S—亚硝基—N—乙酰—DL—青霉胺对巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶的影响

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S—亚硝基—N—乙酰—DL—青霉胺对巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶的影响

作者：胡旭堂胡海英王志禄

来源：《中国当代医药》2014年第08期

[摘要] 目的观察S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺（SNAP）对RAW 264.7诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响，探讨NO在动脉粥样硬化（炎症）过程中的作用。方法以RAW 264.7巨噬细胞为研究对象，分为空白对照组、SNAP组，采用不同浓度（30、100、300、400、500 μmol/L）的SNAP对巨噬细胞进行干预24 h，应用RT-PCR法检测RAW 264.7巨噬细胞iNOS mRNA的表达，采用Western blotting技术检测iNOS蛋白的表达。结果与空白对

照组比较，不同浓度SNAP（30、100、300、400、500 μmol/L）组iNOS mRNA的表达比空白对照组均明显降低（P﹤0.05），不同浓度SNAP（30、100、300 μmol/L）组iNOS蛋白表达明显低于空白对照组（P﹤0.05）。结论 NO可以抑制巨噬细胞自身iNOS mRNA基因转录，降低iNOS的合成而发挥负反馈作用。

[关键词] S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺：诱导型一氧化氮合酶：RAW 264.7巨噬细胞

[中图分类号] R543 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）03（b）-0021-04

动脉粥样硬化是一种发生在血管壁的慢性炎症过程[1]，在高血脂、高血压、遗传、年龄

等全身因素和血流动力、毒素、病毒等局部因素作用下，内皮细胞损伤，低密度脂蛋白（LDL）渗出到内皮下聚集并氧化变性，刺激局部内皮细胞表达黏附因子趋化因子配体2（chemokine ligand 2，CCL-2）等促进血液中单核细胞等的黏附和渗出，并分化为巨噬细胞[2]。巨噬细胞在动脉粥样硬化过程中发挥关键作用，一方面其吞噬LDL转化为泡沫细胞，并坏死形成脂质核；另一方面巨噬细胞是粥样斑块中细胞成分的主要部分，可分泌多种细胞因子及NO等改变局部环境，影响斑块的稳定和疾病的发展[3]。诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）是炎症的重要标志，其可催化产生大量NO，NO在免疫应答中有着复杂而且呈双面性的作用，同时NO供体也是应用多年的冠心病治疗药物，NO在免疫应答中的双面性作用对动脉粥样硬化病程有什么样的影响？本研究通过观察S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺（S-nitroso-N-acetyl-DL-penicillamine，SNAP）对RAW 264.7巨噬细胞内iNOS mRNA 和蛋白表达的影响，旨在探讨NO对巨噬细胞的影响及其在动脉粥样硬化发展过程中的作用，为临床治疗冠状动脉粥样硬化提供新的依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂