，如河砂、土壤、硅胶、滤纸及麸皮等，以保藏菌种。以沙土保

藏用得较多，制备方法为：将河砂经24 目过筛后用10%~20%盐酸浸泡3~4 h，以除去其中所含的有机物，

用水漂洗至中性，烘干，然后装入高度约1cm 的河沙于小试管中，121℃间歇灭菌 3 次。用无菌吸管将孢

子悬液滴入砂粒小管中，经真空干燥8 h，于常温或低温下保藏均可，保存期为1~10 年。一般细菌芽孢常

用砂管保藏，霉菌的孢子多用麸皮管保藏（即用麸皮加水/营养液后拌匀，灭菌代替河沙，其余同前）

4．影响微生物抗热力的因素有哪些？解释D值、Z值以及D值和Z值的关系。

影响微生物抗热力的因素：

（1）菌种的不同，对热的抵抗力也不同，与细胞结构特性和细胞组成特性有关，例如嗜热菌抗热力＞嗜

温菌，孢子＞菌丝体，芽胞菌＞非芽胞菌，球菌＞无芽胞杆菌，G+＞G-, 霉菌＞酵母菌

（2）不同菌龄对热抵抗力不同

同一温度下，对数生产期的菌体细胞抗热力较小；稳定期老龄细胞抗热力较大；老龄的细胞芽胞大于幼龄

的细胞芽胞

（3）微生物数量的多少与抗热力有明显关系，菌量越多，抗热力越高，杀死最后一个微生物细胞所需时

间越长（因为菌体细胞可以分泌出对菌体有保护作用的蛋白质性质物质，有降低热力的作用

（4）基质的影响因素

微生物的抗热力随着水分减少而增大，即使是同一种微生物，它们在干热环境中的抗热力要比在湿热环境

中的抗热力大得多；

基质中蛋白质，脂肪，糖等物质对微生物有保护作用，有些盐类的存在也可增强抗热力，但钙，镁离子存

在会降低微生物抗热力；

PH 为7 时抗热力最强，偏酸对抗热力减弱明显；

基质中有一些抑制性物质存在也可以减弱微生物抗热力，例如SO2,亚硝酸盐，

（5）加热温度和时间

温度升高，抗热力下降，加热时间越长，热致死作用越大，一定高温范围内，温度越高，杀菌时间越短

D 值：作用一定温度进行加热，活菌数减少一个对数周期时所需时间

Z 值：如果在加热致死时间曲线中，时间降低一个对数周期，所需升高的温度

两者之间关系：

Z=

T2 T1 lg D1 lg D2

证明过程：

n

设T 1温度下菌数下降10 需时t1即D1。n D1 = t1

T2温度下菌数下降10 n需时t 2即D2。n D2 = t 2

则杀菌时间下降（lg D1 lg D2）需温度升高T 2 -T 1故lg D1 lg D2与T 2 -T 1成正比关系

Z=

T2 T1 lg D1 lg D2

5.什么是大肠菌群，测检食品中大肠菌群的意义是什么？常用什么培养基？该培养基中各种成分的主要作用是什么？这是一类什么性质的培养基？

见98.4

6.根据免疫学的原理，设计一种快速灵敏的检测细菌或毒素的方法，并说明原理。

检测食品中的致病菌和毒素的快速灵敏的检测方法有：免疫荧光技术，ELISA 酶联免疫技术，PCR 技术，荧光酶标免疫分析，免疫电镜技术，放射免疫技术。DNA 探针技术，HPLC 高效液相检测细菌毒素，

采用ELISA 和FAT（荧光免疫）相结合的技术

原理：应用双抗体夹心法

(1)利用已知具有高度特异性的单克隆抗体捕获样品中的目的抗原（细菌，毒素）,如果目的毒素是一

种半抗原，只有免疫反应性没有免疫原性，不能直接刺激机体产生抗体则采用载体蛋白与之结合形成完全

抗原之后再制备具有高度特异性的单克隆抗体,

(2)再以标记有酶的相同抗体与抗原结合，加入酶底物检测反应;

具体为以包被有高度特异的单克隆抗体混合物的SPR 包被针吸取待检测样品，并利用固定于SPR 包

被针上的单克隆抗体捕获目的抗原，而非特异性抗原则被洗去，特异性抗体和碱性磷酸酶的复合物和目的

抗原反应并结合，酶和底物（4-甲基伞形基磷酸盐）反应产生蓝色荧光，其强度与样品中的目的抗原含量

成正比。

另外一种方法，对于致病菌的话可利用被检测微生物的16sRNA 序列设计一段特异的寡核苷酸序列进

行特异性杂交

00年硕士题

1.举例说明微生物的特点。

练习题第 2 题

答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。

特点：a.体积小，面积大：典型的菌株体积仅1μm3左右，比面值却极大

b.吸收多，转化快：发酵乳糖的细菌 1 小时可分解其自重1000-10000 倍的乳糖

c.生长旺，繁殖快：大肠杆菌每分裂 1 次时间为12.5-20.0min，每昼分裂72 次，后代4722366500 亿万个。

d.适应强，易变异：某些硫细菌可在250℃甚至300℃高温下生存。微生物个体一般是单细胞，单倍体，繁殖快，数量多，即使变异率很低，也可在短时间内产生大量变异后代。如1943 年每毫升青霉素生

产菌发酵液只分泌20 单位的青霉素，而现在其发酵水平已经超过每毫升 5 万单位。

e.分布广，种类多：人体肠道中聚居着100-400 种不同微生物，个数大于100 万亿。

2.酸性食品和非酸性食品常用什么温度杀菌？为什么？

见97.2

3.叙述微生物的营养物跨膜输送方式；

练习题第20 题

单纯扩散、促进扩散、主动运输、基团移位四种不同营养物质运送方式。

通过盖章的方式能达到在一系列培养皿的相同位置上出现相同的遗传型菌落的接种和培养方法。它证明了

微生物的抗药性是在未接触药物前自发产生的，这一突变与相应的药物环境不相干是自发的

实验设计：利用影印培养法证明 E.coli 如何通过自发突变产生抗链霉素突变株

具体步骤如下：

首先把大量对链霉素敏感的 E.coli K12 细胞涂布在不含链霉素的平板（1）表面，待其长出密集的小菌落之后，用影印法接种到不含链霉素的平板（2）上，随即再影印到含链霉素的选择性培养基平板（3）上。影印的作用是保证这 3 个平板上所长出的菌落的亲缘和相对位置保持严格的对应性。经培养之后，平板（3）上出现了个别抗链霉素菌落。对培养皿平板（2）和（3）进行比较之后，就可在平板（2）的相应位置找

到平板（3）上那几个抗性菌落的“孪生兄弟”。然后将（2）中与此最相近的部位上的菌落再挑至不含链霉

素的培养液（4）中培养，再涂布到平板（5）上，重复以上各步骤，即可做到只要涂上越来越少的原菌液

至培养皿（5）和（9）上，就可得到越来越多的抗性菌落，最终甚至可以得到纯的抗性菌株细胞群。

因为全过程中原始的链霉素敏感株只要通过（1）-（2）-（4）-（5）-（6）-（8）-(9)-(10)-(12)的移种和选

择序列，也就是没有接触任何一点链霉素的条件下即可筛选到大量抗链霉素的突变株。证明基因突变的自

发性和不可对应性

6.果奶产品经过封口杀菌后，出现部分产品发生变质，是分析是什么原因，如何防止？

变质题，见97.4

7.试设计选育高纤维素酶高产菌的实验方案，如已知纤维素酶的合成是操纵子的阻遏机制，如何利用这一机理设计有效的筛选方法？

筛选题，见97.3，

01年硕士题

1．试以梯度培养皿法来说明定向培育吡哆醇高产菌株的过程与原理；

答：定义：通过制备琼脂表面存在药物浓度梯度的平板，在其上涂布诱变处理后的细胞悬液，经培养后再

从其上选取抗药性菌落等步骤，就可定向筛选到相应的抗药性突变株。

例如：筛选抗异烟肼的吡哆醇高产突变株

先在培养皿中加入10ml 融化的普通琼脂培养基，皿底斜放，待凝，再将皿放平，倒上第二层含适当浓度

的异烟肼的琼脂培养基（10ml）待凝固后，在这一具有药物梯度浓度的平板上涂以大量经诱变后的酵母菌

细胞，经培养后即可出现抗性菌落、

推测：有可能产生了能分解异烟肼酶的突变株，也有可能产生能合成更高浓度的吡哆醇以克服异烟肼的竞

争性抑制的突变株，经检测后者为大多数。

2.试述微生物菌种保藏的原理。Lactobacillus bulgaricus和Aspergillus niger若要长期有效的保藏，可分别采用哪些方法？为什么？

见975，993

3．在以消毒奶为原料生产酸奶的过程中，为什么要在尽可能短的时间内达到酸凝？可采取哪些措施？

答：未加热的新鲜牛奶中由于牛奶含有抗菌物质，梭菌不能生长，然而加热之后，牛奶的Eh 降低，梭菌

可以旺盛生长，同时，由于巴氏消毒奶不可能彻底杀灭原料中的细菌芽胞，因此，需要使消毒奶的PH 值

迅速下降以抑制细菌芽胞生长，因为当PH 小于 4.5 时，腐败细菌受到抑制无法生长

采取措施：

关键：1、用消毒的牛奶，以防止因牛奶而带入杂菌；2、缩短延滞期；3、控制冷藏的温度、时间，温

度过低会有多种菌生长，过低高会破坏牛奶中的蛋白质，缩短培养时间，卫生指标数；4、酸度，PH〈4.5，

芽孢不再生长，否则芽孢繁殖

4．下列食品如果变质，主要是由什么类型的微生物所引起？Why？1〉市售的米粉2〉肉类罐头

变质题，见97.4

5．利用免疫学原理设计一种快速灵敏的检测金黄色葡萄球菌的方法，并说明原理。

见996

答：黄曲霉毒素是一种半抗原，只有免疫反应性没有免疫原性，故不能直接刺激机体产生抗体。

具体方法：黄曲霉毒素+载体蛋白（MBSA）----形成完全抗原----刺激家兔----在家兔血液中提取黄曲霉毒素

的特异抗体(免疫球蛋白)----采用ELISA 法(双抗体夹心法)可以快速测定黄曲霉毒素

具体步骤:

(1) 将上述免疫获得的抗体吸附在微量滴定板的小孔中洗涤;

(2) 加入待测样品,如样品中含有黄曲霉毒素,则和抗体特异结合,洗涤;

(3) 加入酶联抗体,形成夹心,洗涤

(4) 加入该酶的底物,产生有色的酶解产物,比色,有有色酶解产物产生,证明有黄曲霉毒素存在,或反之

02年硕士题

1．细菌芽孢有何特点？举例说明细菌芽孢实践的重要性。

练习题第17 题

答：芽孢是某些细菌在其生长发育后期，，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、壁厚、含水量低、抗逆性

强的休眠构造。无繁殖功能，芽孢有极强的抗热抗辐射，抗化学药物和抗静水压等特性。芽孢具有极强的

休眠能力，可以保存几年至几十年而不死亡，芽孢的有无、形态和位置，在细菌分类和鉴定中是重要的形

态学指标，实践上芽孢的存在亦利于菌种的筛选与保藏，有利于对各种消毒、杀菌措施优劣的判断等。

芽胞是一种休眠体，每一细胞仅形成一个芽胞，无繁殖能力。

产芽孢的菌有：革兰氏阳性菌：好氧的芽孢杆菌属，枯草芽胞杆菌

厌氧的梭菌属，肉毒梭状芽胞杆菌

芽孢八叠球菌属

革兰氏阴性菌：脱硫肠状菌属

实践重要性：

（1）菌种鉴定中的形态学指标

（2）有利于菌种的筛选和保藏

（3）衡量消毒灭菌措施的主要构造

举例：肉类罐头的肉毒梭状芽孢杆菌为灭菌程度的依据，一般121℃，20min

外科器械灭菌以破伤风梭菌和产气荚膜梭菌的芽胞耐热性作为灭菌程度依据，一般121℃，10min

在实验室或发酵工业以能否杀死自然界中耐热性最强的嗜热脂肪芽孢杆菌芽胞为目标，一般121℃，20min 2．如要长期保藏酸性食品和非酸性食品，常用什么温度杀菌？为什么？

见97.2

3．如何运用代谢调控理论使微生物合成比自身需求量更多的有用代谢产物？举例说明。

见97.1

4．试用平板影印培养法证明基因突变的自发性和不对应性。

见00.5

5．设计一种从自然界中筛选酸性蛋白酶产生菌的试验方案，说明其原理；若该酶作为食品工业用酶，如何保证其安全性？

筛选题，97.3

03年硕士题

1．长期保存低酸性和酸性食品采用什么温度杀菌,为什么？

见97.2

2．试诉微生物菌种保藏原理.若长期保藏Lactobacillus bulgaricus,Aspergillus niger,可分别采用什么方法,为什么,简述过程及原理

见975，993

3．什么是大肠菌群,检测它的意义,常用方法和培养基,该培养基中各成分的作用,是什么性质的培养基

见98.4

4．如何使微生物合成比自身需求量更多的产物,举例说明

见97.1

5．设计筛选低温乳糖酶产生菌的实验方案,解释主要步骤和原理

见97.3

6．设计快速检测金黄色葡萄球菌的方法,说明原理

见01.5

7．如果下列食品变质,使什么类型微生物引起,为什么,如何防止.

(1)市售的面包(2)肉类罐头

见97.4

04年硕士题

1. 试比较细菌、放线菌、酵母菌、霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生质体制备方法

答：细胞壁成分比较：

原生质体制备方法：

1)

2) G +G -菌原生质体获得：3) 4) 5)

2.在以消毒奶为原料生产酸奶的过程中，为什么要在尽可能短的时间内达到酸凝？可采取哪 些措施？

见 01.3

3.在遗传育种过程中，紫外线是应用最方便和最普遍的诱变育种方法之一，为达到良好的诱 变效果，你认为怎样操作比较合理

答：操作方法如下

1. 由于存在光复活作用，故辐照和处理后的培养应避免可见光照射（应在红光下照射）

2. 微生物所受射线的制备取决于灯的功率，照射距离和时间成正比，故照射时间的长短可作为相对剂量， 一般用 15W 的紫外灯，距离在 30cm ，选用致死率达 90%-99.9%所需的辐射时间进行诱变处理，各类微生 物所需的最佳时间不同。

3. 照射不宜在肉汤等成分复杂的液体中进行，以免化学反应的干扰，同时要有电磁搅拌设备，以求照射均 匀，尤其在菌液浓度较大或菌体，孢子等较大时很容易在处理期间发生沉降，造成不均匀

4. 照射前紫外灯宜先预热 20~30min ，使光线稳定。

4.试述艾姆氏实验（Ames test ）法检测致癌剂的理论依据，方法概要和优点。

见练习题 25 题。具体内容见二版 p215

答：理论依据是由于一切生物的遗传物质都是核酸尤其是 DNA ，因此凡是能改变核酸结构的因素都可影 响核酸的生物学功能，某些化学物质会引起核酸结构损伤，并对生物具有致突变，致癌变，致畸变的作用。 根据生物化学统一性原理，人们可选用最简单的低等生物（如细菌）做为模型去了解发生在复杂的高等生 物（如人类）体内的突变事件（如致癌）的原因。

鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如发生回复突变成原养型 后能生长。方法大致是在含待测可疑“三致”物（例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反应停”或二垩英等）

的试样中，加入鼠肝匀浆液，经一段时间保温后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放置于平板中央。经过培

养后，出现三种情况：

①在平板上无大量菌落产生，说明试样中不含诱变剂；

②在纸片周围有一抑制圈，其外周围出现大量菌落，说明试样中有某种高浓度诱变剂存在；

③在纸片周围长有大量菌落，说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。

优点：快速、准确和费用省等。

注意两点：

（1）因为许多化学物质之前并非诱变剂/致癌剂，只有在进入机体并在肝脏解毒过程中受到肝细胞一些加氧酶作用才形成有害的环氧化物或其他激活态化合物，因此需加鼠肝匀浆液保温

（2）除需要用营养缺陷型之外，还应是DNA 修复酶的缺陷型实验菌株

5.为什么有些诱变菌株对末端代谢产物的结构类似物具有抗性？试举例说明这些菌株对工业菌株选育的重要性？

答：应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节

这类菌株解除了末端代谢产物反馈抑制或和阻遏。A调节亚基发生变异。B 操纵子的控制基因发生变异，产生的调节蛋白对类似物不敏感。结构类似物会与调节酶的调节亚基或和阻遏酶的原阻遏物结合，从

而发生反馈抑制或和阻遏。结构类似物不能参与正常代谢，所以会使未突变细胞饥饿而死。而解除了反馈

调节的菌株对结构类似物就具有“抗性”。以此为筛子可筛选到大量积累末端代谢产物的菌株。在工业上利

用结构类似物作筛子，可筛选其对应氨基酸的高产株。

以赖氨酸发酵为例,谷氨酸棒杆菌对赖氨酸的结构类似物S-(β氨乙酰基)胱氨酸(A EC)敏感,是赖氨酸毒

性类似物。它能抑制合成途径中的天冬氨酸激酶,但不能参与蛋白质的合成。当细胞在含有A EC 的培养基

中培养时,野生型菌株由于得不到赖氨酸营养而遭淘汰,抗A EC 突变型则因编码天冬氨酸酶结构基因发生了

突变,变构酶调节部位不再能与代谢拮抗类似物相结合,而其活性中心却不变,这种突变型在正常代谢时,最

终产物与代谢类似物结构相似,故也不与结构发生改变的变构酶相结合,这样,这种抗反馈调节突变型对产物

抑制脱敏,仍有正常的催化功能,从而过量生产赖氨酸。

6.根据免疫学原理设计一种快速灵敏的检测炭疽芽孢杆菌的方法，并说明原理

见99.6

7.下列食品如果变质，主要由什么类型的微生物所引起的？为什么？如何防止？

（1）市售的面粉（2）真空包装的蜜饯产品

见97.4

05年硕士题

1.简述艾姆氏实验（Ames test），并解释其原理.

见04.4

2.什么是大肠菌群？检测食品中大肠菌群数的意义是什么？检测中常用的麦康开培养基（蛋

白胨20g，乳糖10g，牛胆酸盐5g，NaCl 5g,水1000ml，PH7.4, 1%中性红5ml）属于哪一

类培养基？该培养基中各成分所起的作用是什么？该培养基在制备中可采用什么杀菌条件？

为什么？

见98.4

3.检测食品中的致病菌和毒素的快速灵敏的检测方法有哪些？请设计一种利用ELISA方法快

速检测食品中黄曲霉毒素的实验方案，并说明理由

见99.6，01.5

4.影响微生物的耐热性的因素有哪些？什么是D值，什么是Z值? Z值与D值的关系是什么？

并加以证明

见99.4

5.什么是营养缺陷型，筛选营养缺陷型的方法有哪些？在肌苷酸的生产中往往可以采用腺苷

酸琥珀酸合成酶缺失的腺嘌呤缺陷型菌株来实现提高产量，试设计一种筛选腺嘌呤缺陷型菌

株的实验方案？并说明理由。

营养缺陷型：野生型菌株经诱变剂处理后由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成

产物的培养基中才能生长，此类突变菌株称营养缺陷型

步骤如下：

（一）菌悬液的制备

取目的菌株一环接入完全培养基中培养，使细胞处于对数生长期，用缓冲溶液调整细胞浓度在107-108

个/ml

（二）诱变处理

取上述菌悬液2ml 于小培养皿（内含搅拌子）中，将其放置在磁力搅拌器在搅拌状态下接受紫外线照

射，完毕后立即离心收集细胞，并避光保存。

（三）青霉素淘汰野生型

1. 将诱变处理的菌体用完全培养液振荡培养2~3 代以结束表型延迟现象，达到稳定的表型和生理状况

2. 将完全培养基培养后的菌体进行离心，洗涤，转移到基本培养基中饥饿培养4~6h，使营养缺陷型菌株

停止生长，以防止以后被加入的青霉素杀死，再转移到含无机氮的培养基中培养3~4h,使野生型刚刚进

入对数期，加入一定浓度的青霉素（青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，因而能杀死正常生长繁殖

的野生型细菌，但无法杀死正处于休止状态的营养缺陷型细菌，同时加20%的蔗糖以提高渗透压（防

止野生型破裂释放许多营养使营养缺陷型细胞生长），杀死野生型后转移到不含青霉素的低渗透压的溶

液中稀释，涂皿分离。

（四）检出缺陷型

将完全培养基上形成的每个菌落用无菌牙签分别点种在基本培养基和完全培养基的相应位置上，37℃

培养12~16h，在完全培养基上生长而在基本培养基上不生长的菌落继续接种在基本培养基和完全培养基的对应位置上，如此传代5~6 次，最后在完全培养基上生长而在基本培养基相应位置上不生长的菌株即可确定为营养缺陷型菌株

（五）鉴定缺陷型：(生长谱法)

将挑出的缺陷型制成菌悬液（106~108个/ml）涂布在基本固体培养基表面，待表面干燥后，在标定位置上放少数含腺嘌呤的滤纸片，37℃培养12~16h，经培养后在纸片周围有生长圈的，即表明为腺嘌呤缺陷型菌株。

06年硕士题

1、下述微生物的生态环境如何？设想如何分离它们？（15分）

嗜热菌，嗜盐菌，高渗酵母菌，芽孢菌，光合细菌，金黄色葡萄球菌。

练习题第35 题

答：嗜热菌：温泉，火山地，地热区土壤，草堆，煤堆，海底火山口等地方，在高温下培养分离，t 大于

45℃

嗜盐菌：海滩，高盐环境，如食品腌制厂，盐厂，盐湖等，在培养基中有一定盐（0.2~0.5mol/l）盐分

条件下分离，因为其他菌无法正常生长，注意如果在低盐条件下也能生长，只能称耐盐微生物）厌氧菌：无氧条件；河底污泥、沼气池，堆肥中心等。进行厌氧培养，再通过影印平板划线分离培养高渗酵母菌：酱油厂，糖浆等高浓度糖的高层培养基中分离培养

乳酸菌：乳制品厂周围，蔬菜腌制中酸的环境ph＜4.5 （其余细菌不易生长）

纤维素分解菌：森林、木厂、牧场、草厂等以纤维素为 C 源的培养基中

金黄色葡萄球菌：化脓的伤口甘露醇氯化钠琼脂培养基

光合细菌，在水中，在缺氮培养基下进行分离培养，普通细菌没有氮源无法生长

2、在食品添加剂和酶制剂中，有相当一部分是来源于微生物的代谢产物，如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明。（15分）

见97.1

3、检测食品中的大肠菌群指标的意义是什么？通常采用什么方法？现有一种采用革兰氏阳性厌氧菌制成的益生菌活菌产品，该菌可发酵乳糖产酸产气，且能耐受高浓度的胆汁盐，试设计一种检测该产品中的大肠菌群数的方法。（15分）

见98.4 ，对于益生菌检测，列举如下见07 年真题，对于革兰氏阳性厌氧菌，不必做其中的通气实验。

4、在防止食品腐败变质中，是否可以使用抗生素？为什么？如果使用，所使用的抗生素应具有什么特性？

答：

1、根据《药品管理法》的有关规定，抗生素属于药品。研制、生产、销售、使用药品，必须是取得药品

经营资质的单位，例如，这些单位必须是药厂、药店、医疗机构等。食品生产企业无法取得相应的证照，也就是说根本无法购进成批的抗生素原料，能买到的只是药店里的成方制剂，这恐怕难以用于批量生产。

2、抗生素类药物根据其化学结构有着不同的抗菌谱。抗菌谱最广的也仅仅限于大部分的原核微生物，无

法对全部微生物起效，因此，抗菌素只是可以对抗细菌，但是不能对抗除细菌外的其它微生物，没有防腐作用的。抗生素不是防腐剂。

3、食品中是禁止添加药品的，我国已经有相当一部分食品、保健品中加入药品后被查处的案例，何况是

抗生素这一类有较高致敏性和较多不良反应的药物。另一方面，抗生素的加入还可能会培养耐药菌株。

您所生产的食品必须根据《食品卫生法》的有关规定选用合适的防腐剂。对于食品加入违禁成分的，食品药监、工商等有关部门会查处。

4、如果所添加的物质属于食品添加剂的范畴（譬如乳酸链球菌素和纳他霉素就是抗生素,现在已经在食品

的防腐中得到广泛的应用）,应符合以下要求:

（1）安全性

如果是新的食品添加剂,要包括安全性实验数据(动物实验/人体实验),证明其无明显风险。

（2）适用性

食品生产的适应性研究：针对单个食品生产工艺进行系统适用性实验，验证该添加剂应用在该特定食

品工艺时的效果和性能、确保不会产生其它不良影响。

食品生产的稳定性研究：证明该添加组分在食品保存中起效、不产生不良影响。

综上，抗生素不应纳入食品的研究及生产范畴。

5、什么是D值？什么是Z值？试以公式说明Z值和D值的关系，并证明该式。（15分）见99.4

07年硕士题

1.以下食品的腐败原因:1.发酸的果酒;

2.表面出现丝状物的月饼

见97.4

江南大学发酵微生物5考研真题

1995年硕士学位研究生入学考试试题 第一部分 一、填空 1、微生物的分类方法有（）（）（）三种，目前常用的是（） 2、荚膜是指（）据其在细胞表面的状况可以分为（）（）（）（）四类 3、耐高温微生物之所以能在较高的温度下生存和繁殖，主要是因为（） 4、防止菌种衰退的主要措施有（）（）（）（） 5、空气中的微生物主要来源于（）（）（）（） 6、制备固体培养基常用的凝固剂主要有（）（）（） 二、判断 1、原噬菌体是指蛋白质外壳尚未包装完成的噬菌体（） 2、营养琼脂培养基可以用于培养E.coli, Lys- Met -,Str-菌株（） 3、在对数生长期中，细菌的生长速度是不变的（） 4、微生物在其生长温度范围之外的湿度下即停止生长并快速死亡（） 5、细菌的抗药性的产生是基因突变的结果（） 6、为避免细胞对DNA的损伤的修复，经过紫外线诱变的细胞要在红光下做避光培养（） 7、兼性厌氧微生物在氧化还原电位大于或小于＋0.1v的环境中均可以生长，只是获取能量的方式不同（） 8、构成细胞壁网状骨架结构的主要物质在细菌和放线菌中是肽聚糖，在酵母菌和霉菌中是葡聚糖（） 三、单选 1、用单细胞微生物进行发酵时，应该选用（）的种子进行菌种扩培 A 对数前期 B 对数中期 C 对数后期 D 稳定期 2、能造成碱基烷化的诱变剂是（）

A NTG B HNO2 C 5-BU D ICR-100 3、供受体菌细胞间不接触即可进行基因重组的方式为（） A 接合 B 转导 C 转化 D 原生质体融合 4、察式培养基用于培养（） A 细菌 B 放线菌 C 酵母菌 D 霉菌 5、对staphylococcus aureus 进行革兰式染色后镜检时发现有少量细胞成红色，其原因是（） A 脱色过度 B 培养时间过长细胞衰老 C 活化不好有死细胞存在 D 三种情况都有可能 6、由菌株A+B-和A-B+形成的异核体菌落上所长出的分生孢子一般情况下在（）培养基上不能萌发 A MM B MM+A C MM+B D MM+A+B 7、对于Bacillus subtilis而言。简便而又较长期的保藏方法是（） A 斜面冰箱保藏法 B 石蜡油封藏法 C 砂土保藏法 D 冷冻干燥保藏法 8、能形成芽孢的细菌是（） A E.coli B Bacillus subtilis C Acetobacter D pasteurianus 四、名词解释 异宗配合子囊孢子芽裂 E.coli k12(λ) 分批培养 BOD5 世代时间 五、问题 1、试述真核微生物与原核微生物的主要区别 2、微生物的营养物质有哪几类？微生物将营养物质输送至细胞内的各种方式的特点如何？ 3、试画出典型的根霉和曲霉的无性繁殖结构图并简要说明各部位的名称 第二部分 一．填空

食品微生物学第1阶段测试题

江南大学现代远程教育第一阶段测试卷 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）第一章至第五章 时间：90分钟 学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 巴斯德效应 答：在厌氧条件下，向高速发酵的培养基中通入氧气，则葡萄糖消耗减少，抑制发酵产物积累的现象称为巴斯德效应。即呼吸抑制发酵的作用。 2. 噬菌斑 答：有噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”即为噬菌斑。 3. 伴孢晶体 答：某些芽孢杆菌，如苏云芽孢金杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的的碱溶性蛋白晶体，称为伴孢晶体。 4. 烈性噬菌体 答：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、复制、装配和裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体。 5. 温和性噬菌体 答:凡在吸附侵入细胞后，噬菌体的DNA只整合在宿主的染色体组上并可以长期随宿主DNA的复制而进行同步复制，一般都进行增殖和引起宿主细胞裂解的噬菌体。 6. 自养微生物 答：凡以无机碳源作为主要碳源的微生物。 7. 呼吸链 答：指位于原核生物细胞膜上或真核生物线粒体膜上的，由一系列氧化还原势呈梯度差的、链状排列的氢（或电子）传递体。 8. 异型乳酸发酵 答：凡葡萄糖经发酵后除主要产生乳酸外，还产生乙醇、乙酸和二氧化碳等多种产物的发酵。 9. Ａw 答：水分活度数值用Aw表示，水分活度值等于用百分率表示的相对湿度，其数值在0-1之间。溶液中水的蒸气分压P与纯水蒸气压O的比值，Aw=P/O。 10. 溶源性细菌

答：即在染色体上整合了温和噬菌体的核酸，但在细菌体内又检查不出成熟噬菌体颗粒的存在， 这样的细菌称为溶源性细菌。 二、图解题(本题共4小题，每题5分，共20分) 1．营养物跨膜运输的四种类型。 答：

江南大学微生物考研(发酵真题)-2009年硕士学位研究生入学考试题

2009年硕士学位研究生入学考试题 考试科目：823微生物学（发酵）A 请将题号和答案写在答题纸上，直接写在试卷上无效！ 一、判断题：正确的回答T，不正确的回答F（2分*15） 1. 一般情况下，在土壤中细菌的总数和生物量往往都是高的。 2. 青霉素抑制肽聚糖分子中肽桥的生物合成，因此对于生长旺盛的细胞明显的抑制作用，而对于休止细胞无抑制作用。 3. 芽孢在适宜条件下可以萌发成为营养细胞，但芽孢不是细菌的繁殖方式。 4. 发酵是一种没有外源电子受体的生物氧化方式。 5. 有鞭毛细菌去除细胞壁后鞭毛失去了着生位点，从而将失去运动能力。 6. 好氧处理能更快的分解废水中的有机物，因此废水中的有机物浓度越高，越适于采用好氧方式处理。 7. 啤酒酿造的发酵温度与酿酒酵母的最适生长温度基本上是一致的。 8. 通常在耐氧厌氧微生物与兼性厌氧微生物细胞中都含有SOD酶和过氧化氢酶。 9. 已经发现的嗜高温微生物都是古生菌，它们的最适生长温度一般要高于80℃. 10. EMB培养基中，伊红美蓝有促进大肠杆菌生长的作用。 11. 两株具有不同营养缺陷型标记的霉菌进行准性生殖时，所形成的异核体和杂合二倍体的分生孢子在基本培养基上都能够生长。 12. 无义突变是指不造成任何遗传效应的无意义突变。 13. SOS修复系统是诱导产生的一种修复体系，它属于一种倾向差错的修复。 14. Ames试验是利用细菌突变来检测环境中存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。可以通过某待测物质对微生物的诱变能力间接判断其致癌能力。 15. 亚硝酸、羟胺和5-溴尿嘧啶都能诱发碱基置换，因此在大多数情况下，它们诱发的突变都可以被它们自己诱发而得以回复。 二、名称解释：（3分*10） 1. 生长因子 2. 拮抗作用 3. 局限性转导4 移码突变 5. 增值培养 6. 高压蒸汽灭菌法 7.巴斯德效应 8. biofilm 9．Peptideglycan 10.Escherichia coli（Migula）Cvastellani et Chalmers 1919 三、问答题（共90分） 1. 试述大肠杆菌、酿酒酵母、红曲霉和T4噬菌体这四种微生物的主要繁殖过程，并从微生物繁殖方式的角度谈谈你对微生物多样性的认识。（20） 2. 微生物营养物质的跨膜运输有哪几种方式？试从输送动力、输送方向、是否需要载体和代谢能量、输送物质种类（举例）及输送前后存在状态等方面对各自的特点进行比较。（20） 3. 何谓基因工程？为什么说基因工程的操作离不开微生物？（15） 4. 适述配制斜面培养基的程序和注意事项。（培养基配方：牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、NaCl0.5%、琼脂2%，Ph7.2,灭菌121℃ 20min）（15） 5. 以谷氨酸棒杆菌为出发菌株，通过诱变育种，为什么筛选Hser-AECr株，可以获得赖氨酸（Lys）高产菌株？并进一步叙述通过紫外诱变，筛选Hser-突变株的主要步骤及理由。（20）

江南大学微生物实验部分试题库及标准答案

江南大学微生物实验部分试题库及标准答案 一、名词解释题 1.电子显微镜：电子显微镜是利用电子波波长短,分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。 2.普通光学显微镜：用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。 3.合成培养基：由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。 4.人工培养基：人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。 5.天然培养基：由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯,麸皮等配制而成的培养基。 6.半合成培养基：由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。 7.革兰氏染色法：革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法,细菌首先用结晶紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后,又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色,也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。 8.简单染色：用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。 9.稀释平板计数法：将一定量的样品经十倍稀释后,用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后,计数出某一稀释度的菌落数后再乘以稀释倍数,即为样品中的含菌数。10.显微直接计：利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后,再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。 二、选择题 01.革兰氏染色的关键操作步骤是: A.结晶紫染色。 B.碘液固定。 C.酒精脱色。 D.复染。答:(C) 02.放线菌印片染色的关键操作是: A.印片时不能移动。 B.染色。 C.染色后不能吸干。 D.A-C。答:(A)。 03.高氏培养基用来培养: A.细菌。 B.霉菌。 C.放线菌。D酵母菌答:(C)。 04.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌。 B.霉菌。 C.细菌。D放线菌答:(C)。 05.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌。 C.根瘤菌。 D.A,B均可培养。答:(D)。 06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯。 B.水。 C.香柏油。D甲苯答:(C)。 07.常用的消毒酒精浓度为: A.75%。 B.50%。 C.90%。D70% 答:(A)。

微生物代谢工程 - 江南大学研究生院学习资料

微生物代谢工程-江南大学研究生院

生工学院 课程编号：020302 课程名称：生命科学与生物技术进展（Advances on Life Science and Biotechnology） 总学时：50 学分：3.0 主讲教师：陶文沂(教授)、陈坚（教授）、王武（教授）、诸葛健（教授）、金坚（教授） 主要内容：使得相关专业的博士研究生了解并掌握植物细胞和组织培养技术和植物生物技术；蛋白质分子水平的研究进展以及蛋白质设计与改造；环境科学；发酵工业的近期发展和转基因食品的近期及发展趋势和基因方面的研究进展及最新技术。 课程编号：021001 课程名称：现代水污染控制理论与技术（Advanced Theory and Technology of Water Pollution Control） 总学时：36 学分：2.0 主讲教师：李秀芬(副教授)、华兆哲（副教授） 主要内容：膜分离技术与水处理、膜生物反应器、光催化、Fenteon反应。通过学习使学生了解环境技术状况，掌握环境污染控制技术与方法，跟踪国内外环境技术前沿。 课程编号：021003 课程名称：环境工程进展（Progress of Environmental Engineering） 总学时：36 学分：2.0 主讲教师：陈坚（教授） 主要内容：环境微生物学进展、废水生物处理工程进展、废水物化处理技术进展、废物资源化技术研究进展、污染事故的生物补救和污染场地生物修复研究进展。本课程旨在追踪国内外环境科学与工程前沿，以利于学生及时掌握该领域的最新发展动态。 课程编号：021004 课程名称：生化工程进展（Advances in Biochemical Engineering） 总学时：36 学分：2.0 主讲教师：陈坚（教授） 主要内容：绪论、发酵过程优化原理、发酵过程的系统优化技术、赖氨酸发酵过程优化、丙酮酸发酵过程优化、透明质酸发酵过程优化、谷氨酰胺转胺酶发酵过程优化、聚羟基烷酸(酯)发酵过程优化。通过本课程学习，使研究生了解和掌握生化过程的一些最新研究进展情况，以及生化过程优化控制中的一些先进手段和具体应用实例，为今后从事这方面的研究开拓视野并能由此打下扎实的基础。 课程编号：021006 课程名称：现代环境生物技术（Advanced Environmental Biotechnology） 总学时：36 学分：2.0 主讲教师：陈坚(教授)

食品微生物学第1阶段江南大学练习题答案 共三个阶段,这是其中一个阶段,答案在最后。

江南大学网络教育第一阶段江南大学练习题答案共三个阶段，这是其中一个阶段，答案在最后。 考试科目:《食品微生物学》第章至第章（总分100分） __________学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一单选题 (共8题，总分值8分，下列选项中有且仅有一个选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。) 1. 最早发现微生物、并被后人称为微生物学先驱的科学家的是 ( ) （1 分） A. 列文虎克 B. 巴斯德 C. 柯赫 D. 弗莱明 2. 引起疯牛病和人的克-雅氏病的亚病毒因子是( ) （1 分） A. 朊病毒 B. 拟病毒 C. 类病毒 D. 卫星病毒 3. 下列微生物结构与代谢产物中可用于制造医用塑料和快餐盒的是( ) （1 分） A. LPS B. PHB C. 肽聚糖 D. 葡聚糖 4. 在普通光学显微镜下不适合用血球计数板计数的微生物为( ) （1 分） A. 酵母活菌 B. 酵母总菌 C. 霉菌孢子 D. 细菌总数 5. 下列微生物中，经革兰氏染色后染色结果呈现红色的是( ) （1 分） A. Bacillus cereus B. Escherichia coli C. Clostridium botulinum D. Staphylococcus aureus 6. 下列微生物中能产生伴胞晶体的是( ) （1 分） A. 枯草芽孢杆菌 B. 腊状芽孢杆菌 C. 苏云金芽孢杆菌 D. 肉毒梭状芽孢杆菌 7. 单独用溶菌酶处理后可以得到原生质体的微生物是( ) （1 分）

A. 啤酒酵母 B. 荨麻青霉 C. 沙门氏菌 D. 枯草芽孢杆菌 8. 在果园、菜园等酸性土壤中，含量最多的微生物类群为( ) （1 分） A. 酵母菌 B. 细菌 C. 放线菌 D. 霉菌 二多选题 (共5题，总分值10分，下列选项中至少有2个或2个以上选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。) 9. 细菌细胞的一般构造包括以下哪几项( ) （2 分） A. 细胞壁 B. 鞭毛 C. 内含物 D. 细胞膜 E. 伴孢晶体 10. 以下食品中常见的革兰氏阳性菌为( ) （2 分） A. 枯草芽孢杆菌 B. 大肠杆菌 C. 沙门氏菌 D. 金黄色葡萄球菌 E. 酿酒酵母 11. 下列哪些食品的制作需要利用微生物的发酵作用( ) （2 分） A. 腐乳 B. 豆豉 C. 泡菜 D. 蜜饯 E. 肉罐头 12. 微生物的特点包括( ) （2 分） A. 体积小、面积大 B. 吸收多、转化快 C. 吸收多、转化快 D. 适应强、易变异 E. 分布广、种类多 13. 下列哪些菌能够产生抗生素( ) （2 分） A. 大肠杆菌 B. 灰色链霉菌 C. 金黄色葡萄球菌 D. 产黄青霉菌 E. 枯草芽孢杆菌 三判断题 (共10题，总分值10分正确的填涂“A”，错误的填涂“B”。) 14. 细菌的大小和形态是始终不变的，因而可作为分类依据。（1 分）（） 15. 芽孢是真菌的一种繁殖细胞。（1 分）（） 16. 霉菌是一种单细胞微生物。（1 分）（）

食品微生物学第新阶段测试题

食品微生物学第新阶段 测试题 GE GROUP system office room 【GEIHUA16H-GEIHUA GEIHUA8Q8-

江南大学现代远程教育第三阶段测试卷 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）综合测试 时间：90分钟 学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 鉴别性培养基 答：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基 2. 暗修复 答：指细胞的DNA经过紫外线照射损伤后，在不依赖可见光的条件下，通过酶切作用去除嘧啶二聚体，随后重新合成一段正常DNA链的核酸修复方式，这个过程有多种酶的参包括：核酸内切酶、核酸外切酶、DNA聚合酶和、DNA连接酶。 3. 光复活

答：指经紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光下时，可明显降低其死亡率的现象。光复活的机制是可见光（有效波长400nm左右）激活了光复活酶，分辨紫外线照射形成的DNA嘧啶二聚体，从而实现DNA损伤修复。 4. 生长因子 答：生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。狭义的生长因子一般仅指维生素，广义的生长因子除维生素外，还包括碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类和脂肪酸等。 5. 革兰氏染色 答：革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，即待检细菌细胞通过结晶紫初染、碘液媒染、乙醇洗脱、番红复染等步骤后，在普通光学显微镜下被区分成红色（革兰氏阴性）或紫色（革兰氏阳性）细胞的实验。革兰氏染色结果是菌种分类鉴定的一个重要指标。 6. D值 答：是指在一定的处境和一定的热力致死温度条件下，某细菌数群中90％的原有残存活菌被杀死所需的时间（min )。 7. Z值 答;指灭菌时间减少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭99%的微生物所需提高的温度。

江南大学微生物习题

江南大学微生物习题 Revised final draft November 26, 2020

名词解释 1997 1原生质体2芽孢3菌落4诱导酶5生长因素6回复突变7诱导8拮抗9血清学反应10巴斯德效应? 1998 1芽孢2菌落3质粒4回复突变5生长因子6诱导酶7拮抗8巴斯德效应9光复活作用10活性污泥? 1999? 1原生质体2菌落3质粒4芽孢5诱导酶6生长因子7巴斯德效应8营养缺陷型9B O D10血清学反应? 2000? 1温和性噬菌体2巴斯德效应3艾姆斯试验（Amestest）4ELISA?5PCR? 2001? 1类毒素2暗修复作用3巴斯德效应4诱导酶? 2002? 1转化2半抗原3活性污泥4回复突变5P C R 填空1997? 1微生物生长的特点是：_____

2微生物的学名是由_和_所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是_。影响染色的主要因素是_和_，革兰氏染色后为红色的是_ 4酵母菌是_，其无性繁殖方式是_和_，有性繁殖是_ 5霉菌产生的无性孢子有___ 6噬菌体的特点是___，其生长繁殖过程包括_____五个步骤。7培养基按用途可分为_____ 8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于_，大多数霉菌属于_ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有___等10光复活作用是指____四种情况11染色体畸变是指____四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_ 13影响微生物的抗热性的因素是_____ 14B O D是指_ 15在空气中能较长时间的微生物类群是__特点是_ 16培养时，培养皿倒置是为了_和_ 17平板菌落计数法结果表达中常用的“c l u”的意思是_ 1998?

食品微生物学第3阶段练习题答案 江南大学2020年12月

江南大学网络教育第三阶段练习题正确的答案是江南大学2020年12月 考试科目:《食品微生物学》第章至第章（总分100分） __________学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一单选题 (共10题，总分值10分，下列选项中有且仅有一个选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。) 1. 当人受到外伤时，用红汞药水洗伤口，这种过程称为( ) （1 分） A. 灭菌 B. 抑菌 C. 防腐 D. 消毒 2. 食物中最常见的粪便污染指示菌是( ) （1 分） A. 粪肠球菌 B. 李斯特菌 C. 沙门氏菌 D. 大肠菌群 3. 下列菌种保藏方法中，保藏效果最好的菌种保藏方法是( ) （1 分） A. 低温保藏法 B. 隔绝空气保藏法 C. 真空冷冻干燥保藏法 D. 寄主保藏法 4. 测定细菌菌落总数时，细菌的培养温度一般是( ) （1 分） A. 4℃ B. 28℃ C. 37℃ D. 42℃ 5. 下面哪种微生物适合采用砂土管法来进行菌种保藏( ) （1 分） A. 无芽孢菌 B. 噬菌体 C. 酵母菌 D. 霉菌 6. 用微生物来检测水质有机物质含量的指标是( ) （1 分） B. COD C. TOD D. TOC A. BOD5 7. 测定细菌菌落总数时，细菌的培养时间一般控制在( ) （1 分）

A. 8～12小时 B. 24～48小时 C. 36～72小时 D. 4～8小时 8. 下列对于暗修复过程描述正确的是( ) （1 分） A. 在黑暗中进行的一种重组修复 B. 由多种酶参与的DNA修复过程 C. 在可见光存在下不能进行暗修复 D. 是光复活过程的逆向过程 9. 在酸奶发酵时，嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种在一起培养时的产酸速度明显高于将 两种微生物单独培养时的产酸速度，这种关系称为( ) （1 分） A. 竞争 B. 共生 C. 拮抗 D. 互生 10. 下列哪类菌株不适合在发酵工业上提高生产效率( ) （1 分） A. 营养缺陷型菌株 B. 噬菌体敏感菌株 C. 细胞膜缺损突变株 D. 抗反馈调节突变株 二多选题 (共5题，总分值10分，下列选项中至少有2个或2个以上选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。) 11. 下列哪些物质可以作为食品防腐剂( ) （2 分） A. Nisin B. 大肠杆菌细菌素 C. 亚硝酸盐 D. 山梨酸钾 E. LPS 12. 低温对微生物的作用包括( ) （2 分） A. 可以作为杀菌的方法之一 B. 抑制微生物酶的活性 C. 影响营养物质的吸收 D. 可作为菌种保存手段 E. 在-70℃至-179℃范围造成大量菌体死亡 13. 影响微生物生长的代时长短的因素包括( ) （2 分） A. 不同菌种差别 B. 不同培养基造成的差别 C. 生长限制因子的浓度 D. 培养温度 E. 培养时间 14. 微生物培养稳定期的特点包括( ) （2 分） A. 生长速率常数为0 B. 细胞会积累糖原、异染粒等贮存物 C. 这一时间段的微生物是发酵种子的最佳菌龄时期

江南大学研究生微生物(食品)历年真题97~2011

江大食品微生物97-2011历届试题 97年 一．名词解释 1.原生质体； 2.芽孢； 3.菌落； 4.诱导酶； 5.生长因素 6.回复突变； 7.诱导； 8.拮抗； 9血清学反应； 10.巴斯德效应 二．图解： 1.曲酶的细胞形态； 2.Z值； 3.微生物营养物质的四种运输方式； 4.微生物生长与T的关系 三．填空 1微生物生长的特点是：___ 、、、、、生长旺、繁殖快。 2微生物的学名是由_____和____所组成。 3细菌革兰氏染色的主要原理是__。影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是__. 4酵母菌是__，其无性繁殖方式是____和____，有性繁殖是____和____。 5霉菌产生的无性孢子有_____、_____、 _____。 6噬菌体的特点是___、___、___，其生长繁殖过程包括____、____、_____、____、____五个步骤。7培养基按用途可分为_____五种。 8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于____，大多数霉菌属于____ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有______、_____、_____等 10光复活作用是指____、___、___、___、四种情况 11染色体畸变是指____、___、___、___、四种情况 12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_ 13影响微生物的抗热性的因素是_____、___、 ___、___、___、 14 BOD是指_ 15在空气中能较长时间的微生物类群是____、_____、特点是____ 16培养时，培养皿倒置是为了_____和_____ 17平板菌落计数法结果表达中常用的“cfu”的意思是_____ 四．问答 1.如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明； 2.如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？Why？ 3.设计一种从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的试验方案，并解释主要步骤的基本原理； 4.下列食品如变质，主要是有什么类型的微生物所引起？说明其原因？ 1〉市售面包2〉充CO2的果汁； 5.菌种保藏主要利用什么手段？原理？举例说明.

食品微生物学第阶段测试题完整版

食品微生物学第阶段测 试题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

江南大学现代远程教育第二阶段测试卷 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）第六章至第十章 时间：90分钟 学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 共生 答：生物间密切联系、互有益处地共同生活在一起的现象。 2.BOD5 答：5日生化需氧量。 3.抗原 答：能使人和动物体产生免疫反应的一类物质，既能刺激免疫系统产生特异性免疫反应，形成抗体和致敏淋巴细胞，又能与之结合而出现反应。 4.抗体 答：在人和动物体内，由于抗原或半抗原入侵刺激机体而在细胞中产生的免疫球蛋白。能可逆、非共价、特异地与相应抗原结合，形成抗原-抗体复合体。 5.血清学反应 答：是指相应的抗原和抗体在体外进行的结合反应。 6.商业灭菌 答：将病原菌、产毒菌及在食品上造成食品腐败的微生物杀死，罐头内允许残留有微生物或芽孢，不过，在常温无冷藏状况的商业贮运过程中，在一定的保质期内，不引起食品腐败变质。 7.内毒素 答：由革兰氏阴性菌所合成的一种存在于细菌细胞壁外层、只有在细菌死亡和裂解后才释出的有毒物质。 8.类毒素 答:由于变性或化学修饰而失去毒性的毒素，但仍保留其抗原性。 9.多克隆抗体 答：多种抗原表位刺激机体免疫系统后，机体产生的针对不同抗原表位的混合抗体。 10. 单克隆抗体 答：高度均质性的特异性抗体，由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞。 二、图解题(本题共4小题，每题5分，共20分) 1. 图解埃姆斯实验的具体流程。 2. 图解微生物诱变育种过程。

食品微生物学第2阶段练习题及答案

江南大学现代远程教育第二阶段练习题 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1.代时 当微生物处于生长曲线的指数期(对数期)时，细胞分裂一次所需平均时间，也等于群体中的个体数或其生物量增加一倍所需的平均时间。又称世代时间。 2.生长速率常数 微生物每小时的分裂代数（R），用来表示细胞生长繁殖速率 3.巴氏灭菌 是一种利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法。 4. 间歇灭菌 间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。 5.抗生素 是一类由微生物或其他生物生命活动过程中合成的在很低浓度时就能抑制或干扰它种生物（包括病原菌、病毒、癌细胞等）的生物活动的次生代谢产物或其人工衍生物。 6.营养缺陷型 对某些必需的营养物质(如氨基酸)或生长因子的合成能力出现缺陷的变异菌株或细胞。必须在基本培养基(如由葡萄糖和无机盐组成的培养基)中补加相应的营养成分才能正常生长。 7.转化 转化是供体菌裂解游离的基因片段被受体菌直接摄取, 使受体菌获得新的性状 8. 普遍性转导 普遍性转导是以温和噬菌体为载体,将供体菌的一段DNA转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状,如转移的DNA 是供体菌染色体上的任何部分,则称为普遍性转导 8.缺陷性转导 指噬菌体只能传递供体染色体上原噬菌体整合位置附近基因的转导过程。 9.溶源转变 当温和噬菌体感染其宿主而使之发生溶源化时，因噬菌体的基因整合到宿主的基因组上，而使后者获得了除免疫性以外的新性状的现象，称为溶源转变。 二、图解

江南大学微生物考研(发酵真题)-微生物名词解释

微生物名词解释 微生物(Microbe): 微观的生物机体。(细小的肉眼看不见的生物) 原核微生物(prokaryotic microbe)：指核质和细胞质之间不存在明显核膜，其染色体由单一核酸组成的一类微生物。 原核细胞型微生物(procaryotic cell microbe):指没有真正细胞核（即核质和细胞质之间没有明显核膜）的细胞型微生物。 真核细胞型微生物(eukaryotic cell microbe):指具有真正细胞核（即核质和细胞质之间存在明显核膜）的细胞型微生物。 真菌(fungi)：有真正细胞核，没有叶绿素的生物，它们一般都能进行有性和无性繁殖，能产生孢子，它们的营养体通常是丝状的且有分枝结构，具有甲壳质和纤维质的细胞壁,并且常常是进行吸收营养的生物。 霉菌(Mold): 具有丝状结构特征的真菌。 细菌(bacterium)：单或多细胞的微小原核生物。 病毒(virus)：是一类没有细胞结构但有遗传复制等生命特征，主要由核酸和蛋白质组成的大分子生物。是比细菌更小的专性细胞内寄生的微生物，大多数能通过细菌过滤器。 放线菌(actionomycetes）：一目形成真的菌丝成分枝丝状体的细菌。 蓝细菌(cyanobacterium)：是光合微生物，蓝细菌是能进行光合作用的原核微生物。 原生生物(protistan)：指比较简单的具有真核的生物。 原生动物(protozoa)：单细胞的原生生物。 感染(Infection): 宿主由于微生物生长的病理学状况。 巴氏灭菌法(pasteurization)：亦称低温消毒法，冷杀菌法，利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法。 巴斯德消毒法(Pasteurization)：在一控制温度给液体食物或饮料加热以提高保藏质量，同时也消毀有害的微生物。 无菌的(Aseptic)：没有能够引起感染或污染的微生物。 化学疗法(chemotherapy)：用化学药物来治疗传染病。 化学治疗(Chemotherapy)：用化学制品治疗疾病。 抗生素疗法(tetracycline)：用真菌等生物产生的抗生素来治疗疾病。 分类学(Tasonomy)：尽可能有亲缘关系基础上对有机体的分类。 无性繁殖系(Clone)：从单一细胞传下来的细胞集群。 属(Genus)：一组亲缘关系非常接近的种。 分辨率(resolving power)：能够分辨出两者之间最小的距离。 菌株(Strain)：单一分离体后代组成的微生物纯培养物。 污染：微生物纯培养物和灭过菌的物品等被某些杂菌或有害微生物混人或沾染的现象。 螺旋状细菌(Spirillum): 螺旋状的或开塞钻状的细菌。（呈弯曲状的细菌） 螺旋体(Spirochete): 螺旋形细菌；多为寄生性的。 梅毒(Syphilis)：由梅毒密螺旋体引起的一种性病。 链球菌(Streptococci)：分裂后细胞成链的球菌。 弧菌：菌体呈有一个弯曲呈弧形（即弯度一圈）。 螺菌：菌体较为坚硬有多个弯曲。 衰老型、退化型：细菌在老的培养物中会出现各种与正常形状不一样的个体，重新培养有些可以恢复，有些不可以恢复原来的形状。 细菌多型性：有些细菌尽管在最适宜的（正常的）环境中生长，其形态也很不一致。 菌柄(Prosthecas)：在诸如柄杆菌属的细菌中，作为细胞壁的一部分的附器。

江南大学2018年上半年食品微生物学第1阶段练习题

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 江南大学现代远程教育第一阶段练习题 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）第一章至第五章 学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 巴斯德效应 2. 噬菌斑 3. 伴孢晶体 4. 烈性噬菌体 5. 温和性噬菌体 6. 自养微生物 7. 呼吸链 8. 异型乳酸发酵 9. Ａw 10. 溶源性细菌 二、图解题(本题共4小题，每题5分，共20分) 1．营养物跨膜运输的四种类型。 2．当环境中葡萄糖、乳糖同时存在时，Ｅ．coli的生长现象并分析其原因。 3．图解细菌的一般构造与特殊构造。 4．图解谷氨酸棒杆菌在氨基酸生产过程中的反馈抑制模型。 三、问答题(本题共5小题，每小题10分，共50分) 1. 什么是病毒？简述病毒的特点？ 2．什么是培养基？简述选用和设计培养基的原则和方法? 3．什么是选择性培养基和鉴别性培养基？ 4．自微生物EMP途径中丙酮酸出发的发酵有哪些？它们对于食品与发酵工业的意义在哪里？5．微生物乳酸发酵类型有哪些，请加以详细说明？ 更多江南大学阶段测试参考答案网 江南大学现代远程教育第一阶段练习题 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）第一章至第五章 学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 巴斯德效应 2. 噬菌斑 3. 伴孢晶体 4. 烈性噬菌体 5. 温和性噬菌体 6. 自养微生物 7. 呼吸链 8. 异型乳酸发酵 9. Ａw

2013江南大学微生物学综合

一选择题（2*15） 1.放线菌的细胞壁主要成分是（） A 磷壁酸 B 肽聚糖 2.下列系统中哪个的微生物含量最低（） A 湖水B海洋C江水D深层地下水 3.担子菌菌丝和霉菌菌丝最大的不同（） A有横隔B锁状联合 4.准性生殖的过程中不包括（） A减数分裂B形成异核体 C核配质配D体细胞融合 5.体内缺乏SOD的微生物是哪类微生物（） A厌氧微生物 B 好氧生物 C 兼性厌氧 D 微好氧7.属于细菌特有的特殊结构为（） 其他都是一般结构只有荚膜是特殊结构 8. 9. 10. 11. 12.*观察某一酵母菌的生长情况用下列什么方法（） A干重测定 B 比色法 C 血球计数D平板划线 13.*下列属于多细胞的是（） A.青霉 B.灰色链霉菌 C.红曲霉 D.根霉

14.*烷化剂引起的鸟嘌呤突变作用主要有（） A脱嘌呤作用B形成嘧啶二聚体 C鸟嘌呤的交联 D 碱基配对错误 15*下列属于厌氧微生物的途径是（） A硝化作用 B 反硝化作用 C 乙醇发酵 D 磷酸戊糖途径 E 酒精发酵F乙醛酸循环G甘油酸循环（大概是这些，我不太记得清楚了） 二名词解释（3*10） 1.拮抗 2.BOD5 3.间体 4.重组修复 5.增变基因 6.VBNC bacteria 7.Biofilm 8.局限性转导 9.促进扩散 三问答题（15*6） 1.从微生物的繁殖方式角度谈谈你对微生物多样性的认识 2.给出下列培养基的配方，问在下列情况下适合什么类型的微生物的生长，碳源，氮源，能源及生长方式是什么

配方：葡萄糖NH4NO3 1g 氯化钠磷酸氢钾硫酸镁水微量元素生长因子什么的都有是个正常的完全的配方（1）有光照，有葡萄糖，有NH4NO3 ，有氧 （2）有光照，有葡萄糖，有NH4NO3，无氧 （3）无光照，有葡萄糖，有NH4NO3，无氧 （4）无光照，无葡萄糖，有NH4NO3，有氧 （5）有光照，有葡萄糖，无NH4NO3，有氧 3.分别说明Ecoli JM109 , PCR , ECOR1, PUC19, T4DNAligase在基因工程中的运用或意义 4.说出6种在实验室或是发酵工厂中常用的灭菌消毒的方法，分别说出他们的原理和适用对象 5.写出用紫外诱变筛选出Ecoli r str突变株的主要步骤及 其目的和注意点 6.黄色短杆菌产赖氨酸内有关合成代谢途径如下，试分析下表 天冬氨酸 天冬氨酸激酶 天冬氨酸-○p 高丝氨酸天冬氨酸半醛

食品微生物学 第3阶段测试题

江南大学现代远程教育第三阶段测试卷 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）综合测试 时间：90分钟 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 鉴别性培养基，一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基 2. 暗修复，指细胞的DNA经过紫外线照射损伤后，在不依赖可见光的条件下，通过酶切作用去除嘧啶二聚体，随后重新合成一段正常DNA链的核酸修复方式，这个过程有多种酶的参包括：核酸内切酶、核酸外切酶、DNA聚合酶和、DNA连接酶。 3. 光复活，指经紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光下时，可明显降低其死亡率的现象。光复活的机制是可见光（有效波长400nm左右）激活了光复活酶，分辨紫外线照射形成的DNA 嘧啶二聚体，从而实现DNA损伤修复。 4. 生长因子，生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。狭义的生长因子一般仅指维生素，广义的生长因子除维生素外，还包括碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类和脂肪酸等。 5. 革兰氏染色，革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，即待检细菌细胞通过结晶紫初染、碘液媒染、乙醇洗脱、番红复染等步骤后，在普通光学显微镜下被区分成红色（革兰氏阴性）或紫色（革兰氏阳性）细胞的实验。革兰氏染色结果是菌种分类鉴定的一个重要指标。 6. D值，是指在一定的处境和一定的热力致死温度条件下，某细菌数群中90％的原有残存活菌被杀死所需的时间（min )。 7. Z值，指灭菌时间减少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭99%的微生物所需提高的温度。 8. 益生菌，益生菌系一种对人体有益的细菌，它们可直接作为食品添加剂服用，以维持肠道菌丛的平衡。 9. Nisin，称为乳酸链球菌素亦称乳酸链球肽，是某些乳酸链球菌产生的一种多肽物质。是一种高效、安全、无毒、无副作用的天然食品防腐剂。 10．凝集反应，是一种血清学反应，指颗粒性抗原（完整的病原微生物或红细胞等）与相应抗体结合，在有电介质存在的条件下，经过一定时间，出现肉眼可见的凝集小块的现象。参与凝集反应的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素，可分为直接凝集反应和间接凝集反应两类。 二、图解题(本题共4小题，每题5分，共20分) 1. 机体产生抗体的两次应答规律。

江南大学考研微生物真题及答案b卷

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试卷专用纸

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微生物学试卷B答案

一、填空题： 1、球状、杆状、螺旋状；培养时间过长，营养缺乏或代谢产物积累过高 2、基内菌丝、气生菌丝、孢子丝 3、水、碳源、氮源、无机盐、生长因子；有机物氧化产生ATP；有机碳源 4、比表面积大，吸收多、转化快，生长旺、繁殖快，适应强、变异快，分布广、种类多 5、微生物正常生长，生长受到抑制或暂时改变原有的一些特征，死亡或发生遗传变异 6、特异性结合抗原，激活补体，结合细胞表面的Fc受体。 7、（飞扬的）土壤尘土，水面吹起的小水滴，人及动物体表干燥脱落物，呼吸道的排泄物， 开口的污水生物处理系统 8、细菌；放线菌；真菌；藻类、原生动物；霉菌 9、好氧活性污泥法，好氧生物膜法，厌氧活性污泥法（甲烷发酵、沼气发酵），氧化塘法 二、选择题 1、B; 2、A,B,D; 3、C; 4、C; 5、A,B,E,F; 6、A,D; 7、B; 8、D; 9、B; 10、A,D,F,G 三、名词解释（如叙述的文字不同，但意思正确，酌情给分） 1、两种不能单独生活的微生物生活在一起，相互依赖，彼此有利，甚至形成特殊的共生体， 它们在生理上表现出一定的分工，在组织和形态上产生了新的结构。如地衣中丝状真菌和藻类 2、Ig是一种免疫分子，是机体产生免疫功能的免疫系统的组成部分，由两条完全相同的重链 和轻链通过链间二硫键连接的Y型肽链分子。 3、在特异性的载体蛋白参与下，顺浓度梯度运输营养物质的一种方式。不需消耗能量；如真 菌中对糖类的输送。 4、通过同步培养获得，细胞基本上处于相同的生理状态，即同步生长，同步分裂。获得同步 培养物的方法有机械法、诱导法等。 5、由一个（或少数几个聚在一起的）细胞在固体培养基上生长繁殖后形成的肉眼可见的子细 胞的群体。 6、乳糖操纵子（Lac）由3个结构基因Z、Y、a及其相连的启动基因、操纵基因组成的与乳糖 降解利用相关的DNA片段。 7、透明圈法是平板快速检测的一种方法，即利用某种物质在平板中表现出不透明（混浊），而 目的菌产生的代谢产物使混浊变透明，形成围绕目的产物产生菌落的透明圈，根据其直径与菌落直径大小的比较可定性及半定量的判。 8、由于土样中各种微生物混杂，目的菌数量比例低，而针对性地控制营养成分、培养条件使 目的菌得以繁殖，非目的菌生长受到抑制的培养方法 9、能杀死微生物的化学试剂，可能在低浓度时仅起防腐作用。消毒处理的结果不一定是无菌 状态。 10、利用高压蒸汽进行湿热灭菌的方法。利用高压蒸汽所产生的高温，使微生物细胞蛋白 发生凝固、变性，从而杀死所有的微生物。常用与培养基、生理盐水等试剂的灭菌。 四、问答题：（如叙述的文字不同，但意思正确，酌情给分） 1、细菌生长曲线是如何得到（1分）；该曲线可以分为四个时期——延迟期、对数生长期、平 衡期、衰亡期。叙述每一个时期的细胞生长的特点及规律（×4=6分）；应用（3分），缩短延迟期方法，延长平衡期方法。 2、画出细菌细胞的结构图（2分），图中应画出主要结构：包括细胞壁、细胞膜、间体、拟核、

食品微生物学第2阶段测试题

江南大学现代远程教育第二阶段测试卷 考试科目:《食品微生物学》（总分100分）第六章至第十章 时间：90分钟 学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（本题共10小题，每小题3分，共30分） 1. 共生 答：生物间密切联系、互有益处地共同生活在一起的现象。 2.BOD5 答：5日生化需氧量。 3.抗原 答：能使人和动物体产生免疫反应的一类物质，既能刺激免疫系统产生特异性免疫反应，形成抗体和致敏淋巴细胞，又能与之结合而出现反应。 4.抗体 答：在人和动物体内，由于抗原或半抗原入侵刺激机体而在细胞中产生的免疫球蛋白。能可逆、非共价、特异地与相应抗原结合，形成抗原-抗体复合体。 5.血清学反应 答：是指相应的抗原和抗体在体外进行的结合反应。 6.商业灭菌 答：将病原菌、产毒菌及在食品上造成食品腐败的微生物杀死，罐头内允许残留有微生物或芽孢，不过，在常温无冷藏状况的商业贮运过程中，在一定的保质期内，不引起食品腐败变质。 7.内毒素 答：由革兰氏阴性菌所合成的一种存在于细菌细胞壁外层、只有在细菌死亡和裂解后才释出的有毒物质。 8.类毒素 答:由于变性或化学修饰而失去毒性的毒素，但仍保留其抗原性。 9.多克隆抗体 答：多种抗原表位刺激机体免疫系统后，机体产生的针对不同抗原表位的混合抗体。 10. 单克隆抗体 答：高度均质性的特异性抗体，由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞。 二、图解题(本题共4小题，每题5分，共20分)

1. 图解埃姆斯实验的具体流程。 2. 图解微生物诱变育种过程。 答： 3. 图解原生质体融合的操作步骤。 4. 图解微生物发酵过程中人工调节pH的措施。 答： 三、问答题(本题共5小题，每小题10分，共50分) 1. 简述微生物连续培养的方式。 答：恒浊连续培养： 不断调节流速培养液浊度保持恒定。使用：收货菌体及与菌体相平行的产物，工业发酵。 恒华连续培养： 恒定流速，及时补充营养，营养物浓度基本恒定，从而保持恒定生长率。又称恒组成连续培养。培养基成分中，必须将某种必须的营养物控制在较低的浓度，以作为限制性因子，而其它营养物过量。常用的有氨、氨基酸、葡萄糖、生长因子、无机盐等。试用：科研 2. 厌氧微生物的培养方法有哪些？ 答：固体培养：多层琼脂法，其中加入指示剂来监测氧气含量；冲入惰性气体，例如氮气。 液体培养法：在发酵容器中冲入惰性气体，例如氮气。 3. 哪些化学和物理手段能够实现对微生物生长的控制？ 答：物理手段：温度、渗透压等。