细胞与基因治疗产品效力检测指导原则
细胞与基因治疗产品效力检测指导原则
I.引言
II.背景
A.什么是效力检测？
B.效力许可的生物制品的监管要求有哪些？
C.什么是研究性CGT产品的效力需求？
D.CGT产品的效力和临床效果之间的关系是什么？
III.效力检测的建议
A.效价要测量什么？
1.产品特征
2.作用机制(MOA)
B.有什么方法可用于检测效力？
1.生物学检测
2.非生物分析检测
3.多重检测（检测矩阵）。
C.在生物活性和一个非生物分析检测之间必要的关联是什么？
D.效力测定的发展应该何时启动？
E.渐进的效力测定怎样完成？
1.早期产品开发
2.后期阶段的产品开发
3.生物学许可
4.效力检测评估和修改
IV.实验设计和验证
A.在实验设计中应考虑什么？
B.参考材料和控制应如何加以利用？
C.效力检测验证计划应考虑什么？
1.规定
2.统计设计和分析
3.定性分析的验证
4.检测评估和修改
V.参考文献
细胞和基因治疗产品的药效试验
I.引言
FDA发行此指南的目的是为细胞和基因治疗产品（CGT）的生产商提供显现检测和效能检验标准。这些指南阐明了生物制品许可申请（BLA）和临床适用新药申请(IND)中的效能信息。由于效能检测是针对某些特殊制品，这些原则不对特殊效能检测起作用，同样也能不做为产品验收标准。本指南意为补充相关文件，在无“企业指导原则：细胞和基因治疗产品效能检测”标题、未定案成为知道原则草案之前，并不代替或者取代任何现行的指导原则。
本指导原则只适用于被FDA细胞组织基因治疗（OCTGC）办公室、生物制品评价和研究中心（CBER）参照公共卫生署法案（PHS Act）352评审过的CGT产品。注意：本原则还适用于隶属CGT产品的治疗性疫苗。
本原则同样不适用于下述的21CFR1271-10部分中隶属PHS Act361的产品；属于21CFR820规定范畴的医疗器械产品；被CDER或CBER下属的疫苗研究和评审处（OVRR）评审过的产品；CBER下属的血液研究和评审处（OBRR）评审过的产品。
包括本指南在内的FDA指导文件，不具有法律强制执行的责任。指导原则仅代表FDA 目前对于本领域的观点，在没有特殊情况或管理条例、法令要求条件下，应该被认为是建议性的。在FDA知道原则中“should”意味着被建议或者推荐，并非强制要求。
II.背景
A．什么是效力检测？
效力检测被定义为“在适当方法实验室检测下或在可控条件下通过大量临床数据获得的产品的特殊能力或活性”。效能是“药物的治疗学活性，可以被适当的实验室检测方法或足量可控的临床数据证明”。条例要求“检测”应该包含体内或/和体外实验，并且具有特异性，此外特异性应满足本章§ 600.3对特异性的解释。
效力检测应做为产品一致性检验，相似性研究，稳定性检验的部分内容。这些检验用于检测产品质量和质量控制，用于确保产品纯度、一致性、稳定性和性能，应贯穿与临床研究的各个阶段。同样的，效能检测也用于证明只有符合相关特异性规定或者验收标准的产品才能用于各期临床研究和随后的生产许可。
B 批准的生物产品调整性要求
所有PHS Act351规定下的生物产品必须符合上述的安全性、纯度、和BLA、联邦食品药品化妆品条例（FDC Act）、 (21 U.S.C. 321 et seq.)、 (21 CFR 601.2)规定的效能要求。对于CGT，产品一致性检验和生产过程中的控制要符合FDA现行的药品生产质量管理规范（CGMP）。“并非所有许可产品都应该在检测完成之后才可流向市场，只要符合此类产品的相关规定即可” (21 CFR 610.1),这些要求适用于所有的生物制品，包括自体和异体移植产品。
一些CGT产品可能添加了一种活几种辅料。此目录不包含对于辅料检测内容的要求。但是需要注意的是“制品中应尽量不添加药用辅料，除非在有充分证据证明辅料不影响制品安全性和效能”（21 CFR 610.15(a)）。制品中如果添加有一种或多种药用辅料时，应就效能检测实验咨询CBER评审团人员更多的相关信息。
FDA 条例对每个制品适当的检测方法允许一定的灵活性。效能取决于每个产品的属性，因此，适当的效能检测实验评价基础是逐案的，但是所有用于出厂许可生物制剂产品的效能检测方法必须和使用的生物制品和CGMP条例相适应：
·说明每个产品的特异性生物活性/活度(21 CFR 600.3(s) 和 610.10; and 21 CFR 210.3(b)(16)(ii))；
· 提供出厂产品的检测结果(21 CFR 610.1;；21 CFR 211.165(a))；
· 提供定量数据(21 CFR 211.194；或见21 CFR 600.3(k k)；21 CFR 211.165(d);
211.165(e)；
·符合之前的接收或/和拒绝标准(21 CFR 211.165(d)；或见21 CFR 600.3(kk)；and
21 CFR 210.3(b)(20))；
·包含恰当的文献材料、标准和/或对照(见21 CFR 210.3(b)(16)(ii) and 211.160)；·通过认证的员工建立或记录精确、敏感、特异性和重现性良好的检测方法(21 CFR 211.165(e) 和211.194(a)(2))；
·测量所有活性成分的一致性和活性（活度）(21 CFR 211.165(a)；或见 21 CFR 210.3(b)(7))
·提供建立数据周期的数据(见21 CFR 600.3(l) 和 610.53(a))
·符合贴标签的要求(21 CFR 610.61(g)(3) 和 610.61(r))
C. 什么是CGT产品的效力需求？
在临床研究的早期，批准的生物制品可能不能满足上述所有要求。但在临床试验的各阶段，必须提交能保证生物制品性状、质量、纯度、效能、稳定性的数据材料。这些信息需随着各阶段研究进展提供相应的剂型、研究时段等内容。
CGT制品的复杂性可能使效能检测方法的建立较为困难。为了便于开发CGT产品，我们推荐了一些增设的方法以补充效能检测实验。我们在EⅢ部分提供了大体的各阶段效能检测要求。正如EⅢ所阐述的，效能检测方法可能会随着生物制品的开发变化很大，我们要求申请方及时和CBER认证团队讨论效能检测方法的设计、评估和验证。
D. CGT制品效能和临床疗效之间的关系
没有一种实验方法可以独立测定生物制品的性能来预测临床疗效，所以生产商必须提供详实的证据来证明生物制品的临床效果，例如：按建议或要求的使用条件，生物制品应具有标注或说明的作用。总体来说，生物制品的临床疗效应来自对生物制品持续的、严格控制的、充分研究。效力检测是产品特异性检验、相似性、稳定性检查的必须组成部分。
控制良好的临床研究可以为生物制品的生物活性提供有力证据，但是仅仅利用临床研究的数据来测量生物效能并不可行。因此本指南就测量生物制品的效能检测方法进行了讨论：临床数据可以用于建立生物学活性和实际效能检测之间的相关性，这在生物制品中药效的发挥、稳定性、兼容性研究中会经常用到。
III.效力检测的要求
A.效力检测的内容是什么？
1.产品特征
CGT产品复杂，申请人需要充分了解产品生物学活性以开发有效的效能检测方法，因此应在临床前和临床实验过程中收集充足的相关数据（如：分子量，生物化学、免疫学生理学、体内性质）以建立或修正效能检测。
申请人在测定生物学活性或性能之前，应参照相关的同类或相似生物制品的临床前研究、早期临床研究、类似可得的历史研究、文献资料，这些信息可以为生物制品的属
性和生物学活性如何促成功能提供理解基础。这些材料可以为最初方法学的选择或改进提供帮助，以便于更好地推向市场。
不为生物制品开发的重要组成部分，除了常规批次测试，研发者还应测量一系列生物制品的属性。探索研究可以为寻找最优效能提供帮助，因为探索研究的目的是获得产品信息，这有助于设计相关的向能检测方法。当有些方法不适用于批次测试，但是它们可以为设计生物学活性或/和临床效用提供帮助。
2.作用机制（MOA）
理想状态下，效能检测方法代表了生物制品的作用机制。但是，很多制品作用机制复杂或者没有具体的作用机制，这使测量方法存在一定的难度。但检测方法应尽量反映该制品的作用机制。如：某种基因治疗细菌依赖于至少两种生物学活性：向胞内转运基因序列的能力，表达基因序列的生物学效应。因此，针对此制品的效能检测应包含针对这两项能力的检测。
除此之外，既定的MOA应依赖于多种活性成分。对于一些复杂的生物制品（如：细胞内肿瘤疫苗）到底是何种活性成分构成效能可能很含糊。需要注意的是21 CFR 211.165规定每批制剂应在适当实验室检测方法下具有良好的一致性，包括兼备和释放前的活性成分。如果申请人的制品包含多种活性成分则需多种针对每种活性成分的效能检测方法。除此之外，当设计检测方法时，应尽量考虑到活性成分间可能的非添加剂效应如相互作用或者协同作用等。
B.有什么分析方法可用于效力检测？
1.生物学分析
传统的生物学定量方法是指能使生物制品产生预想功能的特异性生物学活性同时符合相关标准（II.B部分规定）的检测。生物学分析方法可以通过在活的生物学系统内测定效能。主要包括载体动物实验，体外器官实验，组织或细胞培养系统，或者以上任意组合联合应用，个人拥有方法选取的自由，但我们鼓励可信赖的限制性应用动物实验。
2.非生物学分析方法
由于技术或者CGT制品本身的局限性，有可能不能进行生物学定量分析（参照表1）。在此情况下我们可以采用替代的生物学活性测定方法。例如：非生物学分析方法可行而且足以反应批次制品的特性。这些分析方法可以通过评价免疫化学、生物化学、构成制品的分子来提供大量产品特性数据，反映产品特异的生物学活性，可以替代生物学分析方法。
3.多重测定（矩阵测定）
很多情况下，单一的生物学或其它分析方法无法提供充足的效能信息，原因如下：· 制品自身复杂和/或作用机制不完全清楚
· 制品包含多种活性成分或/和多重生物学活性
· 制品稳定性差
· 生物学分析方法不能定量或反应性不强，或精密度不好
在一种测定方法不能充分进行效能检测时，我们可以采用多重互补测试的方法：如测定和制品性质相关的特异性、一致性、稳定性时，我们可以采用不同方法相互补充。多重测定可以是几种生物学检测方法相结合，也可以是生物学检测方法和分析方法结合，或者几种分析学相结合。如果采用定量分析进行批次释放、稳定性和相似性研究时，需要多种矩阵检测方法相结（详见II.B部分）合。
C.生物学活性测定和非生物学分析方法的关联性
当使用矩阵检测或分析方法代替生物学活性检测时，应提供充足的、科学的可靠数据，如：基于适当的合格方法，重复性好，多个批次或不同的患者样本等，以建立替代测量方法和生物学活性之间的关联性。因此，我们也要求申请人在设计相关研究之前向CBR评审团咨询。
替代测量方法和生物学活性之间的相关性可以用各种方法：临床前实验数据和体内实验数据（动物实验和临床试验）、体外细胞数据或生化数据的比较。当选择分析方法替代生物学活性检测认证的生物产品时，需要满足II.B的要求。分析方法应能够鉴别活性成分和非活性成分或降解产物的区别，或者实施充分的对照研究或者才去一个确认的分析方法。
制品的生物活性和替代检测方法之间的相关性受以下因素的影响：
?相关的类型和相关性;
?你积累的产品信息;
?如何了解产品的生物活性;
?如何替代测量反映的生物活性。
和效能检测一样，在研究的早期，申请人应该收集大量的产品信息和方法学特性以支持所选的分析方法
D.效力测定应该何时启动？
通过生物制品的特性了解反映质量、效价、批次一致性和稳定性是必须的。了解并控制这些参数可以证明批次制品之间的一致性，评价不同身产过程和/和不同分析方法之的兼容性，还可以了解哪些制品属性和生物学活性和产品的有效性相关。在制品开发的早期进行效能检测可以有如下优势：
· 证明开发过程中制品的生物活性、质量和一致性
· 收集大量数据以规范批次生产
· 为工艺改进提供评价依据
· 评价产品稳定性
· 发现技术问题并为改进分析方法提供依据
· 评价矩阵分析方法
· 为必要情况下提供研究相关的充足数据
E.什么是渐进的效力测定实施？
1. 产品研发早期：
对于一些生物制品而言，在早期的临床前Ⅰ期和Ⅱ期研究中，只需要跟制品生物学特性相关的很少一部分信息就已足够。分析的验收标准应该设置在一个很大的范围，而且应该整个生产过程做出适量调整，以便及时反应生产和临床信息。在早期临床研究中，批次产品的效能检测比以后研究阶段的信息更能被认可。
随着临床试验的进展和制品相关信息的增多，申请人应补充改进的效能检测方法（详见21 CFR 312.23(a)(7)）。
2. 后期阶段的产品开发：
产品晚期调查研究的主要目的是根据大量的对照性临床试验，采集关于产品效能有意义的数据。这样可以使申请中的制品批次有相似的效能，和建立效能界值方法一致的是为批次产品提供合理的可信区间，使之在患者体内达到期望剂量。因此，效能检测或者矩阵效能方法设计和接受区间应该建立恰当的界值，以保证批次制品是定义明确、具
有生物学活性和一致性。在申请人没有提供足够的关键试验中制品的质量保证情况下，此试验可能被认为是“设计缺陷，不能满足宣称的目的”，可以被终止(21 CFR 312.42(b)(2)(ii))。
除此之外，申请人应利用效能检测方法或矩阵分析方法，在建立的检测限内，在稳定性实验考察批次一致性时建立药品有效期（详见21 CFR 610.53; Ref. 4）。用于建立稳定性和有效期的分析方法应具有稳定性指示。
3. 生物学许可
为了获得生物学许可证，必须在BLA中表述一个有效的效能检测方法或具有明确检测限的矩阵分析。检测限应基于制造经验或者制品研制各阶段和临床研究的数据，当评价制品批次一致性或者批次生产明确用于关键临床研究时，检测限应该修改以反应以上要求。
在BLA定义的效能检测检测限中，应该反应用于关键临床研究并证明临床效果的生物制品的效能界限（详见FDC Act，505（d）部分， 21U.S.C.351）。
4. 效能测定评估和修饰
产品研发或/和认证后生产和检测使得效能检测方法再评估很有必要。如果打算修改用于已经认证过的生物制品的效能检测方法或者建立一个新的方法，需要进行稳定性研究，以证明修改过的或新的方法对效能检测仍然有效。此外，为了证明原始方法和修改过/新的检测方法的一致性，应建立一个包含统计学处理过的样本量和分析方法的研究。这个研究包括预设的接受标准以证明方法间的等效性。效能检测方法和相似性的修改研究中，变化的数据应随其它材料一并提交申请。支持效能检测方法改变的数据量取决于以下因素：
?产品研发所处的阶段
?现行分析方法的改变类型
?分析方法是否用于测定其它制品的特性
?新的测定方法是否符合分析以上标准（上述及II.B部分）
如果修改研究中的效能检测方法，即将采用的分析方法要合格且对相应变更做出修正（如相关性更好，更实用，更能定量）这些要求强调了随时保留制品、标准品、临界试剂的重要性。在缺乏分析恰当的保留样品时，比较不同分析方法或决定新方法是否恰当是很困难的。
IV 效能检测方法的设计和确认
A 设计效能检测方法时的注意事项
和CGMP条例一致，含量测定应允许申请人收集这些数据：保证能够衡量分析方法和目的相适应（详见e.g., 21 CFR 211.165和 21 CFR 211.194，Refs. 9-11 ）。这些包括足够的统计数据以满足分析，实用随机样本以降低误差，对照。分析方法的设计还应该考虑满足分析方法稳定性的因素。具体操作时应考虑分析方法中的变异的来源，并在实验设计中将它们逐步消除。有些变异类型虽然可以减少但是不可避免，因此应该考虑平衡和模型化。减少变异性的一般原则包括使用合格的试剂、刻度精确的仪器、训练合格的操作人员。方法学变异性可以通过严格执行SOP和合适的对照实现。方法学特异性的对照取决于被分析的制品和分析方法，还应该考虑标准品长期应用的可行性。生产商可以参阅更多的资料（如：Ref 14- 21）来获得关于方法学设计的更详尽资料。
B 如何使用标准品和对照品
建立一个效能检测的方法和设计实验一样，应该包括合适的标准品和可比性良好的
产品特异性的对照品，这样可以保证分析方法能够按期望值进行。对照品有助于仪器和试剂在限定范围内工作。一个设计良好的对照品可以使结果的可信度大大增加。
我们鼓励申请人开发自己的标准品（Ref. 9- 11），如和制品性质很相似的细胞株等。这些标准品被采用的机制应十分明确。我们鼓励开发标准品或获得参考材料时向CBER评审团咨询。
其它标准品和操作规则可以帮助检测，并用来发展和、或定量更多相关的标准品和操作规则。很多标准品和对照品、操作规则正被逐步做为标准品研发对象。如：荧光球/抗体和颗粒大小标准和准则可用来帮助校准设备，并帮助确定定量流式细胞分析可接受的参数。对照品目前也适用于5型腺病毒、逆转录病毒载体和一个腺相关病毒2型载体。慢病毒载体的标准品和操作规则也已被描述。我们鼓励开发其它CGT的通用或标准物质产品。
由于您将对照品使用在各个阶段的产品开发和鉴定，你应该对照品稳定性研究与您的产品的稳定性研究并行，并设计合理的重复性研究和终止日期。此外，你应适当地表现每一批新的对照品的特征，把它与原来的比较，并建立适当的程序使其有资格并最终验证为新的标准品。如果可能的话，你应该保留与新生产的对照品比较的每批的对照品，并在对照品损耗或到期之前做好准备。
C 效力检测验证计划应考虑什么？
1.规例
为了获得生物学许可，您必须在您的BLA说明中提交数据，经过效力测试验证，您的产品满足效力需求的规定。验证过程要鉴别测定方法中潜在的错误并量化出来。在测定法的建立过程中，您应该评估测定法的性能和适用性。很多资源可用于分析方法的确证9-11。您应该进行所有相关测试参数的分析和验证，包括：
?准确度
?精密度（重复性，重现性）
?特异性
?线性范围
?系统适用性
?耐用性
2.统计设计和分析
实验室设计和分析效力检测实验中，使用噪声和合适的统计方法是十分重要的。否则，从这些实验数据得出的推论可能是无效的。报告结果时，应说明重复检测变异和变化的潜在来源。您应该充分描述你的方法分析，包括你的理由和根据，。这些研究报告中提出的独立统计分析和评价结果描述应该足够清楚。以电子格式提供从药效实验验证研究收集的数据，可以方便CBER审查委员会统计评估。验证研究的结果应该有针对性的验证参数和验收标准的一致性。我们鼓励您早期与审查小组讨论，并接收关于效力测试的实验设计、数据格式和分析的反馈。
3.定性分析的验证
Section III.B.3讨论，只要你进行适当的相关性研究，定性检测可能被用来作为一个分析矩阵的一部分以评估效力。您应该验证您的定性分析的所有相关的参数，并提供你确定是不相关的这些参数的理由。例如，虽然某些实验验证参数（例如，线性）可能无法适用于一个合格或失败读数时的定性检测，应使用适当的控制样品特异性和灵敏度以及可接受的其他功能性能（例如，耐用性，系统适用性）来进行检测。
没有定量的数据显示准确度和精密度，可能是具有挑战性的，但适当的实验设计（如，足量的重复），你可能能够证明测试的可重复性。半定量检测（高度变量的定量读数检测，
例如，在动物模型的反应），确定检测的耐用性和重现性时，可考虑更广泛的接受范围。您应该给您的定性分析建立一个准则，以确保每个测试都是可行的。如果在众多测试中的某一个控制失败，那么该测试是不可行的。因此，我们鼓励您在开始具体的试验设计和/或详细的效力测试实验分析之前，与您的CBER审查小组讨论计划的实验。
4.检测评估和修改
制造和测试的实践在产品开发或批准上市后开展，或者，使得它有必要且/或有益于重新评估您的效力测定。如果你打算修改已经批准的应用程序中使用的检测，或提出一个新的检测，你必须执行验证的研究，表明修改后的/新的检测仍然是一个适当的效力测试（21 CFR 211.165（e））。这些变化必须作为获批申请的补充提交（21 CFR 601.12（b）（3）（vi））。
支持效力测试的变化所需数据的数量将取决于以下多项因素，包括：
?产品开发阶段
?在现有检测的类型变化
?检测是否是被用来衡量不同的产品属性
?提议的检测是否符合上文所述的检测标准
如果修改了调查研究过程中使用的效力检测，你应该使检测合格，并提供提议更改的理由（例如，更有关，更实用，更定量）。
这些建议进一步强调坚持尽可能保留样本（如产品，对照品，关键试剂）的重要性。如果没有分析合适的保留样品，那么进行比较分析或确定新的分析方法是否使用会很困难。
指导意见表示，制定适合您的产品的效力检测可能需要大量的数据。另外，您的检测可能会随时间发生适当变化，因为您开发产品时会获得的新信息。因此，我们建议您及时与审查小组的讨论关于为您设计、评估和验证您的效力测试。
生殖细胞DNA检测对孕育方面的意义
生殖细胞DNA完整性检测 —评估精子质量和预防胚胎发育不良 据统计，大约有15%—25%男性不育患者的精液虽然在常规检测中检查正常，但是生殖细胞DNA完整性较差。国内外学者研究发现，氧化胁迫，精子染色质包装或分离异常，凋亡异常发生等因素可引起生殖细胞DNA损伤、生殖细胞DNA完整性异常，会影响受精和胚胎发育，最终导致不孕不育，流产，死产，子代智力低下和染色体疾病。生殖细胞DNA完整性检测可以评估出精子细胞完整性，细胞核的染色体是否受损，在哪个环节出了问题，以及是什么原因导致的问题(比如：生殖道感染、有毒有害物质因素，活性氧与自由基等各种因素导致)。北京华博医院在国内率先成功引进生殖细胞DNA完整性检测技术，为男性不育和女性反复性流产选择科学治疗方案提供参考，具有重要的现实意义。 华博医院精子示意图 生殖细胞DNA完整性较差产生的原因及危害： 正常情况下，男性体内的生殖细胞DNA有着稳定的双链结构。但在某些情况之下，如睾丸温度升高、环境激素、大量吸食烟草等，或有生殖腺体感染和炎症(附睾炎、睾丸炎、前列腺炎或精囊炎等)、精液中白细胞增多、精索静脉曲张等疾病，会导致生殖细胞DNA单链以及双链断裂，如此导致生殖细胞DNA不完整。在现代社会，随着环境污染加重、生存压力增大等多重复杂因素的交互影响，全球范围内男性生殖细胞DNA完整性较差的现象日益严重。 生殖细胞DNA完整性较差产生的危害主要有： 1、影响精子授精能力。健康的精子必须具备三种能力：一是运动能力，二是顶体识别能力，三是卵子识别能力。如果生殖细胞DNA完整性受破坏，卵子识别能力受影响，也就会影响精子的授精能力。 2、引发习惯性流产。生殖细胞DNA碎片化会导致DNA结构发生移位，从而影响胚胎的发育，导致流产、死胎。
高中生物第1章生物科学与健康1.2基因诊断与基因治疗课时作业新人教版选修2
1.2 基因诊断与基因治疗 [课时作业]·达标 一、选择题 1.下列与基因诊断有关的一组物质是( ) A.蛋白质、核酸 B.放射性同位素、蛋白质 C.荧光分子、核酸 D.放射性同位素、糖类 解析因为基因诊断是用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，所以题中只有C项正确。 答案 C 2.对肿瘤的论述错误的是( ) A.与肿瘤相关的基因包括原癌基因、抑癌基因等 B.肿瘤的形成是遗传因素与环境因素相互作用的结果 C.肿瘤的发生只是基因表达与调控水平出现了变化 D.基因芯片技术对肿瘤能进行早期诊断 解析肿瘤的形成是遗传因素与环境因素相互作用的结果。肿瘤的发生、发展都伴随肿瘤相关基因和肿瘤细胞基因表达的改变。某些肿瘤的发生，既有基因结构的改变，也有基因表达与调控水平上的变化。 答案 C 3.下列关于基因诊断的叙述，不正确的是( ) A.基因诊断具有更准确、快速、灵敏、简便等特征 B.基因诊断应用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子做探针 C.基因诊断的技术原理是DNA分子杂交技术 D.科技发展、技术进步使基因诊断已能完成对所有疾病的诊断和检测 解析本题考查基因诊断的定义、原理、特点及成果。基因诊断不适用于所有疾病，如外伤。 答案 D 4.下列不属于基因芯片技术应用的是( ) A.发现疾病的相关基因 B.用于传染病的检测 C.基因芯片技术应用引起医学行为的改变 D.用于检测心理疾病 解析基因芯片的检测原理是DNA分子杂交，检测的是样本上的遗传信息即DNA序列。A、B、C三项都是检测DNA序列。D项不是基因芯片检测的对象。 答案 D
5.(2015·宁夏贺兰山联考)肿瘤是21世纪人类最主要的杀手，它是一种由环境因素与遗传因素相互作用的复杂性疾病，下列有关癌细胞的叙述，不正确的是( ) A.癌变的内在因素是致癌因子激活原癌基因 B.减少癌细胞的营养供应可以抑制癌细胞的增殖 C.所有癌细胞中的DNA含量都相同 D.用化学药剂抑制肿瘤细胞的DNA复制，可使其停留在间期 解析在癌组织中，在同一时刻很多细胞处于有丝分裂的不同阶段，所以DNA含量不一定相同。比如前期的细胞比末期的细胞DNA含量高。 答案 C 6.下列关于基因治疗的叙述中错误的是( ) A.通过导入目的基因来实现对缺陷基因的抑制、替换或修补 B.基因治疗也可用于基因的改造，提高人类“优秀”基因的频率 C.基因治疗最终要通过对目的基因的调控表达实现 D.基因治疗过程中需要载体的参与 解析基因治疗还有许多技术问题，不能进行基因改造，故选B。 答案 B 7.对恶性肿瘤进行基因诊断的过程为( ) ①将DNA转到一种特制的尼龙膜上②构建基因探针③从人体的尿液或血清等体液中 获得少量的脱落细胞，提取DNA，经热处理成单链DNA ④将探针与尼龙膜上的DNA分子结合⑤对单链DNA进行PCR扩增⑥将扩增获得的DNA热处理得到大量的DNA单链 A.②①③⑤④⑥ B.②③⑤⑥①④ C.②③⑤⑥④① D.①②⑤⑥③④ 答案 B 8.基因治疗的步骤为( ) ①治疗基因的表达②选择治疗基因③将治疗基因转入患者体内④选择运输治疗基 因的载体 A.②③①④ B.②③④① C.③④②① D.②④③① 答案 D 9.基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，将同源DNA片段导入受体细胞，使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。基因敲除既可以使用突变基因或其他基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。下列有关基因敲除说法，正确的是( ) A.基因敲除实际上是删除某个基因，从而达到使该基因“沉默”的目的
2020年中考生物复习主题七生物的生殖发育和遗传变异课时训练21生物的遗传和变异
课时训练(二十一) 生物的遗传和变异(一) (限时:40分钟) |基础达标| 1.[2019·石景山二模]下列生物性状的表述中,不属于相对性状的是 ( ) A.家蚕的白色蛹和褐色蛹 B.果蝇的白眼和红眼 C.家猫瞳孔的放大和缩小 D.豌豆种子的圆粒和皱粒 2.[2019·通州一模]果蝇是生命科学研究重要的实验材料。对于果蝇生命活动的说法中正确的是( ) A.果蝇个体发育的起点是卵细胞 B.果蝇的红眼与残翅是一对相对性状 C.果蝇的性状表现只由遗传物质决定 D.果蝇群体中存在着先天的各种变异 3.[2019·石景山二模]把一只没有怀孕的雌性大鼠暴露在X射线下,只有它的哪种细胞中的遗传物质发生变异,才会对后代产生影响( ) A.体 B.肝 C.生殖 D.神经 4.[2018·顺义一模]如图K21-1所示,同一株水毛茛,漂浮在水面的叶呈扁平状,淹没在水中的叶呈丝状,下列叙述对该现象解释正确的是( ) 图K21-1 A.该生物的性状不是基因作用的结果 B.该生物的性状仅是环境作用的结果 C.该生物的性状仅是基因作用的结果 D.该生物的性状是基因和环境共同作用的结果 5.[2018·北京101中学月考]下列关于基因、DNA和染色体关系的叙述,不正确的是( ) A.一个DNA分子上有很多个基因 B.每条染色体上有很多个DNA分子 C.每条染色体上有很多个蛋白质分子 D.基因是具有遗传效应的DNA片段
6.[2018·北京101中学月考]“杂交水稻之父”袁隆平正在研究将玉米的高产基因转入水稻,使水稻产量更高,这一项目已经取得阶段性成果,转基因技术的基本原理是( ) A.基因控制性状 B.性状控制基因 C.基因就是性状 D.基因与性状无关 7.[2018·北京101中学月考]禾本科植物中的簇毛麦生长繁茂、抗病性好,对小麦条锈、叶锈、秆锈病均有抗性。其体细胞中染色体组成如图K21-2所示。下列叙述不正确的是( ) 图K21-2 A.叶肉细胞中染色体数目为14条 B.卵细胞中染色体数目为7条 C.各种抗病性状是由染色体决定的 D.染色体由DNA和蛋白质组成 8.[2018·大兴初三检测]桃树所结果实的味道酸味(A)对甜味(a)是显性。现在把基因组成为aa的接穗嫁接到基因组成为Aa的砧木上,其所结果实可食部分的基因组成及味道是( ) A.aa甜味 B.Aa酸味 C.AA酸味 D.Aa或aa又酸又甜 |能力提升| 9.[2018·北京101中学月考]番茄果皮红色(R)对黄色(r)为显性,若将纯种红色番茄(RR)的花粉授到黄色番茄(rr)的柱头上,则黄色番茄植株上所结的种子的基因组成以及果皮颜色分别为( ) A.种子基因组成为Rr、果皮红色 B.种子基因组成为Rr、果皮黄色 C.种子基因组成为rr、果皮红色 D.种子基因组成为RR、果皮黄色 10.[2018·北京101中学月考]图K21-3是关于遗传知识的概念图,图中代码1、2、3、4依次为 ( ) 图K21-3 A.细胞核、双螺旋结构、遗传信息、基因
医学遗传学习题(附)第15章 遗传病的治疗
第十四章遗传病的治疗 （一）选择题（A 型选择题） 1．随着分子生物学技术在医学中广泛应用，遗传病的治疗有了突破性的进展，已从传统的手术治疗、饮食方法、药物疗法等跨入了。 A．基因治疗 B．手术与药物治疗 C．饮食与维生素治疗D．蛋白质与糖类治疗 E．物理治疗 2．由于成功的同种异体移植可以持续提供所缺乏的酶或蛋白质，因此，对于某些先天性代谢病进行器官移植而达到治疗目的，所以这种移植又称。 A.器官移植 B.组织移植 C.细胞移植 D.蛋白移植 E酶移植 3．目前能采用症状前药物治疗的疾病是 A.甲状腺功能低下 B.苯丙酮尿症 C.枫糖尿症 D.同型胱氨酸尿症或半乳糖血症 E.以上都是 4．目前，遗传病的手术疗法主要包括。 A．手术矫正和器官移植 B．器官组织细胞修复 C．克隆技术 D．推拿疗法 E．手术的剖折 5．目前，饮食疗法治疗遗传病的基本原则是。 A．少食 B．多食肉类 C．口服维生素 D．禁其所忌 E．补其所缺 6．通过特定的方法如同源重组或靶向突变等对突变的DNA进行原位修复,将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保留，就称其为。 A．基因修正 B．基因转移 C．基因添加 D．基因复制 E．基因突变 7．假如在基因治疗时仅仅将正常的DNA导入细胞而不替换掉有缺陷的基因，从而使细胞的功能恢复正常，就称其为。 A．基因修正 B．基因转移 C．基因添加 D．基因复制 E．基因突变 8．对于缺陷型遗传病患者进行体细胞基因治疗，可以采用的方法为。 A．SSCP B．基因添加 C．三螺旋DNA技术
D．反义技术 E．cDNA杂交 9．去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使致病基因得到永久地更正的策略称为。 A．基因替代 B．基因转移 C．基因修正 D．基因复制 E．基因突变 10．对有些遗传病是因为某些酶缺乏而不能形成机体所必需的代谢产物，如给予补充，即可使症状得到明显的改善，达到治疗目的，即称。 A．添加 B．补缺 C．基因突变 D．基因修正 E．cDNA 11．外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培养的自体或异体的细胞，经筛选后将能表达外源基因的受体细胞重新输回受试者体内称之为。 A．直接活体转移 B．回体转移 C．间体转移 D．导入 E．移植 12．将正常基因转移到患者的生殖细胞中而使之发育成一个正常的个体称为。 A．体细胞基因治疗 B．生殖细胞基因治疗 C．胚胎细胞的基因治疗 D．胚胎组织细胞基因治疗 E．胎儿的基因治疗 13．将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强称之为。 A．基因突变 B．基因增强 C．基因复制 D．基因转移 E．基因互补 14．将含有外源基因的重组病毒、脂质体或裸露的DNA直接导入体内称之为。 A．直接活体转移 B．回体转移 C．间体转移 D．导入 E．移植 15．遗传病治疗不包括下列方面。 A．针对突变基因的生殖细胞基因的修饰与改善 B．针对突变基因转录的基因表达调控
基因治疗——复习测试题
第二十三章基因治疗——复习测试题 （一）选择题 A型题 1.全世界第一例基因治疗成功的疾病是 A.β地中海贫血 B.血友病 C.重症联合免疫缺陷症 D.高胆固醇血症 E.糖尿病 2.理论上讲，基因治疗最理想的策略是 A.基因置换 B.基因替代 C.基因失活 D.免疫调节 E.导入“自杀基因” 3.目前基因治疗所采用的方法中，最常用的是 A.基因置换 B.基因替代 C.基因失活 D.免疫调节 E.导入“自杀基因” 4.利用反义核酸阻断基因异常表达的基因治疗方法是
A.基因置换 B.基因替代 C.基因矫正 D.基因失活 E.免疫调节 5.将白细胞介素-2基因导入肿瘤病人体内，提高病人IL-2的表达水平，进行抗肿 瘤辅助治疗。这种基因治疗方法是 A.基因置换 B.基因替代 C.基因矫正 D.基因失活 E.免疫调节 6.下列哪种方法不是目前基因治疗所采用的方法 A.基因缺失 B.基因置换 C.基因替代 D.基因失活 E.免疫调节 7.基因治疗的基本程序中不包括 A.选择治疗基因 B.选择载体 C.选择靶细胞 D.将载体直接注射体内 E.将治疗基因导入靶细胞
8.下列哪种方法不属于非病毒介导基因转移的物理方法 A.电穿孔法 B.脂质体法 C. DNA直接注射法 D.显微注射法 E.基因枪技术 9.下列哪种方法属于非病毒介导基因转移的化学方法 A.电穿孔法 B.基因枪技术 C. DNA直接注射法 D.显微注射 E. DEAE-葡聚糖法 10.将外源治疗性基因导入哺乳动物细胞的方法不包括 A.显微注射法 B.电穿孔法 C.脂质体法 D. CaCl2法 E.病毒介导的基因转移 11.目前在基因治疗的临床实施中，最常使用的载体是 A.逆转录病毒载体 B. pBR322 C.λ噬菌体 D. pUC18 E. YAC
医学遗传学习题(附答案)第15章遗传病的治疗
第十四章遗传病的治疗 (一)选择题(A 型选择题） 1随着分子生物学技术在医学中广泛应用，遗传病的治疗有了突破性的进展，已从 传统的手术治疗、饮食方法、药物疗法等跨入了 ________ 。 A. 基因治疗 B ?手术与药物治疗 C ?饮 食与维生素治疗 D 蛋白质与糖类治疗 E ?物理治疗 2?由于成功的同种异体移植可以持续提供所缺乏的酶或蛋白质,因此，对于某些先 天性代谢病进行器官移植而达到治疗目的，所以这种移植又称 3。目前能采用症状前药物治疗的疾病是 4。目前，遗传病的手术疗法主要包括 A 。少食 B 。多食肉类 C 。 口服维生素 D 禁其所忌 E .补其所缺 6 。通过特定的方法如同源重组或靶向突变等对突变的 DNA 进行原位修复，将致病基因 的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保留,就称其为 __________ 。 A.基因修正 B 。基因转移 C .基因添加 D.基因复制 E .基因突变 7 。假如在基因治疗时仅仅将正常的 DNA 导入细胞而不替换掉有缺陷的基因，从而使 细胞的功能恢复正常，就称其为 _________ 。 A.基因修正 B 。基因转移 C 。基因添加 D 。基因复制 E 。基因突变 8.对于缺陷型遗传病患者进行体细胞基因治疗,可以采用的方法为 ____________ 。 A.器官移植 B.组织移植 C.细胞移植 D.蛋白移植El 酶移植 A.甲状腺功能低下 B. 苯丙酮尿症 C. 枫糖尿症 D.同型胱氨酸尿症或半乳糖血症 E. A.手术矫正和器官移植 .器官组织细胞修复 C.克隆技术 .推拿疗法 E .手术的剖折 5 .目前，饮食疗法治疗遗传病的 基本原则是
颅内生殖细胞瘤的个性化治疗-新
可编辑
颅内生殖细胞瘤的个体化治疗
山 东 省 济 宁 市 第 一 人 民 医 院 神 经 外 科 朱 广 廷 272111
摘要 目的 探讨颅内生殖细胞瘤的个性化治疗效果。方法 对收治的 43 例颅 内生殖细胞瘤进行临床分析，针对不同的亚型进行个性化治疗。结果 43 例中 肿瘤位于松果体区者 21 例，鞍区 9 例，鞍区+松果体区 8 例，基底节区 5 例。31 例经手术或立体定向活检证实为生殖细胞瘤，13 例行肿瘤标记物检查或试验性 放化疗证实为生殖细胞瘤。结论 采用手术、放疗和化疗的综合治疗措施，并且 需根据患者的不同病情行个性化治疗是提高颅内生殖细胞瘤治愈率及生存率的 有效手段。 关键词 生殖细胞瘤 放疗 化疗 Abstract ： Objective To discuss clinical effects of treating intracranial germinomas 。 Methods To analysis the 43 cases of Intracranial Germinoma , treating accoding to different subtype individually; Results Of the 43 cases—21 in the pineal region, 9 in the suprasellar region , 8 in the pineal and suprasellar regions, , and 3 in the basal ganglion. 31cases were confirmed Germinoma by operation or stereotactic biopsy. 13 cases were confirmed by tumor labeling or exploratory radiotherapy and chemotherapy .Conclusion Use synthestical methods of operation combined with Chemotherapy and radiotherapy , and using defferent measure according to the different illness state is an effective method to improve curative effect and reduce mortaloty. Key Words Intracranial Germinoma Chemotherapy Radiotherapy
Zhuguangting The first people’s hospital of Jining , Shandong provence , 272111. Yanchangxiang , Sanbo brain science hospital 100093.
原发中枢神经系统生殖细胞瘤（CNSGCTs ）是较罕见的恶性肿瘤，约占所有 颅内肿瘤的 1%-2%。作者收集我院和北京三博脑科医院自 1996 年 1 月至 2008 年 9 月共收治颅内生殖细胞瘤 43 例，占同期收治颅内肿瘤的 1.1%。现总结报告如 下： 1 临床资料 1.1 一般资料
本组男性 32 例，女性 11 例；年龄 6~40 岁，中位年龄 15 岁，病程 7~31 个 月，中位病程 10 个月。病变位于鞍区单发肿瘤 10 例，松果体区单发肿瘤 21 例， 基底节区单发肿瘤 7 例，鞍区合并松果体区肿瘤 6 例。临床表现：头痛 20 例， 肢体不同程度偏瘫 10 例，尿崩 10 例，视力减退 6 例，性早熟 4 例，Parinaud 综合症 5 例。
实验室及辅助检查：全部病例均行血清肿瘤标记检查，其中 10 加行脑脊液肿 瘤标记物检查。见下表。
精品